MATERI ISOLASI DNA

MATERI ISOLASI DNABiologi FK UNISSULACARA KERJA ISOLASI DNABahan baku pisangPotong pisang 1-2 buah menjadi kecil-kecilTaruh pada blender serta campur dengan air sekitar 100 mlTambahkan NaCl 1 ml dan Blender sampai halusTaruh hasil tersebut pada tabung conicel sampai 5 cc

5. Beri Larutan Lisis Buffer sekitar 750 mikro liter6. Kocok dengan perlahan sekitar 1-3 menit7. Diamkan sekitar 5-10 menit8. Tambahkan 1 ml Proteinase K 9. Gojok perlahan-lahan sekitar 1-3 menit10. Tambahkan etanol dingin 1/3 11. Amati hasil12. Lakukan pembacaan pada spektofotometri

CARA KERJA ISOLASI DNABahan Baku buccalLakukan seperti Massage pada buccalKumurr dengan menggunakan air selama minimal 3 menit Lalu tampung hasil air kumuran pada tabung conicel besarTambah Buffer lisis (3cc)Perbandingan 20 :35. Kocok secara perlahan selama 1-3 menit6. Tunggu selama 5-10 menit7. Tambah Proteinase 1 ml8. Kocok secara perlahan selama 1-3 menit9. Tambahkan etanol dingin 1/3 nya 10. Amati hasil11. Lakukan pembacaan pada spektofotometri

Panjang gelombang untuk membaca DNA adalah 260 nanometerPanjang gelombang untuk membaca protein adalah 280 nanometer260/280 rasio ketentuan 1,8 (N)>1,8 kontaminan RNA< 1,8 kontaminan protein

Bahan untuk isolasi DNA berasal dari :Tumbuhan Hewan contoh pada buccalBakteri

Pada tumbuhan yang banyak mengandung DNA:BayamKacang polongPisangBrokoliStrawberry Dinding sel (di pecah) membran (lisis) inti sel DNA dan protein histon protein histon akan di pecah oleh enzim proteinase KDNA akan di presipitasi oleh etanol dingin agar presible seperti benang

Untuk memecah dinding sel bisa di lakukanDi blenderDi tumbukDi simpan dengan suhu minus 70Perbedaan isolasi DNA pada hewan dan tumbuhan adalahPada tumbuhan terdapat dinding sel jadi hari di pecah terlebih dahuluSedangkan pada hewan tidak ada dinding sel maka langsung di beri buffer lisis