CAPITULO 3. proteinas

download CAPITULO 3. proteinas

of 47

  • date post

    12-Oct-2015
  • Category

    Documents

  • view

    6
  • download

    0

Embed Size (px)

Transcript of CAPITULO 3. proteinas

  • CAPITULO 3PROTENASBIOQUMICA APLICADA

  • FuncionesEstructurales. Ejplo. Colgeno, keratina, Elastina. Funcionales.Catalticas. Transporte.Pueden ser:- fibrosas.- globulares

  • Son polmeros de aminocidos

  • El enlace peptdico, tiene carcter parcial de doble enlace. El enlace peptdico es plano y no permite la libre rotacin de sus sustituyentes.

  • Los ngulos de torsin en torno al Carbono alfa permiten flexibilidad conformacional a la cadena principal (cadena polipeptdica, sin considerar los grupos de cadena lateral)

  • Polipeptidos Pptidos. Menos de 50 AAEj. Glutation. Tripptido: glicina, cistena y cido glutmico. Antioxidante intracelular: usa el grupo tiol de la cistena como agente reductor. Acta reduciendo especies reactivas del oxgeno como perxido de hidrgeno gracias a la enzima glutatin peroxidasa la cual cataliza la siguiente reaccin:H2O2 + 2GSH------- GSSG + 2 H2O.

  • Pptidos Ej. Aspartame. Edulcorante no calrico.Un comit internacional de expertos ha establecido un nivel de Ingesta Diaria Admisible (IDA). El aspartamo es un polvo blanco e inodoro, poder edulcorante 200 marcas, como Natreen, Canderel o Nutrasweet. El aspartamo es estable cuando se encuentra seco o congelado, pero se descompone y pierde su poder edulcorante, con el transcurso del tiempo, cuando se conserva en lquidos a temperaturas superiores a 30C.

  • ESTRUCTURA DE PROTEINASEstructura primaria. Secuencia de aminoacidos en la cadena.Estructura secundariaEstructura terciariaEstructura cuaternaria

  • ESTRUCTURA PRIMARIAEs su secuencia de aminocidos.

  • Estructura primaria de lizosima

  • Protenas de varias cadenas

  • Degradacin de Edman (c). Mtodo qumico para determinar la secuencia de aminocidos en una cadena polipeptdica.

  • ESTRUCTURA SECUNDARIAHelice.Lamina plegada.

  • Estructura alfa helice.

  • Hoja plegada

  • Estructuras secundarias

  • Estructuras con helices y laminas

  • ESTRUCTURA TERCIARIA

  • Estructura secundaria y terciaria de queratina

  • ESTRUCTURA CUATERNARIA

  • Estructura de hemoglobina

  • Estructura cuaternaria. globulina

  • Niveles de la estructura de protenasI: secuencia deaminocidosII: Estructura Estabilizada porPuentes de HidrgenoDe cadena principal(establecidos por elGrupo amida formadoPor el enlace peptdicoIII: Estructura 3D de una Cadena polipeptdica Completa. Involucra arreglos de Estructura II (estructura super-II) e interacciones de cadena lateral, mediante puentes de Hidrgeno, interacciones hidrofbicas, interacciones inicas (puentes salinos) y eventualmente, puentes dislfuro.IV: Ensamble de cadenasPolipeptdicas en un complejoFuncional. Todas las interaccionesPresentes en III pueden estarPresentes en IV

  • Comportamiento fisiolgicoSOLUBILIDAD Son solubles en agua cuando adoptan conformacin globular. La solubilidad es debida a los radicales (-R) libres de aminocidos que, establecen enlaces (puentes de hidrgeno) con molculas de agua. Esta propiedad hace posible la hidratacin de tejidos de los seres vivos.CAPACIDAD AMORTIGUADORALas protenas tienen un comportamiento anftero y esto las hace capaces de neutralizar las variaciones de pH del medioLiberan o retiran protones (H+) del medio donde se encuentran.

  • desnaturalizacinEs la Ruptura de enlaces que mantenan sus estructuras cuaternaria, terciaria y secundaria, conservando la primaria. Las protenas se transforman en filamentos que se entrelazan hasta formar compuestos fibrosos e insolubles. Agentes desnaturalizantes: calor excesivo; sustancias que modifican el pH; alteraciones en la concentracin; alta salinidad; etc.pH. Provoca ruptura de puente-HSoluciones concentradas. Las sales ionizadas compiten con los puentes-HDetergentes. Unen los grupos hidrofobos con el solvente.Calor. Ruptura puentes -H

  • RinonucleasaNatural Desnaturalizada

  • Solubilidad y fuerza inica

  • Separacion por su punto isoelctrico

  • Mtodos de separacin de protenas.Electroforesis,Cromatografa Tcnicas de afinidad.Dialisis

  • Isoelectroenfoque: Las protenas migran en un campo elctrico a travs de una gradiente de pH. Las protenas dejan de migrar cuando encuentran el pH que corresponde a su pI (z=0).Electroforesis 2D: Despus de un isoelectroenfoqueSe corre un SDS-PAGE y se obtiene una separacinEn 2 dimensiones. Permite el anlisis de muestrasConteniendo muchas protenas distintas. Se usa en Protemica.

  • Cromatografa de intercambio catinico.

    La matriz slida (fase estacionaria) est cargada negativamente, de modo que interacta con cationes (cationes son retardados en la columna, Mientras que los aniones son repelidos y eluyen inmediatamente.Los cationes pueden ser eluidos despus de adicionar cationes Que interacten con la matriz, permitiendo la elucin de protenas bsicas, Esto es, cargadas positivamente.

  • DialisisProceso de separar molculas de una solucin por diferencia del ndice de difusin a travs de una membrana semipermeable.Una solucin de varios tipos de molculas es puesta en un bolso semipermeable de dilisis (acetato de celulosa u otro). El bolso de dilisis sellado se coloca en un envase con una solucin diferente, o agua pura. Las molculas lo suficientemente pequeas como para pasar a travs de los poros (a menudo agua, sales y otras molculas pequeas) tienden a moverse hacia adentro o hacia afuera del bolso de dilisis en la direccin de la concentracin ms baja. Molculas ms grandes (a menudo protenas, ADN, o polisacridos) que tiene dimensiones significativamente mayores que el dimetro del poro son retenidas dentro del bolso de dilisis.

  • Dialisis

  • Separacion por centrifugacion

  • PROCESOS CON PROTEINASCurtidoQueratina.

  • Curtiembre.El cuero consta de tres capas: epidermis, dermis y capa subcutnea. La dermis comprende aproximadamente un 30 a 35 % protena, que en su mayor parte es colgeno, siendo el resto agua y grasa. CURTIDO. Proceso qumico que convierte las pieles de animales en cuero. (materiales fuertes y resistentes a la putrefaccin)consiste en reforzar la estructura proteica del cuero creando un enlace entre las cadenas de ppticos.- proceso de rivera- curtido

  • Fibrillas de colageno

  • Ordenamiento de cadenas

  • Enlaces entre fibrillas

  • Procesos de riveraEl objeto es limpiar y preparar la piel para facilitar la etapa de curtido: Remojo: Proceso para rehidratar la piel, eliminar la sal y otros elementos como sangre, excretas y suciedad en general. Aditivos: hidrxido de sodiodesinfectantes: fluoruro sdico, hipoclorito de sodiolos agentes tensoactivos y las preparaciones enzimticas.Pelambre: Proceso a travs del cual se disuelve el pelo utilizando cal y sulfuro de sodio, producindose adems, al interior del cuero, el desdoblamiento de fibras a fibrillas.

  • Queratina del peloLa unin disulfuro entre cadenas peptdicas pueden sufrir procesos de oxidacin y reduccin, lo que provoca que las cadenas se abran o se unan an mas

  • Rompimiento de enlaces disulfuro

  • Desencalado: Proceso donde se lava la piel para remover la cal y el sulfuro, para evitar posibles interferencias en las etapas posteriores del curtido tratando de reducir la alcalinidad y removiendo los residuos de cal y sulfuro de sodio. Entre los compuestos qumicos que se emplean estn los cidos orgnicos tamponados ( lctico, frmico, brico y mezclas), las sales de amonio, el bisulfito de sodio.Descarnado: proceso que consiste en la eliminacin mecnica de la grasa natural, y del tejido conectivo, esencial para las operaciones secuenciales posteriores hasta el curtido.

  • Purga enzimtica: El efecto principal del rendido, tiene lugar sobre la estructura fibrosa de la piel, emplea enzimas proteolticas, como el caso de la tripsina para la limpieza de los poros de la piel. Tambin se emplea cloruro de amonio.Su accin es complementar la eliminacin de protenas no estructuradas, y una accin sobre la limpieza de la flor, la que se traduce en lisura de la misma, y le confiere mayor elasticidad.

  • PiqueladoEl proceso de piquelado comprende la preparacin qumica de la piel para el proceso de curtido, mediante la utilizacin de cido frmico y sulfrico principalmente, que hacen un aporte de protones, los que se enlazan con el grupo carboxlico, permitiendo la difusin del curtiente hacia el interior de la piel sin que se fije en las capas externas del colgeno.podra producirse una sobrecurticion en las etapas externas dificultando la difusin a las capaz internas.La velocidad de difusin de los componentes del piquelado puede aumentarse incrementado la temperatura del sistema, pero hay riesgo de provocar la hidrlisis acida de la protena (a 36C).

  • CurtidoProceso por el cual se estabiliza el colgeno de la piel mediante agentes curtientes minerales o vegetales, transformndola en cueroSales de cromo trivalente (sulfato de cromo y/o xido crmico, Cr2O3), concentracin que vara de 1,5 a 8 por ciento de Cr2O3.Se provoca la reaccin entre los grupos carboxilo (-COOH) del colgeno con el cromo.Al final de esta etapa se tiene el conocido "wet blue.

  • Acabado.Post-curtido. Estos procesos que incluyen las operaciones en hmedo a partir del estado de wet-blue, vale decir lavado, neutralizado, recurtido, teido y engraseAblandado. Operacin mecnica de batido que se utiliza para hacer el cuero ms suave.Para mejorar el aspecto final, el lado de flor del cuero se esmerila utilizando un cilindro de esmerilado

    ********