LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK PERCOBAAN II

PENETAPAN KADAR KARBOHIDRAT TOTAL Hari/ Tanggal Percobaan : Selasa/ 19 April 2011

Golongan/ Kelas : II/ FKK 2009

Dosen Jaga : Prof.Dr. Edy Meiyanto, M.Si., Apt.

Asisten Jaga : Titis Janu W., Candra Dwipayana

Nama Anggota :

1. Nisa Qurrota Ayun FA/08277

2. Jefrina Ayu Wardani FA/08282

3. Deamon Sakaraga FA/08403

4. Sheila Nabila Firdha FA/08285

5. Kanthi Noorani Utami FA/08289

6. Erika Emilia FA/08297

7. Zebby Fortunella Dyah P. FA/08298

8. I Made Ana Sanjaya FA/08301

9. Revika Pinnata FA/08305

10. Nurul Adila Dianastuti FA/08308

11. Hadiatussalamah FA/08309

12. Ika Restu Swastiningsih FA/08313

13. Dewa Ayu Putu Satrya D. FA/08314

14. Esty Oktaviarini Riyanti FA/08315

15. Septiana Tri Wahyuni FA/08324

16. Kusmiyati FA/08336

17. Romdlon Fauzi FA/08341

18. Dyah Ayu Safitri FA/08342

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK

PERCOBAAN III PENETAPAN KADAR KARBOHIDRAT TOTAL

Hari/Tanggal Praktikum : Selasa, 19 April 2011 Golongan : II

I. Tujuan Percobaan Agar mahasiswa mampu menetapkan kadar karbohidrat total dan GPT dalam sampel plasma dengan metode enzimatik. II. Prinsip Dasar Percobaan Enzim GOD akan mengoksidasi glukosa yang nantinya akan menghasilkan asam glukonat dan H2O2. H2O2 yang terbentuk akan direaksikan oleh peroksidase dan o-dianisidin dan kemudian dihasilkan senyawa kunonimin (reaksi Trinder) yang berwarna merah, yang bisa dibaca absorbansinya pada panjang gelombang 500nm. Reaksi: Glukosa + O2

GOD + asam glukonat + H2O2 O-dianisidin H2O2, peroksidase ion semiquinon + 4H2O III. ALAT DAN BAHAN

1. Alat

Alat yang digunakan adalah: a. Mikropipet b. Tabung reaksi dan rak c. Kuvet d. Spektrofotometer e. Blue & yellow tip f. Beker glass

2. Bahan a. Plasma darah b. Glukosa darah c. Aquadest d. Reagent Glukosa

i. Phosphate buffer pH 7,5 ii. Phenol iii. GOD iv. POD

v. 4-aminoantipyrin e. Reagent GPT - Reagent 1

• TCA pH 7,5 • L-alanine • LDH (Lactate dehidrogenase)

- Reagent 2 • 2-oxoglutarate • NADH

IV. METODE ENZIMATIK � Preparasi sampel (plasma) Ambil darah 6 ml Sentrifuge (2500 rpm, 5’) Pengambilan sampel darah.

- Penetapan kadar Glukosa Sampel plasma puasa10µL Sampel plasma tidak puasa 10 µL

Tambah Reagen GOD 1000 µL

inkubasi 10 menit di waterbath, suhu 37 ̊C

Baca absorbansi di λ 500 nm

Analisis Data

Blanko : aquadest 10 µL + reagen 1 ml Baku : larutan baku 10 µL + reagen 1 ml

� Penetapan kadar GPT 100 µL sampel + 1000 µL reagen I Inkubasi 5 menit pada suhu kamar

Tambah reagen II 250 µL, inkubasi 1 menit

Segera baca absorbansi pada � 340 nm (baca menit ke 0, 1, 2, 3)

V. DATA PERCOBAAN

Kadar Karbohidrat = �� ������ − �������

�� ���� − �������× 100 ��/ !

� Karbohidrat Total Absorbansi baku = 0,707

Absorbansi blanko = 0

Kel Replikasi Puasa Tidak Puasa

Abs Kadar Rata-rata Abs Kadar Rata-rata

1 Orig 0,335 47,38

41,96 I 0,280 39,60 II 0,275 38,90

2 Orig

0,476 67,327

62,282 I 0,414 58,557 II 0,431 60,962

3 Orig 0,267 37,765

43,281 I 0,330 46,676 II 0,321 45,403

4 Orig

0,521 73,69

73,36 I 0,536 75,81 II 0,499 70,58

5 Orig 0,267 39,04

36,44 I 0,265 37,48 II 0,232 32,81

� Penetapan GPT

Menit ke- Replikasi

0’ 1’ 2’ 3’

Orig 0,030 0,028 0,016 0,013

I 0,071 0,083 0,073 0,072

II 0,155 0,154 0,146 0,141

Rata ∆ A =∆#$%∆#&% ∆ #'

' x 2143u/I

∆ orig = 12,14 u/I

∆ I = 16,43 u/I

∆ II = 10,00 u/I

Rata-rata = 12,86 u/I

ANALISIS STATISTIK

SD = (dihitung dengan kalkulator)

CV = ()

* (,-.-/,-.-) × 100%

Keterangan:

Kelompok 1, 3, 5 : puasa

Kelompok 2, 4 : tidak puasa

Kel

Rata-rata kolesterol

total (mg/dL)

SD CV (%)

1 41,96 4,71 11,22 2 62,28 4,53 7,27 3 43,28 4,82 11,14 4 73,36 2,63 3,58 5 36,44 19,667 8,89