pengaruh peningkatan konsentrasi - PLAGIAT MERUPAKAN ...

PENGARUH PENINGKATAN KONSENTRASI

SODIUM CARBOXYMETHYLCELLULOSE (CMC-Na) SEBAGAI

GELLING AGENT DALAM PASTA GIGI MINYAK KAYU MANIS

(Cinnamomum burmannii Bl.)

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Eliza Telamiana Riyani Purbo

NIM : 108114134

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2014

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i

PENGARUH PENINGKATAN KONSENTRASI

SODIUM CARBOXYMETHYLCELLULOSE (CMC-Na) SEBAGAI

GELLING AGENT DALAM PASTA GIGI MINYAK KAYU MANIS

(Cinnamomum burmannii Bl.)

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Eliza Telamiana Riyani Purbo

NIM : 108114134

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2014


ii


iii


iv


v


vi

HALAMAN PERSEMBAHAN


vii

PRAKATA

Puji syukur kepada Bapa di Surga atas berkat, anugerah dan penyertaan

yang telah diberikan kepada penulis, sehingga penulis dapat menyelesaikan

laporan akhir yang berjudul “Pengaruh Peningkatan Konsentrasi Sodium

Carboxymethylcellulose (CMC-Na) sebagai Gelling Agent dalam Sediaan Pasta

Gigi Minyak Kayu Manis (Cinnamomum burmannii Bl.) dengan baik.

Penulis dapat menyelesaikan laporan akhir ini setelah melalui banyak

kesulitan dan hambatan, tentu saja ini karena doa, dukungan dan bantuan dari

banyak pihak. Oleh karenanya, dengan tulus dan kerendahan hati, penulis ingin

mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada:

1. Tuhan Yesus Kristus, yang selalu menuntun dan menyertai penulis.

2. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma.

3. Dr. T.N. Saifullah Sulaiman, S. Si., M.Si., Apt. dan Agustina Setiawati,

M.Sc., Apt. selaku pembimbing, atas perhatian, arahan, bimbingan,

nasehat, semangat dan dukungan yang diberikan selama penyusunan

proposal, penelitian dan penyusunan naskah.

4. Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Si., Apt. dan Melania Perwitasari, M.Sc., Apt.

selaku dosen penguji, atas kritik, saran serta dukungannya selama proses

penyempurnaan naskah.

5. Maria Dwi Budi Jumpowati, S.Si., atas masukan-masukan yang diberikan

selama penulis melakukan penelitian.

6. Christophori Maria Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt., selaku dosen

pembimbing akademik, atas perhatian dan masukan yang diberikan pada

penulis.

7. Pak Musrifin, Pak Mukminin, dan seluruh dosen serta karyawan Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma atas bantuan yang diberikan selama

penulis melakukan penelitian dan menempuh perkuliahan.

8. Kedua orang tua, yang telah memberikan doa, dukungan, kasih sayang,

semangat dan kepercayaan selama penulis menempuh perkuliahan.

9. Teman-teman serta seluruh pihak yang telah membantu penulis.


viii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................. i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ....................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................... iii

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................... iv

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ..................................... v

HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................... vi

PRAKATA ................................................................................................ vii

DAFTAR ISI ............................................................................................. viii

DAFTAR SINGKATAN .......................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xii

DAFTAR TABEL ..................................................................................... xiii

DAFTAR PERSAMAAN ......................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xv

INTISARI .................................................................................................. xvi

ABSTRACT ................................................................................................ xvii

BAB I. PENGANTAR .............................................................................. 1

A. Latar Belakang .............................................................................. 1

1. Permasalahan .......................................................................... 3

2. Keaslian Penelitian .................................................................. 3

3. Manfaat ................................................................................... 4

B. Tujuan Penelitian .......................................................................... 5

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA....................................................... 6

A. Karies Gigi .................................................................................... 6

B. Streptococcus mutans .................................................................... 7

C. Kayu Manis ................................................................................... 8

D. Pasta Gigi ...................................................................................... 9

E. Komponen Pasta Gigi ................................................................... 10

1. Bahan abrasif ........................................................................... 10

2. Humectant atau pelembab ....................................................... 11


ix

3. Gelling agent ........................................................................... 12

4. Surfactant atau deterjen........................................................... 13

5. Bahan antimikroba .................................................................. 14

6. Bahan penambah rasa .............................................................. 14

7. Bahan pengawet ...................................................................... 15

F. Uji Kualitas Sediaan Pasta Gigi .................................................... 15

1. Uji organoleptis ....................................................................... 15

2. Viskositas ................................................................................ 16

3. Pergeseran viskositas .............................................................. 16

4. Uji daya lekat .......................................................................... 17

5. Uji pH ...................................................................................... 17

6. Uji daya hambat sediaan pasta gigi terhadap

Streptococcus mutans .............................................................. 17

7. Uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis ................................. 18

G. Landasan Teori .............................................................................. 19

H. Hipotesis ........................................................................................ 20

BAB III. METODE PENELITIAN .......................................................... 21

A. Jenis dan Rancangan Penelitian .................................................... 21

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ............................... 21

1. Variabel penelitian .................................................................. 21

2. Definisi operasional ................................................................ 22

C. Bahan Penelitian............................................................................ 24

D. Alat Penelitian ............................................................................... 24

E. Tata Cara Penelitian ...................................................................... 25

1. Identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis ....................... 25

2. Uji Pendahuluan Daya Antibakteri Minyak Kayu Manis

(Cinnamomum burmannii Bl.) ................................................ 26

3. Pembuatan pasta gigi .............................................................. 30

4. Uji sifat fisik pasta .................................................................. 30

5. Uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis

terhadap Streptococcus mutans dengan difusi sumuran.......... 31


x

6. Uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis ................................. 32

F. Analisis Data ................................................................................. 35

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................. 36

A. Identifikasi dan Verifikasi Minyak Kayu Manis ........................... 36

B. Uji Pendahuluan Daya Antibakteri Minyak Kayu Manis

(Cinnamomum burmannii Bl.) ...................................................... 37

C. Pembuatan Pasta Gigi Minyak Kayu Manis ................................. 43

D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Pasta ................................................ 44

1. Uji organoleptis ....................................................................... 45

2. Uji pH ...................................................................................... 46

3. Uji viskositas dan pergeseran viskositas ................................. 47

4. Uji daya lekat .......................................................................... 49

E. Uji Daya Antibakteri Pasta Gigi Minyak Kayu Manis

terhadap Streptococcus mutans dengan Difusi Sumuran .............. 51

F. Uji Iritasi Pasta Gigi Minyak Kayu Manis .................................... 54

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 56

A. Kesimpulan ................................................................................... 56

B. Saran .............................................................................................. 56

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 57

LAMPIRAN .............................................................................................. 62

BIOGRAFI PENULIS .............................................................................. 93


xi

DAFTAR SINGKATAN

ALP : Alkaline Phosphatase

ATP : Adenosine Triphosphate

CMC-Na : Sodium Carboxymethyl Cellulose

CoA : Certificate of Analysis

KBM : Konsentrasi Bunuh Minimum

KHM : Konsentrasi Hambat Minimum

LDH : Lactate Dehydrogenase

MP : Mucus Production

MSC : Microbiological Safety Cabinet

PBS : Phosphate Buffered Saline

SLS : Sodium Lauryl Sulfate

TSA : Tryptone Soya Agar

TSB : Tryptone Soya Broth


xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Sinamaldehid..................................................................... 8

Gambar 2. Sorbitol.............................................................................. 11

Gambar 3. Gliserin.............................................................................. 11

Gambar 4. CMC-Na............................................................................ 12

Gambar 5. Sodium Lauryl Sulfate....................................................... 14

Gambar 6. Xylitol................................................................................ 14

Gambar 7. Metil paraben..................................................................... 15

Gambar 8. Parameter iritasi untuk masing-masing sediaan................ 19

Gambar 9. Minyak kayu manis dari CV. Eteris Nusantara................. 37

Gambar 10. Perbandingan kejernihan media uji kontrol pertumbuhan

dengan konsentrasi 5% dan konsentrasi 6%...................... 40

Gambar 11. Hasil uji penegasan pertama.............................................. 42

Gambar 12. Hasil uji penegasan kedua................................................. 42

Gambar 13. Grafik hasil uji viskositas pasta gigi minyak kayu manis 48

Gambar 14. Grafik pergeseran viskositas pasta gigi minyak kayu

manis................................................................................. 49

Gambar 15. Grafik hasil uji daya lekat pasta gigi minyak kayu manis 50

Gambar 16. Grafik pergeseran daya lekat pasta gigi minyak kayu

manis................................................................................. 51

Gambar 17. Zona hambat pertumbuhan Streptococcus mutans yang

terbentuk oleh pasta gigi minyak kayu manis................... 52


xiii

DAFTAR TABEL

Tabel I. Komponen umum pasta gigi.................................... 10

Tabel II. Formula toothpaste dengan berbagai konsentrasi

CMC-Na................................................................... 30

Tabel III. Hasil identifikasi dan verifikasi minyak kayu

manis........................................................................ 36

Tabel IV. Hasil uji difusi sumuran........................................... 40

Tabel V. Hasil uji dilusi padat................................................ 41

Tabel VI. Hasil uji organoleptis pasta gigi minyak kayu

manis........................................................................ 45

Tabel VII. Diameter zona hambat yang terbentuk oleh pasta

gigi minyak kayu manis terhadap Streptococcus

mutans dengan difusi sumuran................................ 52

Tabel VIII. Hasil uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis......... 55


xiv

DAFTAR PERSAMAAN

Persamaan 1. Rumus perhitungan produksi mukus slug........................... 33


xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Sertifikat analisis minyak kayu manis................... 62

Lampiran 2. Sertifikat hasil uji Streptococcus mutans.............. 63

Lampiran 3. Verifikasi minyak kayu manis............................... 64

Lampiran 4. Hasil uji daya antibakteri minyak kayu manis

terhadap Streptococcus mutans dengan metode difusi

sumuran....................................................... 67

Lampiran 5. Pengukuran diameter zona hambat minyak kayu

manis terhadap Streptococcus mutans................... 68

Lampiran 6. Perhitungan konsentrasi minyak kayu manis pada uji

dilusi padat....................................................... 69

Lampiran 7. Hasil uji daya antibakteri minyak kayu manis

terhadap Streptococcus mutans dengan metode dilusi

padat............................................................. 70

Lampiran 8. Hasil uji penegasan daya antibakteri minyak kayu

manis terhadap Streptococcus mutans.......... 71

Lampiran 9. Pasta gigi minyak kayu manis............................... 72

Lampiran 10. Hasil uji sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis 75

Lampiran 11. Hasil uji statistik sifat fisik pasta gigi minyak kayu

manis............................................................. 76

Lampiran 12. Hasil uji statistik pergeseran viskositas pasta gigi

minyak kayu manis................................................ 80

Lampiran 13. Hasil uji statistik pergeseran daya lekat pasta gigi

minyak kayu manis................................................ 83

Lampiran 14. Hasil uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu

manis terhadap Streptococcus mutans................... 87

Lampiran 15. Hasil perhitungan statistik zona hambat pasta gigi

minyak kayu manis terhadap Streptococcus mutans

dengan metode difusi sumuran................. 88

Lampiran 16. Hasil uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis dengan

slug............................................................ 90

Lampiran 17. Hasil perhitungan produksi mukus siput............... 91


xvi

INTISARI

Minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.) merupakan bahan

alam yang diketahui manfaatnya untuk mencegah plak gigi dengan menghambat

pertumbuhan Streptococcus mutans. Minyak kayu manis dapat diformulasikan

menjadi pasta gigi. Gelling agent merupakan komponen penting dalam pasta gigi,

berfungsi untuk mempertahankan bentuk sediaan semi-solid sehingga

stabilitasnya terjaga dan memperlama kontak zat aktif pada gigi. Sodium

carboxymethylcellulose (CMC-Na) berperan sebagai gelling agent dalam pasta

gigi minyak kayu manis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh

penambahan konsentrasi CMC-Na terhadap sifat dan stabilitas fisik pasta gigi,

serta daya hambat pasta gigi minyak kayu manis terhadap Streptococcus mutans.

Penelitian ini merupakan rancangan eksperimental murni. CMC-Na

dengan variasi konsentrasi tertentu diuji karakteristik fisik dan stabilitasnya,

meliputi viskositas dan daya lekat, serta daya hambatnya terhadap Streptococcus

mutans dan potensi iritasinya terhadap membran mukosa. Analisis data

menggunakan program R 3.0.2 untuk mengetahui signifikansi pengaruh

penambahan CMC-Na terhadap kedua sifat fisik tersebut. Data yang diperoleh

menunjukkan bahwa penambahan konsentrasi CMC-Na mempengaruhi viskositas

dan daya lekat pasta gigi minyak kayu manis. Semakin tinggi konsentrasi CMC-

Na maka viskositas dan daya lekatnya semakin meningkat pula. Pasta gigi minyak

kayu manis mampu menghambat pertumbuhan Streptococcus mutans, namun

pasta gigi minyak kayu manis ini memiliki potensi mengiritasi membran mukosa

yang tergolong iritasi berat.

Kata kunci: CMC-Na, gelling agent, minyak kayu manis (Cinnamomum

burmannii Bl.), Streptococcus mutans, pasta gigi.


xvii

ABSTRACT

Cinnamon essential oil (Cinnamomum burmanni Bl.) is a natural

ingredient which helps prevent tooth decay by inhibiting the growth of

Streptococcus mutans. Cinnamon essential oil can be used in toothpaste

formulation. Gelling agent is an important ingredient in the toothpaste, to

maintain semi-solid form, keep the stability of toothpaste and prolonged contact

time between toothpaste and teeth. Sodium carboxymethylcellulose (Na-CMC)

acts as gelling agent in cinnamon essential oil’s toothpaste. The objectives of this

study was to investigate the effect of increasing concentration of Na-CMC

towards phisical properties and stability of cinnamon essential oil’s toothpaste.

This study also observed the ability of cinnamon essential oil’s toothpaste to

inhibit Streptococcus mutans’s growth.

This research was a pure experimental design. Six formula of toothpastes

with different concentration of Na-CMC were tested to knew the phisical

properties and stability (viscosity and adhesivenes) of cinnamon essential oil’s

toothpastes, the ability to inhibit Streptococcus mutans and their mucosal

irritation potency. The data was analyzed statistically by R program 3.0.2 version

to determined the significance of each phisical properties. The data showed that

the increasing of Na-CMC’s concentration increased viscosity and adhesiveness

of cinnamon essential oil’s toothpastes. Cinnamon essential oil’s toothpastes

could inhibit Streptococcus mutans’s growth, but they had severe irritation

potency.

Keywords: Na-CMC, gelling agent, Cinnamon essential oil (Cinnamomum

burmannii Bl.), Streptococcus mutans, toothpaste.


1

BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang

Gigi berlubang merupakan masalah kesehatan gigi yang disebabkan oleh

adanya plak pada permukaan gigi. Salah satu bakteri yang dapat menimbulkan

plak gigi adalah bakteri Streptococcus mutans. Streptococcus mutans mampu

membentuk asam dari karbohidrat yang dapat diragikan. Bakteri ini dapat tumbuh

subur dalam suasana asam dan mampu menempel pada permukaan gigi karena

kemampuannya membuat polisakarida ekstra sel, yang terdiri dari polimer

glukosa yang menyebabkan matriks plak memiliki konsistensi seperti gelatin,

sehingga bakteri mampu melekat pada gigi dan saling melekat satu sama lain.

Plak yang semakin menebal menyebabkan saliva yang diproduksi di mulut

menjadi kehilangan kemampuan untuk melakukan aktivitas antibakterinya

(Pratiwi, 2005).

Cara yang dapat dilakukan sebagai tindakan preventif terhadap

pembentukan plak gigi adalah dengan melakukan pembersihan secara teratur.

Menyikat gigi menggunakan pasta gigi dapat membantu mencegah terbentuknya

plak gigi. Pada saat ini penggunaan bahan alam dalam sediaan farmasi mulai

meluas dan mulai banyak dikembangkan. Bahan alam juga dapat digunakan dalam

pembuatan sediaan pasta gigi, karena manfaatnya dalam membantu menjaga

kesehatan gigi, salah satunya dengan membantu mencegah pembentukan plak

gigi.


2

Bahan alam yang dapat digunakan untuk mencegah plak gigi adalah kayu

manis (Cinnamomum burmannii Bl.). Karakteristik dari minyak kayu manis yang

hidrofobik membuat minyak kayu manis mampu memisahkan lipid pada

membran sel bakteri, merusak struktur sel dan membuat bakteri menjadi lebih

permeabel. Kerusakan sel bakteri yang luas serta hilangnya molekul-molekul dan

ion-ion penting dari bakteri menyebabkan bakteri menjadi mati (Dwijayanti,

2011; Kwon et al., 2003). Penggunaan minyak kayu manis dalam pasta gigi

merupakan salah satu upaya dalam mendukung pengembangan penggunaan bahan

alam dalam sediaan farmasi.

Komponen penting dalam pasta gigi yakni gelling agent yang berfungsi

untuk mempertahankan bentuk sediaan semi-solid sehingga stabilitasnya dapat

terjaga dan membantu memperlama kontak zat aktif pada gigi dan mampu

memperbaiki stabilitas bahan dalam jangka waktu yang lama. Sodium

Carboxymethyl Cellulose (CMC-Na) memberikan konsistensi yang stabil dalam

sediaan pasta gigi, sehingga dapat memenuhi persyaratan fisik dari pasta gigi yang

dibuat (Garlen, 1996). Adanya perbedaan konsentrasi CMC-Na yang digunakan

sangat dimungkinkan untuk memberi pengaruh yang signifikan terhadap sifat dan

stabilitas fisik sediaan pasta gigi yang dihasilkan.

Oleh karena gelling agent merupakan bahan yang penting dalam sediaan

pasta gigi, maka dilakukan penelitian dengan dibuat pasta gigi menggunakan zat

aktif minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.) dan CMC-Na sebagai

gelling agent pada konsentrasi yang berbeda-beda untuk setiap formula. Pasta gigi

yang mengandung minyak kayu manis yang dibuat juga diukur kemampuannya


3

dalam menghambat bakteri Streptococcus mutans, serta potensinya dalam

mengiritasi membran mukosa.

1. Permasalahan

a. Bagaimana pengaruh penambahan konsentrasi gelling agent CMC-Na

terhadap sifat dan stabilitas fisik dari pasta gigi minyak kayu manis yang

dihasilkan?

b. Apakah sediaan pasta gigi minyak kayu manis mampu menghambat

pertumbuhan Streptococcus mutans?

c. Apakah sediaan pasta gigi minyak kayu manis memiliki potensi dalam

mengiritasi jaringan mukosa mulut?

2. Keaslian penelitian

Sejauh penulusaran pustaka yang dilakukan peneliti, penelitian mengenai

pengaruh CMC-Na sebagai gelling agent dalam sediaan pasta gigi yang

mengandung minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.) belum pernah

dilakukan. Adapun penelitian terkait, adalah sebagai berikut:

a. Penggunaan Na-CMC sebagai Gelling Agent dalam Formula Pasta Gigi

Ekstrak Etanol 70% Daun Jambu Biji (Psidium guajava L) (Nursal et al.,

2010). Pada penelitian ini yang menjadi pembeda adalah zat aktif yang

digunakan yaitu minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.),

formula yang digunakan, serta metode pengujian sediaan pasta gigi.

b. Formulasi Pasta Gigi Minyak Cengkeh (Oleum caryophylli) dan Uji

Aktivitas Antibakteri terhadap Streptococcus mutans (Harmely et al.,

2012). Pada penelitian ini yang menjadi pembeda adalah zat aktif yang


4

digunakan yaitu minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.) dan

formula yang digunakan.

c. Pengaruh Konsentrasi Sorbitol Sebagai Humektan dalam Pasta Gigi

Minyak Atsiri Kayu Manis (Cinnamomum Burmannii Bl.) terhadap

Karakteristik Fisik dan Stabilitas Sediaan (Fitria, 2013). Pada penelitian

ini yang menjadi pembeda yakni faktor yang diteliti adalah CMC-Na

sebagai gelling agent dan dilakukan uji daya hambat yang dimiliki oleh

pasta gigi yang mengandung minyak kayu manis, serta uji iritasi sediaan

pasta gigi yang mengandung minyak kayu manis.

3. Manfaat

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberi informasi dan menambah

pengetahuan mengenai pengaruh penambahan konsentrasi CMC-Na sebagai

gelling agent dalam sediaan pasta gigi yang mengandung minyak kayu manis

(Cinnamomum burmannii Bl.).

b. Manfaat praktis

1) Dapat memberikan gambaran mengenai pengaruh peningkatan

konsentrasi CMC-Na terhadap sifat dan stabilitas fisik pasta gigi

minyak kayu manis.

2) Pasta gigi minyak kayu manis dengan gelling agent CMC-Na dapat

membantu mengurangi dan mencegah terbentuknya plak pada gigi

dengan menghambat bakteri Streptococcus mutans.


5

3) Dapat memberikan gambaran mengenai potensi pasta gigi minyak

kayu manis dalam mengiritasi membran mukosa.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Tujuan umum penelitian adalah membuat sediaan pasta gigi dengan

CMC-Na sebagai gelling agent yang mengandung minyak kayu manis

(Cinnamomum burmannii Bl.).

2. Tujuan khusus

a. Mengetahui pengaruh penambahan konsentrasi gelling agent CMC-Na

terhadap stabilitas fisik dari pasta gigi minyak kayu manis yang

diinginkan.

b. Mengetahui daya hambat sediaan pasta gigi yang mengandung minyak

kayu manis terhadap Streptococcus mutans.

c. Mengetahui potensi pasta gigi minyak kayu manis dalam mengiritasi

membran mukosa.


6

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Karies Gigi

Karies gigi adalah disintegrasi gigi yang dimulai pada permukaan dan

berkembang progresif ke dalam. Karies gigi diawali dengan terjadinya

demineralisasi pada email gigi akibat adanya efek produk asam oleh fermentasi

bakteri. Dekomposisi yang terjadi pada dentin dan semen selanjutnya melibatkan

proses pencernaan matriks oleh bakteri. Plak keras dan halus yang terbentuk pada

permukaan email merupakan pertanda dari timbulnya karies gigi. Plak terdiri dari

deposit gelatinosa glukan dengan berat molekul besar, tempat bakteri penghasil

asam melekat pada email. Timbulnya plak gigi ini kemudian diikuti dengan asam

yang terbentuk dari karbohidrat oleh Streptococcus mutans pada plak (pH kurang

dari 5). Konsentrasi asam yang tinggi menyebabkan demineralisasi email di

sebelahnya dan memulai timbulnya karies gigi (Brooks, 2007).

Karies gigi terjadi sebagai akibat terganggunya keseimbangan antara

email dan sekelilingnya yang disebabkan oleh pembentukan asam mikrobial dari

substrat. Ada beberapa faktor yang mendorong terjadinya karies gigi yaitu

tersedianya karbohidrat di rongga mulut yang cukup untuk difermentasi oleh

bakteri, terbentuknya plak, banyaknya mikroorganisme kariogenik seperti

Streptococcus mutans dan kurangnya kesadaran diri untuk selalu menjaga

kebersihan mulut (Prakash et al., 2012).


7

B. Streptococcus mutans

Streptococcus mutans merupakan bakteri Gram positif yang dapat

tumbuh dalam suasana fakultatif anaerob, karena tumbuh baik dalam suasana

dengan oksigen maupun tanpa oksigen. Dalam keadaan anaerob bakteri ini

memerlukan 5% CO2 dan 95% nitrogen serta memerlukan amonia sebagai sumber

nitrogen agar dapat bertahan hidup dalam lapisan plak yang tebal. Streptococcus

mutans menghasilkan dua enzim, yaitu glikosiltransferase dan fruktosiltransferase,

bersifat spesifik untuk subtrat sukrosa yang digunakan untuk mensintesa glukan

dan fruktan dengan berat molekul tinggi. Glukan ini mengikat reseptor-reseptor

khusus pada permukaan Streptococcus mutans. Reaksi ini banyak terjadi pada saat

Streptococcus mutans dibiakkan pada media yang mengandung sukrosa (Bachtiar,

1997).

Streptococcus mutans sangat asidogenik, mencapai pH terminalnya pada

pH 3,4 dalam periode 18 jam pertumbuhan di medium air kaldu. Streptococcus

mutans memiliki kemampuan untuk bertahan pada lingkungan asam dan mampu

hidup pada pH rendah dalam waktu yang lama. Organisme ini dapat membuat

bahan cadangan polisakarida intraseluler yang mirip dengan glikogen, apabila

terdapat gula dalam jumlah berlebih. Bakteri dapat memecah kembali polisakarida

intraseluler yang telah dibuatnya apabila persediaan gula yang eksogen telah habis

terpakai. Hal ini akan menghasilkan penambahan asam yang bermanfaat untuk

mempertahankan tingkatan pH yang rendah dalam plak lebih lama. Streptococcus

mutans juga mampu membuat polisakarida ekstraseluler dengan konsistensi

seperti perekat sehingga mampu melekat pada permukaan gigi dalam waktu yang


8

lama meskipun terdapat daya pembersih dari lidah dan saliva. Hal ini mendukung

terjadinya plak gigi dan kemudian menjadi karies gigi (Darout et al., 2002).

C. Kayu Manis

Kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.) termasuk dalam famili

Lauraceae. Kulit batang kayu manis mengandung sinamaldehid, benzaldehid,

sinamal asetat, eugenol dan kumarin. Adanya sifat menghambat dan merusak dari

minyak atsiri dalam proses kehidupan dapat digunakan sebagai bakterisidal dan

fungisidal (Departemen Kesehatan RI, 1977; Guenther, 1987).

Minyak atsiri kayu manis mengandung senyawa sinamaldehid yang

diketahui memiliki daya antibakteri terhadap bakteri Streptococcus mutans.

Minyak atsiri ini memiliki nilai KHM sebesar 5 % dan nilai KBM sebesar 20%

(Dwijayanti, 2011).

Gambar 1. Sinamaldehid (Nainggolan, 2008)

Karakteristik dari minyak kayu manis yang hidrofobik membuat minyak

kayu manis mampu memisahkan lipid pada membran sel bakteri, merusak struktur

sel dan membuat bakteri menjadi lebih permeabel. Kerusakan sel bakteri yang

luas serta hilangnya molekul-molekul dan ion-ion penting dari bakteri

menyebabkan bakteri menjadi mati (Kwon et al., 2003).

Oral LD50 minyak kulit batang kayu manis pada tikus adalah sebesar

4,16 g/kg dan 3,4 mL/kg berat badan, sedangkan sinamaldehid memiliki LD50


9

pada tikus sebesar 2,22 g/kg berat badan. Dermal LD50 dari minyak kulit batang

kayu manis pada kelinci sebesar 0,69 mL/kg dan untuk sinamaldehid adalah

sebesar 0,59 mg/kg. Minyak yang tidak diencerkan memiliki potensi mengiritasi

berat, dan mengiritasi ringan saat diaplikasikan pada punggung mencit, namun

saat minyak diencerkan konsentrasinya menjadi 8%, minyak tersebut tidak

mengiritasi kulit manusia (European Medicines Agency, 2011).

Mekanisme sinamaldehid sebagai antibakteri terjadi karena adanya

interaksi antara sinamaldehid dengan membran sel yang menyebabkan gangguan

yang cukup untuk mendispersi gerakan proton dengan keluarnya ion-ion penting

dari bakteri, tanpa menyebabkan sel yang lebih besar (seperti ATP) juga keluar,

sehingga mampu menyebabkan kematian sel bakteri. Sinamaldehid juga mampu

menghambat glikolisis pada sel bakteri (Gill & Holley, 2004).

D. Pasta Gigi

Pasta gigi didefinisikan sebagai bahan semi-solid yang digunakan

bersama sikat gigi berfungsi untuk mengurangi pembentukan plak, memperkuat

gigi terhadap karies, membersihkan dan memoles permukaan gigi, menghilangkan

atau mengurangi bau mulut, memberikan rasa segar pada mulut serta memelihara

kesehatan gusi. Pasta gigi dapat berupa pasta opaque, gel, pasta dengan garis

berwarna, setengah gel atau setengah pasta, serbuk maupun cairan. Karakteristik

yang penting dalam pasta gigi meliputi konsistensi, abrasiveness atau kemampuan

pasta gigi untuk menggosok permukaan gigi, kemampuan membersihkan dan

mengkilapkan gigi, penampilan, stabilitas dan keamanan (Garlen, 1996).


10

Pasta gigi diklasifikasikan sebagai produk cosmeceuticals. Hal ini

dikarenakan produk cosmeceuticals mengandung bahan alam yang dimaksudkan

untuk meningkatkan kesehatan, sehingga pasta gigi yang mengandung bahan alam

dapat diklasifikasikan sebagai produk cosmeceuticals (American Academy of

Dermatology, 2014).

E. Komponen Pasta Gigi

Komposisi umum yang biasa diaplikasikan ke dalam pasta gigi:

Tabel I. Komponen umum pasta gigi (Katz, 2012)

Bahan Berat (% b/b)

Bahan abrasif 10-50

Humectant 40-70

Gelling agent 0,4-2

Surfactant 0,5-2

Bahan antimikroba 0,2-1,5

Bahan penambah rasa 0,8-1,5

Bahan Pengawet 0,05-0,5

Air 0-50

1. Bahan abrasif

Bahan abrasif yang terdapat dalam pasta gigi umumnya berbentuk bubuk

pembersih yang dapat menghilangkan stain dan plak, dimana contoh bahan abrasif

ini adalah kalsium karbonat. Kalsium karbonat biasa digunakan sebagai basis

produk perawatan gigi. Kalsium karbonat merupakan serbuk berwarna putih yang

tidak berbau dan tidak berasa, tidak dapat larut dalam etanol 95% dan air

(Armstrong, 2009; Garlen, 1996).


11

2. Humectant atau pelembab

Humectant adalah bahan penyerap air dari udara dan menjaga

kelembaban, contohnya sorbitol dan gliserin. Bahan ini digunakan untuk menjaga

pasta gigi tetap lembab. Konsentrasi humectant yang digunakan dalam pasta gigi

yakni berkisar antara 10 hingga 30% (Garlen, 1996; Poucher, 2000).

Sorbitol memiliki rasa yang manis dan memiliki efek yang menyejukkan.

Oleh karena itu, sorbitol juga dapat dimanfaatkan sebagai pemanis untuk

membantu meningkatkan kenyamanan konsumen dalam menggunakan pasta gigi

(Shur, 2009).

Gambar 2. Sorbitol (Shur, 2009)

Gliserin adalah cairan yang bening, tidak berwarna, tidak berasa, kental,

bersifat higroskopis, dan memiliki rasa yang manis. Gliserin merupakan pelarut

yang dapat pula berfungsi sebagai humektan, agen antimikroba, gel vehicle dan

agen pemanis. Gliserin dapat pula berperan sebagai agen pendispersi CMC-Na

(Medina & Alvarez-Nunes, 2009).

Gambar 3. Gliserin (Medina & Alvarez-Nunes, 2009)


12

3. Gelling agent

Gelling agent umumnya memiliki bobot molekul yang tinggi dan dapat

diperoleh dari alam maupun sintetik. Gelling agent harus tidak berinteraksi

dengan komponen lain dan penggunaan preservative tidak boleh mengubah

rheologinya. Gelling agent berfungsi untuk mengontrol kekentalan dan memberi

bentuk krim dengan cara mencegah terjadinya pemisahan bahan solid dan liquid

pada suatu pasta gigi. Salah satu contohnya adalah CMC-Na (Mahalingam et al.,

2008; Garlen, 1996).

Sodium carboxymethylcellulose (CMC-Na) adalah garam natrium dari

polikarboksimetil eter selulosa. CMC-Na dapat meningkatkan viskositas sehingga

dapat berfungsi sebagai gel-forming agent (gelling agent) pada konsentrasi 0,4-

2,0% dalam pembuatan gel atau pasta (Katz, 2012).

CMC-Na merupakan serbuk yang berwarna putih, tidak berbau, tidak

berasa dan dapat bersifat higroskopis setelah mengalami pengeringan. CMC-Na

tidak dapat larut dalam aseton, etanol 95%, eter dan toluen, namun dapat dengan

mudah terdispersi dalam gliserin, propilen glikol dan air pada suhu berapapun,

sehingga dapat membentuk larutan yang bening dan stabil pada pH 4-10 (Hooton,

2009).

Gambar 4. CMC-Na (Hooton, 2009)


13

Peningkatan konsentrasi CMC-Na mampu memberikan pengaruh pada

viskositas pasta gigi ekstrak daun jambu biji. CMC-Na bekerja melalui proses

pengembangan dengan cara merangkap atau mengikat air yang ada, sehingga

molekul-molekul air akan saling berdekatan dan terjadi gaya tarik menarik (terjadi

peningkatan daya kohesivitas) (Nursal et al., 2010).

Peningkatan konsentrasi CMC-Na sebagai gelling agent dalam sediaan

emulgel mampu meningkatkan daya lekat emulgel. Sediaan emulgel dengan

peningkatan konsentrasi CMC-Na yang diuji daya lekatnya membutuhkan waktu

tidak lebih dari 60 detik agar object glass terlepas dari alat uji. Kemampuan daya

lekat berbanding terbalik dengan kemampuan daya sebar emulgel, emulgel

dengan kemampuan daya sebar rendah memiliki kemampuan daya lekat yang

tinggi (Ningrum, 2012).

4. Surfactant atau deterjen

Bahan deterjen yang banyak terdapat dalam pasta gigi di pasaran adalah

Sodium Lauryl Sulfat (SLS) yang berfungsi menurunkan tegangan permukaan,

mengemulsi (melarutkan lemak) dan memberikan busa sehingga pembuangan

plak, debris, material alba dan sisa makanan menjadi lebih mudah (Garlen, 1996).

Sodium Lauryl Sulfate (SLS) adalah surfaktan anionik yang berbentuk

serbuk berwarna putih, memiliki efek berbusa, rasa yang pahit, dapat larut dalam

air, memiliki berat jenis 288,38 dan pH 7,0-9,5. SLS dapat berfungsi sebagai

bakteriostatik bagi bakteri Gram positif, namun tidak efektif bagi beberapa bakteri

Gram negatif (Plumb, 2009).


14

Gambar 5. Sodium Lauryl Sulfate (Plumb, 2009)

5. Bahan antimikroba

Bahan ini digunakan untuk membunuh dan menghambat pertumbuhan

bakteri (Garlen, 1996). Ada beberapa herbal yang dapat pula ditambahkan sebagai

antimikroba dalam pasta gigi, contohnya minyak kayu manis, minyak cengkeh,

ekstrak daun jambu biji, ekstrak daun sirih dan stroberi. Herbal tersebut memiliki

senyawa aldehid dan fenolik.

6. Bahan penambah rasa

Pasta gigi umumnya menggunakan bahan penambah rasa dan pemanis

untuk memberikan cita rasa yang beraneka ragam, misalnya rasa mint dan xylitol.

Oleum mentha piperita berwujud cairan tidak berwarna, kuning pucat atau kuning

kehijauan dengan bau khas aromatik, rasa pedas dan hangat, kemudian dingin.

Xylitol umumnya digunakan sebagai pemanis pengganti sukrosa dalam beragam

sediaan farmasi. Penggunaan xylitol pada pasta gigi umumnya juga dimanfaatkan

sebagai agen yang dapat membantu mengurangi plak gigi dan kerapuhan pada

gigi. Xylitol dapat larut dalam gliserin, propilen glikol, air dan etanol (Garlen,

1996; Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1979; Bond, 2009).

Gambar 6. Xylitol (Bond, 2009)


15

7. Bahan pengawet

Bahan pengawet berfungsi untuk mencegah pertumbuhan

mikroorganisme dalam pasta gigi. Umumnya bahan pengawet yang ditambahkan

dalam pasta gigi adalah sodium benzoate, methylparaben dan ethylparaben

(Garlen, 1996). Metil paraben digunakan secara luas sebagai antimikroba dalam

produk kosmetik, makanan dan sediaan farmasi. Metil paraben dapat digunakan

secara tunggal maupun dikombinasikan dengan bahan pengawet lainnya. Aktivitas

antimikroba metil paraben meningkat seiring dengan peningkatan panjang rantai

gugus alkil, namun hal ini menyebabkan kelarutannya dalam air berkurang.

Konsentrasi metil paraben yang digunakan untuk aktivitas antimikroba adalah

0,015-0,2% pada pH 4-8. Metil paraben lebih efektif untuk bakteri Gram positif

dibandingkan dengan bakteri Gram negatif (Haley, 2009).

Gambar 7. Metil paraben (Haley, 2009)

F. Uji Kualitas Sediaan Pasta Gigi

1. Uji organoleptis

Uji organoleptis atau uji indera merupakan cara pengujian dengan

menggunakan indera manusia sebagai alat utama untuk pengukuran daya

penerimaan terhadap produk. Pengujian organoleptis mempunyai peranan penting


http://id.wikipedia.org/wiki/Indera

http://id.wikipedia.org/wiki/Manusia

http://id.wikipedia.org/wiki/Produk

16

dalam penerapan mutu. Uji organoleptis sediaan pasta gigi yang mengandung

bahan alam biasanya meliputi tekstur, bau, warna, rasa dan homogenitas (Nursal

et al., 2010; Garlen, 1996).

2. Viskositas

Viskositas adalah suatu pernyataan pertahanan dari suatu cairan untuk

mengalir, semakin tinggi viskositas akan semakin besar tahanannya. Viskositas

sediaan ditingkatkan oleh bahan baku yang digunakan, misalnya polimer yang

memiliki tingkat viskositas tertentu. Viskositas yang dimiliki oleh sediaan seperti

pasta, suspensi, emulsi, dispersi dan larutan polimer umumnya termasuk tipe non-

Newtonian. Pada tipe non-Newtonian, viskositas tidak berbanding lurus dengan

kecepatan geser. Tipe non-Newtonian meliputi plastis, pseudoplastis, dan dilatan.

Pasta memiliki sifat alir dilatan, karena mengandung zat padat terdispersi dengan

konsentrasi tinggi (Martin et al., 1983).

3. Pergeseran viskositas

Perubahan viskositas sediaan sejak awal pembuatan dari waktu ke waktu

perlu menjadi perhatian utama, karena viskositas merupakan hal yang penting

dalam mempengaruhi stabilitas dan karakteristik sediaan. Faktor yang

bertanggung jawab dalam perubahan viskositas dispersi selama penyimpanan

yakni bahan-bahan yang dapat meningkatkan viskositas atau interaksi bahan

tersebut dengan sistem dispersi. Agregasi partikel yang tidak tergantung pada

kandungan polimer juga merupakan faktor penyebab terjadinya pergeseran

viskositas, meskipun polimer dapat mengurangi kecepatan perubahan ukuran

partikel (Zatz et al., 1996).


http://id.wikipedia.org/wiki/Mutu

17

4. Uji daya lekat

Uji daya lekat bertujuan untuk mengetahui berapa lama sediaan dapat

melekat pada tempat sasaran. Pada uji kualitas pasta gigi, uji daya lekat perlu

dilakukan karena pasta gigi harus mampu melekat pada sikat gigi saat pasta gigi

dikeluarkan dari tube, namun pasta gigi juga tidak boleh terlalu melekat pada sikat

gigi karena pasta gigi tidak dapat menyebar dengan merata saat dilakukan

penggosokan jika pasta gigi terlalu melekat pada sikat gigi. Uji daya lekat

dilakukan dengan meletakkan 0,25 gram di atas dua object glass, kemudian

ditekan dengan beban 1 kg selama 1 menit setelah itu object glass dipasang pada

alat tes. Alat tes ini diberi beban 80 gram dan dicatat waktu pelepasan sediaan dari

object glass (Voigh, 1995).

5. Uji pH

Stabilitas sediaan pasta perlu mempertimbangkan pH optimal, karena

sistem rheologi tergantung pada pH. Pasta gigi harus memiliki pH yang stabil

selama penyimpanan, karena viskositas dari hidrokoloid juga dipengaruhi oleh

pH. Pada umumnya, suatu sediaan semi-solid memiliki pH stabil pada kisaran 4 –

10 (Garlen, 1996).

6. Uji daya hambat sediaan pasta gigi terhadap Streptococcus mutans

Uji daya hambat sediaan perlu dilakukan untuk mengetahui kemampuan

sediaan dalam melepaskan zat aktif atau tidak. Uji ini dilakukan dengan metode

Heatley Cup atau Punched Hole Diffusion atau yang biasa disebut metode

sumuran. Metode ini terdiri dari pembuatan lubang sumuran pada cawan agar


18

yang sebelumnya telah diinokulasikan bakteri uji. Masing-masing sumuran diisi

dengan senyawa atau sediaan yang akan diuji (Agbor et al., 2011).

7. Uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis

Uji iritasi dengan slug merupakan alternatif uji untuk memprediksi iritasi

yang terjadi pada mukosa oleh suatu sediaan baru pada tahap penelitian dan

pengembangan, sebagai ganti uji dengan menggunakan hewan mamalia. Tubuh

slug memiliki permukaan yang berlendir, dimana terdapat silia, sel dengan

mikrofili dan sekresi mukus yang melapisi jaringan penghubung sub-epitel. Slug

yang diletakkan di atas bahan iritan akan memproduksi mukus. Kerusakan

jaringan juga dapat terjadi, yang ditandai dengan adanya protein dan enzim pada

mukus tersebut. Uji ini juga dapat dilakukan untuk pengamatan pemejanan

tunggal dan berulang, serta dapat memprediksi gejala klinis seperti sensasi

terbakar dan menyengat. Uji iritasi mukosa dengan slug ini dapat memprediksi

toleransi lokal dari sediaan solid, semi-solid atau cairan. Prediksi potensi iritasi

untuk masing-masing sediaan dapat dilihat pada Gambar 8. Potensi iritasi

diprediksi berdasarkan jumlah mukus total yang diproduksi (MP) selama 30 menit

waktu kontak dengan sediaan. Produksi mukus dinilai sebagai persentase dari

berat slug (Adriaens, 2006).


19

Gambar 8. Parameter iritasi untuk masing-masing sediaan (Adriaens, 2006)

G. Landasan Teori

Pasta gigi merupakan suatu sediaan semi solid yang berfungsi untuk

membantu memperbaiki penampilan gigi, dengan mengurangi pembentukan plak,

memperkuat gigi terhadap karies, membersihkan permukaan gigi, mengurangi bau

mulut, memberikan rasa segar pada mulut dan memelihara kesehatan gusi. Salah

satu bahan yang berperan penting dalam pembuatan pasta gigi adalah gelling

agent, yang berfungsi untuk meningkatkan viskositas serta menjaga konsistuen

cairan dan padatan guna membentuk karakteristik pasta yang stabil dan baik. Pada

penelitian digunakan CMC-Na karena CMC-Na memiliki pH yang stabil pada

rentang pH 4-10. Peningkatan konsentrasi CMC-Na mampu meningkatkan

viskositas pasta gigi (Nursal et al., 2010). Senyawa sinamaldehid yang terdapat

dalam minyak kayu manis mampu membunuh bakteri akibat adanya interaksi

antara sinamaldehid dengan membran sel Streptococcus mutans yang

menyebabkan keluarnya ion-ion penting, sehingga terjadi kematian sel bakteri

(Gill & Holley, 2004). Uji daya hambat sediaan pasta gigi terhadap Streptococcus


20

mutans perlu dilakukan untuk mengetahui kemampuan sediaan pasta gigi dalam

melepaskan minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.).

H. Hipotesis

1. Penambahan konsentrasi sodium carboxymethylcellulose sebagai gelling

agent mampu meningkatkan viskositas dan daya lekat sediaan pasta gigi

minyak kayu manis, serta tidak mempengaruhi stabilitas pasta gigi selama

penyimpanan yang meliputi viskositas dan daya lekat, serta pH sediaan pasta

gigi minyak kayu manis.

2. Pasta gigi yang mengandung zat aktif minyak kayu manis dapat menghambat

pertumbuhan Streptococcus mutans yang menyebabkan plak gigi.

3. Pasta gigi minyak kayu manis tidak berpotensi dalam mengiritasi membran

mukosa.


21

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan rancangan eksperimental murni.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

1. Variabel penelitian

a. Variabel bebas. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi

CMC-Na sebagai gelling agent, yaitu 0,5%, 0,75%, 1%, 1,25%, 1,5% dan

1,75%.

b. Variabel tergantung. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah

karakteristik fisik dan stabilitas pasta gigi minyak kayu manis yang

meliputi uji organoleptis, viskositas, uji pH, uji daya lekat, uji aktivitas

antimikroba, serta uji iritasi.

c. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam

penelitian ini adalah lama penyimpanan dan sifat dari wadah

penyimpanan.

d. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam

penelitian ini adalah suhu penyimpanan dan kelembaban ruangan.


22

2. Definisi operasional

a. Pasta gigi. Pasta gigi adalah sediaan yang digunakan dengan tujuan untuk

membersihkan permukaan gigi.

b. Gelling agent. Gelling agent merupakan bahan yang digunakan untuk

membentuk kekentalan atau pembentuk sifat alir sediaan pasta. Gelling

agent yang digunakan dalam penelitian ini adalah Sodium Carboxymethyl

Cellulose (CMC-Na).

c. Viskositas optimum. Viskositas optimum pada penelitian ini adalah

viskositas yang sesuai pasta gigi yang telah beredar di pasaran yaitu

sebesar 300-600 d.Pa.s.

d. Stabilitas pasta. Stabilitas pasta ditentukan dari besarnya nilai pergesaran

viskositas antara sebelum dan sesudah penyimpanan selama 1 bulan yaitu

< 15%.

e. Respon. Respon adalah besaran yang diamati perubahan efeknya, besarnya

dapat dikuantitatif. Respon dalam penelitian ini adalah viskositas dan daya

lekat.

f. Faktor. Faktor adalah besaran yang mempengaruhi respon, dalam

penelitian digunakan 1 faktor, yaitu penambahan Sodium Carboxymethyl

Cellulose (CMC-Na).

g. Streptococcus mutans. Streptococcus mutans merupakan biakan murni

bakteri penyebab karies gigi yang diperoleh dari Laboratorium Balai

Kesehatan Yogyakarta.


23

h. Daya antibakteri. Daya antibakteri adalah kekuatan pasta gigi minyak kayu

manis dalam menghambat dan membunuh Streptococcus mutans yang

memiliki perbedaan bermakna dibandingkan dengan kontrol negatif.

i. Kontrol positif dan kontrol negatif. Kontrol positif dalam penelitian ini

adalah pasta gigi merek X yang digunakan sebagai pengontrol metode dan

pembanding. Kontrol negatif dalam penelitian ini yakni basis pasta gigi.

j. Zona hambat. Zona hambat merupakan zona jernih yang tidak tampak

adanya pertumbuhan koloni Streptococcus mutans.

k. Metode difusi dengan sumuran. Metode difusi dengan sumuran adalah

metode yang digunakan untuk mengukur daya hambat minyak atsiri

terhadap Streptococcus mutans dengan cara mengukur zona jernih (zona

hambat) pada sekitar sumuran.

l. Metode dilusi padat. Metode dilusi padat adalah metode pengukuran

aktivitas antibakteri dengan cara mengencerkan minyak atsiri kulit batang

kayu manis pada beberapa konsentrasi, kemudian dicampurkan pada

media padat untuk melihat daya hambat minyak atsiri serta menentukan

KHM dan KBM.

m. KHM (Konsentrasi Hambat Minimum). KHM adalah konsentrasi

minimum minyak atsiri kulit batang kayu manis untuk menghambat

pertumbuhan Streptococcus mutans.

n. KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum). KBM adalah konsentrasi minimum

minyak atsiri kulit batang kayu manis yang dapat membunuh

Streptococcus mutans.


24

o. Mukus. Mukus adalah lendir yang dihasilkan oleh slug (siput tanpa

bercangkang).

C. Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah minyak kayu

manis (Cinamomum burmannii Bl.) yang diperoleh dari Eteris Nusantara, Sodium

Carboxymethyl Cellulose (CMC-Na), sorbitol, gliserin, xylitol, methylparaben,

Oleum mentha piperita, Sodium Lauryl Sulfate (SLS), kalsium karbonat. Seluruh

bahan yang telah disebutkan di atas memiliki kualitas farmasetis. Distilled water

yang digunakan adalah aquadest dari Laboratorium Kimia Organik Universitas

Sanata Dharma, Yogyakarta, Indonesia, larutan standar Mc Farland II, kultur

bakteri Streptococcus mutans diperoleh dari Balai Laboratorium Kesehatan

Yogyakarta, Tryptone Soya Agar (Oxoid®

), Tryptone Soya Broth (Oxoid®

), etanol

absolut 96%, slug, reagen Alkaline Phosphatase (ALP), reagen Lactate

Dehydrogenase (LDH) dan reagen albumin.

D. Alat Penelitian

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas (Pyrex®

),

waterbath, hot plate, viscotester seri VT 04 (Rion-Japan), mortir dan stamper,

autoklaf (model KT-40, ALP Co. Ltd. Midorigouka Kamurashi, Tokyo, Japan),

inkubator (Heraeus), pH indicator strips (Merck®

), sentrifuge (Heraeus), vortex,

oven, jarum ose, neraca analitik, mikropipet, pelubang sumuran diameter 7 mm,


25

object glass, bunsen, oven, Microbiological Safety Cabinet (MSC), jangka sorong,

Spektrofotometer Mini UV-Vis, kuvet dan pinset.

E. Tata Cara Penelitian

1. Identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis

Bahan yang diidentifikasi pada penelitian ini, yaitu: minyak kayu manis

yang merupakan dari tanaman kayu manis (Cinamomum burmannii Bl.) diperoleh

dari CV. Eteris Nusantara dan telah diuji identitasnya, dibuktikan dengan

Certificate of Analysis (CoA).

Identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis meliputi:

a. Pengamatan organoleptis. Pengamatan organoleptis berupa pengamatan

bentuk, warna, dan aroma dari minyak kayu manis yang digunakan

sebagai bahan penelitian.

b. Indeks bias. Indeks bias minyak kayu manis diukur dengan menggunakan

hand refractometer. Penutup prisma dibuka kemudian minyak kayu manis

diteteskan 1 atau 2 tetes sampel pada prisma utama, penutup prisma

ditutup perlahan sampai menyentuh prisma utama. Skala 1, 2, atau 3 diatur

dengan memutar knob hingga tanda titik (.) tergantung dari konsentrasi

sampel yang diuji. Jarak jangkauan skala 1 adalah 1,333–1,404 (skala

sebelah kiri), skala 2 adalah 1,404–1,468 (skala tengah), skala 3 adalah

1,468–1,520 (skala sebelah kanan). Ujung refraktor diarahkan ke arah

cahaya yang terang, dilihat melalui lensa sambil diputar-putar sampai

skala terlihat jelas. Tampak garis batas yang memisahkan sisi yang terang


26

dan gelap pada bagian atas dan bawah. Apabila garis batas berwarna atau

tidak jelas, maka ring diputar untuk menghilangkan warna hingga batas

terlihat jelas.

c. Bobot Jenis. Piknometer 10 mL ditimbang dalam keadaan kosong dan

bersih. Piknometer 10 mL diisi air suling. Suhu diturunkan hingga 23°C

kemudian dinaikkan perlahan hingga 25°C. Permukaan air diatur sampai

puncak kapiler kemudian pipa kapiler ditutup. Dinding luar piknometer

diusap dan ditimbang setelah mencapai suhu kamar. Hal yang sama

dilakukan pada minyak kayu manis. Bobot jenis minyak kayu manis sama

dengan kerapatan minyak kayu manis dibagi kerapatan air pada suhu

25°C.

2. Uji pendahuluan daya antibakteri minyak kayu manis (Cinnamomum

burmannii Bl.)

Uji pendahuluan ini meliputi:

a. Sterilisasi peralatan dan media. Peralatan yang digunakan dalam

penelitian, terutama yang berhubungan dengan bakteri uji seperti: tabung

reaksi dan cawan petri, disterilisasikan dengan menggunakan autoklaf

pada suhu 121°C selama 20 menit dengan tekanan 1 atm, dan khusus

untuk pipet ukur disterilisasi dengan menggunakan oven pada suhu 50°C

selama 20 menit.

b. Penyiapan media uji. Pada penelitian ini media yang digunakan ada 2

macam yaitu Tryptone Soya Agar (TSA) dan Tryptone Soya Broth (TSB).

Pemilihan kedua media tersebut adalah terkait agar Streptococcus mutans

dapat tumbuh, pada media yang sesuai. Pembuatan media TSA yaitu


27

dengan mencampurkan serbuk TSA sebanyak 24 gram dengan aquadest

sebanyak 600 mL. Pembuatan media TSB yaitu dengan mencampurkan

serbuk TSB sebanyak 1,8 gram dengan aquadest sebanyak 60 mL, lalu

kedua jenis media disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121°C dan

tekanan 1 atm selama 15 menit. Penyiapan media stok mikroba uji

dilakukan setelah media TSA disterilkan, media TSA dibiarkan memadat

dalam kondisi miring untuk reisolasi bakteri Streptococcus mutans.

c. Pembuatan suspensi bakteri. Satu hingga tiga ose isolat murni bakteri

Streptococcus mutans yang sudah dibiakkan diambil, diinokulasikan ke

dalam 5 mL TSB dan divortex supaya tercampur merata, kemudian

diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Suspensi bakteri uji dibuat dan

disetarakan dengan larutan standar Mc Farland 0,5 dengan cara

menyetarakan kekeruhan suspensi bakteri dengan standar Mc Farland 0,5,

jika kekeruhannya melebihi kekeruhan Mc Farland 0,5, maka dilakukan

penambahan media TSB steril sampai didapat kekeruhan yang sama.

d. Pengujian aktivitas antibakteri dengan difusi sumuran. Pengujian aktivitas

antibakteri minyak kayu manis terhadap bakteri Streptococcus mutans

dilakukan dengan pembuatan sumuran pada media yang dibuat dengan

menggunakan media double layer. Media TSA sebanyak 10 mL dituang

ke dalam petri sebagai base layer, kemudian dibiarkan memadat terlebih

dahulu. Suspensi bakteri sebanyak 0,2 mL Streptococcus mutans yang

sudah disetarakan dengan larutan standar McFarland 0,5 diinokulasikan ke

dalam 20 mL media TSA pada suhu 45-50°C (sebagai seed layer), lalu


28

dituang ke dalam petri berisi base layer yang sudah memadat, kemudian

secara aseptis dibuat sumuran hingga mencapai batas antara base layer dan

seed layer. Sumuran dibuat sebanyak 6 lubang pada 12 petri yang berisi

media TSA menggunakan pelubang berdiameter 7 mm, kemudian dibuat 6

lubang secara aseptis pada 12 petri yang berisi media TSA dengan

diameter 7 mm. Pada setiap lubang sumuran diisi minyak kayu manis

dengan konsentrasi 1% hingga 10% dan kontrol negatif yaitu parafin cair

masing-masing sebanyak 0,020 mL. Inkubasi selama 24 jam dengan suhu

37°C, diamati diameter zona hambat yang dihasilkan diukur dengan

jangka sorong, kemudian dikurangi diameter sumuran yang digunakan,

yakni 7 mm. Daya antibakteri diamati berdasarkan diameter zona hambat

yang terbentuk dibandingkan dengan kontrol negatif.

e. Pembuatan uji dilusi padat konsentrasi 5−10%. Pembuatan media TSA,

dengan mencampurkan serbuk TSA sebanyak 9 gram dengan aquadest

sebanyak 225 mL. Pembuatan media TSB yaitu dengan mencampurkan

serbuk TSB sebanyak 0,6 gram dengan aquadest sebanyak 20 mL, lalu

kedua jenis media disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121°C dan

tekanan 1 atm selama 15 menit. Pada setiap tabung reaksi yang sudah

diisikan media TSA steril sebanyak 15 mL, kemudian diinokulasikan

sebanyak 0,2 mL suspensi bakteri Streptococcus mutans yang sudah

disetarakan dengan larutan Mc Farland 0,5. Sebanyak 0,2 mL minyak kayu

manis dengan konsentrasi 5-10% dituang ke dalam petri steril. Kekeruhan

media dengan kontrol negatif yang menunjukkan kepadatan pertumbuhan


29

bakteri uji dapat dibandingkan setelah diinkubasi selama 24 jam. Penilaian

dilakukan dengan menggunakan notasi (+) untuk media yang tampak

keruh dan (-) jika tidak ada kekeruhan, yang berarti tidak ada pertumbuhan

bakteri uji dalam media tersebut. Hasil pengamatan dianalisis untuk

mendapatkan konsentrasi atau Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)

minyak kayu manis.

f. Uji penegasan (streak plate) konsentrasi 6−9%. Media TSA dibuat

sebanyak 1,33 gram dengan aquadest sebanyak 33 mL, autoklaf pada suhu

121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit. Masing-masing petri diisi

sebanyak 15 mL TSA dan dibagi menjadi 2 bagian. Hasil dari uji dilusi

padat pada konsentrasi 6-9% diambil dan ditanam ke media yang telah

memadat secara streak plate. Inkubasi selama 24 jam dengan suhu 37° C,

kemudian diamati daya hambat yang dihasilkan. Uji penegasan kedua

dilakukan kembali bila ditemukan adanya pertumbuhan, yakni dengan

mengambil hasil dari uji penegasan pertama dan ditanam ke media baru

secara streak plate. Inkubasi kembali selama 24 jam dengan suhu 37°C,

kemudian ditentukan konsentrasi atau Konsentrasi Bunuh Minimum

(KBM) minyak kayu manis.


30

3. Pembuatan pasta gigi

Formula toothpaste yang digunakan :

Tabel II. Formula toothpaste dengan berbagai konsentrasi CMC-Na

Bahan (g) Formula

1 2 3 4 5 6

Sodium carboxymethylcellulose 0,5 0,75 1 1,25 1,5 1,75

Sorbitol 21 21 21 21 21 21

Xylitol 1 1 1 1 1 1

Methylparaben 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Kalsium karbonat 41 41 41 41 41 41

Sodium Lauryl Sulfate 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8

Oleum mentha piperita 3 3 3 3 3 3

Gliserin 20 20 20 20 20 20

Cinamomum burmannii Bl. 8 8 8 8 8 8

Aquadest 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5

Cara pembuatan pasta gigi :

Sodium carboxymethylcellulose didispersikan dalam gliserin dan

ditambah dengan aquadest (Campuran A). Sodium Lauryl Sulfate ditambah

dengan sedikit gliserin pada cawan porselin (Campuran B). Gliserin yang tersisa

kemudian ditambah minyak kayu manis (Cinnamomum burmannii Bl.), Oleum

mentha piperita, dan methylparaben, kemudian diaduk hingga homogen

(Campuran C). Campuran A dan C dimasukkan ke dalam mortir dan diaduk

dengan kecepatan pengadukan sedang, lalu ditambah xylitol dan sebagian kalsium

karbonat. Campuran B dan sedikit kalsium karbonat ditambahkan ke dalamnya.

Sorbitol dan sisa kalsium karbonat ditambahkan secara bergantian pada adonan

tersebut hingga kalsium karbonat tercampur homogen.

4. Uji sifat fisik pasta

a. Uji organoleptis. Uji organoleptis yang dilakukan meliputi bau, warna, dan

homogenitas terhadap pasta gigi yang telah dibuat.


31

b. Uji pH. Uji pH dilakukan setelah pembuatan pasta gigi dengan

menggunakan indikator pH. Uji ini dilakukan 48 jam setelah pembuatan

untuk mengetahui efek faktor terhadap viskositas, sedangkan untuk

memonitor perubahan viskositas, dilakukan uji pada 1 minggu, 2 minggu,

3 minggu dan 4 minggu.

c. Uji viskositas dan pergeseran viskositas. Pengukuran viskositas

menggunakan alat Viscometer Rion seri VT 04. Pasta gigi dimasukan ke

dalam wadah hingga penuh dan dipasang pada portable viscotester.

Viskositas pasta gigi diketahui dengan mengamati gerakan jarum penunjuk

viskositas. Uji ini dilakukan 48 jam setelah pembuatan untuk mengetahui

efek faktor terhadap viskositas, sedangkan untuk memonitor perubahan

viskositas, dilakukan uji selama 1 bulan penyimpanan.

d. Uji daya lekat dan pergeseran daya lekat. Uji daya lekat dilakukan dengan

cara 0,25 gram pasta gigi diletakkan di atas dua object glass yang telah

ditentukan, kemudian ditekan dengan beban 1 kg selama 1 menit. Object

glass dipasang pada alat uji lalu ditambahkan beban 80 gram pada alat uji,

kemudian dicatat waktu pelepasan pasta dari object glass (Voigh, 1995).

Uji ini dilakukan 48 jam setelah pembuatan untuk mengetahui efek faktor

terhadap daya lekat, sedangkan untuk memonitor perubahan daya lekat,

dilakukan uji selama 1 bulan penyimpanan.

5. Uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis terhadap

Streptococcus mutans dengan difusi sumuran

Pembuatan media TSA yaitu dengan mencampurkan serbuk TSA

sebanyak 32 gram dengan aquadest sebanyak 800 mL. Pembuatan media TSB


32

yaitu dengan mencampurkan serbuk TSB sebanyak 1,5 gram dengan aquadest

sebanyak 50 mL, lalu kedua jenis media disterilkan dengan autoklaf pada suhu

121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit.

Media yang telah jadi dicampur dengan suspensi bakteri secara pour

plate, media tersebut dibiarkan memadat. Lalu dibuat 4 lubang secara aseptis pada

18 petri yang berisi media TSA menggunakan pelubang berdiameter 7 mm. Pada

setiap lubang sumuran diisi dengan pasta gigi (sampel) sesuai formula, kontrol

negatif (basis pasta), kontrol positif (pasta gigi merek X), minyak kayu manis 7%

menggunakan spuit injeksi 1 mL masing-masing sebanyak 0,020 mL.

Inkubasi selama 24 jam dengan suhu 37°C, kemudian diamati diameter

zona jernih yang dihasilkan. Diameter zona hambat yang dihasilkan diukur

dengan jangka sorong, kemudian dikurangi diameter sumuran yang digunakan,

yakni 7 mm. Daya antibakteri diamati berdasarkan diameter zona hambat yang

terbentuk dibandingkan dengan kontrol negatif. Replikasi dilakukan sebanyak 3

kali untuk tiap formula pasta gigi.

6. Uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis

Uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis ini dilakukan selama lima hari

berturut-turut dengan langkah-langkah sebagai berikut:

a. Penimbangan mukus. Slug dipilih dan ditimbang dengan berat antara 2,5-3

gram. Petri kosong ditimbang dan ditambah dengan 500 mg sampel,

kemudian petri dan sampel tersebut ditimbang kembali. Slug diletakkan di

atas sampel dan didiamkan selama 30 menit. Slug kemudian dibersihkan


33

dari mukus. Mukus yang terdapat pada petri ditimbang. Mukus yang

diproduksi (MP) dihitung dengan rumus:

MP = berat mukus (gram)

berat slug (gram)× 100% (1)

MP tersebut diklasifikasikan menjadi:

1) Tidak mengiritasi (non irritating), bila produksi mukus kurang dari

15%

2) Mengiritasi ringan (mild), bila produksi mukus antara 15% hingga

20%

3) Mengiritasi sedang (moderate), bila produksi mukus antara 20%

hingga 25%

4) Mengiritasi berat (severe), bila produksi mukus lebih dari 25%

(Adriaens, 2006).

Apabila mukus yang dihasilkan tergolong mengiritasi sedang hingga berat,

maka perlu dilakukan uji lanjutan dengan menggunakan spektrofotometer

untuk mengukur konsentrasi ALP, LDH dan protein (albumin). Slug yang

telah dibersihkan dari mukusnya dipindahkan ke petri lain yang telah diisi

1 mL PBS (Phosphate Buffered Saline) pH 7,4. Slug didiamkan selama 60

menit. Sampel diambil dari larutan mukus dalam PBS untuk diukur

konsentrasi ALP, LDH dan protein (albumin).

b. Pengukuran ALP. Spektrofotometer diatur pada panjang gelombang (λ)

405 nm. Sebanyak 800 µL reagen ALP I dicampur dengan 200 µL reagen

ALP II dan ditambah dengan 20 µL sampel dalam labu ukur 5 mL.

Aquadest ditambahkan hingga 5 mL. Larutan tersebut kemudian

didiamkan selama 3 menit pada 37°C. Pembacaan absorbansi dilakukan

dengan spektrofotometer UV-Vis dan diulang setiap menit sebanyak 3 kali

(menit ke-4, ke-5 dan ke-6).


34

c. Pengukuran LDH. Spektrofotometer diatur pada panjang gelombang 340

nm. Sebanyak 800 µL reagen LDH I dicampur dengan 200 µL reagen

LDH II dan ditambah dengan 20 µL sampel dalam labu ukur 5 mL.

Aquadest ditambahkan hingga 5 mL. Larutan tersebut kemudian

didiamkan selama 1 menit pada 37°C. Pembacaan absorbansi dilakukan

dengan spektrofotometer UV-Vis dan diulang setiap menit sebanyak 3 kali

(menit ke-2, ke-3 dan ke-4).

d. Pengukuran konsentrasi protein. Pengukuran konsentrasi protein dilakukan

dengan cara sebagai berikut :

1) Absorbansi blanko (aquadest) dibaca dengan cara : sebanyak 800 µL

reagen albumin ditambah dengan 3200 µL larutan fisiologis NaCl 0,9%.

Aquadest ditambahkan sebanyak 8µL dan didiamkan selama 90 detik

pada suhu 37°C, kemudian dibaca absorbansinya pada λ 630 nm.

2) Absorbansi standar albumin dibaca dengan cara : sebanyak 800 µL

reagen albumin ditambah dengan 3200 µL larutan fisiologis NaCl 0,9%.

Standar albumin ditambahkan sebanyak 8µL dan didiamkan selama 90

detik pada suhu 37°C, kemudian dibaca absorbansinya pada λ 630 nm.

3) Absorbansi sampel dibaca dengan cara : sebanyak 800 µL reagen

albumin ditambah dengan 3200 µL larutan fisiologis NaCl 0,9%.

Sampel ditambahkan sebanyak 40 µL dan didiamkan selama 90 detik

pada suhu 37°C, kemudian dibaca absorbansinya pada λ 630 nm.


35

F. Analisis Data

Data yang diperoleh pada penelitian ini adalah data sifat fisik sediaan

pasta gigi minyak kayu manis dan kontrol basis sediaan pasta gigi yang meliputi

viskositas, daya lekat dan pH, serta data daya antibakteri. Signifikansi data

diketahui dengan menganalisis secara statistik pada distribusi data normal dan

tidak normal.

Aplikasi program R-3.0.2 digunakan sebagai alat untuk melakukan uji

statistika pada penelitian ini. Pada distribusi normal, digunakan analisis statistik

parametrik (ANAVA) dan uji T berpasangan dengan tingkat kepercayaan 95%,

maka faktor dikatakan berpengaruh jika nilai p (probability value) kurang dari

0,05 sedangkan pada distribusi data tidak normal digunakan analisis statistik non-

parametrik (Kruskal-Wallis) dengan tingkat kepercayaan 95%, apabila nilai p <

0,05 dapat disimpulkan terdapat perbedaan antar formula, sebaliknya apabila p >

0,05 dapat disimpulkan tidak terdapat perbedaan antar formula.


36

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Identifikasi dan Verifikasi Minyak Kayu Manis

Identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis dilakukan dengan tujuan

untuk menjamin keaslian dan kesesuaian bahan yang diperoleh dari CV. Eteris

Nusantara dengan CoA yang telah dilampirkan (Lampiran 1). Penjaminan

keaslian dan kesesuaian bahan yang digunakan melalui identifikasi dan verifikasi

minyak kayu manis dalam penelitian ini penting dilakukan karena untuk menjaga

kualitas pasta gigi minyak kayu manis yang dihasilkan, mengingat minyak atsiri

yang diperoleh tidak hanya berasal dari satu tanaman kayu manis saja, melainkan

berasal dari beberapa tanaman kayu manis, yang memiliki indeks bias dan bobot

jenis yang berbeda pula. Identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis ini

meliputi pengamatan organoleptis, indeks bias dan bobot jenis. Hasil identifikasi

dan verifikasi minyak kayu manis yang diperoleh adalah sebagai berikut:

Tabel III. Hasil identifikasi dan verifikasi minyak kayu manis

Uji Hasil Identifikasi

dan Verifikasi

Certificate of

Analysis

Badan Standar Nasional

(Badan Standardisasi

Nasional, 2006)

Bentuk Cair Cair Cair

Warna Kuning Kuning Kuning muda - cokelat

muda

Bau Khas kayu manis Khas kayu

manis Khas kayu manis

Indeks Bias

(nD20) 1,576 ± 0,020 1,58 1,559 - 1,595

Bobot Jenis 1,013 ± 0,00055 1,013 1,008 - 1,030


37

Identifikasi dan verifikasi yang telah dilakukan menunjukkan bahwa

minyak kayu manis yang digunakan dalam penelitian ini asli dan memenuhi

persyaratan organoleptis, indeks bias dan bobot jenis yang ditetapkan oleh Badan

Standardisasi Nasional.

Gambar 9. Minyak kayu manis dari CV. Eteris Nusantara

B. Uji Pendahuluan Daya Antibakteri Minyak Kayu Manis (Cinnamomum

burmannii Bl.)

Uji daya antibakteri minyak kayu manis yang digunakan merupakan uji

yang dilakukan untuk memastikan adanya daya antibakteri minyak kayu manis

terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans sebelum diformulasikan dalam pasta

gigi dan untuk menentukan konsentrasi minyak kayu manis yang akan digunakan

dalam pembuatan pasta gigi. Uji daya antibakteri ini dilakukan dengan

menggunakan bakteri Streptococcus mutans sebagai bakteri uji yang diperoleh

dari Balai Kesehatan Yogyakarta yang telah diuji kemurniannya. Bakteri

Streptococcus mutans dipilih karena bakteri tersebut merupakan salah satu bakteri

penyebab plak gigi (Brooks, 2007; Prakash et al., 2012). Uji daya antibakteri

minyak kayu manis dilakukan dengan metode difusi sumuran dan dilusi padat.

Kedua uji ini dilakukan dalam Biological Safety Cabinet untuk meningkatkan

kondisi lingkungan yang aseptis. Difusi sumuran digunakan untuk memastikan

adanya daya antibakteri minyak kayu manis terhadap bakteri Streptococcus


38

mutans. Metode ini dipilih karena sifat bahan uji yang digunakan berupa minyak

yang memiliki tingkat kepolaran yang rendah (log P minyak kayu manis pada

rentang 1,48-2,59 (Porel et al., 2014)), sehingga dengan metode ini minyak dapat

berdifusi ke dalam media pertumbuhan bakteri. Suatu senyawa memiliki daya

antibakteri apabila memiliki zona hambat berupa area jernih di sekeliling sumuran

dan lebih besar dengan perbedaan bermakna dari kontrol negatifnya. Uji dilusi

padat digunakan untuk menentukan rentang Konsentrasi Hambat Minimum

(KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) yang diperoleh dari konsentrasi

minyak kayu manis terkecil dari hasil uji difusi sumuran yang memiliki zona

hambat lebih besar dan memiliki perbedaan bermakna dari kontrol negatif.

Senyawa uji dikatakan memiliki daya antibakteri apabila media uji memiliki

kejernihan yang sama dengan kontrol sterilitas media dan kejernihan yang lebih

besar bila dibandingkan dengan kontrol pertumbuhan bakteri. Pengamatan KHM

dan KBM dilakukan secara visual, kemudian dilakukan uji penegasan dengan

metode streak plate. Uji penegasan dilakukan dengan menanam hasil uji dilusi

padat ke media agar secara streak plate. Konsentrasi minyak kayu manis yang

digunakan dalam formulasi pasta gigi merupakan hasil KBM yang diperoleh dari

uji penegasan.

Konsentrasi minyak kayu manis yang digunakan pada uji difusi sumuran

yaitu 1-10%. Kontrol negatif pada uji difusi sumuran ini adalah parafin cair,

karena parafin cair digunakan sebagai pelarut untuk pembuatan variasi konsentrasi

minyak kayu manis tersebut dan parafin cair tidak memberikan daya antibakteri

yang dapat mempengaruhi daya antibakteri yang dihasilkan oleh minyak kayu


39

manis. Setiap petri berisi enam sumuran, yang terdiri dari satu sumuran untuk

kontrol negatif dan lima sumuran berisi lima konsentrasi minyak kayu manis yang

berbeda (konsentrasi 1-5% dan 6-10%). Replikasi dilakukan sebanyak enam kali

untuk menjamin validitas hasilnya. Zona hambat yang didapat setelah inkubasi

selama 24 jam menunjukkan hasil yang tidak overlapping. Pengamatan zona

hambat yang terbentuk dilakukan setelah inkubasi selama 24 jam karena pada

waktu tersebut diasumsikan bakteri telah mengalami fase eksponensial, dimana

pada fase ini materi sel baru disintesis dengan kecepatan konstan (Brooks, 2007).

Pada konsentrasi 1-4% tidak ditemukan adanya zona hambat pada daerah sekitar

sumuran, namun pada konsentrasi 5-10% terdapat zona hambat yang dihasilkan

oleh minyak kayu manis pada daerah sekitar sumuran (Tabel IV). Pada kontrol

negatif parafin cair tidak ditemukan adanya zona hambat. Hal ini membuktikan

bahwa zona hambat yang dihasilkan oleh minyak kayu manis konsentrasi 5-10%

adalah kemampuan minyak kayu manis itu sendiri, bukan karena pengaruh dari

parafin cair. Data diameter zona hambat dari minyak kayu manis konsentrasi 5-

10% diolah secara statistik untuk mengetahui adanya perbedaan antar kelompok

konsentrasi, sedangkan pada konsentrasi 1-4% tidak dilakukan pengolahan secara

statistik karena tidak memiliki zona hambat dan dianggap tidak berbeda secara

statistik dengan kontrol negatif.

Uji dilusi padat dilakukan dengan menggunakan konsentrasi minyak

kayu manis yang menghasilkan zona hambat pada uji difusi sumuran yang telah

dilakukan sebelumnya, yakni konsentrasi 5-10%, namun pada uji dilusi padat ini

konsentrasi minyak kayu manis yang digunakan mengalami penurunan karena


40

Tabel IV. Hasil uji difusi sumuran

Senyawa Uji Zona Jernih (mm)

Minyak kayu manis 5% 3,51 ± 1,83






Kontrol Negatif (parafin cair) 0 ± 0

ketika dilakukan uji dilusi padat, minyak kayu manis dicampur dengan media

TSA yang masih cair, sehingga konsentrasinya menjadi 0,06-0,13%. Media yang

berisi minyak kayu manis dengan berbagai konsentrasi dan suspensi bakteri

kemudian diinkubasi selama 24 jam dan diamati pertumbuhan bakteri berdasarkan

kekeruhan yang nampak pada media. Pada konsentrasi minyak kayu manis yang

memiliki daya antibakteri, media terlihat jernih. Hasil yang didapat setelah

inkubasi selama 24 jam yaitu masih terdapat pertumbuhan bakteri Streptococcus

mutans pada media dengan minyak kayu manis konsentrasi 0,06% dan pada

media dengan konsentrasi 0,08-0,13% terlihat bahwa media lebih jernih bila

dibanding dengan kontrol pertumbuhan bakteri.

(a) (b) (c)

Gambar 10. Perbandingan kejernihan media uji kontrol pertumbuhan (a) dengan

konsentrasi 5% (b) dengan konsentrasi 6% (c)

Penilaian terhadap kekeruhan media diberikan dalam bentuk notasi (+)

untuk media yang keruh dan notasi (−) untuk media yang tidak menunjukkan


41

adanya kekeruhan. Semakin keruh media, maka semakin banyak bakteri yang

tumbuh pada media tersebut. Berikut dijabarkan dalam tabel hasil pengamatan

secara visual perbandingan kejernihan media uji dengan kontrol pertumbuhan

bakteri (Tabel V).

Tabel V. Hasil uji dilusi padat

Kelompok Notasi

Kontrol media −

Kontrol pelarut −

Kontrol pertumbuhan bakteri + + +

Minyak kayu manis 0,06% +

Minyak kayu manis 0,08% −





Keterangan: Negatif (−) = Jernih; Positif (+) = keruh, semakin banyak tanda positif maka

semakin keruh

Hasil tersebut menunjukkan bahwa KHM dan KBM berada dalam

rentang konsentrasi 0,08-0,13%. Uji penegasan perlu dilakukan untuk mengetahui

konsentrasi KHM dan KBM minyak kayu manis yang digunakan. Uji penegasan

dilakukan sebanyak dua kali dengan menginokulasikan bakteri di media uji dilusi

padat yang jernih secara streak plate pada media TSA yang telah memadat. Media

diinkubasi selama 24 jam, apabila pada goresan terdapat pertumbuhan maka

konsentrasi tersebut merupakan Konsentrasi Hambat Minimum, dan apabila tidak

terdapat pertumbuhan pada goresan maka konsentrasi tersebut merupakan

Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM). Hasil uji penegasan pertama terdapat

pertumbuhan bakteri yang sesuai goresan pada konsentrasi 0,08%, sedangkan

pada konsentrasi 0,09%, 0,10% dan 0,12% tidak ditumbuhi oleh bakteri (Gambar

11).


42

(a) (b)

Gambar 11. Hasil uji penegasan pertama: (a) konsentrasi 0,09% (kiri) dan 0,08%

(kanan); (b) konsentrasi 0,12% (kiri) dan 0,13% (kanan)

Uji penegasan kedua dilakukan dengan menggunakan bakteri yang

diambil dari media uji penegasan pertama untuk memastikan bahwa hanya pada

konsentrasi 0,08% yang terdapat pertumbuhan bakteri. Media diinkubasi selama

24 jam dan didapatkan hasil uji penegasan kedua yang sama dengan uji penegasan

pertama, yaitu hanya pada konsentrasi 0,08% yang ditumbuhi oleh bakteri,

sedangkan pada konsentrasi yang lain tidak terdapat pertumbuhan bakteri

(Gambar 12). Hasil uji penegasan kedua ini membuktikan bahwa minyak kayu

manis dengan konsentrasi 0,08% merupakan Konsentrasi Hambat Minimum

(KHM) dan minyak kayu manis dengan konsentrasi 0,09% merupakan

Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM).

(a) (b)

Gambar 12. Hasil uji penegasan kedua: (a) konsentrasi 0,09% (kiri) dan 0,08%

(kanan); (b) konsentrasi 0,12% (kiri) dan 0,10% (kanan)

Minyak kayu manis digunakan dalam formula pasta gigi sebagai agen

yang berfungsi untuk mencegah plak pada gigi dengan menghambat pertumbuhan

bakteri Streptococcus mutans. Bakteri Streptococcus mutans termasuk dalam


43

bakteri gram positif. Minyak kayu manis memiliki kandungan sinamaldehid yang

diketahui memiliki daya antibakteri terhadap Streptococcus mutans dengan

memisahkan lipid pada membran sel bakteri, merusak struktur sel dan membuat

bakteri menjadi lebih permeabel, sehingga interaksinya dengan membran sel ini

menyebabkan gangguan yang mampu mendispersikan gerakan proton dengan

keluarnya ion-ion penting dari bakteri dan bakteri menjadi mati (Kwon et al.,

2003; Gill & Holley, 2004).

C. Pembuatan Pasta Gigi Minyak Kayu Manis

Pasta gigi merupakan sediaan pasta yang digunakan bersamaan dengan

sikat gigi yang bertujuan untuk membersihkan permukaan gigi. Pada penelitian ini

dibuat pasta gigi dengan minyak kayu manis sebagai zat aktifnya. Pasta gigi

dipilih karena pasta gigi merupakan sediaan yang memiliki waktu kontak yang

lama dan mekanisme pembersihannya dibantu dengan sikat gigi, sehingga mampu

membersihkan gigi lebih efektif. Minyak kayu manis mampu membantu

mencegah terbentuknya plak gigi dengan menghambat pertumbuhan bakteri

Streptococcus mutans. Konsentrasi minyak kayu manis yang digunakan pada

sediaan pasta gigi yang dibuat adalah sebesar 7%.

Pada penelitian ini, dibuat enam formula, dimana setiap formula

memiliki konsentrasi CMC-Na yang berbeda-beda. Perbedaan konsentrasi ini

bertujuan untuk mengetahui pengaruh penambahan konsentrasi CMC-Na terhadap

stabilitas fisik sediaan pasta gigi yang meliputi organoleptis, pH, daya lekat dan

viskositas sediaan, serta pergeseran viskositasnya.


44

Bahan-bahan yang diformulasikan untuk pembuatan pasta gigi ini

merupakan bahan-bahan yang telah diketahui perannya masing-masing dalam

pasta gigi. Pasta gigi yang dibuat menggunakan CMC-Na sebagai gelling agent

karena CMC-Na mampu mempertahankan bentuk sediaan semi-solid sehingga

stabilitasnya dapat terjaga dan membantu memperlama kontak zat aktif pada gigi.

CMC-Na juga mampu membentuk pasta dengan konsistensi yang menyerupai gel

sehingga dapat menimbulkan rasa nyaman saat pasta gigi digunakan. CMC-Na

dapat dengan mudah terdispersi oleh air, sehingga saat proses berkumur setelah

menggosok gigi, sediaan pasta gigi tidak tertinggal pada rongga mulut.

Konsentrasi CMC-Na yang digunakan dalam sediaan pasta gigi minyak kayu

manis ini yaitu antara 0,5-1,75%.

D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Pasta

Uji sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis dilakukan dengan tujuan

untuk mengetahui kualitas pasta gigi minyak kayu manis yang telah dibuat. Uji ini

meliputi uji organoleptis, uji pH, uji viskositas dan pergeseran viskositas, serta uji

daya lekat dan pergeseran daya lekat. Seluruh uji sifat fisik tersebut mulai

dilakukan setelah 48 jam pembuatan (Garg, 2002). Pengujian setelah 48 jam ini

bertujuan untuk memberi waktu bagi sediaan dalam membentuk sistemnya dengan

sempurna setelah proses pembuatan, karena proses pembuatan menimbulkan

energi/kalor dari gaya mekanik saat pengadukan yang dapat mempengaruhi hasil

pengujian dari pasta gigi yang dibuat, sehingga saat pengujian berlangsung,

didapatkan hasil yang tidak terpengaruh oleh kalor yang dihasilkan dari gaya

mekanik saat pengadukan pada pasta gigi minyak kayu manis. Uji stabilitas pasta


45

gigi seharusnya dilakukan selama 1-3 tahun, namun karena keterbatasan waktu

maka pada uji stabilitas pasta gigi minyak kayu manis ini hanya dilakukan 1 bulan

saja.

1. Uji organoleptis

Uji organoleptis sediaan pasta gigi minyak kayu manis ini meliputi

tekstur, bau, warna dan homogenitas. Hasil pengamatan organoleptis pada Tabel

VI menunjukkan bahwa setiap formula pasta gigi yang dibuat memiliki warna,

bau dan homogenitas yang sama. Hal ini menunjukkan bahwa penambahan

konsentrasi CMC-Na pada formula pasta gigi yang dibuat tidak mempengaruhi

karakteristik warna, bau dan homogenitas sediaan pasta gigi. Setiap formula

memiliki tekstur yang berbeda, pada F1 dan F2 dihasilkan pasta gigi yang encer

karena penambahan CMC-Na yang terlalu rendah, yaitu 0,5% dan 0,75%. Pada F3

memiliki tekstur yang kental karena CMC-Na yang ditambahkan sebesar 1%.

Pada F4, F5 dan F6 pasta gigi yang terbentuk lebih kental daripada F1-F3. Hal ini

menunjukkan bahwa penambahan konsentrasi CMC-Na mempengaruhi tekstur

pasta gigi yang dihasilkan.

Tabel VI. Hasil uji organoleptis pasta gigi minyak kayu manis

Formula Pemeriksaan

Tekstur Bau Warna Homogenitas

F1 Encer Kayu manis Putih kekuningan Homogen

F2 Encer Kayu manis Putih kekuningan Homogen

F3 Kental Kayu manis Putih kekuningan Homogen

F4 Sangat kental Kayu manis Putih kekuningan Homogen

F5 Keras Kayu manis Putih kekuningan Homogen

F6 Keras Kayu manis Putih kekuningan Homogen

Keterangan:

F1 : Konsentrasi CMC-Na 0,5%


F3 : Konsentrasi CMC-Na 1%





46

Uji organoleptis dilakukan selama 4 minggu. Hasil pemeriksaan

organoleptis menunjukkan bahwa pada F1 hingga F6 tidak terjadi perubahan bau

dan warna, hanya pada F1 dan F2 saat minggu ke-2, sudah mengalami pemisahan,

sedangkan pada F3 pemisahan terjadi saat minggu ke-3. Pada F4, F5 dan F6 tidak

mengalami pemisahan hingga minggu ke-4. Hal ini menunjukkan bahwa

penambahan konsentrasi CMC-Na mempengaruhi stabilitas fisik selama masa

penyimpanan 1 bulan. Pemisahan ini disebabkan karena konsentrasi CMC-Na

yang rendah mengakibatkan cairan dalam struktur polimer CMC-Na tidak terikat

kuat sehingga cairan di dalam sediaan terpisah dan membentuk lapisan (Nursal et

al., 2010).

2. Uji pH

Pasta gigi yang ideal sebaiknya memiliki rentang yang memenuhi kriteria

yang telah ditetapkan, karena pH yang berada di bawah persyaratan dapat

menyebabkan iritasi pada mulut, dan dapat memberi suasana yang tepat bagi

bakteri Streptococcus mutans untuk berkembang. Pasta gigi yang dibuat pada F1,

F2, F3, F4, F5 dan F6 memiliki pH sebesar 8 dan pH tersebut memenuhi

persyaratan pH pasta gigi yang baik yang ditetapkan, yaitu pH 4,5-10,5 (Badan

Standardisasi Nasional, 1995). Hal ini menunjukkan bahwa penambahan

konsentrasi CMC-Na tidak memberikan pengaruh terhadap pH pasta gigi yang

dihasilkan.

Pada stabilitas pH selama penyipanan didapatkan hasil bahwa pH sediaan

pasta gigi minyak kayu manis yang dibuat tidak mengalami perubahan pH. pH

suatu sediaan yang tidak stabil selama penyimpanan menjadi parameter adanya


47

mikroba yang mengkontaminasi sediaan sehingga menimbulkan proses

pembusukan. Mikroba dapat berkembang dalam sediaan apabila sediaan tersebut

memiliki kadar air yang tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa penambahan

konsentrasi CMC-Na tidak memberikan pengaruh pada stabilitas pH sediaan,

karena CMC-Na mampu mengikat air yang ada pada pasta gigi, namun CMC-Na

tidak mampu mengikat air yang ada di lingkungannya.

3. Uji viskositas dan pergeseran viskositas

Uji viskositas merupakan uji yang dilakukan untuk melihat profil

kekentalan dari pasta gigi. Viskositas merupakan faktor yang penting dari suatu

sediaan semi-solid, karena viskositas mempengaruhi kemampuan sediaan dalam

proses pengisian ke dalam kemasan dan pengeluaran dari kemasan. Viskositas

juga mempengaruhi kemampuan pasta gigi dalam melekat pada sikat gigi dan saat

diaplikasikan pada gigi. Semakin tinggi viskositas maka semakin kental sediaan

yang dihasilkan, namun semakin rendah viskositas maka semakin encer sediaan

yang dihasilkan. Data hasil pengukuran viskositas pasta gigi minyak kayu manis

(Gambar 13) menunjukkan bahwa penambahan CMC-Na sebanyak 0,25 gram

mampu meningkatkan viskositas pasta gigi minyak kayu manis yang dihasilkan

hingga mencapai jumlah tertinggi yang ditambahkan, yaitu 1,75 gram. Hasil yang

diperoleh dari uji statistik terhadap viskositas menggunakan ANAVA memiliki p-

value < 0,05 yang menunjukkan seluruh formula pasta gigi minyak kayu manis

memiliki perbedaan yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa viskositas pasta

gigi minyak kayu manis dipengaruhi oleh penambahan jumlah gelling agent.

CMC-Na mampu mengikat air yang ada, menyebabkan molekul air akan saling


48

berdekatan dan memperkuat matriks yang terbentuk, sehingga pasta gigi

mengalami kenaikan viskositas (Nursal et al., 2010; Sumardikan, 2007).

Gambar 13. Grafik hasil uji viskositas pasta gigi minyak kayu manis

Pengujian pergeseran viskositas penting dilakukan untuk mengetahui

stabilitas dari viskositas pasta gigi minyak kayu manis yang dibuat selama

penyimpanan. Hasil pengujian pergeseran viskositas menunjukkan bahwa seluruh

formula mengalami perubahan viskositas dari 48 jam hingga minggu ke-4

(Gambar 14), namun perubahan viskositas yang signifikan terjadi pada minggu

ke-3 untuk formula 1−4, sedangkan formula 5 dan 6 mengalami perubahan

viskositas yang signifikan pada minggu ke-2. Adanya pergeseran viskositas yang

terjadi membuktikan bahwa pasta gigi minyak kayu manis yang dibuat tidak stabil

selama penyimpanan. Hal ini disebabkan karena selama penyimpanan cairan yang

ada pada pasta gigi minyak kayu manis menguap. Penguapan cairan pada pasta

gigi ini disebabkan karena pasta gigi selalu dikeluarkan dari tube dan dimasukkan

ke dalam tube saat proses pengujian stabilitas viskositas pasta gigi.

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0 1 2 3 4 5 6

Vis

ko

sita

s (d

Pa

s)

Formula


49

Gambar 14. Grafik pergeseran viskositas pasta gigi minyak kayu manis

4. Uji daya lekat

Uji daya lekat pasta gigi minyak kayu manis dilakukan untuk mengetahui

kemampuan melekat pasta gigi saat diaplikasikan pada sikat gigi dan pasta gigi

tersebut mulai diaplikasikan pada gigi. Hasil pengujian yang didapat

menunjukkan bahwa daya lekat pasta gigi minyak kayu manis mengalami

peningkatan dari formula 1 hingga formula 6 (Gambar 15). Hal ini didukung

dengan hasil yang didapat dari uji statistik yang menunjukkan bahwa p-value yang

bernilai kurang dari 0,05 (p-value < 0,05), yang berarti data memiliki perbedaan

yang bermakna secara statistik. Hasil tersebut menyimpulkan bahwa semakin

banyak jumlah CMC-Na yang ditambahkan, maka daya lekatnya semakin

meningkat. Peningkatan daya lekat ini terjadi karena meskipun sediaan pasta gigi

minyak kayu manis ini mengandung cairan, namun adanya peningkatan

konsentrasi CMC-Na menyebabkan peningkatan viskositas pasta gigi yang

dihasilkan dan pasta gigi yang memiliki konsistensi agak keras memiliki

200

400

600

800

1000

1200

Vis

ko

sita

s (d

Pa

s)

Lama Penyimpanan

Formula 1

Formula 2

Formula 3

Formula 4

Formula 5

Formula 6

48 Jam Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4


50

kemampuan melekat lebih lama, dibandingkan dengan pasta gigi yang

konsistensinya encer.

Gambar 15. Grafik hasil uji daya lekat pasta gigi minyak kayu manis

Pengujian pergeseran daya lekat dilakukan dengan tujuan untuk

mengetahui kemampuan daya lekat pasta gigi minyak kayu manis setelah proses

penyimpanan. Hasil pengujian ini menunjukkan bahwa seluruh formula

mengalami peningkatan daya lekat, hanya saja tidak semua formula mengalami

peningkatan yang signifikan (Gambar 16). Oleh karena itu, dilakukan uji statistik

untuk mengetahui pada minggu ke berapa dan formula berapa yang mengalami

peningkatan daya lekat yang signifikan. Formula 1 dan 2 mengalami peningkatan

daya lekat yang signifikan pada minggu ke-2, formula 3 mengalami peningkatan

daya lekat yang signifikan pada minggu ke-3, sedangkan formula 4-6 tidak

mengalami peningkatan yang signifikan secara statistik. Oleh karena itu, dapat

dikatakan bahwa formula 1-3 daya lekatnya tidak stabil, sedangkan formula 4-6

stabil. Adanya peningkatan daya lekat antar formula ini disebabkan oleh

ketidakstabilan pasta gigi yang dibuat selama penyimpanan. Hal ini berkaitan

dengan viskositas pasta gigi yang juga meningkat selama penyimpanan akibat

0

4

8

12

16

20

24

0 1 2 3 4 5 6

Da

ya

Lek

at

(det

ik)

Formula


51

banyaknya cairan dalam pasta gigi yang menguap, dimana semakin tinggi

viskositas, maka daya lekatnya juga semakin lama (Ningrum, 2012). Hasil yang

diperoleh membuktikan bahwa CMC-Na belum mampu menjaga stabilitas daya

lekat pasta gigi minyak kayu manis pada formula 1-3, sedangkan CMC-Na dapat

dikatakan masih mampu menjaga stabilitas daya lekatnya untuk formula 4-6.

Gambar 16. Grafik pergeseran daya lekat pasta gigi minyak kayu manis

E. Uji Daya Antibakteri Pasta Gigi Minyak Kayu Manis terhadap

Streptococcus mutans dengan Difusi Sumuran

Uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis bertujuan untuk

mengetahui kemampuan pasta gigi dalam menghambat pertumbuhan bakteri

Streptococcus mutans. Uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis ini

dilakukan dengan metode difusi sumuran. Metode difusi sumuran dipilih karena

sifat pasta gigi yang memiliki viskositas yang tinggi sehingga lebih cocok

menggunakan metode difusi sumuran.

Kontrol yang digunakan pada uji ini yaitu kontrol sterilitas media,

kontrol pertumbuhan bakteri, kontrol basis, kontrol positif dan kontrol minyak

kayu manis 7%. Kontrol basis digunakan untuk melihat ada/tidaknya daya

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

Day

a L

ekat

(d

etik

)

Lama Penyimpanan

Formula 1

Formula 2

Formula 3

Formula 4

Formula 5

Formula 6

48 Jam Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4


52

antibakteri basis pasta gigi terhadap bakteri Streptococcus mutans. Kontrol positif

digunakan untuk membandingkan daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis

dengan pasta gigi yang sudah beredar di pasaran. Kontrol positif yang digunakan

yaitu pasta gigi merek X. Kontrol minyak kayu manis 7% digunakan sebagai

pembanding, dimana minyak kayu manis 7% ini tidak diformulasikan menjadi

suatu sediaan sehingga dapat melihat pengaruh pelepasan minyak kayu manis dari

sediaan pasta gigi yang dibuat. Diameter zona hambat terhadap bakteri

Streptococcus mutans yang dihasilkan pada penelitian ini disajikan pada tabel VII.

Tabel VII. Diameter zona hambat yang terbentuk oleh pasta gigi minyak kayu manis

terhadap Streptococcus mutans dengan difusi sumuran

Formula

Zona Jernih (mm)

Pasta Gigi Minyak

Kayu Manis Basis

Kontrol Positif (Pasta

Gigi Merek X)

Minyak Kayu

Manis

1 12,47 ± 0,17 10,23 ± 0,09

21,01 ± 1,21 9,42 ± 0,62

2 13,45 ± 0,11 10,45 ± 0,45

3 14,22 ± 0,09 10,43 ± 0,24

4 16,35 ± 0,25 10,27 ± 0,22

5 17,58 ± 0,14 10,37 ± 0,08

6 17,92 ± 0,13 10,29 ± 0,29

Gambar 17. Zona hambat pertumbuhan Streptococcus mutans yang terbentuk oleh pasta gigi

minyak kayu manis (ditunjukkan oleh panah hitam)

Data diameter zona hambat yang diperoleh menunjukkan bahwa tidak

terdapat perbedaan diameter zona hambat yang terbentuk pada seluruh basis

K basis K minyak

Sampel (F1)

K Pasta Gigi Merek X


53

formula 1-6, sedangkan pada pasta gigi minyak kayu manis formula 1-6 terjadi

peningkatan diameter zona hambat yang terbentuk. Hal ini menunjukkan bahwa

CMC-Na mempengaruhi kemampuan pasta gigi dalam melepaskan minyak kayu

manis. Peningkatan konsentrasi CMC-Na terhadap meningkatnya zona hambat

yang terbentuk dari pasta gigi minyak kayu manis ini disebabkan oleh CMC-Na

yang mampu berperan sebagai emulsifying agent dengan mudah seiring dengan

konsentrasi CMC-Na yang semakin tinggi dalam pasta gigi, selain itu, sifat CMC-

Na dan SLS yang hidrofil, sehingga mampu membentuk sistem minyak dalam air

(M/A). Sediaan M/A lebih cepat berdifusi ke media agar yang juga bersifat

hidrofil, bila dibanding dengan sediaan air dalam minyak (A/M). Sifat minyak

atsiri yang non polar dan air yang polar menyebabkan afinitas minyak dari air

kecil, sehingga partisi minyak keluar dari basis lebih cepat daripada sediaan A/M

(Rahmawati, 2010).

Data diameter zona hambat yang diperoleh kemudian dianalisis

menggunakan uji ANAVA karena berdasarkan uji Shapiro-Wilk distribusi data

dinyatakan normal. Data dapat disimpulkan memiliki perbedaan yang bermakna

secara statistik apabila data tersebut memiliki p value yang lebih kecil dari 0,05 (p

< 0,05). Sediaan pasta gigi minyak kayu manis memiliki zona hambat yang lebih

besar dan memiliki perbedaan yang bermakna secara statistik dari kontrol basis.

Hal ini menunjukkan bahwa minyak kayu manis memberikan efek yang signifikan

dalam membentuk zona hambat sediaan pasta gigi minyak kayu manis yang

dibuat. Pasta gigi minyak kayu manis memiliki zona hambat yang lebih besar dan

memiliki perbedaan yang bermakna secara statistik dari kontrol minyak kayu


54

manis 7%. Hal ini menunjukkan bahwa minyak kayu manis lebih baik

diformulasikan menjadi pasta gigi untuk memudahkan pengaplikasian dan daya

hambat yang dihasilkan dari pasta gigi lebih besar dibandingkan kontrol minyak

kayu manis 7%, karena daya hambat yang dihasilkan dari pasta gigi minyak kayu

manis merupakan daya hambat dari basis dan minyak kayu manis, meskipun

pelepasan minyak dari parafin cair lebih baik dibanding dengan pelepasan minyak

kayu manis dari pasta gigi. Pelepasan minyak kayu manis dari parafin cair ini

dapat terjadi karena komponen minyak kayu manis memiliki koefisien partisi (log

P) pada rentang 1,48-2,59 yang berarti minyak kayu manis tersebut memiliki

fraksi yang dapat larut pada senyawa hidrofil (Porel et al., 2014), sehingga

minyak kayu manis tetap dapat berdifusi meskipun minyak kayu manis bersifat

lipofil. Kontrol positif pasta gigi merek X memiliki zona hambat yang lebih besar

dan memiliki perbedaan yang bermakna secara statistik dari sediaan pasta gigi

minyak kayu manis yang dibuat, yang artinya sediaan pasta gigi minyak kayu

manis yang dibuat tidak bisa dipasarkan.

F. Uji Iritasi Pasta Gigi Minyak Kayu Manis

Uji iritasi penting dilakukan karena untuk mengetahui potensi pasta gigi

minyak kayu manis dalam mengiritasi membran mukosa, mengingat pasta gigi

digunakan setiap hari, meskipun waktu kontak dengan gigi dan membran mukosa

mulut tidak terlalu lama. Hasil uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis yang

didapat (Tabel VIII) kemudian dibandingkan dengan parameter uji iritasi untuk

sediaan semi-solid (Gambar 8). Hasil menunjukkan bahwa pasta gigi minyak kayu

manis yang dibuat memiliki potensi mengiritasi berat membran mukosa. Hal ini


55

disebabkan karena kandungan sinamaldehid yang ada pada minyak kayu manis

memiliki kemampuan untuk mengiritasi membran mukosa (National Association

for Holistic Aromatherapy, 2014). Penyebab lainnya adalah meskipun minyak

kayu manis tersebut telah diformulasikan menjadi pasta gigi, namun konsentrasi

minyak kayu manis yang terkandung pada setiap formula cukup besar, yakni

sebesar 7%, padahal konsentrasi minyak kayu manis pada dilusi padat didapati

bahwa Konsentrasi Bunuh Minimum minyak kayu manis adalah sebesar 0,09%

sehingga potensi minyak kayu manis dalam mengiritasi slug juga besar. Pada

penelitian ini, seharusnya dilakukan uji iritasi pada pasta gigi yang telah beredar

dipasaran, untuk dapat membandingkan potensi iritasi yang dimiliki oleh pasta

gigi yang beredar dipasaran dengan pasta gigi minyak kayu manis yang dibuat,

untuk menghindari didapatkannya hasil positif palsu pada uji iritasi pasta gigi

minyak kayu manis.

Tabel VIII. Hasil uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis

Sampel Produksi Mukus (%)

Pasta gigi minyak kayu manis 30,17 ± 0,49

Kontrol positif (SLS 2%) 20,51 ± 3,41

Kontrol negatif (air) -5,89 ± 2,68

Uji iritasi pasta gigi dengan slug ini seharusnya dilakukan selama 5 hari

berturut-turut dan dilakukan uji lanjutan menggunakan spektrofotometer untuk

mengukur konsentrasi ALP, LDH dan protein, guna mengetahui adanya kerusakan

jaringan yang ditandai dengan kandungan protein dan enzim yang terdapat pada

mukus yang diproduksi, namun pada penelitian ini tidak dilakukan uji lanjutan

menggunakan spektrofotometer karena slug yang digunakan sebagai hewan uji

telah mati pada hari ke-2, sehingga tidak dapat dilakukan uji lanjutan.


56

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

1. Penambahan konsentrasi gelling agent CMC-Na dapat menaikkan

viskositas dan daya lekat pasta gigi minyak kayu manis yang dihasilkan,

namun tidak mempengaruhi pH.

2. Pasta gigi minyak kayu manis yang dihasilkan mampu menghambat

pertumbuhan Streptococcus mutans.

3. Pasta gigi minyak kayu manis yang dihasilkan memiliki potensi dalam

mengiritasi membran mukosa mulut yang tergolong iritasi berat.

B. Saran

1. Perlu dilakukan modifikasi formula untuk memperbaiki stabilitas fisik

pasta gigi minyak kayu manis dan menurunkan potensi dalam mengiritasi

membran mukosa mulut.

2. Perlu dilakukan uji sifat fisik pasta gigi yang belum dapat dilakukan oleh

penulis, seperti extrudability dan uji sag pasta gigi sehingga dapat

dihasilkan pasta gigi yang memiliki sifat fisik pasta gigi yang baik.

3. Perlu dilakukan uji iritasi untuk pasta gigi yang telah beredar dipasaran

sehingga dapat dibandingkan potensi iritasi pasta gigi minyak kayu manis

yang dibuat dengan pasta gigi yang telah beredar dipasaran.


57

DAFTAR PUSTAKA

Adriaens, E., 2006, The Slug Mucosal Irritation Assay: An Alternative Assay for

Local Tolerance Testing, National Centre for The Replacement,

Refinement and Reduction of Animals in Research, 9 (8), pp.1-9.

Agbor, V.O., Ma'ori, L. & Opajobi, S.O., 2011, Bacterial Resistance to

Cephalosporins in Clinical Isolates in Jos University Teaching Hospital

(JUTH), New York Science Journal, 4 (9), pp.46-55.

American Academy of Dermatology, 2014, Cosmeceuticals, http://www.aad.org/

media-resources/stats-and-facts/cosmetic-treatments/cosmeceuticals,

diakses tanggal 27 Mei 2014.

Armstrong, N.A., 2009, Calcium Carbonate, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey & M.E.

Quinn, (Eds.), Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th

ed.,:

Pharmaceutical Press, London, pp.86-89.

Bachtiar, E.W., 1997, Prospek Vaksinasi dalam Pencegahan Karies dengan

Antigen Hasil Rekayasa Protein Dinding Sel Streptococcus mutans, Jurnal

Kegokteran Gigi Universitas Indonesia, 4, hal.641-669.

Badan Standardisasi Nasional, 1995, Pasta Gigi, Standar Nasional Indonesia,

Badan Standardisasi Nasional, Jakarta.

Badan Standardisasi Nasional, 2006, Minyak Kulit Kayu Manis, Standar Nasional

Indonesia, Badan Standardisasi Nasional, Jakarta.

Bond, M., 2009, Xylitol, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey & M.E. Quinn, (Eds.),

Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th

ed., Pharmaceutical Press,

London, pp.786-789.

Brooks, G.F., 2007, Jawetz, Melnick and Adelberg's Medical Microbiology, 23rd

ed., diterjemahkan oleh Hartanto, H., Rachman, C., Dimanti, A., Diani, A.,

EGC, Jakarta, hal.54-61, 200.

Darout, I.A., Albandar, J.M., Skaug, N. & Ali, R.W., 2002, Salivary Microbiota

Levels in Relation to Periodontal Status, Experience of Caries and Miswak

Use in Sudanese Adults, Journal of Clinical Periodontology, 29, pp.411-

420.


58

Departemen Kesehatan RI, 1977, Materia Medika Indonesia, jilid I, Departemen

Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal.40-41, 43-45.

Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1979, Farmakope Indonesia,

Edisi III, Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta,

hal.458.

Dwijayanti, K.R., 2011, Daya Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Batang Kayu

Manis (Cinnamomum burmannii Bl.) terhadap Streptococcus mutans

Penyebab Karies Gigi, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

European Medicines Agency, 2011, Assessment Report on Cinnamomum verum

J. S. Presl, Cortex and Corticis Aetheroleum, Assessment Report,

European Medicines Agency European Medicines Agency, London.

Fitria, S., 2013, Pengaruh Konsentrasi Sorbitol Sebagai Humektan dalam Pasta

Gigi Minyak Atsiri Kayu Manis (Cinnamomum burmanii Bl.) terhadap

Karakteristik Fisik dan Stabilitas Sediaan, Skripsi, Sekolah Tinggi Ilmu

Farmasi "Yayasan Pharmasi", Semarang.

Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid

Formulations, pharmtech.com, diakses tanggal 25 April 2014.

Garlen, D., 1996, Toothpastes, in H.A. Lieberman, (Ed.), Pharmaceutical Dosage

Forms: Disperse Systems Vol 2, Marcel Dekker Inc., New York, pp.423-

443.

Gill, A.O. & Holley, R.A., 2004, Mechanism of Bactericidal Action of

Cinnamaldehyde against Listeria monocytogenes and of Eugenol against

L. monocytogenes and Lactobacillus sakei, Applied and Environmental

Microbiology, 20 (10), pp.5750-5755.

Guenther, E., 1987, Minyak Atsiri, jilid IV A, diterjemahkan oleh S. Ketaren,

Universitas Indonesia Press, Jakarta, hal.241-291.

Haley, S., 2009, Methylparaben, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey & M.E. Quinn,

(Eds.), Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th

ed., Pharmaceutical

Press, London, pp.441-445.


pharmtech.com

59

Harmely, F., Hosiana, V. & Reskika, R., 2012, Formulasi Pasta Gigi Minyak

Cengkeh dan Uji Aktvitas Antibakteri terhadap Streptococcus mutans,

Scientia, 2 (1), pp.36-40.

Hooton, J.C., 2009, Carboxymethylcellulose Sodium, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey

& M.E. Quinn, (Eds.), Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th

ed.,


Jaelani, A.K., 2012, Formulasi Gel Antijerawat Ekstrak Etanol Patikan Kebo

(Euphorbia hirta L.) dengan Basis HPMC tipe 2910: Uji Sifat Fisik,

Stabilitas Fisik dan Aktivitas Antibakteri terhadap Staphylococcus

epidermidis, Naskah Publikasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta,

Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Katz, D.A., 2012, Toothpastes, http://www.chymist.com/Toothpaste.pdf, diakses

tanggal 11 September 2013.

Kwon, J.A., Yu, C.B. & Park, H.D., 2003, Bacteriocidal Effects and Inhibition of

Cell Separation of Cinnamic Aldehyde on Bacillus cereus, Letters in

Applied Microbiology, 37, pp.61-65.

Mahalingam, R., Li, X. & Jasti, B.R., 2008, Semi Solid Dosages: Ointments,

Creams, and Gels, in S.C. Gad, (Ed.), Pharmaceutical Manufacturing

Handbook: Production and Processes, Wiley-Interscience, New Jersey,

p.279.

Martin, A., Swarbrick, J. & Cammarata, A., 1983, in Physical Pharmacy, 3rd

ed.,

Lea and Febriger, Philadelphia, pp.522-523.

Medina, C. & Alvarez-Nunes, F.A., 2009, Glycerin, in H.o.P. Excipients, (Ed.),



pp.283-286.

Morawiec, T. et al., 2013, The Biological Activity of Propolis-Containing

Toothpaste on Oral Health Environment in Patients Who Underwent

Implant-Supported Prosthodontic Rehabilitation, Evidence-Based

Complementary and Alternative Medicine Hindawi Publishing

Corporation, 2013, pp.1-12.


http://www.chymist.com/Toothpaste.pdf

60

Nainggolan, M., 2008, Isolasi Sinnamaldehid dari Kulit Kayu Manis

(Cinnamomum burmannii), Tesis, Sekolah Pascasarjana Universitas

Sumatera Utara, Medan.

National Association for Holistic Aromatherapy, 2014, Exploring Aromatherapy:

Safety Information, http://www.naha.org/explore-aromatherapy/safety,

diakses tanggal 25 April 2014.

Ningrum, D.S., 2012, Pengaruh Natrium Karboksimetilselulosa sebagai Gelling

Agent terhadap Karakteristik Fisik Emulgel Analgetik dengan Zat Aktif

Metil Salisilat dan Mentol, Karya Tulis Ilmiah, Akademi Farmasi

Theresiana, Semarang.

Nursal, F.K., Indriani, O. & Dewantini, L.A., 2010, Penggunaan Na-CMC sebagai

Gelling Agent dalam Formula Pasta Gigi Ekstrak Etanol 70% Daun Jambu

Biji (Psidium guajava L), Farmasains, 1 (1), hal.44-50.

Plumb, P., 2009, Sodium Lauryl Sulfate, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey & M.E.

Quinn, (Eds.), Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th

ed.,


Porel, A., Sanyal, Y. & Kundu, A., 2014, Simultaneous HPLC Determination of

22 Components of Essential Oils; Method Robustness with Experimental

Design, Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, 76 (1), pp.19-30.

Poucher, J., 2000, in Poucher’s Perfume Cosmetics and Soap, 10th

ed., Kluwer

Academic, Netherlands, p.228.

Prakash, P., Subramaniam, P., Durgesh, B.H. & Konde, S., 2012, Prevalence of

Early Childhood Caries and Associated Risk Factors in Preschool Children

of Urban Bangalore, India: A Cross-Sectional Study, European Journal of

Dentistry, 4 (6), pp.141-152.

Pratiwi, R., 2005, Perbedaan Daya Hambat terhadap Streptococcus mutans dari

Beberapa Pasta Gigi yang Mengandung Herbal, Majalah Kedokteran Gigi,

38 (2), hal.64-67.

Rahmawati, D., Sukmawati, A., Indrayudha, P., 2010, Formulasi Krim Minyak

Atsiri Rimpang Temu Giring (Curcuma heyneana Val & Zijp): Uji Sifat

Fisik dan Daya Antijamur terhadap Candida albicans secara In Vitro,

Majalah Obat Tradisional, 15 (2), hal.56-63.


http://www.naha.org/explore-aromatherapy/safety

61

Shur, J., 2009, Sorbitol, in R.C. Rowe, P.J. Sheskey & M.E. Quinn, (Eds.),



London, pp.679-682.

Sumardikan, H., 2007, Penggunaan Carboxymethylcellulose (CMC) terhadap pH,

Keasaman, Viskositas, Sineresis dan Mutu Organoleptik Yogurt Set,

Skripsi, Universitas Brawijaya, Malang.

Voigh, R., 1995, Lehrbuch Der Pharmazeutischen Technologie, diterjemahkan

oleh Soewandhi, S.N., Universitas Gadjah Mada Press, Yogyakarta, hal

387, 439.

Zatz, J.L., Berry, J.J. & Aldermen, D.A., 1996, in Pharmaceutical Dosage Forms.

1st ed., Devised and Expander Marcel Dekker, Inc., New York, pp.287-

313.


62

LAMPIRAN

Lampiran 1. Sertifikat analisis minyak kayu manis


63

Lampiran 2. Sertifikat hasil uji Streptococcus mutans


64

Lampiran 3. Verifikasi minyak kayu manis

1. Bobot Jenis

a. Kalibrasi piknometer

Tabel Data Perhitungan Bobot Air dalam Piknometer

Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

Bobot piknometer kosong (g) 24,3435 24,3652 24,3468

Bobot piknometer +air (g) 34,5252 34,5689 34,5473

Bobot air (g) 10,1797 10,2037 10,2005

Suhu perlakuan 25°C

ρair (25°C ) = 0,99707 g/mL

Volume piknometer replikasi 1 =m1

ρair=

10,1797

0,99707=10,2096 mL


ρair=

10,2037

0,99707=10,2336 mL


ρair=

10,2005

0,99707=10,2305 mL

b. Bobot jenis minyak kayu manis 100%


Bobot piknometer kosong (g) 24, 3440 24,396 24,3639

Bobot piknometer + minyak

kayu manis (g) 34,6885 34,7716 34,7246

Bobot minyak kayu manis (g) 10,3445 10,3756 10,3607

Massa jenis minyak kayu manis replikasi 1= ρ1=

m1

v1

=10,3445

10,2096=1,0132 g mL


m2

v2

=10,3756

10,2336=1,0138 g mL


m3

v3

=10,3607

10,2305=1,0127 g mL

Bobot jenis minyak kayu manis replikasi 1= ρ

1

ρair

=1,0132 g mL

0,99707 g mL = 1,0161


2

ρair

=1,0138 g mL

0,99707 g mL = 1,0168


3

ρair

=1,0127 g mL

0,99707 g mL = 1,0157

Rerata bobot jenis minyak kayu manis= 1,0161+1,0168+1,0157

3=1,0162

Standar Deviasi SD = Σ(x-x )

2

n-1=0,0005

Bobot jenis minyak kayu manis 100% = rerata ± SD = 1,0162 ± 0,0005


65

c. Bobot jenis minyak kayu manis 7%


Bobot piknometer kosong (g) 24, 3418 24,3766 24,3477

Bobot piknometer + minyak

kayu manis (g) 33,3287 33,3546 33,3719

Bobot minyak kayu manis (g) 8,9869 8,9780 9,0242


m1

v1

=8,9869

10,2096= 0,8802 g mL


m2

v2

=8,9780

10,2336= 0,8773 g mL


m3

v3

=9,0242

10,2305= 0,8821 g mL


1

ρair

=0,8802 g mL

0,99707 g mL = 0,8828


2

ρair

=0,8773 g mL

0,99707 g mL = 0,8799


3

ρair

=0,8821 g mL

0,99707 g mL = 0,8847

Rerata bobot jenis minyak kayu manis= 0,8828+0,8799+0,8847

3=0,8825

Standar Deviasi SD = Σ(x-x )

2

n-1=0,0024

Bobot jenis minyak kayu manis 7% = rerata ± SD = 0,8825 ± 0,0024

d. Konversi volume minyak kayu manis 7% v v menjadi bobot minyak kayu

manis 7% b b

7% vv =

7 mL konsentrasi 100%

100 mL konsentrasi 7%

(A) 7 mL = x gram

(B) 100 mL = x gram

1) Replikasi 1

Bobot minyak kayu manis 7% = 100 mL × 0,8802 g mL = 88,02 gram


Konversi ke 100 gram :

7,0924 gram

88,02 gram=

x gram

100 gram

x gram = 8,0577 gram minyak kayu manis 100 %

2) Replikasi 2



(A)

(B)


66


7,0966 gram

87,73 gram=

x gram

100 gram


3) Replikasi 3




7,0889 gram

88,21 gram=

x gram

100 gram


4) Rerata bobot minyak kayu manis 7%

Rerata bobot= 8,0577+8,0891+8,0364

3= 8,0611 gram

2. Indeks Bias

Uji indeks bias minyak kayu manis

Rumus : ns = np + 0,0044 (Tp – Ts)

Ts = 25°C dan Tp = 27°C

Perlakuan np ns

Replikasi 1 1,555 1,5598

Replikasi 2 1,59 1,5988

Replikasi 3 1,56 1,5688

Indeks bias ± SD 1,5758 ±0,02


67

Lampiran 4. Hasil uji daya antibakteri minyak kayu manis terhadap

Streptococcus mutans dengan metode difusi sumuran

(a) (b) (c)

(d) (e)

Keterangan:

(a) : Kontrol media

(b) : Kontrol pelarut

(c) : Kontrol pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans

(d) : Uji difusi sumuran konsentrasi 1-5%

(e) : Uji difusi sumuran konsentrasi 6-10%

( − ) ( − )

3%

4%

2%

1%

5%

6%

7%

8% 9%

10%


68

Lampiran 5. Pengukuran diameter zona hambat minyak kayu manis

terhadap Streptococcus mutans

Senyawa

Uji

Diameter zona hambat (mm) Rerata

± SD Replikasi

1

Replikasi

2

Replikasi

3

Replikasi

4

Replikasi

5

Replikasi

6

1 0 0 0 0 0 0 0 ± 0

2 0 0 0 0 0 0 0 ± 0

3 0 0 0 0 0 0 0 ± 0

4 0 0 0 0 0 0 0 ± 0

5 4,76 3,96 0 3,73 5,13 3,5 3,51 ±

1,83

6 6,6 4,6 4,13 4,33 4 5,33 4,83 ±

0,98

7 5,57 4,73 7,06 4,5 6,66 6,33 5,81 ±

1,04

8 9,06 9,03 12,26 9 6,33 9,33 9,17 ±

1,88

9 9,86 10,76 11,3 9,5 11,83 12,5 10,96 ±

1,15

10 13,4 13,36 7,3 9,83 14,3 11,66 11,64 ±

2,65

( − ) 0 0 0 0 0 0 0 ± 0

Keterangan:

1 : Minyak kayu manis 1%









( − ) : Kontrol negatif (Parafin cair)


69

Lampiran 6. Perhitungan konsentrasi minyak kayu manis pada uji dilusi

padat

Diketahui untuk masing-masing petri: volume media yang digunakan 15 mL ;

suspensi bakteri yang ditambahkan 0,2 mL ; minyak kayu manis yang

ditambahkan 0,2 mL

Konsentrasi minyak kayu manis setelah mengalami pengenceran:

V1 × C1 = V2 × C2

V1 = volume minyak kayu manis yang ditambahkan (mL)

C1 = konsentrasi minyak kayu manis mula-mula (konsentrasi 5-10%) (%)

V2 = volume total masing-masing petri (volume media 15 mL + volume suspensi

bakteri 0,2 mL + volume minyak kayu manis 0,2 mL = 15,4 mL) (mL)

C2 = konsentrasi minyak kayu manis setelah mengalami pengenceran (%)

1. Konsentrasi 5%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 5 = 15,4 × C2

C2 = 0,06%

2. Konsentrasi 6%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 6 = 15,4 × C2

C2 = 0,08%

3. Konsentrasi 7%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 7 = 15,4 × C2

C2 = 0,09%

4. Konsentrasi 8%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 8 = 15,4 × C2

C2 = 0,10%

5. Konsentrasi 9%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 9 = 15,4 × C2

C2 = 0,12%

6. Konsentrasi 10%

V1 × C1 = V2 × C2

0,2 × 10 = 15,4 × C2

C2 = 0,13%


70

Lampiran 7. Hasil uji daya antibakteri minyak kayu manis terhadap

Streptococcus mutans dengan metode dilusi padat

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

(g) (h) (i)

Keterangan :

(a) Kontrol media : −

(b) Kontrol pelarut : −

(c) Kontrol pertumbuhan bakteri : + + +

(d) Minyak kayu manis 0,06% : +

(e) Minyak kayu manis 0,08% : −

(f) Minyak kayu manis 0,09% : −

(g) Minyak kayu manis 0,10% : −

(h) Minyak kayu manis 0,12% : −

(i) Minyak kayu manis 0,13% : −

Hasil positif (+) menunjukkan tingkat kekeruhan petri perlakuan,

sedangkan hasil negatif (−) menunjukkan kejernihan petri perlakuan.


71

Lampiran 8. Hasil uji penegasan daya antibakteri minyak kayu manis


(a) (b)

(c) (d)

Keterangan:

1. (a) dan (b) hasil uji penegasan pertama :

(a) konsentrasi 7% (kiri) dan konsentrasi 6% (kanan)

(b) konsentrasi 9% (kiri) dan konsentrasi 8% (kanan)

2. (c) dan (d) hasil uji penegasan kedua :

(c) konsentrasi 7% (kiri) dan konsentrasi 6% (kanan)

(d) konsentrasi 9% (kiri) dan konsentrasi 8% (kanan)


72

Lampiran 9. Pasta gigi minyak kayu manis

1. Pasta gigi minyak kayu manis setelah 48 jam pembuatan

Formula 1 Formula 2 Formula 3


2. Pasta gigi minyak kayu manis setelah 1 minggu penyimpanan




73








74





75

Lampiran 10. Hasil uji sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis pada 48 jam

1. Viskositas

Formula Viskositas (dPas)

Rerata ± SD Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

Formula 1 290 270 300 286,67 ± 15,27

Formula 2 390 380 420 396,67 ± 20,82

Formula 3 470 450 500 473,33 ± 25,17

Formula 4 570 590 600 586,67 ± 15,28

Formula 5 700 710 680 696,67 ± 15,28

Formula 6 960 980 1000 980 ± 20

2. Daya lekat

Formula Daya Lekat (detik)


Formula 1 4,4 4,9 4,7 4,67 ± 0,25

Formula 2 5,5 6 5,8 5,77 ± 0,26

Formula 3 7,3 7,7 8,2 7,73 ± 0,99

Formula 4 10,4 9,8 10,3 510,17 ± 0,95

Formula 5 15,7 15,9 16,2 15,93 ± 0,26

Formula 6 20,1 19,6 19,8 19,83 ± 0,25

3. pH

Formula pH


Formula 1 8 8 8 8 ± 0

Formula 2 8 8 8 8 ± 0

Formula 3 8 8 8 8 ± 0

Formula 4 8 8 8 8 ± 0

Formula 5 8 8 8 8 ± 0

Formula 6 8 8 8 8 ± 0


76

Lampiran 11. Hasil uji statistik sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis pada

48 jam

1. Viskositas

a. Contoh perhitungan statistik sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis

dengan program R

1) Uji normalitas dengan Shapiro-Wilk

Formula 1

Keterangan: Formula 1 memiliki p value > 0,05 menunjukkan data

terdistribusi normal.

2) Uji variansi data (Levene’s test)

Keterangan: p value > 0,05 menunjukkan data homogen.

3) Hasil uji ANAVA

Keterangan: p value < 0,05 menunjukkan data memiliki perbedaan yang

bermakna secara statistik.


77

4) Hasil uji Tukey HSD

b. Tabel hasil uji Tukey HSD

P-value Viskositas Formula

1 2 3 4 5 6

P-value Formula

1 − − − − − −

2 0,0001431 − − − − −

3 0,0000006 0,0035578 − − − −

4 0,0000000 0,0000005 0,0001070 − − −

5 0,0000000 0,0000000 0,0000001 0,0001431 − −

6 0,0000000 0,0000000 0,0000000 0,0000000 0,0000000 −

* p value > 0,05 menunjukkan data tidak berbeda bermakna secara statistik

* Taraf kepercayaan 95%


78

2. Daya lekat

a. Contoh perhitungan statistik sifat fisik pasta gigi minyak kayu manis

dengan program R


Formula 1



2) Uji variansi data (Levene’s test)

Keterangan: p value > 0,05 menunjukkan data homogen.

3) Hasil uji ANAVA

Keterangan: p value < 0,05 menunjukkan data memiliki perbedaan yang



79

4) Hasil uji Tukey HSD

b. Tabel hasil uji Tukey HSD

P-value Daya Lekat Formula

1 2 3 4 5 6

P-value Daya Lekat Formula

1 − − − − − −

2 0,0085240 − − − − −

3 0,0000004 0,0000501 − − − −

4 0,0000000 0,0000000 0,0000055 − − −

5 0,0000000 0,0000000 0,0000000 0,0000000 − −

6 0,0000000 0,0000000 0,0000000 0,0000000 0,0000000 −

* p value > 0,05 menunjukkan data tidak berbeda bermakna secara statistik

* Taraf kepercayaan 95%


80

Lampiran 12. Hasil uji statistik pergeseran viskositas pasta gigi minyak kayu

manis

1. Contoh perhitungan pergeseran viskositas pasta gigi minyak kayu manis

menggunakan program R

a. Formula 1


48 Jam


terdistribusi normal

2) Hasil uji T

a) 48 jam dan 1 minggu

b) 48 jam dan 2 minggu

c) 48 jam dan 3 minggu


81

d) 48 jam dan 4 minggu

e) 1 minggu dan 2 minggu

f) 1 minggu dan 3 minggu

g) 1 minggu dan 4 minggu

h) 2 minggu dan 3 minggu


82

i) 2 minggu dan 4 minggu

j) 3 minggu dan 4 minggu

2. P-value pergeseran viskositas formula 1-6

Tabel P-value Pergeseran Viskositas Formula 1-6

Kelompok Komparasi P value Formula

1 2 3 4 5 6

48 jam vs 1 minggu 0,2697 0,2697 0,4226 0,4226 0,0263 0,2254

48 jam vs 2 minggu 0,0942 0,1296 0,2254 0,0378 0,0351 0,0378

48 jam vs 3 minggu 0,0599 0,0942 0,0728 0,1091 0,0276 0,0051

48 jam vs 4 minggu 0,0153 0,0472 0,0153 0,0229 0,0162 0,0016

1 minggu vs 2 minggu 0,0572 0,4226 0,4226 0,2254 0,2999 0,4226

1 minggu vs 3 minggu 0,0229 0,2697 0,0742 0,1567 0,2354 0,0082

1 minggu vs 4 minggu 0,0091 0,0742 0,0198 0,0315 0,1383 0,0142

2 minggu vs 3 minggu 0,0351 0,2254 0,0572 0,1994 0,4226 0,0351

2 minggu vs 4 minggu 0,0068 0,0533 0,0378 0,0153 0,0378 0,0025

3 minggu vs 4 minggu 0,0075 0,0153 0,4226 0,2254 0,0572 0,0315

Keterangan: p-value < 0,05 menunjukkan data memiliki perbedaan yang



83

Lampiran 13. Hasil uji statistik pergeseran daya lekat pasta gigi minyak

kayu manis

1. Contoh perhitungan pergeseran daya lekat pasta gigi minyak kayu manis

menggunakan program R

a. Formula 1


48 Jam



2) Hasil uji T

a) 48 jam dan 1 minggu

b) 48 jam dan 2 minggu


84

c) 48 jam dan 3 minggu

d) 48 jam dan 4 minggu

e) 1 minggu dan 2 minggu

f) 1 minggu dan 3 minggu


85

g) 1 minggu dan 4 minggu

h) 2 minggu dan 3 minggu

i) 2 minggu dan 4 minggu

j) 3 minggu dan 4 minggu


86

2. P-value pergeseran daya lekat formula 1-6

Tabel P-value Pergeseran Daya Lekat Formula 1-6

Kelompok Komparasi P-value Formula

1 2 3 4 5 6

48 jam vs 1 minggu 0,4226 0,1447 0,2254 0,1835 0,4226 0,1835

48 jam vs 2 minggu 0,0572 0,1317 0,1885 0,1296 0,7418 0,4226

48 jam vs 3 minggu 0,0317 0,0334 0,0926 0,1835 0,1835 0,1835

48 jam vs 4 minggu 0,0171 0,0023 0,0323 0,1917 0,0198 0,0572

1 minggu vs 2 minggu 0,1835 0,1217 0,1835 0,6667 0,5286 0,2254

1 minggu vs 3 minggu 0,0600 0,0082 0,0728 0,1835 0,0000 0,0571

1 minggu vs 4 minggu 0,0139 0,0067 0,0221 0,2254 0,0153 0,0742

2 minggu vs 3 minggu 0,0544 0,0831 0,0153 0,7418 0,7418 0,6667

2 minggu vs 4 minggu 0,0170 0,0414 0,0151 0,5286 0,0742 0,2254

3 minggu vs 4 minggu 0,0877 0,0378 0,0262 0,4226 0,0378 0,1835




87

Lampiran 14. Hasil uji daya antibakteri pasta gigi minyak kayu manis





88

Lampiran 15. Hasil perhitungan statistik zona hambat pasta gigi minyak

kayu manis terhadap Streptococcus mutans dengan metode difusi sumuran

1. Contoh perhitungan statistik zona hambat pasta gigi minyak kayu manis

dengan program R

Formula 1

a. Uji normalitas dengan Shapiro-Wilk

1) Basis

2) Minyak kayu manis

3) Kontrol pasta gigi merek X

4) Pasta gigi minyak kayu manis Formula 1

b. Uji variansi data (Levene’s test)


89

c. Hasil uji ANAVA

d. Hasil uji Tukey HSD

2. P-value uji difusi sumuran pasta gigi minyak kayu manis

Tabel P-value Uji Difusi Sumuran Pasta Gigi Minyak Kayu Manis

Formula 1-6

Kelompok

Komparasi

P-value Formula

1 2 3 4 5 6

Sampel vs

kontrol positif 0,0000029 0,0000000 0,0000011 0,0000143 0,0009637 0,0000016

Sampel vs

minyak 0,0005424 0,0000224 0,0000312 0,0000000 0,0000014 0,0000000

Sampel vs

basis 0,0124713 0,0001248 0,0002068 0,0000002 0,0000026 0,0000000




90

Lampiran 16. Hasil uji iritasi pasta gigi minyak kayu manis dengan slug

Pasta gigi minyak Kontrol positif Kontrol negatif

kayu manis (SLS 2%) (air)


91

Lampiran 17. Hasil perhitungan produksi mukus siput

1. Penimbangan berat siput

a. Siput untuk pasta gigi minyak kayu manis

Berat (gram) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 4 Replikasi 5

Petri Kosong 53,13 53,13 53,13 53,17 53,17

Petri + Siput 56,42 56,87 56,98 56,53 56,26

Siput 3,29 3,74 3,85 3,36 3,09

b. Siput untuk kontrol positif (SLS 2%)


Petri Kosong 53,16 53,2 53,18 53,22 53,21

Petri + Siput 56,55 56,41 56,78 56,62 56,23

Siput 3,39 3,21 3,6 3,4 3,02

c. Siput untuk kontrol negatif (air)


Petri Kosong 53,21 53,2 53,2 53,2 53,21

Petri + Siput 56,64 56,2 56,8 57,12 56,93

Siput 3,43 3 3,6 3,92 3,72

2. Penimbangan berat mukus



Petri Kosong 47,133 44,153 48,757 43,504 47,55

Petri + Sediaan 47,64 44,652 49,261 44,008 48,05

Petri + Mukus 48,628 45,757 50,447 45,038 48,972

Mukus 0,988 1,105 1,186 1,03 0,922



Petri Kosong 48,283 44,035 46,362 40,495 45,187

Petri + Sediaan 48,786 44,588 46,866 41,002 45,69

Petri + Mukus 49,328 45,374 47,519 41,765 46,339

Mukus 0,542 0,786 0,653 0,763 0,649


92



Petri Kosong 46,684 49,5 44,486 47,322 51,282

Petri + Sediaan 47,13 49,96 44,93 47,769 51,474

Petri + Mukus 46,96 49,650 44,72 47,650 51,275

Mukus -0,17 -0,31 -0,21 -0,119 -0,199

3. Perhitungan produksi mukus


MPReplikasi 1= 0,988 gram

3,290 gram×100% = 30,03%


3,740 gram×100% = 29,54%


3,850 gram×100% = 30,80%


3,360 gram×100% = 30,36%


3,090 gram×100% = 29,84%



3,390 gram×100% = 15,99%


3,210 gram×100% = 24,49%


3,600 gram×100% = 18,14%


3,400 gram×100% = 22,44%


3,02 gram×100% = 29,84%


MPReplikasi 1= -0,17 gram

3,430 gram×100% = -4,96%


3,00 gram×100% = -10,30%


3,6000 gram×100% = -5,83%


3,920 gram×100% = -3,03%


3,720 gram×100% = -5,35%


93

BIOGRAFI PENULIS

Eliza Telamiana Riyani Purbo lahir di

Kendal pada tanggal 14 April 1991. Penulis yang

memiliki seorang adik laki-laki ini merupakan putri

pertama dari pasangan N. Purbo Cahyono dan

Endang Hariyani. Penulis telah menempuh

pendidikan di TK Kristen I YSKI (1995-1997), SD

Kristen I YSKI (1997-2003), SMP Krista Mitra

(2003-2006) dan SMA Kristen Indonesia (2007-

2010). Penulis melanjutkan pendidikannya setelah

tamat SMA di Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma Yogyakarta. Penulis aktif mengikuti

kegiatan kemahasiswaan selama menempuh

pendidikan di Sanata Dharma, sebagai sekretaris dalam kegiatan Penyuluhan dan

Pengenalan Tanaman Obat Keluarga (TOGA) untuk Penyakit Hipertensi dan

Asam Urat di Dusun Burikan (2012), sie. keakraban dalam Peringatan Dies

Natalis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma ke-16 (2012), sie. acara

dalam acara Hari AIDS Sedunia (2011), sie. perlengkapan pada acara Photo

Exhibition (2010). Penulis pernah mengikuti Program Kreativitas Mahasiswa

bidang Pengabdian Masyarakat lolos didanai DIKTI (2013), menjadi delegasi

dalam kegiatan The 12th

Asia Pacific Pharmaceutical Symposium in Japan (2013),

serta menjadi asisten praktikum Farmakologi Toksikologi (2013) dan praktikum

Compounding (2014).


pengaruh peningkatan konsentrasi - PLAGIAT MERUPAKAN ...

Documents

Transcript of pengaruh peningkatan konsentrasi - PLAGIAT MERUPAKAN ...