Kinetic Analysis of the M1 RNA Folding Pathway

Post on 29-Apr-2023

0 views 0 download

Transcript of Kinetic Analysis of the M1 RNA Folding Pathway

��������������� ����� �� ��������� ������ �� ������������������������ �� �� ���� ����� � ���� '()� ��� !�"

�������������

������� ������ � ��� �� ��� ������ ������

����� ������ ������ �� ��� !" ��� ������ �� ��������#

����������� �� ������������������ �������� �������� �� � ��� �� ��������������� �������� !" #$!$���������������� $������������������ ���� %& ��'"���� ��'� ���� (������)� *+!� $�����

< ��� ������� �� �� ���������������!��������D����� ����

�������� ���� ����C ;�# ;��������# ��������� ����

++�� �23>@++@+-+>11E6 F3-�++@+

��� ������� �� ��� � �� ��� ���� �� �������� �� �� ����� ��� �������� ����� � ��� ���� �� �� ������ ���� ���� ������� �� ���� ����� ���� � ��� ���� �������� ������ �������� ��� �� ���� ����� ������� ������� ���� ���� ���� �� ������ �� ������ ���� ��� � ������� �������� �� �� ����� �� �� �� ��� ���� ������� ����� ��� ��� � �� ������� �� �� �� �� ��� �� ���� �� ������� �� �� �� ���!� ����� ������ "���# !� �������� ��� � ����� �� �� ����� �� �� $� ������ ��� �� �� ���� ��� �� ����� %� &� ��������� ���� �� ��� ���� ��� ����� �� $� ��� ����� !� � �� ������� ��� ���� �� ����� ����� ��� ���� ���� � ������� � �� ���� ������� ��� �� �� ����� �� �!�� ������� % ���� '�� ���� � ������ � �� # �� ��� ��� � �� (���� � ���� )���# �� $� ��� ���� �� � � � �� �� ���� �� ��� � ��� ��� ����� ������� ��� �� !� ������ �� ����� ������� ��� �� �� ����� �� ������������ ����� � ������ � ������ �� �� ������� ��� *����� �� �� �� ��� �� !��� �������� ��� ������ ������� � ���� �� �� ������ �� !��� �� !� �������� ���� ������� ��� �� ������ �� !� � � ���� �� ��� !���������� �� �� ���� ��� �� �� ������� ����� ������

� �+++ �������� %����

,��-���. ����� %, $� ���, �������� ���� ����, ���� �� ��� ���� ��,��� �����

/$���������� �����

�� ��� ��� �� �� ��� ��� ��� ����� $��%�&

����� % �� �� ����� �� ��� ������ ��� ������ ����� �������� ��� �� �� ��� ��� �� �� -� ��� ����������� ���� .� ����/� � ���� �� �� ��� ������� � �� �� � ��� ��� ��� ��� �������� �# ������ ����� �� ��� ���� �� ���0���� ��� �� � �����0� � ��� ������ .(������� ������ �� ���#�123, � ��� �� ���# �111/� 4�� ������# �� �����% �� ��� � ���� �� ���� ��� �� �� � ������ �� ��$� ��� ��� 5- ��� ��� �� # �� �� �������� ����� ������ �� ���� �� �� ��� ������ ���������� �� # $� ��� ���� �� ��� � ��0���� � ������ ��� .(������� ������ �� ���# �123/� ��� ����������� � �� �' �� ����� %# ��� �� ��� ����� ���� �� ����� ��������# ��� ��� �������.366 ��� 7+� � # ������ ����/ �� ������� ������ �������� � ��� �� � ���� �� ��� � ��� ���� ������ �������� ��� ���� ��� ��� � � ��� ���������

��� ��������� � ��� ��� �� $� ���# ������ ���� �� ����� �� ������� �� ����������� .8����

�� �� ���C

�, ;�# ;����� �, �

�� ���# �122, &�� ��� 9 � ���# �117, $������ �� ���#�112/# ��� ���� � ������ �� ������ .%/ ��� :����� .8/������ .4���� �.�//� �� ���� ���# � ������ �� �� ���� �� ���� ���� ���� ���� ������ �� ����� ��������� ��� ����� ����� ��������� � .$�������� ���# �112, 5��� �� ���# �112, 4���� �.�//� $� ����� ����� % ��� �� ���������� �� � !� ���������������� .;����� � .;�/ ��� ;����� � .;�/,4���� �.�// !���� ��� ������� � �� !�������� �� �� ��� �� �' �������� ���� '�� �� ���� �������# ;�# ��� ���� �� �� ��� �� �� ���� <;�� ��� ���� �� ��������� � �� $�� ����� ��� � ��� ��� ����� ��� ���� ���� �� �� �� !� ������� �� $� ��� ��� ��� ���������� �.=���� 9 %��# �11>, %�� �� ���# �111/� � ��� ������� ���!� �� ������ ��� �� ;� ��� ;� �� ���' �������� ��� ������ ;� � ������ � ���� �� ����� �� ����� ����� �� �� ���, ������ ��� �� ;����� ;� ������ �� ����� ����� �� �� �������� ?�++ ��� !��� �� ����� �� � �� ;� ����������- ��� .=���� 9 %��# �11>, 4�� �� ���# �111, %���� ���# �111/�

��� ����� ��� �� �� ���� ����� � ��� ��� �� $���� ��� �� �� �� �� ��� ��� �� �' �������� �����% ���� ���� ������� ���� �������� ����������)� ���@����� " ������# A����������#��� 5; ���� ������� .B�������� �� ���# �11>, 4��

� �+++ �������� %����

������ �� .�/ *�������� � ��� ��� �� $� ��� ���!�� �� !� ������� ��� �� ���� � ��� ��� �� ���� ����.�� !��� ��� ������� ������/ �������� �� �� ����� ��������� .�� �� $������ �� ���# �112/� .�/ <��������� ����� ����� �� �� �������� �������� ����� � 36 �5 �� �� $� ��� ���� �' �� �� � ���� ��� �� ���.%�� �� ���# �111/� ��� ����� �� � �� ��� ����� !���� ������� �� �������� �� �� �� �� �� ��� � �� ����� �� � ���� ��� �� ��� ���!�� �� ���� ��� ��$�� � ����� ���� ����� 4���� ��� �� �� 1 ���� �� �� ����� �� �� ������� �� ���� �� �� $� ��� ������� �� � � ��� !��� �������� �� �6 ��� ��� �������� ��� ���� 20� ���� �� ������� �8��� ��� ���� �� �� ��� %�� ������ !�� ��� ����� ���� I� 3�%J��%.�<�/ ��� �7 �������� ��� ������ ��� ��� �� �� ���� �� ��� �� �� ����� �� � �� $� ������ ����� � .�+ �/���� � ����)��� � ��� ��� ��� .�+ �$ ����)���#��+ �$ K5# �- �$ $5�# -+ �$ ��"�%'7@���"%'7 .�" 6//# !��� �������� !� � ����� � .�+ �#� � �+- ���/ �� � ���� �� � � ��� ��� ��� .- �$ -� �������� ���� �� �# -++ �$ K5# �++ �$ $5�# -+ �$

!�� ����� ��������� �� �� �����

�� ��'� �111/� '������� ��� �������)� ���@�����" ������ !�� ������� �� &������� ��� �� !������ � ������� �� ����� �� ����� % �������� �� � �' �� ��� �' �������� .B�������� �� ���#�11>/� ����� � ����� ���� �0�� � � ���� � �� ������� ��� �� �� ����� � ��� ��� �� �� � �������� �� �� ����� ��� �� �� %> ����� �����.4���� �.�//� 4���������� ��� 5; � ����� �� ������� �� �� ������ ������� � $� ��� ;����� �' �������� ����� % ��� ���� ���!� �� �� !� ������� �� ����� % ��� ��� ��� ������� ��� �� �� ���� ���# � ��� ���� ���� �� �� ��� ��� � �� ������� �� ��� ������� �� �� ����� ����� � 0�� �� ��� � ��� ��� � ���� �� ���� �� ����� ���� �� ������� �� ������� ������ .=���� 9%��# �11>, 4�� �� ���# �111, %�� �� ���# �111/� ������� � ������� � ���� ����� � ��� ��� �� ������� �� $�# !� ���� ��������� ���� �� ��� ���� �� ��������� � �� $� ����� ���� ���� !� ��������� ���� ����� ����� � ����� ������ �� ��� �� �� � �� ��� $� ��� ���� ����0��� ������ ����� �� !��� � ��� �� ����� �� � �� �� ���������� �� ����

����� !������� � �� ��� �����

G����� �������� �� ����� �� �!�� �� �� $����# !� �� ������� �� ����� ����� �� � ���� �� ��������������� �� ��� � �� $� .4���� �.�//�� � ������� �� �� ����� �� ��� ����� $� ��� ��� �� � ���� ��� .%�� �� ���# �111/� &� ��� ����)��$� ��� �� �6 ������ �������� ��� ���� �� �� ������ �8��� ��� ��� �� �� ��� ����� �� ������ ��� �� �������� ������� � � 0�� ������ �� ��� �� �- �$� &� ����� � 3�% ����� $���� ���� �� �# � ������ ���� �' �� � �� ��� �� ���� ��� � ������� ����# ��!�� ������ ������ ��� �+ �������# ��� ����)�� �� ���� � ������ ���� %�(<� H���� ���� ����� ����# ������� �� ��� �� ���� ����� �� ���� ��� ����� ��� �������� � �� ����� �� ��� ����� �� �� ������� �� ���� �� �� ��� ��� ��� �� �������� !�� �� ������� � �� ��������� �� ������� �, 0 �� ��� �� � � � 0�� ����� �� ����� ��� ��� � �� � ���� �� ��� �����# 0�#�� �+�+� ��� .4���� �.�//# !���� ����� !� �

��"�%'7@���"%'7 .�" 6// � �� ����� �� ���� �� �!�� $5� ���� ��� � �� ����)��� � ��� ��� �������� ���� ��������� ��� �+ ������� ������ ��������!� � �� ���� ����� �� � �� ��� ��� .�++ �$���<;��# >�7 $ ����# +�7 �@� ���������� ���#+�7 �@� ����� ������# +�7 $ ���� ����# +�7 $ ���������/� ���� ���� !��� ��� ���:�� �� � ���� ���� �- L.�1C�/ %�(< ��� ��- ����� � 6- &� (�� !��� ������� � � $������ ;������� %������� *����� �� !�� ��� ������� �� � $������ ;������� * ��� 2>+ %��� ���������� <� �� � �� ���� ��� !��� ���� �0�� .���� M��� -�+/ ��� � �� �� ������)�� �� �� �� ���� ��������� ����� ��� !�� 0 �� � � 0�� ����� ������� ��.(��4� 3�++/ ���� �� � ���� ���� ��������� ��

��� �� �� �� �� ����� ��� ������ �� $� ����������� ���� �������� ���� ���� �� � ���� �� ��� ���� �� �����

����� � ����� ���� ��� �� �� �� � .���/�

%7 >2 6� +�+>%- 67 6> +�+6%>.-�/ 27 +�+7%6 2> 1+ +�+>%2.-�/ 1- +�+6%2.3�/ �+� �+3 +�+>%1 �+2 ��+ +�+>=1 ��3 ��- +�+-%�+ ��+ ��� +�+6%�� �77 �7> +��6%��� �67 �6> +��>%�3� �17 �1> +��+8�3@�7� �+� �+7 +�+3%�7� ��7 ��6 +�+�%��� ��1 �3� +�+-%6� �7+ �7� +�+7%>� �6� �6> +�+�

-� ��� ����� $� ����� 3� ��� ����� $� ����� H���� ��� ��� �� �� �� ��� ��� � ������ ����� ��� ���� ��

����� �� �����

����� ��������� �� �� ����� !��

��������� ����� �� ���� � ��� �� �� � ���� �� ������� ��� �� ��� �� �' �������� ��� .%�� �� ���#�111/�

������� ���$������� � �� ��� ����$���*����� � ����

H��� ����� �� ���� �� � ���� �� ���� � ��� ����# ������ ������ ��� ��� �� �� ���� ������������� ������� ������, �� ��� �� �� �� NN��� ���� ��OO ������ ��� ������ ��� �� �� ����� � � ��� �� ���� &� �� ������� �� ���������� ��� ���� �� ����� $� ��� �� ���:�� �� �� �������� ��� ����� ��� � ������ !� � ��������� ������ ������ �������� ���� ���� .K���� ��'� �11�# �113, 5���� 9 $��$���# �+++�#�/���!�� �� � ���������� �� �� ������ �� ������ ����� �� �� � ������ &��� ���� ��������� �!��� ��������� !� � �� � -� ��� 3� ��� ���������# �� ���� �� �������� �������� ��� �� ��� ������ �� !� � �� ����� ��� �� � ������ ��� ��� ��� ������ �� !� � �� ���� � �� ���� <;�� ��� ���� �� .=���� 9 %��# �11>/ !����������� .�� � �� ���!�/� ��� ��� ��� ��� �� ��������� ���� -+ 1+ L ��� !��� ����� ������� �� �������� �� �� $� ����

�� ����� � ������� � ����� �� �� �������� ��$� ����� !� ���� ��� �� �� ���� �� ��� ���� �������� ��� �� �������� ���� ���� .5���� 9$��$���# �+++�#�/� ���� ����� �� ��� ��� ��������� ��� ��� � ��� �� �" ��� ������������� �� ������ � ������� ������� ��������� �� ���� �������� ��� ��������� ��� ��������� ����� �������� !� � � ��� ��� �� ��������� ����� ������ � �" 6� ���������# �������� ���� ������ ��� ��� ��� ��� �� ������� �� NN���� ��OO ��� ���� �� � ����� ��� ��� �� ���� � � ��� ��� ������ !� � ��� ���� �� �������� �� ����������� �� ��� ��� 4�� ������# !� ���� ��� ������ � ��)�� �� ����� � ����)� ���� � �� �� ����� �� �!�� �� �� (���� � ����)���!���� ��� ���� !� � ��� ���� ����� ���� ���� � 3+ ������� .5���� 9 $��$���# �+++�#�/� ����� ������ �� �� �������� ���� ���� �� � ��� ������� ��� ��� ��� �������� �������� � ��������� ����� �� � ���� �� ����� � &� �������� � ������ ���� �� �� ������ �������� �� � �� ����� ����� �� ���� ���� ���!�� �� ����0�� ��� !� � �� ������ ��������� .K�� �� ��'� �11�# �113, 5����9 $��$���# �+++�#�/� "������ ������ ����� ������� ��� �� ��� �� �� �� ����� ���� ��� �� ������������ � ���� ���� �������� � �" 6�

&� ������� �� ���� �� ��� ���� �� � ����� !� ��� � -� ��� 3� ��� ����� $� ���� &� ��� �� ������� �� -� ����� $� �� ����� ������ �� ������ � ����� ���� ���� ���!�� �� ������ ��� �� �� ������ �������� �� � � ������� ����� ���� ���� !��� ���� �� �� ������� � ������ ����)�� �� ���� ���� %�(< .4���� �.�//��� !�� �������� �� ���������� ��� ���� �� ����� ���� �# ���� !��� ������ �� ����0��� ��� �� ����������� ���� ����� �� �� $� ���� ������ ���# � !�� ���� �� �� ����� �� ��� �� ���

!�� ��� �������� ��� ������ �� �������� �������� �� ���� �� ����� � ������ �� ������� ��� ��������� ���������� �� ���� ��� �� ����# !� ���� �0�� ������� ���� �����0� ������ ��� �� �� ���� �� � ���� ��� �� ��� ��� ��� �� ��� ������ ���.5���� 9 $��$���# �+++�#�/� ������� � 0�� ����� �������# !� 0 ���� �� � � � 0�� ������������ �� � ���� �� �� ��� ��������� ��� �� ����.4���� �.�/ ��� ���� �/�

�� � ������ !��# !� �������� 3� ��� ����� $���� ��� ������� �� ���� �� ��� ���� �� ����� ���� � �� �� ����� �� �!�� ���� �������� �������� �� ��������� ����� .4���� �.�//� '��� ����#� ������ �� ��� �������� ��� �� ���� !������������ &� ���� �0�� ���� ��� �� ���� �� ����� ��� �� ��� ��� 0 �� �� � � � 0�� ������������ �� .4���� �.�// � ��� �� � ���� �� � ��� �� ��������� ��� �� ���� .���� �/�

+&$�������� � !������ ���$����� �� ��� ����� ����� $���

��� ��� �� ���� �������� �� ��� � ��� ��������!� � �� � ���� �� � ����� ���� +��+ +�+� ���

!���� ���������� � ��� ���� �� ��� �� ��� ��� �� ���� ���� � 3- ������� .���� �/� *���� ��������� � ���� �� ��� ���� � !��� ���� �0�� ���������� �� �� $� �������� .����� ��� �� �� ���� -���� 3� ���� �� �� ���, 4���� � ��� ���� �/�K��� ��� �� ��� �� ��� �� �� %> ���� ��� �� ���������� !� � �� � �� ����� ���� �������� ����������)� ���@����� " ������ !���� !�� ���� � ������� � � � ���� �� $� ����� .B���������� ���# �11>/�

��� ���� �� ��� ���� � �� $� ����� �� �� � ��� ��� ������ ��� ��� �� ������ �� ����)�� ��

������ �� .3����� ������/

����� ��������� �� �� ����� !��

��� # ������# ��� ��! ���� � .4���� 3/� ������������ ���� ���� ������ ���� ��� �� � �� ������� � �� �� $� ��� �� !� �� �� �� ��� �� ��0�� �� ���� � ��� ���� ��� ������ ����� ���� ��������� ���� ������ �� %�� ��� %�3 ������ ��;� .4���� 3/ �� ������ �������� � �� ���� ��� �� ���� �� ���� ���� .$������ �� ���# �112/� ��� ���������� ��� �� � ��� ��� �� ��� ����� �� ���������� �� �� ����� ��� �� �� %7@%> ���� �� �� (���� �����)���� "�!����# �� ��� ��� � �� (���� ������ �� �!��# � �� ������ �� ���� ���� ��� �� ���� � ����� �� � ������� ��� ����� ���� � ��� ������ � ������ ����� � ��� ���� ������ �� �� �� ;� ��� ���� �� �� ������� �� ;� .=���� 9%��# �11>, %�� �� ���# �111/�

�� ������� � �� �� �� ����� .��� ���� �� �+ �6�������/ !��� �������� ��� ������ �� �� � ;� ���;� .���� �/� %�� �� ��� �� �� %6 ����� %�������� �������� � �� ����� ��� �� �� ����� ������� � �� ;� !��� ��� �� ��� �� %7# %-# ��� ��-� ���� �� %> ���������� � � ��� ��� ����� ��� ��;� .4���� 3/� ���������# ����� �� ����� �� � �� �� (���� � ���# �� ����� ��� �� �� !�������� �� $� ��� �� ��������� �� ����� �� � ������ �� K��� �� ��� ���� �� !� � ������� ������������ �� �� ������� ��� P ��� ������� ��� �������� �� �� ������ ��� �� �� �� ���� � ��!�������� �� �!�� �� �� (���� � ����)��� .*������ ���# �116# �112/# !���� ���� �� � � � �� ��� � ��� ��� ����� � ����� �� ����� �� ���� ���# ����� ����� ��� P ��� � ��� ��� �� � ��� ������ �� �� (���� � ��� ��� ���� �� ������� .(������ ���# �112/ ��� ������ � �� �� ���� %7@%> ������!���� � ����)�� � �� �� ������ !���� ��� ����� ��� !������ ������ � , �� ������� ��� �� %7@%> ���� ������ !� � ������ � �� ��� �� ����� �������� ������� !� !� � ��� � ��� ����"�!����# �� ��� �� �� � ;� ��� ;� �� $���� ��� !� � ������ �� �� ���� � �� ���� ���� � ����� �� ���� ��� �� ����� ����� ��� ����� ���� �� ��� ������ �� !� � !� ����� �� $� �� ���� � ��� ��� �� !���� �� ����� � ��� ��� ���

������ �� K��� �� ��� ���� �� �� �� $� ��� ����� ��������� �� -� ��� ����� ��� ��� �� !� � �������� ���� � �� ����� ���� ���� .�/ ;��� ���� %�(< ������� �� 3� ��� �� �� ���� ���!�� ���� ��� �� $�� � �� ����� ���� ����� ��! .%>, �/ ����� ������ �� �� $� ��� .>++ ��� 1+�� � ����� !�� -� ��� ����� ���� I� 3�%J��% ��� �7 ������ .�<�/ ��� ���� ���.�/ ��������� .�������� =��� *�$5� .0�� ������ �� ��� �- �$/ � � ��� ��� .0�� ����-+ �$ ��"�%'7@���"%'7 .�" 6/# - �$ -� �� 3� ��� ���!�� ��� ����� �� �� �� ���� ��� �� �������� ���� ���� .� � ���� !��� ��!�� � ������� ��� �+ ������� ������ ����)��.+�3 ��+ � �+> ���/ !��� ��� ���:�� �� � ���� ���� > L .��� ��- ����� ��� 3� ��� ����� ���/� ;���� �� !��� ���� ��� ������� �� � $������ ;������� * ��� 2>+ %�������� �� ��� .��� ���� /# ��������� �� ���� � .����M��� -�+��� ����� !�� ������� ���� �� �� ���� � �� � ����� � ����� � ��� )��� . �� ��� ���� �� �� ������� �� ����� $�� ���� ��� !��� ������)�� ���� + � �� %� � �� ������)��0�� ����� ������� �� .(��4� 3�++/ ���� �� � ������� ����

��� � �� �� ����� �� ����� ��� � ����� ������.5��� �� ���# �112, $������ �� ���# �112, 4���� 3.�//�� �� �� ����� �� �� ������� � � ��� �� �� ��� �� �� $� ��� ����� � �� �� ������ �� �� ;���� ;� �������� ���� ����� !� � �� ������� ����� � ���� �� ��� �� �� ����� ������� ��������� ���� ���� �� !��� ;� ��� ;� .4�� �� ���# �111,%�� �� ���# �111/�

����� ���� ���� �� � �� ��� �� ���� ��� ���������� �� ���� �� ����� � ���C �� 3� ���� �� %># ��%�7 ���� ��� 8�3@�7 ����� ��� ��� �� �� !� ���� ���� �� ��3 � 3- ������� .���� �/� %> �� ��� �� ;� !��� �� � %�7 ��� 8�3@�7 ������ �� ;�� %>�� ������ ���� ����� ���� ��� ���� �� �� ������������� �� ;� ��� ���� ������ � ��� ;� �� � �� ���� ��� .4���� �.�//� ��� ��� �� ��� ���������� ������� ��� � � � �� ���� ���� !� � %6 �� ;���� %- �� ;� .5��� �� ���# �112, $������ �� ���#�112/� ��� ��� �� ��� �������� �� %�7 �� ���� ��� � � � �� ���� �� ���� ��� !� � %2 �� �� 7 ����:��� ��� !��� ��� �� ��� �� 8�3@�7 ��� �� ��� �� � �� ���� ��� !� � �� %�+ %�� ������ .5��� �� ���#�112, $������ �� ���# �112/� ��� %�7 ��� 8�3@�7 ��� �� ���� �������� � � � ����������� �� �� ����� ��� ��� !� ��� ;�# !������ �� ��� �� ��� �� %>�������� � � ������� �� �� ������ �� ���� ����� !��� %> ��� %6 �� ;� .5��� �� ���# �112,$������ �� ���# �112/� G� � �� ���� ��� �� ���� ������ � �� �� �� �!�� � �� 0�� �� ��� ����� � ��� ��� .4���� 3.�//� ����� ��� �� ���� ��� �������������� �� !� � ������ ���� �� ������ ���� �� ���������� �� 3� ���� �� %> .4�� �� ���# �111, %���� ���# �111/�

� �� �� ���� �� �� ���� �� �� ��� �� ������������ �� �� ������ � ��� ���������� � ������� �� � �� ����� �� �������� �� �� ������ ��������� �� ��� � ����� .4���� �.�/ ��� ���� �/�� ���� ��� ��� �� ��� � ����������� �� !��� �� !� ����� ������# � �� ������ �� !� � ��� ������������ � �� ��� �� �������� ��� �� ��� �� ��� �� � ��� �� ��� � ��� ���� *����� ��� �� �� !� ������� �� �' �������� ���� � �� ��� ����� ��

�!�� ���� �������� ���� ����� .�/ ;��� ���� %�(<��� � �� ������ �� ���� ���!�� ���� ��� �� $�� ������ ��� ��� �� !� � �������� ���� ���� � �� ���� �� .�/ �������� � ��� ��� ��� ��� �� ���� �� ��� .%��, �/+ ������ ��� ���� � ��� �� ���!�/� ��� ��� ��� ���� ����� ��� ������ �� 3� ��� ����� ���� I� 3�%J������� �����/� $� ��� ����� !�� ��� �� �� �� �� ���� ��� ��� �+ �/ ��� ����� 0�� ������ �� ���� �� ��+ �$ K5#�� ����)��� .+�- 3�+ � �+> ���/ � 36 �5� 4�� ���� ��# 2+ �3+ �$/ � �� ������ �� ����� 4�� ���� �� ���� �� ��� ��� ���!�� �� � ���� ������� � ���� ���� ����

�1C�/ %�(< � 2- & . !� ����� ��� -� ��� ����� ������ � � $������ ;������� %������� *����� �� !��

�������� �� ����� � �� ���� ���� �������� ���� ����/ !�� 0�� ��� ��� �� ��� � ������ ��� ��� ����������� ��� ���� ��� !�� ������� �� �� �� ���� � �� �� ����

�� �������� �� ������� ���/� ��� ���� �� ���� �������� ���� ��� �� ��� ������ ����� ��� !��� 0 �� � � ���� ������ � ��������� ��

������ �� 4���� �� �!�� �� ����� % $� ���� .�/ *�������� � ��� ��� .$������ �� ���# �112/ �� �� $� ��� ��� ��� �� !� � ������ �� �� ���� � ��� ��� ���!�� �� ��������� �� ��� �� ���� �������� ��� � �� ����� ��� �� ���� ��� ��� ����� �� ����� ��������� C ��� .����/# ������ .���!/# ��� ��! .���/� .�/ * ��!��� ����� ��� �� ���� ��� �� ���� � ��� ��� �� $� ��� ���� �� ������� .H/ � �� ��� .�/ � � �� ���!�� ��� .����/# ������.���!/# ��� ��! .���/ ���� � .�� �� �� ���� �� $������ �� ���# �112/� ;���� ������ ����! �������� � ��������� �� ������ �� ���� ���� ����� $� ������

!�� ����� ��������� �� �� �����

;� �� �� ����� �� �� �� � �� ����� �� ;� .%���� ���# �111/, �� ���� ��� �� �� �� �������� �� �������� � ��� ���� � �� � ���� �� ��� �� ������� �� $� ��� �� ���� � �� �� ���� ���� �� �� ����� �� �!���

��� ������ � ��� ���� � �� �������# ������� �!�� ��� ��������� ����� �� �� !� ��������� $� ���# ���!�� �� ����������� �� ���� !� ������� �� � �� �������� �� ��� ����� ������ �� �� ������� � �� �� �� ����� !����������� �� �� � ������� ������ �� �� �� ��� �� �� ��� �� �� �������� �� �� ����� � ��� �� �� �� � ���� ��� ������� ��� �� ���� �� ������ ����� �� ���� ��� $� � ��� ��� ����� ���#������� � �� %7@%> ������ �� �� ������������ ��� �� ������ �� !� � �� !� ������ � ��� ����� $�� ������# ��� ����� !� � !� ��������

����� �� $� �� !���� � ������ �� � ����� ���������� � ������� � ��� ��� ��� ����� �� �� ��� �� �!� ��� � ������ ���� ����� .$������ �� ���# �112,5��� �� ���# �112, 4���� 3.�//� �� ��� �����# $������ �� ��� � �������� �������� � �� ���� ��� ��� ��� ����� �� � !���� ��� ���� � � ���� �� �� ��# �� �� �� (���� � ����)���� ����� ����# � ���� �� ������� �� �!�� �� ����� ������ ���� ��� �� �����# �� �� ���� ������ ��� �� ����� �� ������ � � �����0� ����

��!������&����

���� !��� !�� ������ �� �� �� �� ��� *������� ���<�������� �������� 5����� �� 5����� .�*<�5/� &�

����� ��������� �� �� ����� !�"

���� ;���� %������) K����� ��� *����� � ������ �������� �� � �8��� ��� ���� ��� ���� 5���� �������� ������������

�� �������

� ���# *� 9 K�������# =� .�111/� ����������� %� �� �� 45� 6��� .(�� ����# �� 4�# 5���# �� �� 9� ����# 8� 4�# ���/# ��� ��� �# ��� 3-� 32+# 5��*���� "����� =����� ��� %����# 5�� *����"�����# �Q�

G� ��# �� ��# �����# �� %� 9 ;�����# 8� �� .�111/���� ���� �� ��� �� ��� � ��� ��� ��� ����������-' $���' 7��' ��' ��# �3�> �373�

5����# *� (� 9 $��$���# �� $� .�+++�/� 5����� ���) � ��� �� �� ���������� ����)��� ����� �� �!������ �� ���� �� ��� ���� �� ����� �������� ��������� �� ��������� ��# � 2�

5����# *� (� 9 $��$���# �� $� .�+++�/� K��� �� ��� ���� �� �� �� ��� ����� �� �!�� ���� ������ �� ���� ����� ����-' $���' 7��' ��' ��# -�� -�3�

5���# 8� =�# ����# 8� $�# "�����# $� <� 9 %���# �� ��.�112/� 5������ ��� ��� ������ ����� ������� �� �� �� ���� � ��� ���� �� �� ���� ��� �� ��� �� ������������� ����� % ����� ���( 8' ��# �-�- �-�-�

4��# P�# %��# �� 9 *������# �� �� .�111/� $�� ����� ��� ����� �� � ��� ����)��� !� ��� ���� �� ����� 5����� ���� �' ���' �# �+1� �+1-�

(����# G� =�# (�����# �� ��# %���# <� �� 9 5���# �� ��.�112/� � ��������)�� �� ��� �� � �� �� ���� �� ��� ��� �� �� ���������� ����)���� � ��� �� ���#�-1 �>7�

(������� ������# 5�# (�������# K�# $����# ��# %���# �� ��9 � ���# *� .�123/� ��� ��� ���� � �� ������ ����� % �� �� �� �� �� ������ �� �� ��)���� $������# 271 2-6�

8����# G� ;�# '���# (� 8�# =��# 8� 9 %���# �� �� .�122/���� ��������� � ��� ��� �� ����������� % ���# ��

�� �� �� ����� �� � ������������ ��� ��)����$���� ��# �1 �>�

K��# %� ��# ��������# R� <�# <�!����# 8� '�# (�� �����#(�# %���# �� 5� 9 *��# 8� &� .�11�/� � � ������� �� ����� �� ������� ������ ���� ����� � ��� �� ������� ��� ����C ���� ��� !� � ��� ������� ������ ����� 8' ��' $���' � ' ���# -73+ -73��

K��# %� ��# 8������# <�# * ����# ;�# ��������# R� <� 9G����!� )# $� .�113/� NN4�� ���� ��OO ��� ���� ��;�� !� � �������� ���� ����� 5� �' � ��� 4��' ��#�763 �762�

=����# �� 9 %��# �� .�11>/� ;����� � ��� ��� �� ������)��� ���� ����� ���� ����������� %� 45�� �#--� ->3�

$������# 5�# 8����# =� 9 &�� ���# <� .�112/� ;����� ����� �� ���� ���������� ����� �� ��� �� ��� ��������������� % ���� ���� ������� ��� ���������������� 8' ��' ���' ���# 663 613�

%��# ��# 4��# P� 9 *������# �� .�111/� %� �!�� ���� � ���# ������� ����� � ��� ��� ����� ��� ���������� ���� �� ��� ��� 8' ��' ���' ���# 6�� 63��

*����# G�# &������# *�# *�����# $�# 5�����# $� �� 9G����!� )# $� .�116/� ���� ������� ������� ���P ��� NN��� ���� ��OO# � ��! �������� � �� � ����� ������ ���� � ��� ��� ��� ���� ���C ������ ��� � ��� ��� ;�� �� ���� ���� ��� ��� ������8' ��' ���' ���# �77 �-1�

*����# G�# *�����# $�# 5�����# $� ��# G����!� )# $� 9&������# *� �� .�112/� ��� ����� � ����������� ����� �� ������� ��� ������� ������ ��� ���� ��� � ��� �� ���# �17+ �173�

&�� ���# <� 9 � ���# *� .�117/� ����� ����������!����� ���� �� $� ���# �� �� �� �� ��� ��� ��� �� ����������� % ���� �� ���� ��� ��� 9� '5��� � ��' � �' ���� ��# -�33 -�36�

B��������# %� %�# &��# 8� 9 &�������# 8� �� .�11>/�*�! ����� ���� ��� �� ����� % ���� 45�� �#->7 -63�

������ �� � �� ���

:4� ����� % ��������� #&&&; �� ����� �� ������� �� <! ( ���� #&&&; � ����� #& ( ���� #&&&=