i

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT

DARI BADEG (NIRA KELAPA) YANG BERPOTENSI

SEBAGAI PROBIOTIK

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Disusun oleh :

LINA NUR AFIFAH

1201070041

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

ii

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

iii

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

iv

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

v

MOTTO

“Untuk mendapatkan kesuksesan, keberanianmu harus lebih besar daripada

ketakutanmu”

“Tidak ada masalah yang tidak bisa diselesaikan selama ada komitmen bersama

untuk menyelesaikannya”

“Man Jadda Wa Jadda” Barang siapa yang bersungguh - sungguh akan

mendapatkannya.

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

vi

PERSEMBAHAN

Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan

karunia serta kemudahan yang Engkau berikan akhirnya skripsi yang sederhana

ini dapat terselesaikan. Sholawat dan salam selalu terlimpahkan keharibaan

Rasullah Muhammad SAW. Skripsi ini penulis persembahkan untuk:

Kedua orang tua, mamah dan bapak yang selalu mendukung penulis dalam

menyelesaikan skripsi .

Adikku, Nida Umi latifah yang membuat penulis lebih semangat dalam proses

penulisan skripsi.

Ung Mono, Ika Maharani, Wawa Yati dan semua keluarga di Purbalingga.

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

vii

UCAPAN TERIMA KASIH

Assalamu’alikum Wr.Wb.

Dengan mengucap puji syukur Alhamdulillah kepada Allah SWT yang

telah memberikan rahmat dan karuniaNya kepada pelulis, sehingga penulis dapat

menyusun skripsi yang berjudul: Isolasi Dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat

Dari Badeg (Nira Kelapa) Yang Berpotensi Sebagai Probiotik sebagai syarat

untuk memperoleh gelar keserjanaan S-1.

Dalam proses penelitian dan penyusunan atau penulisan skripsi ini,

peneliti telah berusaha seoptimal mungkin untuk menghasilkan karya yang

terbaik. Penyusunan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai

pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terima

kasih kepada:

1. Bapak Drs. Pudiyono, M.Hum, selaku dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu

Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Bapak Drs. Arief Husin, M.Si, selaku Kepala Program Studi Pendidikan

Biologi.

3. Drs. Heri Maryanto, M.Si, Pembimbing yang selalu memberikan semangat,

saran yang membangun, dan dengan ikhlas mengoreksi dengan cermat.

4. Dewan penguji skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan

dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

5. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan

Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah

membimbing dan memberikan ilmunya kepada penulis selama perkuliahan.

6. Staff laboran Program Studi Pendidikan Biologi yang telah memberi bantuan

selama penelitian: Selvi Yenitasari, S.Pd, Alhikmah, S. Si, & R. Nindra, S. Si.

7. Mamah dan Bapak yang selalu memberikan dukungan, mendoakan dan

menyemangati penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi ini. Terimakasih

mah pa atas atas semua Do’a dan dukungan, semoga ini menjadi langkah

awal untuk membahagiakan mamah dan bapak.

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

viii

8. Nida Umi Latifah, terimakasih selalu mendengarkan keluh kesah dan

memberi semangat.

9. Keluarga besar di Purbalingga yang selalu memberikan dukungan pada

penulis.

10. Teman-teman tersayang : Putri, Lala, Darmuti, Yunita, Ritanti, Novi, Suci,

Anna yang telah membantu dalam pelaksanaan penelitian, bertukar pikiran

dalam penulisan dan berbagi suka duka baik selama penelitian maupun

selama perkuliahan.

11. Teman-teman seperjuangan di Program Studi Pendidikan Biologi angkatan

2012 atas kerjasamanya selama ini.

12. Teman-teman kost : Inneke, Mba Nia, Eca, Tria, Mitha, Amel, Dina, Karmila

yang memberikan suport dan sudah seperti keluarga selama tinggal di Seruni

Kost.

13. Semua pihak yang membantu dalam penyusunan skripsi ini, yang tidak bisa

peneliti sebutkan satu persatu.

Demikian skripsi sederhana ini, Semoga skripsi ini bermanfaat sebagai

dasar pemikiran untuk penelitian selanjutnya baik oleh peneliti sendiri maupun

peneliti lain.

Wassalamu’alaikum wr.wb.

Purwokerto, 19 Januari 2017

Penulis,

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

ix

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT DARI BADEG

( NIRA KELAPA) YANG BERPOTENSI SEBAGAI PROBIOTIK

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri

asam laktat dari badeg (nira kelapa) dan potensinya sebagai probiotik. Isolat

murni yang diperoleh diidentifkasi berdasarkan pengamatan karakteristik

makroskopis koloni, mikroskopis sel, dan uji biokimia aktivitas sel. Kemampuan

sebagai bakteri probiotik diperoleh dengan melakukan uji ketahanan suhu, uji

ketahanan terhadap pH rendah, uji ketahanan terhadap garam empedu dan uji daya

hambat terhadap bakteri patogen dengan menggunakan bakteri Staphylococcus

aures dan Escherichia coli. Isolat bakteri diidentifikasi menggunakan buku

Bergey’s Manual Determinative of Bacteriology (Holt et al., 1994) serta

menurut Cullimore (2000) didalam Meisji et al. (2013) dan Anastiawan (2014).

Hasil isolasi diperoleh 8 isolat bakteri yaitu isolat A,B,C,D,E,F,G,H. Hasil

identifikasi terdapat 2 Genus bakteri yaitu Genus Lactobacillus (isolat

A,B,D,E,F,G,H ) dan Genus Streptococccus (isolat C). Dari hasil uji kemampuan

sebagai probiotik didapatkan bahwa 8 isolat tumbuh optimum pada suhu 37oC

serta dapat tumbuh pada suhu 15oC dan 45

oC, mampu tumbuh pada medium yang

memiliki pH 2,5-3, dan mampu tumbuh pada medium yang mengandung garam

empedu sintetik 0,3%. Berdasarkan uji daya hambat, isolat A, B, E, F, H (Genus

Lactobacillus) mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aures

dan Escherichia coli, isolat C (Genus Streptococcus) dan D (Genus

Lactobacillus) hanya mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aures, isolat G (Genus Lactobacillus) hanya mampu menghambat pertumbuhan

bakteri Escherichia coli.

Kata kunci : Badeg, Bakteri asam laktat, Identifikasi, Isolasi, Probiotik.

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

x

DAFTAR ISI

Halaman

UCAPAN TERIMAS KASIH.............................................................................vii

ABSTRAK ..........................................................................................................ix

DAFTAR ISI .......................................................................................................x

DAFTAR TABEL ...............................................................................................xii

DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................xiii

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................xiv

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah ............................................................1

1.2 Rumusan Masalah .....................................................................3

1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................3

1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

1.1 Probiotik ....................................................................................5

1.2 Bakteri Asam Laktat .................................................................6

1.3 Badeg (Nira Kelapa) .................................................................8

1.4 Isolasi Bakteri............................................................................9

1.5 Identifikasi Bkteri......................................................................11

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Lokasi dan Waktu.......................................................................13

3.2 Alat dan Bahan ...........................................................................13

3.3 Metode Penelitian ......................................................................14

3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................14

3.5 Identifikasi .................................................................................20

3.6 Uji Kemampuan Bakteri Sebagai Probiotik ...............................21

3.7 Analisis Data .............................................................................23

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian .........................................................................24

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

xi

4.2 Pembahasan ...............................................................................34

BAB V SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Simpulan ....................................................................................48

5.2 Saran ..........................................................................................48

DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................49

LAMPIRAN ........................................................................................................53

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Komposisi kimia nira kelapa .............................................................9

Tabel 4.1 Isolasi bakteri yang berhasil diisolasi dari badeg (nira kelapa) .......24

Tabel 4.2 Karakteristik makroskopis koloni bakteri hasil isolasi

dari badeg (nira kelapa .....................................................................25

Tabel 4.3 Karakteristik isolat A,B,D,E,F,G,H .................................................29

Tabel 4.4 Karakteristik isolat C ........................................................................31

Tabel 4.5 Hasil uji temperatur/suhu .................................................................32

Tabel 4.6 Hasil pengukuran zona bening pada daya hambat ...........................33

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 4.1 Hasil uji MR ...................................................................................26

Gambar 4.2 Hasil uji VP ....................................................................................27

Gambar 4.3 Hasil uji fermentasi karbohidrat ....................................................27

Gambar 4.4 Hasil uji motilitas ...........................................................................28

Gambar 4.5 Hasil uji terhadap garam empedu ..................................................33

Gambar 4.6 Hasil Pengamatan Uji Daya Hambat .............................................34

Gambar 4.7 Persamaan reaksi hidrolisis glukosa ..............................................34

Gambar 4.8.a. Persamaan reaksi fermentasi karbohidrat..................................35

Gambar 4.8.b. Persamaan reaksi perubahan warna pada medium uji VP ........36

Gambar 4.9 Persamaan reaksi uji Katalase ........................................................38

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Kode isolat masing-masing genus bakteri .....................................55

Lampiran 2. Hasil pengamatan Koloni bakteri ..................................................56

Lampiran 3. Hasil pengamatan sel bakteri .........................................................57

Lampiran 4. Hasil identifikasi isolat-isolat bakteri .............................................58

Lampiran 5. Hasil uji terhadap pH .....................................................................59

Lampiran 6. Hasil uji terhadap termperatur/suhu ...............................................60

56

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ..., LINA NUR AFIFAH , P. BIOLOGI, UMP2017.