7/31/2019 mikro respi

1/4

Mycobacterium tuberculosis

Karakteristik :

1. Berbentuk batang lurus atau agak bengkok dengan ukuran 0,2 - 0,4 x 1 - 4 um.2. Tumbuh lambat, koloni tampak setelah lebih kurang 2 minggu bahkan stelah 6-8 minggu3. Suhu optimum 35-37C, tidak tumbuh pada suhu 25C atau lebih dari 40C.4. Tidak tahan panas dan sinar UV, akan mati pada 6C selama 15-20 menit5. Biakan dapat mati jika terkena sinar matahari langsung selama 2 jam.6. Bakteri Tahan asam7. Bersifat non motil, non spora, non kapsul8. Tidak dapat tumbuh pada medium kultur biasa hanya pada enriched media egg-based, yaitu

LOWENSTEIN JENSEN MEDIUM (LJ), KUDOH, OGAWA, and BACTEC

9. Obligatif aerob,10.Dinding M. tuberculosis sangat kompleks, terdiri dari lapisan lemak cukup tinggi (60%).

Penyusun utama dinding sel M. tuberculosis ialah asam mikolat, lilin kompleks complex-

waxes), trehalosa dimikolat yang disebut cord factor, dan mycobacterial sulfolipids yang

berperan dalam virulensi.

Sputum konsentrat : sputum yang telah dihilangkan bahan-bahan lain yang ada di dalamnyadengan tujuan bakteri tahan asam lebih mudah dideteksi

Koloni pada Media Lwenstein-Jensen akan tampak pertumbuhan dalam waktu 34 mingguberwarna putih kekuning-kuningan, permukaan kering, kasar (tidak licin) dan rapuh dengan

tepi yang tidak beraturan (seperti bunga kol). Tepi : bergerigi

Pewarnaan gram

Tujuan

Melihat bentuk (morfologi ) bakteri Melihat reaksi/sifat pewarnaan Gram dari bakteri.

Disediakan

1. Preparat hapus sputum.2. Biakan bakteri A pd agar miring3. Biakan bakteri B pd agar miring

7/31/2019 mikro respi

2/4

4. Satu buah kaca benda5. NaCl 0,9% steril.6. Satu set zat warna Gram.

Cara kerja

1. Kaca benda 2 bagi atas A dan B.2. Buat preparat tipis dan rata bakteri A pd A, dan bakteri B pd bgn B3. Keringkan dan fiksasi.4. 4. Kaca benda/preparat 1 dan 2 mendatar di atas rak preparat,5. 5. Tuangi kristal violet 1-2 menit.6. 6. Buang zat warna, dan bilas7. 7. Tetesi lugol 30 detik.8. 8. Buang lugol dan bilas.9. 9. Lunturkan dgn alkohol 96% dan segera bilas.10.10. Tetesi air fuchsin 2 menit.11.11. Buang zat warna dan bilas.12.12. Periksalah di bawah mikroskop13.13. Gambarkan apa yang anda lihat !14.14. Buat kesimpulan hasil pewarnaan:15. - Warna Bakteri positif-Gram16. - Warna bakteri negatif-Gram17. - Warna sitoplasma sel18. - Warna inti sel19. - Warna latar belakang

1. Metode Ziehl-NeelsenDisediakan

1. Preparat hapus dari Sputum penderita 1 yang sudah difiksasi.

2. Satu set bahan bahan pewarnaan Ziehl-Neelsen, yang terdiri dari:- Larutan karbol fuchsin

7/31/2019 mikro respi

3/4

- Alkohol Asam

- Larutan methylen blue

3. Satu obor kecil yang terdiri dari kapas yang dipintal pada ujung satu kawat.4. Spiritus

Cara kerja

1. Letakkan preparat mendatar pada rak pewarnaan,

2. Tuangi seluruh kaca benda karbol fuchsin.

3. Panasi zat warna menguap, dinginkan dan panasi lagi. (3 kali dlm 10)

4. Cuci dengan air mengalir.

5. Lunturkan dengan alkohol asam 3%. Pelunturan dilakukan sampai preparat nampak

berwarna merah muda.

6. Segera cuci dengan air mengalir.

7. Beri zat warna kontras, yaitu larutan methylen blue 0,5%, selama 1 menit.

8. Cuci dengan air mengalir.

Metode Tanzil

Disediakan

1. Sputum penderita 2

2. Satu set bahan untuk pewarnaan modifikasi Kinyoun, yang terdiri dari :

Larutan Kinjoun (Carbol fuchsin) Larutan Gabbet, yang terdiri dari: Methylen blue dan alkohol asam

Cara kerja

1. Letakkan kedua preparat diatas rak pewarnaan

2. Tuangi larutan Kinyoun 3- 5 menit.

3. Buang zat warna dan bilas .

4. Lunturkan dengan alkohol asam semua zat warna larut.

5. Segera bilas, dan keringkan

6. Tuangi preparat dengan Methylen blue 3 menit.

7. Bilas dan keringkan.

8. Lihat di bawah mikroskop dengan pembesaran emersi , dan gambarkan morfologi serta

tuliskan bentuk dan sifat pewarnaan dari sel bakteri serta latar belakang preparat.

Klebsiella pneumoniae

1. Gram negatif yang berbentuk batang (basil).2. Bersifat non motil3. fakultatif an aerob4. memfermentasikan laktosa5. Indol (-)6. Dapat mereduksi nitrat7. banyak ditemukan di mulut, kulit, dan sal usus, namun habitat alami dari Klebsiella

pneumonia adalah di tanah

8. Dapat menyebabkan penyakit karena mempunyai dua tipe antigen pada permukaan selnya: Antigen OAntigen O adalah lipopolisakarida yang terdapat dalam sembilan varietas.

7/31/2019 mikro respi

4/4

Antigen K

Antigen K adalah polisakarida yang dikelilingi oleh kapsula dengan lebih dari 80 varietas.

TSI (Triple Sugar Iron) Test

Measures capability for gas (clear area) or hydrogen sulfide (H2S black) production fromfermentation of the carbohydrates glucose, sucrose, and lactose

Red=Alkaline and only glucose fermenter Yellow=Acidic and ferments all three sugars A=Proteus mirabilis B=Salmonella sp. C=E. Coli

SIM (Sulfide Indole Motility) Test

Measures ability to produce H2S (black), Indole from tryptophan metabolism (red), andmotility through spreading of inoculum

1=K. pneumoniae 2=E. coli 3=P. vulgaris 4=E. aerogenes