Profil Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di Sulawesi Tenggara terhadap Bakteri...

SKRIPSI

PROFIL FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI

TANAMAN OBAT DI SULAWESI TENGGARA

TERHADAP BAKTERI Salmonella typhi YCTC

Untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana (S-1)

Oleh :

MUHAMMAD JEFRIYANTO BUDIKAFA

F1F1 10 054

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS HALU OLEO

KENDARI

OKTOBER 2014

ii

HALAMAN PERSETUJUAN

Skripsi

Profil Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di Sulawesi

Tenggara Terhadap Bakteri Salmonella typhi YCTC

Diajukan oleh:

Muhammad Jefriyanto BudikafaF1F1 10 054

Telah disetujui oleh:

Pembimbing I,

Prof. Dr. Sahidin, S.Pd., M.Si.NIP. 19690420 199403 1 004

Pembimbing II,

Rini Hamsidi,S.Farm.,M.Farm.,Apt.NIP. 19810705 200812 2 002

Mengetahui,Ketua Jurusan Farmasi UHO,

Nur Illiyyin Akib, S.Si.,M.Si.,Apt.NIP. 19810319 200801 2 006

iii

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi ini tidak terdapat karya yangpernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi,dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yangpernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacudalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Kendari, Oktober 2014

Muh. Jefriyanto B.

F1F1 10 054

iv

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT

yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulisan skripsi

dengan judul “Profil Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di

Sulawesi Tenggara Terhadap Bakteri Salmonella typhi YCTC” dapat

terselesaikan.

Melalui kesempatan ini secara khusus dan tulus penulis sampaikan

penghargaan dan terima kasih yang tak terhingga kepada Ayahanda Drs.

Budikafa dan Ibunda Dra. Aifa atas segala doa, restu, semangat, bimbingan,

arahan, nasehat yang memberikan kedamaian hati serta ketabahan dalam

mendidik, membesarkan dan menitipkan harapan besar kepada penulis. Semoga

Allah SWT selalu melindungi dan melimpahkan rahmat-Nya kepada Ayah dan

Ibunda tersayang.

Dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan banyak terima kasih

kepada Bapak Prof. Dr. Sahidin, S.Pd., M.Si. selaku penasehat akademik,

pembimbing pertama sekaligus Dekan Fakultas Farmasi dan ibu Rini Hamsidi,

S.Farm., M.Farm., Apt. selaku pembimbing kedua yang telah meluangkan

waktu, tenaga dan pikiran dalam mengarahkan dan membimbing penulis selama

mengikuti perkuliahan maupun dalam proses penyelesaian skripsi ini.

v

Penulis juga menyampaikan terima kasih kepada :

1. Prof. Dr. Ir. H. Usman Rianse, M.S., selaku Rektor Universitas Halu Oleo,

2. Ibu Nur Illiyyin Akib, S.Si., M.Si., Apt. selaku Ketua Jurusan Farmasi

Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo.

3. Ibu Henny Kasmawati, S.Farm., M.Si., Apt., selaku Kepala Laboratorium

Farmasi yang telah memberikan izin untuk melakukan penelitian.

4. Bapak Dr. Muzuni, S.Si., M.Si, Bapak Adryan Fristiohady, S.Farm., M.Sc.,

Apt. dan Ibu Wa Ode Sitti Zubaydah, S.Si., M.Sc. selaku Dewan Penguji yang

telah banyak memberikan ide dan saran bagi penulis dalam menyelesaikan

tugas akhir.

5. Bapak dan Ibu dosen Jurusan Farmasi, serta seluruh staf di lingkungan

Fakultas Farmasi UHO atas segala fasilitas dan pelayanan yang diberikan

selama penulis dalam menuntut ilmu.

6. Kakak penulis Fandi Ardiansyah, S.Pd. dan Adik Penulis Muh. Ridwan

Apriansyah dan Siti Fatimah Apriyani terima kasih untuk segalanya.

7. Saudari Sri Rahayu Ningsi, terima kasih untuk dukungan dan motivasi yang

selalu diberikan kepada penulis.

8. Kakanda Agung Wibawa Mahatva Yodha, S.Si., terima kasih untuk bantuan

dan arahannya selama ini.

9. Agriawan Al Hikmah, S. Ked., Ld. Surazal., Thomas Alfaidin Arnol, S. Pd.,

Refly Julian Praditya, Didit Zulfikar, S.H., dan Ridho Rosadi yang merupakan

vi

sahabat penulis terima kasih atas semangat dan dukungan yang selalu

diberikan untuk penulis.

10. Rekan-rekan organisasi EFD : Edi, Ipank, Aja, Azhar, Endra, Harry, Noe, Adi,

Erman, Leo, Aco, Rudi, Ical, Agil, Anzul, Arly, Ipul semoga kompak selalu.

11. Teman-teman seperjuangan angkatan 2010 terima kasih telah membawa

keceriaan dan semangat baik di dalam maupun di luar laboratorium. Semoga

Allah SWT memberikan dan memudahkan jalan bagi kita semua tanpa

terkecuali.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih

jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu kritik dan saran yang sifatnya

membangun dari semua pihak sangat penulis butuhkan demi kesempurnaan

skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat kepada pembaca dan

dalam pengembangan ilmu pengetahuan dan teknologi ke depan. Insya Allah.

Kendari, Oktober 2014

Penulis

vii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................................i

HALAMAN PERSETUJUAN................................................................................ ii

PERNYATAAN..................................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv

DAFTAR ISI......................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL.................................................................................................. ix

DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. x

DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................................... xi

ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN .............................................................. xii

ABSTRAK ........................................................................................................... xiii

BAB I PENDAHULUAN....................................................................................... 1

A. Latar Belakang ......................................................................................... 1

B. Rumusan Masalah .................................................................................... 4

C. Tujuan Penelitian...................................................................................... 4

D. Manfaat Penelitian.................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 6

A. Tanaman Obat .......................................................................................... 6

B. Metode Ekstraksi .................................................................................... 16

C. Metode Kromatografi Lapis Tipis .......................................................... 17

D. Bakteri S. typhi ....................................................................................... 18

E. Antibiotik Pembanding........................................................................... 19

F. Uji Profil Fitokimia................................................................................ 21

G. Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................................ 25

H. Kerangka Konsep ................................................................................... 27

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 28

A. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................ 28

viii

B. Jenis Penelitian ....................................................................................... 28

C. Bahan Penelitian..................................................................................... 28

D. Alat Penelitian ........................................................................................ 29

E. Prosedur Penelitian................................................................................. 29

F. Pengolahan Data .................................................................................... 33

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 34

A. Preparasi Sampel .................................................................................... 34

B. Uji Profil Fitokimia ................................................................................ 36

C. Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................................ 42

BAB V PENUTUP................................................................................................ 52

A. Simpulan................................................................................................. 52

B. Saran ....................................................................................................... 54

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 55

LAMPIRAN.......................................................................................................... 61

ix

DAFTAR TABEL

Nomor Teks Halaman

1.2.3.

Perhitungan Rendamen EkstrakHasil uji golongan senyawa metabolit sekunderHasil uji aktivitas antibakteri

354146

x

DAFTAR GAMBAR

Nomor Teks Halaman

1.2.3.4.5.6.

Tanaman Pecah Beling (S. crispus)Tanaman Belimbing (A. bilimbi)Tanaman Kangkung (I. aquatica)Tanaman Secang (C. sappan)Tanaman Jarak Pagar (J. curcas)Struktur molekul kloramfenikol

7911131520

7.8.9.10.11.12.13.14.15.16.

17.18.

Kerangka konsep penelitianPlat KLT setelah dielusiUji golongan senyawa alkaloidUji golongan senyawa flavonoidUji golongan senyawa taninUji golongan senyawa saponinUji golongan senyawa triterpenHasil uji aktivitas tanaman Keji beling (S. crispus)Hasil uji aktivitas tanaman Belimbing (A. bilimbi)(a) Hasil uji aktivitas tanaman Kangkung (I. aquatica) (b)Hasil uji aktivitas tanaman Jarak pagar (J. curcas)Hasil uji aktivitas tanaman Secang (C. sappan)(a) Struktur kloramfenikol (b) Struktur alkaloid (c)Struktur flavonoid (d) Struktur tanin (e) Struktur saponin(f) Struktur triterpen

27373838394041434444

4548

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Teks Halaman1.2.3.4.5.6.

Penyiapan Ekstrak TanamanPembuatan ReagenPenapisan FitokimiaPembuatan Standar Kekeruhan McFarlandBagan Alir Uji Aktivitas AntibakteriDokumentasi

616263656769

xii

ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN

Lambang/Singkatan Arti Lambang dan Keterangan

YCTC

atm

cm

KLT

ppm

NaCl

nm

NA

tRNA

mRNA

dkk

µm

S

ml0C

HCl

Cm

UV

λ

mm

FeCl3

CFU

Yogyakarta culture type collection

Atmosphere

Centimeter

Kromatografi Lapis Tipis

part per milion

Natrium Klorida

Nanometer

Nutrient Agar

Transfer RNA

Messanger RNA

dan kawan-kawan

Mikrometer

Svedberg

Mililiter

Derajat Celcius

Hydrochlorida

Centimeter

Ultra Violet

Lamda (Panjang Gelombang)

Milimeter

Besi (III) Klorida

Colony Forming Unit

xiii

ABSTRAK

Uji profil fitokimia dan aktivitas antibakteri dilakukan terhadap beberapatanaman obat yaitu ekstrak metanol tanaman Keji beling (Strobilanthes crispusBI), Belimbing (Averrhoa bilimbi Linn.), Kangkung (Ipomoea aquatica), Secang(Caesalpinia sappan Linn.) dan Jarak pagar (Jatropha curcas Linn.) yang ada diSulawesi Tenggara. Uji profil fitokimia dilakukan dengan metode KLT untukmengidentifikasi golongan senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid,flavonoid, tanin, saponin dan triterpenoid, sedangkan uji aktivitas antibakteriterhadap bakteri Salmonella typhi YCTC menggunakan metode difusi agardengan kloramfenikol sebagai kontrol positif. Hasil diperoleh menunjukkanbahwa ekstrak bagian akar dan daun tanaman S. crispus menghasilkan diameterzona bening sebesar 9 mm dan 5 mm, ekstrak bagian daun tanaman A. bilimbimenghasilkan diameter zona bening sebesar 9 mm, sedangkan ekstrak bagianbatang dan bunga tanaman C. sappan menghasilkan diameter zona bening sebesar3,5 mm dan 6 mm terhadap bakteri S. typhi YCTC.

Kata kunci : Fitokimia, Antibakteri, Salmonella typhi YCTC, Zona bening,S. crispus, A. bilimbi, C. sappan.

xiv

ABSTRACT

Phytochemical profile and antibacterial activity test performed on severalmedicinal plants methanol extracts of plants Keji beling (Strobilanthes crispusBI), Starfruit (Averrhoa bilimbi Linn.), Water spinach (Ipomoea aquatica),Secang (Caesalpinia sappan Linn.) and Jathropa (Jatropha curcas Linn.) existingin the Southeast Sulawesi. Phytochemical screening carried out by TLC method toidentify classes of secondary metabolic compounds like alkaloids, flavonoids,tannins, saponins and triterpenoids, while the antibacterial activity test against thebacteria Salmonella typhi YCTC using the agar diffusion method withchloramphenicol as a positive control. The results obtained show that the extractof the roots and leaves of plants of S. crispus yield a diameter of 9 mm and 5 mmclear zone, the extract of the leaves of plants A. bilimbi yield a diameter of 9 mmclear zone, while the extract of the trunks and flowers of C. sappan. plantsproduce a clear zone diameter of 3,5 mm and 6 mm against the bacteria.

Keywords : Phytochemical, Antibacterial, Salmonella typhi YCTC, Clear zone,S. crispus, A. bilimbi, C. sappan.

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Penyakit infeksi selalu menempati urutan teratas penyebab kesakitan dan

kematian di negara-negara berkembang termasuk Indonesia. Infeksi yang terjadi

dipengaruhi oleh mikroorganisme penyebab yang masuk, derajat virulensi serta

kekebalan tubuh sehingga penderita infeksi biasanya minum obat yang

mengandung antibiotik (Wahyono, 2012). Penggunaan antibiotik dalam

mengobati penyakit infeksi saat ini mengalami kendala dengan munculnya

organisme yang resisten terhadap antibiotik. Keadaan resisten ini disebabkan dari

berbagai macam faktor mulai dari faktor penderita, faktor obat dan faktor

mikroorganisme itu sendiri (Pratiwi, 2008). Sebagian besar penyakit infeksi yang

merugikan bagi manusia disebabkan oleh mikroorganisme, salah satunya adalah

bakteri Salmonella typhi penyebab penyakit infeksi akut yaitu demam tifoid

(Pelczar dan Chan, 2007).

Demam tifoid pada masyarakat dengan standar hidup dan kebersihan

rendah, cenderung meningkat dan terjadi secara endemis. Sumber penularan

penyakit demam tifoid adalah penderita yang aktif, penderita dalam fase

penyembuhan dan kronik karier. Demam tifoid juga dikenali dengan nama lain

yaitu Typhus abdominalis, Typhoid fever atau Enteric fever. Demam tifoid adalah

penyakit sistemik yang akut yang mempunyai karakteristik demam, sakit kepala

dan ketidakenakan abdomen berlangsung lebih kurang 3 minggu yang juga

disertai gejala-gejala perut pembesaran limpa dan erupsi kulit (Supriyono, 2011).

2

Antibakteri yang segera diberikan dengan diagnosis klinis demam tifoid

yaitu kelompok antibakteri lini pertama. Berdasarkan efikasi dan harga, saat ini

kloramfenikol masih menjadi pilihan pertama, tetapi kekurangannya adalah

pemberian dalam jangka waktu yang lama dapat menimbulkan resistensi. Faktor-

faktor penyebab resistensi ini adalah pemakaian antibakteri tanpa resep atau tanpa

pedoman dan kontrol dokter, pilihan antibakteri, dosis, serta lama pemberian

antibakteri yang kurang tepat (Kemenkes, 2006).

Penelitian zat yang berkhasiat sebagai antibakteri perlu dilakukan untuk

menemukan senyawa antibakteri baru yang berpotensi untuk menghambat atau

membunuh bakteri yang resisten terhadap antibiotik dengan harga yang

terjangkau. Salah satu alternatif yang dapat ditempuh adalah memanfaatkan zat

aktif yang terkandung dalam tanaman (Khunaifi, 2011).

Tanaman obat telah lama menjadi sasaran pencarian obat baru.

Perkembangan penggunaan obat khususnya dari tumbuh-tumbuhan untuk

membantu meningkatkan derajat kesehatan masyarakat sudah cukup meluas.

Salah satu manfaat penggunaan obat dari tanaman-tanaman tersebut pada manusia

adalah sebagai antibakteri (Awoyinka dkk., 2007).

Kegunaan tumbuhan obat secara umum sebenarnya disebabkan oleh

kandungan kimia yang dimiliki. Namun, tidak semua kandungan kimia diketahui

secara lengkap karena pemeriksaan bahan kimia dari suatu tanaman memerlukan

biaya yang mahal (Hariana, 2006).

Sulawesi Tenggara terdiri dari berbagai macam suku bangsa, dan tiap suku

mempunyai banyak keluarga. Hal ini akan memberikan kontribusi penting

3

terhadap keragaman etnobotani (Ruslin dan Sahidin, 2008). Keragaman ini juga

memberikan perbedaan dalam cara pemanfaatan tanaman untuk pengobatan

penyakit, termasuk dalam pengobatan penyakit infeksi dimana masih terdapat

sebagian masyarakat yang menggunakan pengetahuan empiris dalam pemanfaatan

tanaman sebagai obat antibakteri, beberapa diantaranya telah dikenal dan biasa

digunakan oleh masyarakat secara turun temurun sebagai tanaman yang berkhasiat

sebagai obat seperti tanaman Keji beling (Strobilanthes crispus BI), Belimbing

(Averrhoa bilimbi Linn.), Kangkung (Ipomoea aquatica), Secang (Caesalpinia

sappan Linn.) dan Jarak pagar (Jatropha curcas Linn.). Oleh karena itu

masyarakat perlu diberi informasi mengenai tanaman-tanaman yang berpotensi

sebagai antibakteri agar pengetahuan masyarakat tentang tanaman obat tradisional

semakin meningkat yang nantinya akan meningkatkan kesejahteraan dari

masyarakat tersebut.

Berdasarkan latar belakang tersebut di atas, maka perlu dilakukan penelitian

lanjutan eksperimental untuk menggali potensi antibakteri dari tanaman Keji

beling (Strobilanthes crispus BI.), Belimbing (Averrhoa bilimbi), Kangkung

(Ipomoea aquatica), Secang (Caesalpinia sappan L.) dan Jarak pagar (Jatropha

curcas) sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri S. typhi untuk alternatif

terapi yang mudah dan aman bagi masyarakat serta memberikan informasi

mengenai kandungan senyawa metabolit sekunder yang ada melalui skrining

fitokimia dari tanaman.

4

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah yang akan dikaji pada penelitian ini yaitu :

1. Metabolit sekunder golongan apa saja yang terdapat yang terdapat dalam

ekstrak metanol tanaman Keji beling (S. crispus) (akar, batang dan daun),

Belimbing (A. bilimbi) (akar, batang dan daun), Kangkung (I. aquatica)

(batang dan daun), Secang (C. sappan) (bunga, biji, batang dan daun), Jarak

pagar (J. Curcas) (akar, batang dan daun)?

2. Bagaimana potensi dari ekstrak metanol tanaman Keji beling (S. crispus) (akar,

batang dan daun), Belimbing (A. bilimbi) (akar, batang dan daun), Kangkung

(I. aquatica) (batang dan daun), Secang (C. sappan) (bunga, biji, batang dan

daun), Jarak pagar (J. Curcas) (akar, batang dan daun) sebagai antibakteri

terhadap pertumbuhan bakteri S. typhi YCTC?

C. Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini yaitu :

1. Untuk mengetahui golongan metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak

metanol tanaman Keji beling (S. crispus) (akar, batang dan daun), Belimbing

(A. bilimbi) (akar, batang dan daun), Kangkung (I. aquatica) (batang dan

daun), Secang (C. sappan) (bunga, biji, batang dan daun), Jarak pagar (J.

Curcas) (akar, batang dan daun).

2. Untuk mengetahui potensi dari ekstrak metanol Keji beling (S. crispus) (akar,

batang dan daun), Belimbing (A. bilimbi) (akar, batang dan daun), Kangkung

(I. aquatica) (batang dan daun), Secang (C. sappan) (bunga, biji, batang dan

5

daun), Jarak pagar (J. Curcas) (akar, batang dan daun) sebagai antibakteri

terhadap pertumbuhan bakteri S. typhi YCTC.

D. Manfaat Penelitian

Manfaat yang ingin diperoleh melalui penelitian ini yaitu :

1. Meningkatkan keterampilan dalam melakukan skrining fitokimia dan uji

aktivitas antibakteri dari tanaman.

2. Memberikan informasi kepada masyarakat tentang kandungan senyawa

metabolit sekunder dan potensi tanaman Keji beling (S. crispus), Belimbing (A.

bilimbi), Kangkung (I. aquatica), Secang (C. sappan) dan Jarak pagar (J.

curcas) sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri S. typhi YCTC.

3. Sebagai sumber informasi prospek pemanfaatan tanaman Keji beling (S.

crispus), Belimbing (A. bilimbi), Kangkung (I. aquatica), Secang (C. sappan)

dan Jarak pagar (J. curcas) sebagai bahan baku untuk untuk pengembangan

obat di masa mendatang.

4. Memberikan informasi dan tambahan pustaka bagi mahasiswa Fakultas

Farmasi Universitas Halu Oleo sebagai referensi dalam menyelesaikan tugas

akhir.

6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Tanaman Obat

1. Tanaman Keji Beling (Strobilanthes crispus BI.)

Tumbuhan Keji beling adalah jenis tumbuhan yang biasa ditanam

masyarakat sebagai tumbuhan pagar, dapat tumbuh hampir diseluruh wilayah

Indonesia. Tumbuhan ini juga sebagai tumbuhan herbal liar hidup menahun yang

banyak manfaatnya bagi kesehatan dalam penyembuhan beberapa penyakit.

Dalam bahasa lokal Keji beling dikenal dengan sebutan keci beling di Jawa dan

picah beling di Sunda (Hariana, 2003 dalam Gunawan, 2011).

Klasifikasi tumbuhan keji beling adalah sebagai berikut:

Regnum : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Dicotyledonae

Bangsa : Scrophulariales

Suku : Acanthaceae

Genus : Strobilanthes

Spesies : Strobilanthes crispus BI

Keji Beling merupakan tumbuhan tergolong tumbuhan semak, biasanya

hidup menggerombol, tinggi 1-2 meter pada tumbuhan dewasa. Morfologi dari

tumbuhan Keji beling yaitu memiliki batang beruas, bentuk batangnya bulat

dengan diameter antara 0,12 - 0,7 cm, berbulu kasar, percabangan monopodial.

7

Kulit batang berwarna ungu dengan bintik-bintik hijau pada waktu muda dan

berubah jadi coklat setelah tua. Tergolong jenis daun tunggal, berhadapan, bentuk

daunnya bulat telur sampai lonjong, permukaan daunnya memiliki bulu halus, tepi

daunnya beringgit, ujung daun meruncing, pangkal daun runcing, panjang helaian

daun berkisar ± 5-8 cm, lebar ± 2-5 cm, bertangkai pendek, tulang daun menyirip,

dan warna permukaan daun bagian atas hijau tua sedangkan bagian bawah hijau

muda (Hariana, 2003 dalam Gunawan, 2011). Tumbuhan Keji beling ditunjukkan

pada Gambar 1.

Gambar 1. Keji Beling (S. crispus)

Tumbuhan Keji beling mengandung beberapa zat gizi yang berkhasiat

dalam mengobati beberapa penyakit, seperti batu ginjal, diabetes melitus, maag

dan sebagai laksatif. Keji beling mengandung zat-zat kimia antara lain: kalium,

natrium, kalsium, asam silikat, alkaloid, saponin, flavonoid, dan polifenol. Kalium

berfungsi melancarkan air seni serta menghancurkan batu dalam empedu, ginjal

dan kandung kemih. Natrium berfungsi meningkatkan cairan ekstraseluler yang

menyebabkan peningkatan volume darah. Kalsium berfungsi membantu proses

pembekuan darah, juga sebagai katalisator berbagai proses biologi dalam tubuh

8

dan mempertahankan fungsi membran sel. Sedangkan asam silikat berfungsi

mengikat air, minyak, dan senyawa-senyawa non-polar lainnya (Soewito, 1989

dalam Gunawan, 2011).

2. Tanaman Belimbing (Averrhoa bilimbi Linn.)

Tanaman belimbing merupakan tanaman yang biasa ditanam sebagai pohon

buah, kadang tumbuh liar dan ditemukan dari dataran rendah sampai 500 m.

Tanaman ini memiliki banyak nama daerah, diantaranya Sumatera: Asom

belimbing, balimbieng, balimbingan, balimbing ; Jawa: belimbing wuluh,

calincing wulet, bhalingbhing bulu ; Bali: blimbing buloh ; Sulawesi: limbi,

balimbeng, lumpias, lembetue, bainang, calene, takurela ; Papua: uteke. Dalam

bahasa Inggris dikela sebagai cucumber tree atau bilimbi, sedangkan dalam

bahasa latin disebut Averrhoa bilimbi (Gunawan dan Mulyani, 2004).

Menurut Tjitrosoepomo (2000), sistematika tumbuhan buah belimbing

wuluh diklasifikasikan sebagai berikut :

Regnum : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledoneae

Bangsa : Oxalidales

Suku : Oxalidaceae

Genus : Averrhoa

Spesies : Averrhoa bilimbi Linn.

9

Belimbing wuluh merupakan tanaman berbentuk pohon kecil, tinggi

mencapai 10 m dengan batang yang tidak begitu besar dan mempunyai garis

tengah hanya sekitar 30 cm. Daun majemuk menyirip ganjil dengan 21-45 pasang

anak daun. Anak daun bertangkai pendek, bentuknya bulat telur, ujung runcing,

pangkal membundar, tepi rata, panjang 2-10 cm, lebar 1-3 cm, warnanya hijau,

permukaan bawah warnanya lebih muda. Ciri buah belimbing wuluh yaitu

buahnya berbentuk bulat lonjong bersegi hingga seperti torpedo, panjangnya 4-10

cm. Warna buah ketika muda hijau dengan sisa kelopak bunga menempel pada

ujungnya. Apabila buah sudah masak, maka buah berwarna kuning atau kuning

pucat. Daging buahnya mengandung banyak air dan rasanya asam.Kulit buahnya

berkilap dan tipis. Biji bentuknya bulat telur, gepeng (Wijayakusuma dan

Dalimartha, 2006). Tanaman belimbing ditunjukkan pada Gambar 2.

Gambar 2. Belimbing (A. bilimbi)

Khasiat dari buah belimbing wuluh ini adalah sebagai obat batuk, gusi

berdarah, sariawan, jerawat, panu dan bisul (Gunawan dan Mulyani, 2004),

dimana tanaman ini mengandung senyawa flavonoid, steroid/triterpenoid,

10

glikosida, protein, lemak, kalsium, fosfor, besi, vitamin A, B1, dan C

(Wijayakusuma dan Dalimartha, 2006).

3. Tanaman Kangkung (Ipomoea aquatica Poir.)

Tanaman kangkung adalah salah satu tanaman yang banyak dimanfaatkan

oleh masyarakat karena selain dapat diolah menjadi berbagai macam masakan,

tanaman ini juga dapat menyembuhkan. Tanaman kangkung memiliki klasifikasi

sebagai berikut (Maryani, 2003).

Regnum : Plantae



Bangsa : Solanales

Suku : Convolvulaceae

Genus : Ipomea

Spesies : Ipomea aquatiqa Poir.

Secara alamiah, kangkung ini dapat ditemukan di kolam, rawa, sawa, dan

tegalan. Tumbuhnya menjalar dengan banyak percabangan. Sistem perakarannya

tunggang dengan cabang-cabang akar yang menyebar ke berbagai penjuru.

Tangkai daun melekat pada buku-buku batang dan bentuk helaiannya seperti hati.

Bunganya menyerupai terompet. Bentuk buahnya bulat telur dan di dalamnya

berisi 3 butir biji (Santosa, 2008). Tanaman kangkung ditunjukkan pada

Gambar 3.

11

Gambar 3. Kangkung (I. aquatica)

Kandungan gizi dalam 100 gram kangkung darat diantaranya adalah 458,00

gram kalium dan 49,00 gram natrium. Kalium dan natrium dalam tanaman ini

merupakan persenyawaan garam bromida. Senyawa-senyawa ini bekerja sebagai

obat tidur berdasarkan sifatnya yang menekan susunan saraf pusat. Selain

mengandung kalium dan natrium, daun kangkung juga mengandung zat kimia

seperti karoten dan sitosterol. Oleh karena itu, tanaman kangkung berkhasiat

sebagai antiinflamasi, diuretik dan hemostatik (Maryani, 2003)

.4. Tanaman Secang (Caesalpinia sappan Linn.)

Kayu secang sangat dikenal terutama di Sulawesi secara empiris sebagai

pemberi warna pada air minum yang dikenal sebagai teh secang. Kayu secang

juga merupakan salah satu ramuan yang digunakan dalam pembuatan minuman

tradisional Betawi bir pletok yaitu sebagai pemberi warna (Winarti dan

Nurdjanah, 2005). Kayu secang memiliki rasa sedikit manis dan hampir tidak

berbau dan sering juga digunakan sebagai obat untuk berbagai macam penyakit.

Kayu secang mengandung komponen yang memiliki aktivitas antioksidan dan

antimikroba (Sundari dkk., 1998).

12

Menurut Tjitrosoepomo (2000), sistematika tumbuhan secang

diklasifikasikan sebagai berikut :

Regnum : Plantae

Divisi : Spermatophyta


Bangsa : Rosales

Suku : Caesalpiniaceae

Genus : Caesalpinia

Spesies : Caesalpinia sappan Linn.

Tumbuhan secang merupakan perdu dengan tinggi 5-10 m, batang dan

percabangannya berduri tempel yang bentuknya bengkok dan letaknya tersebar,

batang berbentuk bulat, warnanya hijau kecoklatan. Secang tumbuh liar dan

kadang ditanam sebagai tanaman pagar atau pembatas kebun. Daun tumbuhan ini

bertipe majemuk menyirip ganda, bunganya bertipe majemuk berbentuk malai

dengan mahkota bentuk tabung dan berwarna kuning, buahnya menyerupai buah

polong yang berisi 3-4 biji berbentuk bulat memanjang dan berwarna kuning

kecoklatan. Panenan kayu dapat dilakukan mulai umur 1-2 tahun dan kayunya bila

digodok memberi warna merah gading muda, dapat digunakan untuk pengecatan,

memberi warna pada bahan anyaman, kue, minuman atau sebagai tinta (Dianasari,

2009). Tanaman secang ditunjukkan pada Gambar 4.

13

Gambar 4. Secang (C. sappan)

Menurut Winarti dan Nurdjanah (2005), secara empiris kayu secang dipakai

sebagai obat luka, batuk berdarah, berak darah, darah kotor, penawar racun,

sipilis, menghentikan pendarahan, pengobatan pasca persalinan, desinfektan,

antidiare dan astringent. Berbagai penelitian juga telah dilakukan untuk menguji

manfaat kayu secang, seperti khasiatnya sebagai antibakteri. Dituliskan oleh

Indriani (2003), bahwa kayu secang juga mempunyai aktivitas sebagai antibakteri

dan bakteriostatik sehingga sering digunakan sebagai obat muntah darah, diare

dan disentri.

5. Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas Linn.)

Jarak pagar telah lama dikenal masyarakat di berbagai daerah Indonesia,

yaitu sejak diperkenalkan oleh bangsa Jepang pada tahun 1942. Saat ini

masyarakat manaman jarak sebagai pagar di pekarangan. Beberapa nama daerah

(nama lokal) yang diberikan kepada tanaman jarak pagar ini yaitu Sunda : jarak

kosta, jarak budeg, Jawa : jarak gundul, jarak pager, Madura : kalekhe paghar,

Bali : jarak pager, Nusa Tenggara : lulu mau, paku kase, jarak pageh, Alor :

14

kuman nema, Sulawesi : jarak kosta, jarak wolanda, bindalo, bintalo, tondo

utomene, Maluku : ai huwa kamala, balacai, kadoto (Hariyadi, 2005).

Klasifikasi tanaman jarak pagar adalah sebagai berikut (Alamsyah, 2006).

Regnum : Plantae


kelas : Dicotyledoneae

Bangsa : Euphorbiales

Suku : Euphorbiaceae

Genus : Jatropha

Spesies : Jatropha curcas Linn.

Tanaman jarak pagar mudah beradaptasi terhadap lingkungan tumbuhnya,

menghendaki lingkungan tumbuh yang optimal bagi pertumbuhannya, yaitu pada

ketinggian 0 – 2000 m di atas permukaan laut, suhu berkisar antara 18º–30ºC.

Pada daerah dengan suhu rendah (<18ºC) jarak pagar mengalami hambatan

pertumbuhan, sedangkan pada suhu tinggi (>35ºC) menyebabkan gugur daun dan

bunga, buah kering sehingga produksi menurun. Jarak pagar dapat tumbuh pada

tanah yang kurang subur, tetapi memiliki drainase baik, tidak tergenang, dan pH

tanah 5.0 – 6.5 (Hariyadi, 2005).

Daun jarak pagar berwarna hijau kekuningan berukuran 6 x 15 cm dengan

tepi berlekuk. Daun jarak pagar mengandung flavanoid, apigenin, vitexin, dan

isovitexin. Daun jarak pagar juga mengandung dimer dari triterpene alkohol

(C63H117O) dan dua flavonoid glikosida (Alamsyah, 2006).

15

Batang jarak pagar mengandung β-sitosterol dan β-D-glukosida, marmesin,

propacin, curculathrine A dan B, diterpenoid jatropol, jatropholone A dan B,

coumarin tomentin, dan coumarino jatrophin. Batang jarak pagar mengeluarkan

getah bening dan tidak menggumpal. Getah jarak pagar dapat digunakan untuk

mempercepat penyembuhan luka yang sulit disembuhkan, infeksi pada gusi, dan

anti pendarahan pada luka yang terpotong atau tergores (Alamsyah, 2006).

Tanaman jarak pagar ditunjukkan pada Gambar 5.

Gambar 5. Jarak Pagar (J. curcas)

Buah jarak pagar berbentuk kapsul dan berukuran kecil dengan diameter

2,5– 4 cm. Buah yang belum masak berwarna hijau, sedangkan jika sudah masak

buah berwarna hitam dengan ukuran 2 cm. Daging biji berwarna putih dan

mengandung minyak (Kingsbury, 1964). Biji jarak pagar rata-rata berukuran 18 x

11 x 9 mm, berat 0,62 gram, dan terdiri atas 58,1 % biji inti berupa daging

(kernel) dan 41,9 % kulit. Kulit hanya mengandung 0,8 % ekstrak eter. Kadar

minyak trigliserida dalam inti biji sama dengan 55% atau 33% dari berat total biji.

Asam lemak penyusun minyak jarak pagar terdiri atas 22,7% asam jenuh dan

77,3% asam tak jenuh. Kadar asam lemak minyak terdiri dari 17,0% asam

16

palmiat, 5,6 % asam stearat, 37,1 % asam oleat, dan 40,2 % asam linoleat (Stegar

dan van Loon, 1941 dalam Brodjonegoro dkk., 2006).

B. Metode Ekstraksi

Ekstraksi merupakan salah satu metode pemisahan berdasarkan perbedaan

kelarutan. Secara umum ekstraksi dapat didefinisikan sebagai proses pemisahan

dan isolasi zat dari suatu zat dengan penambahan pelarut tertentu untuk

mengeluarkan komponen campuran dari zat padat atau zat cair. Dalam hal ini

fraksi padat yang diinginkan bersifat larut dalam pelarut (solvent), sedangkan

fraksi padat lainnya tidak dapat larut. Proses tersebut akan menjadi sempurna jika

solute dipisahkan dari pelarutnya, misalnya dengan cara distilasi/penguapan

(Wahyuni dkk., 2004).

Ekstraksi adalah pemisahan yang menggunakan bantuan pelarut. Beberapa

hal yang harus diperhatikan untuk tercapainya kondisi optimum ekstraksi antara

lain: senyawa dapat terlarut dalam pelarut dengan waktu yang singkat, pelarut

harus selektif melarutkan senyawa yang dikehendaki, senyawa analit memiliki

konsentrasi yang tinggi untuk memudahkan ekstraksi, serta tersedia metode

memisahkan kembali senyawa analit dari pelarut pengekstraksi (Fajriati dkk.,

2011).

Maserasi merupakan cara ekstraksi yang sederhana. Maserasi merupakan

proses perendaman sampel dengan pelarut organik yang digunakan pada

temperatur ruangan pelarut akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam

rongga sel yang mengandung zat aktif sehingga zat aktif akan larut, karena adanya

17

perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel, maka larutan yang

terpekat didesak keluar. Pelarut yang digunakan dapat berupa air, etanol, metanol,

atau pelarut lain. Pemilihan pelarut untuk proses maserasi akan memberikan

efektifitas yang tinggi dengan memperhatikan kelarutan senyawa bahan alam

pelarut tersebut (Christina. 2008).

C. Metode Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi adalah teknik pemisahan campuran yang berdasarkan

kecepatan perambatan komponen dalam medium tertentu. Uraian mengenai

kromatografi pertama kali dijelaskan oleh Michael Tswett, seorang ahli biotani

Rusia yang bekerja di Universitas Warsawa (Sudarmadji dkk., 2007).

Kromatografi dapat dibedakan atas berbagai macam tergantung pada

pengelompokannya. Berdasarkan pada mekanisme pemisahannya, kromatografi

dibedakan menjadi kromatografi adsorpsi, kromatografi partisi, kromatografi

pasangan ion, kromatografi penukar ion, kromatografi eksklusi ukuran dan

kromatografi afinitas. Berdasarkan pada alat yang digunakan, kromatografi dapat

dibagi atas kromatografi kertas, kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi cair

kinerja tinggi (KCKT), dan kromatografi gas (KG) (Gandjar dan Rohman, 2007).

Kromatografi lapis tipis adalah metode pemisahan fisikokimia. Lapisan

yang memisahkan, yang terdiri atas bahan berbutir-butir (fase diam), ditempatkan

pada penyangga berupa pelat gelas, logam, atau lapisan yang cocok. Campuran

yang akan dipisah berupa larutan, ditotolkan berupa bercak atau pita (awal),

setelah plat atau lapisan ditaruh di dalam bejana tertutup rapat yang berisi larutan

18

pengembang yang cocok (fase gerak), pemisahan terjadi selama rambatan kapiler

(pengembangan). Selanjutnya, senyawa yang tidak berwarna harus dideteksi

(Dumont, 1985).

Teknik KLT hingga saat ini masih digunakan untuk mengidentifikasi

senyawa-senyawa kimia, karena murah, sederhana, serta dapat menganalisis

beberapa komponen secara serempak. Teknik standar dalam melaksanakan

pemisahan dengan KLT diawali dengan pembuatan lapisan tipis adsorben pada

permukaan plat kaca. Tebal lapisan bervariasi, bergantung pada analisis yang akan

dilakukan (kualitatif atau kuantitatif) (Hayani dan Sukmasari, 2005).

D. Bakteri S. typhi

Bakteri S. typhi merupakan bakteri Gram negatif dan termasuk

enterobacteriaceae (bakteri enterik batang gram negatif) yang bersifat fakultatif

anaerob atau aerob, tidak berspora dan intraseluler fakultatif (Madjid, 2003).

Bakteri ini tidak berkapsul, mempunyai flagela dan tidak membentuk spora, akan

mati pada pemanasan 57 ˚C selama beberapa menit. S. typhi memiliki tiga antigen

yang penting untuk pemeriksaan laboratorium yaitu antigen O (somatik), antigen

H (flagela), dan antigen K (selaput) (Widoyono, 2011).

Bakteri ini memiliki panjang sekitar 3-5 μm dengan lebar 1 μm (Madigan

dkk, 2012). Karena merupakan Gram negatif, maka struktur dinding selnya tipis

(10-15 nm) dan berlapis tiga (multi). Komposisi dinding selnya mengandung lipid

tinggi (11-22%) yang termasuk membran luar (7-8 nm terdiri dari lipid, protein

dan lipopolisakarida), peptidoglikan (2-7 nm) berada di lapisan kaku sebelah

19

dalam antara membran dalam dan luar serta jumlahnya sedikit (sekitar 10% berat

kering), dan tidak memiliki asam tekoat (Pelczar dan Chan, 2007).

Bakteri ini merupakan bakteri patogen yang mempunyai kemampuan

transmisi, perlekatan pada sel inang, invasi sel dan jaringan inang, toksigenisitas

dan kemampuan menghindari sistem imun inang, sehingga sekali masuk ke dalam

tubuh, bakteri harus menempel atau melekat pada sel inang, biasanya pada sel

epitel (Madjid, 2003).

Demam tifoid adalah infeksi akut pada saluran pencernaan yang 96%

disebabkan oleh S. typhi, sisanya disebabkan oleh S. paratyphi. Bakteri masuk

melalui makanan/minuman, setelah melewati lambung bakteri mencapai usus

halus dan setelah menembus dinding usus akan mencapai folikel limfoid usus

halus (plaque Peyeri). Bakteri akan mengikuti aliran limfe mesenterial ke dalam

sirkulasi darah lalu mencapai jaringan RES untuk bermultiplikasi (hepar, lien,

sumsum tulang). Setelah itu bakteri mencapai sirkulasi darah untuk menyerang

organ lain, baik intra dan ekstra intestinal (Pudjiaji dkk., 2009).

E. Antibiotik Pembanding

Antibiotik yang digunakan sebagai pembanding dalam penelitian ini adalah

kloramfenikol. Kloramfenikol merupakan kristal putih yang sukar larut dalam air

(1:400), rasanya sangat pahit (Setiabudy, 2009) dan merupakan salah satu jenis

antibiotika turunan amfenikol (Susanti dkk., 2009). Senyawa dengan rumus

molekul C11H12Cl2N2O5 dan nama kimia D (-) treo-2-dikloroasetamido-1-p-

20

notrofenilpropana-1,3-diol, memiliki struktur molekul sebagai berikut (USP

XXXI, 2008)

HOO

HN

Cl

ClOH

N+O

O-

Gambar 6. Struktur molekul kloramfenikol

Kloramfenikol memiliki mekanisme kerja sebagai antibakteri yang bersifat

stereospesifik, karena hanya satu stereoisomer yang memiliki aktivitas antibakteri

yaitu D (-) treo-isomer. Bekerja pada spektrum luas yaitu efektif terhadap Gram

positif dan Gram negatif. Mekanisme kerja kloramfenikol menghambat sintesis

protein pada bakteri dan dalam jumlah terbatas pada sel eukariot. Obat ini segera

berpenetrasi ke sel bakteri, kemungkinan melalui difusi terfasilitasi.

Kloramfenikol terutama bekerja dengan mengikat subunit ribosom 50 S secara

reversibel (di dekat tempat kerja antibiotik makrolida dan klindamisin, yang

dihambat secara kompetitif oleh obat ini). Walaupun pengikatan tRNA pada

bagian pengenalan kodon ini ternyata menghalangi pengikatan ujung tRNA

aminosil yang mengandung asam amino ke tempat akseptor pada subunit ribosom

50 S. Interaksi antara peptidiltranferase dengan substrat asam aminonya tidak

dapat terjadi, sehingga pembentukan ikatan peptide terhambat (Mardjono, 1995).

Konsentrasi kloramfenikol yang tinggi dapat bersifat bakterisid terhadap

bakteri tertentu, namun umumnya kloramfenikol bersifat bakteriostatik

(Ganiswara, 2007). Selain menghambat sintesis protein, kloramfenikol juga

mencegah ujung aminoasil tRNA bergabung dengan peptidil transferase (enzim

21

yang menghubungkan asam amino dengan rantai peptid selama proses sintesis

protein). Kloramfenikol bersifat larut dalam lemak sehingga menembus sel bakteri

(Olson, 2004).

F. Uji Profil Fitokimia

Fitokimia merupakan zat kimia alami yang terdapat di dalam tumbuhan dan

dapat memberikan rasa, aroma atau warna pada tumbuhan (Daris, 2010).

Penapisan fitokimia adalah pemeriksaan kandungan kimia secara kualitatif untuk

mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam suatu tumbuhan.

Tumbuhan sebagai makhluk hidup akan menghasilkan senyawa metabolit

sekunder sebagai bentuk adaptasinya dengan lingkungan sekitar. Senyawa ini

memiliki fungsi sebagai alat pertahanan diri dan reproduksi. Metabolit sekunder

juga dikatakan memiliki sifat adaptif agar tumbuhan dapat bertahan hidup atau

tidak musnah (Ruslin dan Sahidin, 2008).

Penapisan fitokimia dilakukan menurut metode Cuiley (1984). Penapisan

fitokimia dilakukan untuk mengetahui komponen kimia pada tumbuhan tersebut

secara kualitatif. Misalnya: identifikasi tanin dilakukan dengan menambahkan

1-2 ml besi (III) klorida pada sari alkohol. Terjadinya warna biru kehitaman

menunjukkan adanya tanin galat sedang warna hijau kehitaman menunjukkan

adanya tanin katekol (Praptiwi dkk., 2006). Senyawa metabolit sekunder yang

terdapat antara tanaman pada daerah yang satu dan daerah yang lainnya berbeda-

beda walaupun dengan jenis tanaman yang sama. Senyawa metabolit sekunder

22

yang dihasilkan oleh tumbuhan terbagi ke dalam beberapa golongan utama antara

lain flavonoid, alkaloid, triterpen, steroid, saponin, dan tanin (Saleh, 2007).

1. Flavonoid

Kandungan flavonoid yang merupakan senyawa fenol dapat menyebabkan

penghambatan terhadap sintesis dinding sel bakteri. Oleh karena itu flavonoid

merupakan komponen antibakteri yang potensial (Liana, 2010). Flavonoid dapat

menghambat perakitan dinding sel bakteri. Penghambatan tersebut mengakibatkan

penggabungan rantai glikan tidak terhubung silang ke dalam peptidoglikan

dinding sel menuju suatu struktur yang lemah dan menyebabkan kerusakan pada

dinding sel bakteri. Kerusakan pada dinding sel bakteri atau hambatan pada

pembentukannya dapat berakibat lisis pada sel bakteri (Jawetz dkk., 2007).

Lisisnya sel bakteri tersebut dikarenakan tidak berfungsinya lagi dinding sel yang

mempertahankan bentuk dan melindungi bakteri yang pada akhirnya

menyebabkan kematian bakteri (Liana, 2010).

Senyawa flavonoid dapat juga berefek antibakteri melalui kemampuan

untuk membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler dan protein yang dapat

larut serta dinding sel bakteri (Dwidjoseputro, 2010). Ikatan kompleks senyawa

flavonoid dengan protein sel bakteri melalui ikatan hidrogen menjadikan sel

bakteri tidak stabil karena struktur protein sel bakteri menjadi rusak karena

adanya ikatan hidrogen dengan flavonoid, sehingga protein sel bakteri menjadi

kehilangan aktivitas biologinya, akibatnya fungsi permeabilitas sel bakteri

terganggu dan sel bakteri akan mengalami lisis yang berakibat pada kematian sel

bakteri (Harbone, 2003).

23

2. Alkaloid

Alkaloid adalah suatu golongan senyawa organik yang terbanyak ditemukan

di alam. Hampir seluruh senyawa alkaloida berasal dari tumbuh-tumbuhan dan

tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan. Hampir semua alkaloida yang

ditemukan di alam mempunyai keaktifan biologis tertentu. Alkaloid memiliki

kemampuan sebagai antibakteri. Mekanisme yang diduga adalah dengan cara

mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga

lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel

tersebut. Senyawa alkaloida mempunyai struktur heterosiklik yang mengandung

atom N didalam intinya dan bersifat basa, karena itu dapat larut dalam asam-asam

serta membentuk garamnya, dan umumnya mempunyai aktifitas fisiologis baik

terhadap manusia ataupun hewan (Robinson, 2005).

3. Triterpen

Triterpen merupakan suatu golongan hidrokarbon yang banyak dihasilkan

oleh tumbuhan terutama terkandung pada getah dan vakuola selnya. Pada

tumbuhan senyawa-senyawa golongan terpen dan turunanannya merupakan hasil

metabolisme sekunder. Triterpen atau isoprenoid ini merupakan salah satu

senyawa organik yang banyak tersebar di alam, yang terbentuk dari satuan isopren

(CH3=C(CH3)-CH=CH2) dan kerangka karbonnya dibangun oleh penyambungan

dua atau lebih satuan isopren. Sebagian besar triterpen mempunyai kerangka

karbon yang dibangun oleh dua atau lebih unit C-5 yang disebut unit isopren

(Lenny, 2006).

24

Triterpen mempunyai manfaat sebagai obat tradisional, antibakteri dan

antijamur. Senyawa terpenoid ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan

cara mengganggu proses pembentukan membran sel atau dinding sel bakteri

sehingga dinding sel atau membran sel bakteri tidak terbentuk atau terbentuk tapi

tidak sempurna (Lenny, 2006).

4. Saponin

Senyawa saponin dari tumbuhan adalah glikosida dari triterpen dan steroid

yang larut dalam air dan tersebar luas pada tumbuhan tingkat tinggi. Keberadaan

saponin sangat mudah yaitu ditandai dengan pembentukan larutan koloidal

dengan air yang apabila dikocok menimbulkan buih, sehingga senyawa saponin

bisa berperan sebagai senyawa penurun tegangan permukaan yang kuat (Cheeke,

2004). Manfaat lain dari saponin adalah sebagai spermisida (obat kontrasepsi laki-

laki), antimikrobia, anti-infalmasi, dan aktivitas sitotoksik (Purnobasuki, 2004).

Senyawa saponin memiliki banyak khasiat antara lain, dapat menghambat

bakteri dengan cara merusak membran sel pada bakteri. Kerusakan membran sel

bakteri ini menyebabkan keluarnya berbagai komponen penting dari dalam bakteri

yaitu protein, nukleotida dan lain-lain yang akan menyebabkan bakteri mati

(Jaya, 2010).

5. Tanin

Tanin merupakan golongan senyawa aktif tumbuhan yang bersifat fenol.

Secara kimia terdapat dua jenis tanin yang tersebar tidak merata dalam dunia

tumbuhan, yaitu tanin terkondensasi atau tanin katekin dan tanin terhidrolisis

(Robinson, 2005). Tanin yang terdapat dalam tumbuhan diduga dapat

25

mengkerutkan dinding sel atau membran sel bakteri sehingga dapat mengganggu

permeabilitas sel dari bakteri. Akibat terganggunya permeabilitas, sel bakteri tidak

dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhan bakteri terhambat atau

bahkan mati (Ajizah, 2004).

G. Uji Aktivitas Antibakteri

Uji antibakteri dapat dilakukan untuk mengetahui sejauh mana aktivitas

suatu bakteri terhadap antibakteri. Terdapat 3 metode yang umum digunakan

dalam uji antibakteri, yaitu metode dilusi kaldu, metode dilusi agar, dan metode

difusi cakram. Prinsip dari metode difusi cakram adalah senyawa antibakteri

dijenuhkan ke dalam kertas saring (kertas cakram). Kertas cakram yang

mengandung senyawa antibakteri tertentu ditanam pada media pembenihan agar

padat yang telah dicampur dengan bakteri yang diuji, kemudian diinkubasi pada

suhu dan waktu tertentu. Selanjutnya diamati adanya area (zona) bening di sekitar

cakram kertas yang menunjukkan tidak adanya pertumbuhan bakteri (Brock dan

Madigan, 1991).

Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi ukuran zona penghambatan dan

harus dikontrol adalah (Pratama, 2005) :

1. Konsentrasi bakteri pada permukaan medium. Semakin tinggi konsentrasi

bakteri maka zona penghambatan akan semakin kecil.

2. Kedalaman medium pada cawan petri. Semakin tebal medium pada cawan petri

maka zona penghambatan akan semakin kecil.

26

3. Nilai pH dari medium. Beberapa antibiotika bekerja dengan baik pada kondisi

asam dan beberapa kondisi alkali/basa.

4. Kondisi aerob/anaerob. Beberapa antibakterial kerja terbaiknya pada kondisi

aerob dan yang lainnya pada kondisi anaerob.

27

H. Kerangka Konsep

Gambar 7. Kerangka Konsep Penelitian

Infeksi olehbakteri S. typhi

Demam Tifoid

Pemberian antibiotik dalam jangka waktuyang panjang menyebabkan resistensi bakteri

Kandungan kimia, khasiat dan efek samping yangbelum terbukti secara ilmiah

Uji profil fitokimia denganmetode KLT

Uji aktivitas antibakteriterhadap S. typhi YCTC

Luas zona hambat

Profil fitokimia dan AktivitasAntibakteri terhadap pertumbuhan

S. typhi YCTC

Penggunaan tanaman sebagaiobat tradisional

28

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei-September 2014 yang bertempat

di Laboratorium Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo Kendari,

Sulawesi Tenggara.

B. Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental ekplorasi yaitu pengujian

profil fitokimia dan aktivitas ekstrak metanol daun, buah, bunga, batang, dan akar

dari beberapa tanaman terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella typhi YCTC.

C. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu tanaman Keji beling

(S. crispus) (akar, batang dan daun), Belimbing (A. bilimbi) (akar, batang dan

daun), Kangkung (I. aquatica) (batang dan daun), Secang (C. sappan) (bunga,

biji, batang dan daun), Jarak pagar (J. Curcas) (akar, batang dan daun), metanol,

medium NA, alkohol 70%, bakteri S. typhi YCTC, kloramfenikol, akuades,

larutan NaCl steril, kloroform, metanol, HCl pekat, asam asetat, FeCl3 1%,

H2SO4, benzene, n-heksan, etil asetat, pereaksi Lieberman-burchard dan amoniak.

29

D. Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu aluminium foil, autoklaf

(WiseClave), batang pengaduk, blender (Philips), cawan petri, chamber, corong,

erlenmeyer (Pyrex), gelas kimia, gelas ukur (Pyrex), hot plate, inkubator, jarum

ose, kertas saring, labu takar, laminar air flow, lampu UV (Srahlen Germany),

neraca analitik, oven (Gallenkamp Civilab-Australia), penotol/pipa kapiler, pinset,

pipet mikro, pipet tetes, pisau, plat KLT, rotary vacuum evaporator (IKA-Werke

RV 05 Germany), spatula, spektronik 20D, wadah plastik (jerigen dan botol

plastik) dan vial.

E. Prosedur Penelitian

1. Pengambilan dan Penyiapan Sampel

Sampel pada penelitian ini yaitu tanaman Keji beling (S. crispus),

Belimbing (A. bilimbi) dan Kangkung (I. aquatica) diperoleh dari kebun warga

Desa Monapa Kecamatan Mowila Kabupaten Konawe Selatan sedangkan

tanaman Secang (C. sappan) dan Jarak pagar (J. curcas) diperoleh di daerah

sekitar Kota Kendari. Preparasi sampel dilakukan dengan membersihkan sampel

terlebih dahulu kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan sebelum

dipotong-potong menjadi kecil kemudian diblender sampai menjadi serbuk.

Semua serbuk tersebut kemudian ditimbang 50 - 100 gram dari tiap-tiap bagian

tanaman dan disimpan dalam wadah plastik (botol plastik) untuk pengerjaan

selanjutnya.

30

2. Tahap Ekstraksi

Ekstraksi maserasi serbuk tanaman dilakukan dalam wadah tertutup selama

3 x 24 jam menggunakan pelarut metanol. Pemisahan residu dan filtrat

dilakukan setiap 1 x 24 jam diiringi penggantian pelarut yang sama. Maserat

dipisahkan dari ampas dengan penyaringan menggunakan corong dan kertas

saring kemudian diuapkan dengan Rotary Vacuum Evaporator pada suhu 56o C

hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak tersebut kemudian ditimbang dan

didapatkan bobot yang berbeda-beda.

3. Metode Pengenceran

Konsentrasi ekstrak 10.000 ppm yang digunakan pada metode ini ditentukan

melalui uji pendahuluan dengan mengacu pada metode sebelumnya. Konsentrasi

tersebut dibuat dengan melarutkan ekstrak dalam metanol.

4. Skrining Fitokimia

Uji fitokimia dengan KLT dilakukan dengan menggunakan plat silika gel

GF254. Ekstrak dari masing-masing tanaman ditotolkan pada jarak ± 1 cm dari tepi

bawah plat dengan pipa kapiler kemudian dikeringkan dan dielusi dengan fase

gerak kloroform-metanol (9:1). Setelah gerakan fase gerak sampai pada garis

batas, elusi dihentikan. Noda-noda pada permukaan plat diperiksa di bawah sinar

UV pada panjang gelombang 254 nm, 366 nm dan sinar tampak, kemudian

diberikan reagen penguji untuk masing-masing golongan senyawa. Reagen

penguji masing-masing golongan senyawa adalah sebagai berikut:

31

a. Golongan senyawa alkaloid digunakan pereaksi Dragendorff untuk mendeteksi

yang menunjukkan bercak coklat jingga (Lutfillah, 2008).

b. Golongan senyawa flavonoid diuapi uap amoniak akan menghasilkan warna

kuning kehijauan (Kusnaeni, 2008).

c. Golongan senyawa tanin digunakan penyemprot FeCl3 1% menghasilkan

warna lambayung (biru kehitaman) (Harborne, 2003).

d. Golongan senyawa saponin ketika ditambah H2SO4 menimbulkan warna ungu-

ungu gelap (Kristianingsih, 2005).

e. Golongan senyawa triterpenoid digunakan pereaksi Lieberman-burchard

menghasilkan warna merah ungu (violet).

5. Uji Aktivitas Antibakteri

a. Sterilisasi alat dan bahan

Cawan petri, erlenmeyer, tabung reaksi, spatula, kertas saring, Nutrient

Agar (NA), dan seluruh alat dan bahan (kecuali metanol dan ekstrak tanaman)

yang akan digunakan disterilisasi di dalam autoklaf pada suhu 121oC dan tekanan

15 Psi selama 15 – 20 menit setelah sebelumnya dicuci bersih, dikeringkan, dan

dibungkus dengan kertas (Pelczar dan Chan, 2005).

b. Penyiapan media

Media untuk pertumbuhan bakteri digunakan nutrient agar (NA). Media

disiapkan dengan cara menimbang media NA sebanyak 20 gram, dilarutkan dalam

1.000 ml air suling dalam erlenmeyer dan dipanaskan menggunakan hot plate

32

sampai mendidih dan larut sempurna kemudian disterilkan dalam autoklaf pada

suhu 121 oC selama 15 menit.

c. Penyiapan kultur bakteri

Bakteri uji yang digunakan pada penelitian ini yaitu bakteri S. typhi YCTC

yang berasal dari koleksi pribadi Prof. Sahidin. Bakteri yang digunakan

diremajakan dengan cara memindahkan 1 atau 2 ose yang ditanam pada media

NA, kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi dan diinkubasi selama 24 jam

pada suhu 37 ± 2oC.

d. Pembuatan suspensi mikroba

Suspensi standar 0,5 Mc. Farland

Sebanyak 0,05 mL BaCl2 dicampurkan dengan 9,95 mL H2SO4 1% dalam

tabung reaksi setelah itu dihomogenkan dimana suspensi 0,5 Mc. Farland adalah

suspensi standar yang menunjukkan kekeruhan jamur sama dengan 108 CFU/mL.

Cara pembuatan :

Bakteri yang akan diuji disuspensikan dengan cara menumbuhkan

mikroba dalam media cair NaCl steril. Kekeruhan bakteri diukur hingga sesuai

dengan standar Mc. Farland 0,5 menggunakan spektronik 20D pada λ 625 nm

(Khan dkk, 2006).

e. Pengujian aktivitas antibakteri

Aktivitas antibakteri diuji dengan metode difusi agar menggunakan kertas

cakram. Metode ini dilakukan dengan cara mencampur sebanyak 50 μl suspensi

bakteri ke dalam 15 ml media agar yang telah di cairkan dalam cawan petri steril

dan kemudian dibiarkan menjadi padat. Kertas cakram dengan diameter 6 mm

33

yang telah diteteskan 20 μl masing-masing zat uji (Adyana dkk., 2004), kontrol

pelarut dan ditambahkan pula antibiotik standar (kloramfenikol) diletakkan pada

permukaan media selanjutnya diinkubasi. Hasil uji daya antibakteri didasarkan

pada pengukuran diameter daerah hambat (DDH) pertumbuhan bakteri yang

terbentuk di sekeliling kertas cakram (Noor dkk., 2006).

F. Pengolahan Data

Data yang telah dihasilkan dianalisis dengan cara membandingkan karakter

perubahan visual yang terjadi pada pengujian yang dilakukan. Untuk pengujian

aktivitas antibakteri dapat dilihat dengan mengukur zona bening yang terbentuk

pada media pertumbuhan bakteri yang digunakan lalu membandingkan antara

zona bening yang terbentuk pada kontrol positif dan sampel penelitian. Luas zona

hambat setiap ekstrak tanaman dan kontrol positif diplotkan dalam bentuk

diagram batang untuk melihat perbandingan keefektifan dalam menghambat

pertumbuhan bakteri S. typhi YCTC. Diagram batang tersebut akan memberikan

gambaran ekstrak tanaman apakah yang mempunyai potensi paling baik dalam

menghambat pertumbuhan bakteri.

Data yang diperoleh pada uji profil fitokimia dengan metode KLT dapat

dianalisis dengan melihat noda yang tampak pada plat KLT setelah diberi reagen

penguji untuk menentukan golongan senyawa yang terdapat pada masing-masing

ekstrak tanaman.

34

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Preparasi Sampel

Sampel pada penelitian ini yaitu tanaman Keji beling (S. crispus),

Belimbing (A. bilimbi) dan Kangkung (I. aquatica) diperoleh dari kebun warga

Desa Monapa Kecamatan Mowila Kabupaten Konawe Selatan sedangkan

tanaman Secang (C. sappan) dan Jarak pagar (J. curcas) diperoleh di daerah

sekitar Kota Kendari. Preparasi sampel dimulai dengan melakukan sortasi basah

dengan air mengalir yang bertujuan untuk menghilangkan pengotor yang terdapat

pada sampel. kemudian dikeringkan terlebih dahulu sebelum dipotong-potong

menjadi kecil. Pemotongan sampel bertujuan untuk memudahkan proses

pengolahan menjadi serbuk, selanjutnya dilakukan proses sortasi kering untuk

memisahkan kotoran, bahan organik asing dan simplisia yang rusak karena proses

sebelumnya. Sampel kemudian diblender sampai menjadi serbuk dimana semakin

kecil ukuran dari suatu partikel akan memperbesar luas permukaan dari sampel

sehingga interaksi antara sampel dan pelarut akan lebih maksimal. Semua serbuk

tersebut kemudian ditimbang 50 - 100 gram dari tiap-tiap bagian tanaman dan

disimpan dalam wadah plastik (botol plastik) untuk pengerjaan selanjutnya.

Pada pembuatan ekstrak dari masing-masing tanaman cara penyarian yang

dipilih adalah metode maserasi. Metode ini dipilih karena memiliki beberapa

keuntungan antara lain tidak adanya proses pemanasan sehingga senyawa-

senyawa yang bersifat labil tidak menjadi rusak atau hilang oleh adanya panas,

cara pengerjaannya mudah, peralatannya sederhana dan mudah diusahakan

35

(Anonim, 1986). Maserasi dilakukan dalam wadah tertutup selama 3 x 24 jam

menggunakan pelarut metanol. Pemisahan residu dan filtrat dilakukan setiap

1 x 24 jam diiringi penggantian pelarut yang sama. Tujuan perendaman selama

24 jam adalah untuk mengendapkan senyawa-senyawa yang tidak diinginkan

yang ikut tersari dalam pelarut. Maserat dipisahkan dari ampas dengan

penyaringan menggunakan corong dan kertas saring kemudian diuapkan dengan

Rotary Vacum Evaporator pada suhu 56o C hingga diperoleh ekstrak kental. Hasil

ekstraksi serbuk tiap bagian tanaman dengan menggunakan pelarut metanol dan

setelah diuapkan dengan menggunakan alat Rotary Vacum Evaporator dapat

dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Perhitungan Rendamen Ekstrak

Sampel Serbuk (g) Ekstrak(g)

Rendamen(Ekstrak/Serbuk x

100 %) (%)

Keji Beling(Strobilanthescrispus)

Akar (A1) 44,32 1,52 3, 42

Batang (A2) 50,31 2,35 4,67

Daun (A3) 59,66 2,16 3,62

Belimbing(Averrhoabilimbi)

Akar (B1) 60,25 3,44 5,70

Batang (B2) 72,47 2,54 3,50

Daun (B3) 53,42 2,04 3,81

Kangkung(Ipomoeaaquatica)

Batang (C1) 40,55 1,40 3,45

Daun (C2) 48,24 1,31 2,71

Jarak Pagar(Jatropha curcas)

Akar (D1) 55,21 2,04 3,69

Batang (D2) 63,48 2,11 3,32

Daun (D3) 48,50 2,27 4,68

Secang(Caesalpiniasappan)

Batang (E1) 52,66 2,15 4,08

Daun (E2) 45,75 1,86 4,06

Biji (E3) 40.58 1,05 2,58

Bunga (E4) 45,20 1,63 3,60

36

B. Uji Profil Fitokimia

Uji profil fitokimia pada penelitian ini dilakukan dengan metode KLT.

Metode KLT dilakukan karena metode ini sederhana, murah, serta dapat

menganalisis beberapa komponen secara serempak. Pengujian dilakukan untuk

mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada masing-

masing ekstrak metanol tanaman. Golongan senyawa metabolit sekunder yang

diuji pada penelitian ini yaitu alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan triterpen.

Uji fitokimia dengan KLT dilakukan dengan menggunakan plat silika gel

GF254. Ekstrak dari masing-masing tanaman ditotolkan pada jarak ± 1 cm dari tepi

bawah plat dengan pipa kapiler kemudian dikeringkan, tujuan dikeringkannya

totolan pada plat sebelum dielusi adalah untuk menguapkan pelarut yang

digunakan sehingga yang terdapat pada plat nantinya hanya senyawa-senyawa

yang ada dalam ekstrak tersebut. Eluen yang dipakai sebagai fase gerak pada

penelitian ini adalah kloroform-metanol (9:1), digunakan eluen yang sama untuk

semua golongan senyawa dikarenakan fokus pada penelitian ini adalah untuk

mengidentifikasi golongan senyawa metabolit sekunder apa saja yang terdapat

pada masing-masing ekstrak tanaman. Setelah gerakan fase gerak sampai pada

garis batas, elusi dihentikan. Kemudian dilihat pada sinar UV 254 nm, 366 nm

dan sinar tsmpak sebelum ditambahkan reagen penguji untuk masing-masing

golongan senyawa. Gambar 8 menunjukkan plat KLT setelah dielusi pada panjang

gelombang 254 nm, 366 nm dan sebelum diberi penampak noda.

37

` (a) Lampu UV 254 nm (b) Lampu UV 366 nm

(c) Plat KLT sebelum diberi penampak noda

Gambar 8. Plat KLT setelah dielusi

1. Alkaloid

Hasil uji golongan senyawa alkaloid diperoleh berdasarkan noda yang

tampak pada plat KLT setelah masing-masing ekstrak ditotolkan pada lempeng

dan dielusi dengan fase gerak kemudian ditambahkan pereaksi Dragendorff

sebagai penampak noda. Ekstrak dengan kandungan senyawa alkaloid akan

menghasilkan warna coklat jingga yang merupakan reaksi antara bismut dan

merkuri nitrat dengan senyawa alkaloid.

38

Gambar 9. Uji Golongan Senyawa Alkaloid

Hasil uji golongan senyawa alkaloid menunjukkan hasil positif kandungan

senyawa pada akar dan daun tanaman keji beling (S. crispus), batang dan daun

tanaman belimbing (A. bilimbi), daun tanaman jarak pagar (J. curcas) dan batang

tanaman secang (C. sappan).

2. Flavonoid

Hasil uji golongan senyawa flavonoid diperoleh berdasarkan noda yang


dan dielusi dengan fase gerak kemudian diuapi dengan uap amoniak. Hasil uji

positif akan menampakkan warna kuning kehijauan.

Gambar 10. Uji Golongan Senyawa Flavonoid

39

Hasil uji golongan senyawa flavonoid seperti pada Gambar 10 menunjukkan

hasil positif kandungan senyawa pada daun tanaman keji beling (S. crispus),

batang tanaman kangkung (A. bilimbi) dan batang tanaman jarak pagar (J. curcas).

3. Tanin

Hasil uji golongan senyawa tanin diperoleh berdasarkan noda yang tampak

pada plat KLT setelah masing-masing ekstrak ditotolkan pada lempeng dan dielusi

dengan fase gerak kemudian ditambahkan FeCl3 1% sebagai penampak noda.

Hasil uji positif akan menghasilkan warna lembayung (biru kehitaman).

Gambar 11. Uji Golongan Senyawa Tanin

Hasil uji golongan senyawa tanin seperti pada Gambar 11 menunjukkan

hasil positif kandungan senyawa pada daun tanaman keji beling (S. crispus),

batang tanaman belimbing (A. bilimbi), daun tanaman kangkung (I. aquatica) dan

batang, daun dan bunga tanaman secang (C. sappan).

40

4. Saponin

Hasil uji golongan senyawa saponin diperoleh berdasarkan noda yang


dan dielusi dengan fase gerak kemudian ditambahkan H2SO4. Hasil uji positif

akan menghasilkan warna ungu-ungu gelap.

Gambar 12. Uji Golongan Senyawa Saponin


hasil positif kandungan senyawa pada akar dan batang tanaman keji beling (S.

crispus), semua bagian tanaman belimbing (A. bilimbi), semua bagian tanaman

kangkung (I. aquatica), semua bagian tanaman jarak pagar (J. curcas) dan bagian

batang, biji dan bunga tanaman secang (C. sappan).

5. Triterpen

Hasil uji golongan senyawa triterpen diperoleh berdasarkan noda yang


dan dielusi dengan fase gerak kemudian ditambahkan pereaksi Lieberman-

burchard. Hasil uji positif akan menghasilkan warna merah-ungu (violet).

41

Gambar 13. Uji Golongan Senyawa Triterpen


hasil positif kandungan senyawa pada bagian akar tanaman jarak pagar (J. curcas)

dan bagian batang dan bunga tanaman secang (C. sappan).

Hasil uji profil fitokimia untuk menentukan kandungan golongan senyawa

metabolit sekunder dari masing-masing ekstrak metanol tanaman dapat dilihat

pada Tabel 2.

Tabel 2. Hasil uji golongan senyawa metabolit sekunder

Sampel A F Ta S Tr


Akar (A1) 1 - - 2 -

Batang (A2) - - - 1 -

Daun (A3) 1 1 1 - -

Belimbing(Averrhoa bilimbi)

Akar (B1) - - - 2 -

Batang (B2) 1 - 1 1 -

Daun (B3) 1 - - 2 -

Kangkung(Ipomoea aquatica)

Batang (C1) - 1 - 3 -

Daun (C2) - - 1 2 -


Akar (D1) - - - 2 1

Batang (D2) - 1 - 3 -

Daun (D3) 1 - - 2 -

Secang(Caesalpinia

Batang (E1) 1 - 1 3 2

Daun (E2) - - 1 - -

42

sappan) Biji (E3) - - - 2 -

Bunga (E4) - - 1 3 3

Keterangan :

A : Alkaloid Tr : Triterpen

F : Flavonoid 1,2,3 : Jumlah kandungan senyawa

Ta : Tanin - : Tidak mengandung

S : Saponin

C. Uji Aktivitas Antibakteri

Uji aktivitas antibakteri pada penelitian ini dilakukan terhadap bakteri S.

typhi YCTC. Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui daya hambat ekstrak

metanol dari masing-masing ekstrak tanaman dan kloramfenikol terhadap bakteri

S. typhi YCTC. sampel yang digunakan dalam penelitian ini yaitu tanaman Keji

beling (S. crispus), Belimbing (A. bilimbi), Kangkung (I. aquatica), Secang (C.

sappan), Jarak pagar (J. Curcas). Masing-masing ekstrak diencerkan dengan

konsentrasi 10.000 ppm kemudian diuji pada bakteri uji untuk melihat aktivitas

tanaman tersebut dalam menghambat pertumbuhan pada bakteri uji.

Hasil pengukuran diameter zona hambat terhadap pertumbuhan S. typhi

YCTC didapatkan dari hasil pengukuran diameter zona bening yang terbentuk di

sekitar kertas cakram, kemudian nilai disesuaikan dengan indikator diameter zona

hambat, dengan interpretasi apabila didapatkan nilai ˂ 3 mm pada pengukuran

diameter zona bening bermakna respon hambatan lemah, 3-6 mm bermakna

respon hambatan sedang dan jika bernilai > 6 mm respon hambatan kuat (Pan

dkk., 2009).

Hasil pengujian aktivitas antibakteri dari masing-masing ekstrak metanol

sampel tanaman terhadap bakteri S. typhi YCTC memberikan hasil yang berbeda-

43

beda. Pada tanaman Keji beling (S. crispus), diperoleh interpretasi respon

hambatan yang berbeda-beda pada masing-masing bagian tanaman. Bagian akar

tanaman menunjukkan interpretasi respon hambatan yang kuat terhadap bakteri

dengan nilai 9 mm, bagian batang tidak menunjukkan respon hambatan terhadap

bakteri uji dengan nilai 0 mm, sedangkan pada bagian daun menunjukkan respon

hambatan yang sedang dengan nilai 5 mm sehingga bagian akar dan daun dari

tanaman Keji beling (S. crispus) dapat dikatakan memiliki potensi sebagai

antibakteri terhadap bakteri S. typhi YCTC berdasarkan respon hambatan berupa

zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram seperti ditunjukkan pada

Gambar 14.

Gambar 14. Hasil uji aktivitas tanaman Keji beling (S. crispus)

Hasil uji pada tanaman Belimbing (A. bilimbi) menunjukkan hanya pada

bagian daun yang berpotensi sebagai antibakteri S. typhi YCTC dengan

interpretasi respon hambatan kuat dengan nilai 9 mm, sedangkan pada bagian akar

dan batang tanaman tidak berpotensi sebagai antibakteri terhadap S. typhi YCTC

karena tidak adanya zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram. Gambar

15 menunjukkan hasil uji aktivtas dari tanaman belimbing (A. bilimbi).

44

Gambar 15. Hasil uji aktivitas tanaman Belimbing (A. bilimbi)

Hasil uji pada tanaman Kangkung (I. aquatica) dan Jarak pagar (J. Curcas)

menunjukkan tidak adanya respon hambatan dari keseluruhan bagian tanaman

karena tidak terbentuk zona bening di sekitar kertas cakram pada cawan petri

seperti ditunjukkan pada Gambar 16, sehingga dapat dikatakan bahwa kedua

tanaman tersebut belum berpotensi sebagai antibakteri terhadap S. typhi YCTC.

(a) (b)

Gambar 16. (a) Hasil uji aktivitas tanaman Kangkung (I. aquatica) (b) Hasil ujiaktivitas tanaman Jarak pagar (J. curcas)

Hasil uji aktivitas pada tanaman Secang (C. sappan) menunjukkan adanya

respon hambatan terhadap bakteri S. typhi YCTC pada bagian batang dan bunga

44







(a) (b)




44







(a) (b)




45

dengan adanya zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram. Bagian

batang dari tanaman menunjukkan interpretasi sedang dengan nilai 3,5 mm, pada

bagian bunga juga menunjukkan interpretasi sedang dengan nilai 6 mm,

sedangkan bagian daun dan biji dari tanaman tidak menunjukkan adanya respon

hambatan terhadap bakteri S. typhi YCTC. Gambar 17 menunjukkan hasil uji

aktivitas antibakteri tanaman secang (C. sappan).

Gambar 17. Hasil uji aktivitas tanaman Secang (C. sappan)

Perbedaan respon hambat yang dilihat dengan terbentuknya diameter zona

bening di sekitar kertas cakram yang telah dijenuhkan dengan ekstrak dari bagian

yang berbeda-beda masing-masing tanaman terhadap S. typhi YCTC diduga

karena terdapat perbedaan kandungan senyawa aktif yang dimiliki oleh masing-

masing ekstrak walaupun pada prinsipnya semua tanaman memiliki senyawa

metabolik sekunder yang aktif. Senyawa metabolit sekunder dalam tumbuhan

biasanya tersebar merata ke seluruh bagian tanaman tetap dalam kadar yang

berbeda-beda (Robinson, 2005).

Hasil uji aktivitas antibakteri dari masing-masing ekstrak metanol tanaman

dapat dilihat pada Tabel 3.

46

Tabel 3. Hasil uji aktivitas antibakteri

SampelDiameter

Daerah hambat(mm)

Interpretasi


Akar (A1) 9 Kuat

Batang (A2) 0 Tidak ada aktivitas

Daun (A3) 5 Sedang

Belimbing(Averrhoa bilimbi)

Akar (B1) 0 Tidak ada aktivitas

Batang (B2) 0 Tidak ada aktivitas

Daun (B3) 9 Kuat

Kangkung(Ipomoea aquatica)

Batang (C1) 0 Tidak ada aktivitas

Daun (C2) 0 Tidak ada aktivitas


Akar (D1) 0 Tidak ada aktivitas

Batang (D2) 0 Tidak ada aktivitas

Daun (D3) 0 Tidak ada aktivitas

Secang(Caesalpiniasappan)

Batang (E1) 3,5 Sedang

Daun (E2) 0 Tidak ada aktivitas

Biji (E3) 0 Tidak ada aktivitas

Bunga (E4) 6 Sedang

Data hasil penelitian di atas menunjukkan ada beberapa ekstrak yang tidak

menunjukkan aktifitas daya hambat sebagai antibakteri terhadap S. typhi YCTC

sedangkan pada hasil profil fitokimianya memiliki kandungan golongan metabolit

sekunder yang kemungkinan aktif sebagai antibakteri. Ada beberapa faktor yang

dapat mempengaruhi hal tersebut. Setiap senyawa memiliki konfigurasi yang

berbeda-beda sehingga efek biologi pada setiap senyawa juga berbeda meskipun

dalam golongan senyawa metabolit yang sama dan banyaknya kandungan

senyawa aktif dalam ekstrak menyebabkan senyawa aktif akan lebih mudah untuk

merusak sel bakteri, tidak terbentuknya zona hambat pada beberapa ekstrak

disebabkan oleh rendahnya senyawa aktif yang dapat menyebabkan

penghambatan pertumbuhan bakteri uji (terjadi pada sebagian kecil dari jumlah

47

total sel bakteri) sehingga bakteri yang tidak terganggu oleh senyawa aktif yang

kadarnya rendah dapat terus tumbuh.

Faktor lain yang mempengaruhi hasil penelitian ini adalah adanya unsur-

unsur pada ekstrak yang merupakan nutrien yang dibutuhkan mikroorganisme

dalam jumlah yang relatif besar, yakni sebagai penyusun protein, sebagai kofaktor

enzim dan kation seluler (Prescott dkk., 2005). Setiap tumbuhan juga memiliki

perbedaan akumulasi, jenis, dan kadar metabolit sekunder yang kemungkinan

dapat menyebabkan perbedaan aktivitas antibakteri (Irmalia, 2011). Hasil uji

aktivitas antibakteri dari tanaman jarak pagar (J. curcas) menunjukkan tidak

adanya respon hambatan pada bakteri S. typhi. Hal ini tidak sesuai dengan

beberapa literatur dan pengetahuan empiris masyarakat yang menjelaskan bahwa

tanaman ini berpotensi sebagai antibakteri, hal ini dapat dipengaruhi oleh faktor

lingkungan tempat tumbuh dari tanaman dimana lokasi tanaman yang berbeda

akan menghasilkan kandungan senyawa metabolit sekunder yang berbeda pula

sehingga aktivitas yang dimiliki juga akan berbeda, selain itu tanaman ini

kemungkinan aktif pada jenis bakteri yang lain seperti E. coli dan S. aureus.

Senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, dan triterpen merupakan

senyawa yang memiliki kesamaan struktur dengan kontrol positif yang digunakan

yaitu kloramfenikol dimana pada senyawa-senyawa tersebut terdapat cincin

aromatik yang juga terdapat pada kloramfenikol sehingga dapat dikatakan bahwa

cincin aromatik tersebut yang memiliki aktivitas sebagai antibakteri oleh karena

itu dibutuhkan penelitian lebih lanjut untuk memastikan aktivitas dari masing-

masing golongan senyawa berkaitan dengan struktur yang dimilikinya. Gambar 18

48

OH

N

O

O-

OH

HN

O

Cl

Cl

menunjukkan perbandingan struktur dari kloramfenikol dengan masing-masing

golongan senyawa metabolit sekunder.

(a) (b)

(c) (d)

(e) (f)

Gambar 18. (a) Struktur kloramfenikol (b) Struktur alkaloid (c) Strukturflavonoid (d) Struktur tanin (e) Struktur saponin(f) Struktur triterpen

N

O

O

OH

OH

49

Kloramfenikol sebagai kontrol positif merupakan senyawa dengan rumus

molekul C11H12Cl2N2O5 yang digunakan sebagai antibiotik bersifat bakteriostatik

dan berspektrum luas. Kloramfenikol bertindak dengan jalan menghambat sintesis

protein yaitu mengikat sub unit 50 S pada ribosom sel bakteri dan menghambat

aktifitas enzim peptidil transferase dengan cepat tanpa mengganggu sintesis DNA

dan RNA. Kerja kloramfenikol dengan melihat kerangka molekul senyawa

terdapatnya atom klor dan cincin aromatik, dengan subtituen gugus nitro dengan

posisi para dan 2 gugus hidroksil. Adanya struktur tersebut memungkinkan

terjadinya interaksi dengan enzim peptidil transferase di ribosom bakteri sehingga

terjadi penghambatan kerja enzim tersebut (Mardjono, 1995).

Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri melalui penghambatan sintesis

dinding sel yang akan menyebabkan lisis pada sel sehingga sel akan mati

(Lamothe, 2009). Senyawa alkaloid memilki gugus basa yang mengandung

nitrogen yang akan bereaksi dengan senyawa asam amino yang menyusun dinding

sel bakteri dan DNA bakteri. Reaksi ini mengakibatkan terjadinya perubahan

struktur dan susunan asam amino, sehingga akan menimbulkan perubahan

keseimbangan genetik pada rantai DNA mengakibatkan kerusakan dan

mendorong terjadinya lisis sel bakteri yang akan menyebabkan kematian sel pada

bakteri (Tanaka dkk., 2006).

Mekanisme golongan senyawa flavonoid sebagai antibakteri melalui

kemampuan untuk membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler dan protein

yang dapat larut serta dinding sel bakteri (Dwidjoseputro, 2010). Ikatan kompleks

senyawa flavonoid dengan protein sel bakteri melalui ikatan hidrogen menjadikan

50

sel bakteri tidak stabil karena struktur protein sel bakteri menjadi rusak karena

adanya ikatan hidrogen dengan flavonoid, sehingga protein sel bakteri menjadi

kehilangan aktivitas biologinya, akibatnya fungsi permeabilitas sel bakteri

terganggu dan sel bakteri akan mengalami lisis yang berakibat pada kematian sel

bakteri (Harbone, 2003).

Mekanisme kerja tanin, dapat mengerutkan dinding sel atau membran sel

bakteri sehingga dapat mengganggu permeabilitas sel. Akibat terganggunya

permeabilitas, sel bakteri tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga

pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati (Ajizah, 2004 dalam Rahmadani,

2013).

Mekanisme kerja dari golongan senyawa saponin, akan mengubah tegangan

muka dan mengikat lipid pada sel bakteri yang menyebabkan lipid terekskresi dari

dinding sel sehingga permeabilitas membran bakteri terganggu (Wardhani dan

Nanik, 2012). Senyawa saponin dapat bersifat antibakteri dengan merusak

membran sel. Rusaknya membran menyebabkan substansi penting keluar sel dan

juga dapat mencegah masuknya bahan-bahan penting ke dalam sel. Jika fungsi

membran sel dirusak maka akan mengakibatkan kematian sel (Monalisa dkk.,

2011).

Mekanisme terpenoid sebagai antibakteri adalah bereaksi dengan porin

(protein transmembran) pada membran luar dinding sel bakteri, membentuk ikatan

polimer yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya porin. Rusaknya porin yang

merupakan pintu keluar masuknya senyawa akan mengurangi permeabilitas

51

dinding sel bakteri yang akan mengakibatkan sel bakteri akan kekurangan nutrisi

sehingga pertumbuhan bakteri terhambat atau mati (Cowan, 1999).

Dalam hal ini belum dapat ditentukan secara pasti satu golongan senyawa

aktif yang berfungsi sebagai antibakteri. Untuk mengetahui dengan pasti golongan

senyawa yang aktif sebagai antibakteri maka perlu dilakukan pemeriksaan lebih

lanjut terhadap masing-masing golongan senyawa tersebut. Selain dari golongan

senyawa yang teridentifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT), tidak

tertutup kemungkinan terdapatnya metabolit/golongan senyawa aktif lain dalam

ekstrak metanol dari masing-masing tanaman yang belum teridentifikasi dan

berpotensi sebagai antibakteri terhadap S. typhi YCTC.

52

BAB V

PENUTUP

A. Simpulan

Simpulan yang diperoleh dari penelitian ini adalah :

1. Metabolit sekunder golongan senyawa alkaloid terdapat pada ekstrak metanol

akar dan daun tanaman keji beling (S. crispus), batang dan daun tanaman

belimbing (A. bilimbi), daun tanaman jarak pagar (J. curcas) dan batang


2. Metabolit sekunder golongan senyawa flavonoid terdapat pada ekstrak

metanol daun tanaman keji beling (S. crispus), batang tanaman kangkung

(I. aquatica) dan batang tanaman jarak pagar (J. curcas).

3. Metabolit sekunder golongan senyawa tanin terdapat pada ekstrak metanol

daun tanaman keji beling (S. crispus), batang tanaman belimbing (A. bilimbi),

daun tanaman kangkung (I. aquatica) dan batang, daun dan bunga tanaman

secang (C. sappan).

4. Metabolit sekunder golongan senyawa saponin terdapat pada ekstrak metanol

akar dan batang tanaman keji beling (S. crispus), semua bagian tanaman

belimbing (A. bilimbi), semua bagian tanaman kangkung (I. aquatica), semua

bagian tanaman jarak pagar (J. curcas) dan bagian batang, biji dan bunga


5. Metabolit sekunder golongan senyawa triterpen terdapat pada ekstrak metanol

akar tanaman jarak pagar (J. curcas) dan batang dan bunga tanaman secang

(C. sappan).

53

6. Ekstrak metanol bagian akar dan daun tanaman Keji beling (S. crispus)

menunjukkan adanya respon hambat terhadap pertumbuhan S. typhi YCTC

dengan nilai 9 mm (interpretasi kuat) dan 5 mm (interpretasi sedang),

sedangkan bagian batang tidak menunjukkan respon hambatan terhadap

bakteri S. typhi YCTC.

7. Ekstrak metanol bagian daun tanaman Belimbing (A. bilimbi) menunjukkan

adanya respon hambatan terhadap pertumbuhan S. typhi YCTC dengan nilai

9 mm (interpretasi kuat), sedangkan bagian akar dan batang tidak

menunjukkan respon hambatan terhadap bakteri S. typhi YCTC.

8. Ekstrak metanol bagian batang dan daun tanaman Kangkung (I. aquatica)

tidak menunjukkan adanya respon hambatan terhadap pertumbuhan S. typhi

YCTC.

9. Ekstrak metanol bagian batang dan bunga tanaman Secang (C. sappan)

menunjukkan adanya respon hambatan terhadap pertumbuhan S. typhi YCTC

dengan nilai 3,5 mm (interpretasi sedang) dan 6 mm (interpretasi sedang),

sedangkan bagian daun dan biji tidak menunjukkan respon hambatan

terhadap bakteri S. typhi YCTC.

10. Ekstrak metanol bagian akar, batang dan daun tanaman Jarak pagar

(J. curcas) tidak menunjukkan adanya respon hambatan terhadap

pertumbuhan S. typhi YCTC.

54

B. Saran

Saran yang dapat diberikan berdasarkan simpulan di atas adalah :

1. Perlu dilakukan isolasi terhadap ekstrak tanaman yang memiliki aktivitas

antibakteri agar diketahui kandungan senyawa yang terdapat didalamnya.

2. Perlu dilakukan pengujian dengan metode biautografi untuk mengetahui

golongan senyawa metabolit sekunder yang memberikan aktivitas antibakteri.

3. Ekstrak metanol beberapa bagian tanaman Keji beling (S. crispus), Belimbing

(A. bilimbi) dan Secang (C. sappan) memiliki potensi sebagai antibakteri

terhadap S. typhi YCTC sehingga penelitian ini dapat dijadikan sebagai

literatur untuk penelitian selanjutnya dengan metode lain (in vivo).

4. Untuk memberikan informasi dan pengetahuan mengenai potensi dan profil

fitokimia tanaman obat ini, dapat dilakukan publikasi melalui media internet

maupun sosialisasi kepada masyarakat.

55

DAFTAR PUSTAKA

Adyana, I, K., Yulinah. E., Sigit J. I. K Fisheri N., dan Insanu M., 2004, EfekEkstrak Daun Jambu Biji Daging Buah Putih dan Jambu Biji Daging BuahMerah sebagai Antidiare, Acta Pharmaceutica Indonesia, (1).

Ajizah, A.. 2004. Sensitivitas Salmonella Typhimurium terhadap Ekstrak DaunPsidium Guajava L. Bioscientiae. 1 (1).

Alamsyah, A, N., 2006, Biodisel Jarak Pagar: Bahan Bakar Alternatif YangRamah Lingkungan, Agromedia Pustaka, Jakarta.

Amelia, 2008, Saponin Fitokimia Ajaib, http/209.85.175.104/search?q=cache;XqOe419Ap-sJ: Diakses pada 23 Mei 2014.

Anonim, 1986, Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,Jakarta.

Aripin, S., 2007, Identifikasi Senyawa Flavonoid dari Bunga Angsret (Spathodacampanulata Beauv) dan Uji Aktivitasnya Sebagai Antioksidan, Skripsi,Universitas Brawijaya, Malang.

Awoyinka, O.A., Balogun, I.O., dan Ogunnowo, A.A.. 2007. PhytochemicalScreening and In Vitro Bioactivity Cnidoscolus aconitifolius(Euphorbiaceae). Journal of Medicinal Plants Research. 1 (3).

Brodjonegoro, T, P., Rekksowardjojo, I, K., dan Soerawidjaja, T, H., 2006, JarakPagar, Sang Primadona, Departemen Teknik Kimia, LaboratoriumTermofluida dan System Utilitas, Kelompok Riset Biodiesel ITB, Bandung.

Cheeke, R, P., 2004, Saponins : Surprising Benefits Of Desert Plants, LinusPailing Institute, USA.

Christina, 2008, Formulasi Gel Antioksidan Ekstrak Buah Buncis (Phaseolusvulgaris L) dengan Menggunakan Basis Aqupec 505 hv., UniversitasPadjajaran, Bandung.

Cowan, M., 1999, Plant Product as Antimicrobial Agent, Clinical MicrobiologyReviews, 12 (4)

Dalimartha, S., dan Wijayakusuma, H., 2006. Ramuan Tradisional untukPengobatan Hepatitis, Penebar Swadaya, Jakarta.

Daris, A., 2010, Fitokimia Mencegah Penyakit Degeneratif. IndonesianPharmacists Association, Diakses 27 Juni 2014.

56

Dianasari, N., 2009, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kayu Secang (Caesalpiniasappan L.) terhadap Staphylococcus aureus dan Shigella dysentriae sertaBioautografinya, Skripsi, Universitas Muhammadiyah, Surakarta.

Dumont, 1985, Analisis Obat secara Kromatografi dan Mikroskopi, ITB,Bandung.

Dwidjoseputro, D., 2010, Dasar-Dasar Mikrobiologi, Djambatan, Jakarta.

Fajriati, I., Malawati, R., dan Muzakky, 2011, Studi Ekstraksi Padat CairMenggunakan Pelarut Logam Cr dan Cu dalam Sampel Sedimen Sungai diSekitar Calon PLTN Muria, Jurnal Ilmu Dasar, 12 (1).

Gandjar, I. G., dan Abdul, R., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar,Yogyakarta.

Ganiswara, G, G., 2007, Farmakologi dan Terapi. Edisi 5, Fakultas KedokteranUniversitas Indonesia, Jakarta.

Gunawan, D., dan Mulyani, S., 2004, Ilmu Obat Alam (Farmakognosi) Edisi 1,Penebar Swadaya, Jakarta.

Gunawan, I., 2011, Efek Keji Beling (Sericocalyx Crispus L) terhadap PenurunanTekanan Darah Pria Dewasa, Skripsi, Fakultas kedokteran UniversitasKristen Maranatha, Bandung.

Harborne, J, B., 2003, Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern MenganalisaTumbuhan. Edisi II, Institut Teknologi Bandung, Bandung.

Hariyadi, 2005, Budidaya Tanaman Jarak (Jatropha curcas ) sebagai SumberBahan Alternatif Biofuel, Departemen Budidaya Pertanian, FakultasPertanian IPB, Bogor.

Hariana, A.. 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri Pertama. PenerbitPenebar Swadaya : Jakarta.

Hayani, E., dan Sukmasari, M., 2005, Teknik Pemisahan Komponen EkstrakPurwoceng Secara Kromatografi Lapis Tipis, Buletin Teknik Pertanian, 10(2).

Indriani H., 2003, Stabilitas Pigmen Alami Kayu Secang (Caesalpinia sappanLinn) dalam Model Minuman Ringan, Skripsi, Institut Pertanian Bogor,Bogor.

57

Irmalia, W.R.. 2011. Daya Antibakteri Ekstrak Biji Coklat (Theobroma cacao)Varietas Farastero terhadap Streptococus mutans. Skripsi. FakultasKedokteran Gigi, Universitas Airlangga.

Jawetz, E., J, L, Melnick, dan E, A, Adelberg, 2007, Mikrobiologi untuk ProfesiKesehatan (Review of Medical Microbiology) : Diterjemahkan oleh H.Tomang, Penerbit EGC, Jakarta.

Jaya, A, M., 2010, Isolasi dan Uji Efektivitas Antibakteri Senyawa Saponin dariAkar Putri Malu (Mimosa pudica), Skripsi, Jurusan Kimia Fakultas Sainsdan Teknologi UIN Maulana Malik Ibrahim, Malang.

Kemenkes, 2006, Pedoman Pengendalian Demam Tifoid, Kementerian KesehatanRepublik Indonesia, Jakarta.

Khunaifi, M., 2010, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong (Anrederacordifolia (Ten.) Steenis) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus danPseudomonas aeruginosa, Skripsi, Fakultas Sains dan Teknologi,Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang.

Kingsbury, J, M., 1964, Poisonous Plants of the United States and Canada.Prentice-Hall, Inc., Englewood Cliffs, New Jersey.

Kristianingsih, 2005, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Triterpenoid dari AkarTanaman Kedondong Laut (Polyscias fruticosa), Skripsi, UniversitasBrawijaya, Malang.

Kusnaeni, V., 2008, Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Fraksi n-Heksana dariekstrak kulit batang Angsret (Spathoda campanulata Beauv), Skripsi,Universitas Brawijaya, Malang.

Lenny, S. 2006. Senyawa Flavonoida, Fenilpropanoida dan Alkaloida, KaryaIlmiah, Departemen Kimia FMIPA Universita Sumatera Utara, Medan.

Liana, I., 2010, Aktivitas Antimikroba Fraksi dari Ekstrak Metanol DaunSenggani (Melastoma candidum D. Don) terhadap Staphylococcus aureusdan Salmonella typhimurium serta Profil Kromatografi Lapis Tipis FraksiTeraktif, Skripsi, Jurusan Biologi F-MIPA. Universitas Sebelas Maret,Surakarta.

Lutfillah, M., 2008, Karakterisasi Senyawa Alkaloid Hasil Isolasi dari KulitBatang Angsret (Spathoda campanulata Beauv) Serta Uji AktivitasnyaSebagai Antibakteri secara In Vitro, Skripsi, Universitas Brawijaya, Malang.

Madigan, M, T., Martinko, J, M., Stahl, D, A., dan Clark, D, P., 2012, Brock :Biology of Microorganism 13th Edition.

58

Madjid, B., 2003, Mikrobiologi Medik 2, Fakultas Kedokteran UniversitasHasanuddin, Makassar.

Mardjono, M., 1995, Farmakologi dan Terapi, Gaya Baru, Jakarta.

Maryani, H., 2003, Tanaman Obat untuk Mengatasi Penyakit pada Usia Lanjut,Agromedia Pustaka, Jakarta.

Noor, M. S. Poeloengan., dkk, 2007, Uji Daya Antibakteri Ekstrak Etanol KulitBatang Bungur (Largerstoremia speciosa Pers) terhadap Staphylococcusaureus dan Escherichia coli secara in vitro, Seminar Nasional TeknologiPeternakan dan Veteriner, Universitas Pancasila Jakarta.

Olson, J., 2004, Belajar Mudah Farmakologi, Cetakan 1, EGC, Penerbit BukuKedokteran, Jakarta.

Pan, X., Chen, F., Wu, T., Tang, H., dan Zhao, Z. 2009. The Acid, Bile Toleranceand Antimicrobial Property of Lactobacillus acidophilus NIT. J. FoodControl. 20

Pelczar, M J., dan Chan, E, C, S., 2005, Dasar-dasar Mikrobiologi Edisi 1, UIPress, Jakarta.

____________, 2007, Dasar-Dasar Mikrobiologi Edisi 2, UI Press, Jakarta.

Praptiwi, Puspa Dewi, dan Mindarti Harapini, Nilai Peroksida Dan Aktivitas AntiRadikal Bebas Diphenyl Picril Hydrazil Hydrate (Dpph) Ekstrak MetanolKnema laurina, Majalah farmasi indonesia, 17(1).

Pratiwi, S,T., 2008, Mikrobiologi Farmasi, Erlangga, Jakarta.

Prescott L.M., Harley, J.P., dan Klein, D.A., 2005. Microbiology, Sixth Edition.McGraw-Hill, New York.

Pudjiaji, A, H., Hegar, B., Handryastuti, S., Idris, N, S., Gandaputra, E, P., danHarmoniati, E, D., 2009, Ikatan Dokter Anak Indonesia. PedomanPelayanan Medis.

Purnobasuki, H., 2004, Potensi Mangrove sebagai Tanaman Obat. JurusanBiologi FMIPA Unair, Surabaya.

Rahmadani, S. S., 2013, Uji Daya Hambat Ekstrak Tanaman Komba – Komba(Chromolaena odorata) terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureusATCC 25923, Streptococcus sp, Salmonella typhi YCTC, dan Escherechia

59

coli ATCC 35218. Skripsi, Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo,Kendari.

Robinson, 2005, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, ITB, Bandung.

Ruslin dan Sahidin, I., 2008, Identifikasi dan Determinasi Tanaman ObatTradisional Masyarakat Sulawesi Tenggara pada Arboretum Prof. MahmudHamundu, Majalah Farmasi Indonesia. 19 (2).

Santosa, H., 2008 Ragam dan Khasiat Tanaman Obat. Agromedia Pustaka,Jakarta.

Setiabudy, R., 2009, Farmakologi dan Terapi, Balai Penerbit FKUI, Jakarta.

Sudarmadji, S., Haryono, B., dan Suhardi, 2007, Analisa Bahan Makanan danPertanian, Penerbit Liberty, Yogyakarta.

Sumaryanto, A., 2009, Isolasi Karakterisasi Senyawa Alkaloid dari Kulit BatangTanaman Angsret (Spathoda campanulata Beauv) Serta Uji AktivitasBiologisnya dengan Metode Uji Brine Shrimp, Skripsi, UniversitasBrawijaya, Malang.

Sundari, D, L., Widowati, dan M, W, Winarno., 1998, Informasi Khasiat,Keamanan dan Fitokimia Tanaman Secang (Caesalpinia sappan L.). WartaTumbuhan Obat Indonesia. 4 (3).

Supriyono, 2011, Demam Tifoid, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,Jakarta.

Susanti, M., Isnaeni, dan Poedjiarti, S., 2009, Validasi Metode Bioautografi untukDeterminasi Kloramfenikol, Jurnal Kedokteran Indonesia, 1 (1).

Tanaka, J.C.A., C.C. da Silva, A.J.B. de Oliveira, C.V. Nakamura dan B.P. DiasFilho, 2006, Antibacterial activity of indole alkaloids from Aspidospermaramiflorum, Braz J Med Biol Res, 39.

The United States Pharmacopeial Convention, 1999, The United StatesPharmacopeia. Ed. 31th, Vol. 2nd, The United States PharmacopeialConvention, Inc., Philadelphia.

Tjitrosoepomo, G., 2000, Morfologi Tumbuhan, Gadjah Mada University Press,Yogyakarta.

Wahyono, H., 2010, Resistensi Antibiotik, Pidato pengukuhan guru besarMikrobiologi FK UNDIP, Semarang.

60

Wahyuni, A., Hardjono dan P, H, Yamrewav., 2004, Ekstraksi Kurkumin dariKunyit, Prosiding Seminar Nasional Rekayasa Kimia.

Wardhani, K, L., dan Nanik, S., 2012, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak EtilAsetat Daun Binahong (Anredera scandens (L.) Moq.) terhadap Shigellaflexneri Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Jurnal Ilmiah Kefarmasian2 (1)

Widoyono, 2011, Penyakit Tropis Epidemiologi, Penularan, Pencegahan, danPemberantasannya. Edisi II, Erlangga, Jakarta.

Winarti, C., dan Nurdjanah, N., 2005, Peluang Tanaman Rempah dan ObatSebagai Sumber Pangan Fungsional, Jurnal Litbang Pertanian. 24 (2).

Yodha, Agung W, M., 2012, Isolasi dan Elusidasi Struktur Senyawa Kimia DariKulit Batang Mangkokan (Nothopanax Scutellarium Merr) Serta UjiAktivitasnya Terhadap Bakteri, Fungi Dan Radikal Bebas, Skripsi,Universitas Haluoleo, Kendari.

61

Lampiran 1. Penyiapan Ekstrak Tanaman

a. Pembuatan ekstrak kental

b. Pembuatan larutan ekstrak 10.000 ppm

Sampel Tanaman

- Dikumpulkan- Dibersihkan dengan air mengalir- Dikeringkan- Dipotong kecil-kecil- Diblender hingga menjadi serbuk

Serbuk tanaman

- Ditimbang 50-100 gram- Dimasukkan dalam wadah

plastik- Direndam dengan metanol

selama 3x24 jam- Dipisahkan filtrat dan residunya

Filtrat Residu

- Dikumpulkan- Dipekatkan dengan vacuum rotary

evaporatorpada suhu 56oC- Disimpan pada wadah vial

Ekstrak kental

Ekstrak kental

- Ditimbang 0,5 gram- Dimasukkan dalam labu takar 50

ml- Dilarutkan dengan metanol hingga

tanda tera- Dimasukkan dalam wadah kaca

Larutan ekstrak 10.000 ppm

62

Lampiran 2. Pembuatan Reagen

a. Pembuatan Dragendrof (alkaloid) noda coklat jingga

1. 0,6 g bismutsubnitrat dalam 2 mL HCl pekat dan 10 mL H2O.

2. 6 g KI dalam 10 mL H2O.

Kedua larutan tersebut dicampur dengan 7 mL HCl pekat dan 15

mL H2O (Harborne, 1987).

b. Pembuatan FeCl3 1%

1% = x100 %

1% = x100 %

gram = 1

Jadi, untuk membuat larutan FeCl3 1% diambil sebanyak 1 gram serbuk

FeCl3dan dilarutkan dalam labu ukur 100 ml

c. Pembuatan H2SO4 0,1 M

M1 x V1 = M2 x V2

18 x V1 = 0,1 x 50

V1 = 0,277 ml

Jadi, untuk membuat H2SO4 0,1 M dipipet 0,277 ml H2SO4 18 M dan

dilarutkan dalam labu ukur 50 ml.

d. Pembuatan reagen Lieberman-Burchard

5mlasam asetat anhidrat dan 5 mL asam sulfat konsentrate ditambahkan

secara hati-hati melalui dindingnya ke dalam 50 mL etanol dalam

keadaan dingin (Wagner, 2001).

63

Lampiran 3. Penapisan Fitokimia

a. Alkaloid

b. Flavonoid

c. Tanin

Ekstrak tanaman

- Diditotolkan pada jarak ± 1 cm daritepi bawah plat KLT

- Dielusi dengan kloroform-metanol(9:1)

- Disemprotkan pereaksi Dragendorff- Diamati perubahan yang terjadi- Positif mengandung alkaloid jika

muncul noda coklat-jingga

Hasil



- Diuapi dengan amoniak- Diamati perubahan yang terjadi- Positif mengandung flavonoid jika

menghasilkan warna kuning-kuningkehijauan

Hasil

Ekstrak tanaman



- Disemprotkan FeCl3 1%- Diamati perubahan yang terjadi- Positif mengandung tanin jika

menghasilkan warna lembayung(biru kehitaman)

Hasil

Ekstrak tanaman

64

d. Saponin

e. Triterpenoid



- DitambahkanH2SO4

- Diamati perubahan yang terjadi- Positif mengandung saponin jika

menimbulkan warna ungu-ungugelap

Hasil

Ekstrak tanaman



- Disemprotkan pereaksi Lieberman-burchard

- Diamati perubahan yang terjadi- Positif mengandung saponin jika

menimbulkan warna merah ungu(violet)

Hasil

Ekstrak tanaman

65

Lampiran 4. Pembuatan Standar Kekeruhan McFarland

Standar McFarland berada dalam bentuk skala yang bernomor dari 0,5

sampai 10, yang menjelaskan konsentrasi spesifik dari bakteri per mL.

Jumlah bakteri sesuai dengan skala Mc. Farland (Smile, 2009)Skala

McFarlandJumlah Bakteri

(x 106/mL)0,5 1501 3002 6003 9004 1.2005 1.5006 1.8007 2.1008 2.4009 2.70010 3.000

Bahan-bahan yang digunakan dalam standar Mc. Farland antara lain yaitu :

Larutan 1 : 1% Barium Klorida encer (1% b/v BaCl2)Larutan 2 : 1% Asam Sulfat encer (1% b/v H2SO4)

Komposisi bahan standar McFarlandStandar McFarland

No. 0,5 0,05 mL BaCl2 dalam 9,95 mL H2SO4

No. 1 0,1 mL BaCl2 dalam 9,9 mL H2SO4









No.10 1,0 mL BaCl2 dalam 9,0 mL H2SO4

Standar McFarland tersedia di pasaran (Smile, 2009).

66

Pembuatan Larutan Standar McFarland 0,5

- diambil 9,95 ml- diambil 0,05 ml

BaCl2 1,175 % H2SO4 1 %

- Dicampur- Dikocok dengan vortex

Larutan standar McFarland 0,5

- Diukur dengan spektrofotometer padaλ 625 nm

Absorbansi larutan standar

67

Lampiran 5. Bagan Alir Uji Aktivitas Antibakteri

a. Sterilisasi

b. Pembuatan Media

c. Pembuatan Suspensi Mikroba

Larutan NaCl Steril

- Ditambahkan kultur mikroba yang akandiujikan sedikit demi sedikit- Dikocok dengan vortex- Diukur kekeruhannya dengan

spektrofotometer pada λ 625 nm hinggaabsorbansinya sama dengan absorbansilarutan standar McFarland0,5

Suspensi mikroba

- Ditimbang sebanyak 20 gram- Dilarutkan sampai 1.000 ml dengan

akuades dalam erlenmeyer- Dipanaskan sampai mendidih- Dimasukkan dalam autoklaf pada suhu

121oC dan tekanan 15 Psi selama 15 – 20menit

Media bakteri (NA)

Nutrient Agar (NA)

- Dicuci sampai bersih- Dikeringkan- Dibungkus dengan kertas- Dimasukkan dalam autoklaf pada

suhu 121oC dan tekanan 15 Psiselama 15 – 20 menit

Alat dan Bahan Steril

Alat dan Bahan

68

d. Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Tanaman

Ekstrak kental

- Dibuat dalam konsentrasi 10.000 ppm- Diteteskan sedikit demi sedikit pada

kertas cakram steril (diameter 6 mm)hingga 20 µl

Kertas cakram yang mengandung 20 µl

ekstrak tanaman

- Diletakkan diatas kultur mikroba ujidalam cawan petri- Diinkubasi selama 18-24 jam

Kultur bakteri yang telah diinkubasi

- diukur zona bening jika ada yangterbentuk di sekitar kertas cakram

Diameter zona hambat

69

Lampiran 6. Dokumentasi Penelitian

Preparasi Sampel Maserasi

Evaporasi Ekstrak kental

Larutan Ekstrak 10.000 ppm

69





69





Profil Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di Sulawesi Tenggara terhadap Bakteri...

Documents

Transcript of Profil Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di Sulawesi Tenggara terhadap Bakteri...