Bagi teman-teman yang akan ujian praktikum Mikrobiologi, semangat ya. Ini rangkuman catatan mimin waktu ujian praktikum Mikro.

A. Alat

Baiklah kita mulai dari alat-alat :

1. Inkubator :

Yaitu suatu alat yang berfungsinya sebagai alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol. Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur waktu.

2. Ose / Jarum Inokulum (inoculating loop)Yaitu jarum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ditumbuhkan

ke media baru. (mimin yakin pasti tau bentuknya yang mana hehe *-* )3. Cawan Petri ( Petri Dish) Cawan petri berfungsi untuk membiakkan (kultivasi) mikroorganisme. Medium dapat

dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan petri tersedia dalam  berbagai macam ukuran, diameter cawan yang biasa berdiameter 15 cm dapat menampung media sebanyak 15-20 ml, sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak 10 ml.

4. Autoklaf  (Autoclave)Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu

benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (121 0C, 15 lbs) selama kurang lebih 15 menit.

Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten yang diproduksi oleh bakteri, sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik.

Endospora dapat dibunuh pada suhu 100 °C, yang merupakan titik didih air pada tekanan atmosfer normal. Pada suhu 121 °C dalam tekanan 1 atm, endospora dapat dibunuh dalam waktu 4-5 menit, dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam waktu 6-30 detik pada suhu 65 °C. (Wah bentuknya mirip dandang nasi/sop ya, jadi ngiler :D)

5. Oven

Oven Berfungsi untuk sterilisasi kering. alat-alat yang disterilkan menggunakan oven antaralain  peralatan gelas seperti cawan petri, tabung reaksi, dll. serilisasi kerning dengan oven dilakukan dengan cara memanaskan dengan suhu 160-170 0 C selama 1-2 jam. (Bentuknya mirip binggo dengan oven kue di tukang roti. Jangan salah masukkan ya kalau ntar jadi ahli mikrobiologi).

6. Biological Safety Cabinet / Laminar Air Flow Biological Safety Cabinet (BSC) atau dapat juga disebut Laminar Air Flow (LAF) adalah

alat yang berguna untuk bekerja secara aseptis karena BSC mempunyai pola pengaturan dan penyaring aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasisinar UV beberapa jam sebelum digunakan.

(Kalau pernah main-main ke rumah sakit anak atau lihat di tv, pasti ingat benda ini mirip banget. Emang benda ini prinsip kerjanya sama dengan di rumah sakit anak. Agar tidak terkontaminasi deng.)

7. Anaerobic jarsAnaerobic jars adalah suatu wadah berpenutup kedap udara yang digunakan untuk

kultivasi mikroorganisme anaerobPrinsip kerja : Menyerap O2 dengan cara mengikatnya dengan Hsehingga terbentuk H2O yang

kemudian diserap lagi sehingga terciptakondisi yang anaerob.

8. Desikator  Prinsip kerja : Menjaga kelembapan dengan cara menyerap uap air (olehsilika gel).Fungsi : Menjaga objek (biakan) tetap pada berat normal.

9. Gas Eto Suhunya biasanya 55 0 C. Merupakan autoclave yang mengalami modifikasi. Alat ini bersifat bakterisidal dan sporasidal. Tidak tahan terhadap panas tinggi.

Tips mimin :1. Apa beda antiseptik dengan desinfektan? Hayooo2. Pemanasan <100 0 C dengan 100>0 C apa bedanya?

B. MediaSekarang kita cus ke media yang sering digunakan dan sering di tanya saat ujian.

HohOhoHo.1. Penanaman M.tuberculosis pakai media : (KOL). (mimin yakin ini bakal ditanya, tapi

jangan bilang-bilang ya)

- K = kudoh- O = ogawa- L = lowenstain jensen

2. Penanaman bakteri anaerob :- Agar darah - Brucella agar darah- Thyioglicolat - Thyioglicolat dengan antibiotik

3. Penanaman enterobakteri : (saat mimin ujian ini di tanyak mas broh).- DCLS- TCBS- Mc Conkey Agar

4. Penanaman mikologi : mikologi kan jamur, jadi mimin ingetnya : Pak Sudirman kena jamur di Daerah Anunya. (jadi ingat awalnya aja P dan S). - SDA- PDA

5. Penanaman media sensitivitas test : - Agar base - Mueller Hinton- DST - Supristol- BHI

C. Pewarnaan Mari sista kita belajar mewarnai ya.

1. Pewarnaan sederhana :Pakai Methyline blue yang digenangi selama 30 -60 detik.

2. Pewarnaan gram :a. Gram positif :

Bakterinya warna ungu. Kok bisa? Ya bisalah karena kan methylin blue. Jadi prinsipnya, pada bakteri gram +, di berwarna ungu karena sanggup mempertahankan warna dari pewarnaan walaupun disiram pakai alkohol.. Kalau gram -, gak sanggup untuk mempertahankan pewarnaan ungu, jadi dia ambil pewarnaan dari warna counter yakni merah).

b. Gram negatif :Bakterinya warna merah. Penjelasan udah atu di atas.

3. BTA (Bakteri Tahan Asam).o Pemeriksaan Mycobakterium :

Ziehl Neelsen Tan Thiam Hock

Prinsipnya pertama di genangi dengan zat warna fuchin basa yang mengandung fenol (carbol fuchin), lalu di lunturkan dengan asam keras H2SO4 atau HCl dalam alkohol 95%.

Zat warna yang digunkan :o Carbol fuchino Asam alkoholo Methyline blue

4. Pewarnaan kapsul pakai Gins Burri. (ini keluar mas bro waktu ujian mimin)5. Pewarnaan flagella pakai pewarnaan Gray6. Pewarnaan Chlamidya pakai :

a. Giemsab. Gimenez

Langsung ke soal latihan ya guys :1. Penanaman pada medium cair yang diisi dengan tabung terbalik untuk melihat

apakah ada gas atau tidak menggunakan jesnis tabung?Tabung duham

2. Pada penanman medium padat, menggunakan teknik penggoresan?o Radiano Sinambung

3. Yang merupakan bakteri kontaminan adalah : o Bacillus subtiliso Proteus sp

4. Pada penanman spesies Nisseria, maka dikultur di suasana mikroaerofilik, pada suhu 36,5-370c. Dilakukan di kultur di media ?

o Coklat agar atau thayer martin.5. Uji serologi ya sis.

a. Infeksi Troponema palladium akan mengakibatkan penyakit ? Sifilis

b. Untuk melakukan uji pada Troponema palladium dilakukan? Serologi (untuk mendeteksi antibodi).

c. Pada uji serologi dilakukan 2 tes yakni uji serologi nonspesifik dan spesifik.

Tes Nonspesifik (Reagins Test):

Menggunakan cardiolipin sebagai antigennya.

a. Tes Flokulasi (flocculation test) yaitu:

- VDRL (venereal disease research laboratory) test

- RPR (rapid plasma reagin) test

- Kahn test

b. Tes Ikatan Komplemen (complement fixation test) yaitu:

- Wassermann test

- Kolmer test

Uji Serologi Spesifik (tes spesifik)

Pada uji (test) ini dipakai antigen dari T. pallidum. Beberapa contoh uji ini

adalah:

a. TPHA (T. pallidum haemagglutination) test

b. TPI (T. pallidum immobilization) test

c. FTA-ABS (fluorescent treponemal antibody absorbed) test

1. Cocci Gram Positif Penyebab Infeksi Bernanah ( Pyogenic Cocci)A. STAPHYLOCOCCUS sp,

Ciri-ciri: Berbentuk sferis/ coccus/ bulat ; berdiameter : 1mikrometer Tersusun irreguler/ staphyle/ seperti Anggur ( A bunch of Grapes)Gram Positif ( warna= Ungu)Nonspora ( Tidak berspora)Nonmotil ( Tidak bergerak)Bersifat Aerob atau mikroaerob

Basil/ BatangBersporaCocci/ Bulat

Klasifikasi:

Spesies Warna Koloni

Hemolisa pada Agar Darah

Fermentasi pada Mannitol Salt Agar (MSA)

Koagulase Uji Sensitif NOVOBIOSIN

DNAase

S. aureus kuning emas

Beta Hemolytic

+ + + +

S. citreus/ S. saphropyticus

kuning citrun

Beta/ O - - + -

S. albus/ S. epidermidis

Putih/Alba Beta/ O - - - -

Untuk membedakan Staphylococcus sp. Dengan Streptococcus sp adalah dengan:

- Tes Katalase + ; Mengubah Hidrogen Peroksida(H2O2) menjadi H2O dan O2B. STREPTOCOCCUS

Ciri-ciri : Berbentuk sferis/ coccus/ bulatTersusun seperti berbentuk rantai.Gram Positif ( warna=ungu)Tidak Berspora

Klasifikasi :

Klasifikasi S. alpha Hemolyticus

S. Beta Hemolyticus

S. Gamma Hemolyticus (anhemolisa)

Hemolisa pada agar Darah

Tidak sempurna; tampak warna kehijauan di sekeliling koloni ( green hemolysis)

Sempurna ; + Clear ZOne

Tidak melisiskan darah

Untuk membedakan antara serogroup A(pyogenes) dan serogroup B(agalactie) Streptococcus Beta hemoliticus adalah dengan melakukan tes Basitrasin;

Serogroup A (+) basitrasin dan Serogroup B (-) basitrasin

C. Diplococcus PneumoniaePerbedaan antara Diplococcus pneumoniae dan Stertococcus viridans ( ada di penuntun)

2. Cocci Gram Negatif Penyebab Infeksi Bernanah( Pyogenic Cocci)A. Neiserria

Ciri-ciri : Gram negatif ( warna= Merah muda)

Tersusun berpasangan seperti biji kopi.

Klasifikasi : N. meningitis : membentuk asam dari glukosa dan maltosaN. gonorrhoeae : membentuk asam dari glukosa saja.

Kultur : - Agar Coklat- Thayer Martin

Ok guys, kan diatas udah di jelasin tentang beberapa hal pengalaman mimin selama ini. So,

mari kita baca ya dengan penuh hikmah dan secara seksama. Jangan lupa untuk diHayati ya !

(bukan hayati dan bang zainuddin ya hehehe). Mimin jamin ini bakal keluar (padahal mimin

bukan dosen heheh).

Apa yang terlihat Hasil Apa yang

dituliskan

tidak ditemukan BTA dalam 100 lapang pandang Negatif Neg

ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapang pandang (tuliskan

jumlah BTA yang ditemukan)

Scanty* Tulis jumlah BTA

ditemukan 10 – 99 BTA dlm 100 lapang pandang 1+ 1+

ditemukan 1 – 10 BTA setiap 1 lapang pandang(periksa

minimal 50 lapang pandang)

2+ 2+

ditemukan ≥ 10 BTA dalam 1 lapang pandang(periksa minimal

20 lapang pandang)

3+ 3+

Famili

Enterobacteriace

ae

Uji Uji TSI Fermentasi

Prod

uksi

Indo

le

Met

hyl R

ed

Vog

es-P

rosk

auer

Sim

mon

s’

Ure

a se

Mot

ilita

s

slan

t/but

t

Gas

H2S

Glu

kosa

Lak

tosa

Mal

tosa

Man

itol

Sukr

osa

Enterobacter spp. - - + + - +

a/a + - + + + + +

Escherichia coli + + - - - +

al/a + - + + + + +

Klebsiella spp. +/- - + + +/- -

a/a + - + + + + +

Proteus spp. +/- + - + + +

al/a + + + - - - +/-

Salmonella spp. - + - +/- - +

al/a +/- +/- + - + + -

Shigella spp. -/+ + - - - -

al/a - - + - - +/- -

No Organisme Fermentasi

Mannitol

Koagulase DNAse Novobiocin Hemolisa

1.

2.

3.

Staphylococcus aureus

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

+

-

-

+

-

-

+

-

-

S

S

R

Beta

Beta / O

O

Kalau mimin kasi tes udah bisa lah ya? Coba kita mulai, kan senin udah mau ujian .(>_<).

1. Apa perbedaan hemolisis alpha, beta, gamma? Kalau dari media bisa bedain gak?

Ingat ya ingat!

2. apa beda koagulase dengan katalase?

3. Kan ada tuh suasana dalam pembiakan bakteri, coba sebutkan seluruhnya, dan beda

seluruhnya?

4. Sebutkan flora normal yang ada di daerah oral, saluran cerna?

5. Penanaman mikologi menggunakan media apa ? (Ingat bang Sudirman ya)!

6. Untuk mewarnain flagella pakai apa?

7. Untuk mewarnai kapsul pakai apa?

8. Sebutkan perbedaan gram + dengan gram - ? Ingat lah itu saat kuliah mikro.

9. Media kultur c.albicans dimana ya? Bentuk medianya? Warnanya?

10. Cooked meet untuk kuman apa ? bentuk medianya gimana?

Dari ringkasan diatas, coba identifikasi gambar-gambar berikut ini !

Mimin kasih tips deh bonusnya tips bocoran hahaha !

Tau gak bedain secara mikroskop staphylococcus, streptococcus, nissereae !

Maaf ya gan, sista, kalau ada kesalahn atau terlalu

“lebay”, mimin hanya mencoba untuk share pengalaman juga

bagi ilmu dikit lah. Karena kesempurnaan itu milik Allah swt.

Follow Ig kita kakak : @danihrp6

@madtechan