Biochemical and histochemical analysis of 71 kDa dystrophin isoform (Dp71f) in rat brain

16
acta histochem. 103, 209±224 2001) Ó Urban & Fischer Verlag Biochemical and histochemical analysis of 71 kDa dystrophin isoform Dp71f) in rat brain Carlos G. Garcia-Tovar 1, 4 , Armando Perez 1 , Jose Luna 2 , Raul Mena 2 , Beatriz Osorio 2 , Victor Aleman 2 , Ricardo Mondragon 3 , Dominique Mornet 5 , Alvaro Rendo Ân 6 , and Jose Manuel Hernandez 1 Departments of 1 Cell Biology, 2 Biophysics, Physiology and Neurosciences, and 3 Biochemistry, CINVESTAV- IPN, Mexico, Mexico; 4 Morphology Unit, FES-Cuautitlan, UNAM, Mexico, Mexico; 5 INSERM U 128, Montpellier, France; and 6 INSERM/Universite Louis Pasteur EMI 99-18, Strasbourg, France Received 8 July 2000 and in revised form 10 November 2000 and 28 December 2000; accepted 10 January 2001 Summary Dp71 is a member of the dystrophin family and the most abundant dmd gene product in the brain. In the present study, we focused on a short dystrophin transcript named Dp71f, which is alternatively spliced when exon 78 is absent The topographic localization of this protein in the encephalon has not been properly described yet, nor its cellular or subcellular localization, and even less its functions. Dp71f was found to be a cytoplasmic 70 kDa protein and localized in all encephalon regions studied. Double labeling using specific markers for various cell types confirmed Dp71f distribution in the cytoplasm of all cell types studied. Labeling was more conspicuous near the nucleus and diminished towards the periphery of cells. In some cases, we observed cells that were positive for actin and Dp71f in regions corresponding to lamellipo- dia-like structures. Dp71f and Dp71d isoforms were differently distributed. Our study is the first specific and unambiguous description of the topography and cellular localization patterns of Dp71f in brain, suggesting that Dp71f is a ubiquitous protein. Key words: Duchenne muscular dystrophy ± dystrophin isoforms ± rat brain ± Dp71 ± cytoskeleton Correspondence to: Dr. Jose Manuel Hernandez, Departamento de Biologia Celular, Centro de Investiga- cion y de Estudios Avanzados del I.P.N., Av. I.P.N.2508, Col. San Pedro Zacatenco, AP±14±740, CP 07360, Mexico, Me  xico; tel: +52 57 47 70 00, ext. 55 80; fax: +52 57 47 70 81; e-mail: [email protected] http://www.urbanfischer.de/journals/actahist 0065±1281/01/103/2±209 $ 15.00/0

Transcript of Biochemical and histochemical analysis of 71 kDa dystrophin isoform (Dp71f) in rat brain

���� �������� ���� � ����� �� ��� ����� � ������� ������

��������� � � ����������� � ������ �� �� ������������ ������ ������� � ��� ����

������ � ������� �!���� �� "���#� $���%�� &��� '(���� )�(� *����� +�����%,������� ������ "������ )����#� *��#�����-� .����/(� *�����0� "�!���)��#�1 �2� ��# &��� *��(�� 3�����#�%�

.�4������� �5 ����� +�����6� �+��4�6����� $�6������6 ��# 7�(����������� ��# -+���������6� �87�9: "��8$7� *�;���� *�;���< �*��4�����6 ����� �9:��(�(������� �7"*� *�;���� *�;���< 087:9)* � ��=�*���4������� ������< ��# 287:9)*>���!������ '�(�� $����(� 9*8 ����=� :������(��� ������

)����!�# = &(�6 � ��# �� ��!���# 5�� � 7�!���� � ��# �= .������ � < ����4��# � &��(��6 � �

�����

���� �� � ��� � �� ���������� ����� ��� �� ���� ������� ��� ��������� �� �� ����� �� �� ����� ������ � ����� �� � ����� �������������������� ���� ���� � ����� �� ����������� ������ ��� ��� �� �� ������ ����������� ������������ � ���� ������ �� �� �������� ��� ��� �������� ������ ��� ��� ��� ������� �� ��������� ������������� ��� ����� ��� ��������� ���� ��� ���� �� � ����������� � !�� ������ ����������� �� ��� �������� ������ ������� ���� ������ ����� ���� �����!�� �� ������� ��� ���� ��� ���� ���� ����������� �� �� ���������� ��� ��� ���� ������� "����� ��� ��� ����������� ��� �� ������ ������������ ������� �� ������� � ����� �� ��� ����� � ����� �������� �� ������� �� ����� ��� ���� �� ������ ������������ �� ��������#���#��! ���������� ���� ��� ����� ��� ���� �� �� ����� ����������$�� ����� �� �� ���� ���� �� ��� ���������� ���������� � �� ������������� ������� ������������ ������� � ���� �� ����� ��������� ���� ���� �� ���%������ �������

��� ���� ������ �������� ��������� & ���������� ��� ���� & ��� ���� &���� & �����!����

������4��#���� ��? .� &��� *��(�� 3�����#�%� .�4�������� #� +������� ���(���� ������ #� 8�!����������� 6 #� 9��(#��� "!��%�#�� #�� 8$7� "! 8$7 �0 =� ��� :�� $�#�� @��������� "$����A� ��$ A-2 � *�;���� *�1 ;���< ���? B0� 0A �A A � �;� 00 = < 5�;? B0� 0A �A A =�<�����? �����C�������!����!;

���4?>>DDD(����5������#�>E�(�����>�������� 20���=�> �>� ->��� � F �0 >

� ���������

����������� '���( �� � ���� ����� � ������� ���� �� ��� �������������� �� ��� �� �� ��� ������� ��� ��������� ����������� ������� ��������� ������� �� ���� ������ ��� ������ ��� �������� ��� �)*� !�� ������� ������ ���� �� ���� �� ������ �������� ���������'�+�( ',� ��� �� ���� �-��. /���� � ���� �-��(� +������� �� ��������) ������� '/���� ��� /��!�� �-- � "��� � ���� �--*. +���� � ���� �--*.0������ � ���� �--). /���� � ���� �--). 0������ �--1(� ��� ������������ ����� ������� ��� ����� ������� '"��� � ���� �--*. 2��!��� � �����--3( ��� ������� ��� ������� ������� ���� � ����� � ���������� ���#����� ���� ����������#��������� ������� '�45�(� 6��� �������� �� ����45� ��� � ��#�45 ������ ���� ���!� �� ����������� ������ '�������(��� �� ����� �����!���� '7������ ��� 0������ �--�. 8���!� � ���� �--*��--)(�

�+� ��������� ��� ��� ���� ������ �������� ���� �� �� ���� ����#����� ���� ���������������� �������������� �������� ������ � ������ ������������ �������� � ������ ,����� ��� ��� �� ��� ������� ��� ������� '2����� �--1(�

4 �� �� ��� �� ��� ����� ��� ���� ������� ������� �� �������� ���� ����������� ���� �� ��� ���� � �� ���������� �����9 ��� �� ���� �� ����� � �� ��� �� �� �� ������ � ����� �� ����������� ������ �� �� '4�� ��� /��!�� �--:(� ;��� ���� ��� �� ���#����� ��� � ����� ��9 ����� ����������� ��0 '6��� � ���� �--�. 0��!� ���� �--:(� ��5 '<���!� � ���� �--*. ,���� ��� ������� �--*. <���!���� 6������� �--1( ��� ��" '=����� � ���� �--)(� ;�� ����� ��� �� ���#����� ��� � ����9 ��*3 '�>8���� � ���� �--1. ����!���� � �����--3(� ���) '"���� � ���� �--1. ���? � ���� �--�(� ����3 '6��� � �����--:. +�������� � ���� �--:. ����� � ���� �--1. ������ � ���� �--1.2���� � ���� �--3(� ���� '6�� � ���� �-- . ,����� � ���� �--*. "�� �� ����� �--*( ��� ��)1 '������ � ���� �--:(� ��� ������� ��� ���� ������ ���������� �������� ������� ������ �� �� ������� ������� ';�� � �����-�-(�

�� ����� � �� ��� ����������������� �� �+� ������� ��� �#������ � ������ ��������� �� ������� ���� � �� ��� ��� 8��� ��� � �� �+� ������� ����� ����� � ������������ �������� � ������ �� ���������� ���� � �������� �� ���� ����� ����� � ���� '6�� � ���� �-- .,����� � ���� �--*. "�� �� � ���� �--*(�

"�! � ��� '�--:( �������� ���� ��������� � ����� 502 �������� � �=4������ ��� �+� ������� �� ��� ������� � ��� � �� ��� ��� ������ �%��� ��� � �+�� 6�!� �������� ��������� '6+�( '+���� �-�)(���� ���� ���� ���������� � �� ��� ������ ��� �� �� ������� ������������ ��� ��������� ���� ������������ �������� � ����� "�� �� � ���'�--:( ���� ���� �� ���� ������� �� ������ ��������� ��� �� ������ ���� ��������� ������ ��������� ���� ���� ��� �� �������� �������

��� � � ������� �!�� �� ��

���� ������ ������� ���� �������� � ���� �� ��� � ��� �� ���� �+� ��#������ ,����� "���� � ��� '�--1( ����� ���� ���� � �� ��������� ����#����� ���� ������������ �������� � ����� �� ���� ��� ���� )) ���1*� 8��� � �������� � ��� ��*3 ��� ���) ��������� �� ��3 ��� �� !���������� �� ��� ������ �� ������� �������� ���� ���) �� ������� �� ���#����� � ����� ���� ��*3 & �� ���� ������� � ��� & �� �� ��?�� �� �#����� �� ������ +������ � ��� '�--�( ���� ������� ��� ������������ �� �������� ���� � �� �� ���� ��� ��������� ���� �������� ��������� ��� ������) ��� ���� �� � ���� $� �� ���� ����� ,���� � ��� '�--*( �#����� ���� �� )* !�� �������� ��� � ��� ���� �� ������������ �� ���� �#���� �� ����� ��� ������� �������� ��� ��� ������� �� �������� ������#���� ���� �� �� ���� ������� � ��� ����� �� �� ���� ��� ����������������� ��� ��� ������� �� ������ �� ��� 3:� 4 )�* ! ���������� ������� �� �� !�� ������ ����� �������� �� ������#���� ������ ��� �� ������� ��#����� ������ � ��� �� ��� �� � ���������� ����� ����� �� �� =#�������'6�� � ���� �-- . ,����� � ���� �--*. "�� �� � ���� �--*(� ���� ��� � ���� �� ����� �������� ����� �� �������� ��������� ����� �!��� ���������� !����� ������� ����� ��� ����� �� �� ��������� ���� �� ����� �!�#��� ����� '6�� � ���� �-- . ,����� � ���� �--*. 2������� � ���� �--* . +�#���� � ���� �--:. ����� � ���� �--1. <���!� ��� 6������� �--1. ,������ ���� �--� �. ��!��� � ���� �--�. 4������ � ���� �---. 0�������� � �����---. "���� � ���� �--- �. 6��! � ���� �---(� ���� ��� ����� �� �� ����������� � �� ��� �� ������ �������� '2������� � ���� �--* �(� ��#����� ��� �� ���� �� �� ��������� '@��� � ���� �--:( ��� ������ �����# ��� ��� ���#���� �� �������� � �� ������� '8��� � ���� �---(� ������� ���� ���� �� ������������� ������ �� ��� ������ '��!��� � ���� �--�(�

0������������� ���� ������������ � ���� �� �� ��������� ��� ���� ������� ���� ��� ���� �� �� ������ ����� '2������� � �����--:. @��� � ���� �--:. ������� ��� $����� �--�. 4������ � ���� �---(��������� ������ ��� ������������ '@��� � ���� �--:(� ����� ��#��! �����#���� ',����� � ���� �--� . ,����� � ���� �---(� �� ��� � ���� �� ������������ ��� ���� � ����� '0�������� � ���� �---( ��� ������� '�#���� � ���� �--1(� 2������ 6��! � ��� '�---( �� ���� ��������� ���#��������� � ��� ������ ��� ���� ���� �� ����� �� ���������� ����#� �������� ����� ������� �������� ������� ������������ ������� ������� �� ������������ �� �� ���� ��������

�� ����� � ���� ��� ������ ��� � �� ����� � ���� ������ ������������ 7�������� � ������� ��� ���� �� �� �� �� ������ �������� � ���� �� ��� ��� ����� ����� ������ �� ������� �������� ��� �� �#����� ��� ��� �� �� ���� '�� ��� ������ ��� �� ��� � ���(� 4�#���� ��� ��� ���� ���� '���� ����� �%���( ��� �� ����� � :� ��������� ������ ������ � �� �������� ���� �� ����� ������ ���� �%��� �� �#������ �� ���� ��� ��� ��� �� ����� ��� ��� �� �� ���� ��� �� ��������� ��� �� � ��� '/������� � ���� �--). 4����� � ���� �--1(� �������������� ����� ����� � ���� ��� ��� '���� ( �� ��!�����

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ���

�� ���� �� ������ ���� ����������� ������� �� ���� ��� ��� ���� ��'��(#������� ������������ �� ������� ��� ����� � �� ���� ������������� ������� ��� �� ��� ������ �� �� ��������� ������� ������� ������� �� ���!�� �� ������� ��� ��� ������ A��� ���� ��������� � ������ ��������� ���� ���� �� �������� �� ������ � �� ���� ���� �������� ��������� �� ��������� � ������ ��������� ����������� ������� � �������� ���� �� ������� ������� ���� � ��� �����

������� � � �����

��� ���� � ��� ������� ���� ��� ��� �� ������ �� ������ ��� 8���� '8�� "����+$� B84(�

���������� +��������� ������� ������� ���� '1;:( ��� ���������� ������� �������� ��������� ����� ���������� �� ���� :� ������� ������ � ���� ';������ � �����--)(� ���* ���������� ������� '=���������� =�����#����#���� B/( ���� ��� ���#������� ��������� ��������� ����� �� ��� ���� � 4 ���������� ������� ��� ���� �������� ��� �� ��� '����#6������ � ���� �-�-(� A ��� �� �������� �������� �� ����� ��� ��� ��� ����9 ���������� ���� ����#����� ���� �� �#����� '=87( �� ������'6������ ;���� 0��� 04� B84(. ���������� ���� ����#����� �������� ������ ������'<;45( �� ���������� ��� ���������� ����#������� �������� ���������� �� �����#���������� ����� ��� !����� ������ � ��� 4� 7������� � ��� +������� B0"4� "��4���� 04� B84 '7������� � ��� +������ � ���� �--�(� �2��0#���� ���������� ������ �� ��������� ;#������ 8������� �������� ���� � ��� ��9 ,25#� ;��0# ����2��0#���� ���������� ���� ����#���� ��< ��� �2��0#���� ���������� ���� ����#���� ��< 'C���� 8�� ;�������� 04� B84(. ;��0#���� ���������� ���� ����#������+ 'D����� 6�������� 04� B84( ��� ���������� ���� ����#���� ��< ������ �� � ������ ���������

������ ���� �� ���������� �������� 6����� �� ����� ��� A����� ���� ���� ���� ����� ��� ���� �� �����#�������� ������ � ������ ���������� '* ��E!���� �����(� �� ����� �� ������� �� ����� �� ��� ������ '����� ��������� ���#�� ���������� ����� ���������� ����� ������������ ������� ���� �� ��������� �������� ������ ������ ��������� ��������� ����������� ������ �������� ��� ��������#���(� 7��� ����� ��� �������� ��������� �� �1 �+ ����#,0�� �, 3��� ����������* F �������� �1F 8�8 ��� 1F *#������������� ��� ������ �� ����� ��� ���:� �� * ���� 4� ���%��� ��� �� ���������� ��� ���� �� ������������ ������ � * � '�E� � 9 �( '"������ �-� (� ��� ������� � ������������ �� ������� � F������������� ��� ���������� ��F 8�8� 5������ �� ����� ��� �� ������������������ '=0( �� ������ � ����� � ��� '�-�-(� �� =0 ���� ���������� �� ���#���� �� ���!� �� 3 ��� ���� 1F ��� �� ���! �� 568 ���������� � 1F ���#* '568#�( ��� ����� ���� 568#� '� ��� ������� ���� ��� ��� ���������� �� ��# ���� �� ���� ���(� 4� ���������� ��������� �� * � ���� *�1F *#������������� ��568 '�� ���� ��!������ ��������( ��� �� ���� ��� ��� ���� �� ������������� ���� 568#�� �� =0 ���� �� ������� �������� �� ) �0 ���� �� 1;: ����#��� ������ � 9 1 �� 568#�� ������ � � 3 ��� ��������� �� ���� ��� ���� �� 9 ) �������� � ���������� ��������#���?����� ���� ����#���� ��< �� � �����#��� ��������

0������������ ��� �� ���� ����� �� 70" 8���� '4������( ��� G#$��� ��� '/���!� 2������ =H� B84( ��� ���� �� ������ ���� �������� �������4���#����� ��� ��� �� ������� ������� �� ��� ��������

��� � � ������� �!�� �� ��

���� �������� 5������ ������� � ���� � �� �� ��� ���� ������ ���� �� ���������� ��� �#���#��� ���� �� ������� 0��� �� ������� �� �+7+ ����� ���#������ ���� * F ��� ���� ���� ��� ����� ���������� ������� �* �� ���: �� ��� ������ 0��� �� ��� ��� ��������� �� �� ��� ����� �� :� �0 ��� �F0$*� 4 �� *) �� ���� �� ����� ������ �* ���� �� �+7+E,��>� ;�* ����� '� 9 �(��������� ���� ������� '� ��E��(� ����� ���� '� ��E��(� ��������� '3�*� ��E��(��������� '�3�� ��E��(� ������ ����� '1��- ��E��( ��� 1 �+ ,���

��� �� ��� ������ ����������������� ������ � 0��� ������� �� ���� ����� �� ��� �� * ��� ���� �F �# ��������� �� 568 '����� ������� ���� ��� ��� �����#����� �� �� ���� �� ���� ���(� 4 �� ������� ���� 568� ���� �� ������������� �1F ������ G� �� 568 �� 1 ���� ��� ������� �� ���������������� ��� ���!����� �F ���� ���� ������ '684( �� * ���� 0��� �� ������� �������� �� � ��#��� ����� ���� �� �������� '�������� ��������( 1;: ������� �� ) �0� ������������� �� �������� ������� ';��0# ���� ����#����#���� ��<� � 9 : ��������( �����3 ���� �� ��� ����� ��������� ����� '1 ��E��( ��� ������ �� 1 ��� �� ����� �=4�0�� ����������� �� ������ �� ����� ����� � ����� ������� '+�������� 8�� "����+$� B84( ���������� �1F �#�������������

;�� ���� ������� �� ��� �������� ��� ������ �� � �� ��������� ���� �� ��#������ �������� ���� �� ����� ���� 568� ���!� ����� ���� �F 684 �� 568 ��* ��� ��� ��� ������� ���� �� ��� ������� ������� �� * �� 0��� �� ����� ����568 ��� ������� ���� � � 9 ) �������� � �2��0#���� ����#����#���� ��< ��������0��� �� ��� ������ �� �������� ���� �� ���� �� ��� ����� ���� ������ ���������� ���� ��� �������� ��������� �2��0#���� �������� ������� ��� ��� ��#���� � ;��0#���� ������� �� ����� � �� ������� 1;: ������� ��� ���� ����� ������ ������ �������� �� ����� � ���������������� � ��� �2��0#���� ����#����#���� ��< �������� ������� �� ���� 1;: ������� ��� ;��0#���� ���� ����#��+ �������� ������� �� ���� 4*61 �������� ����� �������� �� ����#������� ����#���� ����������� ;�� ���� �������� � ���� ��� ������ � ��� �� ��� ���������� � �� ��������� ���� �� �������� ������� ���� �� ������� ���� �2��0#�������������� �� * ����

0������ ���������� �� ����� ��� ���� ������ ���!� �� ������� ����������������� ������ ���� ���������� 0�� ���� �������� ���� ���������� �������� ���

�� ���� ����� � +20#3 '6��#2��� A�� ���� B/(� ������ �� � =�!�� ������� '=�!���@����( �������� ���������� �� �� * �1&� �� ��������� ������� ����� �� ��C#�������� �� ������� ����� �� ������� ���� � 3 � �?����� �� * ������� � ���� ���� ���� �� ������ �������������� ����� �� ������� ����� �� 0�#��� �� ���� ������� '6��#2��(� ;���� ����� �� ������ �� � 7���� 8����� �) � ������ )) ��� '7���� +���� 8�4� � 0�D�� +����( ��� ,5 ����� ���� '0��)34. ,����#5��!��� � +I���� 8�4� � 0�D�� +����(� � �� ��������� ��� �� 0�� ���� 4��������'�� )� *. ��������� ���� 0���! 6��?� +��������� +=� B84( ��� 5�������� �� ����'�� * . +������ �� 2����� A4� B84(�

�������� ������� � 0������ ���� �� ��� ���� �F ���� ��������� ��� ��F������������ �� 568 �� 3 ��� �� ���� ���� ������ ���� �1F ������ G#� ��568 �� 1 ��� �� ���� ���� ��� ��� ���!� ���� �F 684 �� 568� 0��� �� ��������������� �� ) �0 ���� �������� 1;: ������� ��� ��� ������� ���� � � �� �������������#���� ���� ����#���� ��< �� * � �� ���� ���� 4 �������� ���� �� ���� ������� *�1F ������������ �� � � �� �� ������ � ������� ���� �F ������ ����#���� �� : ��� ��� ����� ��� 568 ��� ��� ��� ���� ���� ���� �������� ����� 0����� ������� ���� �F ������ ������ �� ���� �������� ���� �� �1 ��� �� ���� ������������ �� �� ��������� ���� � ������ ��� ������ ���� ���� 8���>� ���� '7��#���� +��������� 8����� ;��� A��������� 54� B84(� ���� ������� �� ������ ���� �2����#@��� �������� ��� ������ ���� ������ ������ 8������ �� ������� �� � * 7G

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ���

������������ ������ ��������� '@7$"� ��!��� @����(� ����� �� ������ ����� 7��#���� ���� ��� '))�-. /���!(� ��� ����� ��� �� ������������ ���� '/������ ��20 ;) ����. /���!(� ���� ��� �� ������� �� ������ ��� �� ��� ���� ������

���������� ��� 0���������� ��� '0<( �� ��� �� ������ � 5���� � ���'�-�)(� �� �� � ����� ��� �#���#��� ���� �� ��������� �� �������� ������� � �') �+ ����#,0�� �, ��)� ���������� �1 �+ 4�5� �� �+ 7��4� ��� � �+ *#�������#������(� �� �������� ��� ����� ��� �� � � �� �1 ��� �� ) �0� �� ���� '5�(��� ���� ��� �� ���������� ��� ��� ����� ��� �� � � �� - ��� �� ) �0� ������� ���� '5*( ��� ���� ��� �� ���������� ��� ���������� �� � �� ���%���� ���������� �� 3 ��� �� *1 �0 �� ����� 0<� �� 0< �� ��!� ���� � ����� �� �&* ��� ��� ����� ��� �� � � �� � ��� �� � �0� �� ���������� '8=( ��� ������� �� ���� ��� �������� �� �������� ������� � � ���������� �1F ������ G#� ����� �������� ���� ��� ��� ����� ��� �� � � �� � ��� �� ) �0� �� ����#������ ��� ���� ����� ������� 'A;( ��� �� ���� ��� ���� ����� ���� 'A5(��� A5 ��� �� �����#������ ��������

�����

������ ���� ������� A ������ �� ��� ���� ������ � A���� ����������� �� ���� ���� � A ���� ���� �� ���������� ��� ������� � ���#�� ��������� ����� ���������� ����� ���������� ����� ������������ ���#���� ���� �� ��������� ���� ���� ������ ������ ��������� ��������� ���#�������� ������ �������� ��� ����������� ';��� � ���� 6 �� +����������(� �� ���������� ������� ������� ���� �������� �� ���������� � ������ �������� ����� � � !�� �� ��� ���� ������ ������� ��������� ������� ����� ��� ��� �� ������� ��������

���� �������� ����������� �������� 5������ ������� ���� ��� ��� ��#������ ������ ������ �� ��?��� �� �� ������ �������� ����� ������� 1;: ������� �� ���� ���� � 4 ������� �������� ������ ��� ���� ��

��! � � ������� �!�� �� ��

"�#$ �$ .�������� �5 .4A�5 �� �;������ 5�� #�55����� #�������# ������� �5 ��� ��� �����(���� G������ �������� 9;������ D��� ��4�����# �6 :.:�$"�9 ��# �����5����# �� ���������(����� "��������� ��# 0�- ������#��� D��� (��# �� #����� ����� ��# .4A�5� ���4����!��6 *�����(��� D����� ��H��� ��� ��#�����# �� ��� ��5�� ��# ��� ����� ������4��# �� ��� 5����D����;������? �%� ������!� ������� �� D���� ��� 4����6 ������#6 D�� �����#< ��� �����; 5���������< �&� �����; 4���������< ��� �����; ��4������< �'� �����; ����4������< �"� ��������(< �(� �(���(� ��5������(�< �)� ���(� 4���5����< ��� �(���(� ��(#��(�< �&� �����(�< �*� ������4�����<�+� �#(��� ���������< ��# ��� ��44���4(�

���� � ��� ������ ����� ;��� * ����� ���� ��� �� ������ ��������� ��������������� ������������ ��� ���� �� ��������� ���� ��� ��������� ����� ���� ��������� � ���� ������� � �������� �������� ������� �� ��� ���������� �� ��������� ����� ��� �� ��� ����� ������� �� ��� �������';��� * �&�(� 4������� � �������� ������� ������� � ���� ��� �� �������������� ���������� �� ����� ������� � ���� �� ��������� ���� '��#��� ;��� * (� �� ��� ����� ������� �������� �� �� ������� ��� ������� ���������� �� ������� ��� �����������#��! ��������� ';��� * � ��� �(� ��#������������ ������� �� ���� ��� : �� ��� �������� ������� �� ����� ��������� ������ ��� ����������� �� ��� �� ���� �� ��������� ��#���������� �� ���������� ���� ������ �������� ���� ��������� �������� ���� ���� ���� ��� ����� �� �� ��������� ��� ������������ ���� ���� ������ '���� ��� �����(�

������������� ������������ ����� �� ���� �� ���� ����� ���� ����������� ���� ���������� ������� ��������� ���������� ������� ��� ��#

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ��,

"�#$ �$ '�����%����� �5 .4A�5 �� 4����6 �(��(��# ����� �5 ��� ����� $����6 �(��(��# �����5�� #�55����� ������� �5 ��� ����� D��� ������# 5�� ��#����� �(��5�(��������� (���� ��������.4A�5 0�- ��������� ������#6 ����� D��� ����6��# D��� � ���5���� �������� ������������4� �� 4����� ���D ����� �������# 5�� #�55����� ����� �������? ��� �(���(� ��(#���(�< ��� �����; ��4������� ��� ����� ������4��#� �� � !������� �4����� ���� �����D���# ���#������ ��� �(����� �����< ��� ��44���4(� �����D���#� ��#����� ���((������ �5 ����� ����� 4���4���6 �5 ��� 4���������< ��� �(��(� ��5������(� �����D���#� ��#����� ���((�������5 ����� �� ��� 4���4���6 �5 ������4�#�����H� ���(��(����< �� ������!� �������� �� D���� ���4����6 ������#6 D�� �����# +���� � �

���� ����� �� 1;: ����#���� �������� <��� ��� ��� ���� �� �� �#��� ��������� �� �� ��������� ������� ����� � ����������� ���� ����#���� �� �����!���� ��������� ';��� :(�

!����� ������� �� !�"#�� 7�������� � ���� �� �� ��� ��� ���� ���#���� ��� ������� ������� ��� ���������� � ���� �������� ������ ������� 1;: ������� ��� �� ��� ���� �� �������� ������� ������ '�#�����(���������������� '4*61( ��� ��������� '<;45(� A ���� ���� ���� �������� �� ��� ��� ���� ����������� �� ������� �� ��� ����� ���� 1;: ����#��� ��� ����#�#����� ������� ���������� ';��� ) � ��� (� �� ��� �����#��� ������ ��� ����� �� ��������������� ';��� ) � ��� �(� =�� ���� 1;:������ ��� ��� ���� ';��� ) �(� ����� 4*61 ���� ����� �� ��� ���';��� ) �� ��������(�

4�������� ����� � �� ��� �������� ������� �� ������ ������ ����1;: ������� ��� �������� ���� <;45 ����� � ������������� ����������������� ';�� ) ��� (�

!����������� �������� �� !�"# ������ $!�"#� ��� !�"#�%� ���� �������� ����� �� ��� ��� ��� �� ����������� ��� ���� �� ������� �

��- � � ������� �!�� �� ��

"�#$ �$ '�����%����� �5 .4A�5 �� 4����6 �(��(��# ����� �5 ��� �����; 5�������� D��� ��� (���5 �(�����# �������� �������46 ��8�� D��� ������# D��� 0�- ������#6 ��# #������#D��� � � ������#�� ���#�������# ���� ������(�� 8�� $����� ���D #�55����� ������� �5 ����� ��� �(���(� �7�< ��� ����(��� ��#�4����� �����(�( ��9)�< ��� �������#��� �*� ���#4�������� ��� ��#�����# D��� ����D���#� $���� ��� ���D� ��� ������!� ������� �� D���� ���4����6 ������#6 D�� �����# +���� � �

A���� �������� ����� ��� ��#���� �� ���� ����� ';��� 1 �� ��� 7(� ������� ���� ��� ��� ��� ��� ';��� 1 � ��� 4(� 4����� ������ �� �� ���� �#���� � �� ����� ��� ��� ���� �������� � �� ������� ���#* ';��� 1 ����� 7(� ���� ������ ��� ������ ������� � �� ��� ��� ����� ���� ��#���� �� ���� ������ 4���� ��� ������ �� ��� �� �� ����������� ���';��� 1 �� ��� 7(�

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ���

"�#$ !$ '�����%����� �5 .4A�5 �� #�55����� �������� ���� �64�� �(��(��# ����� D��� ������#D��� #�(������������ 7�(���� �5 ��������(D��� ������# D��� 0�- ������#6 ��� ��# �����7:9 ������#6 ��� ,����#��#�������� �5 �����;5�������� D��� ������# D��� 0�- ������#6 �����# "�+0 ������#6 ��� ������#��#������� �� ���#�����# �6 ����D���#� "�����6��� �5 �����;5�������� D��� ������# D��� 0�- ������#6 ����# �������"$ ������#6 ��� �� ������!� �������� D�� 4��5���# �� �� ��� � �#��� ������D�� +���� � �

"�#$ ,$ G������ ���� ����6��� �5 5�������� �5 ������� �5 ��� ����� �������# �� �6��4��������� +����� 5�� = #�6���# ���� D��� �������%�# �� �������� �(55�� ��# 4�������# �� ������� �6��4����� ���� �� 5�������� D��� ��4�����# �6 :.:�$"�9 ��# �����5����# �� ����������(���� ������ �� 4������� D��� #������# (���� .6��� ������#6 5�� .4A�# �4���� ��� 0�-������#6 5�� .4A�5 �4���� �� ��# ���������� �4���� �� �� ����(��� D����� ��H��� ��� ���#�����# �� ��� ��5� '���� ������4��# �� #�55����� 5��������? �%� 5���� 4����� �$��< ��� �����#4����� �$��< �&� �(4�������� �:7�< ��� D����# 5������� �G��< �'� D����# 4����� �G$� "���D��� ��� ����� ��#����� .4A� �.4A�# �� 4���� �� ��# .4A�5 �� 4���� �� ��# ����� �4���� �� �� ������!� ������� D�� 4��5���# �� �� ��� � �#��� ��� ���D��

���� �������� ����� ���� 1;: 4 �� ���#* �� ���������� �����2��0#���� ����������� ������ �� �� ����� ���� ����� � ���������������� ������ �� ��� ��� ��������� ���� ����� �� ����� ��� ';��� 3 � ���(� ����� �� �������� ����� �� � ���#*� ��������� ������ �������������� ����� ��� ';��� 3 � ��� �(� ;��������� ��� ���� ����� ���� ��#�������� �� �� ���� ��� � �����������#��! ��������� ��� �� �������������� ����� �� �������� �� �� ����������� ������������ ';��� 3 � ��� � �����#����(�

���������

���� ��� � ������ �� �� ���� ������� ������� �� ������ ���� ��������� ��������� ����� 4 ����������� ��� �������� � ���� ������ �������� � �� ���� ��� �������� �������� �� ��� !���� ���

��. � � ������� �!�� �� ��

"�#$ -$ .�55�������� ������%����� �5 .4A� ���5��� �� �(��(��# ����� �5 ��� ����� $����6 �(���(��# ����� �5 ��� ����� D��� ������# 5�� ��#����� #�(��� �������� (���� 0�- �4���� �� �� .6����4���� �� ������#��� ��# )8 ��������# 4������#�� �4����� � ��# �� ����� D��� ����6��#D��� ���5���� �������46 ����� D��� �������# 5�� ��� �(��(� ��5������(� �4����� � ��# ����# ��4���4(� �4����� � ��# �� "���D���#� ��#����� ��������%����� ����� �5 .4A�5 ��#����� �� ������4�#�����H� ���(��(��� �4����� � ��# �� "���D���# ��#������ ��������%��������D��� .4A�# ��# ����� �� ������ 5����� �4����� � ��# �� �� ������!� ������� D�� 4���5���# �� �� ��� � �#��� ��� ���D�� +��� � �

A ����� ���� �� ����� ���������� ���� �� ����� �� ��� ������ � ���������� ���� �� ������� ';��� �(� ��� ���� �� ������� �� ���� �#����� � @��� � ��� '�--�(� ���� ���� ��� ��� �� ������� ,14: ������������� ��� �� �������� ��������� ��� ���� ��� ����� 8������ ������ �������� � 6��! � ��� '�---( �� ��� ��� �� * �33 �������� ����� �� ��#����� �� �� ���#* �������� �� ���� �������� ��� �� �������� ���� ���� �6��! � ��� '�---( ����� ���� �� ������ �������� ������ �� ��������� ���� ��� �� �������� ������ �� ����� ,����� <���!� ��� 6������'�--1( ���� � ���� �� ������������ � ���� �� �� ����� ������� ��� ������ �������� ����� �� ��� ������������� ,����� ������� � ���� �� ��� ������� ��� �� ����� A ������ �� ���� �� �������� ���� �� � ���� ����#��� ������ ���� A���� ������� ��� ������������ ��������9 ���� ��� ��#��� �� ��� ������ � �� ��������� $� ���� ����� <���!� ��� 6������'�--1( ��� ��� ��� � �2=4 ������ �� ��� ������ ������� ���� �� ��� ��#���������� ��� ������ ���������� '8�� � ���� �---(� �� ��� ��� ��������� ������� ������ �� ��� ���� �� ��������� <���!� � ��� '�--�( �#����� ���� �� ��� ������� ��� ��� �� �� �� �� ����� ���� ��&�) �� �#���� �� /������� � ��� '�--)( ��� 4����� � ��� '�--1( ��� ��� ��� �� �#��� �� �������� ��� �� ��� �����

2������ "���� � ��� '�--- �( ������ � ��� �� �� ����������� ���#��� � ���� �� ��� ����� ��� ���� ���� ��� ��� %������� �� ��������#���� � �� ������ �� ���� �� ���� ����� �� �� ����� ������ � ������ �#����� ���� �� �� ������ ���� �� ������� � "���� � ��� '�--- �(� $������� ����� ��%������ ������������ � ���� �� ��� ���� ';���� � ��� *( ����� �� ������ �� ��� ��� ���� ����������� ��� ������� ��������� ��� �����#���������� ';��� )(� �� ��������� � ���������� ����������� ������������ ���� � ������ �� �� �������� � �� ������ ';��� *(� $�� ������ ��� �������� ������ � ����� � ��� '�--1(� ��� ���� ���� �� �� ������� � ������ ��� �������� ��������� � �� �������� ���� �� 1;: ��������

�� ���� ������� �� �� ������� ���� � ���� ���� �� ���� � �� ��������� �� ���� ������� � 2������� � ��� '�--* (� ������� ���� ��������#���� �� ������ ��� ��������� ��� ������� ������ ��� ���� ���� �� ���������� �� �������� ���� ������� �� �� ���� �������� '��0 �� ��+( ��#���� �� ������� 8���� � ��� '�---( ��� ����� � ����# ��� ��� ���#���� ���������� � �� ���� ������� �� ������ �� ��������� ���� �������������� �������� �� �� ��������� '@��� � ���� �--:( ����� ������ ��� �#������ �� ���� ������������ �� ��� ��� ���� ������ ��� ��� ��%������ ������#����� �� ���� �� �� ������ ���� �� ����!���� ��� � ������� � ���� '"�� �� � ���� �--:( ��� ���� �� ����������� �������� � ���� ��������� ������� ��� ��� ������ ����������� ��� ����� ������ '��!��� ����� �--�(�

A��� ����� �� ��������� ������������� ,����� � ��� '�--� ( ����������������� � ���� ���� ����� ��� �� 0$8#� ���� ����� ��� ���� ;���#����� ��� ������� ���� ���� �������� ��� �������� � ��������� ���������+������ ,����� � ��� '�---( ��� ����� ���� ���� ���������� ���� �����

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ��/

��� �� 0*0�* �������� ��� ����� � ������#�������� � ���� �� ����� ��� ��� �� �� ���������� A ���� ���� ��� ���� ���������� ���� ���� �� �� ��������� �� ��� ����������� �� ��������� ���� ��� ��������� ��#����� �� ������� � ���� A ��� ��� ���� �������������� � ���� ��������� ���. ������ �� ��� ���� � ������ ������� ������� � ���� �� �� �������� ����� ��� ����� �� �� ���� �� � �����������#��!��������� ��� ���������� ���� ����� ';���� * �� 3 � ��� (� ��� ������������� ���� ��� ������ �� �� ��� ��� ��� ������ ������� �� ����#����� � ����� �����������#��! ��������� ������ ���� 1;: �� ��� ��������� ����� ���� � ���� ����� �������� �� �� ������� $� �� ��������� �������� ���� ���#* ��� �� ���� ���� �� ���������� ���� ����� �#�� �� ��������� ';��� 3 � ��� �(� 4�������� �� ,����� � ��� '�---(� �� ���#��� ��������� ���� ����� ��� ����� ������

�� ���� �� ������������ ������� � ���� ��� ���� ��� �� �� ��������� � ��� ���#�������� ����� �� ������ �� �������� ������� ������� �� ������ 8������� '��� �� �� ����� �� ��� �� �� ���� ( �� ����������� ����� �� ������ ���� �� ��� ������������ ���� ��� �� ��� ������� ��� �� ��� ��������� �� �� ��� ��� ������������ � ���� ��� ����� �� ���� ������� ��� ������� ��� ���������� � ����� �����#��� �� ����������� ���� ��� � ���� ���� ����� ��������� ���� ���������� ���� ��� ������ �� �� ���� ����� �������� ��� ';��� 1(� ,�#���� � ��� '�--� � �---( ����� ���� ���� ���������� ���� ������ ������� ��� ��� � ������� ������� ���� ����� ���� �5�� ��� ���� ����� �#����� �� ������ � �� ����������� ��� ��������� �� ���� 6��! � ���'�---( ���� � ������ � ����� �� ��� ���� �� �� ����� � ���������������� ����� ����������� ���� �����!���� ���������� $� �� ���� ��������� ����������� �� �� ��������� ��� ��� ���� � ������ �����������A ���� � �� �� ������������ ����������� ������ ��� �� ������� ��������#������ ���� �����!���� ����� ';��� :(�

�� ������� ������� ���� ��� ����� �� �� ������ ������ �����#����� ������������ ��� �������� ������ '@��� � ���� �--�� �--:. 2�������� ���� �--:. 6��! � ���� �---(� ��� ������ ��������� ������� ���� ����.������ �� ���� ������ ���� �� ���!�� �� ��� ��� ��� ����� ������������� �� ��� ���� ��� ��� � ������

2��� ������ ��� ������� ����� �� �������� ��� ������������������� ��� ����� ���� � �� '"���� � ���� �--- . A����� � ���� �---(��� ���� � ��� ���� ��� B��� ��� � ����� �� �� ���� ���� � ��������� ����� ��������� �� ���������� � �� ������ ������ ��� ,����� �������� �� ����� � ��� �� �������� �� �������� ��� � ���� �� 'A��#��� � ���� �---(� +������ ���� ����� � �� 1;: ������� �� ��������������� �� ��� ������� ������� � �������� ����� ���������� :� ���������������� � �� ���� �%���� ���� ���� ������ �� �� � �� ������ ������#����� ������� � ���� �� �����

�� �������� � ���� ���� ���� �� ��%�������� ������ �� ��� ����������� ������ �� �� ��������� ��������� � ����� ��� �������� ��� ��

��� � � ������� �!�� �� ��

�� ��� ������� �������� �� �����������#��! ��������� ��� �������� ����������� � �� �������� �� �� ������ ����������� ������� � ���� ���# ����� ;����� ������ �� ��� �� ������ ���� �������� �� ��#������������������� � ���� �� ������� �� ��� ������ ���������

��&������ ����� ���� ���! ��� �������� �� ���� � �� 7������ 7������� 0����#���� '7�#0�-:# -�( ��� � � 0$=40H� ����������� '�11)*( ������ �� �� ���� �������A �� ���� �� �� ;�������� +��� ����� 5�� ��� 4������ 8����� �� ������ �����#��� �������� ��� +�� 7���� 0�� �� �� ��������� �������� ����!� �� ���� �� �� ��B+7#0�=D78�4D �� �� ��������� �� ��� ������ ������������� �������� ��� ��#������ �� 8����� <������ ��� +����� +��������� A ���� ����! ;������ =������#<����� �� ������� �� ���������� ��� ��!��� ������ �����������

�� ��

4�� 4,� ��� /��!� "+ '�--:( �� ���������� ��� ��������� �������� � ����������� =�� <���9 *�:&*-�

4������ @5� 0���� G� 2���� ;� ,���� <� ������� H� ��� +���� � '�---( 7�������� �������� ���������� ��������� �������� � �������������#�E����� �� �� ����� ����� � 4����#��� ����� '��������� ������ ��� @ �� 6��� ��9 �1&�:

4����� 20� ,����� 5"� �>8���� D=� /����� ,@� ��� 2�� 5= '�--1( 0������ ��� �����������#���� � ����������� ������ ��� ���� � ����� ,�� +�� <�� �9 �)�1&�)�:

6�� 8� 6���� 7� "�� C� =���� 8� H� �� ��� =��� B '�-- ( 4 ���� ������� � �� ����#�� �������� ��������� �� ����� ������ �� �� ��� �� !���� ��� ���� �� ��� ����������� ����� ������������ 6����� @ ���9 11�&13

6��! �@� ,��!� 2� 6���� +4� ��� 6��� 5A '�---( �� ��� ����������#��! ��������� ������ �� ������ ��� ����� @ 0�� 6��� ���9 3)1&31�

6��� ;+� 6��� 4,� ;�� 0� ��� /��!� "+ '�--�( ���������� �� ��������� �� ���� ���� ������� ������� �������� 5��� =��� 4��� 8�� B84 ��9 �*�3&�*�

6��� �@� "���� ,<A� ��� /��!� "+ '�--:( 4� ��������� ���������� ���������� ���� �� ���������� ���� =�� <�� �9 ��&��

0����� /5 '�--1( ��� �������� ����������9 ���� � �����!����#����������� ������ ���!#��� 0�� ��9 3�1&3�-

0�������� �� 2����� ;� ;������ +� ;������ D� 5����� 8� ��� �� ,� +���� �� ��� 2���� 4'�---( �� ������ ����������� � ����������� �� ��� ������ ����� $�������� D�� 8�� ��9�1* &�1*-

0��! 4� +������ ;� ��� 8����� 5= '�--:( 4 ����������#������������ ������ �� �������������� @ =������ ��9 ):1&))�

0������ /� +���� 5"� ��� 0�������� @8 '�--)( ������ �������� � �� ����������#����� ���#��� ������� ;768 "�� ���9 *11&*3

����� 0@� <�� ��� @+� +���� D� ;������ 7� ��� 5��� ; '�--1( ����� ������� ��� ����#������������� ������������ � �������� ��� ���������� �������� �� �� ��� �������� ����#���� ������ 4������� =������ �9 :)�&:)-

����#6������ ;� 0�������� "� H��� "� ,������ @+� �������� 2+0� 5���� 7� ��� 8��#��� @" '�-�-( ���������� � ������� ���� ����� ����� ������� �� ������ ������� �� D���� �9*��&*�)

������ ,0� 5��� �4� 0���! @�A� J�������� 2+� ��� ���!��� < '�--1( ���������� ����#���� �� �� ���� ���� � �� ������� @ =�������� ��9 3*1&3:*

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ���

����!���� �� ,����� +� =�� A� 8������ ;� ��� 4������ "D6 '�--3( ���������� ��� ������������#��������� ������������ �#������������� ��#������� �� ����������� ��������������� � �� ����� ������ =�������� ��9 3 1&3�*

�>8���� D=� =���� �+� +����� <7� /���� A� 5����� �4+� ��� 2�� 5= '�--1( 4 �������������� ��� ��� �� �%���� �� ������ ������ ���������������� ,�� +�� <�� �9�:�&�)*

���? +� @��� �� ,?��� �� 0����� /5� ��� 7!��� 5 '�--�( �������� �������� � ���) �� ������� � �� ������ �������� ��������� ������ ������ !���� ����������� �� 6������9 �13&�3�

7������ @+� ��� 0����� /5 '�--�( +���� ������������ � �� ����������#������������������ 0�� ��9 ��*�&��:�

7������� � ��� +������4� H��� @� +�0����� �� +����� 2� 0�� 2� /�� � @=� ��� � D���� @'�--�( 4��������� � �� ���������� � ��������������� ���� �������������� ��� �#������� � ���� ���������� �������� � � ��������� � ��� ������ �� =�������9 *-�&:��

;������ 7� =��� B� ,��� =<� 2��� 4� 5��� ;� ��� +���� � '�--)( 0�������������� ��� ��#���������� � � �� !�� ������ ����� �� �� ���������� �� ������ 6����� @ �9 :1-&:31

;�� 04� /���� +� ��� /��!� "+ '�-�-( 4�������� �������� � ����� ���������� �2=4������ ��� ���� �� �� ������ �������� =���� ���9 1 -&1��

<���!� �0� +����� 45� ���� @+@� A��!� 45� 6������ 74� ��� 6������ 5@ '�--*( 7����#���� � ��� ��������� ���������� ����������� �� ���� ������ ������� � �� ��� �����#���� ,�� +�� <�� �9 1 1&1�

<���!� �0� ��� 6������ 74 '�--1( 8��� �� �������� � <#���������� '����( �� �� �����=�������� �9 �-:&�-3

<���!� �0� 4��������! ,� "�!����! /� ��� 6������ 74 '�--�( �� ������ �������� � ����������� ��� �������� � ����������� ������ ���������� ����������� �� �� ���� �����7�� @ =������ 9 -31&-�3

,� ��� 75� 6���� 2,� ��� /��!� "+ '�-��( ����������9 �� ������ ������� � �� ����#�� +������� ��������� ������ 0�� �9 -�-&-*�

,����� 5"� ����� <H� A��� +,� ,� 4� A�� 2<� 5����� �4� ��� 2�� 5= '�--� �( "�����#������ � ���������� ��� ��� ���� �� �� ���� �������� ����� � �� ����� ������� ���%� ��������� ����������� � ���� �� �� ������ ,�� +�� <�� �9 �:�1&�:-�

,����� 5"� /����� ,@� ��� 2�� 5= '�--� ( ����� ������� � � ���� ����� ������ ��� �������� ���� ���������� ��� ���� ;768 "�� ���9 ::�&:)�

,����� 5"� ����� <H� ����� 8�� 4����� 20� A����� 2<� /����� ,@� ��� 2�� 5= '�---(� ������#���� ��� ���� ���� ��� ��)*� ��� �������� ���� �� ������� ����� +���� =�� ��9 �3&*�

,���� @� ��� ������ @5 '�--*( "����������� � ���������� �� �� 5��!��? ���� � ���������� =������ "�� ���9 � 1&� �

,���� @� 0�� 5H� 5���� 4� 6������� @5� ��� ������ @5 '�--*( ����������#��! ���������#������ �� ���!� ��� ����� ���� ���� ������� �� ������� ��� ����� ��������� =������"�� ���9 ���&��3

,����� @5� <����!����� ,� D����� =� 0�� � 5� +����� <7� +����� 45� 6�����#=��� H�/����!� 4� /����� @0� /��� 4� ��� 0���� @ '�--*( ������ ���������� � �� ������������ �������� ��� �� ��������� ���� ��� ��� ������� � �1#!�� ������ ����� ��������#� �� �������� ������� 5��� =��� 4��� 8�� B84 �9 �1 3&�1�

������� +� ��� $���� 7 '�--�( �� ������ �������� � ���������� ��� ���� ��� �������������� ��������#�4+5#������ ������������� �� ��������� � ��� ���� ���������� 5���=��� 4��� 8�� B84 9 3�:-&3�))

@��� �� 5��� ;� "�� @@� 4���� �� ��� 2���� 4 '�--�( ���������� �� ������ ������ �����9� ����������� ������� ����������� ��� ��������� ������������ ������ =������ "�� ���9��&-�

��� � � ������� �!�� �� ��

@��� �� ;������ �� +��#6������ +,� ��� 2���� 4 '�--:( 0�������������� ��� ��������������������� � �� ����������#������ �� '����( ��� ����� =����������� ������ �9 1�1&1��

/���� 85� A� 84� ;���� 6<� ��� +����� @8 '�--)( 4 ������� ���������� ���� ���� ���������� �� #����������� ��� � ��� �#��������� @ 6��� 0�� ��9 ��) &��) �

/���� +� +����� 45� ��� /��!� "+ '�-��( �� ������ �%��� � ���������� ������� ����#����� �����!���� ������� 0�� �9 *�-&**�

/���� +� ��� /��!� "+ '�-- ( ������ �������� � �� ���� ������ � ���������� ����� ��� �������� ���� ������ ���� ��� ��� � ��������� @ 6��� 0�� ��9 )13 &)133

/������� =2� D���� 4� ;����� 80� ��� 8����! 2 '�--)( 4���������� � �������� ��� �����#�� ���������� ����� ���� ���� �� ��������� +� 1�� ����������#��������� ������'8���������(� @ 6��� 0�� ��9 *�� &*��3

"����� B/ '�-� ( 0����� � ���������� ������� ������ �� ������ � �� ��� � ������#���� �)� =���� ���9 3� &3�1

"�� �� �� "�� C� 4���� =� +���� �� +����� <� ;���� $� H� �� ��� =��� B '�--*( 4��#!��������� ������ �� � ��?�� ������� � �� ������ �������� ��������� �� �� ������� ���� ���#����� ������� 5��� =��� 4��� 8�� B84 �9 1:)3&1:1

"�� �� �� H� �� ��� =��� B '�--:( 4 ����!���� ��� �������� ������ �� �� :��#���� � �� ������ �������� ��������� ��� �������� �� �������� � ����� � ��?��������� � �� ��� ,�� +�� <�� �9 ���:&����

"�! B� ,��! 2� ���� ,� ��� 8�� 4 '�--:( 5���� ��������� �� �� ������� ������� � ������� ���������� ��9 ������������ �� �� ����������� ���� ����� ���������� �� �+� ��#������ ,�� +�� <�� �9 ����&����

"��� 64� +��� 4@<� 5������ D6� ��� 5��� 8D '�--*( 6������ ���� ������� �� �� ������#���� � ����� ���� =#������� ����� � ����������� ;768 "�� ��9 ))&)�

"���� ,<A� 8��� 8� ��� /��!� "+ '�--1( ���) 9 � ���� �) !�� 0=8 ���������� ��� ������������ ������ ,�� +�� <�� �9 :*-&::1

"���� 0=� ,���� +� 6���� D� ��� 0�������� @8 '�--- �( 7�������� � �� �� !�� ���#������� ��� ��� '����( ������� � �� ��������� 6���� 2� ���9 ��)&���

"���� 0=� 5���� 8;� 2� �� @4� 0�� <4� ,��������� �"� 6�� 02� 4�!��� 7� A������� 2���� 0�������� @8 '�--- ( 0�������������� � ���������� ��� �������� �������� �� ������� ,�� +�� <�� �9 1-:&1--

+�������� /� H����� ,� 8������ �� ��� 0����� /5 '�--:( �� ������ �������� � ���#�������� �������� ��� ����������#��������� ������� �� �������� ���� ;768 "�� ���9*��&*�1

+���� 27� 6����� @� ��� +������! + '�--*( ��������� ��� ��������������� � �� ��� 0#��#����� ������� � ���������� ������ �� (��������� ����� 6����� @ ���9 � :�&� ))

+����� H� H������ +� H������� ,� ,���� 8� ��� $���� 7 '�--:( ����������� � ������������� ���� ��� ����������#��������� ������� ):�4< '4:�( ��� 1 �4< '4*( �� ������� ���#!� ������� @ 6����� ����9 -:3&-)�

+������ +5� 6������ 0� ������� 4� 6��� ;� +����� =� ��� +����� 0 '�--�( 4� ���� ������) ���� ���������� ��� ���� ����� �� �������� ��������� �� ������ �����������������K 4� @ +� <�� ��9 :*&)�

+��� , '�-�)( ������ �������� ���������9 ��������� ������ ��� ����� ���������,�� <�� ��9 ��&)

=����� ,� ��!����� H� =����� =� H������� ,� 8���!� H� ����!��� H� ����!��� H� +����� 2�=�!����� ,� ��� +����� + '�--)( ����� ������� � � ���� ���� ��� �� �� ����� ������#���� �� ��� � � �� ������� ������ ��� ���� 1 ! ������� � �� ����� !������������ @ 0��� ����� �9 � :�&� )*

5���� 7� ,������ @+� ��� 8����� " '�-�)( 4����#��� ������� � ����������� ������� ��� ���� ������ @ =������ ��9 --)&� *

.4A�5 ������%����� �� ��� ����� ���

2������� �� ;���� $� =��� B� ��� H� � '�--* �( 7�������� � �� ������ �������� ���#������ �� �������� �� ������� ��� ���� ��� ���� �� ������� �������� @ 6��� 0�����9 *�*�-&*�*-*

2������� �� "�� �� �� �� ����� @�� <����������� 5+� D�� $��� <@6� ;���� $� =�#�� B� ��� H� � '�--* ( 0�������������� ��� ��� ��� ����������� � � ����� ��?������������ � �� ������ +������� ��������� ��� �� ��������� �9 ���&�-:

2������� �� <���� �8� ��� +� H� �� ��� =��� B '�--:( ����� �� ���#����� �������� �� ������ �������� ��������� �� �� ��������� ���� �� ��� ������ ;768 "�����9 �-�&* *

2���� ;� 2��� 4� "������ @� ,���� <� ��� +���� � '�--3( 5���� � ���� ��� ����� ���#������� ���E�� �������� �������� �� ������� ��������� �������� ����� ;768 "�� ���9*�*&*�3

2���� 2< '�--1( ����������� ��� ��� ��� �� ������������������ 4�� <�� ��9 ���&*:�2��!��� �=� 4���� /@� ��� 7������ @+ '�--3(� 4 �� ���� �� �� ���������� � ����������

���� ;#������ @ 0�� 6��� ��9 33�&3�*8���� 2� +��� "D� <������ �� ����� 0� ;���� $� H� �� ��� =��� B '�---( ������ ����#

�������� � ����� �� ��?�� ���#����� ������� � �� �+� ��. �� ������ �������� � �� ���� ������� ������ ��������� ,�� +�� <�� �9 �&�

8�� 7@+� ,����� 4,=� ��� /�������� 5 '�---( 4���� ������� ������ �� ������ �� ��#�������� � �� ��� ������������9 ���� 042� '8(� @ ,������� 0������ ��9 *��&*��

8���!� 4� H������ +� H������� ,� ��� $���� 7 '�--*( <����������#������ ��� � ������#���� �� ��� ��� �� �� ������#���� ������ ��� �� ���� ��� � �� ������#������� ��#����� ;768 "�� ���9 �1)&�3

8���!� 4� H������ +� ,������ /� +����� H� ,������� H� ��� $���� 7 '�--)( +������� ����#�������� �� �� �����������#������#������ ��� � ����������� 7�� @ 6����� ���9 *�:&*-*

������ @+� 6��! �@� ��� ����� /7 '�--:( 4��#����������#:9 � *�* ! ���������� ��� ���+� ����� ������� �� ���������� ����������� ������ ���� ,�� +�� <�� �9 1*�&1*)

��!��� 84� ������ =+� 2��� 8+� 8����� 4� ���� 4/� ��� 5����� �4+ '�--�( 2� ���#���� � ���������� ��� ��� ����������� �� ���� ����� � 2�#502 ������ ��� �� ���#���#�� ���� �������� � ������ �������� ���������� +�� <�� +�� �9 *�*&*��

����� ,� 8������ �� ��� <����� @ '�-�-( 7������������ ����� � � ������� ��� ���������#���� ��� �� ������������ ����9 5������ ��� ��� ������������� 5��� =��� 4��� 8��B84 ��9 ):1 &):1)

A����� @� 5��� A� @���� 0� ��� 7������ H, '�---( B��� ��� B��) � ��� ���� ������������ �������� ���� �� ��������� � ����� ���� � ����������� ,�� +�� <�� �9 �*��&�*��

��! � � ������� �!�� �� ��