Synergistic interactions between volicitin, jasmonic acid and ethylene mediate insect-induced...

10
Synergistic interactions between volicitin, jasmonic acid and ethylene mediate insect-induced volatile emission in Zea mays Eric A. Schmelz*, Hans T. Alborn and James H. Tumlinson Center of Medical, Agricultural, and Veterinary Entomology, USDA and Agricultural Research Service, 1600/1700 Southwest 23rd Drive, Gainesville, Florida 32608, USA *Corresponding author, e-mail: [email protected] Received 13 May 2002; revised 16 September 2002 Plants display differential responses following mechanical damage and insect herbivory. Both caterpillar attack and the application of caterpillar oral secretions (OS) to wounded leaves stimulates volatile emission above mechanical damage alone. Volicitin (N-17-hydroxylinolenoyl-L-glutamine), pre- sent in beet armyworm (BAW, Spodoptera exigua) OS, is a powerful elicitor of volatiles in excised maize seedlings (Zea mays cv. Delprim). We consider some of the mechanistic differences between wounding and insect herbivory in maize by examining the activity of volicitin, changes in jasmonic acid (JA) levels, and volatile emission from both intact plant and excised leaf bioassays. Compared to mech- anical damage alone, volicitin stimulated increases in both JA levels and sesquiterpene volatiles when applied to intact plants. In a bioassay comparison, excised leaves were more sensitive and produced far greater volatile responses than intact plants following applications of both volicitin and JA. In the excised leaf bioassay, volicitin applications (10±500 pmol) to wounded leaves resulted in dose dependent JA increases and a direct positive relationship between JA and sesquiterpene volatile emission. Interestingly, volicitin-induced JA levels did not differ between intact and excised bioassays, suggesting a possible interaction of JA with other regulatory signals in excised plants. In addition to JA, insect herbivory is known to stimulate the production of ethylene. Significant increases in ethylene were induced only by BAW herbivory and not by either wounding or volicitin treatments. Using intact plant bioassays, ethylene (at 1 mll 1 or less) greatly promoted volatile emission induced by volicitin and JA but not mechanical damage alone. For intact plants, wounding, elicitor-induced JA and insect-induced ethylene appear to be important interacting components in the stimulation of insect-induced volatile emission. Introduction Plant physiological responses following insect herbivory and simple mechanical damage are not the same (Baldwin 1988, Turlings et al. 1990, Korth and Dixon 1997, Reymond et al. 2000). The demonstration that plants can perceive insect attack as being different from wounding has generated considerable interest in the elucidation of underlying mechanisms that regulate insect-induced plant defenses (Karban and Baldwin 1997). Differences in the spatial and temporal nature of the mechanical damage may be important. However, few attempts have been made to accurately compare insect herbivory and similarly mimicked mechanical damage. In cases where careful controls have been performed, insect damage still resulted in significantly different plant responses (Baldwin 1988, McCloud and Baldwin 1997). Insect-derived elicitors and enzymes that contact the plant leaf surface during feeding are now considered probable candidates to explain the specificity of plant responses to insects (Mattiacci et al. 1995, Alborn et al. 1997, Felton and Eichenseer 1999). One rapid and dramatic example of an insect-specific plant response is induced-volatile emission in maize PHYSIOLOGIA PLANTARUM 117: 403±412. 2003 Copyright # Physiologia Plantarum 2003 Printed in Denmark ± all rights reserved ISSN 0031-9317 Abbreviations ± JA, jasmonic acid; BAW, beet armyworm (Spodoptera exigua); OS, oral secretions. The use of trade, firm, or corporation names in this publication (or page) is for the information and convenience of the reader. Such use does not constitute an official endorsement or approval by the United States Department of Agriculture or the Agricultural Research Service of any product or service to the exclusion of others that may be suitable. Physiol. Plant. 117, 2003 403

Transcript of Synergistic interactions between volicitin, jasmonic acid and ethylene mediate insect-induced...

��������� ��������� ����� �������� ������� ��� ��� ������������� ����������� ������� �������� �� ��� ����

��� �� �������� ���� �� �� ��� ��� ����� �� ���������

������ �� ���� � ����� ���� � �� ��������� ������ ���� ���� �� ����� ���� �������� ������� ���� �!�� �����"���#$� ����� %����� �� & ��� $#��'� ���(������)���� ������� �*�� + ������ ,-������ �.���.�� .��

�������� �� � � �� ������� �� ��������� � �

���� ���!��� ��""������� ���!����� "�������� �������������� ��� ���� ��� ������ #�� ���!����� ��$ ��� ���!!������ �" ���!����� ���� �������� %&�' � ������������� �������� ������� �������� � ��� �������� ������������ (������ %��)*������+������������,���������'� !������ �� �� �������� %#�-� ��� ��� ������' &�� ��� !����"�� ������ �" �������� �� �+���� ����� ��������� %������� �� .��!���'� -� ������� ���� �" �� ����������""������ ����� �������� ��� ���� ��� ����� �� ����� � �+������� �� ����� �" �������� ������ �� ���������� %��' ������� ��� ������� �������� "��� �� ���!��� ��� �+���� ���" ��������� /��!���� � ��������� ������ ������ ������� �������� �������� �� ���� ������ ��� ���0����!��� �������� ���� �!!���� � ���!����� 1� � ������� ��!������� �+���� ������ ���� ������������ ��� !������ "�� ������ ������� ���!�������� ��� !���� "�������� �!!������� �" �� ������� ���

��� 1� �� �+���� ���" �������� ������� �!!�������%)23422 !���' � ������� ������ ������� �� ���� ��!������� �������� ��� � ���� !������ ����������! ������� ��� ���0����!��� ������� ��������� 1������������������������� �� ������ ��� �� ��""�� ����� ��� ����+���� ��������� ��������� � !���� �� �������� �" �� ������� ��������� ������� �� �+���� !����� 1� ������� � ������� ��� ����� �� $���� � ������� �� !������� �"�������� �����"��� �������� �� ������� ���� ������ ���� � #�- ��� ����� ��� �� � ����� �������� ��������� �������� 5���� ��� !��� ��������� �������%� )�� ��) �� ����' ������ !������ ������� �������� ������ � ������� ��� �� � �� �������� ������ ������6�� ��� !����� ��������� ������������� �� �������������� ������� �!!��� � � ��!���� ����������!����� �� �� ��������� �" ����������� ����������������

1��������

���� ������������ ��������� ��������� ������ ����������� ������ �������� ���� �� ��� ��� ��� � ������!""# $%������ �� �& �!! # '���� �� (�)�� �!!*#������� �� �& � +& $�� ������������ ��� ����� ���������� ������ ���, � ����� ��������� ���� ��%������� �������� ����������� �������� �� ��� ��%������� ��%��������� ��������� ��� ���%��� ������-���%��� ������������ �'��� �� ����� �!!*+& (���������� �� �������� �� ������� ��%�� �� ��� �������� ������ �� ��������& .������# ��� ������� ��� ������� �� ��%����� ������ ������ ��������� �� ��������

�����,�� �������� ����& /� ���� ����� ����%��������� ��� ���� ���������# ������ ���� ����� ���%������ ������������ ��������� ���� ��������� � ����� �!""#�0��%� �� ����� �!!*+& /�����-������� ����������� ��1���� ��� ������ ��� ���� ��� �%���� �%����������� �� ��� ���������� ������� �������� �� �)������� ����������� �� ���� ��������� �� ������� ��������� �& �!!2# 3����� �� �& �!!*# 4����� �� 5����������!!!+&6�� ���� �� ������ �)���� �� � ������-��������

���� �������� �� ���%���-������� �������� �� ��1�

�.7�/6869/3 �83:$3�; ��*< = �>=��& � � ��)����� � /���� ��� / ������� #��$

/���� � ������0 1 � ����� ������� 2��3 ��$�*4$�!

�55�������� > ?3# @������ ���� 3A# ���� ������� ��)��)���� �6���+� 6�# ��� ����������&$�� %�� �� ����# ����# �� ���������� ���� �� ���� �%�������� ��� ���+ �� ��� ��� ���������� �� ����������� �� ��� �����& �%�� %�� ������� �������%�� � ������� ����������� �� ������ �� ��� ;����� ����� (�������� �� 3����%��%�� �� ��� 3����%��%�� ������� ������� �� ������%�� �� ������� �� ��� �)��%���� �� ������ ��� �� �� �%�����&

�������& ����& ��*# � � = �

�7�� ����+ ��������� ��������� �� :���%�� ������������������& /� ���� ������# ������ �� ���� �� ���B%�-������� �������� ������ �@�� ������� �������������� ��� ��%�� ���� ������� �� ��� ���� �������� 3A� �)��)���� �6���+# ������ ���� ���� ������ ���������� �� ������� ��������� �������� ���� �����$%������ �� �& �!! +& /�����-���%��� ���� �������� �%������� ������� �� �������� ������� ������ ��� ��� ���������� ��������� �� ��������# ��� ��%�� ������� �����,��� ������ ���������� �$%������ �� �& �!! # C���� (��,� �!!�# (����� �� �& �!!"# '������ �� ����� � �+& /��%��� ������� �������� �� �� ����%-���� �� ������� ��������� ��� ���������� �6�+ ����%�� ����� �� ��� ���� ��� �%���� �$%������ �� �& �!! #�!!�+& C�������� �3*�*-�����)�����������-8-��%�����+�� ���� ������� �� ���������� ���� 3A 6� � ������ ����� �������� �� ������� �������� �� �)����� ��1��������� ������� �3����� �� �& �!!*# ������1 �� �&� �+& 3�������� ���� ���-���� ��� ���@%���� ����������� ���%���� ������� �� ��� ,���� �� ���%� �� ���6� �� ����� ��������� ������� ����D �� �& �!!"# ��������� �& �!!!# 3����� �� �& � # .������,� �� �& � �+&$�� �������� �� ����� ������ ��������� �� ������-

������� ��������� ������� ���%��� ������� ����%����� ��� ����� �� �� �������& 5��� ���, ���� �)�����%��������� �� @������ ��� �?3+ �� �)����� ��� ��������%������� ��� @������� ����� �� �������� ������ �����%����� ������-���%��� ������� �������� �.��,� �� �&�!!=# ���� �� �& �!!2+& 8�,�����# ��� ��������� ��������� �� ��������� ��� ���� ��%�� �� ��� ������� �������-���� ���� ��� ����� ����������-��������� ������3����� �� �& �!!*# ���D �� $%������� �!!!+& $�� ������������� ��� ������ ������� �� ��������� 6� ����%������%�� ������� ������# �%�� � ?3# ��� ���� ������� ���0��%� �� ����� ��!!*+ ����� �)������ �����-������ �� ������ ��6�� ���� 3������ �� ������&3 ���� �� �������� ������� �� ��� ���%��� ������ ������� ?3 �� �������� ���� �.��6�� 6� �� ������ ���������� ���� �����& ��� ��������# .������,��� �& �� �+ ����������� ��� ���������� �� �������-���� ��� ���@%����# ������� �� �. ��6�� 6�# �����%�������� �� ���%�� ���� ?3 �� �������� ���� �������� ��%���� ������ �3������ ���������+ �����&/� �� ���� ���������� ��� ?3 ����� ������� ���������

�������� ���� �� ���� ����%�� �0������ �� %�����!!*+� �������# �������� ���� ���� %�%��� ���%��� �������� �� �� ���%����� �� �������� �$%������ �� �& �!! # �!!�+&$��� ����� ��� B%������ EA�� �����F� �������� �������� ���%�� ���������� ������� ��������GF& �%���� ��� ���-������� ����������� �� ��� �����%��# �%�����# �� �%�����%-�� �����1���� �� ��� ���%��� ?3 ������ �� �)��� ��������������� ��������� �� �������� ����& 3���# ��������������������� �� �)��� ������� �������� ���� ����������� �� ��� ����%����� �� ������ �������� ���� �������� �������& /� �������%� �����# ��%����� ���� ��������� ������� ��� ����H -0����D � �� �& �!"!+ �� ������ �������� ������ �$�����%�� �� 8� �!!�+# ����� �.��6�� �����-���� �������� �%��� �� �������� �������� �'�� �� �& � +&/� ������# �������� �� ������ ������ ����� ��� �� ��������

�� ,���� �� ������ ����%���� ��%�� �� ������-���%����������� ��%�%����� ��� �� ���%���� �� @�������� ����� �� �& �!!*# '�� �� �& � +& $���� ���������,� �� ��,��� ��� ��� ������ �� ����%� ��������%��������� ���� ����%���� ������-���%��� ������� ��������&�1� ��������� ���� ��� �� ��� ����� ������ �������

%��� �� ���������� ���� ������ �� ���� �������������� ��������� ������� �� ��������� ���� ������ 6����%���� �� ��������� ��������� ���%��� ��������� ���-���� �� ��%����� ���� �$%������ �� �& �!! +& $��������� �� ����� ���� ������ %��� �� ����� ��� ���������� �������� ������ �(�������� �� 9������1��� # 4��� �� �& � # ���� �� �& � +# �� ��%�� ������>������ ����������� ������� �� �������� �.������� $%������ � �+& A� ��� �)���� ��� ���� �� ���������-������� ��������# ���������# �� ?3 � ���������������� �� ��� ����������� ���� ��������� ����������������� �������� ���� �� ������ ���������& ;���� ������ ����# �� ������%��� ����������� ��� ���������� ������ ��������� ����� ���%����� �� ����������������� ��� ��������� �� ��������� ���� ������� ���)����� ����� �������1 �� �& � �+& $��� ����� �� ��������� � �� ������1�� ��� ��B%������� �� ����%����������� ������� �� ����������� ���%��� ��������� ������� ��%���� ��� ������ �� %�������� ��� �������������������� �� �������� � ���%���-���� ����������������& /� � ������ �� ���%�� ��� ����� ������������� �������� ������� �� %�� ���� ����� ���� �� �)�������� ������� �� B%����� ��� ���� �� ��%����� ����������� �� ���%����� ���� ?3 ������ �� ���� ���������������& /� ������� �� ?3# ������ ��������� �� ���,���� �� ������� �������� �������� �'�� �� �& � #������1 �� �& � �+ ��%� �� �)���� ������ �� �����%�����# ��������� �� 3A ��������� �� ������������%�����& 4�����# �� �������� ��� ����������� �� �����-��� ���� ���� ��������� �� ?3 ��������� �� �)������� ����� �������� �������� �� ����%���� ��������������� �%���� ��%� ���������&

7������� ��� ������

��� ����� ��� ���� �������

����� �� 7.���� 8& ��& (������ ���� �B%���� ���� (���������� �� ����� 8��& �(�����# ����1�����+# ��������� ��������� ���� �� ���������� �� ���������� ��������� ����� ��� ���� ������1 �� �& � �+& 3�� ����� ���� ���������� ��-� ����������� � � >�" �+ ���� �2 ���� ��� ���

�� ����������������� ����� ������� �%������ �� ��)�%���� ���� ���� �����%�� ����%� �� ���� ����� �����= A# 95 8%���)�+ ���� * I ������� �%������ �� �������%�� ����� �� ���0J���0 ������J��+& $���������� ������� ������ ���� ��������� �� � - �� ��-��-�������� ��� �������� �>= �����&

�+!�������� ������� ��� �������

4�� �������� ���� ���������# ��� �� ��� ����������� ����� �� �������%� ����� �������� ��� �%��������

= = �������& ����& ��*# � �

���� ����� %���� �1�� �� ������ ��� �)�� �%������ ��� ����� ���������%�� ��# �%� ��� ����%����# ��������� ���%��%��& $�� �������� ���� ������������� ���� � ��+ ���� ����)������ �B%�������������� ��� ��� �� ��� �� ��� ��� �%� ������� ���-����� �� � �� ���� ��� �� ��� ���� �� ��� ������& $����������� ����%���� ��� �)� �%����� �� �������� ������� ������ ������ �%���� ���%����� �� ����� �� ��� ����%����& 3 ���� �� ������ � �� �" �� �� 2 �� :�6=��.� "& + �%���� �� �������%��� ������ ������� ���������� ���� ����� �� ��� ���� �������������� ��%�����& $�� B%����� �� ������ ��������� �� ?3������ �� ��� ��%���� ���� �� ��������� �� ��� �)����-����& $����� ���%��� ���� ��� �������� �������������# ����� ���� ���%�� ��������� � E5)�����F���� �%� ���� ����� ����� � ��� ��� �� ��� ������� ������� ���� =-�� ���� ��������� �%������ .�6& /��������� ���� ��� ����%���� �%�����& /� ��� ��1� ����-���� ������# ��� B%������� �� ���%��� �������� ������������ ��������� ����%���%� ��� ����� ����� �������1�� �& � �+� ��%�# ���� ��� ���� �� ���������� �� ����������������� �� ��������� ��� ��� �)��������& (������������ ������ ���%���� �� B%�������� ����������� �� ��������������� �������� ������� �)���������&

8�� ������ �� �� ��� ���� 9� �� �� �� ��. 4�� �������� ���� ���� ��%���# ����� ���� ������ ���� %��������� ���������� ����� �� ������ ���� ������ �" �� ���%���� �� �%���� ��������� ��������� �2 ����+& ��������� ����� � ���%�� ���� ������ ������� !� >� � ��� �������� ��� ?3 ������ �� ��� ����1��� �� ��B%��:� � 2# �2# � # =2# � �� �� -��� ��������& 6� ��������� ��� �� ����� ��� �+# �������� ���� ������������ = � �� ��� ����������� ������� � �� * � ���� ����-����& (%� �� ��� ������ �� ������ ���� ��� ���� ��� �+��� ���%� ��%�� �� ����� � ��� ���� ������� ���?3 ������& $�%� ��� ������ �)�������� �� �������= ����� �� ��� �� ���� � " ����� �� ��������&

������ �� 5������ ���� �� ����� �������� �� 9�������. $�� ����������� �� ����� ���� �� �)����� ���������� �� ��������� �� ?3 ���� ������� %���� ����������� ���� ��������& /��������� ���� ��%��-���# ��������� �� ?3 ���� ������ �� ����� ����� ��� �+�� � �� �%���� � ��� ������ �� & # & 2# &2# 2& �� & # &2# 2# 2 ���� ������# ������������& A����� � ���#��������� ���� ����� �� ����� ���� ������ �)�������� �+ �� ����� ���� ����� ��� �+& $���� �� ���%������ ��������� � 5)����� �� /����# ������������&8�� ��������� ���%���� � � < � �� �������� ������������� �� ��� ��������� ����������� ��� = � ������� ! >�� �& �������� ����������� �� ��� �)������ �����������-���%��� ?3 ������ ���� ���� �)�����& $�������������# ��������� � � < � ��� ��+ ��������� ��%������� ��������# �� ���������� ����� ����������� ���� ������ �%���� ���� �� �%���� ��%� ��������������� ������+&A������ ���# ��� � �����������%����������� �� ����� ���� ������ �)����� ��� "+ �� ����� ��������� ��� "+& 3���� �� �%���� �� ����� ��� =+ �� ��-������ ��� ?3 ������ ����� �������� ��� =+ ���� ����������� ��� ��������� ����������� ��� =� ������� ! >�� �&

�� ������) 5��"��� �� ���� 9� �� �� �� ��. ;���� ��������� �)����� ��� ������ �� ������� �� ����� �������� ����# ������������ ������� ����-�����# ���%��� ?3 �� �������� ���� �)�����& /� �����)�������� ��� �%���� �� �� ��� ��%�� ���� �����%��� �� ��� ��&�& ���� � ��+ �� ������1� ��������� �� ��%��-���%��� ?3& ��) �������� ���%����� "+ ��������� �� ������ %������ �������� ������������ ��%���� ����� ���� � �� �� �%���� ��������������� # � # � # � �� 2 ���� ���������& ��������� �������� ������ � � < �& $�� ��%�� ����# ���< �# ��� � ���%�� ���� ����� �� ��� �� ��� ��������� =+ ���� ���������� �������� ��� ?3 ������&���� �������� ���� ��������� �� ��� �������� �������� =+ ��� = �# ������� ! >�� �# �� ��� ��������������������&

2��������� �� �� �� � � ����� "�� ���� ���. A� �)�-���� ��� ������ �� ��������� �� ���%�� ��������# � ��������������� �� ���� ����� �� ������� �������� ����%�-���� �� �%������ ������� �'����� �� @���� �!! # '���� �& � +& ;���� ����� �����# ��%� �������� ���%����� =+ ���� ������# ���������� �� %������� ��������#�������� ���� ���� �%���� ���� �� �%���� ��%���������� �� ���� ������+# �� 3A ��������� �%����� ������ � ���� ��� ����� 3A ���� ��� ����& /����� ����� ���� �� �)����� ��� ����# �%����%� ���-������� ����� ���,��� ��� ���������-���%��� �������� ���-�%����� ����� �� ���������� �����������& $� ������� �������� �� ��������� �����# ������� � �*< � ���������� ���� ������ = �����# ����� 2 � ��� � �& $��������� ��������� ���� � ������ �� ������� ������%������%�%�# � ��� 3A ���� ���� ������%��� ������� ������� � �������� ������� ��� ���%�����& /������������� ��� ���� ��� ��������� �� ����� ���� ����� ��������� ���� ��������� ���*��+ ��� ��� � � ���������� ��������� �������� ��� ������& A� ���� �)����� ����������� ���������� �� �������� ���� ��������� �� ?3 ����� ���%��� ������� �������� �� ����� �����& 4�� ������������ ����# ��1� ��������� ���� ��%���� �� ���������� ������ �%���� ��� �=+ �� �%���� ��������� � ���� ����������� ��� �=+ � �*< �& ����� ���� ���� ����� ���������%� ���� @�� ��&" �+ ���� � �� �� �������������%���� �� ����� �� ���� ���� ���� ��������� �%�������� �����& 5�� �� ����� ��� �������� ���%�� �����%�������� ���� = �������� ���%�� ��� �+ �� ������������� �� �� ������� �� ������� ����������������������� �� # &�2# &2# ��� ���& $�� �������������� �������� ���� ����� %��� �� ���%�� ��� ����-��������1�� �������� �� �������� �� ��1� ������������� �.� �� �& �!!�# (��� �� �& � +& ���� ������������ ��������� ��� � � � ��� ��������� �� ��� �������������������� � �< �+& /� ��� ?3 ����# ����� ����� ������%���� �� ������ ���� � �� �� �%���� ��������������� # &2# 2# �� 2 ���� �� ?3 � �*<� �& /������%������ ���� ���� ����� �� �&"-� @�� �� ������ ���������� �� �������� �� ��� ��� �� ���������� ��������&C������� ���� ��������� ���� ����� ����� �����������%�� ��� �+ ��� � � � ��� ��������� �� ��� �������������������� � �< �+&

�������& ����& ��*# � � = 2

�������� �" !��� �������� ��� ������� ���

0��������� �� 90 ������ �� �������� �� ��������� ���������� �� ������1 �� �& �� �+& $�� ���� E�����������B%���������F �� %��� �� �������� ��� �%������ �� �������� �@�� ������-���%��� ���B%��������� �� ��1� ���&(������+ ����� �-������������ ��+-�-����������# ����+-�-�������� ������& 90J� B%���������� �� ?3 �������� ����%�� �� �������� ���� A���� �� �& ��!!*+ ��������� �������� ���� ������1 �� �& �� �+& 4�� ����-�������� �)���������# ���� ?3 �� ������� ���� ������������� ������ @������ �����# ��& 8�%��# 6#;�3+& $�� �������� ����������� �� ���� ?3 �� �����-����� �� �� 2&�I �� �� !=&=I ����� ���� ��1����������������� �� 90J� ������& ��� �� �� ����� ?3�� ,���� �� ������� ��������� �������� �������# ��������%���� ������� ��� ��-?3 �� ���� ����� ��� �����-?3� ��� �� A�� �!!"+& 5������� ����%����� ���� ���������� �� ���������� �� �������� ��� �� ����������� ���� ������� ���*��+ ���������� ����� ��� � �&$�� ������� ����� �� ������ �� � .�-2"! 90���� ��@�����# ���� �� ���� ����1���� �������� ������-�%��� �� �2 # " # �� �2 �0# ������������# �� .�����K ���%�� �" J� ����# ��� &��2� � & "2� /&(& 3������#(��������# /8# ;�3+ %���� �������� ������ �� ���� ����� � �������& K%���������� �� ���� �� � �)����������� �%��� ������%���� ���� �-�� ��@������� �� ,������������ ������� �'� �� 7�� �!"�+& 0��%������ ���������� ����%����� ��� ��� ���+ ���� ���� �� ��� ��� ����� ��� ����� ���� � ������� ������ ���� ������� ��������� ����� ���������� �� ���� ����� �� ������&

������

3������ �� ������ �3:6C3�+ ���� ��������� �� ���?3 ������# �������� ���B%���������# ������ �� ��������&���������� �������� ������� ���� ����������� ���� ������ ������� �� ��� 3:6C3 ���� ���������� �/� & 2+&A���� ���������# $%,�� ����� ���� %��� �� ������� ����%������ ���������� ������� ������� �� ��������

���%��& (%�����F� ����� %��� �� �)���� ������������������ �� �������� ���%�� ���� ������� �� ����������������& ����� �� ��������� ������ �� �� �� �%�-@����� �� �B%�� ���� ������������ �� ��������� ���������� ������� �������� ���� ����� ��� ��%���L� �!!�+& $�� ������ �� ����������� ����?� �& ��������� ��������� ������� ��3� /�����%��/��&# 0��# :0# ;�3+&

8�����

������ �" ����� ��� �������������� ��

C�������� �������� ?3 ��%�%����� ���� ������������ ����& A����� 2��� �� �������� ��%�����#����� ?3 ������ �� ����� ����� �������� ���� � ���� �� ��� 4A �4��& �3+& ������ �2 �� � ���# ��%��-���%��� ?3 ������ ������� ������� � ����)�������2 �� ��� 4A �� ���� �������� �� �! �� ��� 4A ���� ���& $�� ���������� �� ��� ��%����� �� ������������%���� �� �%������ ������� �� ?3 ���� ������������������ ������ ��� �������� ���� ���� �������� ����� =2��� �� �� ��� �4��& �3+& ?3 ������ �� %���-��� ������� ����� ������� ��� �� ����������%������� �%���� ���� �)��������& A����� ��� ����� * ��� ��������# ��������� �������� ���� ��� �����������&2-���� ������� �� ���B%�������� ������� �������� ������� �� �������� ���� �4��& � +& �������������� ����� ������ ���� �%���� �������� ���������-�� ���B%�������� ������� �������� ��� �� ������������������ ��� %������ ��������# ��� ����� ��� ��������������� �����&

/��!������ �" ��� !��� ��� �+���� ���" ��������

4�������� ��� �������� �� ����� ���� ���� ?3 �����������# �)������ �������� ���� � ������� �� ��������-��� �� ���������� �� B%���������� ������ �������� ��������� �������� ������� �� ��� ������� ��������� ������� �����& 6� ����� �����# 2 ���� �� ?3 ������ ��

4��& �& �� �M�5+ ?3 ��������������3# �� =+ �� �������� ���B%���������������� � # �� ��+ ���� ����� ��1���������� ������ �� ��� �������& $����������������� �� %������ �������� �0# �+�� ����� ����� ������ ���� ������ �%�����(# �+ �� �%����� ��������� �C# �+ �2 ���� ������& 3������,� ������ ������������������ �� ?3 ���� ����� ����� �������� ���� �%���� ���� �/� & 2# %����(%�����F� ���� ��� ������� �%����������������+& (�������� ������� �# �# �+��������� ���������� ����������� �� ��������������� ������� ��������� �/� & 2# $%,������������ ��� �%������ ����������+&

= � �������& ����& ��*# � �

��%���� ����� ���� �� ���%�� ���B%���������# ��� ��������� �� �%�������� �� ������ ������� �������� ���� ��� ���)����� �4��& �3# +& 8�,�����# & 2 ���� �� ��������� �������� ������� �� ����� �����# �%� ����%��� ����������������� �� ���B%�������� �������� ���� ����� ���)����� �4��& �0#(+& 3����������# �)�����-����� ������B%���������� ���� �������� �� ������ ������ ��������������� ������� ��������� ��� ����� �����& 0��-���� �� ��������� ��%�� ��%� �%���� ���������#2 ���� �� ?3 ����%���� =&�-���� ������� �� ���������� �� "&�-���� ������� �� �)����� ������4��& �3# +& 8�,�����# 2 ���� �� ��������� ����%���� "&�-���� ������� �� ����� ����� �� ��&�-���� ��������� �)�����-����� �4��& �0#(+& $�%� �)�����-����� ��������� ����� ����� �� ?3 �� ���������# ����%�� B%����-������ ���� ��������# �� �)����� ������ �����%������������� ������� ��%����� �� ���������� ���������&C�������� ���%��� �������� ������ �� ?3 �� ����

����� �� �)����� ��� �������& (������ ����� ������������ �� ��%�� �� ��������� ���%��� ?3 ������# �)��-���� ���%��� �� �� ������ ���B%�������� ������� ��������&4�� ����� �����# ?3 ������ �� %������� �������#�������� ����� �%����# �� �������� �������������� ��������� ������ &!# ��& # �� �2&������ 4A#������������ �4��& �3+& $���� ?3 ������ ���� ��������������� ��������� ���� ��� ������������� ��%����%�� �� ��� �)����� ��� ������ �4��& �3+& (������ ���

��, �� ����������� �� ?3# ��� ���� ��%�� �� ������������%��� �������� �������� ���� ��� �)����� ����� ��=&�-���� ������ ��� ���� ����� ����� �4��& � +& $�%������� �������# ���%��� ������ �� ?3 ������� ���%���������� ���������& .������# ?3 ������ ���� �� ����)���� ��� ����������� �� ������� �������� ������� ��������� �� �)����� ��� �������& 3��� ��� ��� ����� ��������� �������� ���� ����� ����� ������ ���� ����������%������ ��� ��� �)����� ��� ������ �� ������ �%���� ����)������ ������������ ������� ��� ����%�%�# ?3 � �%����� �����������# �� ������� �������� ��������&

(������� ���������� �� ��� ������� ��������

/� ��� �)����� ��� ���# ��������� ��%��� �� ������������%���� �� �������� �������� �� ?3 ��%�%�����& 6� ��� ����# ��%����� �������� ����%� ?3 ������ ���� &2�� 2&� �� ��� 4A& .������# ��� ����� ���������� ��������� ?3 ���%���� ��������� ��� �������� �� ��%��������� ���� � ���� ��������� �� ���%���� �� � &2����� 4A�� ?3 �4��& =3+& $������� �� �)����� ����� ����2 ���� �� ��������� ���%���� �� ��& �� ��� 4A ?3#������������ ���� ��� �������� �� ����� ������ ����� ����& ���B%�������� ������� �������� ��� ��������������������# ������ �������� ��� ���� ����������������� �� ?3 ������ ���%��� � � ���� ���������&������� ���� ���� ��� ��� ������������ ���%��

4��& �& �� �� �5+ �����������B%�������� ������� �������� �� ��������� �3# 0+ �� �)����� ��� � # (+ ������������� ��� ���� �� �������� ���������� �%���� ���� � +# ��������� � & 2# &2#2 ����������+# �� ?3 � &2# 2#2 ���� ������+& 3������,� ���������������� �������� �� �������� ���� ��� � +������%���� �������� �/� & 2# %����(%�����F� ���� ��� ������� �%����������������+&

�������& ����& ��*# � � = *

���B%�������� �������� ���� %������ ��������&.������# �� ������������� �� ��������� %��� ����%����������� �������� ���� %������ �������� �4��& = +&C�������� ��������� �� � # � # � # �� 2 ���� ���%������ ���B%�������� ������� �������� �� �&�# �&*# =&"# ��2&"�� = ���# ������������ �4��& = +& $�%� �������� ���-�������� �)���� ������� ��� ��%�� �� ��������� ������

�� ��%�� ����# �������� �� ?3 ������# �� ���%������������ ��������&

(�������������� ��������

/����� ��������� �� ���� ����� �� ���%�� �������� ���-�%����� �� �%������ �������# ��� �%����%� ��������������� ���,��� ��� ���������-���%��� �������� ����%���������� �� ���������� �����������& $� ������� ��� ������� ��������� �����# ����� ���� ������ = ����� ������� ��%��� �� � �# �� ���� �)����� ��� �������� ���-�%�����& �� �������� ����%����� ���� %���������������# �������� ����� �%����# �� ������������� ��������� ��������� ��� ��� ������������ �������� ������ ������� �&== �� �&=* �� ��� ��� �4��& 2+& /��������# 3A ���������# �������� ������� ��� �����������%�����# ���%���� �� =-���� ������� �� ������������%����� ���� �� ����� �������� ���%�� �4��& 2+&9���� ��� ���%���-�������� ����%����� ���%�� �%���������� ��������� �%� ��� ��������� �������� ���� ����-�����# �� �)����� ��� ���������� �� ��� ��� ����������&8�� ������ �� ���������� �������� ������ ������������ ������ �� ���B%�������� ������� �������� ��������� ����� ������ ���� ���������& 6� ��� ����#��������� ���%���� �� ������ ���B%�������� �������� ����������� ����� ������ ���� �%���� ����& .������#���� ���%�� �� ��� ����������� ���������� �4��& �3+& /��%-���� ��������� �� ��� �������� �� �������� � &�2# &2�� ��� ���# ��������� ���%��� ���B%�������� ���������������� �� �&=-# 2&"-# �� �&=-����# �������������4��& �3+& 5������� ��� �� ������ ������ �� ��������������& 3�������� �� &�2# &2 �� ��� ��� �����������%���� �� *=-# !�-# �� �"�-���� �������� �� ������������%��� ������ ������ �4��& � +& /������������# �� ��������# �������� ��� ��� ������������ ������� ��%�����%��� ������� �������� �4��& �3# +

���������� ��������

3���������� �������� �������� ��� ����������� �� ��-���%�� �� ��� ����� ���� �������� �� �)�����%� ?3& /���� ������ �� �������� ��������# 2 ���� ������ ?3

4��& =& �� �M�5# �� =+ ?3�������������3+ �� �)�����-����� ���� � %������� ����������+ �� ����� �� ������ ���� �%������������� ������ # � # � # � �� 2 ���� �����������& ����������� ������� ���������-���%��� ?3 ������ �� ���%����� �����������B%�������� �������� � +& �� ��� ��������� ��� ������� �-�+ ��������� ��������������������� �� ?3 ������ �/� & 2# $%,������������ ��� �%������ ����������+&3������,� ������ ���������� �������� ���������� ���� ��� %������ ��������/� & 2# %���� (%�����F� ���� ��� ��������%������ ����������+&

4��& �& �� �� �5# �� =+ ?3 ������ ��� ��� 4A+ �3+ ���������� ���B%�������� �������� ��� = ���+ � + �� ����� ������� �)�����-����� ��� ���� ���� � %������� �������� �0+ ������� �� ������ ���� ������ �%���� ���� �(+# �� �%���� ��%���������� �C+ � � ���� ������ �3+& A����� ���%���# ��� ��� ��������� ��� ������� �-�+ ��������� ���������� ����������� �/� & 2#$%,�� ���������� ��� �%������ ����������+&

= " �������& ����& ��*# � �

���%��� ���� ���B%��������� �� ������ ��������& .��-����# 2 ���� ������ ?3 �� ������� �4��& *3# +&/� ��� �������� �� ��� ��� ��������# ��� ������� ��

2 ���� ������ ?3 ������� �B%������ �� ����� ���������� 2 ���� ������ ?3 ���� �� �������� ���������4��& *3# +& $�� �������� �������� �� 2 ���� ������

?3 �� ��� ��� �������� ����%��� �&=- �� �&2-���� ��������%��� �� ���B%��������� �� ������ ��� ������������� �����%� �������� �������� �4��& *3# +& 3� ���������������� %���# ���� �������� ��� ��� ����������� �������� ���� ���� �� ���� ��%�� ���%���������� ��������&

.��������

/� ���� ��%�� �� ���������� ��� ���������# ����������� 3A 6�# ����%���� � ������� �� ���� ?3 ��������� �������� ���� ������ �� ���������� ���������� �� ����� �����& A���� ����������# ��� ���%����� ��������� �������� �� ��������� �� ����� ����� �� ������&/� ���������# ��� ������� ��������� �� �)����� ��� ������� ���� ������� ���������� ��� ��� �)�������������� ��� ����%� ����������� �� �����%�� �� ����������%����� ��������� ���������� �� ���� ��������� ��?3& .������# ���������-���%��� ?3 ������ �� ��� ������������� ����� �� �)����� ����� ��%�# ?3 ������ ������ ��� ������ �)���� ��� B%�������� ����������� ��������� �������� ������� ������ �������& �������-����� ������� ���������-���%��� ?3 �� ���%����� ��������������� ���� �)����� %���� ��� ������ ��������� �)�������� ���& 6��� ������� ����� �� �������� ����#��������� ���������� �� ��������� �� >2 ���� ������+���%���� �� �������� �������� �� ���� ?3 �� ���B%�-������� ������� ��������& $�� �������� �����������

������� ���������-���%��� ?3 ������ �� ���%����� ���B%�-������� �������� �%������ ��� ���������� ��� ����������������� ������� �������� �� ����� ����%�� ��� ?3 ���-��& ;���,� ������ ���������# ������� ��%����� ����� ��������� �� ��������� ��� ��� ���%�� �� � ������� ���������� ����%�����& $�%� �� �������� ��������� ����-����� ���� ��� ������ �� ���������� �������� �� �)������� ���������� �� ���������� ��� �� ������� �%�������������& $�� ������� �� �������� �� ����� ���� ���-���� ������ �������� ��� ������� �������� �� ���B%�-�������� �� ������ ��������� ���� ��������� �� ?3���������& $��� �%������ ��� ��� ������� ���%���� ����-��� �� ������ ������� ���������# �%�� � ���������# �� ���������� �%���� ������ ���, �%� �� ��� ���������� �������������-���%��� ��������&/� ����� �� �� ���� ���� ����������� ��� �����-

��� ���� ���%��� �� ��� ��%�%����� �� ?3# ����� ���%�� ���%���� ������� ���� ������������ �0������ ��

4��& �& �� �� �5# �� �+ ������� �������� �� �����������B%��������� �3+ �� ������ � + ���� ����� ����� ��������� ������� ��������� ���� ������ �%���� ���� ������ ���+ �� �%������ ���� �� ��������� ���, ���+& 3�� ����� ���� ���%���� ����������� ����� ��������� ��������� ������ # &�2# &2# �� ��� ��� ������������ ��������& A����� ��� ���%�� ��� ��� ������ ��� ���������� �-�+ ��������� ���������� ����������� �/� & 2# $%,������������ ��� �%������ ����������+&

4��& 2& �� �� �5# �� =+ �������� ����%����� ��� ��� ���+ ��������� ����� ���� � %������� �������� �0+ �� �%������ ����� �=�+���� � -� ������ �� ������ ���� �%���� �(+ �� �%���� ������������������ �� ���� ������+ �C+& 3 �������� ������� ��� ���%����������� ����%����� ��������� �� ����� �������� ���� ����������� ���������� � 3A+& �� ��� ������ ��� ��� ��������-�+ ��������� ���������� ����������� �/� & 2# $%,�� ������������� �%������ ����������+&

�������& ����& ��*# � � = !

%���� �!!*+& /� ������� �� �������� ����# �������� �������� �� %������ �������� ��������� �� ����%������� ����� ����%�� ��� ����������� �� ��������� � ������!!2+& ?3 �� �������� �� �� � �������� ������� ������ ��������� �� �������-������� ��������� ������� �������� � ���� �� �& � �+ �� �%��� ���,� �� �&�!!!+& ��������# ����� �� ,���� �� ������� ��������-����� �� ��%����� �� ������ ��������� � ����� �!""#$%������ �� �& �!! # ������� �� �& � +& $���� �������������� ���� ��������� �� �������� �� �� �%� �� ����������� �� ������ ������� ��������� �� ��1����������� �� �& �!!2# 3����� �� �& �!!*# 4����� ��5��������� �!!!+& 8�,� ��� �������-������� ���������#������-������� ��������� ��� ��� ���� ���������1�� ����� �� ����%�� ��� ��������� �� ?3 ������ �3����� �� �&�!!*# ���D �� $%������� �!!!+& A� ��� ���������� ������ ����� ���� ��� ��������� ���%��� ��� ��%�%����� �� ?3�� ��� ���� ������� ����������� ���� ���%��� ���������������& /� � �)����� ��� ������# ��������� ��%����� ��������� ������ �� ������� ����� �� ��������

���� ���%���� �� �������� �������� �� ������� ���������4��& =+& $�� ��%�� �� ��������� ��B%���� ��� ������������ �� �� ��� ���� �� � >2 ���� ������

�=>��� ��������+& /� ����%� �)������� �� ���������������� �� ��� 6� �� :���%�� ����������# ��� �� �&�� �+ ��%�� ��� ������ ������ ������� ! ���= �� ������& ;�����%����� ��� ��%� B%����� ����������� ��������� ��� ���� ��� �%���� �%���� ��������%� �� ��������� �� %�,����&����%� �� ���� �� �� ,���-����� �� ��� ��������� �� ������ ������ �������������������� �%� �)��������� %����1� ������ �� ��������� ���������� ��%�� �� ��� 6� �� ������ ���������& /� ���������� �� �������# '��� �� �& ��!!!+ ����������� ����)����� ��� ��� �������� �/����� �� ������+ ��������������� ���������� �������� �� ��� �����������=#"#��-���������������-�#�#*#��-������� ��������� ���%��,� �� �& ���� �"����+ 3-����������-8-9�� ��"<�-9��+��� �������# �������)� ����%� �� ���������# ���� �B%��%� ���%����& 3� �������� �������������# ������������� ��� ����%��� ������ ������� �������� �� ����������& 9���� ��� ��������� ��� �� ����%���� �� ?3# �� �����������1�� ��� �"<�-9�� �� �� �� �������%���� ������������� ��� �� ��� ?3 ����� ���� ������ �� ������� ���� �'��� �� �& �!!!+& A� ������� ��� �����%�� �� ��������� %��� �� �%� ���, �� ����� ��� �������B%���� ��� ��� �%������-�%���� ����� �������� ��'��� �� �& ��!!!+& $� ���� ���� �%����� �� %�����0-������� �"<�-9�� �� ���%�� �������� �� ������� �����0 ������������ ���� ��� ���%��� ?3 �����& 0������ �����������# �������� ������� �� ���� ���%��� ?3 �� ��������������� ���� ��������# ��� �� ��%�� �� �������� ��� ��0������������ ���� ��� ���%��� ?3 ����� ��� ��� �����+&$��� ������� �%������ ��� ������ ���%��� �� .������,� �� �&�� �+ ��� ������ ������� ���� ���-���� ��� ���@%������ ��������� �� ?3 �� ��� ����%�����&9���� ��� ������) �����# �������# �� ��� ��%��

�� ������ ���������# �� �� �� %��������� ��� �������������� �� �������� �� �%��� �������� ��� ����%�%� �������� �������& /� ������� �� ������ �� ?3 ������#�������� �� �������� ����%����� ���%� ������ " � �� 3A��������� ������� �%���� ��� ��������� �������1 �� �&� �+ �� ���� ����� �� �� ������ ���%�� �� ��������������� �'����� �� @���� �!! # '�� �� �& � +&/� �%� �����# ���� 3A ��������� ������������ ���������������� ����%�����# ������ ��������� ������ ����� ���������� ���� �������� �4��& 2+& $�� ,���� �������� �����%���-�������� ����%����� �%���� ��������� �� ��������� �� �������� ��������� ��������� ���������������� %� �� �)���� ��� �������� ����������& $����������� ������� �� �������� �� ���� ��������� �� ?3������ ����� �������1�� ��� ������� �������� �� ����������& $�� ������ �� ������� ������# ��������� ������������ ���� ��������� �� �������� ���������� ��� ��������)���� �� ���� ���������� �4��& � +& 5������� � &2�� ��� �������� ���� � -���� ������� �� ��� ���������-���%��� ������ �������� ���� ����� ���� ������ �� ���������� �� �������� ���� ��������� ��� ����������������& $�� ����������� �� ���� ?3 �� �������� ����� �%������� �� ������ �)��������� ���� � ��������

4��& *& �� �� �5# �� �+ ������� �������� �� �����������B%��������� �3+ �� ������ � + ���� ����� ����� ������ ������� ���� �� �%���� ��������� ������ # &2# 2& # 2 & ���� ��@������ ��� �?3+& 3�� ����� ���� ���%���� ��������� �� �������������� ��������� ������ �� ��� ��� ���������� ��������#������� � �>+ �� ��+ ��������# ������������& A����� ��� ���%����� ��� ������ ��� ��� ������� �-�+ ��������� ��������������������� �/� & 2# $%,�� ���������� ��� �%������ ����������+&

=� �������& ����& ��*# � �

���������� ���������# �-������������������ ��-0�+# �� 3A ��������� �� ��1� ���������& ����� ���-���������� �-0� �������� �- �� =-���� �������� �� ���B%�-������� �� ������ ��������# ������������# ���� ���-���� �� �������� �������� �������� �������1 �� �&� �+& A� ������� ��� ��� ��, �� �������� ����%��������� ����� ����� ������ ���� ��������� �� �)���� ������%��� ������� �� ���� �������� ������� �� ��� ���������� ��������� ��������� ��������� ������ ���������&$�� ����������� ���������� �� @������� �� ��������

�� ��������� ��� �)�������� �� ���� ������� ���������� ���� ������%��� ���������& /� ������# �������� �������� @������ �� ,���� �� �������������� ���%����:3 ������ �� �������� �����������-������ ���+ ���-����� �N% �� �& �!!=+& 8�,����� �� ���5�)��# ��� ���%�-����%� �������� �� ���� �������� �� @������ ����B%���� �� �������1� ��� ��%�%����� �� ��� ������������ ��(4�&�+ ��:3 ������ ��������,) �� �&�!!"+& :�� �%���������� ��� �������� ������� �� ���������� ?3 �� ���� ������������ �� ��� ������ �� �������� ����������� �� ���������� �������� �� 4�����!!"# �������� �� �� 8��� �!!!+& 4�� �)����# ������������� ���������� �%�� � �. ��6�� ���� �� ���������� �3������ ���������+# ��� ������-���%��� �����-��� �%��� �� �������� �� ������� ������� ��� ��%�����%��� �������� ��%�%����� ��� �� ���%���� �� ?3�'�� �� �& � +& .���# �������� ��������� ��� ��%�%-����� �� �%�������� 3-��������������� ��:3# ���������������� �� ,�� ��1��� �� ��%�� �� ?3-���%����������� ������������ �A��1 �� ����� � �+& /� ��1����������# �� ���� �������� ���������� �� �������� �������� ��������� �� ?3 �� ���%��� ������� ���������4��� �#*+& /� ����� ��%�� ���������# �������� ���������� �� ���%��� ��� ����� �� ?3 ��� �� ��%�%������������� �������� ���� �6F(������ �� �& �!!�+&/������������# ��� �������� ���������� ��������� �-0���� ��� ����%���� ��� ���%��� ��%�%����� �� ?3 ����1� ��������� ���,�� �� 3A ���� �������1 �� �&� �+& 4%�%�� ���, ���� ������� �)���� ��� ������������%���� �� �������� �� ���������-���%��� ?3 ������&6%� ������ ���%��� �� ��� ���, �� ������ �.��,� �� �&

�!!=# .������,� �� �& � �+ �%����� ���� ��� ?3 �����%����� ������-���%��� ������� ��������& 7�� ?3 �������� ��� �)���� ��� ���� ����������� �� ���������-���%���������� �������� ��������� ���� �)����� ����� ������� ����� �� �������& 5)������ �� ���� ��������� ������ ��# �� ����������� ��# ����� %����%��� ���-�����& 6�� ����-���%������ ���������� ������� �)���������� �� ����� ����� �� �������� ����%����� �� ������������� ����� �� �& �!! # $�� �� �& �!!�+& /� ����� ������ �����# ���� ������ �������� �� �)���������%���� �� �������� �������� �������� ����� ��� �������� ����� ����� ��� ��� ����� �� �& �!! +& 3�����-������# �������� ����������� �� �)����� ����%�� �� ��������� �����%� ��%� �������� �� ����%����� �$���� �& �!!�+& /� ��1� ���������# ����� �@�� ���������%�� � �%������ ���������� �� ,���� �� ��������������� �������� ����������� �����%� ��������� ����%�-���� �.� �� �& �!!�+& $��� �� ��� �� �� ����������� �

�)����� ��� ������� �� �������� ��������� �� ������ �%������ .�6 ������ �� �������� �%�������& :%���-�%� ���������� �)��������� ���� ��������� �� ��������� ����� �� �)����� ����� �������� �� ������ ��������%�� �� ���������-���%��� �������� �� �������� ����%�-����& $� ��� �� ��� �� �������� �� �%����� ��� �������)������ �� ��������� ��������� ������� �������� ����%�-���� �� ��1� ���������& .������# ����� ����� ����������%���# �� �������� �)������-���%��� ������ �� ������������������� � �������� �������� �� �)���� ��� ������-����� �� ���������-���%��� ������� �������� ������������� �������& 0�����# ��� ���� �� �������� ����%������� ����������� �� ���%����� ������� ��������� �� ��1� �������� �� ������ �)�������&/� ��1� �������� ������� %����1��� �)����� ����%��#

��������� ��� � ������ ���%��� �� �������� �3������� �& �!!*# 4��� �� �& � # ������1 �� �& � �+& C���-����� �� ��� ����� ���� ������ �� ��� ��%���� ����� ������� ������� �����& .������# ��� ����� �� ��������������� �� �� �%�� ������ �����%��& ������� ������� ��������� �� ��������� �� �� ���������� ��� �%��������-������� ��������� ��%�� �� %��� � E������ ����F���������� � ����� �� ������� �!!!+# �� �������#��������� ������� ����� %��� �� ���� ��� ����������������� �������� ������ ������� ������%� ���������������� ��� ���� �� ���� ��������� �� ����>�����������������& ����� ���� ����# �%�� �������� �� ������������ �� ��� ������ ������� �� ��������� �� ��������� ������� �������1 �� �& � �+& /� ��� ����� �������� ���� �������� ���%���� �� ������ ����# �%��� ��������# ������� ���� ��������� �� ���%��� ?3 ������� ���%�� �� ��� ���� ������ �� ������� �������� �������-����� �� ������ ���������& $�� ������������ �� ���� ���-���� ������ ����%���� �� ���� ������-������� ����������� ������ ���, �� ��� ��������� �� ��%����� ��� ������������� ��������� �������� ���� �� ������������� ���������&

��0��" �������� 1 A� ���, 0����� �����H � ��� ���� �� ���������� �� ������ ������& �%����� �� ��� ;����� ����� (����-���� �� 3����%��%��-3����%��%�� ������� ������� �� ��� (������3������ ������� ���@��� 3����� �� �����%��� �,���������& A����, $���� 5& 6�������# �%� A& ���D �� ������� ?& 6F(�������� ��� ������%� ��������� ��� ����� ���� �� ����� ����������� ������������ �������� ��� ��%������&

8�"������

3����� .$# ?���� $.# �������� 9�# $%������� ?. �� +/������������ �� ��������� �� ��������� �� ������ �������������� ���� ������� ��� ����������& ? 0��� 5��� ��< � �>��

3����� .$# $%������ $0?# ?���� $.# �������� 9# 8�%����� ?.#$%������� ?. ��!!*+ 3� �������� �� ���� �������� ���� ����������� ��� ���������& ������� �*�< !=2>!=!

����� /$ ��!""+ $�� �,����� ��������� �� ���� ������ �� ����� ���%���� ���������& 6������� **< �*">�"�

����� /$# ������� 03 ��!!!+ $�� ���-������������ ������)��� ������ ��������� �� ������ ����������& ���� � "< ��*>�=2

����� /$# L��� L�# (�� :# 6������� $5# �0��%� 5�8���� 97# ������1 53 ��!!*+ K%����������# ������������� ����%������ �� ��%��-���%��� ������ �� @������ ��� ���������� �� 3������ �� ������& ���� � �< �!*>= =

��� .# A�� ?8 ��!!"+ ?�������< ,�� ������ �� ��� �����������& :� ���� ��� �2< 2=�>22�

�������& ����& ��*# � � =��

���� A# .��,� ?# (���� ?# :%�,� ?# %����1 4 ��!!2+ ?��������� �� �������� ���%�� ���� ����%����� �� �����& 3����0��� /�� 5� 5��� �=< �� >�� �

����� $ ��!!2+ 0�������������� �� �������� ������ �� ���� �����&3��% ��� ���� ������� ���� �� ��� =�< �"!>��=

���� 9# $� 5# ��� 5$ �� �+ ?������-��������� ���%����� �������� ��%���������� �� ���5�)�� �� �%��%�� �������� �� ��� ���-�������� ������� ��"�� ����������& ���� ������� ���< "=!>"�

0������ �3# %���� ?5 ��!!*+ ����������� �� ����� �� @��������� �����& 3��% ��� ���� ������� ���� �� ��� ="< �22>�"�

(�������� ?# 9������1�� ? �� + (����������� �� �������-�1���� �� �5+-��������� ������� ���� ��1�< ���������-���%����� ������� ������� ����������� �� ��5+-=#"-��������-�#�#*-��������� ������������& ���� �� < "�2>"��

(����� 0# 8���� A?# ���D �A# 3����� .$# $%������� ?.��!!"+ .��������-�������� ����� ����������� ����� ���������&:�%�� �!�< 2* >2*�

(��� 0# .� 0?# ���� �A �� + ��������� ���� ���� ���������� �������� �� �����& $����� ���� ��� 2< ���>��*

4����� 9A# 5��������� . ��!!!+ .�������� ���� �� ���%����� ����������� �� ���������� �� ��������& /�< 3�%��� 3# $%1%� �# ��� 5 ����+ /��%��� ���� (������� 3����� �������� �� .����-�����& 3������ ��������������� �������# ��& �%�#:# �� �!>��

4��� # �������� 0# ��� �A# ������1 53# $%������� ?.# 9���� 3�� + 3 ��������� �������� ������� ��� ���� ��� ������ ���������� ��1�& ���� :�� 3�� ��� ;�3 !*< �=" �>�=" �

.������,� �# ������,� ;# ������� 9# ���� A# ����� /$ �� �+����%�� ����������� ������� ��� ��������� ��������������� ��6�� �8���������# ���������+ �� ��� ��%�� ����3������ ���������& ///& 4��� ���-���� ��� ���@%���� ����������� ��� ���������� �� �������� �� �%�������� ������������-�������� ���� ���������& ���� ������� ��2< *��>*�*

.� 0?# ���� �A# (��� 0 ��!!�+ 5������ ����������� ���������� �� ��������- �� ��������-������ ����� �� 7�� ���� 8&�%���� �������� ��������& ���� ������� !"< ��*>�=�

.����� 54# $%������ $0? �� �+ 5)��������� �������� �������� %���� ��������� ���, �� ������� ���� �������� ��-�������& 5��� 5��� ��� �< 22�>2�2

.��,� ?# (���� ?# ������� �# ���� A ��!!=+ .��������-���%��� ��������< $�� �������� �� ������ ������������ ��������� �� /����� �� ������ �� 7�� ���� �� �� ��������� �� �-��%������� �� @������ ���& 45 � 8��� �2�< �=�>�2

'�� ?# ������� (.# 3���� �?# 9O ���� �# '%O ������ 4#������� 03# ����� /$ �� + .��������-���%��� ���������%�������� ������ ������� �%� ��� � �������� ������� ������ ����� ���������& ���� �� < ���>�=�

'� 0.# 7�� �4 ��!"�+ ���� �� �������� �� ��� ���������� ��������� ���� �����& ���� ������� *�< ""�>""2

'��� �# ����� /$ ��!!*+ /��%��� ��������� �� .��������&;��������� �� 0����� �����# 0�����# /�������

'����� (# @���� 8 ��!! + ������������ �������< ����������� 8��)� ��5�� ���%��� ������ �������� ����%����� �� ����������� ��� �������� ���� ����& ? 0��� 5��� ��< !"�>!!�

'������ 3# ����� /$ �� �+ (�������� �%������ �� ���������-���%������� ������� ��������� �� ��%��& ������� �!�< ��=�>��==

'��� $# '�%�� $# ?%�� C# 5��������� ?# ���� A ��!!!+ (�����-����� ���%����� �� ���� ������� ������������ �� ��� ��� ��� ������ �� ��� ������������ �� ��� ����������-�������� ���-��& ���� ������� ���< �2�>���

'���� '8# (�)�� �3 ��!!*+ 5������� ��� ������� ������-�������������%�� ������ �������� ���� ������ ��%�� �������� �������& ���� ������� ��2< ��!!>�� 2

������ 8# (��,� # �����%�%� 3 ��!!2+ ��-��%������� P ��������� �� ���������-���%��� ���� ���� ��� ����������-�������� ������� ����& ���� :�� 3�� ��� !�< � ��>� =

�0��%� 5�# ����� /$ ��!!*+ .�������� �� ������������%������� ������ ��� ��%��-���%��� �������� �� @��������� �%� ��� �������� �� 3������ �� ������& ���� � �< =� >=�2

��,� 48.# ������� �# %����� ?# '�@�� ?A# ������, ?��!!!+ /���������� �� ��� ���������� ����� �� ��������������������� �� �%��� ��������-���%��� �)�������� ����������� ������ �,���� ������������ ����� �� ������������������& ���� ������� ��!< ��"!>��!�

���� �A# .� 0-?# (� 9���� ?3# (� ����� � ��!! + (��� ����������� ������ ������� �������� ��������� �� ����� �����G ����������� !=< ����>���=

��� :# 3����� .$# $�� �53# $%������� ?. �� �+ 5�1������������������ �� ��������� �� ���� �������� ��:� ���� ���������� :� �����)� ,��& ? /����� ������� =*< *=!>*2*

6F(������ �?# 0����� 0# 3�1��� �# A������, 0# 8����� .6# ����� (? ��!!�+ 5������� � ����� �������� ��� ��%���������� �� ����� �����& ������� �*=< �!�=>�!�*

���D �A# 3����� .$# $%������� ?. ��!!"+ 0�������� �������������� � ������ �������� �� ���� ��������& ���� :�� 3�� ��� ;�3!2< ��!*�>��!*2

���D �A# $%������� ?. ��!!!+ ���� �������� � ������� ����������� ����������& ���� ������� ���< ��2>���

���H -0����D � .# �����1-������ ??# ������ �# A������1�� 8#��� � ��!"!+ 3������� ��� �� �������� �� ��� ��%��-���%����)�������� �� ��� ��������� ��������� // ���� �� ����� �������& ���� :�� 3�� ��� "�< !"2�>!"22

�������,) /33# $���� �.?# %��� 3# ���%) ?�# ���,��� A4 ��!!"+ 0��������� �������� �� @�������� �������� �������� ������ �� ��B%���� ��� ���%����� �� ���� �������� ���� �� ���5�)��& ���� 0��� � < �� �>����

�������� 0?# �� 8��� 80 ��!!!+ �������� ���-����������� ����������� ������& $����� ���� ��� =< 2�>2"

������� 9# ?%�� C# .%,��@ 5# 8��� '# ���� A ��!!!+ :������ ��� ����� ���� ���%������ �� ����������� �:���%���#9���������+ ����������& $��������� 22< ���*2>���"

������� �# 4���� 55 ��!!"+ ?������ �� �������� � ����������� ��� ������� ���� �)��������& 0%�� 6��� ���� ��� �< = =>=��

������� �# A���� .# (���� # 4���� 55 �� + (�������������� �)�������� �� �������� �� �������� ��%����� �� ������������� �� ���5�)��& ���� 0��� ��< * *>*�!

������1 53# 3����� .$# ����� 5# $%������� ?. �� �+K%�������� ������������ ������� ���%��� @������ ��� �������� ������� �������� �� 7�� ���� �%���� �)��)���� �6������������& ���� �� �����

������1 53# 3����� .$# $%������� ?. �� �+ $�� ����%���� �������-���� �� �)�����-��� ������ ������� �� ���������- ��@������ ���-���%��� ���B%�������� ������� ������ �� 7������& ���� ��=< �*�>�*!

���� L# L���� LA# (����� .' �� + 3 ��1� ���B%�������������� ���� ���%��� �� ������ ��������� �� ���������< 0���-����1���� �� ����-���� �� �%��� ������& ���� :� 3�� ���;�3 !*< �=" *>�="��

$�����%�� �A# 8� A ��!!�+ A�%����� 3������ ��5���� ������%��� ������� �� ��������%� ������-�-����� ���& ����������� !�< " �>" 2

$�� 47# .%�� '$# '� 0. ��!!�+ 3� ������� �� �������� �����-������ �� �������� ���� @������-�������� ���������� ��������� ���� �����& ? ���� 9����� ��� �2< �!*>�

$%������ $0?# �0�� �?# 3����� .$# $%������� ?. ��!!�+ 3��������� �� ��������� ��� ���������� ��� ���%��� ���� ����������� ���� ������� ������ �������� �� ������� ����& ? 0���5��� �!< =��>=�2

$%������ $0?# $%������� ?.# 8���� A? ��!! + 5)��������� �����������-���%��� ���� ����� �� ����-���,��� ������� ����&������� �2 < ��2�>��2�

C�� 85# (��,� ��!!�+ 5������ �� ����������� %�� �� ��%��������� �� ���������� �����)�& 3��% ��� 5������ �*< �=�>�*�

A���� .# C��, 3# 4���� 55 ��!!*+ (����-�)�-���������������< ��� ��)������� ����� �� ��� @������ �����& ����:�� 3�� ��� ;�3 !=< � =*�>� =*"

A��1 �3# ����� /$ �� �+ ����%�� ����������� ���������� ��������� ��������� ������ ��6�� �8���������# ���������+�� ��� ��%�� ���� 3������ ���������& /C& /�����-���%����������� �%�������� @������-���%��� ��%�%����� �� �������������������� ����������& ���� ������� ��2< ��"!>�� �

N% 7# 0��� �48# 8�% (# :������ 8# ������� '9#.���� �# ����� �3 ��!!=+ ���� ������� ����� ���������������� ���%��� �� �������� �� ������ @������&���� 0��� �< � **>� "2

L� ?. ��!!�+ ����������� 3������# ��� ���& �������� .��# ;��������� �����# :�� ?�����# ��� ��

5����� �� �& 9�������O �

=�� �������& ����& ��*# � �