Journal ReadingOriginal Article

LIPID PEROXIDATION AND THE TOTAL ANTIOXIDANT STATUS

IN THE PATHOGENESIS OF AGE RELATED AND DIABETIC CATARACTS: A STUDY ON THE

LENS AND BLOOD

By : Auliya Rahmi Fadlilah Hiszom Asyhari

Supervisor : dr Trining Purnomo, Sp.M dr. Sri Mastuti, Sp.M

IDENTITAS JURNAL• Lipid Peroxidation And The Total Antioxidant Status

In The Pathogenesis Of Age Related And Diabetic Cataracts: A Study On The Lens And Blood

Judul Jurnal

• AShoK V. KAttA, R.V. KAtKAm, h. GeethAPenulis

• Journal of Clinical and Diagnostic Research. www.jcdr.net Asal Jurnal

• Juni 2013Tanggal Publikasi

Katarak adalah salah satu penyebab utama gangguan visus, yang pada akhirnya bisa mengarah ke kebutaan. Sebuah kerusakan oksidatif pada protein lensa adalah faktor utama yang mengarah terjadinya katarak

• Untuk Mempelajari Hubungan Antara Penanda Biokimia Stres Oksidatif Dan Berbagai Bentuk Katarak.

Tujuan Penelitian

INTRODUCTION

INTRODUCTIONBeberapa tindakan

harus diambil untuk

memperlambat

perkembangan katarak

karena luasnya

disability yang disebabkan

oleh katarak, dan kita tidak

dapat mencegahnya

sampai terjadinya katarak.

Sebuah keterlambatan dalam

pembentukan katarak selama 10

tahun, akan

mengurangi prevalensi

katarak sebesar 50%.

Penundaan tersebut akan meningkatkan kualitas hidup bagi banyak penduduk

yang lebih tua dan dapat

mengurangi beban

ekonomi yang disebabkan

oleh kecacatan visus dan operasi

INTRODUCTION

MATERIAL AND METHODS

Pengumpulan Lensa dan Penyusunan homogenat

Lensa cataract yang diangkat melalui teknik pembedahan oleh PECCE + IOL (Direncanakan ekstraksi katarak ekstra kapsuler + lensa intra-ocular). Lensa diambil kemudian disimpan dalam es saline dingin dan segera dibawa ke laboratorium. Setiap lensa ditimbang dan beratnya ( dalam mg) dicatat.

Pada Lensa yang dihomogenisasi menggunakan batang Teflon dan diencerkan sampai 1:10 (b / v) dengan menambahkan 50mm buffer kalium fosfat (2mm EDTA), PH 7,00. homogenates lensa itu diperoleh setelah disentrifugasi pada 10.000 rpm selama 15 menit pada suhu 40 º C. Supernatan yang diperoleh berikut sentrifugasi itu diproses untuk perkiraan parameter biokimia.

Pengumpulan darah5 ml sampel darah dikumpulkan oleh venipuncture dari pasien yang

menjalani operasi untuk katarak pada yang hari sama.

3ml darah ini dikumpulkan dalam bohlam biasa dan secara terpisah serum

digunakan untuk estimasi nilai TBARS dan vitamin E.

Sisa 2ml darah dikumpulkan dalam bola heparinized untuk

penilaian TAC.

Penentuan

TBARS

• Tingkat TBARS, sebagai indeks peroksidasi lipid yang menghalangi-ditentukan oleh reaksi dengan asam thiobarbituric (TBA) sesuai dengan metode Yagi. Prinsip metode ini tergantung pada pengukuran warna pink yang dihasilkan oleh interaksi TBA dengan MDA. Sampel, SDS, asam asetat, asam thiobarbituric, dan H2O ditambahkan ke tabung reaksi, masing-masing. Kemudian diinkubasi pada 951 º C selama 30 menit dalam bak air. Larutan butanol-piridine (15: 1) ditambahkan ke dalam tabung. Kemudian, tabung disentrifugasi pada 4000 r.p.m. selama 10 menit. lapisan atas butanol diukur dengan spektrofotometri kosong pada panjang gelombang di 532nm . 1,1,3,3 tetraetoksipropane digunakan sebagai standar primer.

•Kadar Vitamin E diukur dengan metode colourimetric dari Baker dan Frank. Metode ini didasarkan pada pengurangan ion ferri menjadi ion besi, yang membentuk kompleks berwarna merah dengan-a 'Dipyridyl, yang dibaca pada 520nm.

Vitamin E determin

ation • TAC diukur dengan uji Kemampuan Ferri mereduksi

Plasma (FRAP/ ferric reducing ability of plasma assay). Hal ini didasarkan pada kekuatan antioksidan untuk mengurangi ion ferri menjadi ion besi pada pH rendah, yang membentuk warna besi kompleks tripyridyltriazine dan absorbansi kompleks ini diukur pada 593nm.

Pengukuran Kapasitas

Antioksidan Total

Analisis Statistik

Semua hasilnya dinyatakan dalam mean ± SD. Salah satu cara Analisis Varians (ANOVA) digunakan untuk menguji perbedaan signifikansi dan uji "t" tes digunakan untuk menguji perbedaan signifikansi antara kedua kelompok. Sebuah p-value dari <0,05 dianggap signifikan secara statistik.

RESULTS

Penelitian ini menunjukkan peroksidasi lipid meningkat baik dalam serum dan lensa pasien katarak. Sebuah peningkatan yang signifikan secara statistik pada tingkat lipid peroksida (p <0,001) diamati, dari subyek kelompok experimen dibandingkan dengan kelompok kontrol

Tingkat TBARS adalah 2-3 kali lipat lebih tinggi di lensa dengan katarak dibandingkan dengan subyek yang lensa normal, level tertinggi berada dalam kelompok katarak nuklir, diikuti oleh kelompok dengan katarak diabetes.

Tingkat vitamin E plasma secara signifikan menurun pada katarak nuklir dibandingkan dengan kelompok di kontrol

(p <0,001). Tapi tidak ada penurunan yang signifikan kadar vitamin E dalam plasma setelah diamati baik pada

kortikal dan katarak diabetes dibandingkan dengan kelompok di kontrol.

Selanjutnya, tingkat vitamin E lensa secara signifikan menurun pada nuklir, cortikal dan katarak diabetes (p

<0,001) dibandingkan dengan mereka pada lensa kelompok kontrol, tingkat tertinggi yang diamati dalam

lensa kelompok diabetes katarak.

TAC secara signifikan menurun pada semua pasien katarak dibandingkan dengan kelompok kontrol. Tingkat kedua plasma dan total antioksidan lensa yang menurun secara signifikan di kortikal,

nuklir dan diabetes katarak (p <0,001) dibandingkan dengan kelompok kontrol.

DISCUSSION

• Peran Peroksidasi Lipid menyebabkan adanya modifikasi oksidatif yang terjadi pada membran plasma lensa seseorang selama proses penuaan dan perkembangan katarak senilis.

• Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa terdapat peningkatan kadar produk peroksidasi lipid (MDA) pada katarak dibandingkan dengan kelompok kontrol.

• Tingginya tingkat TBARS dalam lensa katarak merupakan hasil dari peroksidasi lipid dari membran sel lensa, yang diproduksi secara lokal atau akibat migrasi produk dari retina.

• Sebuah kerusakan peroxidative pada membran plasma dari serat lensa kristal dapat menyebabkan gangguan permeabilitas ion, hilangnya kelompok tiol dari membran terikat crystallines dan juga agregat protein besar dengan kelarutan rendah dalam lensa.

Kerusakan oksidatif protein merupakan salah satu modifikasi yang mengarah ke kegagalan yang parah dalam fungsi biologis dan kematian

• Pada diabetes, setidaknya ada enam jalur yang berbeda melalui konsentrasi tinggi glukosa yang dapat menyebabkan akumulasi ROS dalam lensa. ROS ini dapat menyebabkan lipid peroksidasi dalam jaringan ini .

• Sejak diketahui katarak mungkin berhubungan dengan proses kerusakan jaringan, adalah wajar untuk berharap mengangkat konsentrasi peroksida lipid dalam serum dan lensa dari pasien katarak.

Dalam penelitian ini, tingkat TAC dinilai dengan uji FRAP, berdasarkan kekuatan antioksidan dari antioksidan dengan berat molekul rendah seperti vitamin (A, E andC) dan elemen (Zinc, Selenium dan tembaga).

Status Total Antioksidan dalam penelitian ini secara signifikan menurun pada semua pasien katarak dibandingkan dengan yang di kontrol.

Penurunan TAC adalah suatu kondisi ketika produksi ROS meningkat.

TAC ini mungkin telah berpartisipasi dalam pertahanan terhadap efek merugikan dari ROS yang berbeda yang dirilis karena meningkatnya peroksidasi lipid, protein glikasi dan agregasi protein dengan berat molekul tinggi.

Dengan demikian, rendahnya tingkat ekstra-seluler dan antioksidan membran membuat jaringan lensa rentan untuk berbagai jenis oksidasi dan produk sampingan mereka.

CONCLUSION

• Katarak adalah gangguan terkait usia dan mengkibatkan disability sehingga beberapa tindakan harus diambil untuk memperlambat perkembangan katarak, karena katarak tidak dapat dicegah.

• Stres oksidatif meningkat terkait usia dan pada pasien katarak diabetes. • Hasil penelitian kami menunjukkan tingginya produksi peroksida lipid dan

turunnya status antioksidan total pada pasien katarak diabetes terkait usia. • Tapi pasien diabetes mengalami stres oksidatif lebih tinggi yang paling banyak

terjadi pada awal usia dibandingkan dengan pasien katarak senilis. • Oleh karena itu, pemberian suplementasi dengan dosis yang adekuat dari

antioksidan untuk pasien katarak pada usia lebih awal mungkin bermanfaat dalam menunda komplikasi katarak lebih lanjut.

CRITICAL APPRAISAL JOURNAL

• > 12 KATA• Mencantumkan variabel bebas dan variabel terikat• Menggambarkan penelitianJudul•Latar belakang, metode, hasil, kesimpulan; •Jumlah < 250 kataAbstrak •Kriteria inklusi dan kriteria eksklusi dicantumkanKriteria

Populasi dicantumkan

Tempat penelitian dicantumkan, tetapi waktu penelitian tidak dicantumkan

Metodologi dan cara penelitian dicantumkan

Analisis data dicantumkan

Keterbatasan jurnal dan saran tidak dicantumkan

PICO

PICO• Patient. 120 orang usia 50 - 80 tahun

kelompok experimen

30 oran

g katarak

nuklir

30 oran

g katarak

kortikal

30 oran

g katar

ak diabet

kelompok kontrol

visus normal 6/6 30 orang

PICOIntervention• Melakukan analisis statistik data pasien untuk

mengindetifikasi penanda biokimia stres oksidatif yaitu peroksidasi lipid yang ditandai dengan tingkat TBARS dan status antioksidasi total yang ditandai dengan tingkat Vitamin E dan TAC.

PICOComparison• Untuk membandingkan patogenesis keterkaitan usia dan

katarak diabetik dengan katarak nuklir dan kortikal dengan kelompok kontrol pada lensa dan serum

PICOOutcome• Peroksidasi lipid yang ditandai dengan TBARS secara signifikan

meningkat baik dalam serum maupun lensa pada ketiga kelompok katarak dibandingkan dengan kelompok kontrol

• Status antioksida total yang ditandai dengan tingkat vitamin E dan TAC pada plasma dan lensa secara signifikan menurun pada ketiga kelompok katarak dibandingkan dengan kelompok kontrol.

TERIMA KASIH