Resolution of skeletal muscle inflammation in mdx dystrophic mouse is accompanied by increased...
Transcript of Resolution of skeletal muscle inflammation in mdx dystrophic mouse is accompanied by increased...
��������� � �������� ����� ��� ���� � ������������ ���� �� ���� ����� �� ��������� ��������� �� ��������� ���������
������� ��������� � ��� ��� ������������������ ������������ ������� ������� ��������������� �� ������ �������������
����������� � ��� ������� ����� ��� ��� ���� ��� ������ �� ������ �������
���������� ����������� � ��� ����� ����������� ��������� ��� !����� "� �� #�����
������� ���������� $���������� � ��� ����� %&��� �� ' ����� ��� ��%�"�(�
"� �� #������ ���'��� ��� ���)"* ��"+,-./� !����� )��0��� ����� ������
����� �! "#$ %&'(��)*�#+ ,- �&.&/* 0--1
����%*�! "#$ %&'(��)*�#+ 01 2�'$&)$3 0--0
�� ���� �!4 5#&/�� *6� )+�5)( 5#!�( #" &�6�++� 5&/�&()$ !3/*$#%63�
!� �(#%/ )+ 7(�+8�! $���//� � �+"()55)*#$3 53#%)*63 9�*6 )+ )%%)$�+*
/&/*)�+�! �)%)��*3 "#$ 5&/�(� $�.�+�$)*�#+: �� )+)(3/�! 96�*6�$ �6)+.�/
�+ *6� /8�(�*)( 5&/�(� !&$�+. 53#+��$#/�/ )+! $�.�+�$)*�#+ 9#&(! �#$$�()*�
9�*6 "&+�*�#+)( )(*�$)*�#+/ �+ %�$�%6�$)( (35%6#�! *�//&�/: ��$� 9� /6#9 *6)*
!&$�+. *6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/� 5!4 5��� !�/%()3 5)$8�! )*$#%63 #" %�$�%6
�$)( (35%6 +#!�/ )+! �4*�+/� � 5&/�(� �+"()55)*�#+: �+ �#+*$)/*� �+()$.�5�+*
#" !$)�+�+. (35%6 +#!�/ 9�*6 )��&5&()*�#+ #" � ;� � ;;�� � ;� � 0<��� =� � ;;� (35%6#�3*�/ )+! *3%�0 � ��((/ 9)/ �#+/�/*�+*(3 #'/�$ �!
!&$�+. )5�(�#$)*�#+ #" *6� 5&/�(� (�/�#+: �+ )!!�*�#+� $�.�+�$)*�#+ #" *6�
5&/�&()$ *�//&� 9)/ )��#5%)+��! '3 �#+�#5�*)+* �+�$�)/� #" �55&+#
.(#'&(�+/��$�*�+. ��((/ �+ $�.�#+)( (35%6 +#!�/ )+! '#+� 5)$$#9: #&'(�
�55&+#()'�((�+. )+)(3/�/ $� �)(�! �+*�+/� � ��(( %$#(�"�$)*�#+ )+! "#$5)*�#+
#" .�$5�+)( ��+*$� �+ *6� "#((��(�/ #" !3/*$#%6�� $�.�#+)( (35%6 +#!�/: 2&$*6�$
5#$�� (35%6 +#!� ��((/ %$#!&��! ()$.� )5#&+*/ #" �2�� '&* +#* ��;� ��> #$
��1- )"*�$ �� ���� 5�*#.�+ /*�5&()*�#+ 9�*6 �#+�)+) )(�+ �: �/ *6�/� )(*�$
)*�#+/ #��&$$�! 5)�+(3 !&$�+. *6� $��# �$3 %�$�#!� 9� /&..�/*�! *6)* (#�)(
)�*� )*�#+ #" *6� �55&+� /3/*�5 �#&(! '� )+ �+"(&�+�� 96��6 5�*�.)*�/ *6�
53#+��$#/�/ #" 5&/�&()$ *�//&� �+ *6� 5!4 !3/*$#%6�� 5#&/�:
1��&��2 �55&+� /3/*�5� �+"()55)*�#+� 5!4� 5&/�&()$ !3/*$#%63
�#$$�/%#+!�+��@ 6�$�A) �&�$��#�)+*#/� �)'#$)*#$3 #"
��((&()$ ?)*6#(#.3� �+/*�*&*� #" ��#(#.3� �22� ��*�$#B�� 0;01-1,-���# !� �)+��$#� �$)A�(: 2)4@ <<: -01: 0C1DE<D,;F �5)�(@
G5(�H+�*5)�(:�#5:'$F *I&�$��#H&$'�:�#5:'$
�+*: �: �4%: ?)*6: J0--0K ��� 101E1,0
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*! 101
6� 5!4 5#&/�� )+ )+�5)( 5#!�( #" &�6�++� 5&/
�&()$ !3/*$#%63 J � K� /�5�()$ *# *6� 6&5)+ !�/�)/��
!� �(#%/ )+ 7(�+8�! $���//� � �+"()55)*#$3 53#%)*63
J�#+)8) 1DD=K: �#*6 5!4 5��� )+! � %)*��+*/ 6) �
) !�"���* �+ *6� .�+� �#!�+. "#$ !3/*$#%6�+� ) /&'%()/5)
(�55)( %$#*��+ *6)* '�+!/ *# )�*�+ )+! )//#��)*�/ 9�*6 )
�#5%(�4 #" ��(( /&$")�� %$#*��+/ 96��6 �+ *&$+ �+*�$)�*/
9�*6 *6� �4*$)��((&()$ 5)*$�4 J���K J����+/8� �� ��: 1D=DF
�$#9+ �� ��: 1DDDK: 3/*$#%6�+ !�"����+�3 �5%)�$/ �+*$)
��((&()$ �)0� 6#5�#/*)/�/ )+! !�/$&%*/ 5&(*�%(� %$#*��+
�+*�$)�*�#+/ �5%#$*)+* "#$ /�.+)((�+. "$#5 *6� ��� *# *6�
+&�(�&/ J��6(�$ 0---K: �/%�*� /6)$�+. *6� /)5� .�+�*��
)+! 5#(��&()$ !�"��*� *6� !�/�)/� )$��/ 5)$8�!(3
)5#+. 5��� )+! 6&5)+/: � 7 5��� 6) � ) 5#$�
'�+�.+ �#&$/� )+! /6#9 )+ )%%)$�+* /&/*)�+�! �)%)��*3
"#$ $�.�+�$)*�#+� 96�$�)/ 5&/�(�/ #" 3#&+. 5)(� �
%)*��+*/ )$� $�%()��! '3 ")* )+! �#++��*� � *�//&�� 9�*6
!�)*6 #��&$$�+. )$#&+! *6� /��#+! !��)!� #" (�"�
J�(()5)+! L �)5%'�(( 0---K: �+"#$*&+)*�(3� 5#/* *6�$)
%�&*�� /*$)*�.��/ 6) � '��+ %)((�)*� � $)*6�$ *6)+ �&$)*� ��
9�*6 ) "#�&/ #+ )5�(�#$)*�+. #$ $�/*$)�+�+. *6� !�/�)/�
%$#��//: 6�/ �/ %)$*(3 !&� *# ) ()�8 #" &+!�$/*)+!�+.� +#*
#+(3 #" *6� %$���/� 5#(��&()$ "&+�*�#+ #" !3/*$#%6�+� '&*
)(/# #" *6� !3/*$#%6�� %$#��// �*/�(" )+! *6� �%�/*)*��
")�*#$/ *6)* �+"(&�+�� *6� &(*�5)*� �(�+��)( %6�+#*3%�
J�+")+*� L �&/A).6 1DDDK:
�&/�&()$ !3/*$#%63 �+ 5!4 5#&/� �/ �6)$)�*�$�A�! '3
)'$&%* #+/�* #" 5&/�(� "�'$� !�.�+�$)*�#+ 9�*6 �+*�+/�
�+"()55)*#$3 �+"�(*$)*� %$�/�+* /�+�� 9�)+�+. J�#+)8)
1DD=K: 6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/ #��&$/ +�)$ )!&(*6##!
)+! �/ "#((#9�! '3 �""��*� � 5&/�&()$ $�.�+�$)*�#+: M�*�
%�$/�/*�+* "�'$#/�/ )+! )��&5&()*�#+ #" �#++��*� � *�//&�
)""��* )(5#/* �4�(&/� �(3 *6� !�)%6$).5 J�#()+! �� ��:
1DD<K� *6#&.6 (�5' 5&/�(�/ /6#9 "�'$#/�/ *#9)$!/ *6�
�+! #" *6� /��#+! 3�)$ J?)/*#$�* L ��'�((� 1DD<K: �+ *6�/
/�+/�� 5!4 5��� 5)3 '� �#+/�!�$�! ) )(&)'(� 5#!�(
"#$ /*&!3�+. *6� %$#��// #" 5&/�(� $�.�+�$)*�#+ �+
&�6�++�*3%� 5&/�&()$ !3/*$#%63 J ��)$�# �� ��: 1D=DK:
�3#+��$#/�/ �+ 5!4 5��� �/ #"*�+ %$���!�! '3
'$�)8!#9+ )+! !�*)�65�+* #" /)$�#(�55) "$#5 *6�
')/�5�+* 5�5'$)+� )+! /&'/�I&�+* !�.�+�$)*�#+ #"
5&/�(� "�'$�/ )//#��)*�! 9�*6 �4*�+!�! �+"()55)*#$3
%$#��//: �)�$#%6).�/� � ;� )+! � =� (35%6#�3*�/
$�%$�/�+* *6� 5)�+ �#+/*�*&�+*/ #" *6� �+"()55)*#$3 ��((
%#%&()*�#+ /&$$#&+!�+. *6� !�.�+�$)*�+. 53#"�'$�/
J�� #9)(( �� ��: 1DD-F �%�+��$ �� ��: 0--1K: �� �$)(
"�+!�+./ /&%%#$* *6� 63%#*6�/�/ *6)* *6� �55&+� /3/*�5
5�.6* '� %()3�+. ) $�(� )+* $#(� �+ *6� %)*6#%63/�#(#.3 #"
!3/*$#%6�+!�"����+* 5&/�&()$ !3/*$#%63: 2#$ �+/*)+���
(35%6#�3*�/ 5)3 �#+*$�'&*� !&$�+. �)$(3 /*).�/ #" *6�
!�/�)/�� '3 �+!&��+. )%#%*#/�/ *6$#&.6 %�$"#$�+ !�%�+!
�+* )+! �+!�%�+!�+* 5��6)+�/5/ J�%�+��$ �� ��: 1DDCK
)+! )(/# ()*�$� '3 *6� #+/�* #" "�'$#*�� � �+*/ *6)* &+!�$
5�+� *6� )'�(�*3 #" 5&/�(� *# $�.�+�$)*� J�#$$�/#+ �� ��:
0---K: �#9� �$� ) $���+* /*&!3 �+5!45��� &/�+. )!�+#
�$&/ ��*#$/ �4%$�//�+. �.)()�*#/�!)/� #$ .$��+
"(&#$�/��+* %$#*��+ %#�+*�! #&* ) %#*�+*�)( $#(� "#$ �3*#
8�+�/ �+ %$#5#*�+. &%$�.&()*�#+ #" &*$#%6�+� ) �#5%�+
/)*#$3 /*$&�*&$)( 5&/�(� %$#*��+ JM)5)5#*# �� ��: 0---K:
�+*�$�/*�+.(3� ) %)*��+* 9�*6 ���8�$ 5&/�&()$ !3/*$#%63�
!� �(#%�+. )�*� � )$*6$�*�/ 9�*6 .$�)* %$#!&�*�#+ #"
�+"()55)*#$3 �3*#8�+�/� /6#9�! )5�(�#$)*�#+ #" 5&/
�&()$ !3/*$#%63 9�*6 +#$5)(�A)*�#+ #" �$�)*�+� 8�+)/�
(� �(/ J�)�.)8� �� ��: 1DDDK: � '�**�$ &+!�$/*)+!�+. #"
*6� %)$*���%)*�#+ #" *6� �55&+� /3/*�5 �+ &�6�++�
*3%� 5&/�&()$ !3/*$#%63 5)3 *6�$�"#$� %$# �!� )(&)'(�
�+"#$5)*�#+ "#$ !�/�.+�+. +�9 /*$)*�.��/ #" *$�)*5�+*:
?$� �#&/ !)*) "$#5 #&$ .$#&% /6#9�! *6)* 5)G#$
�6)+.�/ �+ *6� �3*#)$�6�*��*&$� )+! 5��$#�+ �$#+5�+*
#" (35%6#�! #$.)+/� /&�6 )/ )*$#%63 )+! ��� # �$
!�%#/�*�#+� %)$)((�(�! *6� %$#��// #" 53#+��$#/�/ )+!
�4*�+/� � �+"()55)*#$3 $�)�*�#+ �+ *6� 5&/�&()$ *�//&�
#" 5!4 5��� J�&�$��#�)+*#/ �� ��: 1DD<F ���4)/ �� ��:
1DDCK: �+ �#+*$)/*� �+6)+��! ��((&()$�*3 #" !$)�+�+. (35%6
+#!�/ 9�*6 /�.+�"��)+* �+�$�)/� #" � ;� )+! � =� ��((/
�4%$�//�+. ��� $���%*#$/ 9)/ �#+/�/*�+*(3 #'/�$ �!
!&$�+. $�.�+�$)*�#+ #" 5&/�&()$ *�//&� )+! �(�+��)( )5�(�
#$)*�#+ #" *6� !�/�)/� �+ 5!4 5��� J�).$#*)�)+!�!# �� ��:
1DDDK: ��$� 9� $�%#$* *6)* !&$�+. *6� $��# �$3 %6)/� #"
5&/�&()$ !3/*$#%63� !��(�+� �+ 53#+��$#/�/ 9)/ )��#5
%)+��! '3 �+�$�)/�! �55&+#.(#'&(�+ )+! �+*�$"�$#+�%$#!&�*�#+: 6� $�/&(*/ )$� !�/�&//�! �+ *�$5/ #+ *6�
%#//�'(� $#(� #" *6� �55&+� /3/*�5 �+ *6� 5�*�.)*�#+ #"
*6� 5&/�&()$ (�/�#+ �+ 5!4 5#&/�:
��������� �� ������
3�����
�!4 !3/*$#%6�� )+! ).�5)*�6�! �<C��N1-� �#+*$#(
+#+!3/*$#%6�� 5��� 9�$� 5)�+*)�+�! �+ *6� )+�5)(
6#&/� #" *6� �%)$*5�+* #" ��((&()$ )+! �#(��&()$
��#(#.3 )* 2(&5�+�+/� 2�!�$)( �+� �$/�*3: ���� 9�$�
8�%* )* ) �#+/*)+* *�5%�$)*&$� J0- ��K 9�*6 ) (�.6* �3�(�
#" 10 @ 10 6� $���� �! )��!�"��! 9)*�$ )+! �+$��6�! !��*
/&%%(�5�+*�! 9�*6 �*)5�+/ �� ����� �4 �+ )+ )**�5%* *#
5�+�5�A� !�/*$�// )+! ) #�! /*)$ )*�#+ !&� *# 5&/�&()$
!3/*$#%63� 9)*�$ 9)/ %$# �!�! �+ ) '#**(� 9�*6 (#+.�$ /�%
)+! %�((�*�! "##! �+ ) $���%��+* %()��! #+ *6� "(##$ #" *6�
�).�: �)(� )+�5)(/ 9�$� /�(��*�! )* ).�/ �#$$�/%#+!
�+. *# 5)�+ %6)/�/ #" *6� !�/�)/�@ 6��.6* #" 53#+��$#/�/
J;9��8/K� )5�(�#$)*�#+ #" 53#+��$#/�/ J109��8/K )+!
�)$(3 "�'$#/�/ J0;9��8/K:
#4 5�����+������ �� ��4
100 � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0
!�������� ������� ��� 9 ���������� ������
:����� ����8�� 5&/�(� "$#5 ;� 10 )+! 0;9��8 5!4 5���
9�$� �)$�"&((3 $�5# �! )+! "�4�! �+ "#$5)(�+'&""�$�!
J%�C:0K ��((#+�. "�4)*� �: 2� ��5 /��*�#+/ #" %)$)""�+
�5'�!!�! *�//&� 9�$� /*)�+�! 9�*6 6)�5)*#43(�+E�#/�+
J��K: �.�+�$)*�+.N+��$#*�� "�'$�/ 9�$� �!�+*�"��! '3 )+
6#5#.�+�#&/ %)(� �#/�+#%6�(�� /)$�#%()/5� 96�$�)/
$�.�+�$)*�+. "�'$�/ '3 *6��$ /*$#+. /)$�#%()/5�� ')/#
%6�(�) )+! ��+*$)((3 (#�)*�! +&�(��: 6� *#*)( /&$")�� )+!
*6)* #��&%��! '3 53#+��$#/�/� $�.�+�$)*�+. "�'$�/ #$
"�'$#/�/ 9)/ !�*�$5�+�! 9�*6 *6� ����� ?$#.$)5
J�)*�#+)( �+/*�*&*�/ #" ��)(*6 �5).� ?$#.$)5� ���K:
6� !�""�$�+�� '�*9��+ *6�/� *9# 5�)/&$�5�+*/ 9)/
�4%$�//�! )/ *6� %�$��+*).� #" %)*6#(#.��)( )$�) �+ *6�
�$#///��*�#+: �5).�/ "$#5 *6� �+*�$� �$#// /��*�#+
&/�+. ) 0-� #'G��*� � 9�$� )�I&�$�! 9�*6 ) �#&+!
��/�#+ ���$# J���K !�.�*)( �)5�$):
��� �8���8������
:����� ����8�� /8�(�*)( 5&/�(� 9�*6 !$)�+�+. )4�(()$3 )+!
'$)�6�)( (35%6 +#!�/ 9)/ �)$�"&((3 $�5# �! )+! "�4�! "#$
, 6 �+ �)$+#3O/ "�4)*� �: ���*�#+/ %()��! #+ %#(3�(3/�+�
J��.5) �6�5��)( �#5%)+3� ��� ���K %$��#)*�! /(�!�/
9�$� '(#�8�! "#$ �+!#.�+#&/ %�$#4�!)/� )�*� �*3 9�*6 ,P
63!$#.�+ %�$#4�!� �+ %6#/%6)*�'&""�$�! /)(�+� J?��K "#$
<5�+ )+! 9)/6�! 9�*6 ?�� �#+*)�+�+. -:1P ��� J"$)�
*�#+ �K )+! -:-1P $�*#+ 71-- J��.5)K: �%*�5)( !�(&*�#+/
#" '�#*�+3()*�! )+*�?��� �(#+� ?�1- J��(( %$#(�"�$)*�#+
)//#��)*�! 5)$8�$K )+! %&$�"��! )+*��00- �(#+� ��,>�0
J� ��(( 5)$8�$K '#*6 %&$�6)/�! "$#5 ?6)$5�+.�+ J�)+
��.#� ��� ���K 9�$� )%%(��! )+! /��*�#+/ �+�&')*�! )*
$##5 *�5%�$)*&$� �+ ) 5#�/* �6)5'�$ "#$ >-5�+: ���*�#+/
9�$� *6�+ /&'G��*�! "#$ ;-5�+ *# .#)* )+*�$)* �.�
%�$#4�!)/� �#+G&.)*� J��.5)K )+! /*$�%*) �!�+)(8)(�+�
%6#/%6)*)/� J�#&*6�$+ ��#*��6+#(#.3 �//#��)*�/�
��$5�+.6)5� ��� ���K: ?�$#4�!)/� 9)/ $� �)(�! 9�*6
)5�+#�*63(�)$')A#(� J��.5)K �+ *6� %$�/�+�� #" �0�0
)+! %6#/%6)*)/� 9�*6 <'$#5# ;�6(#$# ,�+!#(3( %6#/
%6)*� )+! +�*$# '(&� *�*$)A#(�&5 J�35�! �)'#$)*#$��/
�+�:� ���K: �(( /��*�#+/ 9�$� (�.6*(3 �#&+*�$/*)�+�! 9�*6
�)3�$O/ 6)�5)*#43(�+: 2#$ 6�/*#(#.��)( /*&!��/ )* (�)/*
"� � )+�5)(/ %�$ .$#&% 9�$� �4)5�+�!:
2#$ )//�//5�+* #" � ;� )+! � =� ��(( /&'/�*/ �+
*6� �+"()55)*#$3 �+"�(*$)*�� :����� ����8�� 9)/
�5'�!!�! �+ �� J�//&��8� ��(�/ �+�� �(86)$*�
���K )+! /&'/�I&�+*(3 "$#A�+ �+ (�I&�! +�*$#.�+: 2� ��5*6��8 /��*�#+/ 9�$� "�4�! �+ )��*#+� )+! �+�&')*�!
9�*6 )+*�� ; J�Q1:<K )+! )+*�� = J<,>CK 63'$�!#5)
/&%�$+)*)+*/: 6$�� 5!4 5��� 9�$� �+�(&!�! %�$ ).�
)+! *6$�� �+*�$� �$#///��*�#+/ #" /8�(�*)( 5&/�(� 9�$�
)+)(3/�! 9�*6 ) 0-� #'G��*� � "#$ �)�6 5#&/�:
3����� � ���� ����� ���0�� �� ��& ��������
#&'(� #$ *6$���#(#&$ /*)�+�+. 9�$� %�$"#$5�! 9�*6
"(&#$�/���+E�/#*63#��)+)*� J2��K� �%63�#�$3*6$�+J�?�K�
*$��#(#&$ J�K #$ �&)+*&5 $�! �#+G&.)*�/� &/�+. *6�
"#((#9�+. 5#+#�(#+)( )+*�'#!��/ J5�'/K@ � ;N�?�
�(#+� �,; J���*#+ ��8�+/#+� �)+ �#/�� ��� ���KF
� =N'�#*�+ �(#+� <,>:C J�#&*6�$+ ��#*��6+#(#.3
�//#��)*�/� ��$5�+.6)5� ��� ���KF � <N'�#*�+ �(#+�
�3*1 J���*#+ ��8�+/#+KF � 0<N2�� J�(#+� ��1,K�
����N2�� J�(#+� �<C<DCK "$#5 ��.5): �+*��00-N
�?� J�(#+� ��,E>�0K� � ;;N2�� �(#+� ��C� � >0�N
2�� J�(#+� ��(1;K )+! )+*��.�N2�� J�(#+� �>>-:0K
9�$� %&$�6)/�! "$#5 ?6)$5�+.�+:
�4�(()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!�/� /%(��+ )+! '#+�
5)$$#9 9�$� �)$�"&((3 $�5# �! )+! �(�)+�! "$#5
)!�%#/� *�//&�: �#+� 5)$$#9 ��((/ 9�$� �#((��*�! "$#5
*6�.6 )+! /6�+ '#+�/: ��(( /&/%�+/�#+/ %$�%)$�! '3
"�+� 5�+��+. *6� #$.)+/ 9�*6 +��!(�/ �+ ?�� %�C:0�
9�$� %)//�! *6$#&.6 ) +3(#+ /�� � )+! /&/%�+!�! �+
����#(! ?�� /&%%(�5�+*�! 9�*6 0P 6�)*�+)�*� )*�!
"�*)( �)(" /�$&5 J2��K J��'�# ���� �)�*6�$/'&$.�
���K: ��! '(##! ��((/ 9�$� $�5# �! "#((#9�+. �+�&')
*�#+ 9�*6 -:1>< � $�/)55#+�&5 �6(#$�!� "#$ 05�+:
��((/ 9�$� 9)/6�! 9�*6 ?���0P 2�� )+! �)'�(�*3
!�*�$5�+�! '3 *6� *$3%)+ '(&� �4�(&/�#+ *�/*:
6$�� 6&+!$�! *6#&/)+! ��((/ 9�$� �+�&')*�! "#$
1-5�+ )* ; �� 9�*6 ?�� E 0P 5�4*&$� J @ K "�*)( �)("
/�$&5 )+! 1N1- !�(&*�! +#$5)( 5#&/� /�$&5: 2#$
*6$���#(#&$ /*)�+�+.� ��((/ 9�$� �+�&')*�! 9�*6 #%*�5)(
�#+��+*$)*�#+ #" /%���"�� )+*�'#!��/ "#$ 0-5�+ )* ; ��:��+!�+. #" '�#*�+3()*�! )+*�'#!��/ 9)/ !�*�$5�+�! "#(
(#9�+. /*�%9�/� �+�&')*�#+ "#$ ,-5�+ 9�*6 /*$�%*) �!�+E
�&)+*&5 $�! �#5%(�4 J��.5)K: ��((/ 9�$� "�4�! 9�*6
?���1P "#$5)(!�63!� �#+*)�+�+. -:-<P )A�!�: � (� �+.
.)*� �4�(&!�+. ��(( !�'$�/ )+! +#+ �)'(� ��((/ 9)/ !�*�$
5�+�! &/�+. "#$9)$! /: /�!� /�)**�$ %)$)5�*�$/ )+!
0- --- � �+*/ 9�$� )�I&�$�! &/�+. ) 2����)(�'&$ �3*#
5�*�$ &/�+. ����I&�/* /#"*9)$� J���*#+ ��8�+/#+�
�)+ ��.#� ���K:
�������� � ��� ���� ���+�������� ����
2#$ �7 ��� �4%�$�5�+*/� *#*)( +&5'�$/ #" �.�� �.� )+!
�.� %()/5) ��((/ 9�$� !�*�$5�+�! '3 ) 5#!�"��)*�#+ #" *6�
��!.9��8 )+! �#(* ������%#*�//)3 *��6+�I&� J���K
J��!.9��8 L �#(* 1D=,F �$)!��+ �� ��: 1DD;K: �$��"(3� 5��$#
*�*$� %()*�/ J�&4(#+ �0D ���� ���� 2$)+��K 9�$� �#)*�!
"#$ 1>6 )* ; �� 9�*6 )+*��.�� )+*��.� #$ )+*��.� )+*�
'#!��/ J�#&*6�$+ ��#*��6:� ��$5�+.6)5� ��� ���K !�(&*�!
�+ �#)*�+. '&""�$ J-:-<� Q0�?�;K )+! '(#�8�! "#$ 1 6 9�*6
?�� �#+*)�+�+. 1P .�()*�+ J��.5)K:
5���8���� ��������� ��� ��������� � �������
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0 10,
��$�)( !�(&*�#+/ #" ��(( /&/%�+/�#+/ �+ �?�� 1>;- 9�*6
0P 2�� #'*)�+�! "$#5 �+!� �!&)( (35%6 +#!�/� /%(��+ #$
'#+� 5)$$#9 9�$� /��!�! )+! �+�&')*�! "#$ > 6 )* ,C ���+ ) 6&5�!�"��! <P ��0 �+�&')*#$: �"*�$ 9)/6�+. #&* *6�
��((/� %()*�/ 9�$� �+�&')*�! 9�*6 *6� �#$$�/%#+!�+. .#)*
)+*�5#&/� �.�� �.� #$ �.� )(8)(�+�%6#/%6)*)/� �#+G&
.)*� J�#&*6�$+ ��#*��6:K "#$ D-5�+ )* ,C �� �+ ) 6&5�!�"��!
<P ��0 �+�&')*#$: �%#*/ .�+�$)*�! '3 /%���"�� '�+!�+. #"
/��$�*�! �.� 9�$� $� �)(�! 9�*6 <'$#5#;�6(#$#,
�+!#(3( %6#/%6)*� J���?K /&'/*$)*� !�(&*�! �+ 0)5�+#0
5�*63(1%$#%$)+#(#( )(8)(�+� '&""�$ /#(&*�#+: 6� +&5'�$
#" %()/5) ��((/ %�$ /��!�! ��(( 9)/ !�*�$5�+�! '3 �#&+*
�+. *6� /%#*/ 9�*6 ) 5).+�"��$ (�+/: 6� )'/#(&*� +&5'�$
#" +)*&$)((3 #��&$$�+. %()/5) ��((/ �+ �)�6 #$.)+ 9)/
�)(�&()*�! "$#5 *6� *#*)( +&5'�$ #" ��((/:
� ����8���� ��� ����� �� �+ �*$# �������
��� ����
�#+� 5)$$#9� )4�(()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!� ��((/
#'*)�+�! "$#5 �<C��N1- #$ 5!4 5���� 9�$� �&(*&$�! �+
�?�� 1>;- 5�!�&5 /&%%(�5�+*�! 9�*6 1-P 2��� 05�
�.(&*)5�+� )+! <� 1-�< � �5�$�)%*#�*6)+#( �+ )
0;9�(( *�//&� �&(*&$� %()*� J�#$+�+.� �M� ���K )* ) �#+
��+*$)*�#+ #" 0� 1-> ��((/N5�: �#+� 5)$$#9 ��(( /&/%�+
/�#+/ 9�$� ��+*$�"&.�! *6$#&.6 ) 6�.6 !�+/�*3 2��#((�?)I&�
/#(&*�#+ J�5�$/6)5 ?6)$5)��) ��#*��6: �+�:� ?�/�)*)9)3�
��� ���K *# #'*)�+ 5#+#+&�(�)$ ��(( /&/%�+/�#+/: � ��((/
9�$� �+$��6�! '3 %)++�+. 9�*6 1--�.N5� #" %&$�"��!
6)5/*�$ )+*�5#&/� )+*���� �(#+� �<C<DC J�#&*6�$+
��#*��6:K: 6�/ %$#��!&$� 9)/ �)$$��! #&* *9��� )+! 3��(!�!
5#$� *6)+ =-P �00- %#/�*� � ��((/� )/ �#+"�$5�! '3
�55&+#�3*#�6�5�/*$3 )+! "(#9 �3*#5�*$3: 2#$ �+!&�*�#+
#" �� ���� )+*�'#!3 %$#!&�*�#+� 1-�.N5� #" (3%#%#(3
/)��6)$�!� J�?�K "$#5 6�8����8�� ��� /�$#*3%� -<<@�<
9)/ )!!�! J��.5)K: �"*�$ �+�&')*�#+ "#$ < !)3/ )* ,C ���+ ) 6&5�!�"��! <P ��0 �+�&')*#$� �&(*&$� /&%�$+)*)+*/
9�$� 6)$ �/*�! )+! /*#$�! )* �0- �� &+*�( &/�:
�������� � �������+������� ��� ���� ��� �������
�� � ���� ���������
���$#%()*�/ J�&4(#+ �0D ���� ���� 2$)+��K 9�$�
�#)*�! 9�*6 < �.N5� #" )+*��.�� )+*��.� #$ )+*��.�
)+*�'#!��/ !�(&*�! �+ �#)*�+. '&""�$ J-:-< � Q0�?�;K "#$
1> 6 )* ; ��: �!!�*�#+)( ����� %()*�/ 9�$� �#)*�! 9�*6
1-5.N5� #" $)''�* 5&/�(� 53#/�+� 53�(�+ ')/�� %$#*��+
J��?K #$ *3%� ��� 6�/*#+� "$#5 �)(" *635&/ J��.5)K
"#$ �� ���� )+*�.�+/%���"�� )+*�'#!3 %$#!&�*�#+: �#+
/%���"�� '�+!�+. /�*�/ 9�$� /)*&$)*�! 9�*6 ?�� �#+*)�+
�+. 1P .�()*�+ "#$ 1 6 )+! 9)/6�! /&'/�I&�+*(3 9�*6
?�� �#+*)�+�+. -:-<P 9��+0- J?��K:
��$�)( !�(&*�#+/ #" �&(*&$� /&%�$+)*)+* 9�$� �+�&')*�! )*
,C �� "#$ D-5�+ 9�*6 *6� �#$$�/%#+!�+. /%���"�� )+*�.�+
�#)*�! �+ D>9�(( 5��$#%()*�/: �55&+#.(#'&(�+ J�.K '�+!
�+. 9)/ !�*�$5�+�! "#((#9�+. �+�&')*�#+ 9�*6 .#)* )+*�
5#&/� �.�� �.� #$ �.� %�$#4�!)/��#+G&.)*� J�#&*6�$+
��#*��6:K: �+A35� )�*� �*3 9)/ *6�+ $� �)(�! 9�*6
�%6�+3(�+�!�)5�+� J��.5)K �+ *6� %$�/�+�� #" �0�0
)+! *6� $�)�*�#+ /*#%%�! 9�*6 ,� �0��;: �'/#$')+�� )*
;D0 +5 9)/ 5�)/&$�! &/�+. )+ �55&+#$�)!�$ J�+*6#/
0-1-� �&/*$�)K: �+*�'#!3 �#+��+*$)*�#+/ 9�$� �)(�&()*�!
'3 &/�+. *6� (�+�)$ $)+.�/ #" *6� !�(&*�#+ )+! /*)+!)$!
�&$ �/ .�+�$)*�! 9�*6 %&$�"��! /%���"�� 5#&/� 5#+#�(#
+)( �.�� �.� #$ �.� )+*�'#!3 J�#&*6�$+ ��#*��6:K:
5���8���� ��� ����� �� �+ �*$# ���0��� ��� ����
��� 9 �����������
9# 5�((�#+ ��((/N5�� #'*)�+�! "$#5 5!4 #$ �#+*$#( )4�(
()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!�/ 9�$� /��!�! �+ 0;9�((
*�//&� �&(*&$� %()*�/ J�#$+�+.� �M� ���K �+ *6� %$�/�+��
#" <�.N5� �#+�)+) )(�+ � J��.5)K )+! �+�&')*�! )*
,C �� �+ ) <P ��0 )*5#/%6�$�: �&(*&$� /&%�$+)*)+*/
9�$� �#((��*�! )"*�$ 0; #$ ;= 6 "#$ �3*#8�+� I&)+*�"��)*�#+
'3 ����� J?6)$5�+.�+� �)+ ��.#� ��K: ���$#*�*$�
%()*�/ J�&4(#+ �0D ���� ���� 2$)+��K 9�$� �#)*�!
# �$+�.6* )* ; �� 9�*6 0 �.N9�(( #" %&$�"��! �)%*&$�+.
5�' *# 5#&/� �2��� ��;� ��> #$ ��1- J?6)$5�+.�+K
�+ 1--5� �)$'#+)*� '&""�$� %�D:<: ?()*�/ 9�$� 9)/6�!
"� � *�5�/ 9�*6 ?��9��+: �#+/%���"�� '�+!�+. /�*�/
9�$� /)*&$)*�! 9�*6 1-P 2�� �+ ?�� "#$ 1 6 )+! 9)/6�!
9�*6 ?��9��+: 6�$�)"*�$ /&%�$+)*)+*/ )+! �#$$�/
%#+!�+. �3*#8�+� /*)+!)$! !�(&*�! �+ ?��N2�� 9�$�
)!!�!: ?()*�/ 9�$� �+�&')*�! # �$+�.6* )* ; ��� /&'
/�I&�+*(3 9)/6�! "#&$ *�5�/ 9�*6 ?��9��+ )+!
�+�&')*�! )* $##5 *�5%�$)*&$� "#$ ;-5�+ 9�*6 *6�
�#$$�/%#+!�+. '�#*�+3()*�! )+*��2��� ��;� ��> #$
��1- )+*�'#!3 J?6)$5�+.�+K: �"*�$ 9)/6�+. *6� %()*�/�
) �!�+�#+G&.)*�! 6#$/�$)!�/6 %�$#4�!)/� 9)/ )!!�!
)+! �+�&')*�! "#$ ,-5�+: �+A35� )�*� �*3 9)/ $� �)(�!
9�*6 ,�,��<�<�*�*$)5�*63('�+A�!�+� )+! 1:05� �0�0
�+ ��*$)*� '&""�$ J%�<:-K: 6� $�)�*�#+ 9)/ /*#%%�! '3
)!!�+. 1 � ��(: �'/#$')+�� 9)/ 5�)/&$�! )* ;<- +5
&/�+. *6� �+*6#/ 0-1- ����� !� ��� J�&/*$�)K )+!
�3*#8�+� �#+��+*$)*�#+/ 9�$� I&)+*�"��! &/�+. ) !#&'(�
��.6*%#�+* /*)+!)$! �&$ �:
*��������� ������
���$#/#"* �4��( DC /#"*9)$� J���$#/#"*� ��)**(�� ��K�
9)/ &/�! *# �)(�&()*� 5�)+ )+! /*)+!)$! !� �)*�#+/:
�+%)�$�! �*&!�+*O/ �*�/* 9)/ )%%(��! *# )//�// *6�
(� �( #" /*)*�/*��)( /�.+�"��)+��:
#4 5�����+������ �� ��4
10; � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0
�������
!�������� ��� ���8������ ������ �
�����8�� � ���
&$�+. *6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/ J)* ;9��8/K /8�(�*)(
5&/�(�/ #" !3/*$#%6�� 5��� J)'(� 1K 9�$� &+!�$.#�+.
) /�5�()$ �4*�+* #" +��$#/�/ )+! $�.�+�$)*�#+ 9�*6 %$#5
�+�+* �+"()55)*�#+ J2�.: 1)�!K: 6�$�)"*�$ J)* 109��8/K
) 5)$8�! $�!&�*�#+ #" $�.�+�$)*�+. ')/#%6�(�� "�'$�/ )+!
) %$� )(�+�� #" $�.�+�$)*�! 63%�$*$#%6��! 53#"�'$�/
9�*6 ��+*$)((3 (#�)*�! +&�(�� 9�$� #'/�$ �! J2�.: 1'��K:
�+ �#+*$)/*� #(!�$ J0;9��8K 5!4 5��� /6#9�! �4*�+/� �
����� � 2$�I&�+�3 #" !�/*�+�* %)*6#(#.��)( (�/�#+/ �+ 5!4
/8�(�*)( 5&/�(�: ��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+ � �
J/*)+!)$! !� �)*�#+K �+ %�$��+*).�N&+�* )$�) #" �+"()55)*#$3�+"�(*$)*�� $�.�+�$)*�+. 53#"�'$� )+! "�'$#/�/: � 0-4 #'G��*� �
9)/ &/�! "#$ *6� )+)(3/�/ #" *6$�� �+*�$� �$#// /��*�#+ #"
:����� ����8�� /8�(�*)( 5&/�(� "$#5 *6$�� )+�5)(/ %�$ .$#&% )*).�/ ;9��8/� 109��8/ )+! 0;9��8/:
�.�
J9��8/K
�+"()55)*#$3
�+"�(*$)*�
��.�+�$)*�+.
53#"�'$� 2�'$#/�/
; 1D:-� D:0 11:C� 0:= -:0� -:110 <:C� -:> -:,� -:, 1:1� -:C0; <:,� ,:0 -:,� -:> 1-:,�1:D
a b
c d
e f
!����� � �)�5)*#43(�+�#/�+ /*)�+�+. #" ) < �5 9)4�5'�!!�! /��*�#+ #" :����� ����8�� 5&/�(� "$).5�+*/ #" ; 9��8 J)�!K� 10 9��8 J'��K
)+! 0; 9��8 J�� "K !3/*$#%6�� 5���: J)E!K �4*�+/� � 53#+��$#/�/ 9�*6 63)(�+� "�'$�/ J()$.� )$$#9K )+! �+"()55)*#$3 ��(( �+"�(*$)*�#+ J/*)$K 9�*6
5)+3 %#(35#$%6#+&�(�)$ J)$$#9K )+! 5#+#+&�(�)$ ��((/ J)$$#9 6�)!K )* *6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/F J'E�K +&5�$#&/ 53#"�'$�/ 9�*6 ��+*$)(+&�(�� J)$$#9 6�)!K� /�)$�� �+"()55)*#$3 "#�&/ J/*)$K )+! �#++��*� � *�//&� J)/*�$�/8KF J�E"K 63%�$*$#%6��! J)$$#9 6�)!K )+! +��$#*�� J)$$#9K
53#"�'$�/ )+! # �$!�%#/�*�#+ #" �#++��*� � *�//&� J)/*�$�/8K )* �)$(3 "�'$#/�/ %�$�#!: �$�.�+)( 5).+�"��)*�#+�1-- J)� 'K��0-- J�K��1--- J!� �� "K:
5���8���� ��������� ��� ��������� � �������
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0 10<
"�'$#/�/ 9�*6 !�+/� !�%#/�*�#+ #" �#++��*� � *�//&��
+&5�$#&/ !�.�+�$)*�+.N+��$#*�� "�'$�/ )+! 5�+�5)(
�+"()55)*�#+ J2�.: 1��"K:
�55&+#6�/*#�6�5��)( )+)(3/�/ /6#9�! *6)* !&$�+.
*6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/ � ;� J<1-� ;- ��((/N55,K�
� =� J0=D� 0- ��((/N55,K )+! /#5� � (35%6#�3*�/
J<0� = ��((/N55,K 9�$� %$�/�+* �+ *6� /8�(�*)( 5&/�(�
#" !3/*$#%6�� 5���: �+ �#+*$)/*� $)$� )+! � (35%6#�3*�/
��((/ 9�$� "#&+! �+ *6� /8�(�*)( 5&/�(� #" !3/*$#%6��
5��� )* 10 )+! 0;9��8/:
3�� � ����� � � ����8���� �� �����8�� ����8
��� ��� ��� ����& � ���� 0������ � ���
�����������
&$�+. *6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/� $�.�#+)( (35%6 +#!�/
#" ;9��8#(! 5!4 5��� /6#9�! ) 5)$8�! $�!&�*�#+ #"
��((/ �+ �#5%)$�/#+ *# �#+*$#( �<C��N1-� )(*6#&.6
) 5#$� /�.+�"��)+* J�� -:---1K �""��* 9)/ #'/�$ �! "#$
� (35%6#�3*�/ J2�.: 0K:
��.�+�$)*�#+ #" 53#+��$#/�/ J)* 109��8/K 9)/
)��#5%)+��! '3 $�!&�*�#+ #" � ;� )+! � =� ��((/
�+ *6� /8�(�*)( 5&/�(� #" 5!4 5��� J!)*) +#* /6#9+K:
�#9� �$� �+()$.�5�+* #" $�.�#+)( (35%6 +#!�/ 9�*6
/�.+�"��)+* J�� -:---1K �+�$�)/� #" � (35%6#�3*�/
9)/ �#+/�/*�+*(3 #'/�$ �! �#+�#5�*)+* *# $�.�+�$)*�#+
#" 53#"�'$�/ )+! 5�*�.)*�#+ #" 5&/�&()$ �+"()55)*�#+:
6�/ "�)*&$� 9)/ 5#$� %$#5�+�+* �+ 0;9��8 5!4 5���:
� 5�(! �+�$�)/� �+ *6� )'/#(&*� +&5'�$/ #" � ;� )+!
� =� ��((/ 9�$� )(/# #'/�$ �! �+ ) 109��8 5!4
5#&/�� )(*6#&.6 ) /�.+�"��)+* )&.5�+*)*�#+ 9)/ �#+
/�/*�+*(3 #'/�$ �! �+ 0;9��8#(! 5���: 2&$*6�$ )+)(3/�/
*# � )(&)*� *6� %�$��+*).� #" � <� ��((/ 9�*6�+
*6� �00-��.�� %#%&()*�#+ /6#9�! *6)* *6� 5)G#$�*3
'�(#+.�! *# ) �#+ �+*�#+)( *3%� �0 (35%6#�3*� /&'/�*
J2�.: ,K: �+ )!!�*�#+� ) /�.+�"��)+* �+�$�)/� #" � ;;� )+!
� >0�� /&'/�*/ 9�*6�+ � ;� )+! � =� (35%6#�3*�/
)+! )(/# � 0<�� ;� ��((/ 9�$� #'/�$ �! �+ 0;9��8
3
2
1
010
8
4
6
2
010
8
4
6
2
0TCR CD4+ + TCR CD8+ + B220+
4 wk
12 wk
24 wk
∗
∗∗∗
∗∗
∗∗
∗∗∗∗
Cel
l num
ber
(×10
)6
!�����"� 2(#9 �3*#5�*$3 )+)(3/�/ #" 5#+#+&�(�)$ ��((/ %$�/
�+* �+ )4�(()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!�/ #" 5��� )* ;9��8/�
109��8/ )+! 0;9��8/: �+� $�%$�/�+*)*� � �4%�$�5�+* �/
%$�/�+*�! "#$ �)�6 ).�: ��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+�� #" "#&$ )+�5)(/: 6�/ �4%�$�5�+* 9)/ %�$"#$5�! "#&$ *�5�/:� �<C��N 1-� 5!4: ���-:-< )+! ���� -:---1:
103
102
101
100
103
102
101
100
104
103102101100 104 103102101100 104
IgM
B220
a
20
15
10
5
0CD5+
C57BL/10 mdx
35.63% 49.55%
Cel
l num
ber
(%)
∗
b
!������� 2(#9 �3*#5�*$3 )+)(3/�/ 9�*6 )+*��00-N�?�� )+*�
�.�N2�� )+! )+*�� < '�#*�+N/*$�%*#) �!�+I&)+*&5 $�! #"
/�+.(� ��(( /&/%�+/�#+/ "$#5 )4�(()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!�/#" �#+*$#( )+! 5!4 5��� )* 0;9��8/: J)K �4%$�//�#+ #" �00-
)+! �.�F J'K %�$��+*).� #" � <� ��((/ �+ *6� �00-��.��
%#%&()*�#+: �+� $�%$�/�+*)*� � �4%�$�5�+* �/ %$�/�+*�!:
��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+�� #" "#&$ )+�5)(/: ��5�()$$�/&(*/ 9�$� /��+ �+ "#&$ )!!�*�#+)( �4%�$�5�+*/: � �<C��N 1-�
5!4: ��� -:-<:
#4 5�����+������ �� ��4
10> � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0
5!4 5��� J2�./ ;):'K: �#+�*6�(�// �4%$�//�#+ #"
� 0<� ��((/ 9�*6�+ *6� � =� %#%&()*�#+ 9)/ �$3
(#9 �+ (35%6 +#!�/ "$#5 '#*6 /*$)�+/ #" +#+!3/*$#%6��
�<C��N1- )+! !3/*$#%6�� 5��� J!)*) +#* /6#9+K:
�55&+#6�/*#�6�5��)( )+)(3/�/ #" *6� :����� ����8��
5&/�(� 9�*6 )+*�?��� )+! )+*��00- 5#+#�(#+)( )+*�
'#!��/ �#+"�$5�! *6)* )"*�$ �4*�+/� � 53#+��$#/�/�
$�!&�*�#+ #" 5&/�&()$ �+"()55)*�#+ �#$$�()*�! 9�*6 )��&
5&()*�#+ #" � ��((/ J�00-�K �+ *6� $�.�#+)( (35%6 +#!�/
#" 5!4 5���: �+!��!� 0;9��8#(! 5!4 5��� /6#9�!
�+()$.�5�+* #" �#$*��)( )$�)/ J2�.: <)�'K: �#$�# �$� �*
9)/ %#//�'(� *# #'/�$ � � ��(( %$#(�"�$)*�#+ )+! "#$5)*�#+
#" .�$5�+)( ��+*$�/ �+ *6� "#((��(�/ #" 5!4 5��� J2�.: <��!K:
�#+� 5)$$#9 #" 5!4 !3/*$#%6�� 5��� J2�.: >K /6#9�!
) 5)$8�! $�!&�*�#+ #" �00-(# ��((/ !&$�+. *6� 6��.6*
#" 53#+��$#/�/ J)* ;9��8/K: �+ �#+*$)/*� ) �#+/�/*�+*
�+�$�)/� #" �00-6� ��(( +&5'�$/ 9)/ #'/�$ �! �+
#(!�$ )+�5)(/ J0;9��8/K� )(*6#&.6 +# !�""�$�+�� 9)/
#'/�$ �! '�*9��+ �#+*$#( )+! 5!4 5��� )* 109��8/:
� /(�.6* !��$�)/� �+ *6� )'/#(&*� +&5'�$ #" )+! �
��((/ 9)/ /��+ �+ *6� /%(��+ #" 5!4 5���� '&* #+(3 )* *6�
6��.6* #" 53#+��$#/�/ J)* ;9��8/K: M�* *6�$� 9)/ +#
!�""�$�+�� �+ $�()*� � +&5'�$/ #" )+! � ��((/ '�*9��+
�#+*$#( �<C��N1- )+! 5!4 !3/*$#%6�� 5��� )* )(( ).�/
/*&!��! J!)*) +#* /6#9+K:
��� ���� ���+�������� ���� �� ����8�� ����
�+)/5&�6 )/ � (35%6#�3*�/ 9�$� �+�$�)/�! �+ %�$�%6
�$)( (35%6 +#!�/ )+! '#+� 5)$$#9 #" 5!4 5��� !&$�+.
)5�(�#$)*�#+ #" 53#+��$#/�/ J)* 109��8/K� �* )%%�)$�!
$�(� )+* *# )//�// 96�*6�$ *6#/� ��((/ !�""�$�+*�)*�!
�+*# %()/5) ��((/: �+!��! ) �#+/�/*�+* �+�$�)/� #"
�./��$�*�+. ��((/ �+ $�.�#+)( (35%6#�! #$.)+/ !&$�+.
5&/�(� $�.�+�$)*�#+ 9)/ "#&+! #2�.: CK:
�+ �7 ��� �4%�$�5�+*/� �.�/��$�*�+. ��((/ 9�$�
/�.+�"��)+*(3 �+�$�)/�!� �/%���)((3 �+ !$)�+�+. (35%6
+#!�/ #" 5!4 5��� )* 109��8/ J�� -:-<� 2�.: C)K
)+! 0;9��8/ J�� -:---1� 2�.: C!K: ?$�/�+�� #" �.�
/��$�*�+. ��((/ J�� -:-1K 9)/ �#+/�/*�+*(3 #'/�$ �! �+
(35%6 +#!�/ #" 5!4 5��� )* 0;9��8/: �� )(/# "#&+!
)+ �+�$�5�+* #" �.�/��$�*�+. ��((/ J�� -:-1K �+ *6� /%(��+
#" 5!4 5��� )* 109��8/ J2�.: C'K )+! #" �.�/��$�*�+.
��((/ J�� -:-1� 2�.: C"K �+ *6� '#+� 5)$$#9 #" 0;9��8
5!4 5��� !&$�+. *6� %�$�#! #" �+�$�)/�! �#++��*� �
*�//&� !�%#/�*�#+ �+ *6� /8�(�*)( 5&/�(�:
���)&/� #" )*$#%63� �* 9)/ +#* %#//�'(� *# !�*��* '3
����� /%#* )//)3 *6� %$�/�+�� #" �./��$�*�+. ��((/ �+
$�.�#+)( (35%6 +#!�/ !&$�+. *6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/:
�#+�*6�(�//� +# !�""�$�+�� 9)/ #'/�$ �! �#+��$+�+.
*6� %$�/�+�� #" �.%$#!&��+. ��((/ �+ *6� '#+� 5)$$#9
)+! /%(��+ #" 5!4 5��� )* *6�/ ).�:
�+ �*$# ��� ���� ��� ��� ����
� (35%6#�3*�/ "$#5 '$)�6�)( )+! )4�(()$3 (35%6 +#!�/ #"
10 )+! 0;9��8 5!4 5��� 9�$� /*�5&()*�! �� ���� 9�*6
1- �. �?�� ) %#(3�(#+)( ���(( )�*� )*#$� *# )/��$*)�+
*6� (� �(/ #" �. %$#!&�*�#+ )+! *6� %)**�$+ #" )+*�.�+��
$��#.+�*�#+:�#*6 �#+*$#( )+!5!45���%$#!&��!�#5%)$
)'(� (� �(/ #" �. �+ *6� '#+� 5)$$#9 /&%�$+)*)+*/ J!)*)
+#* /6#9+K: �)*6�$ /&$%$�/�+.(3� � (35%6#�3*�/ "$#5
(35%6 +#!�/ #" 109��8 )+! 0;9��8 5!4 5��� %$#!&��!
(#9�$ (� �(/ #" �.� )+! �.� J2�.: =)K: �35%6#�3*�/ "$#5
!3/*$#%6�� 5��� )(/# %$#!&��! �.� )+*�'#!3 9�*6
(#9�$ $�)�*� �*3 J2�.: ='K "#$ )+*�.�+/ J6�/*#+�� 53#/�+K
8+#9+ *# '� $�(�)/�! "$#5 *6� (�/�#+�! *�//&� $)*6�$
*6)+ "#$ &+$�()*�! )+*�.�+/ J��?K:
�+ �*$# ���0��� ��� ����
�35%6#�3*�/ !�$� �! "$#5 !$)�+�+. (35%6 +#!�/ #"
!3/*$#%6�� )+! ).�5)*�6�! �#+*$#( 5��� 9�$� /*�5&
()*�! �� ���� 9�*6 �#+�)+) )(�+ � J�#+ �K: �&(*&$�
3
2
1
0CD25+ CD44+ CD62L+
CD4+
3
2
1
0 CD44+ CD62L+
CD8+
aA
bsol
ute
cell
num
bers
(×
10)5
b
∗∗
∗∗ ∗
∗∗
!����� $� �4%$�//�#+ #" � 0<� � ;; )+! � >0� 9�*6�+ � ;�
J%)+�( )K )+! � =� J%)+�( 'K ��((/ "$#5 0;9��8 5!4 (35%6
+#!�/: ��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+�� #" "#&$ )+�5)(/:�+� $�%$�/�+*)*� � �4%�$�5�+* �/ %$�/�+*�!: ��5�()$ $�/&(*/
9�$� /��+ �+ *6$�� )!!�*�#+)( �4%�$�5�+*/: � �<C��N 1-�
5!4: ���-:-<� ����-:---1:
5���8���� ��������� ��� ��������� � �������
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0 10C
/&%�$+)*)+*/ 9�$� �#((��*�! 0; #$ ;=6 )"*�$ )+! �4)5�+�!
"#$ �2��� ��;� ��> )+! ��1- �3*#8�+� %$#!&�*�#+ '3
�����: �/ /6#9+ �+ 2�.: D� !3/*$#%6�� (35%6#�3*�/ "$#5
$�.�#+)( (35%6 +#!�/ /*�5&()*�! 9�*6 �#+ � %$#!&��!
5#$� �2�� *6)+ *6#/� .�+�$)*�! "$#5 �#+*$#( 5��� )*
;9��8/ J�� -:--<K� 109��8/ J�� -:-<K )+! 0;9��8/
J�� -:--<K: ��5�()$ $�/&(*/ 9�$� #'*)�+�! 9�*6 /&%�$
+)*)+*/ 6)$ �/*�! "$#5 0; )+! ;= 6 ��(( �&(*&$�/: �#+*$#(
�&(*&$�/ 9�*6 ��((/ .$#9�+. �+ )'/�+�� #" �#+ � %$#
!&��! &+!�*��*)'(� (� �(/ #" �2��: ��8�9�/�� ��(( �&(*&$�/&%�$+)*)+*/ 6)$ �/*�! )"*�$ 0; )+! ;= 6 %$#!&��!
&+!�*��*)'(� (� �(/ #" ��;� ��> )+! ��1- J!)*) +#*
/6#9+K:
%��������
�+ *6� %$�/�+* %)%�$ 9� $�%#$* *6)* !&$�+. *6� 6��.6* #"
53#+��$#/�/� 96�+ /8�(�*)( 5&/�(�/ #" 5!4 5��� /6#9
�4*�+/� � �+"()55)*#$3 $�)�*�#+ )+! !�.�+�$)*�#+� *6�$�
�/ ) .�+�$)( )*$#%63 #" (35%6#�! #$.)+/: 6�/ �#+*$)/*/
9�*6 )��&5&()*�#+ #" �#+ �+*�#+)( *3%�0 � (35%6#
�3*�/ )+! 5)$8�! �55&+#.(#'&(�+ %$#!&�*�#+ �+ '#*6
$�.�#+)( (35%6 +#!�/ )+! '#+� 5)$$#9 !&$�+. �(�+��)(
)5�(�#$)*�#+ )+! $�.�+�$)*�#+ #" *6� 5&/�&()$ (�/�#+:
�� "&$*6�$ #'/�$ �! *6)* $�%()��5�+* #" 53#"�'$�/ '3
�#++��*� � *�//&� �+ *6� (�5' 5&/�(�/ #" 5!4 5#&/�
#��&$$�! /� �$)( 9��8/ �)$(��$ *6)+ %$� �#&/(3 $�%#$*�!
J?)/*#$�* L ��'�((� 1DD<K: �+*�$�/*�+.(3� �+�$�)/�! !�%#/
�*�#+ #" �#++��*� � *�//&� �+ 0;9��8 5!4 !3/*$#%6��
5��� 9)/ )(/# )��#5%)+��! '3 %$#5�+�+* �+()$.�5�+*
#" !$)�+�+. (35%6 +#!�/ )+! �+�$�)/�! )��&5&()*�#+
#" )+! � ��((/:
��((/ )$� $�%#$*�! *# �#+*$�'&*� /�.+�"��)+*(3 *# )%#%
*#/�/ #" /8�(�*)( 5&/�(� )+! %$#.$�//� � "�'$�+#.�+�/�/
� �!�+* !&$�+. $�%�)*�! �3�(�/ #" 5!4 5&/�&()$ *�//&�
!�.�+�$)*�#+ J�#$$�/#+ �� ��: 0---F �%�+��$ �� ��: 0--1K:
�5%(��)*�#+ "#$ *6� %)$*���%)*�#+ #" ��((/ �+ *6� %$#��//
#" "�'$#/�/ 9)/ $���+*(3 !�5#+/*$)*�! �+ �4%�$�5�+*/
�)$$��! #&* �+ 5!4 5��� 9�*6 *6� +&N+& ')�8.$#&+!:
a b
c d
c
PF
c
GC
!�����&� ?6#*#5��$#.$)%6/ /6#9�+. �6)$)�*�$�/*�� /*)�+�+. #" �00- J$�!K )+! ?��� J'()�8K �4%$�//�#+ �+ 0;9��8 5!4 (35%6 +#!�
J'K �#5%)$�! 9�*6 �#+*$#( �<C��N1- J)K: �#*� *6� %$�/�+�� #" .�$5�+)( ��+*$� "#$5)*�#+ �+ 5!4 (35%6 +#!� J�K: �00-� ?����
(35%6#�3*�/ �+ *6� .�$5�+)( ��+*$� )$� �+!��)*�! '3 )$$#9 6�)! J!K: �$�.�+)( 5).+�"��)*�#+�0-- J)� '� �K )+! �1--- J!K:
�� �#$*��)(F ?2� %)$)"#((��&()$F ��� .�$5�+)( ��+*$�:
#4 5�����+������ �� ��4
10= � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0
�+ *6�/ 5#!�(� *$)+/%()+*)*�#+ #" +#$5)( *635�� *�//&� �+*#
5!4+&N+& 5��� $�%(�+�/6�! !�%#/�*�#+ #" )(*�$�! �#(
().�+ �+ *6� 5&/�&()$ *�//&� �#5%)$)'(� *# 9�(!*3%�
5!4 !3/*$#%6�� 5��� J�#$$�/#+ �� ��: 0---K: �#9� �$�
*6� "$�I&�+�3 #" )�*� )*�! ��((/ 9)/ +#* �(� )*�! �+
5!4 !$)�+�+. (35%6 +#!�/ !&$�+. *6� 6��.6* #" 53#
+��$#/�/� )/ $���+*(3 $�%#$*�! J�%�+��$ �� ��: 0--1K:
6� 6�.6 �4%$�//�#+ #" � >0� �+ 5!4 (35%6 +#!�/ )*
0;9��8/ /&..�/*/ *6� �4�/*�+�� #" /*$#+. $��$&�*5�+*
"$#5 *6� ��$�&()*�+. ��(( %##( !&$�+. )5�(�#$)*�#+ #"
53#+��$#/�/ �+ 5!4 5���: 6�/ +#*�#+ �/ /&%%#$*�! '3
) %$� �#&/ #'/�$ )*�#+ /6#9�+. �+�$�)/�! �> �+*�.$�+
)+! ��� �4%$�//�#+ �+ *6� %#/*�)%�(()$3 6�.6 �+!#
*6�(�)( �+&(�/ J���/K #" 5!4 !$)�+�+. (35%6 +#!�/
J�).$#*)�)+!�!# �� ��: 1DDDK: 2&$*6�$5#$�� 9� )(/#
#'/�$ �! ) /�.+�"��)+* �+�$�)/� #" � 0<� )+! � ;;�
��((/ �+ $�.�#+)( (35%6 +#!�/ #" 5!4 5��� )* 0;9��8/�
!&$�+. 5�*�.)*�#+ #" �+"()55)*�#+ )+! �)$(3 "�'$#/�/ #"
/8�(�*)( 5&/�(�: �+*�$�/*�+.(3� *6�$� )$� $�%#$*/ �+!��)*�+.
*6)* $�.&()*#$3 ��((/ �4%$�// *6� %6�+#*3%� � ;�� 0<�
J�#+�)$#(# L �� �+./ 0---K� *6&/ /&..�/*�+. *6)* $�.&
()*#$3 ��((/ 5�.6* '� %()3�+. ) �$�*��)( $#(� �+ *6� �#+*$#(
#" �+"()55)*�#+ )(/# �+ *6� 5!4 5&/�&()$ !3/*$#%63:
�+ *6�/ /�+/�� *6� �55&+� $�.&()*#$3 )�*� �*3 #" *6�
� ;�� 0<� %#%&()*�#+ �/ %)$*(3 5�!�)*�! *6$#&.6
�2� /��$�*�#+ J�)8).&�6� 0---K� ) �3*#8�+� �+ #( �!
�+ !� �(#%5�+* #" "�'$#/�/ �+ 5&/�&()$ !3/*$#%63
J��$+)/�#+� �� ��: 1DD<K: �4%�$�5�+*/ )$� +#9 &+!�$
9)3 �+ #$!�$ *# �/*)'(�/6 �� ���� *6� %$���/� "&+�*�#+ #"
/&�6 %&*)*� � �55&+#$�.&()*#$3 ��((/ �+ *6� �#+*$#( #"
�+"()55)*#$3 (�/�#+ �+ 5!4 !3/*$#%6�� 5���:
�!4 (35%6 +#!� ��((/ %$#!&��! ()$.� )5#&+*/ #" �2��'&* +#* ��;� ��> #$ ��1- )"*�$ �� ���� 5�*#.�+ /*�5&()
*�#+ 9�*6 �#+�)+) )(�+ �� �/%���)((3 !&$�+. $�.�+�$)*�#+
#" 5&/�&()$ !3/*$#%63: �� �$)( .$#9*6 ")�*#$/ J�:.: �2��K)$� $�%#$*�! *# %)$*���%)*� )/ $�.&()*#$/ #" �#++��*� �
*�//&� !�%#/�*�#+ %)$*(3 '3 �+"(&�+��+. *6� %$#!&�*�#+ #"
��� �#5%#+�+*/ J��((�)& 1DD>F �).$#*)�)+!�!# �� ��:
1DD>K: ?$#(�"�$)*�#+ )+! !�""�$�+*�)*�#+ #" 53#.�+�� ��((/
)$� � �+*/ !�%�+!�+* #+ *6� �4%$�//�#+ #" ��$*)�+
.�+�/� 96��6 )$� .$�)*(3 �+"(&�+��! '3 ��(( �+*�$)�*�#+/
9�*6 *6� ��� J2#/*�$ �� ��: 1D=CF ��+8# L �#�**�+.�$
1D=CK: ��5'�$/ #" *6� �+*�$"�$#+�+!&��'(� %$#*��+ %0--
")5�(3 6) � '��+ $�%#$*�! *# '� �4%$�//�! !&$�+.
53#'()/* !�""�$�+*�)*�#+ J��& �� ��: 0---K:
�2�� �/ ) �3*#8�+� *6)* )(/# &%$�.&()*�/ *6�
�4%$�//�#+ #" )!6�/�#+ 5#(��&(�/� 5)G#$ 6�/*#�#5%)*�'�(
�*3 �#5%(�4 .�+� %$#!&�*/ )+! �6�5#8�+�/� 96��6 �)+
&(*�5)*�(3 /*�5&()*� )+ �+"()55)*#$3 $�)�*�#+ #��&$$�+.
�+ *6�5&/�&()$ *�//&� J���6)�(�/ �� ��: 1DD,F ��3�/��3+)
L Q$#(��8 0---K: ?)$)!#4��)((3� *6�$� )$� $�%#$*/ /6#9
�+. *6)* �2�� 5)3 )(/# �4�$* ) %$#*��*� � �""��* �+
5#!�(/ 96�$� 5)�$#%6).�/ )$� �#+/�!�$�! )/ 5)G#$
�""��*#$ ��((/ �+ *�//&� !)5).� J�)**63/ �� ��: 1DDDF
$)+ �� ��: 0---F �)**63/ �� ��: 0--1K: �+*�$�/*�+.(3�
6�%)*�� .$)+&(#5) #" *�8���� ������+"��*�!
5��� 9�*6 !�"����+* �+*�$"�$#+.)55) $���%*#$ J�2����N�K 6)! )+ �+6)+��! "�'$#*�� $�)�*�#+ )+! )+ �+�$�)/�!
$)*�# #" # �$ � ��((/ J�(� ��$) �� ��: 0---K: ��+�� �+ 5!4
�+"()55)*�#+� �)�1� ��((/ )$� 5#$� )'&+!)+* !&$�+.
*6� 6��.6* #" 53#+��$#/�/� �* �/ %#//�'(� *6)* �2�� �/
%()3�+. ) %$#*��*� � $#(� �+ *6� �#+*$#( #" /8�(�*)( 5&/�(�
�+"()55)*�#+ )+! "�'$#/�/ �+ *6� 5!4 5���:
�+ $�.)$! *# � (35%6#�3*� !� �(#%5�+*� �2�� %)$*���
%)*�/ )/ ) !�$��* � ��((5)*&$�+. �3*#8�+�� !$� �+. +#$5)(
� ��(( *# )�*� � �. /��$�*�#+ J�6)+. �� ��: 1DDDK: �+ *6�/
25
20
15
10
5
0
25
20
15
10
5
0
25
20
15
10
5
0TCR+ B220lo
Cel
l num
ber
(×10
)6
B220hi
4 wk
12 wk
24 wk
∗
∗
!����� '� ��� )+! �00-� ��(( +&5'�$/ �+ *6� '#+� 5)$$#9 #"5��� )* ).�/ ;9��8/� 109��8/ )+! 0;9��8/: �+� $�%$�
/�+*)*� � �4%�$�5�+* �/ /6#9+: ��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/
5�)+�� #" "#&$ )+�5)(/: ��5�()$ $�/&(*/ 9�$� /��+ �+ *6$��)!!�*�#+)( �4%�$�5�+*/: � �<C��N 1-� 5!4: ���-:-<:
5���8���� ��������� ��� ��������� � �������
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0 10D
/�+/�� �7 ��� �4%�$�5�+*/ /6#9�! *6)* $�.�+�$)*�#+ #"
53#+��$#/�/ 9)/ )��#5%)+��! '3 �+�$�)/�! +&5'�$/ #"
�./��$�*�+. ��((/ �+ *6� $�.�#+)( (35%6 +#!�/ )+! '#+�
5)$$#9 #" 5!4 5��� )"*�$ 53#+��$#/�/: �+ 8��%�+. 9�*6
*6�/� "�+!�+./� 9� #'/�$ �! �+�$�)/�! � ��(( %$#(�"�$)*�#+
)+! "#$5)*�#+ #" .�$5�+)( ��+*$�/ �+ *6� "#((��(�/ #" 5!4
5��� )"*�$ *6� %�$�#! #" 53#+��$#/�/: 6� $�/&(*/ /6#9�+.
�+�$�)/�! +&5'�$/ #" �00-� � ��((/ )+! �.�/��$�*�+.
��((/ �+ *6� '#+� 5)$$#9 #" 0;9��8 5!4 5��� /&..�/*
Lymph nodes Spleen Bone marrow300
250
200
150
100
50
0
4
3
2
1
0
3
2
1
0
lgM lgG lgA
lgM lgG lgA
lgM lgG lgA lgM lgA300
250
200
150
100
50
0lgM lgG lgA lgM lgG lgA
a b c
d e f
Cel
l num
ber
( ×10
)3100
80
0
60
40
20
200
80
0
40
120
160
12 w
eeks
24 w
eeks
!����� (� �&5'�$/ #" �./��$�*�+. ��((/ �+ !$)�+�+.(35%6 +#!�/ J)� !K� /%(��+ J'� �K )+! '#+� 5)$$#9
J�� "K #" �#+*$#( )+! 5!4 5��� )* 109��8/ J)� '� �K
)+! 0;9��8/ J!� �� "K: �)�6 /35'#( $�%$�/�+*/ #+�
)+�5)(: � �.�� � �.� )+! � �.� "#$ 5!4 )+!�#$$�/%#+!�+. #%�+ /35'#(/ "#$ �#+*$#( 5���: �)$/
!�%��* 5�)+ )(&�/:
12
10
8
6
4
2
0IgM IgG IgA
∗∗∗
∗∗∗
a
500
400
300
200
100
0Myosin Histone MBP
Ig c
once
ntra
tion
(g/
ml)
µA
bsor
banc
e (4
92nm
)
b
∗∗
∗∗
!������� �� ���� �55&+#.(#'&(�+ /��$�*�#+ �+ *6� /&%�$+)*)+*/
#" (35%6#�3*�/ !�$� �! "$#5 )4�(()$3 )+! '$)�6�)( (35%6 +#!�/#" 109��8 5!4 5��� �&(*� )*�! �+ %$�/�+�� #" �?� J1-�.N5�K:
?)+�( J)K /6#9/ �.�� �.� )+! �.� /��$�*�#+ �+ �<C��N 1- #$
5!4 /&%�$+)*)+*/: ?)+�( J'K /6#9/ )+*�.�+ $�)�*� �*3 #"
(35%6#�3*� /&%�$+)*)+*/: �+�6&+!$�! �� #" %$#*��+ )+*�.�+/J1-�.N5�K 9�$� &/�! "#$ �#)*�+. 9�((/ #" 5��$#*�*$� %()*�/:
�&%�$+)*)+* $�)�*� �*3 9)/ )//�//�! 9�*6 )+*��.� )+*�'#!��/
'3 !�$��* �����: ��%$�/�+*)*� � �4%�$�5�+*/ )$� %$�/�+*�!:
��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+�� #" "� � )+�5)(/: ��5�()$$�/&(*/ 9�$� #'*)�+�! �+ *6$�� /�%)$)*� �4%�$�5�+*/:� �<C��N 1-� 5!4: ����-:--1� ����� -:---1:
3000
2500
2000
1500
10004 wk 12 wk 24 wk
IFN
-(p
g/m
l)γ
∗∗
∗∗∗
!�����)� �+�$�)/�! %$#!&�*�#+ #" �2�� '3 (35%6#�3*� %##(
"$#5 < 5!4 #$ �<C��N 1- 5��� )* ).�/ #" ;� 10 )+! 0;9��8/:
�35%6#�3*�/ 9�$� /*�5&()*�! #$ +#* 9�*6 �#+ � J<�.N5�K
"#$ 0; 6: ��/&(*/ )$� �4%$�//�! )/ 5�)+�� #" 9�((/:�+� $�%$�/�+*)*� � �4%�$�5�+* �/ /6#9+: ��5�()$ $�/&(*/
9�$� #'*)�+�! �+ *6$�� /�%)$)*� �4%�$�5�+*/: � �<C��N 1-�
5!4: ��� -:-<� ����-:--<:
#4 5�����+������ �� ��4
1,- � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0
*6)* )�*� )*�! � ��((/ )$� 5�.$)*�+. "$#5 *6� !$)�+�+. (35%6
+#!� *#9)$!/ *6� '#+� 5)$$#9 "#$ )+*�'#!3 /��$�*�#+:
�#+ �$/�(3� *6� %##$ $�/%#+/� #" �� ���� � (35%6#�3*�
/*�5&()*�#+ 5�.6* '� !&� *# 5)4�5)( �� ��� )�*� )*�#+ #"
*6�/� ��((/ *6�$�'3 (�5�*�+. "&$*6�$ �. %$#!&�*�#+: 6�/ /&.
.�/*�#+ �/ /&%%#$*�! '3 /�5�()$ �� ���� /*&!��/ 9�*6 ��$�
'$#/%�+)( "(&�! (35%6#�3*�/ "$#5 %)*��+*/ 9�*6 5&(*�%(�
/�(�$#/�/� )+ �+"()55)*#$3 !�53�(�+)*�+. !�/�)/� #" *6�
��+*$)( +�$ #&/ /3/*�5 9�*6 �55&+� $�)�*� �*3 "#$ 53�(�+
)+*�.�+/ J��+$�8//#+ �� ��: 1D=>K: �35%6#�3*�/ "$#5 5!4
5��� J109��8/ #+9)$!/K )(/# %$#!&��! �� ���� �.� )+*�
'#!3 9�*6 (#9�$ $�)�*� �*3 "#$ )+*�.�+/ J6�/*#+�� 53#/�+K
8+#9+ *# '� $�(�)/�! "$#5 *6� (�/�#+�! *�//&�� $)*6�$ *6)+
"#$ &+$�()*�! )+*�.�+/ J��?K: &$�+. )%#%*#/�/� +&�(�)$
�#5%#+�+*/ J ��� 6�/*#+� )+! %6#/%6)*�!3(/�$�+�K *$)+/
(#�)*�! �+*# 5�5'$)+#&/ '(�'/ 5)3 '�+! *# *$)%%�!
/�(")+*�.�+/ )+! )�*� )*� �#5%(�5�+* �)/�)!�� 96��6
*6�$�"#$� %$#5#*�/ *6��$ $�5# )( 5�!�)*�! '3 �.� )&*#
)+*�'#!��/ J��A#.&�6� �� ��: 1DDCK: 6� %$#��// #" !�.�+
�$)*�#+ )+! $�5# )( #" +��$#*�� *�//&� �/ )+ �5%#$*)+*� �+*
%$���!�+. �""��*� � 5&/�(� $�.�+�$)*�#+ J?)/*#$�* L
��'�((� 1DD<K: �+ *6�/ $�.)$!� *6� %$�/�+�� #" %6).#�3*�/
)+! �+�$�)/�! �.� %$#!&�*�#+ �#&(! '� %$#5#*�+. $�5# )(
#" )%#%*#*�� '(�'/ "$#5 53#+��$#*�� *�//&� )+! %$#')'(3
'(#�8�+. )�*� )*�#+ #" )&*#$�)�*� � ��((/: 6�/ 9#&(!
"&$*6�$ �#+*$�'&*� *# *6� $�/#(&*�#+ #" �+"()55)*�#+ )+!
/8�(�*)( 5&/�(� $�.�+�$)*�#+: �+*�$�/*�+.(3� �+*$) �+#&/
.)55).(#'&(�+ *6�$)%3 #" %)*��+*/ 9�*6 !�$5)*#53#/�*�/
J� �K� )+ �+"()55)*#$3 )&*#�55&+� 5&/�&()$ !�/�)/��
)**�+&)*�/ *�//&� �+"()55)*�#+ )+! �5%$# �/ 5&/�(�
�3*#)$�6�*��*&$� J�5�5�3) �� ��: 0---K:
�* �)+ '� )$.&�! *6)* )�*� )*�#+ #" *6� �55&+� /3/*�5
�+ 5!4 5#&/� �/ )+ �%�/*)*�� � �+*� /��#+!)$3 *# 5&/
�&()$ �+"()55)*�#+: �#9� �$� )/ #%%#/�! *# �+"()55)
*�#+ 9�*6 )��&5&()*�#+ #" � ;�� � =� ��((/ �+ *6�
/8�(�*)( 5&/�(� �+ ;9��8#(! 5!4 5���� !$)�+�+.
(35%6 +#!�/ /6#9�! )*$#%63 !&$�+. #+/�* )+! 6��.6*
#" 53#+��$#/�/: �+ )!!�*�#+� �+()$.�5�+* #" 5!4 (35%6
+#!�/ 9)/ #+(3 � �!�+* !&$�+. 5�*�.)*�#+ #" �+"()55)
*�#+: 2&$*6�$5#$�� )��&5&()*�#+ #" )+! � (35%6#�3*�/
%�$/�/*�! "#$ /� �$)( 5#+*6/: ��.)$!(�// #" 96�*6�$
)�*� )*�#+ #" *6� �55&+� /3/*�5 /6#&(! '� �#+/�!�$�!
)+ �%�%6�+#5�+#+ #$ +#*� *6� �5%#$*)+* ")�* �/ *6)*
�+�$�)/�! (35%6#�3*� )�*� )*�#+ 9�*6 �55&+#.(#'&(�+
)+! �3*#8�+� /��$�*�#+ �#&(! '� %)$*(3 $�/%#+/�'(� "#$
5�*�.)*�#+ #" �+"()55)*�#+ )+! /8�(�*)( 5&/�(� $�.�+�$
)*�#+ �+ 5!4 !3/*$#%6�� 5���: �+ ")�*� �* �/ �&$$�+*(3
)���%*�! *6)* *6� !� �(#%5�+* #" &�6�++�*3%�
5&/�&()$ !3/*$#%63 �/ ) +�* $�/&(* #" �+*�$)�*�#+/ '�*9��+
*6� %$�5)$3 .�+�*�� (�/�#+ )+! ) /�* #" �#5%�+/)*#$3
$�/%#+/�/ "$#5 ) )$�)'(� .�+�*����+ �$#+5�+*)( +�*
9#$8 J�+")+*� L �&/A).6 1DDDK:
6� /*&!3 !�/�$�'�! 6�$��+ 6)/ .�+�$)*�! /� �$)(
�5%#$*)+* "�+!�+./ 9�*6 %)$*��&()$ $�(� )+�� *# ) '�**�$
&+!�$/*)+!�+. #+ *6� %)*6#%63/�#(#.3 #" 5&/�&()$ !3/
*$#%63 �+ *6� 5!4 5#&/�: # #&$ 8+#9(�!.�� #&$ $�/&(*/
)$� *6� "�$/* *# !�5#+/*$)*� ) �#$$�()*�#+ '�*9��+
(35%6#�3*� )�*� )*�#+ )+! $�/#(&*�#+ #" 53#+��$#/�/
�+ 5!4 5���: )8�+ *#.�*6�$� *6�/� !)*) /&..�/* *6)*
�6)+.�/ #��&$$�+. 9�*6�+ *6� 5&/�&()$ *�//&� !&$�+.
!�/*�+�* %6)/�/ #" &�6�++�*3%� 5&/�&()$ !3/*$#%63
)$� �(���*�+. "&+�*�#+)( �6)+.�/ �+ *6� �55&+� /3/*�5�
96��6 &(*�5)*�(3 �#&(! '� %)$*���%)*�+. �+ *6� $�/#(&
*�#+ #" �+"()55)*�#+ )+! $�.�+�$)*�#+ #" /8�(�*)( 5&/�(�
�+ *6� 5!4 !3/*$#%6�� 5#&/�:
*���+����� ���
6� )&*6#$/ )$� .$)*�"&( *# ��+) �: �#$*�/ )+! �)$*�$) :
�(� ��$) "#$ �4��((�+* *��6+��)( )//�/*)+��: 6�/ 9#$8
$���� �! "�+)+��)( /&%%#$* "$#5 ?����7� ��?I�
2�?��� )+! 2���?:
��������
������� �: L ���?���� Q:?: J0---K �+�5)( 5#!�(/ "#$
5&/�&()$ !3/*$#%63@ )(&)'(� *##(/ "#$ *6� !� �(#%5�+* #"
*6�$)%��/: ! �4 ��4 ;����4 )� 0;<DE0;>C:�����M� Q:� ���������� �:� ������� �:?: L ���Q�� �:�:
J0---K #9+$�.&()*�#+ #" �2�1 5��� )+! %$#*��+ �+ *6�
5&/�(�/ #" %)*��+*/ 9�*6 �+"()55)*#$3 53#%)*6��/ )"*�$
*$�)*5�+* 9�*6 6�.6!#/� �+*$) �+#&/ �55&+#.(#'&(�+: ����4��� ��4 )$� DDE1-;:
���������� ?:� �������� �:� ���2�������� ?: � ��: J1DD<K
�4%$�//�#+ #" *$)+/"#$5�+. .$#9*6 ")�*#$�1 �+ !3/*$#%6��
%)*��+* 5&/�(�/ �#$$�()*�/ 9�*6 "�'$#/�/: #4 ����4 �����4 )'�11,CE11;;:
������� �: J1DD>K �+*�$"�$#+�@ '�#(#.3 )+! $#(� �+ %)*6#.�+�/�/:
3��4 ��� ��4 '"� >1E1-D:����� �:� ���?��� �:� ���2 �:2: L ������ �:�: J1DD<K ��*�
!�%�+!�+* %)*6#(#.��)( !�""�$�+��/ �+ /5##*6 5&/�(�/ )+!
/8�(�*)( 5&/�(�/ #" *6� )!&(* 5!4 5#&/�: � ��� < )����
�� >;DE><C:����� �:�:� 2����� �:� ?�??������ �: � ��: J1DDDK 3/*$#%6��
%6�+#*3%� �+!&��! �� ���� '3 )+*�'#!3 '(#�8)!� #" 5&/�(�
�E!3/*$#.(3�)+E()5�+�+ �+*�$)�*�#+: #4 ����4 *��4 "�0-DE01>:
������ �:� ��22����� �:� M��� � �: L ������� �: J1D=DK
2�'$#'()/* .$#9*6 ")�*#$ �+ *6� �4*$)��((&()$ 5)*$�4 #"
!3/*$#%6�� J5!4K 5#&/� 5&/�(�: *������ $$� >==E>D-:2���� �:2:� ���?��� �:�: L Q��2��� �:�: J1D=CK � ()5�+�+
/&'/*$)*� %$#5#*�/ 53#.�+�/�/ �+ $)* /8�(�*)( 5&/�(�
�&(*&$�/@ )+)(3/�/ #" $�%(��)*�#+ )+! !� �(#%5�+* &/�+.
)+*�!�/5�+ 5#+#�(#+)( )+*�'#!��/: ���4 ���4 ""� 11E0-:��� ��� �:� 2��� �:� ������� �:� �� ����� �: L ������� �:
J1DD;K ��.)*� � /�(��*�#+ #" 5&(*�$�)�*� � � ��(( �(#+�/ �+
+#$5)( )!&(* 5���: 6 �4 #4 ��� ��4 "$� 1,;<E1,<0:
5���8���� ��������� ��� ��������� � �������
� 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0 1,1
�����Q���� �:� Q�������� �:� 2������� ?: L ��� ��� �:
J1D=>K ��$�'$#/%�+)( "(&�! (35%6#�3*�/ "$#5 %)*��+*/ 9�*65&(*�%(� /�(�$#/�/ !# +#* �+�$�)/� �55&+#.(#'&(�+ #$
5�)/(�/ )+*�'#!3 %$#!&�*�#+ )"*�$ /*�5&()*�#+ 9�*6 %#8�9��!
5�*#.�+: #4 )� ���� ��4 � 1<E,-:��2��� �:?: L ������� �:�: J1DDDK ���6)+�/5/ #" $�/�/*)+��
*# %)*6#.�+�/�/ �+ 5&/�&()$ !3/*$#%6��/: ��4 ����4 ���8��4
)&� 1<<E1>C:��������� � � �:� ��� ����� 2:�:2:� �������� � :�:�: L
������ �: J1DD>K �""��*/ #" �+*�$"�$#+� &%#+ *635��
�%�*6�(�)( ��((N*635#�3*� �+*�$)�*�#+/ 5�!�)*�! '3 �4*$)
��((&()$ 5)*$�4 (�.)+!/ )+! $���%*#$/: ����4 ��� ��4 (,�0,<E0;;:
��������� � � �:� ������� �:� ������ �: L ������������ :
J1DDDK �4%$�//�#+ #" �4*$)��((&()$ 5)*$�4 (�.)+!/ )+! $���%
*#$/ �+ *6� 5&/�&()$ *�//&� )+! !$)�+�+. (35%6 +#!�/ #" 5!4
!3/*$#%6�� 5���: ����4 ��� ��4 )�� 1;,E1<1:��� �:� ���� �:� ���� �: � ��: J0---K �3# !�%�+!�+*
�+!&�*�#+ !&$�+. 53#'()/* !�""�$�+*�)*�#+ #" %0-;� ) %$#*��+
)(/# �+!&��'(� '3 �+*�$"�$#+: ��4 ����4 ���4 ",� C-0;EC-,>:�����Q� M:� ����� Q:� ����Q� M: L �Q����� Q: J1DDDK
�#$5)(�A)*�#+ #" �$�)*�+� 8�+)/� (� �( !&$�+. )$*6$�*�/ �+ )
%)*��+* 9�*6 ���8�$ 5&/�&()$ !3/*$#%63: )� ���� &"�1C0E1C;:
���M� ?:� �������� Q: L ����� : � ��: J1DDDK �+6)+��!
)&*#�55&+� )$*6$�*�/ �+ �2�� $���%*#$!�"����+* 5��� �/
�#+!�*�#+�! '3 53�#')�*�$�) �+ 2$�&+!O/ )!G& )+* )+! '3
�+�$�)/�! �4%)+/�#+ #" �)�1� 53�(#�! ��((/: #4 ��� ��4 '�� ,<-,E,<1-:
���M� ?:� �������� Q: L ������� �: J0--1K �)�1� 53�(#
%#��/�/ �+!&��! '3 �2�@ ) �(&� *# *6� %)$)!#4��)( �""��*/ #"�2�� �+ )&*#�55&+� !�/�)/� 5#!�(/: :���� ��� ��4 ""�,>CE,C1:
�� ����� �:�:� ��� �:�: L ������ �: J1DD-K �)*&$� #"
*6� 5#+#+&�(�)$ �+"�(*$)*� )+! *6� 5��6)+�/5 #" 5&/�(�!)5).� �+ G& �+�(� !�$5)*#53#/�*�/ )+! &�6�++� 5&/�&()$
!3/*$#%63: #4 )� ��4 *��4 ))� 1DDE01C:������ �:2: J0---K �$)�+ !3/*$#%6�+� +�&$#.�+�*��/ )+!
5�+*)( $�*)$!)*�#+: ����� "�4 "��4 �"� 0CCE,-C:���Q� �:�: L �������� : J1D=CK ���&%)*�#+ #" �4*$)��((&()$
5)*$�4 $���%*#$� �+*�.$�+� �/ ) �#+*$#( %#�+* "#$ 53#.�+��
!�""�$�+*�)*�#+: ���� & � <1E<C:��������� :� ������� �: L ����2�� �: J1DD,K �#+/*�*&*� �
)+! �3*#8�+��+!&��! �4%$�//�#+ #" 6&5)+ (�&8#�3*� )+*�
.�+/ )+! ��(( )!6�/�#+ 5#(��&(�/ '3 6&5)+ 53#*&'�/:
3�4 #4 ���8�4 $�� 11;0E11;D:��������� �:� ��������� �:� ���� �:�:� ?��22�� 2:�: L
���� �:Q: J1DDCK �&%%$�//� � $#(� #" � ��((/ �+ �6$#+��
�#(�*�/ #" ��(( $���%*#$ � 5&*)+* 5���: #4 67�4 ���4 �'�1C;DE1C<>:
�������� �:� �� �:�:� ?����� �:� ?���� �� : L
����������� �: J0---K ��((!�%�+!�+* "�'$#/�/ �+ *6�
5!4 !3/*$#%6�� 5#&/�: 5������� �����4 �,� ==1E=D1:
����Q� �: J1DD=K �+�5)( 5#!�(/ #" 5&/�&()$ !3/*$#%6��/:
5������� 3���4 *��4 $�� =E1>:�������� �:�:� ������Q� �:�:� ������ �:�: � ��: J0---K
*�8���� ����� �..�+!&��! 6�%)*�� .$)+&(#5) �+
5��� !�"����+* "#$ *6� �+*�$"�$#+.)55) $���%*#$ 6) �)(*�$�! %#%&()*�#+ #" 5)�$#%6).�/� (35%6#�3*�/ )+! �#+
+��*� � *�//&� ��((/: ������ ������4 "� 1=1CE1=0>:?����� �: L ������� �: J1DD<K �!4 5��� /6#9 %$#.$�//� �
9�)8+�// )+! 5&/�(� !�*�$�#$)*�#+ 9�*6 ).�: )� ��4 *��4 ")� DCE1-<:
������������ :� ������� �:�: L ������ �: J1DD<K �+�$�)/�!
!�%#/�*�#+ #" �4*$)��((&()$ 5)*$�4 �#5%#+�+*/ �+ *6� *635&/
.()+! #" 5!4 5#&/�@ �#$$�()*�#+ 9�*6 *6� 5&/�&()$ (�/�#+:#4 )� ���� ��4 &)� DE1=:
��M����M�� �:�: L Q�����Q Q:�: J0---K �6�5#8�+� %$#
!&�*�#+ '3 $)* 53#�3*�/ �4%#/�! *# �+*�$"�$#+.)55): ����4
��� ��4 )$� 1-<E11,:��������� �:�: L ������� �:Q: J0---K 6� $#(� #" !�""�$�+*
/&'/�*/ #" $�.&()*#$3 ��((/ �+ �#+*$#((�+. )&*#�55&+�*3:
� ��4 %���4 ��� ��4 "� >C>E>=,:��Q������ �: J0---K ��.&()*#$3 ��((/@ 8�3 �#+*$#((�$/ #"
�55&+#(#.�� /�("*#(�$)+��: ���� , � ;<<E;<=:�� ����Q :�: L ��� ?:�: J1D=,K � /#(�!%6)/� �55&+#
�+A35)*�� *��6+�I&� "#$ *6� �+&5�$)*�#+ #" /%���"�� )+*�'#!3/��$�*�+. ��((/: #4 ��� ��4 ���84 &(� ,-1E,-D:
���7���:�:���������� � ��:�:��������:L������������:
J1DDCK 6� �5%#$*)+�� #" 5!4 5#&/� �+ *6� %)*6#%63/�#(#.3
#" &�6�++�O/ 5&/�&()$ !3/*$#%63: 3�94 )� ���9 ����4 &&�>1-E>1C:
������Q� ?:� ���� M:� �M �����Q �:�:� ������ �:�:�
������� �:�: L ������ ?: J1D=DK 6� 5#(��&()$ ')/�/ #"5&/�&()$ !3/*$#%63 �+ *6� 5!4 5#&/�@ ) %#�+* 5&*)*�#+:
*������ �,� 1<C=E1<=-:�?����� �:�:� ���������� ������ �:� ����Q�� Q: L
� ���� �:�: J0--1K ��(%�$ J� ;�K )+! �3*#*#4�� J� =�K ��((/ %$#5#*� *6� %)*6#(#.3 #" !3/*$#%6�+!�"����+* 5&/�(�:
����4 ��� ��4 )�� 0,<E0;,:�?����� �:�:� ����� �:�:� ����Q�� Q:�:� �� ������ �:�: L
� ���� �:�: J1DDCK �3#+&�(�)$ )%#%*#/�/ �+ !3/*$#%6�� 5!45&/�(� #��&$/ '3 %�$"#$�+5�!�)*�! �3*#*#4���*3: #4 ����4
�����4 � 0C;<E0C<1:��� �:�:� ?����� �:�: L ����� : J0---K �2�� /6)%�/
�55&+� �+ )/�#+ #" *6� ��+*$)( +�$ #&/ /3/*�5 �) $�.&()*�#+
#" �6�5#8�+�/: #4 ��� ��4 '$� 0C<DE0C>=:M������ Q:� M���� Q:� ��M���� M: � ��: J0---K �55&+�
$�/%#+/� *# )!�+# �$&/!�(� �$�! )+*�.�+/ &%$�.&()*�/&*$#%6�+ )+! $�/&(*/ �+ 5�*�.)*�#+ #" 5&/�(� %)*6#(#.3 �+
5!4 5���: ! �4 ;��� :8��4 � >>DE>=-:����� �:7:� 7��� �:�:� ��� 7:2:� ��� �� ��� � ?:�:� ��� �:
L ���Q �: J1DDDK ���� 9�*6 �2�� $���%*#$ !�"����+�3 )$� (�///&/��%*�'(� *# �4%�$�5�+*)( �&*#�55&+� �3)/*6�+�) �$) �/:
#4 ��� ��4 '"� ,CC<E,C=1:
#4 5�����+������ �� ��4
1,0 � 0--0 �()�89�(( ����+�� �*!� ������������ # ���� � 67���������� ���8���� ��� 101E1,0