Exploring the Antibacterial and Hemolytic Activity of Shorter- and Longer-Chain?-,?,?-,...

20
Exploring the Antibacterial and Hemolytic Activity of Shorter- and Longer-Chain b-, a,b-, and g-Peptides, and of b-Peptides from b 2 -3-Aza- and b 3 -2-Methylidene-amino Acids Bearing Proteinogenic Side Chains ± A Survey by Per I. Arvidsson 1 ) Uppsala University, Institute of Chemistry, Department of Organic Chemistry, Box 599, SE-75124 Uppsala and Neil S. Ryder Infectious Diseases Biology, Novartis Institutes for Biomedical Research, Inc., 100 Technology Square, Cambridge, MA 02139, USA and H. Markus Weiss Novartis Pharma AG, ADME Laboratory, CH-4002 Basel and David F. Hook 2 ), Jaime Escalante 3 ), and Dieter Seebach* Departement für Chemie und Angewandte Biowissenschaften, Laboratorium für Organische Chemie der Eidgenössischen Technischen Hochschule, ETH Hönggerberg, Wolfgang-Pauli-Strasse 10, CH-8093 Zürich The antibacterial activities of 31 different b-, mixed a/b-, and g-peptides, as well as of b-peptides derived from b 2 -3-aza- and b 3 -2-methylidene-amino acids were assayed against six pathogens ( Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and Pseudomonas aeruginosa), and the results were compared with literature data. The interaction of these peptides with mammalian cells, as modeled by measuring the hemolysis of human erythrocytes, was also investigated. In addition to those peptides designed to fold into amphiphilic helical conformations with positive charges on one face of the helix, one new peptide with hemolytic activity was detected within the sample set. Moreover, it was demonstrated that neither cationic peptides used for membrane translocation (b 3 -oligoarginines), nor mixed a/b- or g-peptides with somatostatin-mimicking activities display unwanted hemolytic activity. 1. Introduction. ± Bacterial resistance to antibiotics is a significant threat to public health [1] [2]. The World Health Organization states that 95% of the Staphylococcus aureus isolates worldwide are now resistant to penicillin and up to 60% are resistant to methicillin. Resistance is also spreading from serious hospital-acquired infections to community-acquired pathogens, for example, pneumococci and tuberculosis [3 ± 5]. Despite this serious threat, most major pharmaceutical companies have forsaken the CHEMISTRY & BIODIVERSITY ± Vol. 2 (2005) 401 2005 Verlag Helvetica Chimica Acta AG, Zürich 1 ) Postdoctoral Fellow at ETH-Zürich (2000/2001), financed by the Swedish Foundation for International Cooperation in Research and Higher Education (STINT). 2 ) Postdoctoral Fellow (2003 ± 2005) financed by a grant from the Swiss National Science Foundation (No. 200020-100182/1) and by Novartis Pharma AG (Basel). 3 ) Visiting Professor, ETH-Zürich, on sabbatical leave (2002/2003) from the Centro de Investigaciones Químicas, Universidad AutoÂnoma del Estado de Morelos, Mexico.

Transcript of Exploring the Antibacterial and Hemolytic Activity of Shorter- and Longer-Chain?-,?,?-,...

�������� �� ���������� ��� �������� ����� �� ������� �������������� ��� ����� ��� ���������� ��� �� ��������� ���� ����� �� ��������!��������������� ���� "����� ����������� ���� ������ # �$����

�� ��� %& ����������

������ ��� ������ ������� �� �� ������� � ����� � �� ������ �� ������� ��� ���� !"#��$% ������

�&

'��� �& (����

�� ������ ��� �� � ������� �������� �������� �� ���������� ��������� �'� �(( ) ������ *��� �������&� � +, ($�-�� � ,

�&

�& !��)$� *����

�������� ������ ��� ,�+! .���������� �/"%(($ ���

�&

+���� ,& ���)$�� -���� ��������-�� �& +���� �������.

� ���� � � �0� �� �� �& ,� 1�&� ���1��� ������ � .����������� �0� �������� �� �� & �!�&� 2������ ) ������ /������� � !)/ /2�� �� ��� 3�����"4���" ����� �(� �/"5(�- 60����

)� ������� ��� �������� � �� -� &��� � � �"� ��� & �7�"� �& �"� ���& �� �� 1 �� �� �"� ���& � & ��� &���� �$"-"�8�" �& �-"$"� ����& "���� ���&� 1 � ����� & ������ ��� ������ � 9����������� ���������������������� ������� ������������� ��������� ����������� ����� ���������� ��������� �& ��������������������� �& �� � ���� 1 � ������ & 1��� �� ����� &���' )� �� ������ �� �� � � ���& � 1���������� � �� �� ��& & �� � ������ �� � ������ �� ���� ��������� �� 1�� ��� �� ������ &' ��&&���� �� ���� � ���& � & ��� & �� ��& ��� ���������� � ��� ����������� 1��� ������� ����� � � � ��� �� �� � ��� � 1 � ���& 1��� � ������ �������� 1�� & � �� & 1���� �� ���� � �' +�� �� �� �� 1��& ������� & ���� ��� � ������� � ���& � �� & ��� � ���� ���������� 9�-"��������� ��� �� ��� &�7�" �� �"� ���& � 1��� �����������"�����:�� �������� � &����� �1�� & � ������ ��������'

/& %����$����& ; ���� ��� � ������ �� ���������� �� � ��������� ��� �� �� ������ ��� <�= <$=' )� ���� !����� "����#���� ���� � ���� ��> �� �� �������������������� ����� � 1��&1�& �� �1 � ������ �� � ���� �& �� �� ?(> �� � ������ ��� ������' @ ������ �� ��� ��� �&�� ���� � ����� �������"��*��� & �� ����� ����������"��*��� & ������ �� ��� ���� � � �������� �& ��� ������� <- ; �='� ���� ���� � ����� ��� ��� ���� ��A�� ������� ����� ������ � ��� �����: ��

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %(�

E $((� D ��� / � ���� ������� ,��� ,F� 60����

�� 4���&������ G �1 �� !)/"60���� 9$(((7$((��� ���� & �� �� �$����� %������� �� ���������&��������� � �������� �� !����� �������� 9�'�'�'

$� 4���&������ G �1 9$((- ; $((�� ���� & �� � ���� ���� �� �$��� ������� ������ %�������9H�' $((($("�((�5$7�� �& �� �������� ������ �� 9��� �'

-� D������ 4��� ����� !)/"60����� � ��������� �� 9$(($7$((-� ���� �� &���� �� ������������(�)������ *��������� ����+��� ��� ������ �� ,������� + ����'

� ���� ��� �� ���������� � � ��� �� ��� �������� ���� �� <?=' @ � ���� �� ����& ��� ����&� �� � ��� � ��: � ��� ����� �� � ����� �� �& ���� �� �������� ����� ���& &����� ������� ��� ��������'

,� ���� �� ��� ����� 1��: � �"� ���& �� 1 � �& ��� ��� ��� & ������� & �����"� ���& � & ��� & �� ��& ��� ���������� � �� � &����� ����������� ��������<#= <5=' ������� � ���& � ����� �� ������ ���������� �������� �� �-�-� � �������� 1� � ��&�������� � ��&� � �� ��� ���� & � � ��� � 1� � �� ������� ������ �� ���� & � �� ������� ��& � �� 1�& ��� �& � ���� �� ���� �� � �������I� ��� ���� & � � <� ; ��=' )� �� ��� ��& �� ����� �� �� � � ���& � � �������������' �� ��� ��1 � �� � ��� ��� �� & ���� �� ������� ����� � &�� �� �� � ���& �� �� ����� � ����� & ���� ��� � ���� � �& ���� �� ��&��������� ��&� � �� �� ���� 1��� �� ���& ���� � � � 1�� ���� ���� � ����� �& ������ � � & ��� <�$ ; �%=' )� �� ������ �� � � �� �"� ���& � 1��� ���& � ��� � ��� � �� ������ & <�� ; �5=' H������ �������� ������� � ���& � ��� ��� ���: � ���� ��������� � �' )��� �������� �� ��� � ���� & 1��� ��������� �� �& ���� �����& ���������� ����� �� � ������ �������� �� �� � ���& ' �� ��������� ������ �� ��&�� � ������� �� �"� ���& � �� ���� ��� �� � ������� � � ��� ������� & �& ���� ��������� ���� �� ����� &����������� ��&������������ ���� ���� �&� ��� ���� ���� <�$= <��= <$(=' ������ �� �������� �� � ���� ���������� � �������� � � �� � ����� ��� � "� ���� �� ������J � �1 � ��� ��� ��� � & ���"� ���& � � �� ���� � ��� �� � � ���� ���� ���� �� �& �� �1 � � �������<�$= <$�= <$$=' ,���������� �"� ���& � &� ��� ��1 � �� ����� ������ �"� ����� ��� ��� � �� � � ���� � �� � ���� ������' , � &�� & �� � � � ������� ��� �� � ������� � � �� ��� ��� �� & 1� �� � ���& � �� �� ����&�������� <�$= <�-= <��='

4 ���& � ������� �"���� ���&� �� ���� �������� & ���� � *� � ��&�����"���� �� ���1 ������ & ���� ��� � ������� <�$= <$-= <$%=' )� �������� �� �"� ���& ���� 1 �� �� ��� & �7�"� ���& � �& �"� ���& �� ��1��&� ���� ����� & ���&���������& � � ������ ��� �� ��� � ����� �� ���� ������&� �� ������� ��� �� ��<$� ; -$=' � ���� � ����� � �� ��� 1 �� �� ������� ��� �& � ������ &��� �� �� &���� ��� � � ���� �� �� � � &' )��� �� �� � ������ & �� � ���& � & ��� & �� ��& �� ����������� � �� �& ��� ���& � � � �� 1 �� ��� � � ���� & �� ���������'

�& (��$�� ��� +���$�����& ; )� �"� �7�"� �& �"� ���& � �� 1 �� �� �$"-"�8�" �&�-"$"� ����& "�"� ���& � / ; �/ ���1 � '���� . 1 � ����� & ��� ������� ����������� ������ ��� ������ � 9����������� �������� �������������� ������� �������/������ ��������� ����������� ����� ���������� ��������� �& �������������������� �����&�� �� H��. ���& � � <--=' )� � �� � ���� �� ���1 �������� ��������� ��� ������ 9,&� ��� �� �� & ������ �� 1���� �� �� �1 ��������& ��� ������ ������ ���� � ����� ���� �� ����� ���� ��� ���1��%�')� ���� �������� ��1��&� ������� � � 1�� � ���� & ���� ���� ��������� �'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%($

%� )� ������� ��� �������� &��� � '����� . �& 0 �� *��� & �� ,& ��� �� 1� � �� '���� 1 ���1� &�(

��� � 9� ���& ��� ������ � *��� & ��� �(> ���1�� ����� ����� ��� 1��� ��� ,& ��� � ��� ���� �� � �' / ������ &��� � '���� . ���1� �� �� � �� � ������ �� � ��� � ���& ��� ������9����� -(( ���' )� ��� � �� �� *����� � ������ ��������� �� �� & � '���� 0� 1� � �� � '���� 1!&�( ��� � �� �� � � & 9� ���& ��� ������ � *��� & ��� �(> � �����'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %(-

)�� �'��������������!������������������9��� ���� &�

����

��������� ��� �������������

�/��2�/����/������������ ����/�������� ���

�1 /0/�#�/

���0 /1/,���������/���������') ������� 1���� &

���� � � � ����� ������� ��������

9,&

<����

� =J�- ���-�?K�-���-('�K�-���-('$�K�-�����K�-���

�?K�-����?�'G�

��� � �������������� ���>

9$7����&���

&�& ������� 1������� &

������ ���

&���((>

�� �'���

���

&�1 � �� &

���� ������������ ���

���&

9)G,

���������� ������ �����

�K'&'J�&���

������ '

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

/��$5

'&'

���$5

��-����

-$�-���-

-$��� ��

�$5

��

0��$5

%

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%(%

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

1��$5

2��$5

'&'

3��$5

'&'

4��$5

'&'

5�-���-

?%��� ��

�?%

��

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %(�

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

/6�?%

��

//�?%

��

/��?%

��

/��?%

��

/0�?%

��

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%(?

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

/1�?%

��

/2�?%

��

/3�?%

��

/4�?%

��9��(

���

/5�- ���-

-$�-���-

5�-���-

�?�-����

-$�-���-

�$5

�-���-

��$5

#�

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %(#

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

�61���6�

�'&'

1����

��6�

��?%

��

��

�/�?%

%�

���?%

��9��(

���

���?%

��9��(

���

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%(5

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

�0�?%

��

�1�?%

��9��(

���

�2�?%

'&'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %(�

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

�3�?%

'&'

�4�?%

'&'

�5�?%

'&'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%�(

'����.9��

�'�

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-���-��-�����

�-���-��-���-

/ �

�����

��������

��-((��<>

=

�6�?%

��9��-(

���

�/�?%

��

)� & �� �� � ������ 1�� � ���� & �� ��� � ���& ��� ������� � �1 � �&-(( ��� ��� �� �� ��� �� & �������� �� -(( �� �� � ���� & � '���� .� � �� ���� &��� �1�� '

H+@" � ���������� �� ��������� ��� ���1 ���� �-"� ���& / ��&� ��� � ���"���&� ������8 & 0�%"� �� � + �/ �& �*� ��� ������� <-%=' �"4 ���& � ������ & ������ � �� �-"���� ���&� 1��� ���� ��� �� ��& ����� ��� � �� � ����� ���� �� ��& ��� � 0�%"� �� <5= <$#= <-�=' )��� 0�%"� �� �� ������� ��8 & �� �%"� �� � & �� �� - H�/ LLL��� /"��& & ���� �& ��� 9,�"�������� 1� �� ��� & ���� �"���� ���& ����' )� � ��� �������� ���� & �� � ���& / ����� � ��� � ����������K ��1 � �� ���� � ���& &� � �� &����� �� ������� ��� ���������������� &� �� �� ��: �� � ������� ����� '

� �� ��� � ��&� �-"� ���& � � ; 1 ��� ����� ������� ����� � �1�� �� �� �� �� �-�.�� � ��&� �' )� � �� �� � 1 � & ��� & �� ���� ���������� � �� �1� � � ��� ��& ����� 1��& � ���� & � �� ��� � ��� ��� <-?= <-#=',������ ���& ������� ��� �& ���� � ������ �������� � ��� � � ���� & ���� �� ������ �������� � 9���� ���� �-�. � � ��&� � � ��� �� �-�4� � <�#= <-5=� ��������� & &��� <-?= �������� �� & ���� ���� � �1 �������� �& �� � ���� �� ������ �� ������� � ���& �K �� �� &�& ��� � � &����� & � ������ ������� ��� ��������' )��� � ���& ��� &����� & �� ���� �� � ������ �������� 1������ � �� �'

�-"4 ���& � 2 ; 4 ��� � & ����� & �� &����"���������� � �� 0�%"� ������������� <-#= 1��� �� �-�.�� � ��&� � ���� ���������� �� � �� ��������������� �� � ��� �� �' G���� ���� � �� ���� �� � ��� ���� ��� � �� ��&���������-�4� � ��&� � �� �� &"� ����� �� �� � �� ��� ��: � �� � � ���& � ������������� �� � ��� ������ ' � ���� �� ��������� � ��� �& � *� � � �1 &�& ��� �� 4 �& �� � ������� ��� �������� 1�� & � �� & ��� � ���& � 2 ; 4'

4 ���& 5 1�� ��� & �� � *������ ������ �� �-"� ��"� �-"� ��"� �& �-"� �������� ���& � �� ����� & ��� � ���&"���� � ���& ������ �� �� ���� ����-"��������� ���&�� ���:� <�5=' ��� � ���& � ��� � ���1 �� ��� �� ��� ���� �������� � 9��"�� & � "� ������ � ���& � 9�44��� <�5= <-�=' 4 ���& ��� ����� � ������� ����� ����� �� ��� � ��&� � ��� � ���1 ���������� M��A���� &I �� �� � ������ � � ���� � <%(= <%�=' @ ���:���� �� ��A���� & �� �� �� � �� ����& ���� ���� � �� ���� 1 ���� ��� �� �������� �� �-�-� ��� ���� �� �& �H, ����� �� ��� � �������� & �������� � ���& �' � ���� �� ����� ������� ����� �� �� ������ �� � ���& � 5 9� � ;#� &� � �� &����� �� ������� ��� 91��� �� �� ���� �� �� ����� ������ �-������1� � �,& ��� �� ?% �� ��� 1�� � ���& &� �� � ������ ��������' )��� �� ��������� ��&�� ��� �� ��: �� ���� �������� �� ��� &������ � ������ ��& �� ����� �44���' 4 ���& /6 1�� �� & �� � ����� ������� � �� ��� � ������ �� ��� ��� ��� �� 1�� �� �� �� & �� ����� � � ���� � � �� ��� �� � ���� �"��������� � 5 <�5=?�'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %��

�� @ � � ���&� � ��� ���1 ���� �44� �� ������ ����������� �������� ������ �- ������ �� &�� � ���� &��� ��� �� �� ���� ������� � ���� <%$='

?� /�1 � �� � �� � ���� � ��� ��� ������ &� 1���� �� �� ���A �� �� ����� & �� ��������J ������& 5&����� � ��� �& ��� �� ���� ���� ���� � ��� � 9F�D�� <�5='

, � � �� � ���& � ������� $"�����" 9�-�-� // ; /��� $"��&����" 9�-�-� /0 ; /2�� �& $"� ����& " 9/3 �& /4� �"���� ���& � ��&� � 1�� ��� �� ������ &' ,� �� �� &���� & � �� ��: �� � ������� ����� � � �� �� � � ���& � &����� & ������� �����������' � �� � ���� ��� ������ ���� ���� � � �� � ���& � �� �� &��� � � �� ������ �������� � �1 �� ��� ��� $"��&���� � ���& � /0 �& /1 <$�=' )� ����������� �� �� �� � �� �� � � � � ���� �� �/ ����� � ��� � ��A�� ��� � � �� �������� � �� �� � �1� � ���& �K 1� � �� /1 9�� ���3�"������������ �&���� �0�%"� ��� �� ��3�"������� & ������& /0 ������ & � � ��� ���������� 9H+@�� �������� <%-=�' .�: 1�� � � ���& //� 1���� ��� ������ � &���������� & �"�������& �� ��3�"������������ ���1 & � � ��� H+@ �������� � 1��� � ���& � /� �& /�������� �� 0�%"� �� <%-= <%%=' ��� G" �& �/"������� �"� ���& � ��� � �� &��� ���&� � ��� & �� �& ����&�� �� ���� ����� �������� �� �"� ���& � <$�='

,����� �� �� �� �� ����� �� � ��9� ����& �"� ��� ���& /4 ���� ��� ������ �� ��& �� � � ����8�� � ��&��� �������� <%�=� �&� ��� 1��� ���� ���& /3��� ������ & � �������� ��������'

)� M��� &I �"� ���& /5� ������� �� ����� �$" �& �-"���� ���& � ��&� �� ������� �� ��&�� ��� � ���������� .47.1"� ��� ���������� <-#=#�' )� .17.4"� ��� ���������� ��� 9��"� ����� 91��� ��3�"�-" �& 9��"�$"���� ���& � ��&� ���1��� �� ����� �$" �& �("� �� � & /"��& & ���� <%#= <%5=' )� /"��&� � �������������� ����� �� ���� �� �� - 9�$"� �� � & ���� �& �� �� � 9�("� �� � &����� 1��� �� ���& ��� ������ �� ����� � ��� �����K ������ �� �& &�1��� �� � ��� ����' )��� ����� � � �� ���& ������ � ���� � � ��� �� �" ���� � �����&��� � �� .17.4 � ��' � ���������� �� �"� ���&�� 0-5�-"� �� �&�� �"� ���&�� 0�%"� �� ��� � ����� �����&��� � ������ ���� �� H" �� �"� �����9���� &� �& ���� �� �" �� H"� ������ � �� ���� �' ,� �� ������ ���1 <%�=�� ���& /5 ���1� ���& ������� ��� �������� ����������"������� �������������� �&������������� ������� ���� & 1��� � ���� � ������ �������� �� -(( ��' �� ���� � ������8 & ���� � ������ �������� �� �� �� & �� ��� ������� ���� ���� � ������� & & ��� ������� ��� ��������'

��� � M��� &I �"� ���& � 1 � ��� �� ������ &' �"4 ���& �6 1�� & ��� & �� ������ �� � ��&��� �������� � ��� �1 <�( ; �$=' , ��� ����� 1�� �&�� & �� 6$� ������ ����� ��� �� �-�/�� �& �-���� � ��&� � �� �� � ���� �� �� ����� ���& '� ���� � � ������� ����� � ���� � ���& � � � ���� ������� ��� �� � �������������� 1�� ��� �� &' 4 ���& �/� � �� ��� � ��&� &������ � &��� � ��������������� �� ������ &� �� �� �1� ������� �-�.�� � ��&� � �� � �' )��� �� �� 1��& ��� & �� ���� � � �& �"��� � ��&��� �������� 9� � �� � ������ & �� H+@�������� � � �� � �� ������ ���� /"��&�'

)� �1� ����� � M��� &I �$7�-"� ���& � �� �& �� �� ������ & ��: ������� ����� �& &� �� ���1 �� �������� ��1��&� ���� ��� �� ������� � �' �� � �� � �� � ������&� �� �� ���� �� M�����I ������������ �& ������ ����� � � �� ��& "���� ������ ����� �� ����� � ���& ��&�' ,� ����� ������� �� �� � ������&� �� �"� ���& ������� �& �� �� �� ������ 1��� 8�� � ��� � �� ���A �� �� ��& � & � �� �������� <�-='

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%�$

#� , H+@"��������� ������ ��� A��� � ���� � & <%?='

)� ��� & �7�"� ���& � �0 �& �1 <-(= <�%=� �& �� �"� ���& � �2 ; �5 <��= 1 � & ��� & �� ��� �� ������ ��� �� ����� � ���& ����� ������������ �& ���&��&�� �� ���� ����������� � � ����� ��� �& & � ��� �� &' , ��&�� �������9��� �� $$ � 1�� & � ��� & ��� �7�"� ���& �0 1��� � ���� �� � �� &����������� ���� % � � ���� 9����������� �& ���� ���& ����� � �� ��� �� % ��& �#-5 �� � ��'� ��� ���� ��������� � � ����� <-(=' ,� � � '���� .� � �� �� � ������� � ���& � &����� & �� � ������ ������� ��� ��������� �& �� �1� � �� & ���� ������ ��������� �-�-� �0 �& �1� 1 � ������ ' ,� ������ ���� ��: �� �������� ��� ��������� ��� �� � � ���& � �� ��� ����� �� ���� � ���� � ��&��� �������� ' @ � �� ����� ��� � ��1 � �� ���1 ���� �� ������� ��� M������������ �I �� ������� ����"� ���& � �� � ���������� ��� 9�-�-� �� &�� ���& /".��")��"�� ���1�������� ��� ��������� <�?= <�#=' � �� 1 �� ������ � &���� ����������� �� ��&������ �� � �����������"�����:�� & ������� � ��: � ������ �������� �� �& &� ������ �� ���� ��� � ��� � ��&� �� & & ��� ���� ���� ��&�� ������������� � � �����'

G���� �� �"� ��� ���& �6� �������� �� %"����"$"��&���� ���&� 1��� �� ��& ����� �� �� ���� ��� �� ���� ���&� D�� ,�� �& . � <�5=� �& �� �$"-"�8�"� ���& �/ 1��� �� ��� ��& ����� <-�= 1 � � �� &' H ��� � ������� ��� �������� ��� � ������ �������� � 1 � ���& ��� �� � � ���& �'

�& 7��� �$������� *��)�& ; 6������ �& ��"1��: �� ��� �� ��� & � � �� � �� �"� ���& � 1��� ���� ������� ��� �&����� � ���������� 0�%"� ��� �������� 9'���� 1�'� ����� 1��� ����� ����������� � ���& �� �� � ������� ��� ���� ��� �� �������� � � ���� � 1�� �������� & � & � ��� �� ��&����������� �� �� �"� ���& �' ������& �� ���1� � ����� ���� & �� �� � ��&�������� ������� � 1������ ���� ���� ���� 1���� �� ������ & �� ��� ���� ����������� 9� �� & �������-���� ��� �& � ������ ��������' � �&&���� �� ���� ���� ��� � �������� � ���& � ���& �0 9� % �& �� � ��'� ������ &,& ��� � ���� ������ �������� �� �� ���������������� �"� ���& ������ 9-'$ �� ���� <�#= <-5=' ,������ �������� �� � 0�%"� ��� ����� � � � � & �� � � ����� ��� ���� ���� ��&�� �� �� �

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %�-

� ���� �� �� ������ ��� �� � ���& � �� �&��� ���� � ���������� � � ����� ����*� ��� ������ 1�� �� ���& �� � � �� � *����� <�#='������ �& ��"1��: �� ��� ���&� & �� ����������� �������� � �� � � �� � ��

������������ ������� & �"� ���& �� ������� ������ ����� �"���� ���&����' )� � ���� ��&�� �� � ���������� � ���& �� ���� ��� � ���� � 1�� �� & & ������� ���&��� � ���& �1 9� -�� 1���� ��&� �� � .1"� �� 9'���� 0� <��=',,& ��� �� ?'- �� ��� 1�� ��� �� & � �- ����� � ��� �������� �� ������9���� ������' ���� � � ����� �� �1 ��� � ���1 & ������ 9� $� �� � 9� ����������� �& �� ����������� �� �&&����� ������� � ��&� � 9�-�-� �2� � ��� & � �&������ & �� �� � ������� ��� ��������' ������ �� �������� �� ���� ������� H"������ �� ��� "� �� � & ���� �� � ���& �1 9� -� ������� & �� �� & ��������� 1� � ��� .1"� ��� ����� ������ �� �&����� � ���������� � �� ���1 & �������� ��� �� � ������ �������� <-$='

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%�%

)�� $' ������������ �� !�������� ���������� 9�� � ���� & � ���� ��������� �� � ��� �/������������������ ��� F��&�' G�� �� ������� ��� ������� �� &�( �� �� � � � � ������& � ���� �� ��- ('� ��'G�� �� � ������ ������ � ���� 9�( ��� 1�� �� & �� & �� �((> �� �' &�( �& !&�( & �� & �� �� � ���& ��� ������ � *��� & �� �� �� �(> ���1�� ����� ���� �� �(> � ����� � �� ���� �' D�� � *��� & ���

������� ��� ������ � ��� �� � � � �� � � ,& ��� � <�� ���='

������&H�'

G����� ,������ ����������� &�( <��=�- ����

/ ��������������!&�( <��=

�� � $ � �((� - -�� % �'#� � '&� ? '&

� �((� �((

$'?('$-('(5�

�� $'� 9�� -#

�0 � % �'( 9$?�� � -'( 9$(�

��(-$(

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %��

)�� -'��������������!������������������

9��� ���� &�

����

��������� ��� ����/���2�/��������������������

F �

�'+�����1��

�� &

���

� � � � ����� ������� ��������

9,&

<����

� =J�- ���-$�K�-���-$�K�-����?'-K�-���--'$�'G�

��� � ������������� ����9$((

����

� �1��

�� &

��& ��

�((>

�� �'

���

���

&H�'

G���

��

,������ �����������

,&

<����

� =�- ���-��-���-�

�-������-��������

/ �

�������������

����� ��� ������<>

=

�1����-

�- ���-

�$'�

�-���-

-'$

�-����

?'-

�-���-

('5

�9�(����

� �#�

9�((

����

� �

�2�- ���-

�$((

�-���-

�$((

�-����

�((

�-���-

�(

��9�((

����

� �

�3�- ���-

-'�;?'-

�-���-

?'-

�-����

?'-

�-���-

('5

�(9�((

����

� �

�4�- ���-

?'-;�$'�

�-���-

�$'�

�-����

?'-

�-���-

?'-

��9�(����

� �

!�� ��� �� ������ �"� ���& � ������� ����� �� ������ �"���� ���& �������1 & ���� ��� ���� �� 0�%"� ��� ���� ���� ��� ��� �� �� � ������������������� <?(= <?�=' 4 ���& �3 �� ������� ��&� �� � 0�%"� �� � �*� ��� �������������� �� ����������� �������� � �� � �� ��� ��� �� ���� �� �1� 1��� ������ ������ �� �(( �� ���' �& &� �� ��������� ������ ��� & �7�"� ���& � ���� ������ �� � ����� �� �������� ���������� �������� � & �� � ������ � ��� � *����� �� ������� ����������� �������� <?$=K �7�"� ���& �41�� & ��� & �� ��� ����� ����������' �� � ������ �4 �� �� � ������ ��� ������ 1���������&�� ������� ������� ��� ������� �������'

0& �����$�����& ; � ���� ��� �� 1 ��� �� � � & � �� ��� 1 �� �� ������� ����& � ������ �������� � �� � � �� �"� �7�"� �"� �$"-"�8�"� �& �-"$"� ����& "� ���& �1��� ���� ��� �� ��& ����� �� ��� & 1���� ��� ���������' � �&&���� �� ���� � ���& � ������� & ��� & �� ��& ��� ���������� � ��� ������������ �&� ���� & �� ������ �� ��� ������� ��� �& � ������ �������� �� �� � 1 � ���& 1��� � ������ �������� 1�� & � �� & � ���� ���� � �� �� � � ���& �/' /�1 � ������ � ���& �� �� �� & �� �&��� � 1 ��� �� � ��&��� �������� �& ���&��� � ��� � � �� � � � 1 ������& ��� �� & ��� �� ������� ��� �"� ���& �'G���� ���� � ���� ���&� ��� & ������� & ���� ��� � �� ������� � ���& � �� & ���� ���� ���������� 9�-"��������� � 5� �� �� �7�" 9�0 �& �1� �� �" 9�2 ; �5�� ���& � 1��� �����������"�����:�� �������� � &����� & �1�� & � ������ ��������'G���� ��� � � � � ����� ��� & ������� & ���� �� ����� ������� ��� ������"������ � �� ������� �"� ���& � �� � ���������� ������ 1 � � � �� �� �������� ���������� � ���&���� ��� �� �� � �: ���� �� � � & � � �� ������� ����� & ��� �� �� ������� ��� �&7�� � ������ �������� ; ���� �� ���� �� �&� ��� ������� ��� ���� � �� � ���� � &'

3 ���: �� �$����� �������� &������ �� �$��� ������� ������ %�������� �� &�������� 6��������� �'!/78����� �& �� &���9� ������� �� &����� � '������)� 9&"��&:'�� + ����� ��� ������ �������'

����������� ���

�' ������' ��� ��� �& ������� ��8���� �� �� ���1�� � ���& � ��� � �� ������ � ���� &J / <-%=�� ; 4 <-#=� 5� /6 <�5=� // ; /2 <$�= <%%=� /3� /4 <%�=� /5 <-#=� �6 <��=� ��� �� <�-=� �0� �1 <�%=� �2 ; �5 <��=� �6 <�5=� �/<-�=' )� ���� ��� �� � ���& �/ �� ���� & � �1' ������������; ���J 9����"�������������� �+,4J %"9&�� ������������&� � ! �J ��������� ���8����� G���J <9�!"���� "�"��� �����=������� /,)�J""9#"�8�� 8�����8�"�"��"�������"� ���� ��������� � ��������������� � /4.�J ����"� ������� �*"��& ��������������� �'�'J ���� ������ 9('(� )����� +,.��J ������"������ & �� �"& ������� ���8����� )G,J�G-���/� )� J 9�"4��- �/� )H� J $�%�?"�������� 8 ������ ���&' �� ��J �/$�$ ���� & ��� �� ������ � ������ 1�� ��� � & ������� ,$�- 9,���� ���� �� �������� ��' @ �� �� �& � ���&�J !�H9�"4��$ 1�� &���� & �� � ��/$ �& ���� & �& � ,�' ��3 ���& � �� 9�(( ; $(( � ��� 1�� ������� & ���������������' , ��� � � �� �� 1 � �� & �� � � �� & ���� %��3� �� �������' ������ � ������ 1 � � ����� & �& � H$' ,�' � � �� &"���� 9@4� /4.�J ,���32!������ /4.� ���� � 9<�&����� </=.>4����� �D & � ���� </=?44� �� ���� 6/=444�K ����J ��������� .44/> &.@ 9$�(� % ��� ,�������/������'/4.� ,��� �J 1��� � � �� ���&� � ���; ('�> )G, � /$� �& �;+ �H� �� � ��1 ��� �� � � ����� 1����D & � ���� �� $$( �K � � ��� ��� 9�@� � ��' 4� �' � � �� &"���� 9@4� /4.�J ,���32!������ /4.����� � 9<�&����� ���� ��� </=.>4� �D & � ���� </=?44� �� ���� 6/=444� /4.� ���� � 6/=444�'���� �������������� 9���J��������� .44/= &.@ 9$�(� $� ���,�������/������K ���& ���&��� 1�� ������ &1��� � ���&� � �� �; ('�> )G, � /$� �& �; + �H� �� � ��1 ��� �� �5 � ����� 1��� �D & � ���� ��$$( � �& �� ������8 &' �D"F��& )G, 9��>F�� 1�� �� & ��� @4"/4.�' �/"H+@ � ����J���3�� �A/

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%�?

544 9?(( +/8�' �� ���� ������ � � ��� &�1�� & ���� �� �� ���&��& + % � 9�� ( ����K B ��� � � /8'+ J ����� *����� ?-=/'/%' �� ������� � ���� 9+,.�� �� /@"+ � � $��"&���&����� 8��� ���&������� ���� �� ����� � �K � �7# 9> �� ����� � �:�' .������8����J !������� ����� ��& � � 1��� � �'�'����'

$' �������� � ������� �/' )� �� ���� ������ �� ���� ���&� �� & �� ��� �� � ���& �/ �� ���1� �1 9� %������� % ;8%�'

��� � � ��� � � ���� & �� �� �$�-"���� ���&� G���"9$��-��"�$�-�. �9�+ �"�/ 9%�� G���"9$��-��"�$�-�,�9�+ �"�/ 9%8�� �& G���"9$��-��"�$�-�D�9�+ �"�/ 98%� <?-= <?%=� �& �� �$"���� ���&�G���"9��"�$�,�"�/ 9%%%� �& G���"9��"�$�,�"�/ 98� <?�= <??=' G���"�-�.��9����"�/ 9%%� 1��������� & ���� %��3� �& �� & �� � � �� &'

)� � ���& 1�� ��� �� & � � ��3 ���& � ��' )� ��3 ���& � �� 9%(( ��� ('$- ���K ��&��('?� ��� ���� 1�� �1� � �+G7�/$�$ � J� 9% �� ��� $( �� �& G���"& ���� �� & 1��� ��� ��&� 9$(>�� �+G 9% �� %� �( ��� �& � H$ ������' )� � �� 1�� ���� *� �� 1��� & 1��� �+G 9% �� ?� � ���')� ����� ���� ���& 1�� ������ & �� �� � �� �� �&&���� �� % 9$?� ��� ('?5 ����� /,)� 9$�� ���('?? ����� �& !�H9�"4��$ 9('$- �� �'-? ���� � �+G 9- ��' ,�� � ����� �� ���� ��� ��� $ ; - � �� H$

������� �� � �� 1�� ��� � & �& 1��� & 1��� �+G 9% �� �� � ��� �& �� 1��� �/$�$ 9% �� �� � ���'���� ��� �� �� � ����� 1�� ������ & �� �� )H� � �� <?#=' �� � ������ �� �������� �� �� � 8���� 7��� ��&� �&&���� �� ��&�� 1�� & � ��� & �� � #-> 9('%$ ��� ����' G� ���� ������1 � ���� & �� �� ��� � �� �� � �� 1��� ,�$� 9('�? �� �'#( ���� �& �+,4 9$'� ��� ('(�# ���� ��+G 9% ��' ,�� � $ �� �� � �� 1�� ��� � & �& 1��� & 1��� �+G 9% �� �� � ��� �& �� 1��� �/$�$9% �� �� � ���' )� G��� ����� 1�� � �� & 1��� ��� ��&� 9$(>� � �+G 9% �� %� �( ��� �& � H$

������' )� � �� 1�� ��� � & �& 1��� & 1��� �+G 9% �� ?� � ���' ��� *� � G���"�"���� ���&� 1 � �� �&& & �� �� � �� � �� ���1�� ��& �J %%� %%%� %8� %%� 8� 8%' G�� ��� ������ �� �� � ��' �� G���"�"���� ���& 9- *���'�� /,)� 9$'� *���'� �& !�H9�"4��$ 9? *���'� � �+G 9% �� 1�� �� &� �& ����� �� �� ��' 1�� � ����� & �� H$ ������ ��� ('� �' � �� � � �� � ������� )H� � �� 9�&������ ����� � �������� �� ��' 1�� ��1 & �� � ��� ����� � 9$� � ��' )� � �� 1�� �� ��� � & �& 1��� & 1��� �+G9% �� �� � ���' )� G��� ����� 1�� � �� & 1��� ��� ��&� 9$(>� � �+G 9% �� %� �( ��� �& � H$

������' )� � �� 1�� �� ��� � & �& 1��� & 1��� �+G 9% �� ?� � ���� �& �� ���� �� 1�� � � �� &',�� � ������� � �� �� ��� ���� ���&�8%� �& G��� & ���� ����� �� �� ��� 1�� �� ���� & �� �&&������ ,�$� 9('-$ �� -'-? ����� !�H9�"4��$ 9('�� �� -'($ ���� � �+G7�/$�$ � J � 9% �� ('� ��' )� � �� 1���� 1��� & 1��� �+G 9% �� �� � ��� �& �� 1��� �/$�$ 9% �� �� � ���� �& &�� & �� ����� �& � �'�')� &�� G���"& ���� �� & � ���& � �� 1�� ����� �� �� & 1��� � ������ �� �/$�$7)G,7)� �( J� J� 9-� $ ����� 1��� �� ��� ������ � � ����� �� �� J% J� 9-� $ ��� ��1�� �� ��� � �� ���� ��1� ������� �� � ��� &' !�� �� ��� � 1�� ������� &� �& & ���� ���� �� ��& ���� ������ 1�� �� �� & �� ������� �� ���� ��&� � )G,7)� 7/$� �� J$'� J $'� ��� � �' )� ��� � 1�� ������� & �& &�� & �& � �'�'� �& �� � ��&� �������� & 1��� ��& !�$�' )� � ����� ���& 1�� �� �� & �� � ����������' 4���������� �� @4"/4.� 9�( ;�5> � �� � - ��� �5 ; $$> � �� � �( ��� �� & &� ��� � ������8����� �� )G, ��� �� �/ 9�%% ��� 5�> ��� &

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %�#

� ��&�� & � ��������' 3��� ���&' @4"/4.�J 9�( ; $(> � � �( ���J �@ $5'�� ������� �5>' �/"H+@9?(( +/8� �+ ��J ('#? 9�� B� ?'5� + �K ('#5 9�� B� ?'?� + �K ('#� 9�� B� ?'5� + �K ('5- 9�� B� ?'#� + �K ('5�9�� B� ?'�� + �K ('�( 9�� B� ?'#� + �K ('�� 9�� B� #'(� + �K ('�$ 9�� B� ?'5� + �K ('�? 9�� B� ?'�� + �K �'(5 ; �'�-9�� $ /�K �'$- ; �'%# 9�� 5 /�K �'%5 ; �'�$ 9�� - /�K �'?( ; �'?� 9�� � /�K �'5? 9�� �9��+ �K $'�- ; $'$# 9�� ? /�K$'%� ; $'%5 9�� $ /�K $'�$ ; $'?- 9�� % /�K $'?5 ; $'#% 9�� - /�K $'�% ; $'�# 9�� � /�K -'(- ; -'�$ 9�� $ /�K -'5# ;-'�? 9�� - H�/�K %'($ ; %'(5 9�� $ H�/�K ?'#$ 9��' �� H/�K #'�% ; #'�# 9�� - ����' /�K #'$- ; #'$? 9�� $ ����' /�K#'-? 9��' �� H/�K #'%� 9�� B� �('$� H/�K #'�% 9�� B� �'?� H/�K #'?% 9��' �� � H/�K #'?5 9�� B� 5'?� H/�K #'#$ 9�� B�5'#� H/�K #'#� 9�� B� �'(� H/�K #'�5 9�� B� �'5� H/�K 5'(� 9�� B� �'%� H/�K ��� $ ������� & ��� �/ ��������� ������ ���� & �& � �� ��� � � �: -'$5 ; -'--' +,.��"+ 9�� �� &���� ����� & 9$�� �� ���& � & � �� & 9��� �� �� ���� 1 ���� �� �/��J %�( 9�?�� %#� 9�((� <,� �=$��' /@"+ J %#�'-%�� 9<�$�/%%H��%� �=$� K���' %#�'-%??�' )� ���� ����� & �� 9��� 1��& ��� � ������ & 1 ���� �� ��?'?#5# 9��� <��(/55H�(�5=��'

-' 6���������� � !�������� ��������' ������� ����' )� � ���& ������ � 1 � � ���� &��� & 1���6�������I� �������� "���� � & ��� 94� � �� ����� � � �� � �� � �� ���' 1��� & ��� & ��� ������� 9-((��((� -(� �(� -� �& � ���'

������������ ����������' ,���� $ ; - � �� �� �� � �����8 & ���&� ����� & ���� � � ���� �������� � 9����� & 8 ���� @N� �/"��� �� 1�� � ������ & 9��(( �� -#�� �( ���' )� ��� ����� 1��&�����& &� �& � � 1 � � "���� & & �6�������I� 4� �� ��� � ��� ��� ������ �� ��- �(> ��������� �'� ���������� �& � "���� ��� 1�� � � �� & �1� ��� ��� �' G�� � ��������� ���� � ����� � &������ �� �(> ��������� � ���� ��� � 6�������I� 4� 1 � �� ��� & 9� J -� � J �� � J $#�'

!�������� ������' , �?"1 �������� ���� 9����� ������� 1�� �� & 1��� �� �� ��� & � ���& ���'9�5( �� 1��� ��� 1 � ��� ��� &������ �� 1���� �(> �� ��������� ���� ��� 9$( �� 1�� �&& &' )� ��� 1�� ������ & 9-#�� � �� 1��� � � ��������� ��� � 1���� ��� �� 1�� � ������ & 95(( �� �( ���' )� ��� ����� 1�� ����� �� & �� � 1 ���"������ �������� ���� � �& �� �������� �� %(� � 91��� ��( � ��� � � � � 1�� � ���� & � � �������� � �& � 9���C� ,��������� 6�������' G�� � ��������� ���� � ���'9$( �� ���� � ���� ��������� ��� ������� 9�� �(> ��' ��� �� ��� �� ��� & &������ 9� J-� � J ��� J $#�� 1 � �&& & �� �> � 9�5( �� �� �&�� ���� � � ������' � �&&����� �� �(> ��������� ���� ��� 9$( �� 1�� �&& & �� 4� 9�5( �� �� *������ ���:����& � ������'

,����� � ������ !�������� 9/.�&���������' / ������ � �> 9$7�� � 1�� ����� & �� � �((> ����K�� ���:����& � ������ 1�� ��: ���� �������� �� ��������� ���� ��� � 4� 9(> ���� ��� �'���� � � &������ �� �� �(> ��������� ���� ��� 9� J-� � J �� � J $#� 1 � �8 & � �> � �& �� ����������� ��� � 1 � ��: �� ���� ���&�� �� --� ��� �& -'#> � ������� ���� 1���� � ��������� ���� 1�� ������� & �� � �� � �� ���� �& �� & �� �������� ������� ��� � ��� � � ������ ��� !< 9>� �� �� � ���& ���� '

%'6���������� � ������������ ��������' )� � ���& ������ � 1 � � ���� &��� & 1���,������;!��� ����� �� ����� � � �� � �� ���' 1��� & ��� & ��� �������' )� � ���� ���' 1 � ����� & ���������� ��� �������� ������ ��� ������ � 9����������� �������� �������������� ������� ���������������������� ����������� ����� ���������� ��������� �& ���������� ���������� �����&�� �� H��. ���& � � <--=' ) ������� 1�� �� & �� ���&��& ��������� ������&' )� � �� � ���� �� ���1 �������� ��������� ��� ������ 9,&� ��� �� �� & ������ �� 1���� �� �� �1 �� &��� ��� ������������ ���� � ����� ���� �� ����� ���� ��� ���1��� ��� � ���� �� �� ���'

@!G!@!H�!

<�= /' �' H �� ������ /55�� 1>=� �(?%'<$= �' )' ���� ��� O' G' ���� ��� &���- "��- ���������- �66�� .?� ?$�'<-= /' ' F�&� @' �' +� ���� �- ���- B- ,��- /554� 00@� �%%�'<%= �' 3���� ������ �666� ?45� ##�'<�= .' !' H��� � M�� ���� ����� �������� � �� ����� ����������� � ������ I� 3��& / ���

����������� F ��� $((�'<?= �' H����� ������ �660� ?0.� 5��'<#= O' ,' 4����� ,' !' ������ &���- "��- &���- ����- �66�� 5� 5#$'<5= �' ����� ,' N' � �:� �' O' �� ������ &���- ������- �660� .� ����'<�= /' � � �� �' /�����:� P' !����2�� /' � ���� /' F' ����� ������ /54/� 1D1� $%?'<�(= @' !' 3' /����:� <���� /553� 0?D� %�5'<��= /' F' ����� B- ���- ,��- �66�� 1>?� ��#'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%�5

<�$= ,' )����� .' �&��� ,' F������ ��� ����������� �666� >>� %'<�-= 6' �� � B' ���� ����������� /555� ?=� %��'<�%= +' 6������ ������ �66�� ?.>� -5�'<��= @' G' !��&� H' �� 8�1�� !' ,' 4��� �� ' /' F ��� @' +' !��&� ���- B- �������- �66�� 1=4� �$%('<�?= @' G' !��&� )' .' @���� � ' /' F ��� @' +' !��&� ������������ �660� ?0� ��$#'<�#= �' .��� 3' G' � F��&�� B- ��- &���- ���- �66/� .10� #��-'<�5= �' ����� N' H������ B' @' +���A�� 4' ��&���Q& �� @' ������ +' N������ H' ' @�& �� +'3 ���� +'

�� �� �' @���� ' 3 � �� /'"�' � �� �' +�&��� 4' 3�& � +' D�� �� &���- ������- �660� .� ?�'<��= 3' .' +���� �' 4' N���� ����������� /551� 0=� �(�'<$(= ,' F������ ��� .' �&��� ,' )����� ���- B- �������- �66/� 15@� ��5�'<$�= O' /��� 6' �� � B' ���� ������������ /555� 0@� �?�?-'<$$= 6' �� � B' ���� ������������ /553� 05� �5$?'<$-= ' G ��& 8".�� 8� /'"�' N��� !' �' ����� +' � ��&�� O' @' F��A�� ,' N������� N' N�� � �� �� F'

.��� �' ,' 3 �� �� �� N' +' 3���� � +' @' F��&���� ������ �66/� ?.1� %�$'<$%= 6' �� � B' ���� ������������ �666� 0D� ?�(-'<$�= �' G' /��:� G' F ��� �� �' H���� 4' N���� �' ����� &������&��� �660� >� ?��'<$?= �' ����� ' ,� � O' D' ��� �� �� �' +������� ,' N' H�������� /' ���&� /' ���8� /' / �: � @'

3� �� �� G' ������� &����� /554� >1� #-%'<$#= �' ����� +' �� ���&� G' H' +' N� � � �' +������� .' �� � �� �' /��� � /'3�&� ��!���- &���-

���� /552� =D� ��-'<$5= )' /�� ���� �' ����� &����� /553� >.� $%%'<$�= O' G���: ���� 4' �' ,���&���� O' D' ��� �� �� �' ����� &������&��� �66/� 1� %%�'<-(= �' ����� +' @� ���� 4' �' ,���&���� )' N��� ��� 4' +������ �' H���� �' .�� �� �� �' /�� ��

!���- &���- ���� �66/� @?� -�(-'<-�= F' . ���� �' ����� !���- &���- ���� �66�� @5� %��$'<-$= !' ,' 4��� �� �' 3 ������ ' /' F ��� B- ��- &���- ���- �66�� .1?� #-$%'<--= H����� ������� ��� ����� .��������� ��&��&�� M+ ���&� ��� &����� ����������� ���� ��������

� ��� ��� ���� ��� ���� ���1 � �������I� ,����� & ���&��&' G���� !&����' H��. &���� � +#",��H��. � 3�� � 4,� $((('

<-%= 4' �' ,���&���� +' @� ���� �' ����� &���- &����- �66/� ?%�'<-�= �' ����� O' .' +���� 1�� &���- &����- /553� $(��'<-?= 4' �' ,���&���� O' G���: ���� H' ' @�& �� �' .� ����� G' 4 � �� � /' 6��� ���� F' 4' ��� ����� @'

3� �� �� �' ����� &������&��� �66/� .� ##�'<-#= 4' �' ,���&���� O' G���: ���� �' ����� !���- &���- ���� �66�� @5� ��$$'<-5= B' /������ O' 4' �� �& �� 3' G' � F��&�� B- ��- &���- ���- /555� .1.� �$$(('<-�= +' @� ���� B' +���A�� +' �� �� �' ����� &������&��� �66�� 0� $�#'<%(= +' .�&�� � +' /Q���:� ,' 4�������8� R' .�� � '���� ���������- ���- �666� 1.� ��'<%�= M�@� /�&���: � � "4 ������ 4 ���& �I� !&' R' .�� � �@� 4� ��� ��'� ���� @���� $(($'<%$= H' H :����� ��� ,' !�*����� F' N' @�A����� +' /Q���:� R' .�� � .' F��&� %���� B- �660� .@�

-�%'<%-= @' �' +����&� G' F ��� �� �' ����� �' O��� !���- &���- ���� �661� @@� $??'<%%= G' F ��� �� �' H���� +' @� ���� �' ����� !���- &���- ���� �66�� @5� �5?$'<%�= �' O' �� ������ �' ����� �����- B- &���- �660� >=� 5��'<%?= �' ����� )' N��� ��� B' @' +���A�� 4' ��&���Q& �� +' @� ���� �' O��� @' �' +����&� N'

30������� �' /���� )' !� 8�&�"!����A��� !���- &���- ����� � �� �������'<%#= �' ����� N' F�& ��� O' D' ��� �� �� O' .' +���� 1�� )' /�� ���� �' O��� .' �� � �� �' /��� �

/' 3�&� �� !���- &���- ���� /553� @4� $(--'<%5= +' @� ���� O' D' ��� �� �� F' . ���� �' O��� �' ����� !���- &���- ���� �66�� @>� $�##'<%�= 4' �' ,���&���� H' ' @�& �� /' +' 3 ���� F' F����� �' N� �8� @' 3� �� �� �' ����� &������&���

�66�� ?� �-%�'<�(= �' ����� ' ,� � N' F�& ��� �' O��� ���$- &���-� �- ��- /555� 0@� ����K ���$- &���- /555�

...� �#(('<��= G' @����� F' . ���� �' ����� !���- &���- ���� �66�� @5� $?�-'<�$= G' @����� F' . ���� +' ,' ������ @' �' +����&� �' O��� �' ����� ���� ��� ������� & � ����� !)/"

60����� $((%'<�-= �' G' /��:� 4' ��&���Q& �� @' S � ���� 4' N���� �' ����� &���- ������-� ������� &'

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((�� %��

<�%= �' H�� +' @� ���� �' .�� �� �� !' ��� ������ )' N��� ��� 4' +������ N' /���� �' ����� �'/�� �� �- �������- ����- ���������- �66�� 05=� ��'

<��= �' ����� .' ��� �� �� +' �� �� �' /�� �����$- &���-� �- ��- �66�� ?1� ##?K���$- &���- �66��..>� 5(('

<�?= +' �' �T�� �' !' /���� +' .' :��� 3' � � � )' ��� ��� O' ' � &� � B- ,��- &���- �66�� ?5� ��?#'<�#= �' !' /���� 3' � � � )' ��� ��� O' ' � &� � B- ,��- &���- �660� ?=� %���'<�5= +' �� �� �' ����� !���- &���- ���� �66/� @?� ��5�'<��= !' ,' 4��� �� U' 3��� /'" ' . � �' 3 ������ ' /' F ��� ������ �666� ?4?� �?�K !������J ������

�666� ?4>� $�5'<?(= 4' @' . 4� � O' �' G��:� !' ,' 4��� �� �' 3 ������ ' /' F ��� B- ��- &���- ���- �66�� .1?� ?5$('<?�= )' .' @���� � !' ,' 4��� �� �' 3 ������ ' /' F ��� B- ��- &���- ���- �66�� .1?� �$##%'<?$= +' ,' ������� �' 3 ������ ' /' F ��� B- ��- &���- ���- �660� .15� ?5%5'<?-= �' ����� O' D' ��� �� �� ' ,� � U' ������ 3' G' �� F��� � � !���- &���- ���� �666� @0� -%'<?%= ' ,� � 4�'�' )� ��� H� �-$(-� !)/"60����� ����'<?�= �' ����� ' ,� � N' F�& ��� F' F������&� )' /�� ���� �' O��� O' .' +���� 1�� O' D' ��� �� ��

.' �� � �� �' /��� � /' 3�&� �� !���- &���- ���� /554� @.� �-$'<??= F' F������&� ' ,� � �' ����� !���- &���- ���� /554� @.� �5#'<?#= 3' ' /�&���:� O' !' ���� ����� ���- �������- /532� =.� $?('

�������� 6������� 1.� 144?

�/!+� )@B C �����D!@ �)B ; D�' $ 9$((��%$(