Carbazolequinone induction of caspase-dependent cell death in Src-overexpressing cells

12
Carbazolequinone induction of caspase-dependent cell death in Src-overexpressing cells Abdel Aouacheria a , Benjamin Ne Âel a , Zouhair Bouaziz b , Rigal Dominique c , Nadia Walchshofer b , Joe Èlle Paris b , Houda Fillion b , Germain Gillet a,* a Institut de Biologie et Chimie des Prote Âines, UMR 5086 CNRS/Universite  Claude Bernard, 7 passage du Vercors, F69367 Lyon, France b Equipe de Synthe Áse des Mole Âcules Bioactives, Faculte  de Pharmacie, Universite  Claude Bernard Lyon 1, EA 635, 69008 Lyon, France c Etablissement de Transfusion Sanguine, passage du Vercors, F69007 Lyon, France Received 11 July 2002; accepted 14 August 2002 Abstract We previously reported that RSV-transformed quail neuroretina cells (QNR-ts68) were highly resistant to apoptosis provoked by serum withdrawal, and that this property was due to v-Src kinase activity. The present study investigates the cytotoxic effect and the functional mechanism of carbazolequinone-mediated cell death in this system. QNR-ts68 cells were subjected to carbazolequinone treatment and both growth inhibition and cell death induction were examined using formazan assays. Cell death mechanism (both apoptosis and necrosis) was con®rmed through phosphatidyl serine exposure and propidium iodide incorporation. Furthermore, the effect of active carbazolequinone was inhibited by a pan caspase inhibitor. Cyto¯uorimetric and immuno¯uorescence data demonstrated the activation of caspase-3 and the involvement of mitochondria. Therefore, this study clearly indicates that carbazolequinones could induce cell death in transformed cells displaying high levels of antiapoptotic tyrosine kinase activity. Further investigations would be necessary to elucidate the mechanisms by which these carbazolequinones act as antitumor agents. # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. Keywords: Transformation; v-src; Carbazolequinones; Cytotoxicity; Necrosis; Apoptosis; Caspase 1. Introduction The p60 c-src protein, a member of the non-receptor tyrosine kinase family, plays crucial roles in cell cycle progression and cell differentiation [1,2]. Its activity is tightly regulated and its disregulation could lead to cell transformation. Indeed, a high p60 c-src kinase activity is found in a number of tumor cell lines [3]. Moreover, tumors display either high levels of c-src expression, particularly those of the colon [4] or a mutated version of c-Src being central for tumor progression [5]. Increased c-src mRNA and protein levels tightly correlate with kinase activity [6]. The viral counterpart of the p60 c-src protein, namely p60 v-src , is held by the rous sarcoma virus, an avian transforming retrovirus (RSV). In contrast to its cellular homolog, activity of p60 v-src remains constitutively high, irrespective of the cellular context. Thus, infection by RSV leads to rapid v-src-mediated tumor formation in vivo.A number of experimental models has been depicted for the study of cell transformation by the v-src oncogene [7,8]. Among them, quail neuroretina cells (QNR) in culture have Biochemical Pharmacology 64 (2002) 1605±1616 0006-2952/02/$ ± see front matter # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. PII:S0006-2952(02)01385-0 * Corresponding author. Tel.: 33-4-72-72-26-58; fax: 33-4-72-72-26-01. E-mail address: [email protected] (G. Gillet). Abbreviations: PARP, poly-ADP-ribose-polymerase; FACS, ¯uorescence activated cell sorter; PBS, phosphate-buffered saline; RSV, rous sarcoma virus; FCS, fetal calf serum; LDH, lactate dehydrogenase; MTT, 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide; XTT, (sodium 3,3 0 -{1-[(phenylamino)carbonyl]-3,4-tetrazolium}bis(4-methoxy-6-nitro)- benzene sulfonic acid); OD, optical density; FACS, ¯uorescence activated cell sorting; PI, propidium iodide; Dc m , mitochondrial transmembrane potential; DMSO, dimethyl sulfoxide; QNR, quail neuroretina cells; ERK, extracellular regulated kinase; MEK, MAPK/ERK kinase; Z.VAD.FMK, Z-Val-Ala-Asp- (Ome)-CH2F; CMXRos, chloromethyl-X-rosamine; TS, thymidylate synthase; DBC, 7H-dibenzo[c,g]carbazole; ROS, reactive oxygen species; B1, 9-ethyl-1,4-dihydrocarbazole-1,4(9H)-dione; B2, 9-ethyl-6-hydroxy-1, 4-dihydrocarbazole-1,4(9H)-dione; B4, 6-ethyl-3-methyl-6H-pyrido[3, 2-b]carbazole-5,11-dione; B5, 10-ethyl-7-hydroxy-3-methyl-10H-pyrido- [2,3-b]carbazole-5,11-dione; B7, 10-ethyl-3-methoxy-10H-pyrido[3,4-b]car- bazole-5,11-dione; B9, 10-ethyl-2H-pyrido[3,4-b]carbazole-3,5,11(10H)- trione; B10, 6-ethyl-2H-pyrido[4,3-b]carbazole-3,5,11(6H)-trione; B11, 9-methyl-1,4-dihydrocarbazole-1,4(9H)-dione; B12, 9-benzyl-1,4-dihydro- carbazole-1,4(9H)-dione; B13, 3-ethoxy-10-ethyl-4-methyl-10H-pyrido[2, 3-b]carbazole-5,11-dione; B14, 3-bromo-9-ethyl-1,4-dihydrocarbazole- 1,4(9H)-dione; B15, 10-ethyl-7-hydroxy-4-methyl-10H-pyrido[2,3-b]carba- zole-5,11-dione; B17, 6-ethyl-2-methyl-2H-pyrido[4,3-b]carbazole-3, 5,11(6H)-trione.

Transcript of Carbazolequinone induction of caspase-dependent cell death in Src-overexpressing cells

�������������� �� ����� �� �������� ���� ��� ���� ������ ������������������ �����

�� �� ����������� �������� ������� ����� �������� !���� "���������� �� #������������ $��%��� &������ '� � (�������� )������ )�������*

��������� �� ����� �� ����� ��� ���������� ��� ���� ��������������� ����� ������� !������ �� "��#��� $�%&� '(�� $���#��)*��!� �� �(����+�� ��� ����#���� ��#������ $�#����� �� ������#��� ����������� ����� ������ '(� ,� )- �&�� �%��� '(�� $���#�

�)��.��������� �� /����0���� ��������� !������ �� "��#��� $�%�� '(�� $���#�

!������ ++ $�, -..-/ ������� +0 ���� -..-

��������

#� ��������, ������� ���� !�1����������� ��� ���������� ����� 23�!���456 7��� �����, ��������� �� ��������� �����8� �, ����

7��� ��7��� �� ���� ���� �������, 7�� � �� ����� 8����� �������,9 :�� ������� �� , ������������ ��� �,������� ������ �� ��� ���������

��������� �� ����������������� ���� ���� ���� �� ���� �,����9 3�!���45 ����� 7��� ������� �� �������������� ��������� ��

���� ���7�� ���������� �� ���� ���� �� ����� 7��� ������� ���� �������� ����,�9 ���� ���� ��������� 2���� ��������� ��

��������6 7�� ���;��� ������ ��������� ,� ������ ������� �� ����� �� �� � � �������������9 (���������� ��� ������ �� ������

�������������� 7�� �������� �, � ��� ������� ���������9 �,��<��������� �� �����<��������� ��� ���������� ��� ���������� ��

��������= �� ��� ����������� �� �������� ���9 :��������� ���� �� , ������, �� ������ ���� ��������������� ��� �� �� ���� ���� ��

���������� ����� �����,��� ���� ������ �� ������������� �,������ 8����� �������,9 (����� �������������� 7�� �� ��������, �� ���� ���

��� ���������� �, 7���� ����� ��������������� ��� �� �������� ������9

� -..- >������� ������� ?��9 ��� ������ ������� 9

1�(2���3 :�������������/ �4��#/ ���������������/ �,���������,/ ��������/ ���������/ �������

� ���� ������

:�� �4.#4��# �������� � ������ �� ��� ������������

�,������ 8����� �����,� ���,� ������ ����� �� ���� �,���

����������� �� ���� �������������� @+�-A9 ?�� �������, ��

������, ������� �� ��� ����������� ��� ��� �� ����

��������������9 ?� �� � � ���� �4.#4��# 8����� �������, ��

��� �� � ����� �� ���� ���� ����� @=A9 B��������

����� �����, ������ ���� ������ �� ����� �����������

����������, ����� �� ��� ����� @0A �� � ����� �������

�� ����� ����� ������� ��� ���� ����������� @CA9 ?�������

����� �!�� �� ������� ������ ������, ��������� 7��� 8�����

�������, @4A9 :�� ����� ���������� �� ��� �4.#4��# ��������

�����, �4.�4��#� �� ��� �, ��� ��� ������� ����� �� �����

������������ ��������� 2!�169 ?� �������� �� ��� �������

�������� �������, �� �4.�4��# ������� ������������, �����

������������ �� ��� ������� �������9 :��� ��������� �, !�1

��� � �� ���� �������� ���� ���� ��������� �� ���9 �

����� �� ������������ �� ��� ��� ���� ������ ��� ���

�� , �� ���� �������������� �, ��� ����� �������� @D�5A9

����� ����� ��� ���������� ����� 23�!6 �� ����� ����

����������� &����������, 40 2-..-6 +4.CE+4+4

...4�-FC-G.-GH E ��� ����� ������ � -..- >������� ������� ?��9 ��� ������ ������� 9

&??I � . . . 4 � - F C - 2 . - 6 . + = 5 C � .

* ��������� ��� �����9 :��9I �==�0�D-�D-�-4�C5/���I �==�0�D-�D-�-4�.+9

)4���� �������3 �9������J����9�� 2)9 )�����69

-..���������3 &�!&� ���,��"&�����������,������/ (���� <���������

�������� ���� ������/ &��� ���������������� ������/ !�1� ��� �������

����/ (��� ����� ���� ����/ K"'� ������� ��, ��������/ B::� =�@0�

C� �����,���������-�,�A�-�C� �����,����������� ����� �/ L::� 2�� ��

=�=��M+�@2����,������6������,�A�=�0�����������N���20�������,�4������6�������� ������� ��� 6/O"� ������� �����,/ (���� <��������� �������� ����

�������/ &?� ����� �� �� � �/ ���� �������� ���� ������������� ���������/"B�O� �����,� ������ �/ 3�!� ��� ���������� �����/ >!P� ������������

������� 8�����/ B>P� B�&PG>!P 8�����/ 91�"9(BP� �1�����������

2O��6��'-(/ �BL!��� ����������,��L���������/ :�� ��,�� ,����

�,������/ "��� D5� ������@#��A���������/ !O�� �������� ��,��� �������/

�+� F����,��+�0� ��, ������������+�02F56� ����/ �-� F����,��4��, ���,�+�

0� ��, ������������+�02F56� ����/ �0� 4����,��=�����,��45��,�� �@=�

-�.A����������C�++� ����/ �C� +.����,��D��, ���,�=�����,��+.5��,�� ��

@-�=�.A����������C�++� ����/ �D� +.����,��=�������,�+.5��,�� �@=�0�.A����

�������C�++� ����/ �F� +.����,��-5��,�� �@=�0�.A����������=�C�++2+.56�

������/ �+.� 4����,��-5��,�� �@0�=�.A����������=�C�++2456�������/ �++�

F�����,��+�0� ��, ������������+�02F56� ����/ �+-� F�����,��+�0� ��, ���

����������+�02F56� ����/ �+=� =������,�+.����,��0�����,��+.5��,�� �@-�

=�.A����������C�++� ����/ �+0� =�������F����,��+�0� ��, ������������

+�02F56� ����/ �+C� +.����,��D��, ���,�0�����,��+.5��,�� �@-�=�.A������

�����C�++� ����/ �+D� 4����,��-�����,��-5��,�� �@0�=�.A����������=�

C�++2456�������9

������� ����������� �������9 ?� ���������� ����� ����� �����

������� �,����� ������� �� ������������ ����� ����� @F�+.A9

?� � ������ 7���� �4.�4��# �� ���7�� ������� ��� �� �����

������� �� �� �� ���� ������������� @++A� ����� �������, ��

��� �7� �� ��;����� �� ������� ���� ������� �� ���� ����,

�� ���� @+-A9 ?� �� �4.�4��# ��� ��� ������, �� 3�! �����

������� �, ��� �Q��45 ������ �� !�1 23�!���45 �����6 ��

������� ���� ���� ��� ���� 7��� ��7��� �������, �� ���

��� ��� �� ����� ��������� ��8�� �9�9 B,� @+=A �� >+�

@+0A9

�������� �� ��������� ��� �7� ����� ���������� ��

������� ����9 �������� ���� ���� �� �� �������� �������

�������� ���� ������ ������������ ����� �� �� �������

������ �, �:& ��������� ���� �7������� �,��� �� ���

������� �� ������������ ��������� �������� �� ����� ��<���

������ @+CE+DA9 ?� ��������� ��������� �� � �����, ������� �

�����,� ���� ��� ����� ���� ��� � �� ��� ����������� ��

������ �� ����� ����� ���� ������9 :���� ��� ������

������������ �� ��,���������� ������ �� ��������� ����

���� ���� ��� ���� ������� 2�9�9 �,��8����6� ��������

��,��� �������� �� ��������� ������ @+5�+FA9 ���������

�� � ������� �� ������� ������������ �, ���� �����8����

������ ��� ��������� �������� RR<�������SS �����������

����� "�� ��������� �� �,��������� � ��� @+C�-.A9

��������� �� �������� �������, ������� �����7��� �����

@-+E-=A9 ��������� �� ���� ����� ����� �����������,

���� ����� �� ��������� �� 7��� �� �� �������� �� �� ������

�� ��������������� �� �������� ��� ������� ������

������, ������� @-0A9 !������,� ������� �������������� ����

���������� ���� ��� �� ����� �� ��������� �� ��������

�� �����, ���� ��� ��� ��� ��������, �� ��� ������� �����

��� @-+�-CA9

#���� ��� �����������, �� ���� ���������� ������

�� 7��� � ������ � ��� ����������� ���������� �,

7���� ��� ��������, �� �� ���� ���� ������ �����,

������������ 9 B��, ���������� ������ ���� ���� ���7�

�� �� ���� ����� �,������� ������� ��� "�� �����

�� ������� �� ����� �� ��������� @-4�-DA9 ?� � ��

����� ���������� �� ���������� ������ �� ��������

�������, �, ������� ������� �� ��� ������, ��E������

����������� �� ��, ���� �� �� ���� ��� ����������� ��

��� ��������, ��������� ���� ���� @-5�-FA9 � ������

� ������ ��� �� ����� �� ���� ���� � ��, ������

����������� �� ��� 8�, ���������� �� ��� ���������

����7�, �� �� �� �� ������� ��� ���������� �� �� ��

���������� ���9

(����7��� ��� ������� �� ��� �,������� �� ��������

�������, �� ������������ ������ �� ��� ����� �� �,��

� ���������� �� ����������� ���������� @=.�=+A� ���� ���

�������E�������, �������������� ���������� �� �������

�� ��� ����� �� �,������� �� ��7 ��������9 ?� ���������

��� �,������� ���������� �� ��������� ���������� ���� ����

���, ������� �� � ��7 ���� ���� ����� @=-A9 :� ��

8��7�� ��� �� ��� �� �������, ��������� ���� ��� �������

�� ���� �����7��� �������������� ������� �� ������

����� ����� �����,��� ���� ������ �� �,������ 8�����

�������,9 :�� ���������� �� ���� �� , 7��� �� 2+6 ��������

7������ ��������������� 7��� ������, �,������� ��

�4.�4��#����������� ������ 2-6 ����,�� ��� ��������� ��

���� ���� ������� �� ��������������� �,���������,9 :��

� ������ ��� �� ��������������� ���������� �������,

��, ��������� �� ����� �������� ����������� �� ������

���������9

� ��������� �� ����� �

67,7 ���� ��� �������

���������� ����� 23�!6 7��� ������� ���� D� �,���

��� ����,�� 2 �����8 #�����8 9�!��#�6 �� �������

7��� ��� !�1 ������ �Q��45 23�!���4569 ����� 7��� ���7�

�� ������� �� >����S� ����� �� �� 2>�B>� ����� ��6

���������� 7��� +.T ���� ���������� ����� ���� ����

��������� �,����� �� ����������E��������,��� �� ����

�����, ������� @++A9

6767 ����#�� !��!������

��������������� 7��� ������� ���� '9 (�������

K���������� � ������ O������� K,��� (�����I �+C�

�-� �+-� �C @==A� �D� �F� �+.� �+D @=0A� �+� �++� �0�

�+0� �+= @=CA/ +.. �B ����8 �������� 7��� ������� ��

"B�O �� ���� �� ������ �������������� 7��� �����

���� ����� �� ��9

67&7 ����0������ ��� #(��8�#��( ����(�

���� �����, �� �,���������, 7��� ������ � �������

�����,� ���� ��� L:: ����, 2���� ������������� 8�� ??� L::�

!����6 �� ��� K"' �,���������, �������� 8�� 2:�8���

������������6 �����7��� ����������� �����������9

67:7 ���������#��� 0 �#������� #��!���4& ���

��#���� ��������

!����� ���,������ ������������= ������ , �B+ 7�� �

8�� ���� �� ���������� ���� ? � &�������������9 �����

���� ���� �� ��������= 7�� ������ �� ��������,

������� @+-A9 :�� '������ �������� ����� �� ���� �����

� ����� �������������� �� ������ ���������, 7�� ������

��������, @+-A9 ��������� ����� 7��� � ����;� �� �����

���7��� ��� ���� ��������� �� ���������, ���������

�����9 ������ ����� ���7� �� ���� ���������� �� ���

�������� �������� ��� ����� 7��� <������� �������

���9

67�7 -���(��� 0 ���#������� ��������.����

!������� ;���<

:� ������ ���� ����� 7��� ��� � 7��� B�������8��!� �BL!�� 2B������� &�����6 �� ��������, �������

+4.4 -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�

@+-A �� ��������, ����,�� ��� <��������� ������

�������� �� � (��� ������:B �,��<��������9 B����

����8�� !� �BL!�� �� � ����� ,� ���� �� �������������,

��8�� � �, ��� �������� ���� �� � ������� �� ���������

���� ������������� ��������� ���9

67�7 >�����0�#���� 0 �!!����

&���� �� �� � � ������������� 2��������6 �� ��������

�� ,� ������ ������� 2���������6 7��� ������ ������

�����, �� ��������, ������� @+-�=4A9 ����<,� ����� 7���

��� � �� ��� �����, �� C� +.C ����� ��� 4. �� �������

���� ����� ��� �� >�B> ���������� +.T (��9 �����

� -0 �� ����� �� =49C�� ����� 7��� ������� 7���

"B�O 2BO�P6 �� ��� �����;� �������� ��� +5 �� ��

>�B> 7����� ����9 (������� �� � ������ ����� 7���

�������� �� ����� �� ��� &�� ��� ���� ���� ����,��� ��

����� �� �� � � ������������� �� ��������1�(?:�

�������� 2����� ��� �� ��� ����������S� ������������

��������1�(��� �������� 8��� !����6 ����� �����������,�

(K- �� (K+ �������� �� ��� (��� ������:B �,��<��

�������9 ?� ��� ���� ���� ����,�� ����� 7��� �� �����;����

���������� �� ��� ����� �� ��������� ����� ���7���

������� �� �������������� 2"B�O6 ������� ������

2 ��� ��� ���7�69

� �������

#� �� ������ ��������, ���7� ���� ����� �����,���

���� ������ �� ����� 8����� �������, ��� �����, ��������� ��

��������� �����7��� ���� 7��� ��7�� @+-�=DA9 ?� �������

���� ����������� 3�!���45 ����� 7��� ���� �� ������ ���

�� ����� = �,� �� �� ����������� ��� �� ����� -0 �� 7���

����� �� =49C�9 #� �� � �� �� ���� �,���� �� ���� ���

������� ���� �� ����������������� ���������� �� ������

���������� �� ������������������� ������ �����9

&7,7 )00�#�� 0 #��.�?��*������ � '@5 �������

0�� >��4���� #����

K"'���������� 7�� �� �� ������ ��� �,���������, ��

���, ��������� �� ���� @-+�=5A9 :�� ������� �� K"' �� �

���� ��������� ���8�� ��� �,���������, ������� �� ���

��,��� ��� �������� ����� �� ��� ���� �� �� ��

�� ������ �� �������� @-+�=FA9 :��� ����������������� ����

�������, ����, �� ���� �� ��� ��������� ���� �� �����

2��������� ���� ���������6 ���� ��� ������, �� �������� �����

������ �������� ��������,� ���������� ������������ ����

��������� ��� �� K"'� �� ���8 �� �� ��� ���� ���� �����

�� ��9 "��� ������� ���� ���� ����, 7��� �� �� �����

���� ��� ���� ������ ��� ����� �� ������������� ����

7�� ������, �,�������9 ?� � ;��� ��� �� ������������ ������

���������� 7��� ������ ��� �������� ������� �� ��

������� ����� �� ������� 7�� �������� 2 ��� ���

���7�69 �� +5 ��� � �������������� ���� ��� �������� ��

�������� ��� ������ �� ������� ������� ��������, ��

3�!���45 ����� 7�� ������� 2(��9 +�69 �,���������,

������ C.T ��� ������������, C. �B �� �+� �-� �+-

�� �+0� �� DC �B �� �++ 2��� (��9 - ��� ��� ������

������ �� ��� ������ � �� �� ���� �� ,69

&767 -���!���0������� �00�#� 0 #��.�?��*������ �

>��4���� #����

:�� ������ �� ��������������� �� ���� �������������

7�� ������� �, ��� L:: ����,9 :��� ���� �� ���� �� ���

��������� ���� ������ 2������������, ������6 ����� �� ��

���������� �����9 :��� ������������ ����� ��� ����

������ ��� ��� ���� ��, �� ��� ����� ��������,9 ?� ����

����� ��� ������� �� K"' ������� �� ��� ���� ���������

����� �� ������� ��<���� �,���������,9 #��� ��������

�������� 7��� ������ ��� +5 ��� ���������� �� ����������

���� ������ C.T ��� ������������, +-9C �B �� �+0�

-. �B �� �-� C. �B �� �+-� 4. �B �� �+� �� D. �B�� �++� ����� ������ � �������� ���� �������, �� ��,

2(��9 +�69 :���� 7�� �� �����;���� ������ �� ���� �������

������� �� ��������, ��� �������������� ����7 +. �B9 (���������������� ����� +..E-.. �B� ���� ��� �� ��� ������� � ����� ��� ��� �� ����� ���� ���� =E4 �� 7����

�� ��������� ���� ��� ��������9 :�8�� ��������� �����

��� ���7 ���� ���� ��������������� ������� ���� ���7��

�� �������������� 7���� � ��� ���� �� ������ ���� �����

������ �� ��������,9

&7&7 ����#����=�#�����( ����������!�

�������������� �-� 7���� �� ������� �� �+� ������ ��

�� �, ���,� ���� ������� �� ��� ;��� �������� �,��� ��

���� ��;����� �� �� ���� ���� ����� ��������� ���� ����

O' ���� ��, �� ��������� ��� ��������� ��� �������,

�� ���������������9 :�� O' ���� ��, ����7 ���

������������� �� �������� �, ����� ��� � �� ����� ������

������ �����8�9 � �� ���� ������ �� � ��8��� )� ��

� ����� �� ��� ����� �,��� ��� ��� ��� ������� ����

����� 2������� �++ 7��� �+ �� �+-69 � ����� �� � �

���� �� ��� ���� �������� �,��� ��� ���� ������ �� ���

�������, �� ��� �� 2������� �+0 �� �+69 �����������

����� ������� ��� �,���� 2�0� �C� �D� �F� �+.� �+=� �+C

�� �+D6 7��� � ��� �,�� ��� ����� �� ��� �����

����� 7��� ������ �� "B�O 2�C �� �+C6� ���� ��

�,������� ������ �� 3�!���45 �����9 :��� � ������� ����

��, ������� ��� +�0�� ����� �� ����������� ���� ���� ��

�� ��� �����9 �� ����������� ����������� 7�� �� ����

� ����� �� ��� � ���� �� �;�� ��� ��� ��� ���������,

�� ��� ������9

&7:7 ��!!������ 0 #��.�?��*������ �00�#�� .(

#��!��� ����.��� A7"-@7$�1

:�� B:: �� L:: ����,� ��� ���������� ���������

����,� ��� ��� ���������� �� ���� ���� �� �������������

-7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,� +4.D

�� ��� ����������� ���7��� �������� �� ���������9 �����

������ �� ��� ������� �����, �� ��������� �� � �������

����������� ����� �������� �� ��������� �����9 :� ������

������ 7������ ���������� �� ������� ���������� ��������

3�!���45 ����� ���� ����������������� �� ���� �����

7� ������ 3�!���45 ����� 7��� ��������������� �� ���

�������� �� ������� �� ��� ��� ������� ���������

91�"9(BP ��� +5 ��9 ��������������� 7��� �� ��

�������������� 2-C �B6 �������� ���� ����� �����������

2��� ���7�69 (��9 =� ���7� 3�!���45 ����� �� ��������

(��9 +9 2�6 �������������� �� ��� 3�!���45 ���� ����9 ������ 7��� ������ ��� +5 �� 7��� ������ ������������� �� �������� ������ ����� ����,� ���

K"' ������� ���� ��� ��������, B:: ����9 >��� ��� ���������� ��� ���� ���� ��� ����� �����������/ ���� ���� 7�� ������� �� ������� 7����� ��������9

������� ����������� 7��� �������� �, �������� ����� �� ��� ���� �������������� �� "B�O9 "B�O ����� ��� �� �,������� ������9 2�6 �����������������

������ �� ��������������� �� 3�!���45 �����9 ������ 7��� ������ ��� +5 �� 7��� ������ �������������� �� �������� ������ ����� ����,� ��� K"' �������,

���� ��� ���� ���7�� L:: ����9 >��� ��� ���������� ������� ���� ��� ����� �����������/ ���� ���� 7�� ������� �� ������� 7����� ��������9 �������

����������� 7��� �������� �, �������� ����� �� ��� ���� �������������� �� "B�O �������9 "B�O ����� ��� �� ���7�� ���������, ������9

+4.5 -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�

�� ������� �� ��������������� �, ����� �������� ������

����,9 B�������������,� 3�!���45 ����� ��� � ��

������ �� <���� +-E+0 �� ����� ��������������

� ������ �� ������� ���� ���� 2(��9 =�69 :�� ���������,

�������, �� ��� 7� � ����� ��������� 91�"9(BP �� ����

���� �� 3�!���45 ��� �� ������, ������� � �� �������

���� ������� ���������� �� ��������, ��� ���������������

�� �� ���� ���� �� 3�!���45 �����9

&7�7 @���#��� 0 �#������� #��!���4& ��

#��.�?��*�����4������� >��4���� #����

:� ������ ���;�� ���� ��� ����� 7��� ,��� ��� � ��������

���� ��� ���� ����� 7� ���8� �� ��������= 7�� ��������

�� 3�!���45 ������ ���� ��� �B+ ������ , ����� �������

��� ������ ���� �� ��������= @0.A9 (��9 0 ���7� ���� �����

������ 7��� ��������������� �����,��� � �,������

(��9 +9 2 ������� 69

-7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,� +4.F

����� 7��� ������ 7��� �B+9 :���� ������� ��������

7��� ��� ��� ������� 7��� ��� ���� �������� �������

��������� 91�"9(BP� ������, ���������� ���� ��������=

���������� �� � ������� ��� ���� ���� �� ���� �,����9

&7�7 ��.�?��*������ ����#� .�� �!!���� ���

��#���� �� >��4���� #����

:� ������������ ������ ���� ���� �������� ����� ������

���������� �������� 7� ���8� �� �,����� ������ ��

��������� �� ��������I �������� �� ��������� ,�������

�� ��� ���� ���� �� ��� ������ �������� �� ����� ��

�� � � �������������� �����������,9 �� ���7� �� (��9 C� ����

�� ���� ��������, �� ���� ������ ����� 7�� � �� ����

�������� �� ���������9 '�7����� ������� ��� ��������

����������� �� ��������� �� �������� �� ���� ����

���� � �� ��� ��������9 �- �� �+0 �� �� ���������

�����, �������� 7���� �+ �� �++ �� �� ���� ���������

�� ��������9 ?�����������,� ��������� 7��� 91�"9(BP

���������, �������� ���� ����� �� ������� ���� �����

������������� ����� �� �� � � 7��� ������, ���� �������

��� �� ����� ��, �������� �� ���� �����9

&7 7 )���( ���#������� !�����.����( ��������� ��

>��4���� #���� ������� 2��� #��.�?��*������

:� ������ ���;�� ���� ��������������� �� �� �����

����� ������ ��������� 7� �� � �� �� ��� ������������

������� 7��� ��� B:: ����,9 ?� �� � ��� B:: ����, �� �

������������ ����, ��� ��� ������ �������� ����;������ ��

���� ��������, �� �� ���� �� ��� �������� �� ��� ,����7

���������� ���� B:: �� ����� �������� ��,����� �,

������������, ������ �����9 :�� ��������� �� �������� ��

������ �� ��8� ����� ��� ������ �������� ��� @0+A9 �

������� �� ��� ����� �� ������ ����� ������ �� � �������

�� ��� ����� ��������� �������, �� ��� ������9 O� B::

����,� ���������� ���� ��� �� ����� �� ��������� ������

��, 7�� �����;����� ��������� �� ���������� �� ���������

���� ����������, �������� �, ��������������� �� ���� ����

�,����9 B������� ��� �� � ������� ��������� �� ��� ����

����� �� ���������9 � ��� �� ��� �������� ���� ���������

2���6 �� � �������8 �� ��������� ����� ��������� �, �

����� �� ��������� �� ���� @0-A9 :���� ������������

������� � �� ����������� �������� ��� ���������� ��

��������������������� 3�!���45 �����9 :� ��������

(��9 -9 ����� ������� ������ �� ��� ��������������� �� �� ��� �� ,9 B������� 7����� 2B9#96� ��������, �� "B�O �� ���������� �������

2�,���������, �� ���7�� ���������, �������,6 ��� �� ����� ��� ���� ������ 9

+4+. -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�

(��9 =9 �������������� ��������� ��� � �� ������������� ������� �,����� �� ���� ���� ���� ��� �������� �, ��� 7� � ����� ������� ��������� 91�"9(BP9

:�� ���� �� ���� ������ �� �� ����� �� ��� ���� �� ���� �����9 2�6 &���� �������� ���������������� ���7��� �������������� ���� � �� 3�!���45 �����

����� ��� +5 �� �� ��������� �� �� ���������� ������ -C �B �������������� 7��� 2�6 �� 7����� 2�6 91�"9(BP �� 7��� ������� ����� 2BO�P69 2�6

B������������ ����������� �� 3�!���45 ����� �����7��� ������� �� ��������������� 2���� �������������69 ���� ��� ��������� ���� �����8���� �,���������

�������� �� ����� ����������� �,����� �� ���� ���� 7��� ����� ��� ����� �� ��� �������� �� ���������� ��������������I +. �B 2 6� C. �B 2�E�6� +.. �B 2�E

�6 �� �������������� �-9 &������ �������, ��� �� ������� �, ��������� ����� 7��� -.. �B 91�"9(BP 2�E�69

-7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,� +4++

7������ ��������������� ������� ��� ���� 7� �����

��� ��� ���� ���� ��� ���8� �� ��� <��������� B��������8�� !� �BL!�� ����� ��������� �� 3�!���45 �����

7��� ��� ��� ������ � ��������, ������������ �� ���

����� �� ���� 7��89 �� ���7� �� (��9 4� 3�!���45 �����

������ 7��� -C �B �� ���� �������������� ������� �

������� ��� ������� �� ������� ������ ���� ������ ������������, ��������� 7��� ��� ���������� ������, �� ��� ������

;� ��������������� �� �� �� ���� ����9 :��������

����� ������ ������, ��������� ���� ��� ��� ��� �� �� ����,����� ���� ����������������� �� ���� ���� �� 3�!�

��45 �����9

� ����������

(�7 ������� ��� �������, ��������� ���������� ��� �,���

����� ������� �� �������������� �� ���������� �����9

�,������� -�����,�� �� =�����,���������������� ������

����� 7��� ������ ���������� �� ��� ������ 7��� �������

�, ?�����7� �� ��7 @0=A �� ������� ���������� ���� ������ =�

����,���������������� ������������ �����;���� �,���

�������,9 D5�"������@#��A��������� 2"��6 ��� �� "��

����� �� '��)- ����� �� ������ �, ��� ��������� ��

"�� ����� ����8� @00A9 :�� �,���������, �� "�� �� ����

��� ���� �� �� ��������, @0C�04A9 #� ������ ���� ����

��������������� �� �� ���� ���� �� � ���� �� ����

���� ��� ������ �� ����� ����� ����� ���������� �, ���

!�19 :���� ����� ��� ��� ��� �����, ��������� �� ���������

�, ��� �4.�4��# �,������ 8����� �������, @+-A9 #� � �����8

���� ������������� �� �������� ��� ���������� �� ������

������������� �� �,���������, �� ���� ������� �� ��9

O� ������ �� ����� ���� ��������������� ��� �� ��

���� �� ��� ������������� �� ����������� ������� �����

����� 7��� ��������� ���� ��� ���� �����8���� "�� �����

���������� ������� ���������� �� ��� ���9

#���� ���� �, ������,���� �� ���� ��������� ����� ���

��� ��������� �� ����� �� ��������, � ���� ����� ��,

��������� ��� ��� �� ��� ���������� �� � R���8,S ����

����� ���� ���� �� ����� @-+�0DA9 :��� 7�� ���� ��� ����

(��9 09 ��������������� ��������� �� 3�!���45 ����� �� ��� ���� ��������� �� �������� ���� ����9 ��������� 7�� ������ ���� ��������1 �������� ����

���������� ��������� ,� ������ �������9 �������� 7�� ������� �, �������� ����� �� �� � � �������������9 3�!���45 ����� 7��� ����� ��� +5 �� ��

��������� �� �� ���������� ������ -C �B �������������� 7��� 2�6 �� 7����� 2�6 91�"9(BP �� 7��� ������� ����� 2BO�P69

+4+- -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�

��������������� �� �������������� ���7��� +. ��

+.. �B 7���� � ���� �� �������� K"' ������� 7��

������� 9 ?� ���� ������������� ������ ���������������

�� �� ��� �������� ����� �� ��������� �� ��� ���

��<���� ��������� ����� ���� ���� ������ ���� ���

��� �� ���� ����� �������� ��������,9 ��������������

����� +..E-.. �B� �������������� �� ��������������������� �� ����� �� ����� �� ��������� ��������� ���� ���

�,�� �� ���� ���� �� ���� ��� ��� �� �������������9

O���� ������ � ���� ���� ���� ���7� �� �����, �����

����� �� �������� �������������� @-+�00A9 ?� �� � � �����

�� �� ��� ������� �������� �������� �� ���� ���� �,

���� ����� 7��� ������� �� ��� ��� �� ���� ��

�������9 �� ��7 �������������� ��������� ���� �������� �

�� �������� ���� �������� ���� 7�� ������� �� ����

�������������� @05A9 ���� ��� ����� 7�� ���������� ��

��� �� � �������� ��������, ���� �� ���� @-CA9 K�7

�������������� �� ����� �� �� ������� ����8 �� ����������

7���� ���� �������������� �������� ������� ����, ��

��� �� ��������9 :���� ��� ����� � ��� ���� ���� ���

��������� �� ������ �� � ������ ��� �� ������,

���� ��� �� ��� ������������� �� 9 (���������� B�����

�� ��7 @0FA ������� ���� ��� ����������� ����� � ��

�����������,��� �� ��������� �� ���� ��� �� ���

�������, �� ��� ������� �����I �� ��� ����� �� ��� ������

7���� ������� ����� �� ��� ��������� ���� ����9 ��� �

(��9 C9 ��������������� �� �� ���������� �� ��������= �� 3�!���45 �����9 3�!���45 ����� 7��� ����� ��� +5 �� �� ��������� �� �� ���������� ������

-C �B �������������� 7��� 2�6 �� 7����� 2�6 91�"9(BP �� 7��� ������� ����� 2BO�P69 ����� 7��� ���� ��� ���������������� �� ������ ����

��� �B+ ������ ,� 7���� �����������, ���������� ��� �������� ���� �� ��������= 2�B+ ������6 �� 7��� ������������� 7��� '������ ==-C5 �� ����� �����

2'������ ������69 ����� ���������, ������ 7��� �B+ ������� �,������ ����� 2��� ����7�69 ���������� �� ��������= �� �������� �, 91�"9(BP 2����� ������69

-7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,� +4+=

���������� ��� ���� ���� ������� �����7��� ������� ��

��8���� ����� �� ����� �� �������,������ @-DA �� :�

���������� @C.A9 (�����,� ���������� �� ���� �,��� �, �����

��������� ����, ��� � �� ���7�� ����� ������ �,���������,

�� ��������� @C+A9 K�8�7���� �� ������ �� ����� ����

���������� ������������� �� ��������������� ��������,

��� �� � ����� ���� ��������� �� ��������9 B�������� �������

������ ��������������� �� � ���� �,��� ����8��� ������

�� ��� ��� 3BD ���� ���� 2�� �������� ������69

B������� ��� ������� �������� ���� ��� ������� �� ���

��������� ����� �� �9�9 �,�������� # @C-A9 :�� �� �� �����

���� �,����� ���������� ���� ��� ������� �� ����� ����

��� �� ��� �,������� �� ������������� ��� ��� ���������� ��

�������� �� �� ���������9 (�������� �� ��� �� �����

���� ���������� ������� �� ������� �� ��� �������� ����

����������� 2��� �����������, ���������� ����6 ��� �� ��

�� ������� ��������� @+5A9 O� ������ ���������� ���� �

��� ��� ����� �� 3�!���45 ����� �� ����, �� +- �� �������������� 7��� ������ ���������������9 :��� �������

���� ������� �� ��� �������� ���� �����������, �� � 8�,

����� ���� ����������������� �� ���������9 '�7�

����� ����8��� �� ������� ���������� 7��� 91�"9(BP ��

��;����� �� ������� ��������� ���� ���� �� 3�!���45 ������

��������� ���� ��������= ���������� �� �7������� �� ���

��� ���9 :���������� ��������= ��� ���� �, �� �� ���

�������� �� &�!&� 7���� �� ��� ��� � �� ���� ����� ��

"�� ���� ���������� ���������9 :��� ���� ����� ��

������ �� ������� �, ��� ����������� ���� �,������ �����

�� ���������� �� ��������= ��� ������� �� ����������

������ �� ��������������������� 3�!���45 �����9

(����� ��������������� 7��� �� ��������, �� ���� ���

��� ������� ��������� �� �,���������, �� �����������

�����9 !����� �� ��� ���� ���������� ���� �� ����� ��

��������� �, �,������� ��� �� ������, ���� ��8����

����� ��������� ��������� ������, 7��� ���� �� ��� @C=A9

B������� ��� ��� 8��7� ��� ����� ��� ����� ����� ���

�� ������ ������� !O� ��� ����� @C0A9 B������� ���

���� ���� ���7� �� ����������� �� ��� ������� �� ���������

�� �� ���� ����, ���� ��� � �� ������� ,���������9 ?�

� ����� �� �:& �,�������� �������� ��� ��� ������ ��� ���

�� ������ �� ���� �� �� ������ ������� ���������� �'

������� �� ������ ����������� @+4�+D�CCEC5A9 '�7�����

�������� ��� ��� ����� �� ��� �����8 �, ��� ����� �����

��������� �� ���������� ������� @CFA9 O�� ����� ������ ��

�������� �� �������� ���� ��������� �, ����� ���������

��, ������ ��� �������� ���� �������� �� �������������

@C.�4.A� ��� ��� �� ,���������� �� ���� �,��� ��������

��������� �� �������� @4+�4-A9 ?� �� ����7����, ���� �����

����� �� ��� ��������� �� ���� ���� ��� � ������ ���� ��

������� ������� �� ���� ��� ����� ������ 7�� ���7� ��

���, � ���� �� ���� ��������� ������� @4=�40A9 O�� �����

������ �� ������� �� �� �� ��������� �� ����� �� �������

���� ���� �� ��� ���� �������� �� ��������� �� ���

������������ �� ������ ����������� @0+A9 ������ 3�!

����� ������� �,����� ������� �� ������������ ����� �����

@F�+.A� �� 7�� �� �� �������� �� ���� 7������ ��� �����

������ �� ������� �� ��� ����������������� �� ����

���� �� ����� ��������� �����9

:�� �� �� ��������������� �� �������� ������ �� �����

������ 9 '�7����� 7� ���7 ���� ���� ����� ������ � ���

�����, ���������� ����� �����,��� ���� �4.�4��# 8�����

�������, 7���� ��� ����������, ��������� �� ���������9 :���

��������������� ��� �� �� �� 8��� ���� ����� ���

���,��� ���� �� ������ �4.#4��# �,������ 8����� �������,9

:�������� �� ������ �������� ������ �� , �� ��� �� ��

�������������� ���������� �� ������� ��� ��������� ��

����� �����,��� ���� �,������ 8����� �������,9

�������� ������

$9 ����� ��� �� �� ��������, ��8��7�� �� ��� ��� ����

��� (��� ����,���9 #� ����8 �9 ���������� ��� ��� �B+

������ , �� ����� ����� ��� ��� ����������������9 #�

��� ������� �� �������� 1���� �� B����, :����� ���

�������� ��� ��� �� ��� ���������9 :��� 7��8 7�� ���

����� �, ������ ���� ����������� ��� �� ���� ������ ��

������ 2�!�6� K��� ��������� ������ �� ������� U���

�������� ��� � ������ 9 �9 ��������� �� ��������� �� �

�����7���� ���� �!�9

����������

@+A ����8��� &B9 :�� �4.#4��# �����, �� �������E�,������ 8������I �����

���� ���������� �� �������9 ���� !�� O������ +FF-/=I0.+E049

@-A � �� B9 ������������ �������E�,������ 8������9 B��� P����� �QI

(��� &�������� ��9 ?��9/ +FF=9

@=A !���� �� ����� $�� ���7���� �B� ����� &� "���� 1� ?����� B�9

����,��� �� �4.#4��# ������� 8����� �������, �� ���� ���� ���� �����

�� ������9 $ ���� ���� +F54/-4+2-F6I+=DC0EF9

@0A ����7����� ��� B������ �?� >�8���� #9 ���������� �� ��� �4.#4��#

������� 8����� �� �� ����, ����� �� ������� ��������������9 &��� ����

��� ��� U�� +FF./5D2-6ICC5E4-9

(��9 49 K��� �� �������� ���� ��� �� ��������������������� 3�!���45�����9 ����� 7��� ����� ��� +- �� �� �������� �� ������� 2BO�P6 ��

��������������� ��������, ��� � ��� +C ��� 7��� ����������

B�������8�� !� �BL!�� �� ����������� ��������, 7�� ����� � ����

(���9 "��� ��� �������������� �� ����� �� ���� ��� �����������9

+4+0 -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�

@CA ?��, !�� B�� #� ������� "� P��� $� K���� $B� :� �� #� P���

!� (���� "$� $��� !� Q������ :$9 ���������� �!�������� �� � �����

�� � ����� ���� ����� �������9 ��� )���� +FFF/-+2-6I+5DEF.9

@4A "��� �� ������ B�� ������ P9 �!� ��������������� ���������� �� �

����� �� ��������� ������ ���� �����9 (>��K��� -..+/05D2=6I=4DED+9

@DA ���������� K� !�� , B� ����, $�� )���� !� ������ B:� (������ )�

����� �9 !��� ����� �� �,���8������ �� ���� � �����7��� ����������

�� ����� �,������ 8����� �� ��� �,�����9 $ ���� ��� +FF4/+.F2&�

46I+==CE049

@5A ����� ":� P7�� $� B����� )�9 !����� ���� ��� �������������� �, ��

���9 &��� ���� ��� ��� U�� +FFD/F02D6I=.-5E==9

@FA ��������������� &� K������ �B� )���� �� &����� �� #������ B�

������, )9 >��������� �� ������� ���8��� �� ����8 �� ��� ����,�

���������� ������ ������� 7��� ��� ������� ����9 ���� "�����

+F5-/++2+6I0CEC09

@+.A &����� �� )���� �� !���, )� �������� &� #����� B� &����� �� ������,

)9 ����� 7��� ������� ���������� �� ��������� ������ �� ���

����,� ����������� ������� 7��� ��� ������� ����9 ����� !��

+F5=/-DC2+6IC=EF9

@++A )����� )� B����� "� �������� &� )����B� '����� Q� &����� �� ������,

)� ��� )� 1�������� B9 ���� ������� �� ����� ������� �7�

������������, ��������� ����7�,� �� ��� ����������� ����� ��

�����9 O������� +FF=/52=6IC4CED09

@+-A ��������� �� O�, �� ������� $!� !���� "� $� �� &� )����� )9 �4. 2��

���6 �� ���� ������� ���� ����� �� ��������� ��� ������� ����7�,�

�� ��� ���������� �����9 O������� -..-/-+256I++D+E549

@+=A >��� )?� #,���� �'� )������ ��� K�����7�� :"� K�� '� ����8� B�

#����� �B� &��� K � '�����8 "�9 ?� ����� �� ��������� �� ������

������ �, ��B,� �������9 ���� +FF-/4FI++FE-59

@+0A !���� $B� !,�� �� ����� �� B��� :� P�� �� &����� :�� ���8 $K9

� ������� >+� �������� ���������� �� ���� ����� �������� 8������

�, :�(������� ������������ ���� ����� 2:!�?K69 $ ?�����

-.../+4C256I0C--ED9

@+CA #,���� �'9 )����������� ��� �� ��,���,�� ��������� �� ���������

7��� �� ������ �� �������� ����������9 ����� +F5./-50ICCCE49

@+4A >���� Q� ������ �� :������� Q9 ?����������� �:& ������ ��������

���� ���� ���� �, ��������� �� ��������9 ������ !�� +FFD/CD2+.6I

+5=CE0.9

@+DA K���� B� ������ �� ������ � �(� P���� �� �������� &9 ?�����������

� ������� ������������ 2�:&6 �������������I � �7���� �� ��� �������

���7��� ��������� �� ��������9 $ >�� B� +FFD/+5C256I+05+E49

@+5A K� L� P����� Q��� $� $�������� !�#���L9 ?� ����� �� ���������

������� �� ��������� ��������I ��������� ��� �:& �� �,�������� #9

���� +FF4/542+6I+0DECD9

@+FA ������ �9 ��������� �, ���� ������9 ���� +FFD/552=6I=CCE4C9

@-.A (� �8 1�� 1���8�� "!� �������� &�� ����� $$� ������� "K� '�����

&B9 >������ �� ��������� ,������� �� ��� ������ �� ���������

�,�����,��� �������� �������� ����������� �� ������� �, ������

������9 $ ?����� +FF-/+052D6I--.DE+49

@-+A ������� >� P����� "� ��8������� B� �������� &� K����� ��9 �����

����� �� ��������I �7� ������� ������ �� �� � �����������,� �, ���

�� ������� ������ 7��� ������,��"���������� �� ������ ��� �G�����

��� � �� �������� ���� ������9 &��� ���� ��� ��� U�� +FFC/F-2+46I

D+4-E49

@--A "��� �� )�����, �"� &����� "$� >���� "K� B����� �>� #,���� �'9

����,��� �� ������������� �� �������� �� ��������� 2���������

���� ����6 �, ������������� ���7 �,������,9 ������� �����,� ����

+FF-/++==2=6I-DCE5C9

@-=A '�������� K?� $������ :B� �� ������ �>� �������#�� :��������� B'9

? ������������ �� ��������� �� �������� ���� ��8���� ����� �, ���7

�,������,9 >�� ���� !�� +FF0/-+-2+6I+4+EC9

@-0A P��� $(� #�������� �B� '����� �19 ���������9 ?�� ������������ ��

������ �� ������ ������,9 ������ +FF0/D=256I-.+=E-49

@-CA Q��� :P� )����� �� ���� L�#��� 9 :�� �� � �� ������ �� �����I

��������� �� ��7 ������������� �� �������� �� ���� �������������9

������� �����,� !�� ����� +FFF/-4=I=F5E0.09

@-4A '���� Q�9 ��������� �� ��� ������ �� ������ �����������,9

���� +FFD/5F246I+50CEC=9

@-DA 1��� $&� ������ (� "���� &� ������ �� K������ (� ������� B!�

!������� $� ������ &9 �� , �� ��� ��������� �� �� �� ���� �,

���������� ��� �� ��8���� �����9 K�8 !�� +FFD/-+2-6I+4=ED-9

@-5A ������� �B� B������ $!� '��8��� $�9 ',�������������, �� ����

��������� ����� �� ������� ���� �� ��������� �� ��������� 7���

��������� �C= �� � ���� ���I����- �����9 ������ !�� +FF4/C4256I

+5=0E0+9

@-FA :��������, ��� K������8 Q9 ��������I ������� 7�����9 �������

+FF5/-5+I+=+-E49

@=.A K� K'� ��7�� �'9 ����������� ������� �� ����������� �� ��8����

K+-+. �����9 ������� �����,� ���� +FD0/=C=2=6I=DCE509

@=+A ����� )� ������� B9 B��������� �� ������ ����� ���������� ������9

&�������� :��� +F55/=D2=6I0-CE4+9

@=-A ���8������, B� ���� �� P�������� �� P�� � Q� '�����,� Q� P��

��,��� P9 ��������� ��8���� � ���� B���,� 8�������9 &�,�������

����, +FFD/04206IDC+EC9

@==A ������ � )����� � �� !������� (� �������� B>� ������� L� (���� ��

#���������� �� (������ '9 �,������� �� �������������� ����������

�� ���������� �� /8!����� ����� ����� ������� � ��������,����9

>� $ O�� ���� -..-/-..-2++6I+5=0E59

@=0A &������ �� ������ � (������ '� "���� B� )��� $� &����, �(9

!������������ �,������� �� �,�� �@=�0�.A� �� �,�� �@0�=�.A����������

C�++� ���� ����������9 >�������� �� ����� �� ���� ��������� �� �����

��������������� ����������9 ���� &���� ��� :�8,� +FFF/0D2C6I40=E49

@=CA &������ �� ������ � "���� B� (������ '9 !������������ ������

"����E�� �� �,������� �� �,�� �@-�=�.A����������C�++� �����9 '������

�,���� +FFD/0CIC5CEF49

@=4A ��������� �� ���� >� 1���� �� K���� &� )�,B� !���� "� )����� )9

���� � ���� �������� �� ���+= ���������� 7��� ����L� �� �� ��

��������� �� ���������9 O������� -..+/-.20+6IC504ECC9

@=DA $������ "� ������,� B� �������� P� >������7 #� (���� B� #,8�

$9 !�������� �� ���� ��������� �� ���� ������� �, ��� ����� �����

�������9 ���� "���� "����� -.../D256I45CEF49

@=5A ���� �� "���� $�� K����, !� ������� "9 ', ����� ������ � �� �����

��,��� ���� ������� �������,9 ���� +FF0/DD246I5+DE-D9

@=FA K���������� P� $���8������� ?� �,������ P� U���� �� �,������ �9

���������� �� ���� ������������� �� �������, ����,� ���� �7� ��������

���������9 &���� !�� +FF0/++256I++-DE=+9

@0.A ��������� !�� ��� :$� '���� P"� )�� �� ��� L� ������� >��

K��7��8 )� P�����7�8, "�� (���� K�� :�������� P$9 ���������� �� ���

�>"=G?�>������� �������� �&&=- �� ���������� ������ ������

� ������� ��������� �� ��� ��������9 $ ������� +FFD/+D2-6ICC=E4-9

@0+A L�� Q� (��� Q:� #��� )� #��� "� ��� #9 &��������� ������ �� LQFF�

C.=5 �� �, ����� ������ ���� �� ���� ���� �� ����� �������

������9 K��� ��� -..+/4F2=6I-5FEFF9

@0-A (���� P(� P������ )9 O����������������� ���������� �� ���� ����

����7�,�9 ��� ���� ���� -..+/=2++6I>-CCE4=9

@0=A ?�����7� B� P����7� � Q� ?�� �� (�8�7� '� :�������� Q� �����7

P(� K�� P'9 �������� ������ -.=9 ��������� ��8���� ����,���

���� � �� ������ �,������� ��������������� �� �,������� ������9 $

��� &�� -.../4=2D6I5F=ED9

@00A OS����� :� ������8 )� �������� $� "����� ��� B� :����8� )�

#�����7�8, "� B������� P9 � ���������� �� ��������� �� ��������

�� �� �, ������������ �� '��)- �����9 :������ ���� &��������

-.../+402=6I-5.EF.9

@0CA &��8� #�� ���� �8 B>� !�� ����� P� B���� 1B� B�������8 $$9

'��� ������� ���� �,���������,� ����������,� �� "�� � ��

��������� �� D5� ������@#��A��������� �� ��� ������,� ��������� ��

����� ���� �����������9 ������ !�� +F54/042F6I0D.4E++9

@04A ����� "�� ��������� !:� $�,������ P� #����� !B� #�����7�8, "9

:�� ��������, �� ������, �� D5� ������@#��A���������I �,�������

�� ���������������� �� ������� ����������� ���������� �� ��� �����

������������ �� ���������� �� ���� �, ����� ��� �������,���9

�������������� +F5F/+.2=6I0+FE-D9

-7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,� +4+C

@0DA "8� !�� ����� $$9 ?K�- � ������I 7��� ��7�� �� ���7�� ������

��������� � ���� � ������� �� ���� ��� : �����9 K,����8��� !��

+F54/C206I-5FEFF9

@05A �������� '� �������� B�� $������ >� ��������!�������� �B�

������ B>� ?,�� �� !�������� "�� �������� !9 :�� >D ������� ��

���� ������������� �,�� +4 ���������� ������, ���� 8��������,���

�� ���������9 O������� +FF5/+D2+.6I+-.DE+09

@0FA B����� "�� ������ !K� ��������� $!9 &����������I ��� ���������������

��������� �� ��������� �� � ������� ����������� ����� � ��� ������

�������������,��� �� ���������9 ������ ?����� +FFD/+C206I=D-E5+9

@C.A ��8��� $�� ��8��� �&9 :�,�� ,���� �,������ ���������� �� ��� ��

����� ������� �������� �������� ���� ����������� �� �������� �����

��� ��������� �� ��8����� �����9 ������ ��������� &��������

-.../04246I0DDE5D9

@C+A K��� �"� ������7�, "9 O���������� ���������� �� �������9 ����

������ +FFD/F2=G06I-0FECC9

@C-A )���� "!� !�� $�9 B������� ��� �� ���������9 ������� +FF5/

-5+2C=5+6I+=.FE+-9

@C=A &����� B� )�� , B� :�����8� $� P����� !� !����� �9 B������� ����

�������� ����������, �� ������������� �� ���� �,���������� ��8��

��� �� ��������� 7��� ���������� �� ���� ���������� 7�� ��,�� :&C=�

�� ������� �����G ����� � �����9 ���� -..+/F52-6I0.CE+=9

@C0A ������� �� ������ �9 :�� �������� ���� ���������� �� �, �����

������ �9 )������ ���������� �� ������ �� �,�������� ��,���9 ����

���� $ +FD=/+=02=6ID.DE+49

@CCA �������� &� K���� B� (����� ��B�, >9 ?����������� �:&� � �7���� �� ���

������� ���7��� ��������� �� ��������9 :������ K��� +FF5/+.-E

+.=I+=FE0-9

@C4A P������ )9 :�� �������� ���� �� �� ����������G���� ������ �� ����

���� ����7�,�9 ���� "���� "����� +FF5/C246IC0D9

@CDA 3��� :� '����� �� K�������� $$9 :�� �������� ���� �����������,

���������� �� ����� ���� �������� �� ��������� ���� �� �������,���

������ �� ����-=+5D9 :������ ���� &�������� +FFF/+C02-6I++DE

-C9

@C5A �����B�� '� Q�� K�� &'� ���� �&� K�� $$� '��� K$�#��� Q$� $���

$'9 ����� �� ������� �� ��������� �� �� ��� ���� �,��� ������ �� ���

��������� �� ����� ���� P� ���������� �����I ����������� �� ���

��������� �������� ��,��� ������� �� �������� ���� �������� ���

�������9 �������������� -..+/--2F6I+C-DE=C9

@CFA #������ P�� >���� $:� B� ���� 1B� ���������� )� $���� "&9 B����

���� ������ ���� ���� ����,9 �,������ �������79 (� �� ����

:������ +FFD/=52+6I-=E=D9

@4.A 1��������� �K� ��� "����� ���8 $'� ������� $� ��� � 1�� � �$�

B� �� )$9 >����� �� ���������� �������� �� ���������� �� ���� �,���

����������� �� �� ����� �� ��������� �, ��������� 2K�����,��������

����� 6 �� ���� ���������� ������ �����9 ������� &��������

+FFF/C5206I4CCE409

@4+A B��������� $� $��� �� ����� >� (��,�� #� �� &�� B������ �9

?��������� �� ���������� �,������� �� ��� ��7���� ���I � �� �� ���

�� �������, ��� �� ��� ����� ������9 &��� ���� ��� ��� U��

+FF+/552-.6IF=4.E09

@4-A B���8� '� O8��� Q� ��8��� '9 )��������� �� ������ ��,��� �������

���� � ����� ��,������ �� ���� ��� 2�)>�6 ���� ���������� �����

� 2U1�6 ���� ������ �� � �������� ��������� ��� ���� �������9

������� �����,� ���� +FFF/+0-52+6I0CEC49

@4=A !������� &�� )��� '� ������ �?� !������� "B9 ��������� �� ���

������9 ���� ������� +FFD/02C6I--0E=-9

@40A !��� �>� )���� �� '����� (� B���� �� #����� �9 ��������� ����

���� �� ������� ������������9 &��� !���� >,� !�� +FF5/+D206I

00=E409

+4+4 -7 -��#����� �� ��7 � �#����#�� ������#��( �: ;6��6< ,���=,�,�