Lap. Resmi Bioanal

7/23/2019 Lap. Resmi Bioanal

http://slidepdf.com/reader/full/lap-resmi-bioanal 1/21

LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI II

UJI BATAS MIKROBA

Kelompok : E2

Achyar Eka N (2010210001)

Agita Armi Chandra (2011210005)

Amallia Sesi Sa!ila (2011210010)

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PANCASILA

JAKARTA

2014



BAB I

PENDAHULUAN

a. Latar Bea!a"#

"er!agai mikro!a patogen seringkali dit#larkan melal#i air yang

tercemar sehingga menim!#lkan penyakit !a$aan man#sia ma#p#n he$an%

&leh karena it# perl# dilak#kan penelitian mengenai adanya mikro!a dalam

s#at# sediaan o!at' o!at tradisional' kosmetik ma#p#n makanan dan

min#man agar dapat dikons#msi man#sia dengan layak sehingga tidak

menim!#lkan penyakit aki!at kontaminasi mikro!a dalam makanan dan

min#man dan dapat memen#hi ke!#t#han t#!#h secara optimal% Analisis

k#antitati mikro!iologi penting dilak#kan #nt#k mengetah#i m#t# dan

menghit#ng proses penga$etan yang akan diterapkan pada sediaan ata#

prod#k terse!#t%

ikro!a terdapat hampir disem#a tempat% *i#dara m#lai dari

perm#kaan tanah sampai pada lapisan atmos+r paling tinggi% "ahkan pada

kosmetik dan o!at,o!atan yang kita kons#msi -#ga terdapat

mikroorganisme yang m#ngkin !ersiat pathogen% *alam proses pem!#atan

o!at tradisional' ma#p#n o!at dan kosmetik tidak men#t#p kem#ngkinan

ter-adinya pencemaran oleh mikro!a' sehingga perl# dilak#kan peng#-ian

cemaran mikro!a% Sampel dilak#kan #-i cemaran mikro!a' dalam hal ini

!akteri dan kapang.khamir dengan metode #-i cemaran angka lempeng

total dan angka kapang.khamir total%

$. T%&%a" 'a" Ma"(aat

T%&%a"enganalisis keamanan prod#k,prod#k o!at' o!at tradisional'

kosmetika' makanan dan min#man secara mikro!iologi dengan prosed#r #-i

!atas mikro!a yang melip#ti #-i -#mlah mikro!a dan analisis cemaran



mikro!a pathogen% enilai keamanan dan kelayakan prod#k o!at' o!at

tradisional' kosmetika' makanan dan min#man yang di#-i !erdasarkan

perat#ran,perat#ran yang !erlak# di /ndonesia%

Ma"(aat*iharapkan mamp# menganalisis keamanan prod#k sediaan armasi

melip#ti #-i -#mlah mikro!a dan analisis cemaran mikro!a pathogen serta

mamp# menilai keamanan dan k-elayakan s#at# prod#k sediaan armasi

yang telah di#-i !erdasarkan perat#ran yang !erlak# di /ndonesia%



BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

Te)r* Da+ar

Sem#a prod#k non steril yang !eredar di pasaran' !aik it# o!at ' o!at

tradisional' kosmetika' makanan dan min#man' har#s aman #nt#k

dig#nakan ata# dikons#msi% rod#k,prod#k terse!#t har#s aman !aik dari

segi +sik' kimia ma#p#n mikro!iologi% Keamanan dalam hal mikro!iologi

melip#ti -aminan !ah$a prod#k terse!#t tidak mengand#ng mikro!a

pathogen yang !er!ahaya !agi t#!#h dan !ah$a prod#k terse!#t tidak

mengand#ng -#mlah mikro!a yang mele!ihi !atas yang di persyaratkan% -i

!atas mikro!a dilak#kan #nt#k memperkirakan -#mlah mikro!a aero! ia!le

didalam sem#a -enis sampel' !aik it# sediaan o!at' o!at tradisional'

kosmetik ma#p#n prod#k makanan dan min#man

-i !atas -#mlah mikro!a dapat dilak#kan dengan teknik angka

lempeng total.A34 ma#p#n angka kapang,khamir.AKK ata# dengan teknik

angka paling m#ngkin (A) . most pro!a!le n#m!er (N)% 4eknik A34

dilak#kan #nt#k menent#kan -#mlah total !akteri yang terdapat dalam

sampel' AKK dilak#kan #nt#k menent#kan -#mlah total kapang khamir yang

terdapat di dalam sampel' sedangkan N menyatakan -#mlah perkiraan

mikro!a (melip#ti !akteri dan kapang khamir) sem#a teknik dinyatakan

dalam tiap 1 g ata# 1 m3 sampel%



BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

a. Aat 'a" Ba,a"Aat -- Ca$an petri- 4a!#ng reaksi- 3amp# spirit#s

- Erlenmeyer- Vortex - ar#m ose- /nc#!ator- ikropipet 1m3

Ba,a" -

- "rondile6 (sampel)- N#trient Agar (NA)

-(*A)

- Lactose Broth (3")- 4etrathionat "roth- Selenite Cystine "roth- c% Conkey Agar (CA)- Trypticase Soy Broth (4S")- "rilliant 7reen Agar ("7A)- 3*8 steril

$. Cara Ker&a Per+*aa" 'a" H)/)#e"*+a+* Sa/e

"#ka kemasan secara aseptic' tim!ang 10g sampel dan mas#kkan ke

dalam erlenmeyer yang !erisi 90m3 3*8 steril (diperoleh konsentrasi

sampel 10,1)%

U&* A"#!a Le/e"# T)ta 'a" A"#!a Kaa"# K,a/*r



1% *ari hasil persiapan dan homogenisasi contoh (konsentrasi 10,1)'

di!#at !e!erapa seri pengenceran (10,2 dan 10,)% *ari

pengenceran 10,1' diam!il 1m3 ddimas#kkan kedalam ta!#ng

!erisi 9ml 3*8 steril' sehingga diperoleh pengenceran 10,2% *ari

pengenceran 10,2 am!il 1m3' mas#kkan ke ta!#ng !erisi 9m3 3*8

steril' homogenkan' sehingga diperoleh pengenceran 10, (lak#kan

d#plo)%2% nt#k A34' 1m3 pengenceran 10,1 dit#ang ke dalam ca$an petri

steril yang kosong' kem#dian dit#ang dengan NA cair s#h# ;<5,

50=C se!anyak 15,20m3% nt#k penent#an AKK dig#nakan *A

se!agai media% >omogenkan' !iarkan memadat di s#h# r#angan%

3ak#kan hal yang sama pada pengenceran 10,2

dan 10,%

% Setelah sem#a memadat diink#!asikan sel#r#h ca$an dengan

posisi ter!alik' di dalam inc#!ator pada s#h# ?=C selama 2<,<@

-am (#nt#k !akteri) dan s#h# 20,25=C selama ,5 hari #nt#k

kapang khamir%<% *ihit#ng A34 dan AKK

U&* &%/a, /*!r)$a 'e"#a" te!"*! MPN

1% Siapkan masing,masing 9 ta!#ng !erisi media 4S"%2% "agi ta!#ng dalam kelompok' masing,masing terdiri dari

ta!#ng%% ipet masing,masing 1m3 lar#tan yang diperiksa kedalam masing,

masing ta!#ng kelompok pertama sehingga diperoleh

pengenceran sampel 10,1 (0'1)' sisihkan ta!#ng%<% ipet 1m3 lar#tan dari ta!#ng yang disisihkan ke dalam masing,

masing ta!#ng kelompok ked#a sehingga diperoleh konsentrasi

sampel 0'01 (pengenceran10,2)5% ipet 1m3 lar#tan dari ta!#ng yang disisihkan ke dalam masing,

masing ta!#ng kelompok ketiga sehingga diperoleh konsentrasi

sampel 0'001 (pengenceran 10,)%% /nk#!asikan sel#r#h ta!#ng pada inc#!ator !ers#h# 5,?=C

salama 2<,<@ -am%?% Amati adanya pert#m!#han pada masing,masing ta!#ng%



@% *engan mengg#nakan ta!le N dapat dihit#ng -#mlah !ilangan

d#ga terdekat -asad renik tiap gram ata# tiap m3 sediaan yang

diperiksa% A"a*+*+ e/ara" /*!r)$a at,)#e" Escherichia coli

1% "#ka kemasan sampel secara aseptic' homogenisasi sampel danpengkayaanSecara aseptic' tim!ang 10g sampel dan mas#kkan ke dalam

Erlenmeyer !erisi 100m3 media Lactose Broth (3") steril' t#tp

rapat dan homogenkan% *iamkan ;1-am pada s#h# kamar%

/nk#!asi 5=C selama ;2<-am%2% enanam ke media agar selekti

Vortex s#spensi dalam media 3" yang teah diink#!asi' dengan cara

gores k#adran inok#lasikan 1 ose s#spensi ke media agar Mc

Conkey. /nk#!asikan pada s#h# 5=C selama ; 2<,<@-am%% -i lan-#tan terhadap koloni yang did#ga Escherichia coli

/nok#lasikan koloni ke dalam ta!#ng !erisi media 3" steril% A"a*+*+ e/ara" /*!r)$a at,)#e" Salmonella sp

1% >al yang sama dilak#kan seperti poin 1 di atas2% engkayaan selekti % Kocok s#spensi sampel yang telah diink#!asi% Secara aseptic'

pindahkan 1m3 s#spensi ke dalam ta!#ng reaksi !erisi 10m3

media Selenite Cystine Broth dan 1m3 s#spensi ke dalam 10m3

media Tetrathionate Broth. /nk#!asi pada s#h# 5=C selama

;2<-am<% enanam ke media agar selekti

Vortex s#spensi dalam media selenite dan tetrathionate yang telah

diink#!asi' kem#dian dengan cara gores' inok#lasikan masing,

masing 1 ose s#spensi ke media agar Brilliant Green Agar ("7A)%

/nk#!asi pada s#h# 5=C selama ;2<,<@-am%ert#m!#han spesi+k Salmonella sp pada media "7A ditandai

dengan adanya koloni kecil' transparan' tidak !er$arna sering

dikelilingi Bona !er$arna merah m#da hingga merah%5% -i lan-#tan terhadap koloni

Am!il koloni yang did#ga Salmonella sp mengg#nakan -ar#m ose'

inok#lasikan dengan ose cara gores dan t#s#k pada media agar

miring 4S/A dan 3/A% /nk#!asi selama 2<,<@ -am pada s#h# 5=C%



BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

a. Data Pe"#a/ata"

engencer

an

>ari ke,1 >ari ke,2 >ari ke,

A34 AKK A34 AKK A34 AKK

1% 10,1 10 0 , 0 , 12% 10,1 20 44C , 0 , 91% 10,2 0 , 1 , 52% 10,2 2< 0 , 2 , 9

1% 10, 1 , 95 , <<?2% 10, 0 0 , 9 , <5

A34 <5 <5000 C8.m3(161) 6 10,2

AKK 2< 2<00 C8.m3(161) 6 10,2

engencer

an 4a!#ng / 4a!#ng // 4a!#ng /// 4otal N10,1 , , , 0

C8.m310,2 D , , 110, , , , 0

engamatan arna Keterangana%3actose !roth Ker#h p#tih (D) ada pert#m!#han,4etrathionate !roth Ker#h p#tih (D) Salmonella sp,Selenite cystine !roth Ker#h p#tih (D) Salmonella sp

,c Conkey Agar "ening(,) tidak ada

pert#m!#han

!%"7AKoloni p#tih

dikelilingi merah

(D) ada pert#m!#han

Salmonella sp



edia 3ereng 4#s#k >2S 4S/A Asam Asam -

3/A "asa "asa -

$. Pe/$a,a+a"

1% ada #-i Angka 3empeng 4otal dari hasil pengamatan didapat -#mlah koloni tidak terhingga yait# F1100C8.m3 dan pada #-i

Angka Kapang.Khamir didapat -#mlah koloni F1100C8.m3 hal ini

men#n-#kkan !ah$a sampel idak memen#hi syarat steril%

encemaran ini m#ngkin dapat dise!a!kan sampel terkontaminan

pada saat proses pengemasan%

2% etode N dapat dig#nakan #nt#k menghit#ng -#mlah -asad

renik tertent# yang terdapat diantara camp#ran -asad renik

lainnya% Se!agai contoh' -ika dig#nakan media 3ar#tan *apar

8osat (3*8) ' maka adanya !akteri yang dapat memermentasi

laktosa dit#n-#kkan dengan ter!ent#knya keker#han pada lar#tan

dalam ta!#ng% Cara ini !iasa dig#nakan #nt#k menent#kan N

koliorm karena !akteri Coliorm termas#k !akteri yang dapat

menermentasi laktosa%

% ada analisis cemaran mikro!a pathogen Escherichia coli mediaLactose Broth !er$arna ker#h kem#dian dilak#kan inok#lasi media

CA !er$arna !ening hal ini men#n-#kkan !ah$a tidak adanya

pert#m!#han E.coli.<% aada analisis cemaran mikro!a pathogen Salmonella sp s#spensi

sampel 3" tadi dipindahkan 1m3 ke dalam ta!#ng yang masing,

masing !erisi selenite !roth dan tetrathionate !roth dan

meem!erikan $arna ker#h p#tih' kem#dian dilan-#tkan dengan

cara gores pada media "7A dan didapat hasil koloni p#tih

dikelilingi merah% >al ini men#n-#kkan d#gaan adanya

pert#m!#han Salmonella sp.5% ada #-i lan-#tan terhadap koloni yang did#ga Salmonella sp pada

media agar miring 4S/A didapat $arna merah dengan cara lereng

dan t#s#k hal ini men#n-#kkan reaksi asam' sedangkan pada



media agar miring 3/A didapat $arna #ng# dengan cara lereng dan

t#s#k hal ini men#n-#kkan reaksi !asa pada Salmonella sp.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

a. Ke+*/%a"1% ada #-i !atas -asad renik mengg#nakan metode AKK' didapat -#mlah

-asad renik <5000 C8.m3%2% ada #-i !atas -asad renik mengg#nakan metode A34' didapat -#mlah

-asad renik 2<00 C8.m3%% ada #-i !atas -asad renik mengg#nakan metode N' didapat -#mlah

-asad renik C8.m3<% ada sampel kelompok E1 terdapat !akteri Salmonella sp5% ada hasil perco!aan' sampel dinyatakan tidak layak #nt#k dikons#msi

ses#ai dengan persyaratan !atas mikro!a #nt#k sediaan o!at%

$.Sara"

etode perhit#ngan !akteri se!aiknya dengan mengg#nakan

Nkarena pada A34 terdapat !e!erapa kelemahan seperti:

- Kem#ngkinan ter-adinya koloni yang !erasal le!ih dari sat# sel

mikro!a' sehingga dapat memperkecil -#mlah sel mikro!a yang

se!enarnya% Kem#ngkinan adanya -enis mikro!a yang tidak dapat

t#m!#h karena pengg#naan -enis media agar' s#h#' p>' ata#

kand#ngan oksigen selama masa ink#!asi%

- Kem#ngkinan ada -enis mikro!a tertent# yang t#m!#h menye!ar di

sel#r#h perm#kaan media agar sehingga menghalangi mikro!a lain%

>al ini akan mengaki!atkan mikro!a lain terse!#t tidak terhit#ng%



- enghit#ngan dilak#kan pada media agar yang -#mlah pop#lasi

mikro!anya antara 0 G 00 koloni% "ila -#mlah pop#lasi k#rang dari

0 koloni akan menghasilkan penghit#ngan yang k#rang teliti secara

statistik' nam#n !ila le!ih dari 00 koloni akan menghasilkan hal

yang sama karena ter-adi persaingan diantara koloni%

BAB VIDAFTAR PUSTAKA

Anonim' 1992' rosed#r &perasional !ak# eng#-ian ikro!iologi% #sat

emeriksaan

&!at dan makanan% *irektorat enderal enga$asan &!at dan akanan

*epartemen Kesehatan H/' 1<G15' 21G25



$$$%scri!d%com.Analisis,Cemaran,ikroorganisme (2< aret 201<)

mikro!logspotcom%!logspot%com

LAMPIRAN



ALT 101



ALT 102



ALT 10



AKK 101



AKK 102

AKK 10



AKK 10 3,ar* !e



Te!"*! MPN

Lap. Resmi Bioanal

Documents

Transcript of Lap. Resmi Bioanal