Asymmetric expression of a poplar ACC oxidase controls ethylene production during gravitational...

11
Asymmetric expression of a poplar ACC oxidase controls ethylene production during gravitational induction of tension wood Sara Andersson-Gunnera Ês z , Jenny M. Hellgren z , Simon Bjo È rklund, Sharon Regan y , Thomas Moritz and Bjo È rn Sundberg Umea Ê Plant Science Centre, Department of Forest Genetics and Plant Physiology, Swedish University of Agricultural Sciences, 901 83 Umea Ê , Sweden Received 6 November 2002; revised 25 January 2003; accepted 30 January 2003. For correspondence (fax 46 90 786 59 01; e-mail [email protected]). y Present address: Department of Biology, Carleton University, Ottawa, Ontario, Canada K1S 5B6. z Both authors contributed equally to this work. Summary Ethylene is produced in wood-forming tissues, and when applied exogenously, it has been shown to cause profound effects on the pattern and rate of wood development. However, the molecular regulation of ethylene biosynthesis during wood formation is poorly understood. We have characterised an abundant 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) oxidase gene (PttACO1) in the wood-forming tissues of Popu- lus tremula (L.) P. tremuloides (Michx). PttACO1 is primarily expressed in developing secondary xylem, and is speci®cally upregulated during secondary wall formation. Nevertheless, according to GC±MS analy- sis combined with tangential cryosectioning, the distribution of ACC was found to be fairly uniform across the cambial-region tissues. Gravitational stimulation, which causes tension wood to form on the upper side of the stem, resulted in a strong induction of PttACO1 expression and ACC oxidase activity in the tension wood-forming tissues. The ACC levels increased in parallel to the PttACO1 expression. However, the increase on the upper (tension wood) side was only minor, whereas large amounts of both ACC and its hydrolysable conjugates accumulated on the lower (opposite) side of the stem. This suggests that the relatively low level of ACC on the tension wood side is a result of its conversion to ethylene by the highly upregulated PttACO1, and the concurrent accumulation of ACC on the opposite side of the wood is because of the low PttACO1 levels. We conclude that PttACO1 and ACC oxidase activity, but not ACC availability, are important in the control of the asymmetric ethylene production within the poplar stem when tension wood is induced by gravitational stimulation. Keywords: ACC oxidase, development, ethylene, gravistimulation, tension wood, secondary xylem. Introduction Ethylene mediates developmental control and modi®es growth patterns in response to a range of stresses and environmental cues during the life cycle of plants (Abeles et al., 1992; Hyodo, 1991). It is synthesised from S-adenosyl methionine via 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) by the action of ACC synthase and ACC oxidase, which belong to the multigene families (Yang and Hoffman, 1984). Developmental and spatial induction patterns of ethylene production are established by both transcriptional and post-transcriptional control of the ethylene biosyn- thetic enzymes (Fluhr and Mattoo, 1996; Johnson and Ecker, 1998; Wang et al., 2002). Levels of ACC are normally low in vegetative tissues and limiting for high rates of ethylene production. An increase in ethylene biosynthesis therefore requires the initial induction of ACC synthase. This commonly results in a burst of ethylene because of a constitutive expression of ACC oxidase and positive feed- back effects of ethylene on ACC oxidase (Peck and Kende, 1995; Petruzzelli et al., 2000). A well-documented type of localised ethylene induction that seems to proceed as out- lined above occurs in the lower portions of gravistimulated above-ground organs, such as ¯ower stalks, hypocotyls, coleoptyles and apical shoots (Clifford et al., 1983; Kaufman et al., 1995; Philosoph-Hadas et al., 1996, 2001; Prasad The Plant Journal (2003) 34, 339±349 ß 2003 Blackwell Publishing Ltd 339

Transcript of Asymmetric expression of a poplar ACC oxidase controls ethylene production during gravitational...

��������� �������� �� � ������ ��� ������ � ����������� � �������� ���� � ���������� �� � ����� ���� ��� ����

���� � ������ ��� ������� �� � �� ������ �� ���� !"�# �$�� �� ����� %��� �� &����� �����'� � !"�# � �� �(����

����� ���� ������ ����� �������� �� ����� ������� ��� ���� ����������� ������ ��������� �� �����������

�������� � ! "# ����� � �����

�������� � ������ �� � ������� � ������� ���� �������� �� ������� ������� ������������ ���� ��� � !"� � �#� �$��% &'���(������)*)�������%����+��,������ �������- .�������� � &�%)�/ 0��%��� 1���������/ 2���3�/ 2�����/ 0����� 4#( �&���&�5 ���5�� ���������� �6��%%� � �5�� 3�7�

�������

)����� � �� ������� � ���������� � �������� � � ��� ������� ���� ������ �� ��� (�� ���� �� ����

������ � ������ � ��� ������ � � ���� �� ���� ��������� �� ������� ��� �������� ��������� ��

������ � (���� ������ ���� � ���� �������� �� ������ � ��������� *� ���� ����������� � �(� �� �

+���� ��������� ��+���(���� ��� ,���- ������ �� � ,�������- � ��� ���������� � ������� �� ���

�� � ���� ,.�- � �� � �������� ,���-� ������� �� ��������� �������� � �������� � ��� ���� �����

� � �� ����/���� ����������� ���� � ��� ���� ���� �������� � 0������������ ����� � �� ��1�� � ����

��� ��(� �� ���� �� �� ���� �������� � �� ��� ������(���� �� ��� ��� ��� � �� (� ������ � ����� �����

��� ��(��������� �������� ���������� �� ���������� � ���� ����� �� ��� ���� �� ���� � ��� ����� ����

�� ��� ����� �������� � � ���� � � ����� �� ������� �������� � � ��� ������ ������� � ��� �� ���

���������� � �������� &�� ��� ������ � ������ � �������� �� ��� ������� �������� � ������� ���

� ����� � ��� ����� ,�� ��� ����- ���� ��� � �� �� ��� ������� ����� ���� �� �� (��� ��� � � ���

���������(�� � "������ ��������� � ��� ����� ,��������- ���� �� ��� ����� &��� �������� ���� ���

���������� ��� ����� �� ��� � ��� �� ��� ���� ���� �� � ������ �� ��� � ������ �� ������ � (� ��� ������

����������� 2����3+� � � ��� � ���� � ��������� �� ��� � ��� �������� ���� �� ��� ���� �� (�����

�� ��� ��� 2����3+ ������� *� � ���� ���� ������� � � ��� ������ �������� (�� �� ��� ������(������ ���

������� � � ��� � ���� �� ��� ��������� ������ � �������� ����� ��� ������ ���� ��� �� ��� ����

�� � ���� (� ���������� �� ���������� �

4�������5 ��� ������� ��������� �� ������ �� ��������������� � �� ��� ����� ��� ���� �����

6 ��������

8�5�%��� ������� ����%�����% ����% ��� ��9��

)�3�5 �������� �� ������� � � ���)� � �������� ���

����������% ���� �����) �5� %��� ���%� � �%���� �:��%��

� ���/ # � ;��/ # #+� <� �� ����5������ �� ($������%

��5����� ��� #$������%������$#$������%�� ����

�:00+ �� �5� ����� � :00 ����5��� ��� :00 ������/

35��5 ��%�) � �5��%��)��� ���%��� �=��) ��� ;����/

# "�+� .���%�����% ��� ������% �������� �������� �

��5�%��� �������� ��� �����%��5�� �� ��5 �������������%

��� ���$�������������% ����% � �5� ��5�%��� �����$

�5���� ��>��� ��%�5� ��� ?���/ # �� �5��� ���

8�7��/ # "� @��) � ���/ �� +� A���%� � :00 ��� ���%%�

%3 �� ��)������� ������� ��� %�����) �� 5�)5 ����� �

��5�%��� ��������� :� �������� �� ��5�%��� ������5����

�5������ ��6����� �5� ������% �������� � :00 ����5����

B5�� ��%� ����%�� �� � ����� � ��5�%��� ������� � �

����������� ��������� � :00 ������ ��� ������� ����$

���7 ������� � ��5�%��� � :00 ������ �,��7 ��� 4����/

# �� ,����>>�%%� � ���/ ���+� : 3�%%$�������� ���� �

%��%���� ��5�%��� �������� �5�� ���� � ������ �� ��$

%���� ���� ����� �� �5� %3�� ������ � )��������%����

����$)���� �)���/ ���5 �� C3�� ���%7�/ 5�����%�/

�%����%�� ��� �����% �5�� �0%����� � ���/ # "�� 4�����

� ���/ # �� ,5�%��5$;���� � ���/ # �/ ��#� ,�����

$�� ���� %������ � ���+ 78/ �� D��

� ��� &%��73�%% ,��%��5��) A�� ��

� ���/ # " � @5��%�� � ���/ # "�� @%�����)/ # #+� B5�

������% �������� � :00 ����5��� �� �5� )����������%

������� �� ��%� ���������� � �� �������� �����$

�������� � ����� �3���� �5� %3�� ���� � �5� ��������

�)��� ;3����/ �5��� ��� ��� ����%�� � �� �$

�%�� ���3�7� ��)�%����) �5� ��������� � :00 ����5���

��� :00 ������� ����5����/ �%%3��) �5� �%���) �

:00 ������/ ��� �����������% ��������� ��� �%� �� ����%$

%��) ��5�%��� �������� �� �����) ���������)%� ���)$

����� �&���� � ���/ # �� &%�� ��� E������/ # !� 8�)%��5

� ���/ # �� E�) ���?�?����/ ���� 4���� ��� F��3���/

# !� 4� � ���/ # "� A������� � ���/ # �+� ;3����/ �5���

��� � ��3 �����35��� :00 ������ ��������/ ���5�� �5�� :00

����%���%���/ 5�� ���� ��%������ �� �5� ����%%��) ���� ��

���$ ��� �����$�����9� ��5�%��� �������� �.��%�� ���

����7��/ # �� G���>�� � ���/ # +/ ��� �������� �

��������� �5�� �����������% :00 ������ ��������� ��$

��%� ������% �������� � ��5�%��� �������� 5�� ���$

����%� �� ���� ����������

B5� ������ � ������� 3� �� ���� � 3�� ���$

���� �� ���5�� ����%� � � )����������% ������� �5��

���%��� ��5�%��� �������� �(���9�%�/ # !�� B��%%/ # "��

@�%�� ��� :��5��/ # !!+� �������3� �� �������35�� �

��� � �����5 �� ����%���� �� ��� ���% ������� B5��

������ ����� �� ��5 )������ ��� ��)����� �����/

35��� �5� ������� 3� �� ������ �� �������� ���

������ 3�/ ����������%�� B5� ������� � �5� �������

3� �� ���%�����%/ ��� ���%��� ����%������ )�3�5 � �5�

�����%�� ����� ��� �������������� � �5� ��9��

3�� B5� �����������% )�3�5 ����%�� �� �5�����% �������

�5�� ���� ���7 �5� ��� � �����5 �3���� ��� ��)���%

������� A�7� �5� )����������% ������� �� ������ �������/

�5� �������� )�3�5 ������� �� ������� 3� �� ���$

������ 3��5 � �����������% %��%������ � ��5�%��� �����$

���/ ��35��5�� ������� �������� ����� � �5� ���� �

�5� �������$3� ������ �5�� � �5� ������ ����

�A���%� ��� 87%���/ # � ��%�� ��� ;�%%��/ # !"+� <� ��)��$

��� �����/ ���5 �� ��%��/ ������ 3� ����%�� � �5�

����� ���� � �5� )��������%���� ���� B5� ������ �

3� � �5� ������ ���� �� ���5�� ��5������ � ����)%�

��������� B����� 3� �� �5����������� �� 9���� 3��5 ��%%

3�%%� �5�� 5��� �� ����� )�%������ ��%% 3�%% %���� �E$9����+/

���5 �� ��%%�%�� ��� ����� � %�)���� <� �%� 5�� � ��3

�����%� 3��5 ��%% �����% �������� �;��)���� ��� &3���/

# �� ����> � ���/ ��#+� B����� 3� �� ����%� �������

�� %�����) � ������) �5� ���/ ��� �5������ ����� �

��������� ����������% ������

:%�5�)5 �� �� �����%��5�� �5�� ��5�%��� �� ������� ���$

��) 3� ������ ��� �5�� �� ��C������ 3� ����%�$

��� 35�� ���%��� ��)����%� �A���%� ��� ,5����/ # ��

A���%� ��� (����)�/ # "!+/ )���� ������) :00 ����5���

��� :00 ������ �� �����% ������� 5��� �� ��� ����

�5������������ ;3����/ �5��� �� �� ������� ����� �

�� :00 ������ ������ �5�� �� ����)�%���� �����) �$

������� 3� ������ �� ?������ ���� �,%�� � ���/

���+� @��5�� �5� (3����5 ��%�� ��������� ��6����� ��)

�8(B+ ��6������) ��'��� �5���-HH����%������������H+/

������%5%)����:00����5������:00������)����

3��� ���� �� �5� �.�: %�������� �� �5� 3�$����)

�������� ;���/ 3� ����� � �5� �%���) ��� �5�������������

� �� &!/ 35��5 �� �� �������� :00 ������ �� �5���

�������� @� ������� ����%�� � � 5�)5$���%���� ���%���� �

�� &! ��������� ��� :00 ����������� ����� �����%$

��)�� ������� ����) ���)�����% �����������) ��� E0D?(/

��� 3� ������ �������� �53��) �5� �������� � �� &!

���������/�����:00����%���%���/ ����%� �5���������

��5�%��� �������� �����) ������ 3� �������

%������

������ �� �� � �'����� ���� ����(������� ������

B5��� ��������% :00 ������ 5%)��� 3��� ������� ��

�5� 8(B %������ �� �5� �����%$��)�� ������� � 5�����

����� ��������� �� (���7� � ��� �# "+� (���� �%��� 5$

%)�� � �5��� 8(B� 3��� �%� ���� �� � �.�: %������

�� ����%���) ������ 3� ��6������3��5�� �5� ��%��

8(B�����������1���)����5���8(B��������/���%%$%��)�5

:00 ������ �%�� �����)����� �� �� &!/ E��&��7 �����$

�����:=#�!���+3�� ��%���� ���5�����%���)������

3� �.�: %������� B5� ��%%$%��)�5 �%�� �������� � ���$

������ ����) ��)�� � �� ���%������ ��#� ��� �����+/

�� 3�%% �� � �$���%����� ��$�������%���� ��)�� ��� �

"�$���%����� ��$�������%���� ��)���

B5� ��������� ��� ���� ��6����� � �� &! �53��

5�)5��� �������� �! I+ � � �������� :00 ������ ��

���)������� ������� ������9�� 3��5�� �5� :��������� E��$

� <���������/ ������ <. ����� :�#)!!���� : �%���%�

�%�)���� � �5� ������� ��� ���� ��6����� � �� &!

3��5 :00 ������� �� ���)������� ��� �5� 3�%%$�5����$

������� ���%��� ����7�%� �A������� � ���/ # �+ ���

��� �&���� � ���/ # �� ��7����7� � ���/ # "+ 3�� ���$

���� ��� B5�� �����%�� �5�� ,��:02# �������� ��� ����

���� �5�� 3��� �������� ��) �%% ����� � �5� �5�

���<<+$��������� ��)�����H������ ���%� ���)��� #�+/

���%����) �5� ;J.� � �; ��� �53� � �� ���%��� �� ���%

%�)���� �����) ����%���� �F5��) � ���/ # !+� ����5����/

�5�%)������ ���%���� � ��� ���� ��6������ �� ���$

��� ���<<+$��������� ��)������H������� �53�� �5��

,��:02# �%������� 3��5 :00 �������/ ��������) �5� ����$

��� � �� &! �� �� :00 ������ ���)��� #�+�

,��:02# �� �� ��*�� � �'����� �� ����(�������

������ ��� �� ������� ������ ������ ���� ��������

B5� ��������� ������� � �� &!3�� ������� �����5$

��� �%� ���%���� �� )����5���$)�3� ����� ���)��� +� B5�

��� ��� ���������(�������� � �� �%�

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

�� &! ���������� 3�� �����������%%� ���� �� �5� ����%$

���) ��%� ������� �� ����� ����/ ��� � � %�����

������ �� �5� �5%�H����� ������� ��� ��$��� ��$

�%��� B ����5�� �����%��� �5� �� &! ��������� ����� �5�

�����%$��)�� �������/ � 5�)5$���%���� �� �%� ���%����

3�� ������� �� ������) ���)�����% �����������)

3��5 6����������� ,0� ��%�9����� ���:� B5�� �����%��

� ����) ������$�����9� ����)�%���� � �5� ���������� ��

����%���) ��%� ��%%� �� �5� ���%� ���)� � �������� 3�%%

������/ ��9���) ����%�� ������� �� �������� ���$

%���� �;���>���) � ���/ ��#+� @5�� )����5���$)�3�

����� 3��� )��������%���� �� %�����)/ �5� �� &! ����$

������ 3�� �����9��%%� ������� �� ����%���) ��%� � �5�

������ 3� ���� ���)��� ��+� B5� ����)�%���� �

9����� +� :�� ���� ��6����� �%�)���� ��� �5�%)������ ���%���� � ,��:02# 3��5 ��%���� ��6���������+ 0������ � �5� ������� ��� ���� ��6����� � �� &!3��5 :00 ������� �����)�������/ ��7�%� ��� ���� (�6������ ���� �� �5� �%�)�������������� � ���)������� �������/ :�#)!!��� ��,K���#��+� ������ ����/ 0?$:02# �(��#!�+/ 0?$:02 �(��#!�+/ 0?$:02� �(��#!�+� +��������������������/ A8$:02# �0::�# # +/ A8$:02 �0::�"��"+/ A8$:02� �0:: � ��+/ A8$:02� �&::�� �+� <�������% ��� ���%�� ��� ����� ��� �53� �� �%��7 ���)��� ���7)�����/ ����������%�� :������7� �������� ��� ����� �������� ����� �%% ����� � �5� ���<<+$��������� ��)�����H������ ���%�� B5� �%�� ��)���������� %�7�%� ���<<+ ������) ������ B5� E��&��7 �������� ����� �� ���5 ��6����� �� �53� �� ������5�������+ ,5�%)������ ���%���� � ��� ���� ��6������ � �� ����� � �5� ���<<+$��������� ��)�����H������ ���%�� 0A1(B:A@ 3�� ���� � �%�)� �5������� ��6������� B5� ���� 3�� ������� �� �5� ���)5���$'����) ��5� ����) #���$������� ���%������ ��� 3��� �����%���� ����) B�88 G<8@,,0 �������#����+� B5� ���%� ���������� ��# ������������ ��� ����� B5� E��&��7 �������� ����� � ���5 ��6����� �� �53� �� ������5����� �, �������/ :�#)!!�����,K���#��+� , ����/ 0?$:02# �(��#!�+/ 0?$:02 �(��#!�+/ 0?$:02� �(��#!�+� +, ���������/ A8$:02# �0::�# # +/ A8$:02 �0::�"��"+/ A8$:02��0:: � ��+/ A8$:02� �&::�� �+/ A��2;� �&::��# �+/ A�8" �B�����+� +����� �����/ A��2;� �&:&# �� +� -���� ��������/ :�E: �2J �&:& � !�+�.������� �)����/ ��E: �2J �B�#!� +� ����� ������/ ,��2;� �B�� ��+� ������� ������ � �, ����������/ ,��:02# �:=#�!���+/ ,��E: �2J �0:0��!� +�

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

� �'����� ������� ������� ��������� �� ������ ���� ��#

�� &! 3�� ��������� 3��5 � %��)� �������� �� :00 ��$

���� �������� �� �5� ��� ������ ���)��� ��+� <� �5%�H

����� �������/ �5� �������� � :00 ������ 3�� %3��

�5�� �� ��%� �������/ ��� � �������� 3�� ������� �����

������ 3� �������� ����� �� �53�+�

B3 �5�� �������� :00 ������� 3��� ������9�� ��

�.�: %�������� ������� �� 3�$����) �������� 2��

8(B ������� �� �5� �����%$��)�� %������ 3�� 5�)5%� ����$

���� �� �5� 8(B �������� �� C��% �������/ ��� ���5��

)��� ����������� �� �3 8(B ����� �� �5� ������ 3�

%������ 3�� 5�)5%� �������� �� �5� 8(B �������� ��

��������) %������ ;3����/ �5� ��������� � �5��� :00

������� 3�� �� ��������� �� �5� �������� � ������

3� ������ ����� �� �53�+� B5������/ 3� ����������

�5� �'���� � �5� :00 ������ �������� ������� �� )���$

�����%���� � �5� ��������� � �� &!�

� ��������� �� �� ������� ���� ���� ���� )������

)� ����� �� �����(�������� ����������� ������ ��

���)��� ������

@� 3����� � �������)��� �5� ��������� ��� �����������

������� � :00/ �5� ��������� �� :00 ������/ �� �����%$

��)�� ������� 3��5 �5� ��� ���%���� �� ���� �� �5�

�� &! ���������� 0�%�/ :00 �� �%��� ������� ��

�������� ����� �������� � ��5�%���� ;3����/ �5��

��5� �� �� ��������� ���)5 � ������ ������$�����9�

%���%� � :00/ 35��5 ����� �� %3 ����� �� ��$��������

��)������� �������� B5������/ 3� ���� ��� ����������

����� � ��%����� �������������) �8�%��� � ���/ # �+/

35��5 ��� ������ ���)�� ����� � :00 �� �%���

�������� 3��5 )� �������� ��� �������� �;�%%)���/ (���$

���) ��� ?���>/ �����%��5��+� B5�� ��5� 3�� ���� �

����� �5� ����������� ��� ����������� ������� � :00 ��

�����%$��)�� �������� <� ������% ���������� ����) )����$

5���$)�3� �����/ ���%�� ������) �%% �����%$��)��

������� 3��� ���%���� �� :00 ��5 �� ����)5� ����� ���

�� ����� �5�� 3��� ������� � �� ������ 3� �� %�����)�

<� �5� ����)5� �����/ �5� :00 ����������� 3�� ����

� �) )�# ����5 3��)5� ��@+ ���)��� ��+/ 35��5 �� ����$

��%� � �5� �������� �� %����� ��� ��������� � �����%

�%���� �05������ � ���/ # !� ;�%% � ���/ # �+� : #�$�%�

�������� �� :00 ����������� 3�� ���� �� ����� ����)

������ 3�� <���������)%�/ �5�� 5�)� �������� 3�� �%�

������� � �5� ������ 3� ����/ 35����� �5� �����$

������ � �5� ������ 3� ���� 3�� �%� �%�)5�%�

���������� @� ���������� �5� %3�� ����������� � :00

� �5� ������3� ���� � �5� ����) �������� � �� &!

��������� ��� :00 ������ �������� �� �5��� �������� ?��$

�������� � <:: �53�� �5�� �5� ����� ����������� 3��

�� ��������� �� ����� ������� � �� ������ 3�

���)��� ��+/ ����������) �5�� �5� :00 �������� 3��

�� ������� �5��)5 �� �����$������� :00 ����5����

9����� :� 8�������� ���%���� � �� &! �� ��)������� ������� � )����$5���$)�3� ��%������+ ���5��� �%� ���%���� � �� &! ���������� �� #� �) � ���% ��:��������� �� ��������� �)��� ��� �������� �������) � %����� ������������ ������ �� �5� 9��� %��� %�)�� �5�� # ����+ .� �%� ���%���� � �5� �� &! ���������� �� ��������� ��� ��������?�����)�� ��: ��������� �� ���)�����% ������� 3�� ��%�9�� �� ,0���� ����� �� � ��%� ������� B5� ���)� � �������� 3�%% ������/35��� �� &!3�� ����)�%����/ �� ��������� �� �5� �������% �������� B5���� ��������� � #� �� 02/ ������ ,�/ �5%� 9����� ,5/ �5%�� 0F/�����% >��� 8�#/ 9���� �� �5� ���)� � ���%� ��������� 8� / 9���� �� �5����)� � %��� ��������� (@/ ���%� ���)� � �������� 3�%% ������� ?J/������) ��%��

9����� 7� B5� #$������%������$#$������%�� ���� �:00+ ������ �����$��� ����� ��� ���5��� �%� ���%���� � �� &! �� ��%��� ������� � �������� 3� �� )��������%�����B5� ����� 3�� ��� �� )����5���$)�3� ��%��� �5�� 3��� ���5�� ����)5�� )��������%���� �� # ���� �� %�����) ��� ������%� �������) ������3����+ :������� � :00 ������ �� ����%���) ��%�� ?��� � (./ � �� :����$��7� �������� ����������%%� ��)��9���� ����������� �$����+ ������ � ����%%���%� �� ����)5� ������ ��� � ���#� ���� � ����#���+ .������� � �� &! ���������� �� � �) � ���% ��: ��������� �� �5�������������� ������ 0 ����)5� ����% �����/ B@ ������ 3� ����/2@ ������ 3� ����/ , �5%�H�����/ J ����%���) ��%��

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

�� ��� ���������(�������� � �� �%�

@� �%� ������� �5� ����������� � :00 �� �5� ��%�

��� � 9�%�$)�3� ����� �5�� 3��� ����)5� ��� ����� �5��

3��� ����) ������ 3� ����� ## ���� � ������)� <�

����)5� �����/ �5� ����������� 3�� �� �) %�#/ ��� ��

��������� 3��5 �5� ������� ����%�� �� �5� �����%$

��)�� �������/ ������) ������ � ����%� �������� �� :00

����������� ��� �) %�#+ �� �5� ��%� ����

B5� ��������� E0D?( ���5��6�� 3�� ���� �� ��������

3��5 ���)�����% �����������) � ����� � 5�)5$���%����

�� � :00 ����������� ����� �5� �����%$��)�� ��������

(��������)%�/ �5� ������$�����9� ��������� � �� &!

����������� �� ������) ��%� ��%%� 3�� �� ��C����� ��

�5� ����������� � :00� :00 %���%� 3��� ���� � �� ���%��

����� �%% �����%$��)�� �������/ �� �5� ��������%

�5%�/ ����� �5� �����% ������ ��� �5��)5��

9����� ;� A���%� ��� ����������� �������� � #$������%������$#$���$���%�� ���� �:00+ ����� �����%$��)�� ������� �� ����)5� ��� )��������$%���� ��%����B5� �����% ����������� ������� � :00 3�� ������� ����� �5� �����%$��)�� ������� �� ����)5� ����% ����� ��� �� �5� ������ 3� ���� ��������� 3� ���� � 9�%�$)�3� ����� ������%� ����) ������ 3� �����## ���� � ������)� :00 3�� ������� �� �� � ���)�����% �������������� �� � ��������� 8��5 �%�� ���������� �� ���%�� B5����� � :00 �� $������ �� ��������� 3��5 � �%��7 ��/ ��� �5� �5����)� �5� �%�� ��C���� �5� ������� � ������� �� �5� ���%�/ �� ���%������� �5� 9)������+ 1���)5� ����% ��������+ B����� 3� �������+ 2������ 3� �����<� ��+ ��� ��+/ ���5 ���%� ������� � �5��� �%�� �� ��������/ ��� �� ��+/���5 ���%� ������� � �� ������� ��� �5� ��������� ���%� �� ��+� �� ���5��������/ �5��� ����������� �����3����������� ,5 �5%�/0F ��$���% >��/ 8� ��������) 9����/ ?J ������) ��� ����� ��%��

9����� 8� A���%� � #$������%������$#$������%�� ���� �:00+ ��� <:: ����%�� ���� ������� � �� ������ 3� �� )��������%�������+ :00 3�� ������� �� �5� �����%$��)�� ��%� � �5� )����5���$)�3� ��%��� �5�� 3��� ���5�� ����)5� � )��������%���� �� # ���� ��%�����) ��� ������%� �������) ������ 3�� ?��� � (./ � ����+ <:: 3�� ������� �� �5� �����%$��)�� � 9�%�$)�3� ��%��� �5��3��� ���5�� ����)5� � )��������%���� �� ## ���� �� ������) ��� ������%��������) ������ 3�� ?��� � (./ � "�:������7� �������� ����������%%� ��)��9���� ����������� �$����+ ������ �����% %���%� �� ����)5� ������ ��� � ���#� ���� � ����#� 0 ����)5� ����%������ B@ ������ 3� ����� 2@ ������ 3� �����

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

� �'����� ������� ������� ��������� �� ������ ���� ���

�5� ��%�/ � �5� �����% ���) ���)��� ��+� B5� :00 ��������$

���3�� �%� ���%���� �� ���� ����) ������ 3� �����

## ���� � ������) ���)��� ��/�+� 2� �5� ������3� ����/

�5� :00 ����������� 3�� %3 �� �%% ������� �� ����� � �5�

����) ������$�����9� ����)�%���� � �5� �� &! ����$

������ �� �5� ����%���) ��%�� <� ��������� 3��5 �5�

���%��� ���������� � �����%$��)�� �������/ �5� %���%�

� :00 3��� �%� ��5 5�)5�� � �5� ������ 3� ����/

��� �� �5�� ����/ �5� %���%� 3��� �%� ���%�� �5��)5�� �%%

�5� �����%$��)�� ��������

$���(������ �� � ��� � (���*���� ������������

��� �� ,��:02# �'�������� ������ ������ ����

��������

B �������)��� �5� ����) � �5� �������� �� :00 ��� �5�

�������� � �� &! �����) ������ 3� ��������� �

���$����� ��������� 3�� ������� 3��5 9�%�$)�3�

������ (���%���� � �����% )�3�5 � �5� ������ 3�

���� 3�� �����%��5�� ����� ## ���� � ������) ���)��� ��+/

35����� �5� �5������������ )�%������3�%%� 3��5�� �5� 9����

��%� �� ������� ����� � ����� B5��� 3��� ����%%�%

��������� �� �5� ����������� � :00 � �5� ������ 3�

���� ��� �5� ��������� � �� &! � �5� ������ 3�

����/ 3��5 �5� ��������� ����) ��������%� ����� # ��� ���

�%���%� �����%��5�� ����� � ���� ���)��� ��/�+� B5� ������$

��� � ��5 �� &! ��� :00 ������������ �������� �

�������� ����% ��� ##� :)���/ �5� �� &! 3�� ���%�

��������� �� �5� ����%���) ��%�� <�� �������� 3�� �%�

������� �� �5%�H����� ��������/ ��� ��� ���������

3�� ��5 3��7�� �� �5��� �������/ �%�5�)5 �� �%%3�� �

���%�� ���$����� ����� �� �53�+� 2� �5� ������ 3�

����/ � ��%% �������� �� :00 3�� �������/ ��� 3��5 �%�

�5��� ���%������ ��� 3��5 � ���5�� 5�)5 �������� �� ���5

���$����/ �5� ����� ����) �� �5�� �������� 3�� �� �����$

%��5��� @� �%� ������� � �%�)5� ��������� �������� �� �5�

��������� � �� &! ����� # ��� � �5� ������ 3�

����/ ��� �5��������/ �5� ��������� ���%����� B5� ��)��9$

����� � �5�� �� ���9��%� � ���%���� 3��5�� �� �����%��

���������

&�����) � 9�%�$)�3� ��%��� 3�� �������� �� �5� �%$

%3��) )�3��) ����� � ����� :00$��'�)��� ���%����

�����) ������ 3� ������ �� ���� � �������� ��

������������) � �5� :00 �������� B5� ����%�� ��9���

�5� ����%���� � )�3�5 � �5� ������ 3� ����/ ���

������� �������� �5�� �5� )�3�5 � �5� ������ ����3��

��5������ �� �5� ���� ����� �� ������� � �5� ����)5� ���

���)��� !�+� ?�����/ � ����������%%� ��)��9���� ��������

�� :00 � ��5 ����� ��%� �� �����%��5�� ����� # ���

���)��� !�+� B5� �������� � �5� ������ 3� ���� 3��

���������/ ��� 3��5 ������ ������� �� �5� ���� �� �5�

)����5��� ��������� ���)��� �+/ 3� ��%���� �5�� �5�

��%% �������� �� :00 %���%� ������� � �5� ������ 3�

���� 3�� ��������� ��� ���%� :00$��'�)��� ��������$

���� 3��� ���� �) )�# �@ �� ����)5� ����� ���)��� !�+�

B5�� �� �� �)������ 3��5 �5� ��5 5�)5�� ����������� �

��'�)���� ������ � :00 ���%%� ������� �� ��)�$

������ ������� ����/ �� ��������/ 05������ � ���/ # !+� @�

�%� ������� �5�� �5� �������� �� �5� ����������� � �5�

��'�)���� ����%%�%�� �5�� �� :00� B5�� �)���� 3��5 �5�

����%� �������� ���� �5�� ������ :00 �� ����������%� ��$

'�)���� � �$�%��%$:00 �=��) ��� ;����/ # "�+�

9����� <� B��$����� � )�3�5 �������/ #$������%������$#$���$���%�� ���� �:00+ %���%� ��� �� &! ��������� �� ��%�� ���� �����))��������%��������%�$)�3� ����� 3��� ������� � �� ������ 3� �� ������)/ ������%�� �����) � �$��� ������ ��+ E�3�5 ������� ��� ��+ :00 %���%� �������%$��)�� ������� 3��� ������� � �5� ������ 3� �35��� ����+��� ������ 3� ��%��7 ����+ ������ ?��� � (.� � �� 8�������� � �5��� &! ���������� �� ����%���) ��%� � �5� ��+ ������ 3� ���� �B@+��� ��+ ������ 3� ���� �2@+� 8��5 %��� 3�� %���� 3��5 � �% � ���%��: ��������� ��� �%�� �� �5��� ����������� ������

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

��� ��� ���������(�������� � �� �%�

=�������

B ����5�� �� ������������) � �5� ������5���� ��� ����$

��� � ��5�%��� �� �5� �������� ��%� ����%����/ 3�

������9�� � �'� :00 ������ ��� &!+ ��������� �� �5�

3�$����) ������� � ��%��� �� &! 3�� ������9��

�� �5� �����%$��)�� ��� ������ 3� �.�: %��������

������� �� �5� (3����5 ,�%�� 8(B ��)�� �5���-HH��$

��%������������H+� :���� ��6������) #�� ��� ��%�� 8(B�

�� � �.�: %�������� �����������) ��������� �������/

�)��� ��� ����������% ��������/ �5� �%� �5�� %������

�� 35��5 �� 8(B �� �5�� )��� 5�� ���� ���� 3�� � ��

%������� B5� ��%%$%��)�5 �� &! )��� 3�� �%��� ���

��6������/ ��� ��������� ���%���� ��9��� ��� �����9�

��������� �� ����%���) �������� ��%�/ ��� ����)

�������� �����) ������ 3� ������/ ��� ��� ��������

�� �� ���� ���)���� / � ��� �+�

B5� ���%�����% �������� � �� &! � �5� ������ 3�

���� ����� � � %�) %��� � �����/ ���%����) ��� �������

��� ��������/ �� 35��5 �����������% ��������� � :00

������� ���� �5��� ��������% ���%����� �� ���������

��5�%��� ��������+ 5�� ���� ����������� <� �� )����$

�%%� ��������/ 53����/ �5�� ������� � �5� %3 ���������

� :00 �����) ��)������� )�3�5 ��� �5� �5�� %������ �

�5� :00 ����5��� ����������� ��� ��>���/ �5� ��������

� ($������% ��5����� � :00 �� �5� ����%%��) ���� ��

��5�%��� �������� �@��) � ���/ �� +� <�����/ �������

��5�%��� �������� 5�� ���� ��������%� ������� �� ���$

�%%�% 3��5 �� �������� �� :00 %���%� �;��/ # #� =��) ���

;����/ # "�+� 2�� )��������%���� � ��%�� ���� ���

�� ������ �� �������� � �5��� ����������/ ��� ����$

������%�/ �5���3�� �%� � ���� �%�)5� �������� �� :00 � �5�

������ 3� ���� � �5� ���/ 35��� �� &! ���������

��� :00 ������ �������� 3��� �������/ 35�%� �5� ������

3� ���� �����%���� 5�)5 %���%� � :00 ���)���� �/ � ���

!+� B5� ������ ���� �%� ��5������ �� �������� �� ��'�$

)���� :00/ 35��5 �� ����������)/ �� ��'�)���� ������ �

���������� ����%�� :00 �=��) ��� ;����/ # "�+� .������

�5� �������� �� :00 � �5� ������ ����/ �5� ���������

� �� &! 3�� ��������� �� %3 %���%� ���)��� ��+�

B5������/ 3� ���%��� �5�� �����������% ��������� �

�� &! �%��� �� ��������% �%� �� ����%%��) �5� ���$

����� �������� � ��5�%��� ������� �����) ������

3� ������/ ��� �5� ����%�� �%� ����)%� ��))���

�5�� :00 ����%���%��� �� �� �� ������� �%���� � �5��

����%�

��3 �5�� ������� 5��� )���� ���������� �5�� ��5�%���

�������� �� �� ����%%�� �� :00 ������ ��������

���5�� �5�� :00 ����%���%���� <� ���$�%�������� ��7�%�

�����/ �5� �������� � :00 � ��5�%��� 3�� ���%���� �

�������� �5� ������% ��� �����% ����������� � 3���$

������� ��5�%��� �.��%�� ��� ����7��/ # �+� ;3����/

�5� ����� ����� 3�� ����� � ���������� � :00 ���

��5�%���/ ��� ��� �� ������ ��� )��� ��������� ����� <�

���5�� ����� � �����)�� /���' ��������/ ��5�%���

������5���� 3�� �53� � �� %����� �� �5� %���% � :00

������ �������� �G���>�� � ���/ # +� <������)����� � ���$

��������% )�3�5 �����) �5� ������ ��� �����) � �5�

�����% 57 �� )��������) ����%��)� � ��� ��� ���)����(

��� 5��� ������� ����5�� ����%�� � ����%����� ���3���

�������� �������� � :00 ������ ��� �����������%

)�3�5 �������� �,��7 � ���/ # "� ��> ��� 8�7��/ # +�

;3����/ �� ��5 � �5��� �������/ :00 ������3�� ���� ��

� ��7�� �� ��5�%��� �����������/ ��� ��� �%� �� ����%%��)

��5�%��� �������� 3�� �� �������)�����

@5�� ������ ����$)���� ������� � �������)�3���

)��������%����/ ������� ��������� �� :003��� ����������

� �� �����$������� :00 ����5���/ ����%���) �� �� �����

9����� >� #$������%������$#$������%�� ���� �:00+ ��� :00$��'�)���%���%�/ ��� )�3�5 ������� �� )��������%���� ��%�� ��������%�$)�3� ����� 3��� ������� � �� ������ 3� �� ������)���+ E�3�5 ��+ :00 ��� ��+ :00 ��'�)���� �� �5� �����%$��)�� �������3��� ������� ����� #/ � ��� ## ���� �� �5� ������ 3� ���� �35��� ����+��� ������ 3� ���� ��%��7 ����+ ��� �� ����)5� ����% ����� �)��� ����+�?��� � (8/ � �� (�)��9����� � ���������3�� ������ �� ���5 ���$������ ���%���� � �������� �%%3�� �� �5� .�����L� ���� �� �$��%�� %��� �5�� ��6��% � ����� .�������� %������ �������� ��)��9���� ������������

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

� �'����� ������� ������� ��������� �� ������ ���� ���

������������� ��� ��������� %���%� � �5� %3�� ���� � �5�

�)�� �,5�%��5$;���� � ���/ ��#+� .����) �� )�������$

�%���� � ��%�� ����/ ����� ������������ ���������

��5 �� �5� ������ 3� ��� �� �5� ������ 3� ����

������ � �5� %���%� �� ����)5� ������ B5�� ��������� �5��

�� �����$�������%� :00 ����5��� 3�� �� ��������%� ��

�5� ����%% �������� �� :00 �� )��������%���� ��%��/ ���

�5�� �5� ������� ��5���� �� )��������%���� ��%��

����� � ������ �� �5�� �� ������ ����$)���� ��������

<� �� �%� ���� �5�� 35�%� )����������% ��5�%��� �������� ��

������ ���� 3�� ������� 3��5�� 5���/ � ��)��9����

�������� � ,��:02# ��������� 3�� �������� ����% �����

� ���� ���)��� �+� :� �5� %���% � :00 �� �5� ��%� ��� 3��

���� � �������� �� ����� ����) ������ 3�/ �5� ��$

����%��� ��%� �� �� ���%���� �5�� �5� :00 �� �5� �����%

��)�� ��)������ �� �������� �� �5� ��%�/ ��� �� 3��

�� %�7�%� �5�� �5� ����5���� �7 �%��� 3��5�� �5� ��%��

���� <�����9����� ��� �5������������� � :00 ����5����

������ �� �5� ��%�� ��� 3�%% �� ��6����� � ���%�� �5��

������

B5� ��������� � �5� �� &! ���������� 3�� �����9��%%�

����)�%���� �� ��%� ��%%� ����) �������� 3�%%�/ ���

�5� �������� � :00 ������ �������� �����) )��������%�$

��� 3�� �����9� � �5� ����%���) ��%� ������� ���)����

��� �+� B5��� 3��� �����)���) ���������� ��))�����) �5��

�5��� 3��� %��)� ����������� �� ��5�%��� �����������

����� �����%$��)�� �������/ 35��5 ��%� �� ���������

������� �������� � ��5�%��� �� �5� �6���� �5��� 3��

�%3/ ��� �5��� 3�� � %��7 � ��� ������ ���3��� �����%

��%%� �<�)������ � ���/ # #+� <� ������� � �5� ������$

��� � �� &!/ :00 %���%� 3��� ����%� ���%�� ����� �5�

�����%$��)�� ������� ���)��� �+ ��� ��� ����������� ���$

����� ��� �� �������� �5�� ��� �������� � ��5�%��� 3��

�����9��%%� %��%���� �� �5� ����%���) ��%�� : �%�����

������������) � �5� %��%���� ��5�%��� �������� 3��5��

�5� �����%$��)�� ������� 3�%% ��6���� ���%��%������

� �5� ,��:02# ������ 3��5 5�)5$���%���� ������ �

:00 ������ ���������

<� ������� � )����������% ����%�/ ��5�����% ������

����� �� ������)/ ���5��)/ C����) � ������) � �����$

����H���� ��� ������ ��5�%��� ������5���� �� �����%

5���� �� 3�%% �� �� ����� ����� �&�3� ��� A��%�/ # !��

�����/ # "�� ?�)�� ��� .��3/ # !� B�%�3�7� ��� �����/

# "�+� ����5����/ ������) � ��5 0���� ��� ���)�����(

��� %����� 5�� ���� ���������� � ������ :00 ����5���

�:����� ��� :�����/ # � &��%%� � ���/ # �+� <� �� �����/

��5�����% ������ 3�� ����� � ��5 �5� ����� ���

%3�� ����� � �5� ��%�� ���� �� ������)� .������ �5��/

�� &! ��������� 3�� �%� ������� � �5� ����� ����

���)��� �+� B5�� ��))����� �5�� �5� �������� � ��5�%��� ��

������) �� � )����������% ������� ���5�� �5�� �� �������

�� ��5�����% �������� B5� )����������% ������ � �5� ���$

%�����% �������� � �� &! 3�� �%� ��������� �� )����$

5���$)�3� ����� �5�� 3��� %����� ��� 3�%% �������� �

���� ��5�����% ������ ���)��� �+� (��%��%�/ ������%%� ���

A��%� �# !�+ ���%���� �5�� �5� �������� � ��5�%��� ��

������) �� � ������� � )����������% ����%���� ���5��

�5�� � ��5�����% ������ �� ���������� 3��5 ������

���%� �5��� B5��� ���������� ����� 6������� ����

35��5�� �5� ����������% �������� � ��5�%��� ��/ ��

����%�/ ���5/ C����) ��� ������)/ ��� ��� ����������%

�������� �� 3���/ ���%%� ���������� � ��5�����%

������/ ���/ �� ����/ )����������% �������� ����%���) ��

�5� ����%������ � ��������� �� �5��� �6��%����� ���$

���� B5�� ����� �� �� ����%� �%���/ ��� 3�%% ��6���� ����

������% ��������������

�� ��5 5�� ���� ���%���� ���� �5� ����� �%� �

��5�%��� �� �����% )�3�5 ��� 3� ����%���� �A���%�

��� ,5����/ # �� A���%� ��� (����)�/ # "!+/ ��� ��� ��6����$

��� �� ��� � �5� �������� � �������/ �������� ���

�������� � �����% ����������� 5�� ��� � �� ���%�����%�

�����%��5��� B5�� �� �� ��7�� ������� � �����/ 35��5 5��

���� ���������� � �� ��6����� �� �����% ��%% �������/

��%% �������� � �����% ������%� ��� ����5���� ��������������

�(������) � ���/ ��#+� <� �� �����%� �5�� ��5�%��� �� ��$

����� �� �5� 3�$����) ������� �%� �� ������� �

������ �������� ���5 �� ����) 3���/ ������ ����������

��� 3���� ��9������/ ��� ��� ������� �� � ��%��� ��$

���% )�3�5 �������� �������) � �5��� ��������� ������

���������� �� 35��5 ��5�%��� � ��5�%��� ��������� 5���

���� ���%��� � �����% ������� � ������ ��� ��)�����

����� 5��� ���������� ��� �������% � ���� ���

������� � �����% )�3�5 �������� ��� �������������� �

��%� ��%%� �87%��� ��� A���%�/ # �� 4�%�� ��� :%��/ # �

A���%� ��� ,5����/ # �+� ;3����/ ���%������ � ��5�%���

5�� ����� ���� ������� � ������ ������% ������ � �$

������� 3�� B5� �� ��������� ������� � ��)��$

����5�%��� �� �5� ����%���� � �����% ��%% ������� ���

�����% )�3�5� B5������/ �� ������� ������� � �5�

��5�%��� ������� �����) �5� 3�$������� �������

�� �� � ����%��� �����% )�3�5/ ��� �� %���� �� ��%��/

�5�� ����%���� ������� � �� ����������� � �� ��������

�� ������

)������ ��� ���������

���� �������

,���� �%��% �%���� � 5����� ����� �������� ������A� � �, ���������� ?��5��+ 3��� ������ �� � )����5��� � �5��)5� � #D / ����� � H#!�0 ����H��)5�+ ���������� ��)����� � �5������ � #" 5� ������% ���%�)5� 3�� ����%������3��5 ;M<$B( ��� @ B;�# ���% 5�%)�� %��� �2���/ ?����5/E�����+� B5� �%���� 3��� 3������ ���%� ��� �����%���� ��� �3��7 3��5 � # - #�� ��%���� � (1,8�&: ( �;��� (������ :&/A����7���/ (3����+� B����� 3� 3�� ������� �� %�����) �����������) �5� ����� �� �� ��)%� � ���� �������%�$)�3� ����� ����� ��, ������ A�+ 3��� ��%����� �� �

������% ����� ���� 1��N / (3���� ��������/ �� ��8+� B�����

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

��� ��� ���������(�������� � �� �%�

3� 3�� ������� �� ������) ��� 9���) �5� ����� 3��5 �����)�/ ��5�� �5������� � �5� ���3�� �� �� ��)%� � ���� ���� &�����)3�� ������� �����) �5� �� ������ ����� � �����% )�3�5�(�� ������ 3��� �%%����� �� �5� ������ � �5� ���� �� ���$����� ����������/ �5� ����� ���� 3��� ���� � 5�)5 ��� � ��� ������� ������� 5��)5�+� (�� ������ �� :00 ���%���� ����������%$��)�� ������� 3��� ������� �� ����� ���� ! 5�)5��� ! � �� ������� ������� 5��)5�+ ����� ## ���� � ������)�,%��� ������%� �������� �� %���%�� ��� �5����% ���%����

3��� �������%� ��>�� �� %�6��� ����)�� ��� ����� �� �!��0�?������%� �%%����� �� �5� 9�%� 3��� ���������� � �5� %�������� ��� ���� ,%��� ������%� �������� �� �������% ���%���� 3�����>�� � ��� ��� ��� ����� �� � ��0� (��%�� �� ���%���� 3���������� �� �5� ����� ������� 3� ����+ ��� %3�� �������3� ����+ 6������� � �5� �������������0����%$��)�� ������� 3��� �%%����� �� ���%��) �5� ���7 ���

�������) �5� ������ �������� 3��5 � ���%��%� B5� ������� � �5���%� ���� ������� �� ����%���) ��%�+ �������� � �����%%���������)/ ������$3�%%�� ��%� �%����� �� �5� %���� ���)� ��������� ��� ��%� �%����� �� �5� ���)� � �������� 3�%%������� B5� ������� � �5� ���7 ���� ������� �5%�H��$���+ �������� � ��%� �%����� �� �5� ���%� ���)� � ��������/�����% >�� ��%%� ��� ��������������) ��� ����� �5%� �%�$����� �� �5� ���%���� � :00 ��� :00 ��'�)����/ �5� ��������3��� ������ ��� ������ �� �����%$��)�� �������� �� ���5$��� �%� ���%����/ ���5 ������� 3�� ���� ��������%�� :������%�������)����� 3��� ������� � ���������� ������� ��������� ����5 ������% �� �����������)/ ��� 3�� ������� 3��5 �%��$���� �%�� 2� :����% ���) 3���5 3�� ������� ����� � ��������� 9�� ���������� ���%���� � :00 ����� �5� �����%$��)�� �������/ ��>��

���%�� 3��� ����� ��� ����)�����%+ � #� ������%+ � #� ��������%+ �%�7�/ ��������) � �5%�/ �������� ��%�� (��%�� �� ���%���� �������� � �� � �������������)�����% ������� ������� �� �5� �%�7� ����) �� ;? ���8�������� �?��� A���)���O ��/ @�%%���/ E�����+ ��� ��0/ �������) � 1))%� ��� (������) � ��#+� B5� �����% ���$��� � �5� ���)�����% ������� 3�� ��������� �� ����$����������%�� ����� ����� �5��� ���)�����% �������J�%� ��� 3�� �%%����� �� # � %�) ��� ������� 8��5

����� 3�� �%���� �������%%� ��� �������� � � ������ �����B5� ���� 3�� �5�� 9%%�� 3��5 �%���� 3����/ �������) ���������5�� ����� �5� 3���� �5��)5 �5� ��%�/ �5����� ����%����) �5���%� ��� ��� �%%3��) �� � �� �%%������ (��%��) 3�� ����$����� 35�� �5� �%���� 3���� 5�� ������ �5��)5 �5� ������%��

��.� ��)���� ��� ���������

.���%���) ��%� ������� �%%����� �� )����5���$)�3� �����3��� ������� � �� ������ 3� �� %�����)/ ��� 3��� ���� ��������� � �.�: %������ ����) �5� 1��$F:, J� ����� ������(�����)���/ A� �%%�/ 0:/ 1(:+� :��������%� �� � #�� �%�6���3��� ����������� �� ;����D� 9%���� �:���5�/ A���%� 05�%$���/ 14+ ��� �������� 3��5 � P�$� ,Q$�0B,$%���%%�� ����$����� ,0� ���)��� ���� 7�+ ��%�9�� �� �5� :00 ������$%�7� 8(B :�#",�#1 �(���7� � ���/ # "+� :���� �3 ����� � �%�6������9����� ��� 5�����������/ ��)5� ������� �%��� 3��� ��������� ����3��5 8�:����� 5�%��� �5�)� �(�����)���/ A� �%%�/ 0:/ 1(:+/�������) � �5� �����������L� ������������ B5��� � �5��.�:� �������� � �� � ��%% %��)�5 ��� 3��� ��%%� ��6������ ����5 ���������� &���� � �5� ���%����� ��6�����/ 3� ���%�����5�� �%% �5��� �.�:� ���������� � �5� ��� )���/ ����)������� �� &!�

/.� �'������ ��� �'�������� ��������

(��%�� 3��� 5)������ �� %�6��� ����)�� ����) � ���� �������%�� B��% ��: 3�� �������� ����) �� ������ ,%��� ?��� 4���M��)���/ ;�%���/ E�����+� �� �����/ ��%%� �������� %����� ������/ �5� ��5� ��������� �� 05��) � ��� �# �+ 3�� ����� :���������������� 3��5 A�0% �����)5�/ �5� ������ 7�� 3�� ���� �� �5�3��5��) ��� �%���� ������B��% ��: 3�� ��������� � � ���%��5��� �)���� )�%

�������) � (���7 � ��� �# " +/ ��� �%���� �� � ;����$� ��%� 9%��� �:���5�/ A���%� 05�%���/ 14+� : �� &!(�����9����� 3�� ������� �� � ,0�$��%�9�� ���)��� ���� 7�+ ���%��$��) �5� ��$�������%���� ��)��� ����%���%%��) 3�� ������� 3��5P�$� ,Q �:B, ����) � (����$8FB? .�: �:���/ :�����/ BJ/ 1(:+���� ����5���� 7��/ �%%3��) �5� ����%���L� ������������ (�����$��� � �5� %���%%�� ���� �� ������������ ���%������ 3��������� �� ���7 �%��� �,5������ &����5/ 1����%�/ (3�$���+ ����) �������� ���5��6���� ;����������� 3�� ������������)5� �� � �0 �� 1%���5��B? �%���� �:���/ :�����/ BJ/1(:+� ����% 3��5��) 3�� ������� �� �� ��#� ((0/ ��#I (.( ��� �0� B5� ������������ � �5������� 3�� �������� ����) � E($� � ?%���%�� <�)�� �&�$���/ (%��/ (3����+�8�������� ���%���� ����� �5� �����% ��)�� 3�� ������� ��

����) �� �%�� �� �������%� ��������� �� ?�%� � ��� � �� +�,%��:+� ��: 3�� ��������� �� �����9� �����%$��)�� ���$���� ������� �� ���)�����% �����������)/ �������$�������������� ,0�$��%�9��� �� ���5 ��/ ���� ��� �) � ,0� ������ 3������� ��� �5� ��%� ������ 3�� 5��������� 3��5 �5� �� &!(�����9� ���� ��������� �����

-��������� �� � �'����� ������

:00 ������ �������� 3�� ������� �������) � G�������� ����5� �# #+3��5 ����9������� (��%��3��� 5)�������� %�6��� ����)�� 3��5 � ���� ��� ����%�� 2�� )�� � 5$)������������% 3�� ��������� �� % � ������ �#�� ?B���D;0%/�; !� / �� ? ��$�������� ��� #�I )%����%+� :���� ��������)�$��� �� #� ��� � �� #� �� �� ��0/ �5� ����������� 3�� �������� ���� �� �5� ������ B5� ������� ������/ ��������) #�# % ��5� ��������� ������/ �� �% � �� ? :00/ �� �% � ? ��(2�

��� "�� �% � �5� �������/ 3�� ��������� �� ���0 �� 5 3��5 )���%��)������� 2�� �%%�%���� � �5� 5���$����� 3�� �5�� ����� ������%���� 3��5 � (5���>� E0$" : )�� �5���)���5�

1����������� �� �

2�� � 9����� �%%�)��� � ���5 ���%� 3�� ��������� �� "�I��5��%/ 3��5 P ;�Q:00 �#$���$P / /�/�D ;�Q���%������$#$������%�� ���� �(�)�/ (�� A���/ ?2/ 1(:+ �� �� �������% ����$����� B5� ������� 3�� �5�� ����9�� �� (0JD����� ���5��)��5���)���5�� (��%�� �� :00$��'�)��� ���%���� 3���5���%���� �� � ? ;0% �� # 5 �� #���0/ ���� � ����9������ B5�:00 3�� �������� � �� �$���>�%$�$����% ���������� ����) �����% ��9�� �� �5� �� ���� �� �5� ����� �� ;�%% � ����# " +� :���� �������������/ �5� ���%� 3�� ����5�� ����9�� � �0#" �%��$�5��� �������)�� B5� ���%�� 3��� ���%���� �� E0D?($��%����� ������� ������) �(�?� 8�%��� � ���/ # �+ ����) ��82A ?(����� ��� ���������� ��82A/ B7�/ �����+� : �������%�� ���������� � �5� ��5� 3�%% �� ���%��5�� �%��35����B5� �������� � �5� ���%���� � ��5 :00 ��� ��'�)���� :00 3�������%��5�� �� ���������� ���������� ������ ��� 0�>���/# "�+/ ��� �5� �������� � �5� 6�����9�� ���7� 3�� �����%��5���� �������) ��%%$���� ��� �������/ ���%����) �5� �5����������������� �� �5� �$���>�%$�$����% ����������� � ��� �23 �!/

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

� �'����� ������� ������� ��������� �� ������ ���� ��!

�23 ��/ �23 #"!/ �23 #� ��� �23 #��/ �� �5� ��� ����� �� ��������� �� �������� ���%�� ����� �� �53�+�

�$ ��������� ��

@� 3�%� %�7� � �5��7 .�� 83� ?�%%��3��> ��� ���77 4��)��$'�O ��� �� ��%���%� ����� � �5� ���������/ ��� (�5������� �������) �5� 9%��� �� ��$�%� ���%���� ��� 4'�%% 2%���� �����5����% ����������� B5�� �������5 3�� �������� �� ����/ �5�(3����5 �������5 0����% ��� �5� �������� �� (�����)���������5�

%����� ��

�(����� 9�!�� ����� � 2�*� � � ��������� ��)� �# + 4������ ������ 5������/ �� ���� (�� .��)- :������ ,�����

������ ���� � ������� %�0� �# +:�%��$��������� )��� ����$��) #$������%������$#$������%��� ����5��� �� 6+ ������� ���)������� %������ ���� -��, 5���, 7?/ � D # �

!����� ����� !����� !�� !��'��� � ��� ������� *�� ������ � ����� � ������� � =� �# �+ .����������% ��������� � �5� #$���$���%������$#$������%��� ������ )��� ���%� � �������� %, ?/ � �D����

!����� !� � � ������� � =� �# !+ 8�������� � :00 �����������$E1( ������ �� ��� ���.������� ����)������������)�%���� �� ����%�����% ��� ����������% ����%�� ���� %,+:/ !�#D!���

!������� ��%�� ������ %�0� � � 9�� ���� ���� �# �+ : ��5�����%������$������� #$������%������$#$������%�� ���� ����5���)���� ����, .��, ����, ��, ��/ ?:/ #� �D#� "�

!��� � 4��� � � .������� ���� �# !�+ 8�5�%��� ��� �5� ��)�%����� )�3�5 �� ����� ��, %, ����� /��, 7/ #��D#���

��� �� ����� 2������� �� � � ���� ��� �� �# �+ : ���%� �����9����� ��5� �� ��%����) ��: �� ���� ������ ���� -��,5���, /��, ++/ ##�D##��

�������� 0�� @� =� �� � *�� )��� �� )�.� � � @� 3 $��� � ��� �# !+ M����������� ���%���� � #$������%������$#$���$���%�� ���� �� %�6��� �5���)���5� ���%�� � �%�������������� ��� ����������� %, ��������, >>;/ #��D#���

��������� 2�)�� %���� =��� � � 2������ %�2� �# "�+ 8��)������5�%��� ��� �� �������� ��� �� ���� )�������) D � �%��� ��5�%��� �� ��������� ���� ��� 4������, </ ���D����

=� ���� ��%� � � %�(�$��� 4��� �# �+ @���$������� ��5�%����������� �� ���������7�%� ����� ������� %, 7��, ��, <?/#" D# ��

)��� �� ��� )$��# �� ��� �� �(���� !�� �����'� &� � � �� �(���� ���# �+ : ������%� ���5��6�� �� )�� �5���)���5�D������������� ���������� � ���)�� ����� � ���%�$�$������ ���� �� �%��� �������� ���� �������, +AB/ #���D#��!�

)$�� �� .� � � .������ �� ��� �# �+ A�����%%� ���%��� 8�5��% ������%��% ��������� �� �����% )�3�5 ��� ���%�$�$������ ���� ��$��������� �� �)��� )������� �5��� $��� ����, +</ �� D�#��

) ������ 2���� .����� ��*�� %�(����� ���� � � ��$�� � ��!� �# �+<�������� #$������%������$#$������%�� ���� ������ �����$��� �� �5�� � C��� ��� �%���� ������ ��5�%��� ��������� �5���%)���%%� ������ %���%�� ���� �������, +A?/ #���D#����

9����� %� � � ������� ��4� �# �+ 8�5�%���$������5���� ��� ���$������� ��, /��, ���� ��, +;/ �! D� ��

�� �� =� � � ��� ��� ��&� � ���+ ,���9����� ��� �5����������$��� � �3 :00 ������� ��������� �����������%%� �����) %�����)��� �� 35��� �%���� �������, ����, ++A/ #�D #�

���� 4���� )���� ���� � � ��$�� � ��!� �# �+ .���������� �#$������%������$#$������%�� ���� �:00+ �� %��� ������ ���

��%� ��� ����) ����%%��� �%�� )�� �5���)���5� ���� ����)��H�5��5��� �������� ���� ����� /����, +7/ �D ���

���� 4���� 2����� =���)� � � ��$�� � ��!� �# " + : ���%�9����5� �� ���������) #$������%������$#$������%�� �����:00+ �� �%��� ������� ����) � ��� ��%������ �������� ��������� /����, B/ !D��!�

������ � ���� � � !������ ��.� �# �+ ����� ������� ��� 8���������/ ��� ���� :��/ <3�- <2@: (���� 1��������� ,����/��� #�"D# ��

���'(���� ��� ����(���� �� �������� �� �� ��� � ��#+ : ���������$����% ��� �� � 3� ������� ����, .��, ����, ��, ��/?B/ #�!� D#�!�!�

����� � �# #+ (�����H3��� ��5�%���� <� $�� ���� 7������4������ �?��/ :�4� ��� (���%�/ ��0�/ ���+� &�� ����/ �%����-0�0 ,����/ ��� ��D���

6 �������� � !������ .� �C����� )� � � )������ � .� �# #+ (���$��% �������� �� ��5�%��� ����������� �� �5� 3� � �������������� A� $��� �������, B/ !�D ! �

������ ���� �# "�+ ?��5)������ �������� � �%���� � ��5��$���% ����%� � ������� 5���������/ 7A/ � D ���

��� �� � 2�%� � � )$��� ��%� �# "+ B5� ��5�%��� )�� ��)��%����������� ���53��- � %���%�� ������������ ����, /��,����, 7:/ !D ���

�����'� !�� %�(��� �� � � .����C� �� � ��#+ :������% �5��$����������� � ������3� ��� ������ 3� �� ���) ���%�������� � ��%�� �������� ������������ ��� E5�+� 9�8� %, ::/#��D#�!�

4����� 0� � � ��� �� %� �# + �%� � ��5�%��� ��� ����� ����)��������� �������������� ��� ��������� � ����5���� �� ���������� ����%��)�� .�� �����, +8:/ ��!D�#��

4����� � 2�!�� *�� .��.�� !��$� &��� � � 4��� =� �# �+ ;������� �5� ��������� � )�3�5� <� ���� 7������� �.����� ,���/���+� .�����5�- 4%�3�� :������ ,��%��5���/ ��� ��!D�!#�

4� ��� � � � D������� ����=� �# !+ B5� 9�� �%������% �%���5����� ���� ���/ ?/ ## !D# #��

4��� E���� ����� =�� .��� ����� .��� �� � � � 4���*�&� �# "+ &������� ������ ������$��%���� ��������� � #$������%������$#$������%��� ������ )��� ���%� ��.������� �������� A� ���� ��� �������, 7?/ ���D�!��

.�������� )�� !��C�� � &�� �� � ��'� ����� !���� ��� 2��� ����� � �!������F � �� �# �+ (�������� ��� ��������� � �5��� )����������) :00 ������ 5%)� �� �%� � ������ ����A�+� -��, ���, ����, :;+/ "#D ��

.������ �� ��� � � )$�� �� .� �# + 8�5�%��� �� ��%���� � �$������� 3� ������ �� �)��� )������� �5��� $����/ +7/#!�D#!!�

.������ �� ��� � � 2������ %�2� �# �+ ;���% ����% � �����% ���%�)�������% )�3�5 �� �5� ���� ���� <� ���� ���: ������������� ��������� -���������, �E������/ &�A�/ ���+� (�� .��)/ 0:-:������ ,����/ ��� "#D�# �

.������ �� ��� � � �������� %��� �# "!+ B5� �%� � �%��� )�3�5��)�%���� �� ����� ���� �����% )�3�5� ���� ����� /����, </#�!D#� �

����� � 2�*� � � =���� ���� �# !+ 8�5�%��� ��� �%��� ��������� ������� �������, ����, +AA/ � �D����

������ %�� �������� ��� ��� (���� ��� 3���� � 3�� ��� �� ����� �(���� �� � � !�������� %�2� � �� + 8���������% ��� �������)�%���� � 3� ������ ���%��� ����� � �5� :��H<::)��� ���%� �� 5����� ������ ���� %, 7+/ �!�D�"��

0�$����$�� ��� ������� ��� 3$� ����� �� ������� ��� 0�$� �� %��4�(�� E� � � 6 �(�� �� �# "+ .����������% ��������� ��� �������%�������7 ��)�%���� � #$������%������$#$������%�������5���/ #$������%������$#$������%��� ������/ ���

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

��" ��� ���������(�������� � �� �%�

��5�%��� ������� )���� �� ��� ����� �����) ����%���� ����������)� ���� �������, ++B/ # �D#����

0���� � 0�=� � � ������ *�)� �# !"+ 8�5�%��� ��� ������ 3������� �� 4�������� �������������� 8��� ��, $������,+:/ �� D�#��

2�$� ���� � � 4� ��� � �# �+ (�6������% �������� � �5� ��5�$%��� ������5���� ��>��� �� ���%�$�$������ ���� �� ���%��������� ���� -��, 5���, :B/ �D��#�

2�$� ����� 2������$�� 4� � � 4� ��� � �# "+ :�������������������� � ��5�%��� ������� ��%% �%�)���� �� �5������% 57 � ����� ���� ���/ +A/ !#�D! ��

2����''����� .�� ���������� 6� � � .��( ������'���� �� � ���+ 8�5�$%��� ����� ��5�%��� ������5���� �����) ��� ���� )�����$��� �� ������� �������7 ��)�%���� � #$������%������$#$������%�� ���� ������� �����/ :++/ #��D#� �

2��������� ����� ��� 9������ � �� ����� ��� !��$����'����� &���%�� %��� (������ 6�� ������ �� �� 4����� � 2�!�� !��$� 2� � �*������ �� )��� � ��#+ E��������� �� ��� C3�� ���%7� � ����$���)�� ���, ���� /��, :>/ #D � �

2��������� ����� ��� ����� ��� %��� (������ 6� � � ������ �� ��# �+ ��)�%���� � �5� )��������� ������� ��� ��5�%���������5���� �� )��������%���� �������)� ���7�� �� ��%����5�%���� ��� ��5�%��� ��5������� ���� �������, ++A/ ��#D�#��

2����� � ��� 2�� ���� ��� !���� ��� ������ 2� � � !�����G ���� �� ���+ 0������� 3�$��������� ������� �� ����%���)��%� � ������ ���� ������ ������� :���+� ���� �������,+:7/ � D � �

2������ &�4�� ���$���� D� � � ��� �� ���� �# " + (5� ��������$������� ��5�%��� ��������- � )�����% �5�����R %, ��������� /����, B/ !#D!!�

%�'� @� � � )$��� ��%� �# + ��)�%���� � �����������% )�3�5 ���5� �����% 57 � ���)�������� ����������/ +:</ ���#D���"�

%����� =�%� � � ���'���� �� �# "�+ <� 4����������� �� ���� ���(������� �?��?�%%��/ ��/ ���+/ @��� ?� ;����%���)- (����)��/ �� ��

%�(�������� ��� � � .������� ���� �# !�+ 8�5�%��� ��� �5� ��)�%�$��� � ���%� ��� )�3�5 ����� ������� �������, ����, 7:/��#D����

���(���$� ��� 9������ )�9� � � �� ������ &� �# " + -�������� ������, � +�)������ -�����/ �� ���� 0%� (����) ;����-0%� (����) ;���� A������� ,�����

���/���� �� �# !�+ ������� 3�- ��� ��������� ��� ��������������/ +>?/ ��!D����

����$�� 9�� %��� � ��� 4������ � �� �� ��� �# "+ E��� �������� �� �5�3�$����) ������� � ��%��- ���%���� � �� �����������6����� ��)�� ����, .��, ����, ��, ��/ ?;/ #����D#�����

�� �(���� !�� H����� �� � � &���� � � � � ��#+ 0����% )�3�5��� ����� )��������� <� ��� ��� -�������� 5������ �� 8����������� �(����)�/ ��:�/ &������/ ���� ��� ������/ ��/ ���+�2����/ 14- &<2( (������9� ,��%��5��� A��/ ��� #� D#""�

&�����$�� 9�*� � � ������ ���� �# "�+ B5�)��5)������- �5��%� � ��5�%��� �� �5� ������� � ����� ���� ��� �)��� �������� ��5�����% ������������ �������, ����, <</ !D ���

&������ &�)� �# "�+ ���������� 8��� �� �����������/ @��� :�&��%�� ;����%���)- (����)��$G��%�)�

H����� �� � � �� �(���� !� � ��#+ (��%��) � �����%$��)��������� �� 5�)5 ���%���� ���%����� <�8��� �������� �� $�����05�����/ ����/ ���+/ ��� #�D "�

@��������� 2� � � ��� � 2� �# #+ 0�%��� ������� �� ����� ��5�%��� ����) ��>�� ��������� ������������/ 7A/! �D! !�

@���'� � *� �� ��'� $� %�� ����� �� �� � � @���� �$� .��������# + #$������%������$#$������%��� ������ �������� %�$��� ��5�%��� ������5���� �� /���' �������� �����) �����$)����� ���� �������, +:+/ #" D# ��

*� �� 4�.����� .�� � � � )$��� ��%� � �� + 8�5�%��� ������5������� ��)��%��) ���3�7�� ���� ���/ +8/ #�#D#�#�

*������� %���� *����� %��� � � �����(���� 9�!� �# "�+ E����������� 5�)5�� �%��� �5��� ���� �������, B:/ ���D�� �

*���� � !�9� � � ������ %�%� �# !!+ ������� 3�- �������� �����5�����% ������ ����, /��, ���� �������, :B/ �D���

*������ �� )��� �# #+ ��)�%���� � ��5�%��� ������5���� �� )���$�����%���� ;�����<� �5�����+ C3�� ���%7�� %, ���� �������,+7B/ ���D�� �

E� �� ��9� � � ����� � 0�)� �# "�+ 8�5�%��� ������5���� ������ ��)�%���� �� 5�)5�� �%����� ����, /��, ���� �������, 7;/#��D#" �

D�� �� D�� !������ ��0�� !����� � ��)� � � ���/���� ���� �# !+?���%$����%�>�� ������� ��� ���)������ ������� � �5� ����<<+ ������) ���� � #$������%������$#$������%��� �������5����������/ +</ #� D����!�

:������� ����� �� 8?&A ��6����� ��������- :=#�!����

� &%��73�%% ,��%��5��) A��/ $�� ���� %������/ � ���+/ 78/ �� D��

� �'����� ������� ������� ��������� �� ������ ���� ��