Direct binding of arsenic trioxide to AMPK and generation of inhibitory effects on acute myeloid...

37
1 on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

Transcript of Direct binding of arsenic trioxide to AMPK and generation of inhibitory effects on acute myeloid...

1

������� ����� �� ������� ��� ����� � � ����� ��� ������� � ��

����� ����������� ����������� ������������������� ����

���������� ��� ���������� ����������������������� �������� �! � ������"��#�

����"�����$�%�������&������'�(��� �&�)*+ ���� ���,�$�-����� ��.��� ������� �"/����" �0�

#� � �� �������'�

���1���+�/����0���������� �0 ����0������2!�����������3�� �����4�0��� 5��6/��� ������2+�� ����547)�����54���� �������2�"�����89���1��5�������2�"������

!�����������3�� �����4�0��� 5��6/��� ������2+�� ����54:)�����54���� �������2�"������-���������&.�"�� �0������

0��� 5��6/,��� �������20�������4�!�����������3�� �����4�� ������6/$0�������4�2/�2�#��������6���������!�����������3�� �����4�� ������6/%��� �������20����� � �"�����5�� ���5�������5�!�����������3�� �����4�� ������6/'6�������0�����83�� �����;# ������� ����80!��<3�=�>,? �"6!���3�>�%8# ����

9� ���

������5(����@.������(���A�"�"������4����1���.#�

(������� ���������" ��� ��14!6+5� ���0.����B��0.''=�%� �"0.�$$$%%<��/�0�

#� � �� �? �"5� ��6>�0C>>>B�%2��������� �������2&���� ��.22 ���<��/�0�#� � �� �?8

��� �� ��� �� � � ��������" �� � �� 14 !6+ �� ����5 5� ��� (��0.>'>>=$ �"

9��0.�=�$�%�

0��2�����26��������@(�� ������� ������2������2�����������"��� ���'.""�������������"������@/����" �0�#� � �� ����1���+�/����0���������� �0 ����

0�������>�� �����������������/�����:�>'�0��� 5��6/%>%���(������:$>�:,'$$8�� ��@�:

�� � �� �D��������������"�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

2

��������

.����������A�"�<.��)�?�A��1��������� �������� �����22���� �"�����"�A����� ��4�������� �

������54 2�� ��� ��� ����� �2 ��1��� �2 � ������ ���� ���� �4����" ������� <./?�

.�����5�.��)� �� ����� �� ��5�� �� ��� �����2 �� �� � ��5� ���5 � �� "��� ��� ��4 � �����

��������5 2�� ��� ���:������������������� ��� �� ��1�"�2���"� E���� �"�� �"���� �� �

������� �"������41��"���4�������BB��.#�F �"����1����� ��� ��4� (��� ����1������2

.#�14 ����������G����"��� ��2������4����A���22������������� ������������5�������

2���� ����������./�������������� �� ��� ��������� �.#� ��� ��� �� 5������ in

vivo ��� ������:��"���" ������������22������ A���5� 2�./�������"���.�����G�����

�2.#�����1������� ��� �����2����()�� ��� 4 � ��5 �� ���5�� ���42��"1 �������

+��� ��� ���� .#� �A�������� �� ����� ������:"����"��� ��� ���� �2 ��� ��� �� ���

"������� � �2 .#� ��� ��4 ������� ��� ��� 5���� ���� �2 ��5�� ���4 2��"1 �� ��5� ��

�����5���������4� �����2"������� ��()�� �5����(�������� ��������5��������� ������

����A�"��������"�������"�����1������21�������()� �"���� ��� 4������1�� ������

��� �����5 5������2��5 �� �2��"1 ������� �"� A����� �������� ��������������

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

3

��� �����

.������ ����A�"�<.��)�?� �1������"2����������� � ��"���� ��������"2�� ���

��� ������2 ����4�2��"�� ����"������<�?� 0�������4� ����������A�"��� ���� �"14���

9��" �" ���5 ."������� ���� <9�.? 2�� ��� ��� ����� �2 ��� ���" ���� ����4����4���

������� <.#/?� ��1�4���2./<���?� (�� ���� ������������������2���"����"���� �

�������������"������"��5.��)�� 6��� H������ �����2 ������������ �� ��1��"�������

5�����������4��������2�����������������5����"�� �����2�����2�������� �"���� 22�����5

������ � ��5� ���5 � ��� 4� <,:%?� (���� �� ��� � �"���� 2�� "��� ��:�����2������ ����� �2

������2.��)���.#/�����5�1��"��5�� �""�5� " �����2���#/:�.�2������������<'?�

6� 2 ������ ���� ���"���� ���� 1�����" �� �.��)� �����2�� ��41��"� �� ���#/���� 2��5��

"�� �� � �4������ ����"��� �� "��5 �� ���2� �� �����" �4 ���������� �� � �� "� �� ����� ��"

�����4 ���� �""�5� " ����<=?�

(�� ������2� ��5� ����������� ����������A�"�� �1��������������������"�� ����

�2� �4�������5� ���5� ��� 4������"��#/:�.�� ������� �1��� ����������� ���

"�5� " �����2 2������������� �� � ��5�� ��"������� ���5� �� ��"�22����� ������� � <B��>?�

.��)� � � 1��� ��� ����� �� 1��" "������4 �� 6��:1�� �" ����1�� !9�� ��5� ���5 <��?�

����������"���� ���� 1�����"�������22�����2 ��������.#�� ��� 4��(����� �����

�2"�22����� ������� ���� �4������� ������ ����A�"�� ������� �� ��� �����2��=.#�<��?�

.""����� ��4�����1������2��=.#������"������� ��22��������� ��������4����A���22����

�2 .��)� <��:�$?� ��55�����5 �� � ���� � �� "� �� ��5 5�" �" ��� � ��5 �� � 2��"1 ��

��5�� ���4� ��� 4����� � ���1����������1� ��� ��"14.��)� �"� 41������� ��

2�������"�������2 ����� 54� ����� ��� "�����"�5� " �����2���#/�������<�%��'?�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

4

����������4�.��)�� �������� ��� �������� ��5 �� �2��"1 ��� �������������

�����<�=?�)��������"���� �������� �-!���� ��� ��� 4����5 5�"14.��)� �"����

��� ���� �������� �������� �2 ������� ����� <�B:��?� (���� �� ��� � �"���� �� � ������

22�������+�"5���5� ��� 4������� ��� "������������"� �������������2�� �����"����"��5

�����I/6���2�������1���"<��:�,?�(������5 5������2 �������5� ���5� �� "��14.��)�

����������������5����������"����"��5����������A� �"������ ���1�4���

.#�J�� H�� ������ � 2������� �� �� ��5�� �� ����54 ������� ��� <�$?�E��� ������ �

.(# �� ��� "���� .#� �� ��������4� ��" 14 ��� ������ � ��� ��� /��� �" 0.�� �

����"��(���'����������5����� ��� ����<�%:�B?��������� �� �5����2.#������"�.00�

3/� �" �()�0�� ����� �� � ��"� ���:�22������ �� ��� 1����� �" ����� 54 <�>:��?�

.#� � � ����1�� �()�0� 14 "������4 ��������4� ���5 (�0� �" � ����� ����� 22����

�()�0�������A2��� ���� �" ��� ����<��?�

(���� � � 1��� � H�� �������� 2�� ��� ��� �2 .��)� �" ����� ��"���� � ������

�������"� �� ��� ��� ����� �2 �������� � ���� �4��� �����"��5 �4����" ������� � <�� %?�

+��� �����" �� ������� �����������5��2�� �������� � ��� ��4 � ���5�� 5��������"��2

.#/<�?�.� H���� ���2������� 41���� ��� �����2��5 �� �2��"1 ��� ��� 4�"����5

��� ������2���������.��)�� #�� ��������2������5����� ���� 1�����" �� � ����()�

� ��� 4 �� ��� ��" 14 .��)� �� �4����" ������� ����� �" ��� � ��5 �� � 2��"1 ��

��5�� ���4 ����� ���� �� ������� ���� �� ������� <�,?� 6� ���������� ���"4�� ���5�� ��

�A ��������22�����2.��)���.#��6�� �1������ �����4������� ��A�" �����2�����2��

�4����������"�����.#��������� ��2����� ��� ����<�$? �"�����2������4���������"�� �

������ � � 1��" �� ����� �4������ ����"��� �" ��� ��� ��� ���� �2 .#�� �� "��5 �� ���

��� �����2�()��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

5

����������������� ���

������������������

(��3B�'��������� ��1� ���"2���.(00��������1���2�>���(��� ����:�����

����� ��1� ���"2���.(00��������1���>��������������������2����� ����� �� 5�<�:

�� �� 5�� 2����������?����G��"�����5�� �"�A����������������"����"�������� �� 5�"2��

��� � �2 �� ���� �� � � ����� 2��� �������� ���� �" �����2��� ����� "�" ��� ���" �� ��:

�������� ��"� .#�F �7� E( �" .#�F�7� :7: ������ ����" �9� ���� � ��� �����4

"�����1�"<�%? �"����5�������������������"�����>K9���0�������� ���2��"2��

.#�F��������14�������1���<������������� �9�5���.?�� ����:�����������������"��

.(00��"�2��"�#6�%,>�����������"�����>K9���3B�'����������������"���#6

�%,> �����������"���� �>K 2�� � 1� ��� ����� <9��?� .��)�� � ����� ��" 2��� ��5� �

##�,�� ������ ��" 2���0���"� <��"5����"�!-?� .'%B%%�� ������ ��" 2���� ��

0��������������54 �"0����������6:��='>� ������ ��"2����4� �����

������������������ � �����

0���������4��"���������:�4���1�22��<$>�+�#����+'�B8�$>�! 0�8,�

! #4�������� ��8����(.��+=�>8�>�! 98>�$K(�����:C�>>8�>K5�4�����?����

� � #�9� ����� �� ����1���� ����� �� ��� & <�� ��������? �" ������ � �� ����1����

����� �����6<����������? ""�"2�����4�0��������1���2�4����� ��"�������2�5�"� �"����

�� �2���������G��"�����5���3����� ���5������4� ���������1H��������:#.I� �"����

�� ��2����" �� � 6���1����:# ���1� �� <��������?� ��1� ��� ���� ���� ��1H����" ��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

6

1������5 �� $K���2 � "�4���� �� �L((�� <�>�(���:+0/� �+'�$8 �$>�! 0�8 �"

>�$K(�����>? 2�������� .�� ���1�"������������ ��"2���0�����5� ���5(�������5���

�A������� ���1�"��� 5 ����I.#�+<��������?� �"+�#B>F7M<� �� 0��������������54?�

#��� �4 ���1�"������� ""�" �� ������1� �� �� �L ((�� 2�� � ����� �� � ����5��� (��

���1� ��� ������ ���"���������L((�� �"+�#:�����" ���:� 11��<I�+� ���� ��?��

���:����������" �4 ���1�"4<���:� "?� � ""�"2������������������ ���"��������

�L ((�� �" ���� "� �����" ����5 .����� � �0/ ������� 1������5 "�������� �� 5��� <I�

+� ���� ��/�2���������?��6���1���������������������������+�#��1��� ��<��������?�

��� ��� � ��2 ������J� ������������� 0���������������� � � "������" ����5 ���� "��5� ��4

2����9��������"�5�� ��4�� ���"����."�1�#��������0�$����5 0 ���0 ���� �==>>9

�� �����

������!��������� "��

0�������� ��� ��"���� � ������:1��������H�5 �� <.�:������? <0.�!��1��@����B�:

��:%� (������ ���� ��� 0����� ��� 6��? � 2�� � �������� ���� �2 �> μ 2�� � ���� (���

�������" � � 1��� ��� ���� ���" �� ���� ��" ������ 1��"��5 �������� � ������ 1��" �� �����

5�����<%�=��'��=?�.2����4������������:�4���1�22���$>>N5�2�������� �"�����"��1�22��

�" ��� ������:������� ������A�� ���� ���� ���� ��" ���� ������ �"�� 5 ���� 1� "� 14

���1���5 � ,O0 � ����5�� <6� ����5�� /�2� (�������5���?� 9�� �����1�� �� �������� ����2��"

.#�F� ��1���� <!� �� �����5�� ��? �� ��� ��� � �������4�� ���� ����5 .#�F�7M�7P�

<��5� �0���?�������� �����1 ��"2���>�����������.�:������ ��>O0�(�� ������:�������

������A � � ���� ���� ��" ���� ������ �"�� 5 ���� 1� "� � ,O0 2�� � �� <6� ����5�� /�2�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

7

(�������5����0 ���1 "�0.?� (�� 1� "������ ���" � ��������� �������:�4��� 1�22�� ���

���� ����5(�����:C�>>�(��� �������������1����"2��$��� �B$O0���A/ ������ ����

1�22�� �"��1H��������:#.I��6�����1������5� ����2����" �"�����1�" 1� ��

� ������� � ������#$�������� �������

(�� ��0�:.#�F� E( ��������� � � ���"�4 ��� �"�" 14 ��� .��� ������ �"

���� �4 � ��� 22�� <�� �2��" 3�� �����4?� (�� �4������ ����"��� � �BB �" �>, ���� 1���

��� ��" �� .� ���� ����5 ��� 2�������5 ��� 5������ ������� 9:

0(.((00.I..I(.I(0.II.II0((((((II.II.I �" �:0(00(00......

I00(00(0.0(.0((0(II..(.I��� ���������5Q����0� �5�/�5�����5����:�������"

�� 5������ ��� <.5����� (�������5���? ���� ���2����" ��� ���� ��2 ������J� ��������� .��

������5 ���"���� ���� ��G�����" 2�� ���2�� ����� 9�� ������ �"�� ����"��� �A���������

+���B������������ ��2����"����.#�F�����59�5���+��� 5���<#����5 ? ����"��5

������ ��2 ������J�������������������� �"������"�����������2����" �"�����1�" 1� ��

+.�A������"������������"������"14�������1�������5 �+. ���1�"4<0� ���?�

�������������

�>�5�2���2���4 ��� ��������4��.#�F�7M�7P�<��5� �0���?�������� �����1 ��"2���>

�����������.��)���������"0��.�:������ ��>O0�������"������"�� ��"��$>�.(#�

$> ��((� ��� �� �� ����� 1�22��� �" � N57�� �2 �.���"� ��1��� �� ���� ""�" �� ���

"��57���4�� ��A���� �" ����1 ��" 2�� � �� � �>O0� . �� ���4�� ������� � � ���" 2��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

8

1 ��5����"�� ��������� .��� ��4�2.#�� ��� ����" ���� ������2.�#�������"

"����5 ��� �� ����� ����5 ��� .�#:I�� ��� �� .�� 4 2��� #����5 ����"��5 �� ���

� ��2 ������J��������������

����� ����� �� ��

(�� ������:�������������A� � ���� ��" �"�����1�" 1� ��(��1� "������ ���"

����� ����� ���� �>> � ������� 1�� �1�� �� �" ���� "�5����" ���� ��G������5 5� "�

��4����<#����5 ?�.2���"�5������1� "������ ���"���������������>>N��2>��K2�����

��"�.������ �������������" �""���"in vaccuo�.2���"�4��5���������"������������"�"

��$K ����������� �">��K2����� ��"�(��� ����������� "�""������4���� �>�����5�'$

N�� ����"�� ��� ���� �4������ <#�����#��R660�=��>>S�$N������!��)1H���� �?

�"��� � ��"���� �>>������5� "����2���$K ��������������>>K ������������� #��A���

� �4�:/066<(������������2��?�(�������"������"������4�����"���� �/(Q)�1��� �&����

� �������������� <(������������2��?�������������� 4 ����� ���� ��$>��7������ 2���� ���

(��� ��������������� ����� ��" ��" � "����"�����"�� �"2��� ������������� ���

�� � ��� ��� ���� ������� ���� ���� �������" 2��� 2� 5���� ���� 14 ��������� ��"���"

"������ �����(�������� � ������2��� �������������4 � �4�������@�����������2��� �

��� �%>�>>>����� ����"�������������54�$K� ��� ���������>������� ������"����$� �"

���T� �"T, �"��5����� �5��� ���������H����"�

(�� " � ���� ��������" ����5 #� ��, <#������� ����� ����� ������ ��,� (�����

�������2��? �" �� ����" ����5 ��Q3��(+( �� ��� �5������ � �� #� ��,� (�� " � ����

�� ����" 5 ���� Homo sapiens ��2������ �������� "����� "�" 2��� ����������5 < ������

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

9

�>��U'?� (�� ����� � � ������ ���� � 2������@ <�? ���4�� �����2����4@ ��4����8 <��? 2�A�"

��"�2�� ����@ �4������ � �1 ��"�����4� ����8 <� ? �� 1����"�2�� ����@���������� �A�" ����

�" .�:������ ��"�2�� ���� � �4������8 < ? ��������� � �� ����� ��� � � V�>���8 �" < �?

2� 5�������� ������� ���� �V>�=� �(�����������2 ������:1�������"�2��"�����"�� �

� �� ��4 ��" ��"� . ���������"��5 �������� �" � 1�� �2 � �����5 ���� �� ����� ��

���������� �49�5����

�����%��������������

0����� � � 1����4� � ������"14������� ���� ���5 � "�����4�2$>>:��>>>�����7�����

"����"��5���������������� B%:������ ���.��)��##�,���6:��='>��.'%B%%� ��������

���1�� ���� � �4��5�������� ������� ������ ����<#������)?���� ""�"���������

�� �" �"5�������"� 2�� �� ����� �������� ��������� " �� ���" 2�� "�����������������

2��� �� ���5 2�� ���������� ������ &� 1�� ����� ���� G� ���2��" ����5 �> W�E�(:� �� 5���

<�����? ����"��5 �� ��� � ��2 ������J� �������� 2��� , " 4�� 60$> �" 06 ���� ����

� ���� ��"����50�����4���"���������������"��5����� ���������� ""��� ���4���5�������

�� 5�������<�B?�

�� �����&���������� ���� ����������������������� �����

(���� �� 4��������2����"������� ��4 ��������� �������"���<�$���?�#������� �

1���"��1���� ����� ����������1� ���"2���� ���������� �����4����" ������� 2���

�1� ����5 ��2����" ������� ���� �" 14 ��� 6���������� � �� ��� �� �" �2 !�����������

3�� �����4��������� �������������� ��"149�����:+4� G��<��5� .�"����?��"����� �����

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

10

(� ����� ��� �22���� �2 "��5� �� �������� ���5������ <093:/? �����4 2��� ����� ����� ����

�� ��"������4����������<����0���R+,$�,0� ������������#)�����0���(�������5���?�

�'���(��������

!��:� �5����5 ������� �" .#�F� ���!. ���� ����� ��" 2��� �� �� ��� �!.�

(�������5���� .� A R������2��������� </��� ?�������" 2�� ��� �� ��2�������2���� ������

9��3B�'���������0� ����"�������5� �E:>>� �" 2��� ����:�����&� ����"����

���5� � #:>�B �� ���!�����2�����R �1�� ���� 9�� � ����� � ������ ���!. �����"����

���� ���2����" ����5 (� ��6(:(�) � ��������"�" 14 ���� ��� //0� 0���� ���� ����

�� ��"������4���������� �" ������"2������� 1����4��2���093:/ �"�����1�" 1� ��

�)��

(����� �����2�����������2��� ���:2�A�" �"��1�""�"��� � 22���(����1���+/����

0���������� � 0 ���� 0����� # �����54 0��� 9 �����4 ���2����" ��� ���"� ���� � ���� �"

�� ����5� ���"�� ���� �� ���" ���� ��� ��A4��� �" 1���" �� �K ������� �4"��A�"��

"��4"� ��"� �" ������" 2�� �������5�� � � �4���� (3!�/ �� 4 � � ���2����" ����5 ���

.���� 5 #��� #���A�" �� 6� ���� .�������� ��������� ��� <��������? ����"��5 �� ���

� ��2 ������J� ������������� 6� 5�� ���� � ��� ����5 /��� � �>>> /�� ����������

�G�����"���� /��� �90,$>0� ��� �.���� 5��������������"����56� 5�-�

������ �������

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

11

%:�>������" ��4�����7����"�����<0� ������ ��?������H����"���������2�2� ��

������������3B�'������)����������� ���" �� ��� 1����������������H����"146#" ��4

�����������<#������$K��)?�.'%B%%�<0��������? ��>�57�5�.��)�<�� �� ������ �

5� "� (�6��!)CX� (� #� �� ������ � 6�"������� /�"? � $�57�5 �� ��� ���1�� ���� �2

.'%B%%�����.��)��E��� ����"��������5�� �"��"��� ��4�" 4� �"� ���� ��" �����

���� ��� 2����� <D L d�? 7�� �����D �� ��� ���5��� "� ����� �" d �� ��� ������� "� �����

��� � �� ��� ����" ����������� � �� �(��������������"2������ � �� � ����5������

5�� ��� �� � �>K� ����� ���� �A���"��5 ��$ ��� �� 1���"��57�������� � ��� ����� ����� .��

��� ����"������� ���� �"14���!�����������3�� �����46���������� �.��� �0 �� �"3��

0���������

���������� �

.���� ��������������2����"����5#����I� ��� "%�>2��#0�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

12

��������

���������!������������������������(�� �����

6� � � 1��� ��� �����4 ����� �� � ��� �()� � ��� 4 �� ��� ��" �� �������� ��

��� ������2./���������.��)� �"�� 4� ��5 �� ���5�� ���4���������5���� �����2 ���:

���������22����<�,?������.#��� ��5 �� ���5�� ����2�()�������5����"���������2

�����5 5������2����()�� ��� 414.��)��� �� ������"1����� ������ ��4��5�� ��"14

����1������2.#� ��� ������� "��5�� ��� �����2�()��(�� ������2./���������

.��)� ����1���" ��������4� ���� �2 ��� .#�F ��1���� � (���'�� ����� �� ��G����" 2��

��� �����2������ ��<9�5��.?�.����� ���������������4� ���� ��������1����4�������

,=$7,B� <,>? ����� ��" <9�5� �.?� 0��������� ���� ����� ��� ��������4� ���� �2 ��� .#�

��1��� ��.00"���� ��"������������������������� ��"����.��)����2������5 "���� ����

.#���� �� ��� ��4<9�5���?�

6� ��1��G���� ���"��� �� "��������" ��� ���� ����� 14 ����� .��)� 1����� .#�

��� ��4�6���������� 1�����"�� �/���������2���� ����� �����������1��2�� ��� ���5

.#�<�%?� E��4���������"�� ������������1�4 "������22����2 ��������.#�� ����

��������4� ����7 ��� �����2��������� ���� ��/���"�"���"���� ����������� ��������

�2������������2.#� ��� ����� ���2�����"14�����������4� �����2/��� �����(���=B

<9�5� �0?� .� .#� ��������4� ����7 ��� ���� � � ����1���" �� ����� �� ��A� �A ����"

������� ������� �����1��.#���� �� ��� ��4"������4�� �in vitro ��� �� �� 4<9�5��.?�

E����:��� ��" ��� �.#���� ������.��)�����.#�����1�����������"0<,�?��.�:

1������ ����� �� ���2�����5 ��� �� �� 4� ���� .��)� �" .�:������ ��5��2�� ���4 ����1���"

.#� ��� �� ��� ��4 in vitro <9�5� �.?� ��55�����5 ����1����4 �22���� � "����� 1��"��5 �2

��������.#��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

13

�������*�������������� ������

(� ����� ������� ����� �� "����� 1��"��5 �2 ������ �� .#�� �� ���" � ������

�������" �� � �� � 55�"���� 1����� � 1��� ������5 ��� ���� "������� ������ �"��: 5 ����

1� "�� .#� �����1�� �� �������� � 1�� �� 1��" �� ���.�:������ in vitro <9�5� ��?� 6�

""������������ 1��������"�����1��"��5�2.#�F��.�:��������3B�'��������55�����5

�� � ��������"�� ���.#� ��� ��414"�����1��"��5<9�5���?�E��������� " �� 5��2

��� ������ �"�� ����"��� �� "�������� 14� �� �����������4����� �� ���.#�F ��G�����

������ � 4 1��"� E� ����� �� 2���� �� ��� ��� ��1���� �2 .#� 1�� ��� ��� �����4

��1�����"" � �����"�� �����4������� �����"����BB �"�>,���������� ��2�� ��� ����

�2 .#� 14 �A�" ���� <�$?� E� ��� ��" .#�F ��1���� ���� �� ��� .#�F�7M�7P�

�������4���������.�:�������������" �""��������"14� �������������4�� ����1�����

�����4� �"������"1���"���4�������BB��.#�F��1��������1�� ����������������<9�5�

�0?� 6������"1�����"�� �����"������������� ��������1����4 �� � ������� 41� 1����

1��"�����������"��� ����4� 4� � �����1��"��5 22����4�� �� ����1�"������"14� ��

�����������4� (� ���2��� ����� 2��"��5� ����5 "�22����� ���� ��� �� � ���A������" ��

+���B������.#�F���":�4�� <E(?�� ��� ��.#�F �������1����4��������BB �"

�>,������� ��"�� � ������E����� 1���������� ������� ��.#�F"������1��" �

������.�:������ ����E(�������<9�5���?�!�� 1�4�1��"��5� �������������4 1��5 ��"

14 ������ �����2 �4��������BB �"�>,� ��55�����5 ����A��������2 ""����� �1��"��5 �����

�� ���5������ �1���"����� 1��14� �������������4�

� ������ � �����������!���������� ������ ��������� � ������������ ����+,-�

(��A �������2������� ����� ����2.#� � ��5�� ����2 ������:"����"���

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

14

�()� ��� ����������"��1�4����2�1��1� ���2���������������2�����.#�F� �"�

���2����<�%?<���������� �9�5���.?�6���� 1������2.#����� ������2������������

.��)�2 ���"����"��� ��� ����7��������4� �����2����()�0���1��� ���%� �(���=B<9�5�

�.?� +��� ��� ��� "������� � �22����� �2 �%�� �% ��1���� � ������� <���%? � � �����

��������4� ��" ������$7��% <9�5� ��?� ��55�����5 ��� ��5 5����� �2 � ����� �� �� ��� 4

�� �������� ���2�����%��������4� �����6�� �1������ �����4������� �.��)� ��� ���

������ ������<�=?<9�5�����? �"���������� ���������4� �����% � ��������"��<,�?�

���A ����"��������1����4�� �������5 5������� ���� ����2�������� �����5��������2

��� �����2�()���5� ���5 �� ��� 1������2.#�� .� �A�����"� �����2.#�"�"���

������ ����� 1����4�2.��)��� ��� ���()�0�� �.�(��������4� ���� ����,'�� ������

"����� 1����.#� �������������<���������� �9�5����?�!�� 1�4���������2.#���"

����"���"������� ��4��.��)� ��� ����"14 E�(:� � 1����4 �� 4<9�5���0 �"��?�(��

60$>2��.#����":�4�������� ���=N ��������N2�����.#��������������<9�5��

�0 �" ��?� E� ��� � ���� ��" 06 ���� �� "�������� ������� ����� ���� �4���5�����

�4����A���22���������1�� ������2.��)��������������� � �4����()�����1����##�,������

�������1�����6:��='><�B?�0�:��� ���������##�,����4���5���4��� ���".��)�:��"���"

�4����A����4��.#� �������������<06 ���>�BB��������������� ""��� ��22����?<9�5��0?�

)���������� �"������� ��4���5���1������.��)� �"##�,���.#����":�4�������<06

���>�,�?<9�5��0?�(�����������2 ""��� ��22�����1������4���54��������������������

���1 1�4"�������2 ���� �.��)�������� 1���� ��� ���()�0� ��� ��4�� ������ 22����"

14 ��� �����"����2.#�� +��� ��� ��� ��������� � �������� ������ ����1�����6:

��='>� ����"���06 ���2��������":�4�����������>>��"�� ���5 ""��� ��22���� �"���06

���2������������������ ��>�=,��"�� ���5�4���5������22����<9�5���?�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

15

E���A� ���5�� ��"�������� ����22�����2.#������"����� ��� ��"�������2 ���

���:�������������������2 ������� � ������"14��� 1����4�������������5������2������� �

./ �������� ���������� <093:/?� �����"��� �2 .#�F� �������" �� �� ������ ��4

��5��2�� �� �� 5����� �2 ��� ���:�������� �22���� �2 ������ �� 1��� 3B�': �" � ����:�:

"��� �"�����������5����������"�� ���5�� �.#�����G����"2��5���� �����2������������ �

�22�����2 ��������������������������<9�5��,. �",�?� 6����� ���4���������22�����2

���!.:��"� ��"�����"����2.#�F������5���� �����2����22�����2.��)������� �4

������� � ������������������ 2���� ����������./� ��A ����"��� 2���" �� � ��� ���:

���������22�����2.��)����� ����� ����"14� �5����5.#�F�<9�5�,0?���� 1������5 ��4

����2��.#���"�� �����������"�������2.��)�:5���� ��" ������������22�����

(������������!�� ���./0//+����� �1��������������� ���(,�in vitro����in vivo�

��������������" � �� � ������� �����1��.#� �"�� ���������G����"��� ��2��

��� ���:���������22�������������"2���������"��� ���"���A ��������22�����2���1����5

�.#� ��� ������� �������E����"���"�����.#� ��� ���.'%B%%�<,�?����������

��� �������� ����2������ 4� ��22�������������"����"����2.#�<,,:,%?�6� ����

� 1����4 �� 4�.'%B%%� �� 5�����"����22�����2.��)�<9�5�$.?�(��60$>2��.��)� ����

� ���%,N ���������N2�� ���.��)�T.'%B%%����1�� ����� (��06 ���� ���%%

��"�� ���5 �� 5������ 6�����4���������� �����4 2�����5 �� 4��.'%B%%� ��� �� 5�����"

��� ���:���������22�����2.��)���3B�':"��� �"�����������5�������<093:/?<9�5�$�? �"

�� ���� �4 �������� ���5������� 2��� ./ � ������ <9�5� $0?� E� ��� �A ����" �������

.'%B%%�� � 1�� �� �� 5����� ����22�����2.��)���.#�����1�����<9�5��$� �"$�?�

(��.��)�:"����"���������������2.#�F��������4� ���� �(���'�<9�5�$�? ����� ����

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

16

��������4� �����2 ���.#���1��� ��3/� ����$$$ ��3B�'����� <9�5�$�?����� ��� ��4

�� ����" 14 ��:��� ���������.'%B%%�� ��55�����5 ���� ���� 2�� ��� �� ��� � �2 ��� ���:

���������22�����2.��)�14.'%B%%��

6���1��G�������"������������" A���5� 2�./��"�����A ��������22�����2���

���1�� ���� �2 ��� .#� ��� ��� ���� .��)� in vivo <9�5� %?� .'%B%%� ���� "�" ���

��5��2�� ���4 ����� �� ��� � ����� �� � ��� ������� 5����� .� �A�����"� .��)�� � 1�� ��

��5��2�� ���4 ����� �� ��� � ����� �: ��� �2 >�>>�% <9�5� %.?� +��� ��� ���� �.��)�

�22��� �� ��� � �� � �� ����1�� 14 ��� ���1�� ���� �2.��)�����.'%B%%�� ��"�� ���5 �� �

.#� ��� ���� �� 5��������� �������� ���������������2.��)�in vivo�C���5� 2�������

2��� ���� ��� ��" ���� �������� .'%B%%�� .��)�� �" .'%B%%� T .��)� ���� ���� ��" 14

�������54 �"�������������������4<6+0?2��(3!�/�� ����5 � �� �����2 ��������<9�5�

%�?�E� ���� ��" ��� ����� �2 �������� 1������ ��� ������ �.��)� � � 1��� ��� �����4

����� �� ��"���� ���" �������� �� ����� A���5� 2���"��� <��?� (�� ������ �2���� ��� ��"

����.��)� �����" �� ������ ��4 ��5��2�� �� ����� �� �� �������� ���� ��"���� �����������

����� � ���� �2 ��� ����� ��� ����� 5��������� �� ������ ��4 "�22����� �� � ��� ������� 5����

<9�5�%� �"0?�(����� �����5��2�� ��"�22�������������������54�2����������� � 1��

����� �� �� �" ��� .��)�:��� ��" ������ �����" ����" ��� �" ����� ��" �������� 14

(3!�/ �� ����5 ���� ��" ���� ��� ������� ������8 ���� ��� ���� � � ��� �� ������ ��4

��5��2�� ��<9�5�%�?�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

17

�������� �

(���� � � 1��� �A����� � � �"���� "���������5 ��� ������ �������� ���� ���������� �2

����������A�"� �"����� ������ ��in vitro �"in vivo <�?�1��������� ����� ��������52��

����� �������� ���� ��� ����� ��� �� �� 1� ��������4 ��� 1�����"� 6� ��� ������� ���"4 ��

��� �"� � �"���� 2�� ���G�� ���� ���� 14 ����� .��)� ��"�� ��� ��� ���� �2 �()��

�� �� ��5 ����1������2.#���� �� ��� ��4 � "�����1��"��5 ���4�������BB �� ������ ���

04�������BB� �����2�������"����������1������� ��2�� ��� �����2.#� ��� ����

14�A�" ����<�$?�(����2��������������� � ����������1��� ��� �����2.#�14��� �����5

�A�" �����2�����4����������"���

6� � � 1��� ��� �����4 �������" �� � .#� ��� ���� 14 �A�" ���� �� �����" �4 ��

��������4� ���� � (���'�� 1 ��" �� 2��"��5� "������� ���5 �� �22���� �� .#�

��������4� ���� � ���(:���� �� �������� ���4"��5������A�"��14��� �����2�4��������BB

�" �>, <�$?� +��� ��� �� ��� ���"4 ����� �� �� �" ��������� �2 ��������� 2��� .��)�

��� ������ �� 2���" �� � ����� �� ��� ��4 � .��)�:"����"��� "���� �� �� ��������4� ���� �

(���'� �" ���� � � ����� ���" 14 � ����� �� �� ��������4� ���� � ��� ����1����4 ����

���,=$7,=B� (��� ���� � � 1��� �������" �� 1� 1��� � �����������4� ���� ���� � ���� �

"������4 � �5���" 14 .�( �" #�. �" �� "� �� ����1����� �2 .#� ��� ��4 14 ��� �����5

��������4� ���� �2 (���'� <,>� ,'� ,=?� ���"��5 �2 ������ �� �4������� �� �������� � �

��� �����4 ����� �� ���� ������� ���2��� ���� �" �����" �4 ��������� <=� ,B?� (���� �� ��

�����1���� ��� ""���������� �����5�A�" �����1��"��5�2 ��������.#�� ���� �������� �

���2��� ���� �� �5� �� � �������� 1��"��5 �2 #�. �� .�(� ������5 ��������4� ���� �2

���,B$7,=B �" ����1������2(���'���������4� ����� .������������� �������� � ������

� � ����1�� ��� /���:.#� � ��� 4 �� "��5 �� ��"������ �� ������� ���5����� <$>?� (��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

18

������ ����1���" �� � �� � �22��� �2 ������ �� /��� ��� ���� � ���4 � � ������ �����

����1����� �2 /��� �" .#�� E�� ���� ��� "�" ��� ��� ������ ����� �22���� �" ����� "

2���" ����1������2.#������ ���22������/�����������4� ����� ��"�� ���5 �� � ������J�

�22������2����"�����1��"��5��.#��(��"�22������1������������ �������"4 �"����� 4

1�"����"�22��������������4������"��"�1�������4��2�������"�� 4�" ����������2�22������

�� ����"4�"��� 2����,��,=����� 2������ ������

.#����������� ��4����5���2 � ����������������1��������� �"����� ���55����"

�� �� "����"��5 �� �����A�� �� � 4 2������� � � ����5��� <$�?� �����2�� ��4� .#� � �

�������4 ����� �� ��5�� ��!.�#+ �"�)� �� ��� �� ���������� ��������� ��� � �"����5

����54 ������ <$�?� )�� 2��"��5� �� � .#� ����1����� 14 ������ �� ��G����" �� � �� 2�� ���

�4����A���22������1���./����� �"���� �4�����������5�������2���./� ������ ��

�������������� ������� �����5��������2��.#��(�����"�������2�)�14 �������� ��4

������ ��2������4����A���22����<�? �"���������1���� �� ���2��� 1����4������� ���)���

��� ���� � 4 1� �����5� ����1����� �2 .#�� �� "��5 �� ����������� �2 �����2�� ���� �"

����1����4�22�����������������5�����������42��� �����.��� �����2.#�14.'%B%%�

� 4 �� 5�����������"�������2�)�14 ������ �"�� "��"���� ��"�4����A���22��������

������ 5���� �����1���"�

������ " � � � ��55����" �� � ��� ���� �2 .#� 14 ���2����� �� ������� �

���� ������� �5����./<$�?�6���������5�4����"�����.#� ��� ���.'%B%%� ����� "��

�22��� ���������A���5� 2���"���2./ �""�"�������1�������2�� ����in vitro�������5�

"���� <9�5�� $ �" %?� )����� � � ����� �� � "����� .#� ��� ���� 14 .'%B%%� "�" ���

����1�� �����2�� ���� �2 5���� ������ ����� �.60.� �"���2��������� 1�� �� "� ��� �"

����1���"���� �����.#�:��"����"����22�����21���"��5�<,%?�6� ""������ ���������"4

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

19

�����" �� � ����2����� < ���2����� � ��5? � � ���� �22���� � �� /��� �� ��� ��" ���5

������<$,?�6�����������5���"��52 ���"�� ��� ��.#��������������� ���"��������� �

��� �� /��� 1�� � � ���� �22���� � �� ��� �4����A�� �22���� �����5� .#�:��"����"���

� ��� 4����� ��69�α�0+)# �"��������"�� ����1� ��������� � <$,?� (����2���� �� ��

�����1�� �� � ��� ���:������5���� �22���� �2 ���2����� ����� �� � �5� �A���� � .#�:

��"����"��� ���� ������ 9����� ������ �:�� ��� ���� � �22���� �����" ��� � �� ����

�����"�� ���� ��� 2 �� �� � "����� ��� ���� �2 .#� � 4 ��� � � ��5��2�� �� �22����

���� ������ ��4��./� �"���2 ���.#� ��� ����� 41�����5���� �"7�� �� 5��������

���:���������22�����2����� 5�������� � ����������A�"��

��� "����������

E��� ��.��������� �"���� �4���� 22��<�� �2��"3�� �����4?2����� �"��5���������

��0�:.#�F�E(����������

���������

�� E A� ���.�"������0�+�����4�2 ���"� ���������2 ������"��� �� �� ��� ����

���� �4�)�����5�����>>�8%������@�:�>�

�� 0����+�+�����2��" �� 9� ��+���5 �� 61� ���.� -������ -��)*/� �4 --� �� ��

���5 ���� ����� ����@ ����������A�"��� ��A�2������ ��� � ��� ������ ���� A���1�A �������

)�����5�����>>�8%@,:���

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

20

�� #� � �� � /0� �����5�� � ��������� �� ������ �������"�� - ���� 0���� �>>B8

�=,@�=$=�:'

,� ���" #-�+�55#-�.������ �:1 ��"� ����"��5��0 ����(�� ��� ��>>'8��@$,�:%,�

$� � � " � �� � ��4 #0� ! 5 �� � �#� ������"�� -#� (����� 0� .������<666? �������

����1���A�" �� ��������2��"��5�� ����������������4��>>B8,=@,�,:���

%� ����"����#�+ �����#/�0���+���"� 5� ���3�)*+ ���� �(&�.���� ���� ��� ��4

�2 �� ��:�������� �" � ��� ������ �� ������<666? ������A��� 6���5 ��� ��������4�

�>��8$�@���B�:�>,�

'� ! ����I��������0�9����)��������+�#����/���������0��� ���� "�� �����2 ����

����4����4��� ������� :����� ���5 ����� �����5� #/:�.�. "�5� " ����� ! � �"�

�>>=8�,@����:,��

=� Y� �5 CE� Z � C-� Y��� Y�� Z �5 99� E� YZ� ��� +�� �� �� .������ ����A�"�

�������� ��� 2 �� �2 ��� #/:�.� ��� ����������� 14 "������4 1��"��5 #/� ��������

�>�>8��=@�,>:��

B� I���������-�I��� �����E��-�& � � �� �� �� ����54�� �� ��.����� 5��

"�5� " �����2 ����0�:.�/����������� �"5���� �����2 ��������������������14 ������

����A�"������"��>��8��>@�$$$:%��

�>� �� ����2��"������2��0������� H�.�E A� ��������( �5���""�5� " �����2���

./�7���7�&6������������14 ����������A�"��0 ���������>>%8%%@���%>:B�

��� � � ��#�( � � ���(�! ����I�." �����0���Z�(�����Z��� ��6���1������2!9:

� �� � ��� ����14 ������������5��� ��������� ������ ��4����������� ��� ���������2

6� �� ���� ���-����0�����>>>8�'$@�%>%�:%�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

21

��� I� 2��!�� ������"����� �� ��.�( ��� ���+�55���/��!�1��" .���� �������2

�����=����5��: ��� ��"���������� ��� ��� 4�����5���� �����2 ����������A�"�:"����"���

������ �����������0 ���������>>%8%%@%'%�:'��

��� ����� � �� � ������"�� �� 0 � 4�� !� .��� � -�� ��"�5 .-� ( ��� � �� �� ��

��5�� ���� �2 ������ ����A�"�:��"���" ������ � ��������� 14��� �"���� - ���� 0����

�>>=8�=�@��>�,:,��

�,� � �� �:(��� ��� � �#�� ������"����( ��� ���.�����-��#� � �� �/0�.��� ����

�2�������5��: �"������: ��� ��"��� ���14 ����������A�"��-����0�����>>%8�=�@��,,%:

$��

�$� &��� .� ����"�� � ��1 ��� � �� �� .� � �1� �� �� �� � �"� 9� �� ��

.��� �����2� �� �"�����=����5��: ��� ��"���������� ��� ��� 4������������ ������

����A�"��-����0�����>>�8�''@,,B==:B$�

�%� I���������-�.��� �-��I� ���+��!���-/�( ��� ���#� � �� �/0�.����� 54

�� ������ ����� ����2�� ��� ��"�������2 ��� ������������22�����2 ������ ����A�"�� -����

0�����>�>8�=$@�BB=B:B'�

�'� + 4 � � 9� #�� ���4 /� #�������4� ���� �2 #/ 14 ����5��: ��� ��" �������

��� ����� 4� ��4������ ����������A�"�:��"� ��" ���������0 ����������>>,8$@�=B:,>��

�=� I � ��-#�.��� �-������ �".�I���������-�& � � ��� �� ��.��� ����5�� ����

�2 ������ ������14 ������ ����A�"� �"5���� �����2 ����������� ����������0 ��������

(�����>��8�,�

�B� � ������ �����E A� ��������E+�-��-!� ��� ������ ��"� ����2 ������

����A�"�:��"���" ���������� ��������4����4���������� ����������"��>>,8�>�@�,B%:$>��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

22

�>� �� ��� � ���� �� 0����1� � 0������� ./� �� � Y� # "� �� .� �� ��

.������4 ����A�"�:��"���" �������� �� "����"��� �� ����7-!� ��5� ���5� (�A���� /����

�>>%8�%>@�$=:'>�

��� ��"��"�:���� -� ����1 �:�� � �� +��� �"�� ��� 0����� # �"���� .� (����-�

I ��� : ���-.��� ��6�"�������2�:��������4�����4���������� ���� ��������14 ������

����A�"� �� �� ��������������2 �����������������"��:��� ��7.����� � �� ��� 4 � �:H��:

!+� ������ � ��� �� ��� ���� �" #(�! ����5�� �����0����� � � ���� ���� ��� @ � �22��� �

H���� ��2���.����� �.����� ����2��0 �������� �����>�>8�%@,�=�:B��

��� �� ��� �� �� ���5�� /� ����� I� � H� � �#� + �� �� /�� Z0� �� �� .������

����A�"� ����1��� ��� � � ���� ���� 5����� �" ����� "� �������� �� ���� 14 1������5

+�"5���57I/6� ��� 4�-0���6� �����>��8���@�,=:%>�

��� 9���/�/�+������0���� ��������5���I����-.��� ��.��� �����2+�"5���5

��5� ���514����� �������� ���A�� �� ������� 4������1��������������54�2 ������:��"���"

�������0 ���������>�>8'>@�B=�:=�

�,� ���-�/��--�I �"������� ��4#.�.������ �� 5������ ���+�"5���5� ��� 414

��� �����5���� �4 ������ ���� �"��"����5�� 1����4�2 ���I��� �� ���������� ��22������#���

! ��.� "���3�.��>�>8�>'@��,��:'�

�$� 0 ����5�� 4��9&�� �"���-�I �1����-�.#: ��� ��"���������� ��@� ����*�

����54�������! �0���������>��8'@$��:=�

�%� E��"� .� &�������� �� !��� �� �� (��� �� � 4���� -� ���� ����� 3� �� ��

6"����2�� ���� �2 ��������4� ���� ����� ��.#: ��� ��" ������� ��� �� <.#�? 2�� ������ �

.#� ��� ��� �" ���"4 �2 ����� ����� 14 ����:"������" ��� 5������� - ���� 0����

�>>�8�'=@�=,�,:,��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

23

�'� + ���4 �.� � ���� � E��"� .� � ��� �#� ���� ��� 0 ����5 �� �� ��

0� � ������ �����2���.#: ��� ��"#��������� ����� ��2���� �/� �� �"6"����2�� ����

�2(���������'� ���� H������ �E����6�#�������4� ���.#: ��� ��"#��������� ���-

����0�����BB%8�'�@�'='B:='�

�=� +����4 �/� .�"����� �.� 9� ����� -� ���� ��� � �� .�� E������ /.� (��

0 �T70 ���"����:"����"��� #������ ��� �� ��� ��� .�� .#: ��� ��" #������ ��� ��

��� ����-����0�����>>$8�=>@�B>%>:%�

�B� �� ��-����� �� �� �"���4!�+����4�/�E������/.���#�����.� �� �� (��

���������������/������ ��"������4 ��� ���.#: ��� ��"��� �� �"��5�� ��� ��������

����������������54�������##���! ��.� "���3�.��>>,8�>�@���B:�$�

�>� � ����#�0 ����5����" 4��+ �"���I������ � ��4����2��������4� �����2

� � �� �� ���4�:0�. � �1�A4� �� 14 ��� .#: ��� ��" ������� ��� ��� "������� ��" ����5

2�����:�� ����5��22�����2��5�2 �"��������-���������BB�8�>�@%�$:���

��� 6���������-�I� ��/�.#� �"�()��������� �����54������� ��� �""��5

� �5����.����� #� �� ���(�A������>��8$�@�=�:,>>�

��� �5 ������-��� ��-�I� ��/�(�� ����� 54����� ���5��� ��3/������5�� ��"

� �������5��������4� ����14.#� �"�()��.����� 54��>��8'@%,�:,�

��� �� ��� ����#� � �� �/0�(��� ��������2���()�� ��� 4 �"���������� �����

)���5�����>��8��@�B��:���

�,� .��� � -�� Z��� #� � ������"�� �� �����4��� �� � �� �� .� ��"�5 .-� �� ��

��5�� ���4 �22���� �2 � �� �� � � �5�� �2 � � �4���:��"� ��" ��5� �� �� ��� 5���� ���� �2

����������A�"�����������-����0�����>>=8�=�@�BB�:�>>��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

24

�$� Y��H�����-E�� ���H����� �+�9��55���.�/ � ���������.1� � ����A��������

�4"��5�� ����A�"� ��"���� �A�" ���� �" ��� ���� �2 .#: ��� ��" ������� ��� ��� - ����

0�����>�>8�=$@���$,:%,�

�%� / "������ ��� .��� �� 0 � � 5 � -� �� �� � /� (� )�"�� -� �� �� $*:.#:

��� ��"���������� ��<.#�?����"���"14���:�A45�� �"5������"���� �������"������

2���"������":������������ ������������0���������>>%8�%@$��%:,'�

�'� � ""�� �� �� �� .� +����� (� -���� I�� -��� + ���� �!� /����5 �+� !� ��

1�����4� ��"����4� ������� ��"� �1�2������� � �� 5���� 2�� �� �� ��4����� ������@ ���"�����

��"���" ���1�"��� �" ��� 5����� 1��"��5 ���� �2 ��"���" (����"� ��������� ����������

������H�5 ����������4��BBB8�>@%�B:�'�

�=� Y� �5C�Z �59�����-Z������/�.�"��������0���C�6"����2�� �����2 ������:

1��"��5������������� �1�� ��� ����������0 �������������>>'8�$$@B$:�>%�

�B� 0��� (0� (�������� � 1 ���� �A�������� � "���5�� �" �����������" ����� ���� �2

�4���5��� �" �� 5�������"��5���1�� �������"����#� �� ����� ��>>%8$=@%��:=��

,>� +����4�/�� ���/��E��"���.�"������.��������� ��.���� ����5�� ����

�2.#: ��� ��"���������� ��14�����������������4� ���������������� 5������ ���� ��

������ ��.#�-����0�����>>%8�=�@�%%%�:'��

,�� Y���I�4�����/�Z�0���Z�����C�9��4�:���"4-��� �������2.#: ��� ��"

���������� �������� �����2���2����� ������-0����6� �����>>�8�>=@��%':',�

,�� ���A ##� �� �1 �� � �� &� +� +��� �� 0���� �� ( ����� -� �� �� �.�7���

��5� ���5�������� ����:�����2�� ��1���� � ��������%��������4� ���� � ��� �" ������ ���

� �:"����"����� ��� �����-����0�����>>'8�=�@�,>$%:%,�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

25

,�� 0��� �� Y����� �� 0���� E� ��2�� /� 0 � !� #��� � � �� �� 6"����2�� ���� �"

�� � ������ ���� �2 �� �� �������� .#� ��� ��� �� � ��� �� ��4 ���������� �2 �4�� �

"� 1���� �"������ 1�����4�"�����0����� 1��>>%8�@,>�:�%�

,,� ��:�� Z� !�5���� &� 9��� ��� �� . ���� !� ��5����� � /� �� � C�

������4�1�5� ��"�����1������������� ���� � ���"������22���� �5���"����������� ���4�� ��

������A6�-����0�����>>>8�'$@���:=�

,$� � ���"�� .� ��� � H .� ��� �Z� I�� �� #� ����� �� &������ �� �� �� ��2������

��"����"��� �2 .#�� ����1��� �()�0� �� � 5 I(# ��:"����"��� � ����� 0��� �� 1�

�>�>8��@�B>:,>��

,%� /�� C� 0���� ��� #��4 �� E���� � � Z ��4���� �� 0��� /� �� �� ��������

���� ������2�()� �"�����4�����5�� ����14.#� 5��������"����"����2.#��#���

! ��.� "���3�.��>�,8���@�,�$:,,�

,'� +��� � ��&����������+� ����!��� ���������&�E��"�.� �� �� 6������

�� 5������ ������� :��"���"(���'���������4� �����2.#: ��� ��"���������� �� ��� :

��1��������� �� � ���� ����� ���������4� �����2���,=$7,B��-����0�����>>%8�=�@$��$:

,>�

,=� ����4�0/��� ������4��-��.��� �����2� �"� �.#: ��� ��"���������� ��14

/����A���������������� ��4��A� ��1�����"14����� ��".�� ��� ��4�.�-#�4����+� ��

0���#�4������>>%8�B>@+�,'�:B�

,B� 0�����-�(�����0�������"��-#��22�����2.�<666?1��"��5�� ��� :����� �����������-

.�0��������>>�8��$@�B��:B�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

26

$>� E �5C���5�� 0� �5Q� # � -� Y� �5 Y� 0���I� �� �� .������ ����1��� �������

���5����� 14 ����1����5 ��� /���:.#� ��5� ���5 � ��� 4� �� ���� +� ��� #��������

�>�>8��=@%�':�,�

$�� /� �5 -� ���� I�� .#�@ �����A�� � ����5��� �� ����� ����������[ 0 ���� ����

�>��8'�@�B�B:�$�

$�� -�����0� �"��!��+ 4!�.#���5�� ���!.�#+������� ������������������

������� � �"����5����54�������! ������>��8,=$@%%�:$�

$�� I���� .�� 0� ���� !� ���� ((� E������ /� / �1��� � .������ 0� �� �� (��

/���7.#� ��5� ���5 � ��� 4 � � ����� ���������� ��� ��4 �� ���� �4����" �������

�����5� ��� ���������� �2 �()�:"����"��� ����5���� ��!. �� ��� ����� ����"�

�>�>8��%@,�%�:'��

$,� �� ����2��" ��� .1� �� I����� /� & �G��� ��� ���� .� /�1� �� � �� �� /���

�� ��� ����"��� ��� ���� ���������������2���:�� ������ ���5� ���� �� ������ 1�����"��5

����2������0 ����������>��8��@�,�:$=�

2������&������

Figure 1�22�����2.��)���.#���������4� ������./������ 3B�'������������ ��"

����.��)�<�μ?2�������"�� ��"�������G� � �������2��� ������4� ���������1H����"��

���:#.I� 2������" 14 �� ��2�� �� #&�9���1� ���� 6�����1������5���� ��� ��"�� ��"

���1�"��� 5 ���� .#�F <�?� .00 <*? �" /��� <�? �" ���:+�#B> �� ������ (��

������1�������� ���1�"��� 5 ���������������4� ��"2�����2������������� 5 ���������� �

������������2����4� ���2������� ���A��������� � �4��"��� � ����14���:#.I��

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

27

Figure 2�.������1��"�"������4��.#� �"����1��������� �� ��� ��4���.�.#���� ��

�� 4 � � ���2����" ���� .#�F�7M�7P� �����1�� �� ������� ����5 � .�#:I�� ��� ��

.�� 4� ���5��������" � 2�� ��������� �����2�N�\�]>�>$�\\\\�]>�>>>�����5 �

��� ���"�:�����*������1�� ��.#��������� ���� ��"2���>��� ��>O0����.�:������

<�>N?�� ������� vitro1��"��5�2 ��������.#��9��������1��"��5�A���������3B�'

����� ���� ��� ��" ���� .�:������<�> N? 2�� � ��� �" ��1��G�����4 �4��"� .������:1�����

������A������ ����1 ��"���������� �"��1� "�� ����5�� �" ����� ���" �"�����" 2���

��� 1� "� ���� � A / ������ � ���� 1�22��� � ����� ���� ���� ��1H����" �� ���:#.I��

2������"14������1������52��.#�F��� �������������4� ����2����"�������1�� ��

.#�������� �".�:������������A�������������.#�F���������G����� ���� ��"����

�����"�2�� �����2���"�0^�4����������"�2��")^�A�" ���� �".^�4����������.�:�������

+�5���5���" �� 5� 4 �� ��� �����"� �� �� 5�� �� +. � 55�" .#�F E( �" .#�F

0�BB��>,.��� ��������������� ��:�A������" ��+���B�������0�������� ��� ��"�����>

N.�:������ 2�� � ��� �" ��1��G�����4 �4��"� .������:������� ������A������ ���� ��" 14

����1 �������������� �"��1� "�� ����5�� �"����� ���" �"�����"2������1� "������A

/ ������� ����1�22���� ���������������1H����"�����:� 5��2������"14�������1������5

2��+.� 5�

Figure 3/����2.#� 22���� ������ :"����"�����5� �� �" ��"�������2�4����A����4�� ���

.#��7�E( �"���������9������������ � �"� ����5�� �"������� ��"����.��)�

<$ N? 2�� ��� ��"�� ��" ������ (�� � ���� �4� ��� ���� ���� ����� �" 14 ���:#.I� �"

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

28

������1�����" ���� ��� ��"�� ��" ���1�"���� (�� ������1���� ���� ���1�"��� 5 ���� ���

��������4� ��" 2���� �2 ��� �������� �� 5 ���� ��� ��� � ������������ 2��� �4� ��� 2��� ���

� ���A��������� � �4��"��� � ����14���:#.I��*3.#��7�E( �"���������9�

����������� � �"� ����5�� �"������� ��"����.��)�<$N?2�������"�� ��"������(�� �

�����4� ���������������� �"14���:#.I� �"������1�����"���������"�� ��" ���1�"����

(��������1�������� ���1�"��� 5 ���������������4� ��"2�����2������������� 5 �������

��� �������������2����4� ���2������� ���A��������� � �4��"��� � ����14���:#.I��

(�� 1���� ����� �� ��� � �� �4� ��� ����� �� � ��� . 1������ ��� �� "�22����� 5��� ��

.#�F �7�E( �" ���������9����� �� ��" �� B%���� �� ��� �" ��� ��"���� �4��5

�������� ������2.��)������()�����1����##�,� �".��)�T##�,�2��," 4��&� 1����4� �

������" ����5 E�(:� �� 4� � � �� �A������" � ������� 5� �2 ������ ������� ��� ��"

����������� ���� �� �"�� �" �"�������2�������"����"����A���������� ��.#�F�7�

E( �" �������� �9� ���� ��� ��" ���� �4��5 �������� ����� �2 .��)�� �� ��� ���

����1���� �6:��='> �� ��� ���1�� ���� �2 .��)�T�6:��='> 2�� , " 4� �" � 1����4 � �

�� ����"14 E�(:� �� 4�� � ���A������" � ������� 5��2 ���������������� ��"������

����� ������� �� �"�� �" �"�������2�������"����"����A����������

Figure 4������"��� �2.#�F� �� 5������ ��� ���:�������� �22���� �2 �������� ��� (Left)

3B�' ����� ���� �� ��2����" ���� .#�F� ���!. �" ���� �� ��" ������4���������� �� ���

���������� 1������2.��)� <�N? �" �����������5������ �����4 2��� ���� <093:/?� �

������" �� �����5���� �� 4� ������4����������� � � �� �A������" � ������� 5� �2 ���

����� ��" ������� ���!. �� ��2����" ������ ����� �� ��� �� �� T �� �2 ��A ��"����"���

�A����������\\�]>�>�����5 � ���"�:�����(Right) 6����1������52��.#� ��A��������

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

29

�� ��� � ���� �4� ��� 2��� 3B�' ����� �� ��2����" ���� ������� ���!. �� .#� � ���!. ��

������ *� (Left) � ����:� ����� ���� �� ��2����" ���� .#�F� ���!. �" ���� �� ��" ��

����4���������� �� ��� �������� �� 1����� �2 .��)� <�N? �" �������� ���5������ �����4

2��� ����<093:/?� � ������"�������5���� �� 4�������4������������ � ���A������" �

������� 5��2�������� ��"����������!.�� ��2����"����������� ������� ��T���2��A

��"����"��� �A���������� \\ � ] >�>� ����5 � ���" �:����� (Right) 6����1������5 2��

.#� ��A������������� ������4� ���2���� ����:�������� ��2����"��������������!.��

.#� ����!.�������� ���������� ������ ���� ��"2���./� ������������ ��"��

�����5���� �� 4� �� ����4���������� �� ����� ��� �22���� �2 ���!.:��"� ��" .#�F�

�����"��������5���� �����2������������ ��22�����2.��)�<>�$N?������ �4��������

���5������ �����4 2��� ���� <093:/?� � � �� �A������" � ������� 5� �2 ��� ����� ��"

����������!.�� ��2����"����������� ������� ��T���2�����A������������2����"����

� �����2���"�22�����./� �������\\�]>�>�����5 � ���"�:�����

Figure 5� 0�:��� ����� ���� ��� "����� .#� ��� ��� .'%B%%� �� 5������ ��� �4����A��

�22���� �2.��)� in vitro� ��3B�' ���������� ��� ��"���� �4��5 �������� ����� �2.��)��

.'%B%%���.��)�T.'%B%%�2��," 4� �" � 1����4� � ������"14 E�(:� �� 4�� � ��

�A������" � ������� 5� �2 ������ ������� ��� ��" ������ ����� �� �� �� T �� �2 �����

��"����"����A����������*�3B�'����������� ��"�������5���� �� 4�������4������������

������������2.��)�<�N?�.'%B%%�<�>>N?��.��)�T.'%B%%�� ���"�� ��" �"093:/

�������� �����4 2��� ���� � � ������"� ����� �� �� �� T �� �2 ��A ��"����"���

�A����������\�]>�>$����5 � ���"�:��������������� ���������� ��"2���./� ������

������ ��"�������5���� �� 4�������4������������������������2.��)�<�N?�.'%B%%�

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

30

<�>>N?��.��)�T.'%B%%�� ���"�� ��" �"���� �4�����������5�����������42��� ����

<093:/?� � ������"������ ������� ��T���2��5���A������������2����"����� �����

2���"�22�����./� �������\�]>�>$����5 � ���"�:�������3B�'������������ ��"����

.��)� <�N?�.'%B%%� <�>> N?� �� .��)� T.'%B%%� 2�� � ������ (�� � ���� �4� �������

����� �"14���:#.I� �" ������1�����"���� ��� ��"�� ��" ���1�"���� (�� ������1����

���� ���1�"��� 5 ���� ��� ��������4� ��" 2���� �2 ��� �������� �� 5 ���� ��� ��� � ��������

����2����4� ���2������� ���A��������� � �4��"��� � ����14���:#.I��4�3B�'�����

������� ��"����.��)�<�N?�.'%B%%�<�>>N?��.��)�T.'%B%%�2���������(�� �����

�4� ������� ����� �" 14���:#.I� �" ������1�����"���� ��� ��"�� ��" ���1�"���� (��

������1�������� ���1�"��� 5 ���������������4� ��"2�����2������������� 5 ���������� �

������������2����4� ���2������� ���A��������� � �4��"��� � ����14���:#.I��

Figure 6�.'%B%%� �� 5����������22�����2.��)�in vivo�� � ��3�3B�'�����������H����"����

�����2�2� ���2 ��4�����"������(����"�� ��"���1����2 ��� ��������� ��"������������

.'%B%%��.��)� �"������1�� �����2.��)�T.'%B%%����� � �� �"��������" ��������

������ � �� �\\�]>�>������5 /�5:� ��< ����:0�A?�����*3(�����2������������.

���� � �4��" 14+_� �" 6+0 2�� (3!�/ � � ���� �2 ��������� ��A�" ��5���� ����

� 1���������������" ���5���� 5��2�� ����������� 5��1�����(��� ����� 5�� �� �L�$

�"��������� ��� �� 5�� �� �L�>>� 5��2�� �������(��������� 5� �� �2��������� �

�� ����"2���$"�22�����2���"��� ����5 � H����4�2��������� ���� �A�$� 5��2�� �����

.�� � � �� ����" ����5 6� 5� -� \�] >�>$ ����5 ���:� 4 .!)&. � �4��� ����

���2�����������������

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T

Published OnlineFirst October 24, 2014.Mol Cancer Ther   Elspeth Beauchamp, Ewa M Kosciuczuk, Ruth Serrano, et al.   inhibitory effects on acute myeloid leukemia precursorsDirect binding of arsenic trioxide to AMPK and generation of

  Updated version

  10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-Tdoi:

Access the most recent version of this article at:

  Material

Supplementary

  http://mct.aacrjournals.org/content/suppl/2014/10/24/1535-7163.MCT-14-0665-T.DC1.html

Access the most recent supplemental material at:

  Manuscript

Authoredited. Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been

   

   

   

  E-mail alerts related to this article or journal.Sign up to receive free email-alerts

  Subscriptions

Reprints and

  [email protected] at

To order reprints of this article or to subscribe to the journal, contact the AACR Publications

  Permissions

  [email protected] at

To request permission to re-use all or part of this article, contact the AACR Publications

on February 18, 2016. © 2014 American Association for Cancer Research. mct.aacrjournals.org Downloaded from

Author manuscripts have been peer reviewed and accepted for publication but have not yet been edited. Author Manuscript Published OnlineFirst on October 24, 2014; DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0665-T