UJI EFEK ANTI-INFLAMASI EKSTRAK METANOL KULIT … · Antiinflamasi (n=5) ... Termasuk dalam OAINS...

UJI EFEK ANTI-INFLAMASI EKSTRAK METANOL KULIT ALPUKAT

(Persea americana Mill.) PADA MENCIT JANTAN GALUR SWISS

TERINDUKSI KARAGENIN 1%

SKRIPSI

Dijalankan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Program Studi Farmasi

Diajukan Oleh:

Alexander Vito Harmony Swastika Yuan

NIM: 148114067

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2017

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i

UJI EFEK ANTI-INFLAMASI EKSTRAK METANOL KULIT ALPUKAT

(Persea americana Mill.) PADA MENCIT JANTAN GALUR SWISS

TERINDUKSI KARAGENIN

SKRIPSI

Dijalankan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Diajukan Oleh:

Alexander Vito Harmony Swastika Yuan

NIM: 148114067

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2017


ii


iii


iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

KEEP GOING.

RESULTS TAKE TIME. BUT IF YOU’RE CONSISTENT,

THEY WILL COME.

Karya ini kupersembehkan untuk:

Tritunggal Maha Kudus, Santo Alexander, Santo Ignatius Loyola sumber berkat

dan harapanku

Papa, Mama, Kakak-kakakku, serta seluruh keluarga besar yang penuh cinta

Semua sahabat dan teman yang telah menemaniku dan menyemangatiku

Semua manusia yang menganggap karya ini bermanfaat

serta Almamaterku Universitas Sanata Dharma


v


vi


vii

PRAKATA

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas limpahan berkat dan kasih-

Nya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Anti-

Inflamasi Ekstrak Kulit Alpukat (Persea americana Mill.) pada Mencit Jantan

Galur Swiss Terinduksi Karagenin” dengan baik. Skripsi ini merupakan bagian

dari penelitian Phebe Hendra, Ph.D., Apt., yang berjudul “Aktivitas Analgesik dan

Antiinflamasi Kulit Alpukat” berdasarkan SK No. 014B/LPPM USD/III/2017.

Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi (S.Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

Dalam penyusunan skripsi ini, penulis mendapatkan banyak bantuan,

dukungan, dan bimbingan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak

langsung. Oleh karena itu, pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terima

kasih yang sebesar-besarnya kepada:

1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Apt., Ph.D., selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Ibu Dr. Sri Hartati Yuliani, Apt., selaku Ketua Program Studi Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

3. Ibu Dr. Dewi Setyaningsih, Apt., selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan izin untuk penggunaan

segala fasilitas laboratorium selama penelitian.

4. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing skripsi yang

telah dengan sabar memberikan banyak kritik, saran, dan bimbingan selama

penelitian dan penyusunan skripsi.

5. Ibu Damiana Sapta Candrasari, S.Si., M.Sc., selaku dosen penguji atas kritik

dan saran selama penyusunan skripsi.

6. Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji atas kritik

dan saran selama penyusunan skripsi.

7. Mas Antonius Dwi Priyana dan Mas Sarwanto selaku Sekretariat S1 Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma yang memberikan informasi selama

perkuliahan dan ujian.


viii

8. Pak Heru Purwanto, Pak Suparjiman, Pak Markus Suparlan, Pak Yohanes

Wagiran, Pak Kayatno, Pak Musrifin, Mas Bimo yang telah membantu

pengerjaan penelitian skripsi ini.

9. Keluarga terkasih, Bapak Oei, Leonardus Widadi, Ibu Sri Purbaningsih,

Gabriella Rosa Petra S.Y., Grace Litany Aurora S.Y. yang telah menyemangati

dan memberi dukungan selama proses pengerjaan skripsi.

10. Angelica Rivera Santoso, yang selalu menemani, memberikan semangat,

dukungan, kasih sayang selama perkuliahan dan proses pengerjaan skripsi ini.

11. Teman-teman kos Krisna, Eko Aprilianto, Andreas Billyansa, Christio Rafelix

Putra, Andreas Billyansa, Petrus Febrian Widiantoro, Dwi Meilianto yang

memberi warna kehidupan harian di kos.

12. Teman-teman Konco Tisu, Patricia Dian Anggraeni, Dicky Prasetya, Aquina

Nino Ramadanti Dewita, Debby Permatasari Liwang, Petrus Febrian

Widiantoro, Agata Ratna Puspitasari, Yulius Denis Chrismaaji, Rabulas Tri

Nugroho, dan Claudia Darantika Pradita yang memberikan kebahagiaan dan

bantuan selama perkuliahan.

13. Teman-teman Pejuang Skripsi Poenya, Eko Aprilianto dan Claudia Darantika

Pradita yang telah bersama-sama berjuang mengerjakan skripsi ini.

14. Teman-teman FSM B 2014 dan seluruh angkatan 2014 yang telah berdinamika,

baik panitia maupun perkuliahan.

15. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu oleh penulis yang telah

membantu selama proses penyusunan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna dan

dalam naskah skripsi ini masih terdapat kekurangan mengingat keterbatasan

pengetahuan dan kemampuan yang dimiliki oleh penulis. Oleh karena itu, penulis

mengharapkan adanya kritik dan saran yang membantu demi kemajuan di masa

yang akan datang. Akhir kata, penulis berharap agar skripsi ini dapat bermanfaat

bagi mahasiswa, lingkungan akademis, masyarakat serta dapat memberikan

sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang

kefarmasiaan.

Yogyakarta, 4 September 2017

Penulis


ix

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................... i

PERSETUJUAN PEMBIMBING .......................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................. v

HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................... vi

PRAKATA ............................................................................................................ vii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ................................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii

ABSTRACT ......................................................................................................... xiii

ABSTRAK ........................................................................................................... xiv

PENDAHULUAN ................................................................................................. 1

METODE PENELITIAN ....................................................................................... 3

HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................................... 6

KESIMPULAN ..................................................................................................... 14

SARAN ................................................................................................................. 14

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 15

LAMPIRAN .......................................................................................................... 16

BIOGRAFI PENULIS .......................................................................................... 34


x

DAFTAR TABEL

Tabel I. Uji Normalitas Nilai Rata-rata AUC Total (mm.menit) pada

Orientasi Penetapan Dosis Kalium Diklofenak dan Selang Waktu

Pemberian Karagenin ................................................................... 7

Tabel II. Hasil Uji LSD AUC Total (mm.menit) Pada Uji Pendahuluan Dosis

Efektif Kalium Diklofenak dan Selang Waktu Pemberian Karagenin

7

Tabel III. Rata-rata AUC Total (mm.menit) pada Kelompok Uji Antiinflamasi

(N=5) ........................................................................................... 11

Tabel IV. Hasil Uji LSD AUC Total (mm.menit) pada Kelompok Uji

Antiinflamasi (n=5) ..................................................................... 11

Tabel V. Rata-rata Persen Penghambatan Inflamasi Tiap Mencit Pada

Masing-masing Kelompok .......................................................... 14


xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Kulit Alpukat .................................................................................... 24

Gambar 2. Kulit Alpukat Kering........................................................................ 24

Gambar 3. Serbuk Kulit Alpukat ....................................................................... 24

Gambar 4. Ekstrak kental Kulit Alpukat ............................................................ 24

Gambar 5. Pemberian secara peroral ................................................................. 25

Gambar 6. Pemberian garis pengukuran ............................................................ 25

Gambar 7. Injeksi subplantar ............................................................................. 25

Gambar 8. Pengukuran udem ............................................................................. 25


xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Pengesahan Determinasi Kulit Persea americana Mill.. 18

Lampiran 2. Surat Kalibrasi Jangka Sorong Digital ..................................... 19

Lampiran 3. Surat Legalitas Penggunaan SPSS ........................................... 20

Lampiran 4. Surat Ethical Clearance ........................................................... 21

Lampiran 5. Data Perhitungan Dosis dan Rendemen ................................... 22

Lampiran 6. Kulit Alpukat dan Ekstrak Kulit Alpukat ................................ 24

Lampiran 7. Pembuatan Udem dan Pengukuran Telapak Kaki Mencit ........ 25

Lampiran 8. Analisa Statistika Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang

Waktu Pemberian Diklofenak .................................................. 26

Lampiran 9. Analisa Statistika Nilai Data AUC Total pada Uji Antiinflamasi

Ekstrak Metanol Kulit Alpukat ................................................ 30


xiii

ABSTRACT

Avocado (Persea americana Mill.) is a plant that has many benefits. Avocado seed

and peel contain flavonoid compounds that have anti-inflammatory effects.

However, this compound is more contained in the avocado peel. This study aims to

prove the anti-inflammatory effect of avocado peel methanol extract on male

carrageenan-induced mice. This research was purely experimental with randomized

completed direct sampling design. A total of 25 mice, age 2-3 months, divided

randomly into 5 treatment groups. Group I was given CMC-Na as a negative

control, Group II was given potassium diclofenac as a positive control, group III,

IV, and V were given peel extracts of Persea americana Mill. with three dose

ratings of 830 mg/kgBW; 1670 mg/kgBW; 3330 mg/kgBW. After 30 minutes, the

mice were induced with 1% carrageenan. Hind paw edema of mice was measured

with a digital caliper for 6 hours. Data analysis was performed by calculating AUC

from the size of hind paw edema, then analyzed statistically using one way ANOVA

and LSD test. The result from statistical tests is Avocado methanol extract has anti-

inflammatory effect. The mean percentage of inflammation inhibition of all three

doses of avocado leaf methanol extract, from the lowest dose was 48.33; 50.52;

58.61%. The effective dose of Avocado methanol extract is 3330 mg/kgBW

Keywords: antiinflammatory, peel, avocado peel, Persea americana Mill.,

carrageenan, methanol extract.


xiv

ABSTRAK

Alpukat (Persea americana Mill.) adalah tanaman yang memiliki banyak manfaat.

Biji dan kulit Alpukat mengandung senyawa-senyawa flavonoid yang mempunyai

efek antiinflamasi. Namun senyawa tersebut lebih banyak terkandung pada kulit

Alpukat. Penelitian ini bertujuan untuk meneliti efek anti-inflamasi dari ekstrak

metanol kulit Alpukat pada mencit jantan terinduksi karagenin. Penelitian ini

merupakan eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah.

Sebanyak 25 mencit, usia 2-3 bulan, dibagi secara acak menjadi 5 kelompok

perlakuan. Kelompok I diberi CMC-Na sebagai kontrol negatif, kelompok II diberi

kalium diklofenak sebagai kontrol positif, kelompok III, IV, dan V diberikan

ekstrak kulit Persea americana Mill. dengan tiga peringkat dosis yaitu 830

mg/kgBB; 1670 mg/kgBB; 3330 mg/kgBB. Setelah 15 menit, mencit diinduksi

dengan karagenin 1%. Udem pada kaki mencit diukur dengan jangka sorong digital

selama 6 jam. Analisis data dilakukan dengan menghitung AUC dari ketebalan

udem pada kaki, kemudian dianalisis secara statistik menggunakan one way

ANOVA dan uji LSD. Ekstrak metanol kulit Alpukat mempunyai efek

antiinflamasi. Rata-rata persen penghambatan inflamasi dari ketiga peringkat dosis

ekstrak metanol kulit Alpukat dari dosis terendah adalah 48,33; 50,52; 58,61%.

Dosis efektif ekstrak metanol kulit Alpukat yaitu yaitu 3330 mg/kgBB

Kata kunci: antiinflamasi, kulit, kulit alpukat, Persea americana Mill., karagenin,

ekstrak metanol.


1

PENDAHULUAN

Koolman dan Roehm (2005) mendefinisikan inflamasi sebagai respon imun

terhadap jaringan yang rusak yang disertai perubahan fisiologis. Inflamasi muncul

ketika ada antigen atau zat asing yang masuk ke dalam tubuh, trauma fisik, dan zat

iritan. Sistem imun akan melepaskan sel-sel imun yang akan menghancurkan

antigen tersebut dan memperbaiki jaringan tubuh yang rusak.

Mediator inflamasi disintesis melalui jalur siklo-oksigenase yang akan

menghasilkan prostaglandin dan senyawa-senyawa lain seperti tromboksan dan

prostasiklin. Obat anti-inflamasi non-steroid (OAINS), kebanyakan mempunyai

mekanisme menghambat jalur siklo-oksigenase sehingga tidak terbentuk

prostaglandin. Obat AINS mempunyai sifat anti piretik, analgesik, dan anti-

inflamasi yang berbeda-beda potensinya. Natrium diklofenak mempunyai potensi

anti-inflamasi yang lebih besar daripada aspirin, naproksen, dan indometasin

(Mycek dkk., 2006).

Cataflam® merupakan tablet immediate-release dengan senyawa aktif

Kalium diklofenak. Termasuk dalam OAINS yang mempunyai efek analgesik,

anti-inflamasi, dan antipiretik. Mekanisme aksinya adalah dengan menghambat

enzim siklo-oksigenase (COX 1 dan COX 2) sehingga tidak terbentuk mediator

inflamasi yaitu prostaglandin. Untuk penggunaan oral tersedia dalam tablet

immediate-release 50 mg (Novartis, 2011).

Alpukat (Persea americana Mill.) merupakan buah yang tumbuh secara luas

dan umum ditemukan di daerah tropis dan subtropis untuk dikonsumsi. Di

Indonesia sendiri, buah ini mudah untuk ditemukan di pasar atau pusat perbelanjaan

karena rasa dan juga manfaatnya yang baik untuk kesehatan. Mulai dari biji,

daging, dan kulit buah. Sayangnya hanya daging buah Persea americana Mill.

yang dapat dikonsumsi, sedangkan biji dan kulit masuk yang tidak digunakan,

dimasukkan ke tempat pembuangan.

Industri makanan maupun industri kesehatan memproses Persea americana

Mill. menjadi minyak ataupun pasta, baik itu biji, daging atau kulit buahnya.

Ekstrak yang berupa minyak dan pasta tersebut kaya akan kandungan biologis

kimia aktif tumbuhan. Vinha dkk. (2013) melaporkan bahwa bagian yang tidak


2

dapat dimakan dari alpukat memiliki kandungan bioaktif yang tinggi. Oleh sebab

itu, limbah alpukat yang berupa biji dan kulit merupakan sumber yang menjanjikan

untuk dimanfaatkan dalam makanan, farmasetis, dan kosmetik

Kosinska dkk. (2012) melaporkan bahwa ekstrak kulit dan biji Persea

americana Mill. dengan metanol 80% banyak mengandung senyawa fenolik seperti

golongan flavonoid, prosianidin, dan asam hidroksinamat, baik jenis Hass maupun

Shepard. Kandungan fenolik tersebut lebih besar di kulit alpukat daripada di biji

alpukat. Prosianidin, katekin, kuarsetin, dan 5-O-caffeoylquinic acid adalah

beberapa senyawa yang ditemukan baik dalam kulit maupun biji Persea americana

Mill. jenis Hass dan Shepard. Rodríguez-Carpena dkk. (2011) menyatakan bahwa

senyawa fenolik pada Persea americana Mill. mempunyai aktivitas antioksidan

yang tinggi dalam berbagai uji in vitro yang telah dilakukan. Senyawa fenol

memiiki kemampuan sebagai anti-inflamasi, antikoagulan, antioksidan, serta

peningkatan sistem imun (Arukwe dkk., 2012). Aktivitas farmakologi dari senyawa

flavonoid adalah sebagai antialergi, antiviral, antiinflamasi, hepatoprotektif,

antioksidan, antitrombotik, vasodilator dan antikarsinogenik (Seyoum dkk., 2006).

Senyawa fenolik dan flavonoid dapat mengurangi proses pembentukan dan

mengikat radikal bebas dalam tubuh manusia (Hidalgo dkk., 2010). Selain biji dan

kulitnya, Yasir dkk. (2010) melaporkan bahwa daun alpukat mempunyai efek

antara lain sebagai anti-inflamasi, analgesik, antioksidan, dan antihepatotoksik.

Tianri (2016) melaporkan bahwa ekstrak metanol 90% biji alpukat mempunyai

aktivitas anti-inflamasi. Ekstrak dipilih karena dapat menyari senyawa-senyawa

yang lebih spesifik yang ingin diteliti. Karena senyawa yang tersari hanya yang

larut terhadap penyari atau pelarut.

Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk membuktikan efek

antiinflamasi dari ekstrak metanol kulit Alpukat. Berdasarkan dari kandungan

antara biji dan kulit alpukat, yang keduanya mengandung senyawa fenolik seperti

flavonoid, prosianidin, dan asam hidroksinamat serta penelitian yang telah

membuktikan bahwa biji alpukat mempunyai efek antiinflamasi.


3

METODE PENELITIAN

Penelitian termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak

lengkap pola searah

Alat dan bahan penelitian

Hewan uji mencit jantan galur Swiss yang berumur 2-3 bulan dengan berat

sekitar 20-30 gram dalam kondisi yang sehat (tidak terdapat luka pada kaki)

diperoleh dari Laboratorium Imunologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

Limbah kulit alpukat yang diperoleh dari salah satu depot es di Galeria Mall

Yogyakarta. Karagenin tipe I (sigma Chemical co.). Metanol sebagai penyari

diperoleh dari PT. Brataco. NaCl 0,9 % sebagai pelarut karagenin, akuades, dan

Cataflam Fast® 50 mg.

Alat-alat yang digunakan antara lain oven (Memmert®), mesin penyerbuk

(Retsch®), dan ayakan nomor 40 dan 60. Seperangkat alat gelas berupa beaker

glass, cawan porselen, gelas ukur, labu ukur, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex

Iwaki Glass®), pompa vakum, corong Buchner, alat maserasi (Innova 2100), dan

rotary evaporator (Buchi R 201/215). Timbangan analitik Mettler Toledo®,

stopwatch, penangas air, waterbath, statif, dan termometer. Spuit injeksi 1 mL,

mortir dan stamper, bekker glass, neraca analitik, stopwatch, dan jangka sorong

digital (Hardened®).

Pengumpulan bahan dan pembuatan serbuk simplisia

Kulit alpukat dicuci dari kotoran-kotoran serta daging-daging kulit alpukat

yang masih menempel di kulitnya. Kemudian kulit alpukat yang dipotong-potong

±1 cm dijemur hingga kering (mudah untuk dipatahkan). Setelah kering dilakukan

pembersihan terhadap kotoran-kotoran kemudian diblender hingga menjadi serbuk

simplisia. Simplisia diayak menggunakan ayakan no. 40 dan 50 dan diambil serbuk

yang lolos ayakan 40 dan tidak lolos ayakan 50 agar ukuran partikel seragam.

Uji kadar air

Uji kadar air dilakukan dengan meletakkan 5 g serbuk simplisia ke dalam

alat moisture balance dan setelah 15 menit akan muncul nilai persen kadar. Uji ini

bertujuan untuk mengetahui kualitas dan stabilitas serbuk saat penyimpanan

sebelum digunakan sebagai larutan uji.


4

Ekstraksi

Sebanyak 50 g serbuk simplisia dibagi kedalam 2 buah Erlenmeyer dan

direndam dengan 100 mL metanol 90% lalu dimaserasi selama 24 jam. Hasil

maserasi kemudian disaring dengan corong Buchner, selanjutnya diuapkan dengan

rotary evaporator. Ekstrak kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselen dan

ditimbang massanya. Setelah penimbangan, ekstrak diletakkan di atas waterbath

dan dioven pada suhu 50oC hingga mendapat bobot tetap dari ekstrak kental.

Ekstrak kental tersebut kemudian dilarutkan oleh CMC-Na 1% menjadi sebuah

larutan uji dengan konsentrasi 10%.

Uji pendahuluan

Penelitian ini telah mendapatkan persetujuan dari Komisi Etik Fakultas

Kedokteran Umum UGM berupa Ethical Clearance. Pada penelitian dilakukan uji

pendahuluan terlebih dahulu yang bertujuan untuk mengetahui selang waktu

pemberian karagenin. Uji pendahuluan menggunakan 12 ekor mencit yang dibagi

ke dalam 4 kelompok yaitu Kalium diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB dan dosis 9,1

mg/kgBB dengan selang waktu 15 menit. Kalium diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB

dan 9,1 mg/kgBB dengan selang waktu 30 menit. Karagenin disuntikkan sesuai

dengan selang waktu pemberian kelompok larutan uji ke telapak kaki kanan mencit

dan spuit kosong disuntikkan ke telapak kaki kiri mencit sebagai pembanding.

Udem diukur selama 6 jam pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210,

240, 270, 300, 330, 360 dengan jangka sorong digital yang telah dikalibrasi oleh

Badan Penelitian dan Pengembangan Industri Balai Besar Kulit, Karet, dan Plastik

Laboratorium Pengujian dan Kalibrasi. Kemudian selisih udem telapak kaki kanan

dan kiri dihitung dengan menggunakan AUC.

Uji aktivitas antiinflamasi

Disiapkan mencit sebanyak 25 ekor yang dibagi ke dalam 5 kelompok

masing-masing berisi 5 ekor mencit yang diambil secara acak. Kelima kelompok

tersebut adalah kontrol negatif CMC-Na 1%; kontrol positif Kalium diklofenak

dosis 4,48 mg/kgBB (berdasarkan uji pendahuluan); ekstrak metanol kulit Alpukat

dosis I 830 mg/kgBB; ekstrak metanol kulit alpukat dosis II 1670 mg/kgBB; ekstrak

metanol kulit alpukat dosis III 3330 mg/kgBB. Karagenin disuntikkan 30 menit


5

setelah pemberian larutan uji (berdasarkan uji pendahuluan) ke telapak kaki kanan

mencit dan spuit kosong disuntikkan ke telapak kaki kiri mencit sebagai

pembanding. Udem diukur selama 6 jam pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120,

150, 180, 210, 240, 270, 300, 330, 360 dengan jangka sorong digital yang telah

dikalibrasi oleh Badan Penelitian dan Pengembangan Industri Balai Besar Kulit,

Karet, dan Plastik Laboratorium Pengujian dan Kalibrasi. Kemudian selisih udem

telapak kaki kanan dan kiri dihitung dengan menggunakan AUC.

Keterangan:

𝐴𝑈𝐶0−𝑥 = area di bawah kurva dari menit ke-0 hingga menit ke-360

(mm.mencit)

𝐶𝑛 − 𝐶𝑛−1 = selisih udem pada menit ke-(n) dan ke-(n-1) (mm)

𝑡𝑛 − 𝑡𝑛−1 = selisih menit ke-(n) dan ke-(n-1) (jam).

Dihitung juga persen penghambatan inflamasi dengan rumus sebagai berikut

Penghambatan inflamasi (%) = (𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0− (𝐴𝑈𝐶0−𝑥)𝑛

(𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0 × 100%

Keterangan:

(𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0 = rata-rata AUC total kontrol negatif (mm.jam)

(𝐴𝑈𝐶0−𝑥)𝑛 = nilai AUC total pada kelompok perlakuan replikasi ke - (mm.jam)

Analisis Statistika

Dilakukan uji Shapiro Wilk untuk mengetahui data terdistribusi normal atau

tidak. Data terdistribusi normal apabila P > 0,05. Lalu dilanjutkan uji ANOVA

dengan taraf kepercayaan 95% dan P < 0,05 untuk melihat apakah terdapat

perbedaan bermakna pada kelompok data. Kemudian dilakukan LSD Post Hoc Test

untuk melihat kelompok data mana yang memiliki perbadaan bermakna. Uji

dilakukan menggunakan software SPSS Statistic Version 22 yang dilakukan oleh

CE&BU Fakultas Kedokteran Umum UGM.


6

HASIL DAN PEMBAHASAN

Determinasi, Penetapan Kadar Air dan Ekstraksi Kulit Alpukat

Determinasi dilakukan di Unit II Biologi Farmasi Fakultas Farmasi UGM

dan didapatkan bahwa bahan uji kulit alpukat yang digunakan untuk penelitian

adalah Persea americana Mill.

Simplisia diayak menggunakan ayakan 40 dan 50 agar mendapatkan ukuran

partikel yang sama sehingga semua partikel dapat terbasahi semua pada waktu

maserasi. Simplisia kulit alpukat diuji kadar airnya dengan hasil sebesar 7,328%

yang telah memenuhi kriteria kadar air yang baik. Kriteria kadar air yang baik yaitu

dibawah 10%. Kemudian simplisia diesktraksi dengan pelarut metanol 90% yang

merupakan pelarut organik yang digunakan untuk menarik senyawa flavonoid yang

mempunyai efek antiinflamasi yang juga merupakan senyawa organik. Ekstraksi

merupakan proses pemisahan bahan dari campurannya berdasarkan perbedaan

kelarutan terhadap dua cairan tidak saling larut (Agoes, 2009).

Hasil remaserasi tidak dibuat menjadi ekstrak kental karena terdapat benda

putih seperti jamur di dalam larutan ekstrak. Setelah proses maserasi berakhir,

ekstrak diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu 60oC agar metanol dapat

menguap. Didapatkan sebanyak 2 cawan porselen hasil ekstraksi. Pemanasan

cawan di atas waterbath bertujuan untuk menghilangkan metanol yang masih

tertinggal kemudian di oven untuk mendapatkan bobot tetap. Hasil akhir

pengukuran bobot tetap cawan 1 yaitu 2,768 g dan cawan 2 yaitu 3,294 g. Hasil

rendemen yang didapatkan yaitu 6,062%.

Uji pendahuluan

Uji pendahuluan bertujuan untuk menetapkan dosis pemberian kalium

diklofenak dan selang waktu pemberian karagenin yang efektif. Penetapan dosis

kalium diklofenak dan selang waktu pemberian karagenin dapat dilihat dari nilai

AUC yang diperoleh pada masing-masing kelompok perlakuan pada tabel I berikut

ini.


7

Tabel I. Uji Normalitas Nilai Rata-rata AUC Total (mm.menit) pada Orientasi

Penetapan Dosis Kalium diklofenak dan Selang Waktu Pemberian Karagenin

Kelompok Rata-rata AUC total

(mm.menit) (�� ± SE) Nilai p

Kalium diklofenak dosis 4,48

mg/kg BB waktu pemberian 15

menit

380,97 ± 8,51 0,484 (N)



menit

422,58 ± 2,70 0,118 (N)



menit

251,45 ± 7,04 0,061 (N)



menit

447,61 ± 4,23 0,050 (N)

Keterangan:

�� = rata-rata

SE = Standard Error (SD/√𝑛)

N = distribusi data normal (p>0,05)

Tabel II. Hasil Uji LSD AUC Total (mm.menit) Pada Uji Pendahuluan Dosis

Efektif Kalium diklofenak dan Selang Waktu Pemberian Karagenin

Kelompok

Diklofenak

dosis 4,48

mg/kgBB ;

15 menit

Diklofenak

dosis 9,1

mg/kgBB ;

15 menit

Diklofenak

dosis 4,48

mg/kgBB ;

30 menit

Diklofenak

dosis 9,1

mg/kgBB;

30 menit

Diklofenak dosis

4,48 mg/kgBB ; 15

menit

- BB BB BB

Diklofenak dosis

9,1 mg/kgBB ; 15

menit

BB - BB BB


8

Diklofenak dosis

4,48 mg/kgBB ; 30

menit

BB BB - BB

Diklofenak dosis

9,1 mg/kgBB ; 30

menit

BB BB BB -

Keterangan:

BB = Berbeda Bermakna (p<0,05)

BTB = Berbeda Tidak Bermakna (p>0,05)

Dari tabel I, dapat dilihat bahwa rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak

4,48 mg/kgBB selang waktu 15 menit (380,97 ± 8,51) jika dibandingkan dengan

rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 15 menit

(422,58 ± 2,70) menunjukkan hasil yang berbeda bermakna. Hasil yang berbeda

bermakna dari perbandingan rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 4,48

mg/kgBB selang waktu 15 menit dengan rata-rata AUC kelompok kalium

diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 15 menit menunjukkan perbedaan aktivitas

antiinflamasi yang signifikan dari kedua kelompok tersebut. Kalium diklofenak

4,48 mg/kgBB selang waktu 15 menit mempunyai aktivitas antiinflamasi lebih

besar dibandingkan dengan kalium diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 15 menit

karena mempunyai rata-rata AUC yang lebih kecil yaitu 380,97 ± 8,51.

Apabila rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 4,48 mg/kgBB selang

waktu 15 menit dibandingkan dengan rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak

dengan dosis yang sama yaitu 4,48 mg/kgBB dengan selang waktu yang lebih lama

yaitu 30 menit (251,45 ± 7,04) menunjukkan hasil yang berbeda bermakna. Hasil

yang berbeda bermakna dari perbandingan rata-rata AUC kelompok kalium

diklofenak 4,48 mg/kgBB selang waktu 15 dengan 30 menit menunjukkan

perbedaan aktivitas antiinflamasi yang signifikan dari kedua kelompok tersebut.

Kalium diklofenak 4,48 mg/kg selang waktu 30 menit mempunyai aktivitas


9

antiinflamasi lebih besar dibandingkan dengan kalium diklofenak 4,48 mg/kgBB

selang waktu 15 menit karena mempunyai rata-rata AUC yang lebih kecil yaitu

251,45 ± 7,04. Jika rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 4,48 mg/kgBB

selang waktu 30 menit dibandingkan dengan rata-rata AUC kelompok kalium

diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 30 menit (447,61 ± 4,23) menunjukkan hasil

yang berbeda bermakna. Hasil yang berbeda bermakna dari perbandingan rata-rata

AUC kelompok kalium diklofenak 4,48 mg/kgBB selang waktu 30 menit dengan

rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 30 menit

menunjukkan perbedaan aktivitas antiinflamasi yang signifikan dari kedua

kelompok tersebut. Rata-rata AUC kelompok kalium diklofenak 4,48 mg/kgBB

selang waktu 30 yang lebih kecil daripada rata-rata AUC kelompok kalium

diklofenak 9,1 mg/kgBB selang waktu 30 menit memperlihatkan aktivitas

antiinflamasi yang lebih besar.

Dari data diatas, dapat ditarik kesimpulan bahwa pemberian Kalium

diklofenak dosis 4,48 mg/kgBB dengan selang waktu pemberian 30 menit

mempunyai rata-rata AUC yang paling kecil. Rata-rata AUC paling kecil

menunjukkan aktivitas antiinflamasi dan penurunan udem yang paling besar

sehingga dosis pemberian Kalium diklofenak yang digunakan untuk uji aktivitas

antiinflamasi yaitu 4,48 mg/kgBB dan selang waktu pemberian karagenin yaitu 30

menit. Semakin kecil AUC suatu senyawa menunjukkan kemampuan menurunkan

udem atau efek antiinflamasi yang semakin besar.

Uji aktivitas antiinflamasi

Uji aktivitas antiinflamasi bertujuan untuk mendapatkan dosis efektif dari

ekstrak metanol 90% kulit Alpukat. Aktivitas antiinflamasi dilihat melalui

pengukuran udem telapak kaki mencit jantan galur Swiss yang terinduksi karagenin

1% dengan menggunakan jangka sorong digital. Jangka sorong digital digunakan

karena pemakaian alatnya yang sederhana, mempermudah pembacaan, serta

reprodusibilitasnya yang tinggi. Penggunaan karagenin dikarenakan karagenin

memiliki efek yang cepat, tidak meninggalkan bekas dan kerusakan pada jaringan

(Siswanto dan Nurulita, 2005). Konsentrasi karagenin sebesar 1% dikarenakan


10

dengan konsentrasi tersebut sudah dapat menimbulkan udem dan juga untuk

efisiensi bahan.

Uji aktivitas antiinflamasi dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok

kontrol negatif, kontrol positif, ekstrak dosis I (830 mg/kgBB), ekstrak dosis II

(1670 mg/kgBB), dan ekstrak dosis III (3330 g/kgBB). Kelompok kontrol negatif

bertujuan untuk melihat apakah pelarut yang digunakan memiliki aktivitas

antiinflamasi atau tidak, sedangkan kontrol positif untuk perbandingan efek

antiinflamasi ekstrak dengan obat antiinflamasi yang sudah ada di pasaran yaitu

kalium diklofenak. Kalium diklofenak yang digunakan adalah Cataflam Fast®

yang berisi Kalium diklofenak 50 mg dalam bentuk serbuk supaya lebih mudah

larut sehingga akan lebih cepat terabsorbsi. Cataflam Fast® diabsorbsi 100%

melalui oral dan sebanyak 50% beredar secara sistemik setelah first-pass

metabolism. Kadar serum puncak didapati setelah 1 jam (Novartis, 2011). Efek

antiinflamasi ditunjukkan dengan penurunan penurunan tebal udem nilai tiap satuan

waktu setelah pemberian karagenin 1% yang digambarkan dengan adanya

penurunan nilai AUC total (mm.menit).

Mencit ditimbang terlebih dahulu sebelum memulai uji aktivitas

antiinflamasi untuk mendapatkan mencit dengan bobot 20-30 g sesuai kriteria yang

telah ditentukan sebelumnya. Mencit yang bobotnya kurang dikelompokkan untuk

diberi makan lebih banyak agar terjadi kenaikan berat badan sehingga dapat

digunakan untuk pengujian berikutnya, sedangkan mencit dengan berat badan

berlebih dikelompokkan dengan pengurangan makan agar terjadi penurunan berat

badan. Sebelum uji, mencit dipuasakan selama 24 jam agar tidak terjadi intervensi

makanan terhadap absorbs perlakuan secara peroral.

Tebal udem kaki mencit diperoleh dari selisih antara telapak kaki kanan

(karagenin) dengan telapak kaki kiri (spuit kosong). Tujuan kaki kiri disuntik

dengan spuit kosong adalah untuk melihat inflamasi yang ditimbulkan oleh spuit

itu sendiri. Jadi, hasil selisih yang diperoleh merupakan inflamasi yang ditimbulkan

oleh senyawa uji. Nilai AUC yang besar menunjukkan penurunan tebal udem yang

semakin kecil. Nilai rata-rata AUC total dan hasil uji LSD AUC total pada


11

kelompok perlakuan ekstrak metanol kulit Alpukat serta kelompok kontrol negatif

dan positif dapat dilihat pada tabel III dan IV.

Uji Shapiro Wilk menunjukkan bahwa data semua kelompok terdistribusi

secara normal (p > 0,05). Lalu dilakukan uji ANOVA untuk melihat apakah

terdapat perbedaan bermakna di antara kelompok-kelompok perlakuan. Hasil yang

didapatkan p < 0,05 yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna di

antara kelompok-kelompok perlakuan. Maka dari itu, setelah uji ANOVA

dilakukan uji LSD.

Tabel III. Rata-rata AUC Total (mm.menit) pada Kelompok Uji Antiinflamasi

(N=5)

Kelompok Rata-rata AUC total

(mm.menit) (�� ± SE) Nilai p

Kontrol negatif CMC-Na 474,34 ± 7,99 0,378 (N)

Kontrol positif diklofenak

dosis 4,48 mg/kg BB 249,11 ± 7,80 0,396 (N)

Ekstrak Metanol dosis 833

mg/kgBB 240,34 ± 6,04 0,236 (N)


mg/kgBB 234,72 ± 9,83 0,088(N)


mg/kgBB 196,32 ± 17,98 0,306(N)

Keterangan :

�� = rata-rata

SE = Standard Error (SD/akar n)

N = distribusi data normal (p>0,05)

Tabel IV. Hasil Uji LSD AUC Total (mm.menit) pada Kelompok Uji Antiinflamasi

(n=5)


12

Kelompok

Ekstrak

dosis 830

mg/kgBB

Ekstrak

dosis 1670

mg/kgBB

Ekstrak

dosis 3330

mg/kgBB

Kontrol

positif

Kontrol

negatif

Ekstrak dosis

830 mg/kgBB - BTB BB BTB BB

Ekstrak dosis

1670 mg/kgBB BTB - BB BTB BB

Ekstrak dosis

3330 mg/kgBB BB BB - BB BB

Kontrol positif BTB BTB BB - BB

Kontrol negatif BB BB BB BB -

Keterangan :

BB = Berbeda Bermakna (p<0,05)

BTB = Berbeda Tidak Bermakna (p>0,05)

Pada tabel III, dapat dilihat bahwa kelompok kontrol negatif CMC-Na 1%

mempunyai rata-rata AUC paling besar. Hal ini menunjukkan bahwa pelarut

ekstrak yaitu CMC-Na 1% tidak memiliki aktivitas antiinflamasi (Kou dkk., 2005).

Rata-rata AUC kelompok kontrol positif (249,11 ± 7,80) bila dibandingkan dengan

rata-rata AUC kontrol negatif (474,34 ± 7,99) menunjukkan hasil yang berbeda

bermakna. Hasil yang berbeda bermakna dari perbandingan rata-rata AUC

kelompok kontrol positif dengan rata-rata AUC kelompok kontrol negatif

memperlihatkan bahwa terdapat perbedaan efek antiinflamasi yang signifikan,

dimana efek antiinflamasi kontrol positif lebih besar karena memiliki rata-rata AUC

yang lebih kecil.

Jika rata-rata AUC kelompok ekstrak dosis 830 (240,34 ± 6,04), 1670

(234,72 ± 9,83), 3330 mg/kgBB (196,32 ± 17,98) dibandingkan dengan rata-rata

AUC kelompok kontrol negatif (474,34 ± 7,99) menunjukkan hasil yang berbeda

bermakna. Hasil yang berbeda bermakna dari perbandingan rata-rata AUC tiga

kelompok peringkat dosis ekstrak dengan kontrol negatif membuktikan bahwa

ekstrak dosis 830, 1670, 3330 mg/kgB mempunyai efek antiinflamasi. Efek


13

antiinflamasi ekstrak dosis 830 dan 1670 mg/kgBB sebanding dengan kontrol

positif yang ditunjukkan dari hasil uji LSD pada tabel IV yang memperlihatkan

bahwa rata-rata AUC ketiga kelompok tersebut berbeda tidak bermakna. Masih

dibandingkan dengan kelompok kontrol positif, untuk kelompok ekstrak dosis

tertinggi yaitu dosis 3330 mg/kgBB mempunyai efek antiinflamasi lebih besar

daripada kelompok kontrol positif, dilihat dari nilai rata-rata AUC ekstrak dosis

3330 mg/kgBB yang lebih kecil dan hasil uji LSD kedua kelompok tersebut yang

berbeda bermakna (tabel IV).

Dapat dilihat kembali pada tabel IV, rata-rata AUC kelompok ekstrak dosis

830 mg/kgBB bila dibandingkan dengan kelompok ekstrak dosis 1670 mg/kgBB

menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna. Hasil yang berbeda tidak

bermakna tersebut menunjukkan bahwa aktivitas antiinflamasi dari kedua

kelompok dosis 830 mg/kgBB dan 1670 mg/kgBB sebanding. Aktivitas

antiinflamasi yang paling besar ditunjukkan oleh kelompok ekstrak dosis 3330

mg/kgBB dikarenakan ketika rata-rata AUC kelompok ekstrak dosis 3330

mg/kgBB dibandingkan dengan rata-rata AUC kelompok ekstrak dosis 830

mg/kgBB dan 1670 mg/kgBB menunjukkan hasil berbeda bermakna dimana rata-

rata AUC kelompok ekstrak dosis 3330 mg/kgBB paling kecil.

Dengan nilai AUC yang paling kecil (196,32 ± 17,98), dapat disimpulkan

bahwa ekstrak dosis 3330 mg/kgBB merupakan dosis efektif karena mempunyai

efek antiinflamasi yang paling besar dibandingkan ekstrak metanol dosis 830

mg/kgBB, 1670 mg/kgBB serta kontrol positif yaitu Cataflam Fast® yang telah

beredar di pasaran dan telah teruji efek antiinflamasinya. Dosis efektif merupakan

dosis ekstrak yang menimbullkan efek antiinflamasi paling besar.

Ekstrak metanol dosis 3330 mg/kgBB mempunyai efek antiinflamasi paling

besar disebabkan karena semakin besar dosis ekstrak yang diberikan, efek

antiinflamasi yang ditimbulkan juga semakin besar. Di dalam dosis ekstrak yang

besar terdapat banyak senyawa-senyawa fenolik yaitu dari golongan flavonoid,

asam hidroksinamat, dan prosianidin. Golongan fenol dan flavonoid dan

merupakan sumber radical scavenger atau antioksidan (Lisdawati dan Kardono,

2006). Antioksidan merupakan senyawa yang dapat mengikat radikal bebas dengan


14

menyediakan elektron untuk senyawa radikal bebas sehingga kerusakan jaringan

yang lebih parah dapat terhindarkan (Nadler, 2007). Antioksidan sendiri dapat

mengurangi inflamasi karena mengikat radikal bebas yang dapat merusak jaringan

dan menimbulkan inflamasi (Hidalgo, 2010). Semakin banyak senyawa-senyawa

fenol dan flavonoid yang berfungsi sebagai antioksidan, maka sebanding dengan

potensi antiinflamasi yang semakin besar (Do dkk., 2014). Namun, belum

diketahui secara pasti apakah golongan senyawa fenolik, flavonoid, prosianidin

atau asam hidroksinamat yang terkandung dalam ekstrak metanol kulit Alpukat

sehingga ekstrak metanol kulit Alpukat mampu memberikan efek antiinflamasi.

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut berupa uji kualitatif yaitu fraksinasi untuk

membuktikan hal tersebut.

Uji persen penghambatan inflamasi

Persen penghambatan inflamasi digunakan untuk mengukur seberapa besar

suatu senyawa dapat menghambat efek inflamasi yang ditimbulkan oleh karagenin

dengan menghitung selisih antara AUC mencit perlakuan dan rata-rata kelompok

kontrol negatif dibandingkan dengan AUC rata-rata kelompok kontrol negatif.

Senyawa yang diduga memiliki efek antiinflamasi diharapkan memiliki nilai rata-

rata persen penghambatan inflamasi yang besar.

Tabel V. Rata-rata Persen Penghambatan Inflamasi Tiap Mencit pada Masing-

masing Kelompok

Perlakuan %Penghambatan

Inflamasi

Kontrol positif 47,48

Ekstrak dosis 830 mg/kgBB 49,33



Tabel V menunjukkan persen penghambatan inflamasi tiap mencit pada

masing-masing kelompok perlakuan. Hasil persen penghambatan inflamasi dari


15

paling kecil ke paling besar yaitu kontrol negatif, kontrol positif,ekstrak dosis 830,

1670, dan 3330 mg/kgBB. Persen penghambatan inflamasi paling besar yaitu dari

kelompok ekstrak 3330 mg/kgBB yang berarti kemampuan antiinflamasinya paling

besar. Semakin besar persen penghambatan inflamasi semakin besar penurunan

udem pada kaki mencit sehingga semakin besar efek antiinflamasi yang

ditimbulkan. Hasil dari persen penghambatan inflamasi ini memperkuat

kesimpulan dari uji LSD bahwa ekstrak dosis 3330 mg/kgBB merupakan dosis

efektif dari ekstrak metanol kulit Alpukat. Dosis efektif merupakan dosis ekstrak

yang menimbulkan efek antiinflamasi paling besar.

KESIMPULAN

Ekstrak metanol kulit Alpukat memiliki efek antiinflamasi pada mencit jantan galur

Swiss terinduksi karagenin 1% dengan dosis efektif yaitu 3330 mg/kgBB.

SARAN

Untuk penelitian selanjutnya, peneliti mempunyai sebuah saran yaitu dilakukan uji

kualitatif yaitu fraksinasi untuk mendeteksi apakah terdapat golongan-golongan

senyawa yang bertanggung jawab terhadap efek antiinflamasi.

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, G., 2009, Seri Farmasi Industri-2: Teknologi Bahan Alam.

Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M.K.C, Agomuo, E.N., Adindu, E.A., Odika, P.C.,

Lele, K.C., Egejuru, L., Anudike, J., 2012, Chemical Composition of

Persea americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS, 11(2), 347.

Do, Q.D., Angkawijaya, A.E., Nguyen, P.L.T., Huynh, L.H., Soetaredjo, F.E.,

Ismadji, S., and Ju, Y.H., Effect of extraction solvent on total phenol

content, total flavonoid content, and antioxidant activity of Limnophila

aromatic, Journal of Food and Drug Analysis, 30 (9), 1-7.


16

Hidalgo, M., Sánchez-Moreno, C., & Pascual-Teresa, S, 2010, Flavonoid-flavonoid

interaction and its effect on their antioxidant activity, Food Chemistry,

121(3), 691−696.

Kim, H.P., Son, K.H., Chang, H.W., and Kang, S.S., 2004, Anti-inflamatory Plant

Flavonoids and Cellular Action Mechanism, Journal of Pharmacological

Science, 96 (1), 229-245.

Koolman, J, and Roehm, K.H., 2005, Color Atlas of Biochemistry.

Kosinska, A., Karamac, M., Estrella, I., Hernandez, T., Bartolome, B., and Dykes,

G.A., 2012, Phenolic Compound Profiles and Antioxidant Capacity of

Persea americana Mill. Peels and Seeds of Two Varieties, J. Agric. Food

Chem., 60, 4613-4619.

Kou, J., Ni, Y., Li, N., Wang, J., Liu, L., and Jiang, Z.H., 2005, Analgesic and Anti-

Inflammatory Activities of Total Extract and Individual Fractions of

Chinese Medicinal Ants Polyrhachis lamellidens, Department of

Traditional Chinese Prescription, 28 (1), 176-180.

Lisdawati V. dan Kardono L.B.S., 2006, Antioksidan dari Berbagai Fraksi Ekstrak

Daging Buah dan Kulit Biji Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa), Media

Litbang Kesehatan, 16(4), 1-7.

Mycek, M.J., Harvey, R.A., dan Champe, P.C., 2006, Farmakologi: Ulasan

Bergambar, Edisi 2, Jakarta:Widya Medika, 404-414.

Nadler, B., 2007, Inflammation, Free Radicals, Oxidative Stress, and Antioxidants,

http://www.beverlynadler.com/html/inflammation.html, diakses pada

tanggal 24 Agustus 2017.

Novartis, 2011, Cataflam, New Jersey:Novartis Pharmaceutical Corporation, 1-4.

Rodríguez-Carpena, J., Morcuende, D., Andrade, M.J., Kylli, P., and Estévez, M,

2011, Avocado (Persea americana Mill.) Phenolics, in vitro antioxidante

and antimicrobial activities, and inhibition of lipid and protein oxidation in

porcine patties, Journal Agricultural Food Chemistry, 59(10), 5625-5635.

Sagala, N., 2013, Efek Antiinflamasi Kombinasi Infusa Daun Ilee (Coleus

antropurpureus L. Benth) Dosis 140 mg/kgBB dengan Bunga Telang

(Clitoria ternatea L.) Dosis 328;655;1310 mg/kgBB pada Udema Telapak


17

Kaki Mencit Betina Terinduksi Karagenin dengan Pengukuran Jangka

Sorong, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Seyoum, A., Asres, K., dan El-Ficky, F.K., 2006, Structure-Radical Scavenging

Activity Relationships of Flavonoids, Phytochemistry, 67, 2058-2070.

Siswanto, A., dan Nurulita, N.A., 2005, Daya Anti-inflamasi Infus Daun Mahkota

Dewa (Phaleria macrocarpa Scheff Boerl) pada Tikus Putih (Rattus

norvegicus) Jantan, Prosiding Seminar Nasional TOI XXVII.

Tianri, S.V., 2016, Uji aktivitas anti-inflamasi ekstrak metanol biji alpukat (Persea

americana Mill.) pada mencit jantan terinduksi karagenin, Skripsi,

Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Vinha, A.F., Moreira, J., and Barreira, S.V.P., 2013, Physicochemical Parameters,

Phytochemical Composition and Antioxidant Activity of the Algarvian

Avocado (Persea americana Mill.), Journal of Agricultural Science, 5(12),

100-105.

Yasir, M., Das, S., and Kharya, M. D., 2010, The phytochemical and

pharmacological profile of Persea americana Mill, Department of

Pharmacy, 4(7), 77-83.


18

LAMPIRAN


19

Lampiran 1. Surat Pengesahan Determinasi Kulit Persea americana Mill.


20

Lampiran 2. Surat Kalibrasi Jangka Sorong Digital


21

Lampiran 3. Surat Legalitas Penggunaan SPSS


22

Lampiran 4. Surat Ethical Clearance


23

Lampiran 5. Data Perhitungan Dosis dan Rendemen

a. Dosis CMC-Na 1%

D x BB = C x V

D x 30 g = 1 g/100 mL x 1 mL

D = 0,33 mg/gBB

b. Dosis Karagenin

Penggunaan karagenin dengan dosis 25 mg/kgBB mengacu pada penelitian

Wiliamson dkk. (2005). Karagenin disuntikkan secara subplantar dengan

volume pemberian yaitu 0,05 mL. Karagenin yang digunakan pada

penelitian ini mempunyai konsentrasi 1% yang dilarutkan ke dalam 0,9%

NaCl. Berikut adalah perhitungannya

D x 20 g = 10 mg/mL x 0,05 mL

D = 0,025 mg/gBB

= 25 mg/kgBB

c. Dosis Kalium diklofenak

Dosis Kalium diklofenak mengacu pada penelitian Djunarko dkk. (2003)

dan Sagala (2013). Djunarko dkk. (2003) melakukan penelitian dosis

Kalium diklofenak untuk tikus 200 g adalah 32 mg/kgBB, lalu dikonversi

ke mencit dengan berat 20 g menjadi 4,48 mg/kgBB. Sagala (2013)

melakukan penelitian dosis Kalium diklofenak untuk manusia berat 50 kg

adalah 50 mg, sehingga dosis untuk manusia berat 70 kg adalah 70 mg.

Ketika dosis tersebut dikonversi ke mencit dengan berat 20 g dikalikan

sebesar 0,0026 menjadi 9,1 mg/kgBB

D = 70 mg x 0,0026 / 20 g = 9,1 mg/kgBB

d. Dosis Ekstrak Metanol Kulit Alpukat

D x 30 g = 100 mg/mL x 1 mL

D = 3,33 mg/gBB = 3330 mg/kgBB dosis tertinggi

3,33 mg/gBB / 2 = 1,67 mg/gBB = 1670 mg/kgBB dosis tengah

1,67 mg/gBB / 2 = 0,83 mg/gBB = 830 mg/kgBB dosis rendah


24

e. Data Bobot Tetap

Cawan 1

Jam 0 = 47,237 g

Jam 1 = 47,212 g

Jam 2 = 47,212 g

Cawan 2

Jam 0 = 44,543 g

Jam 1 = 44,520 g

Jam 2 = 44,520 g

f. Perhitungan Rendemen

Ekstrak kental 1

Cawan kosong = 44,454 g

Cawan+isi = 47,212 g

Isi = 2,768 g

Ekstrak kental 2

Cawan kosong = 41,326 g

Cawan+isi = 44,520 g

Isi = 3,294 g

%𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 =2,768 𝑔 + 3,294 𝑔

100 𝑔× 100% = 6,062%


25

Lampiran 6. Kulit Alpukat dan Ekstrak Kulit Alpukat

Gambar 1. Kulit Alpukat Gambar 2. Kulit Alpukat Kering

Gambar 4. Ekstrak kental Kulit Alpukat

Gambar 3. Serbuk Kulit Alpukat


26

Lampiran 7. Pembuatan Udem dan Pengukuran Telapak Kaki Mencit

Gambar 5. Pemberian secara peroral Gambar 6. Pemberian garis pengukuran

Gambar 8. Pengukuran udem

Gambar 7. Injeksi secara subplantar


27

Lampiran 8. Analisa Statistika Data Orientasi Penentuan Dosis dan Selang Waktu

Pemberian Diklofenak

1. Pengujian Normalitas

Tests of Normality

Kelompok

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Udem Kalium Diklofenak

4,48 15 menit ,288 3 . ,929 3 ,484

Kalium diklofenak 4,48

30 menit ,374 3 . ,777 3 ,061

Kalium Diklofenak 9.1

15 menit ,363 3 . ,802 3 ,118

Kalium Diklofenak 9.1

30 menit ,376 3 . ,772 3 ,051

CMC-Na 30 menit ,259 3 . ,959 3 ,613

a. Lilliefors Significance Correction

2. Pengujian Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances

AUC

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

2,188 4 10 ,144

3. ANOVA

ANOVA

AUC

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 87059,390 4 21764,847 225,743 ,000

Within Groups 964,144 10 96,414

Total 88023,534 14


28

4. Rata-rata total AUC dan standard error (SE) pada uji orientasi

Descriptives

Kelompok Statistic Std. Error

AUC Kalium Diklofenak

4,48 15 menit

Mean 380,9733 8,51329

95% Confidence

Interval for Mean

Lower

Bound 344,3436

Upper

Bound 417,6031

5% Trimmed Mean .

Median 385,5200

Variance 217,428

Std. Deviation 14,74545

Minimum 364,49

Maximum 392,91

Range 28,42

Interquartile Range .

Skewness -1,256 1,225

Kurtosis . .

Kalium diklofenak

4,48 30 menit

Mean 251,4500 7,04360

95% Confidence

Interval for Mean

Lower

Bound 221,1438

Upper

Bound 281,7562

5% Trimmed Mean .

Median 244,8000

Variance 148,837


Minimum 244,02

Maximum 265,53

Range 21,51


Skewness 1,724 1,225

Kurtosis . .

Kalium Diklofenak

9.1 15 menit

Mean 422,5767 2,70186

95% Confidence

Interval for Mean

Lower

Bound 410,9515


29

Upper

Bound 434,2018

5% Trimmed Mean .

Median 420,1700

Variance 21,900


Minimum 419,59

Maximum 427,97

Range 8,38



Kurtosis . .

Kalium Diklofenak

9.1 30 menit

Mean 447,6133 4,22983

95% Confidence

Interval for Mean

Lower

Bound 429,4037

Upper

Bound 465,8163

5% Trimmed Mean .

Median 443,5700

Variance 53,715


Minimum 443,19

Maximum 456,07

Range 12,88



Kurtosis . .


30

Multiple Comparisons

Dependent Variable: AUC

LSD

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean

Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence

Interval

Lower

Bound

Upper

Bound

Kalium

Diklofenak

4,48 15 menit

Kalium diklofenak 4,48 30

menit 129,52333* 8,01725 ,000 111,6598 147,3869

Kalium Diklofenak 9,1 15

menit -41,60333* 8,01725 ,000 -59,4669 -23,7398


menit -66,63667* 8,01725 ,000 -84,5002 -48,7731

Kalium

diklofenak

4,48 30 menit


menit -129,52333* 8,01725 ,000 -147,3869 -111,6598


menit -171,12667* 8,01725 ,000 -188,9902 -153,2631


menit -196,16000* 8,01725 ,000 -214,0235 -178,2965

Kalium

Diklofenak

9,1 15 menit


menit 41,60333* 8,01725 ,000 23,7398 59,4669


menit 171,12667* 8,01725 ,000 153,2631 188,9902


menit -25,03333* 8,01725 ,011 -42,8969 -7,1698

Kalium

Diklofenak

9,1 30 menit


menit 66,63667* 8,01725 ,000 48,7731 84,5002


menit 196,16000* 8,01725 ,000 178,2965 214,0235


menit 25,03333* 8,01725 ,011 7,1698 42,8969

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.


31

Lampiran 9. Analisis Statistika Nilai Data AUC Total pada Uji Antiinflamasi

Ekstrak Metanol Kulit Alpukat

1. Pengujian Normalitas

Tests of Normality

Kelompok

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Udem Kontrol negatif ,226 5 ,200* ,894 5 ,378

Kontrol positif ,227 5 ,200* ,898 5 ,396

Ekstrak Metanol dosis

1 ,265 5 ,200* ,862 5 ,236


2 ,326 5 ,088 ,804 5 ,088


3 ,201 5 ,200* ,879 5 ,306

*. This is a lower bound of the true significance.

a. Lilliefors Significance Correction

2. Pengujian Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances

AUC

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

2,207 4 20 ,105

3. ANOVA

ANOVA

AUC

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Between

Groups 246701,631 4 61675,408 106,102 ,000

Within Groups 11625,628 20 581,281

Total 258327,259 24


32

4. Rata-rata Toral AUC dan Standard Error (SE)

Descriptives

Kelompok Statistic Std. Error

Udem Kontrol negatif Mean 474,3360 7,98583

95% Confidence Interval for

Mean

Lower

Bound 452,1638

Upper

Bound 496,5082

5% Trimmed Mean 473,6300

Median 470,5300

Variance 318,867


Minimum 458,11

Maximum 503,27

Range 45,16

Interquartile Range 30,36

Skewness 1,325 ,913

Kurtosis 1,747 2,000

Kontrol positif Mean 249,1100 7,80456


Mean

Lower

Bound 227,4411

Upper

Bound 270,7789


Median 244,8000

Variance 304,556


Minimum 224,63

Maximum 266,57

Range 41,94


Skewness -,402 ,913

Kurtosis -,914 2,000

Ekstrak dosis 830

mg/kgBB

Mean 240,3360 6,04027


Mean

Lower

Bound 223,5655


33

Upper

Bound 257,1065


Median 234,5900

Variance 182,424


Minimum 228,41

Maximum 262,62

Range 34,21


Skewness 1,493 ,913

Kurtosis 2,164 2,000

Ekstrak dosis

1670 mg/kgBB

Mean 234,7220 9,83321


Mean

Lower

Bound 207,4206

Upper

Bound 262,0234


Median 247,9500

Variance 483,460


Minimum 205,33

Maximum 252,22

Range 46,89


Skewness -,741 ,913

Kurtosis -2,411 2,000

Ekstrak dosis

3330 mg/kgBB

Mean 196,3240 17,98388


Mean

Lower

Bound 146,3927

Upper

Bound 246,2553


Median 186,6800

Variance 1617,099



34

Minimum 162,69

Maximum 259,62

Range 96,93


Skewness 1,163 ,913

Kurtosis ,853 2,000

Multiple Comparisons

Dependent Variable: AUC

LSD

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean

Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower

Bound

Upper

Bound

Kontrol negatif Kontrol positif 225,22600* 15,24836 ,000 193,4185 257,0335

Ekstrak dosis 1 234,00000* 15,24836 ,000 202,1925 265,8075

Ekstrak dosis 2 239,61400* 15,24836 ,000 207,8065 271,4215

Ekstrak dosis 3 278,01200* 15,24836 ,000 246,2045 309,8195

Kontrol positif Kontrol negatif -225,22600* 15,24836 ,000 -257,0335 -193,4185

Ekstrak dosis 1 8,77400 15,24836 ,571 -23,0335 40,5815

Ekstrak dosis 2 14,38800 15,24836 ,357 -17,4195 46,1955

Ekstrak dosis 3 52,78600* 15,24836 ,002 20,9785 84,5935

Ekstrak dosis 1 Kontrol negatif -234,00000* 15,24836 ,000 -265,8075 -202,1925

Kontrol positif -8,77400 15,24836 ,571 -40,5815 23,0335

Ekstrak dosis 2 5,61400 15,24836 ,717 -26,1935 37,4215

Ekstrak dosis 3 44,01200* 15,24836 ,009 12,2045 75,8195


Kontrol positif -14,38800 15,24836 ,357 -46,1955 17,4195

Ekstrak dosis 1 -5,61400 15,24836 ,717 -37,4215 26,1935

Ekstrak dosis 3 38,39800* 15,24836 ,020 6,5905 70,2055


Kontrol positif -52,78600* 15,24836 ,002 -84,5935 -20,9785

Ekstrak dosis 1 -44,01200* 15,24836 ,009 -75,8195 -12,2045

Ekstrak dosis 2 -38,39800* 15,24836 ,020 -70,2055 -6,5905

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.


35

BIOGRAFI PENULIS

Penulis bernama lengkap Alexander Vito Harmony

Swastika Yuan lahir di Semarang, 5 November 1996.

Penulis merupakan anak ketiga dari Bapak Oei,

Leonardus Widadi dan Sri Purbaningsih Sastro.

Pendidikan formal yang telah ditempuh yaitu TK PL

Bernardus Semarang (2001-2002), SD PL Bernardus

Semarang (2002-2008), SMP PL Domenico Savio

Semarang (2008-2011), SMA Kolese Loyola Semarang

(2011-2014). Pada tahun 2014, penulis melanjutkan

pendidikan sarjana ke Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Semasa pendidikannya penulis aktif ikut berpartisipasi mengikuti kepanitiaan

seperti Pelepasan Wisuda II (2014), Tiga Hari Temu Akrab Farmasi atau TITRASI

(2015 dan 2016), Pharmacy 3 on 3 Basketball (2015), dan Donor Darah JMKI

(2016). Selain kepanitiaan, penulis juga ikut berpartisipasi menjadi Asisten Dosen

Kimia Organik (2016 dan 2017), Kimia Analisis (2017), dan Formulasi Teknologi

Sediaan Farmasi (2017).


UJI EFEK ANTI-INFLAMASI EKSTRAK METANOL KULIT … · Antiinflamasi (n=5) ... Termasuk dalam OAINS...

Documents

Transcript of UJI EFEK ANTI-INFLAMASI EKSTRAK METANOL KULIT … · Antiinflamasi (n=5) ... Termasuk dalam OAINS...