LAPORAN LENGKAP

7/18/2019 LAPORAN LENGKAP

http://slidepdf.com/reader/full/laporan-lengkap-569705df03690 1/18

BAB I

PENDAHULUAN

I.I Latar Belakang

Medium adalah substansi yang terdiri atas campuran at!at makanan

"nutrien# yang dipergunakan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan

mikr$$rganisme. Mikr$$rganisme %uga merupakan mahluk hidup& untuk

memeliharanya dibutuhkan medium yang harus mengandung semua at yang

diperlukan untuk pertumbuhannya& yaitu antara lain senya'a!senya'a $rganik

"pr$tein& karb$hidrat& lemak& mineral& dan (itamin#.

Untuk keperluan hidupnya& semua makhluk hidup memerlukan makanan

ini diperlukan unruk sintesis bahan sel dan untuk mendpatkan energi. Demikain

%uga dengan mikr$$rganisme & untuk hidupnya membutuhkan bahan bahan

$rganik dan n$n$rganik dari lingkungannya. Bahan!bahan tersebut disebut dengan

nutrient "at gii# sedang pr$ses penyerapannya disebut pr$ses nutrisi. Peran

utama nutriebt adalah sebagai sumber energi& bahan pembagun sel dan sebagai

asept$r elektr$n.

Dalam bidang penelitian mikr$$rganisme ini& tentunya menggunakan

teknik atau cara!cara khusus untuk mempela%arinya dan beker%a pada skala

lab$rat$rium untuk meneliti mikr$$rganisme ini baik si)at dan karakteristiknya&

tentu diperlukan pula tentang bagamana caranya menumbuhkan suatu mikr$ba ke

dalam suatu media& karena kita tahu bah'a beragamnya persyaratan tumbuh

mikr$ba& maka harus dimengerti %enis!%enis nutrient yang disyaratkan $leh



mikr$ba dan %uga macam lingkungan )isik yang menyediakan k$ndisi yang

$ptimum bagi pertumbuhannya. Mikr$ba amat beragam& baik dalam persyaratan

nutrient maupun )isiknya. *adi& media yang digunakan harus mengandung

k$mp$nen!k$mp$nen yang dibutuhkan $leh mikr$ba tersebut.

I.+ ,umusan Masalah

-. Bagaimana cara mengetahui mensterilkan alat yang akan digunakan dalam

lab$rat$rium mikr$bi$l$gi

+. Bagaimana cara mengetahui macam!macam medium berdasarkan atas

bahan yang digunakan

/. Bagaimana cara mengetahui dan memahami cara membuat medium 00A&

LB& NA& dan PDA

I./ 1u%uan Perc$baan

-. Untuk mengetahui cara mensterilkan alat yang akan digunakan dalam

lab$rat$rium mikr$bi$l$gi

+. Untuk mengetahui macam!macam medium berdasarkan atas bahan yang

digunakan

/. Untuk mengetahui dan memahami cara membuat medium 00A& LB& NA&

dan PDA

BAB II



1IN*AUAN PU01A2A

II.I 1e$ri Umum

Medium adalah substansi yang terdiri atas campuran at!at makanan

"nutrien# yang dipergunakan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan




"pr$tein& karb$hidrat& lemak& mineral& dan (itamin#. Medium digunakan untuk

melihat gerakan dari suatu gerakan mikr$$rganisme apakah bersi)at m$til atau

n$n m$til& medium ini ditambahkan bahan pemadat 345 "Indra.+446#

Mikr$$rganisme sebagai mahluk hidup sama dengan $rganisme hidup

lainnya sangat memerlukan energi dan bahan!bahan untuk membangun

tumbuhannya& seperti dalam sintesa pr$t$plasma dan bagian!bagian sel yang

lainnya. Bahan!bahan tersebut disebut nutrien. Untuk meman)aatkan bahan!bahan

tersebut& maka sel memerlukan suatu kegiatan!kegiatan& sehingga menyebabkan

perubahan kimia di dalam selnya. 0emua reaksi yang terarah yang berlangsung di

dalam sel ini disebut metab$lisme. Metab$lisme yang melibatkan berbagai macam

reaksi di dalam sel tersebut& hanya dapat berlangsung atas bantuan dari suatu

senya'a $rganik yang disebut katalisat$r $rganik atau biasa disebut bi$katalisat$r

yang dinamakan enim. Untuk dapat memahami tentang nutrisi dan metab$lisme

ini& pengetahuan dasar bi$k$mia sangat dibutuhkan "Natsir D%ide dan 0artini.

+447#.



0uatu medium yang mengandung substansi k$mpleks seperti ekstrak

daging& tri)t$n& darah dan %uga dapat disebut medium buatan atau medium

k$mpleks. 0ebagai la'annya kita aduk medium yang masing!masing medium

yang ditentukan. Medium sintetik mungkin sangat rumit atau atau sangat berbeda

sesuai dengan mikr$$rganisme tertentu yang hendak ditumbuhkan untuk sebagian

besar medium sintetik hanya digunakan untuk pertumbuhan mikr$$rganisme

dilab$rat$rium penelitian. Banyak medium saringan lain yang serupa dengan

kaldu yang mengandung makanan "Pel$ar& -887#

Peran utama nutrien adalah sebagai sumber energi& bahan pembangun sel&

dan sebagai asept$r elektr$n dalam reaksi bi$energetik "reaksi yang menghasilkan

energi#. 9leh karenanya bahan makanan yang diperlukan terdiri dari air:& sumber

energi& sumber karb$n& sumber asept$r elektr$n& sumber mineral& )akt$r

pertumbuhan& dan nitr$gen. ;0elain itu& secara umum nutrient dalam media

pembenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting untuk sintesis

bi$l$gik $ranisme baru< "Ar)iandi. +448#

Mikr$$rganisme dapat menggunakan makanan dalam bentuk padat dan

dapat pula yang hanya menggunakan bahan!bahan dalam bentuk cairan atau

larutan. Mikr$$rganisme yang menggunakan makanannya dalam bentuk padat

terg$l$ng tipe h$l$$ik. Mikr$$rganisme yang dapat menggunakan makanannya

dalam bentuk cairan atau larutan disebut h$l$)itik. Ada beberapa mikr$$rganisme

yang dapat menggunakan makanannya dalam bentuk padatan& tetapi makanan

tersebut sebelumnya harus dicerna& di luar sel dengan bantuan enim

ekstraseluler "Iptek& +448#



Mikr$$rganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu

substrat yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan

mengembangbiakkan mikr$$rganisme tersebut harus sesuai susunannya dengan

kebutuhan %enis!%enis mikr$$rganisme yang bersangkutan. Beberapa

mikr$$rganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang

hanya mengandung garam an$rganik ditambah sumber karb$n $rganik seperti

gula. 0edangkan mikr$$rganisme lainnya memerlukan suatu medium yang sangat

k$mpleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan!bahan k$mpleks

lainnya "=$lk&-88/#.

Menurut *a'et dkk "-887# media pertumbuhan mikr$bia meliputi>

Medium berdasarkan si)at )isiknya dibagi men%adi >

-. Medium padat yaitu media yang mengandung agar -35 sehingga setelah

dingin media men%adi padat.

+. Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar 4&/!4&?5

sehingga men%adi sedikit kenyal& tidak padat& tidak begitu cair. Media

semis$lid dibuat dengan tu%uan supaya pertumbuhan mikr$ba dapat

menyebar ke seluruh media& tetapi tidak mengalami percampuran

sempurna %ika terg$yang. Misalnya bakteri yang tumbuh pada media N)B

" Nitrogen free Bromthymol Blue# semis$lid akan membentuk cincin hi%au

kebiruan di ba'ah permukaan media& %ika media ini cair maka cincin ini

dapat dengan mudah hancur. 0emis$lid %uga bertu%uan untuk

mencegah@menekan di)usi $ksigen& misalnya pada media Nitrate Broth&



k$ndisi anaer$b atau sedikit $ksigen meningkatkan metab$lisme nitrat& tetapi

bakteri ini %uga diharuskan tumbuh merata di seluruh media./. Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar& c$nt$hnya adalah NB

" Nutrient Broth#& dan LB " Lactose Broth#.

Medium berdasarkan k$mp$sisi

-. Medium sintesis yaitu media yang k$mp$sisi at kimianya diketahui %enis dan

takarannya secara pasti& misalnya Glucose Agar & Mac Conkey Agar .

+. Medium semisintesis yaitu media yang sebagian k$mp$sisinya diketahui

secara pasti& misanya PDA " Potato Dextrose Agar # yang mengandung agar&

dekstr$sa dan ekstrak kentang. Untuk bahan ekstrak kentang& secara detail

tidak dapat mengetahui tentang k$mp$sisi senya'a penyusunnya.

/. Medium n$n sintesis yaitu media yang dibuat dengan k$mp$sisi yang tidak

dapat diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahan

dasarnya& misalnya Tomato Juice Agar & Brain Heart nfusion

Agar & Pancreatic !xtract .

Menurut "Pel$ar. -887# 2lasi)ikasi medium berdasarkan )ungsinya

dig$l$ngkan men%adi g$l$ngan& yaitu>

-. Medium umum& media yang ditambahkan bahan!bahan yang bertu%uan

menstimulasi pertumbuhan mikr$ba secara umum. $nt$h Nutrien Agar

"NA# untuk menstimulasi pertumbuhan bakteri& P$tat$ DeCt$se Agar "PDA#

untuk menstimulir pertumbuhan )ungi.

+. Medium khusus& merupakan medium untuk menentukan tipe pertumbuhan

mikr$ba dan kemampuannya untuk mengadakan perubahan!perubahan kimia

tertentu misalnya& medium tetes tebu untuk "accharomyces cere#isiae$

/. Media diperkaya "enrichment me%ia#& media yang ditambahkan bahan!bahan

tertentu untuk menstimulasi pertumbuhan mikr$ba yang diinginkan. Hal ini



dilakukan untuk menstimulasi pertumbuhan mikr$ba yang %umlahnya sedikit

dalam suatu campuran berbagai mikr$ba c$nt$h h$c$late media dan &east'

!xtract'(o(tasium Nitrat Agar$

?. Media selekti)& merupakan media yang ditambahkan bahan!bahan tertentu

yang akan menghambat pertumbuhan mikr$ba yang tidak diinginkan yang

ada dalam suatu spesimen. Inhibit$r yang digunakan berupa antibi$tik&

garamk dan bahan!bahan kimia lainnya.

3. Media di))erensial& merupakan media yang ditambahkan bahan!bahan kimia

atau reagensia tertentu yang menyebabkan mikr$ba yang tumbuh

memperlihatkan perubahan!perubahan spesi)ik sehingga dapat dibedakan

dengan %enis lainnya.

7. Medium pengu%i " Assay me%ium#& yaitu medium dengan susunan tertentu

yang digunakan untuk pengu%ian senya'a!senya'a tertentu dengan bantuan

bakteri misalnya medium untuk mengu%i (itamin!(itamin& antibi$tika dan

lain!lain.

. Medium perhitungan %umlah mikr$ba yaitu medium spesi)ik yang digunakan

untuk menghitung %umlah mikr$ba dalam suatu bahan& misalnya medium

untuk menghitung %umlah bakteri !$ coli air sumur.

+.-.- 0terilisasi

0terilisasi adalah suatu pr$ses untuk membunuh semua %asad renik yang

ada sehingga %ika ditumbuhkan di dalam suatu medium tidak ada lagi %asad renik

yang dapat berkembang biak. "ardia&-88+#. 0teril akan didapatkan melalui

sterilisasi& dilakukan dengan>

-. 0terilisasi )isik& yakni senya'a kimia yang akan disterilkan tidak akan

berubah atau terurai akibat perubahan temperatur tinggi. ara sterilisasi ini



dilakukan dengan menggunakan udara panas "$(en# dengan temperatur -4!

-644 selama + %am. ara ini digunakan untuk mensterilkan peralatan gelas.

ara sterilisasi dengan uap air panas dan tekanan tinggi dengan aut$kla) yang

memiliki temperatur uap -+-4 dengan tekanan -3 psi.

+. 0terilisasi kimia& yakni sterilisai dengan menggunakan desin)ektan& larutan

alk$h$l& larutan )$rmalin& larutan AM "campuran asam kl$rida dengan

garam Hg#. Dengan larutan!larutan dan desin)ektan tersebut mikr$ba dapat

dimatikan karena tekanan $sm$tik dan dehidrasi pr$tein pada substrat./. 0terilisasi mekanik& yakni sterilisasi dengan melakukan penyaringan mikr$ba

dengan cara )ilter khusus& misalnya )ilter Berke)eld& )ilter hamberland& dan

)ilter 0eit. *enis )ilter yang diguankan bergantung pada tu%uan

penyaringandan benda yang akan disaring. "0ura'iria> -867#

II.+ Uraian Bahan

-. Alk$h$l "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > AE1HAN9LUM Nama lain > Etan$l@Alk$h$l.

Pemerian > airan tak ber'arna& %ernih& mudah menguap dan mudah

bergerak bau khas rasa panas. Mudah terbakar dengan

memberikan nyala biru yang tidak berasap.

Penyimpanan > Dalam 'adah tertutup rapat& terlindung dari cahaya di

tempat se%uk& %auh dari nyala api.

2egunaan > 0ebagai at tambahan.

+. Agar "Dir%en P9M Edisi III& -88#



Nama resmi > AFA,

Nama lain > Agar!agar

Pemerian > 1idak berbau atau bau lemah& berasa musilag$ pada

lidah.

2elarutan > 1idak larut dalam air dingin& dan larut dalam air

mendidih.

2egunaan > 0ebagai bahan pemadat medium.

Penyimpanan > Dalam 'adah tertutup baik.

/. AGuadest "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > AUA DE01ILLA1A.

Nama lain > Air suling@aGuades.

,M@BM > H+9@-6&4+.Pemerian > airan %ernih& tidak ber'arna& tidak berbau& dan tidak

mempunyai rasa.

Penyimpanan > Dalam 'adah tertutup baik

2egunaan > 0ebagai pelarut dan sumber 9+

?. Dekstr$sa "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > DE1,90UM

Nama lain > Dekstr$sa& Fluk$sa

,M@BM > 7H-+97@-64&-

Pemerian > Hablur tidak ber'arna& serbuk hablur atau serbuk

granul putih tidak berbau rasa manis.

2elarutan > Mudah larut dalam air sangat mudah larut dalam

air larutr mendidih larut dalam etan$l mendidih sukar

larut dalam etan$pl "835# P


3. Ekstrak Bee) "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > BEE E201,A1

Nama lain > kaldu nabati& kaldu he'ani& ekstrak daging

Pemerian > Massa berbentuk pasta& ber'arna c$klat kekuningan

sampai c$klat tua& bau dan rasa seperti daging& sedikit

asam

2elarutan > Larut dalam air dingin

2egunaan > sumber pr$tein untuk pertumbuhan mikr$$rganisme

Penyimpanan > dalam 'adah tertutup rapat& tidak tembus matahari



7. Pept$n "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > PEP19N

Nama lain > pept$nPemerian > 0erbuk kuning kemerahan sampai c$klat bau khas tidak

busuk.

2elarutan > Larut dalam air memberikan larutan ber'arna c$klat

kekuningan yang bereaksi agak asam praktis tidak larut

dalam etan$l "835# P dan dalam eter P.

2egunaan >0ebagai sumber utama senya'a $rganik nitr$gen&

(itamin& dan karb$hidrat.. 0ukr$sa "Dir%en P9M Edisi III& -88#

Nama resmi > 0U,90UM

Nama lain > 0akar$sa

,M@BM > -+H++9--@ /?+&/4

Pemerian > Hablur putih atau tidak ber'arna massa hablur atau

berbentuk kubus& atau serbuk hablur putih tidak berbau&

rasa manis& stabil di udara. Larutannya netral terhadap

lakmus.

2elarutan > 0angat mudah larut dalam air lebih mudah larut dalam

air mendidih sukar larut dalam etan$l tidak larut dalam

kl$r$)$rm dan dalam eter.


2egunaan > 0ebagai pemadat medium

BAB III

ME19DE PE,9BAAN

III.I Alat dan Bahan

III.I.I Alat

-. Aut$cla(e

+. Bunsen

/. Batang pengaduk

?. B$t$l sempr$t

3. a'an petri

7. Erlenmeyer

. Felas kimia

6. Felas ukur

8. 2aki tiga

-4. Lap kasar



--. Pipet tetes

-+. ,ak tabung

-/. 0end$k tanduk

-?. 1abung reaksi

-3. 1imbangan

-7. III.I.+ Bahan

-. Alk$h$l

+. Aluminium )$il

/. AGuadest

?. Benang g$dam

3. Handsc$$n

7. 2ertas bekas

. 2ertas puyer

6. 2apas

8. 2$rek gas

-4. Label

--. Masker

-+. Medium 00A

-/. Medium NA

-?. Medium PDA

-3. Medium LB



-7.

-.

-6. III.+ 2$mp$sisi Medium-. Medium 00A

a. Bact$ J Bee) ECtract 3 gr

b. Bact$ J Lact$se -4 gr

c. Bact$ J Agar ?/.3 gr

d. Bact$ J Bile 0alt 6.3 gr

e. Bact$ J Brilliant Freen 4./ gr

). Bact$ J Neutral red +.3 gr

g. Prere$sa Pept$ne 3 gr

h. 0$dium itrate 6.3 gr

i. 0$dium 1hi$sul)ate 63 gr

%. erric itrate - gr +. Medium NA

a. Daging sapi 344 gr

b. Pept$ne -3 gr

c. Agar -3 gr

d. AGuadest -44 ml

/. P$tat$ DeCtr$se Agar "PDA#

a. 2entang +44 gr

b. Fluk$sa -3 gr

c. Agar -3 gr

d. AGuadest -44 ml

-8.

?. Lact$sa Br$th "LB#

a. Nutrient br$th 6 gr

b. Lact$se 3 gr

c. AGuadest -44 ml

+4.

+-. III./ ara 2er%a

-. Disiapkan alat dan bahan

+. Ditimbang 00A 7 gr& NA + gr& PDA /.8 gr dan LB -.8 gr& lalu dimasukkan

kedalam Erlenmeyer dan dilarutkan dengan aGuadest -44 ml lalu

dih$m$genkan

/. Ditutup erlenmeyer menggunakan aluminium )$il

?. Dinyalakan bunsen& lalu larutan dipanaskan hingga mendidih& setelah itu

diangkat dan didinginkan selama beberapa menit



3. Dimasukkan larutan medium kedalm tabung reaksi sebanyak 3 ml

menggunakan pipet tetes& lakukan pemi%aran didepan bunsen pada saat

memasukkan larutan medium kedalam tabung reaksi

7. Ditutup tabung reaksi menggunakan kapas& dan diletakkan pada tempat

yang bersih dalam keadaan miring.

. Dimasukkan larutan medium pada ca'an petri sebanyak -4 ml& lakukan

pemi%aran didepan bunsen pada saat memasukkan larutan medium

kedalam ca'an petri.

6. Disimpan pada bidang datar& lalu tabung reaksi dan ca'an petri dibungkus

dengan kertas bekas

8. 2emudian masukkan kedalam aut$cla(e pada suhu -+-4 selama -3

menit.

-4. 0etelah itu& keluarkan dari aut$cla(e dan buka bungkusan kertas bekas

tersebut.

--. Dilihat hasilnya dan kemudian di )$t$.

++.



+/. BAB I=

+?. HA0IL PENFAMA1AN

+3. I=.- 1abel Pengamatan

+7.

N +. Medium

+6. Perubahan 'arna yang ter%adi

/-. 0ebelum

dipanaskan

/+. 0etelah

dipanaskan

//.

-

/?. 0alm$nella

0higella

Agar "00A#

/3. Merah Bata /7. Merah Bata

/.

+

/6. Nutrient

Agar "NA#

/8. 2uning ?4. 2uning

?-.

/

?+. P$tat$

DeCtr$se

Agar "PDA#

?/. ??.

?3.

?

?7. Lact$se

Br$th "LB#

?. ?6.

?8.

34. I=.+ Perhitungan Bahan

-. Pada medium 00A terdapat 74 gr dalam - liter

3-. K60 gr

1000 -44 ml K 7 gr

+. Pada medium NA terdapat +4 gr dalam - liter

3+. K20 gr

1000 x

-44 ml K + gr



/. Pada medium PDA terdapat /8 gr dalam - liter

3/. K

39 gr

1000 x

-44 ml K /.8 gr

?. Pada medium LB terdapat -8 gr dalam - liter

3?. K19 gr

1000 x

-44 ml K -.8 gr

33. I=./ Fambar Pembuatan Medium

37. Lab$rat$rium Mikr$bi$l$gi

3. 01I2es Mega ,eky

Makassar

36. Lab$rat$rium

Mikr$bi$l$gi

38. 01I2es Mega ,eky

Makassar

74.

7-.

7+.

7/.

7?. 73.

77.

7.

76.

78.

4.

-.

+.



/.

?.

3.7. BAB =

. PEMBAHA0AN

6. Medium merupakan bahan yang digunakan unutk menumbuhkan

mikr$$rganisme. Medium adalah substansi yang terdiri atas campuran at!at

makanan "nutrien# yang dipergunakan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan




"pr$tein& karb$hidrat& lemak& mineral& dan (itamin#.

8. Adapun karakteristik medium yang baik yaitu medium harus

mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan untuk mikr$ba& medium harus

mempunyai tekanan $sm$sis& medium tidak mengandung at!at yang dapat

menghambat& dan medium harus steril& tidak ada k$ntaminan dari mikr$$rganisme

yang tidak diinginkan.

64. Pada praktikum kali ini& medium yang akan digunakan dalam

pembuatan medium yaitu medium 0alm$nella 0higella Agar "00A#& Nutrient Agar

"NA#& P$tat$ DeCtr$se Agar "PDA#& dan Lact$se Br$th "LB#.

6-. Alat yang digunakan harus disterilisasi terlebih dahulu selam + %am

pada suhu -744

& sebelum disterilkan alat!alat yang akan digunakan harus

dibungkus dengan kertas bekas. 0etelah itu& masukkan kedalam $(en. 0etelah +

%am& alat!alat tersebut dikeluarkan dari $(en.

6+. Adapun cara pembuatan medium 0alm$nella 0higella Agar "00A#&

Nutrient Agar "NA#& P$tat$ DeCtr$se Agar "PDA#& dan Lact$se Br$th "LB# yaitu

ditimbang masing!masing bahan& untuk medium 00A sebanyak 7 gr& NA sebanyak

+ gr& PDA sebanyak /.8 gr dan LB sebanyak -.8 gr kemudian dimasukkan



kedalam r erlenmeyer lalu dilarutkan dengan aGuadest sebanyak -44 ml dan

dituang sedikit demi sedikit kemudian dih$m$genkan. 0etelah itu& dipanaskan

diatas bunsen hingga mendidih kemudian diangkat dan didinginkan selama

beberapa menit& lalu dimasukkan larutan medium kedalam tabung reaksi sebanyak

3 ml menggunakan pipet tetes& lakukan pemi%aran didepan bunsen pada saat

memasukkan larutan medium kedalam tabung reaksi& Ditutup tabung reaksi

menggunakan kapas& dan diletakkan pada tempat yang bersih dalam keadaan

miring.kemudian dimasukkan larutan medium pada ca'an petri sebanyak -4 ml&

lakukan pemi%aran didepan bunsen pada saat memasukkan larutan medium

kedalam ca'an petri disimpan pada bidang datar& lalu tabung reaksi dan ca'an

petri dibungkus dengan kertas bekas& 2emudian masukkan kedalam aut$cla(e

pada suhu -+-4 selama -3 menit. 0etelah itu& keluarkan dari aut$cla(e dan buka

bungkusan kertas bekas tersebut. Dilihat hasilnya dan kemudian di )$t$.

6/.



84.

LAPORAN LENGKAP

Documents

Transcript of LAPORAN LENGKAP