Kuliah Pengantar Praktikum Darah
-
Upload
kulkasdidapur -
Category
Documents
-
view
65 -
download
1
description
Transcript of Kuliah Pengantar Praktikum Darah
![Page 1: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/1.jpg)
Kuliah Pengantar Praktikum
Patologi Klinik Blok Hematologi
M. I. Diah P.
16 Maret 2011
![Page 2: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/2.jpg)
PHLEBOTOMY
![Page 3: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/3.jpg)
Sarana :Tempat pengambilan darah, sebaiknya :
Bersih dan berventilasi udara segar Tenang & Nyaman Lingkungan yang tertutup Kursi yang ergonomic, adjustable
serta nyaman Tempat tidur (untuk bayi) Wadah khusus jarum
![Page 4: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/4.jpg)
BAHAN DAN ALAT
Evacuated Collection Tube, Jarum, Holder
Syringe Torniquet Kapas Alkohol Plester Sarung tangan Wadah Pembuangan Jarum
![Page 5: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/5.jpg)
ALAT-ALAT YANG DIBUTUHKAN
![Page 6: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/6.jpg)
TEKNIK PUNGSI VENA
Identifikasi pasien Jelaskan Prosedur, ambil posisi Siapkan alat – alat yang diperlukan Suruh pasien menggenggam tangan Pilih vena yang baik untuk pungsi Bersihkan dengan alkohol 70 % Pasang torniquet ( Tdk blh > 1
menit )
![Page 7: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/7.jpg)
Mencari letak vena
Rentangkan tangan lurus ke bawah
Tekan lengan di lokasi pembuluh vena
![Page 8: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/8.jpg)
Mencari letak venaGenggam dan buka telapak tangan beberapa
kali, agar vena terlihat menonjol
Tentukan lokasi vena yang tepat dengan rabaan
![Page 9: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/9.jpg)
TEKNIK PUNGSI VENA
Fiksasi Vena Lakukan pungsi vena dengan sudut
150
Lepaskan turniquet Suruh pasien melemaskan tangan,
jangan ‘pumping’ Taruh kapas steril dan beri tekanan
![Page 10: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/10.jpg)
Persiapan Penusukan Vena
Rentangkan lengan pasien ke bawah
Pasang turniquet pada lengan pasien
![Page 11: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/11.jpg)
Persiapan Penusukan Vena
Raba letak vena dengan jari telunjuk
Regangkan kulit dengan ibu jari tangan kiri agar letak Vena tidak berubah saat penusukan
![Page 12: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/12.jpg)
Persiapan Penusukan Vena
Desinfeksi lokasi yang akan ditusuk jarum dengan
alkohol
![Page 13: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/13.jpg)
Posisi jarum yang benar
1. Jarum kurang dalam
2. Jarum terlalu dalam
![Page 14: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/14.jpg)
Posisi jarum yang benar
3. Darah berkumpul di bawah kulit
4. Penusukan yang benar
![Page 15: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/15.jpg)
*
![Page 16: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/16.jpg)
![Page 17: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/17.jpg)
*
Tarik perlahan untuk mencegahhemolisis
![Page 18: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/18.jpg)
Antikoagulan
Hematologi :
EDTA : hematologi rutin, Sitrat : koagulasi, agregasi trombosit Perbandingan
darah:antikoagulan harus tepat
![Page 19: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/19.jpg)
ANTIKOAGULAN1.Ethylenediamine tetra-acetic acid
(EDTA) Natrium EDTA Kalium EDTA terutama utk hematologi rutin Fungsi:
Mencegah Ca tdk mengion Mencegah adhesi dan pengerombolan
trombosit Tidak mempengaruhi pengenceran dan bentuk
eritrosit Utk mencapai efek tsb diperlukan 1,2
mg/ml darah
kuat
![Page 20: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/20.jpg)
2. Trisodium sitrate (Na sitrat )
= Na3C6H5O7 antikoagulan pilihan utk pemeriksaan
koagulasi
(9 vol darah : 1 vol lar Na sitrat) Juga dipakai pada LED
(4 vol darah : 1 vol lar Na sitrat)
antikoagulan
![Page 21: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/21.jpg)
3. Heparin Kadar: 10-20 IU/ml darah Heparin:
antikoagulan yg efektif tdk mempengaruhi ukuran eritrosit lebih baik disajikan dlm bentuk kering, tu.
utk mengurangi kemungkinan lisis tetapi, tdk dpt dipakai utk membuat
apusan darah (menimbulkan background kebiruan dg pengecatan Romanowsky)
paling baik digunakan utk pem. tes fragilitas osmotik
tdk boleh dipakai utk pem jumlah lekosit (menyebabkan penggumpalan lekosit)
antikoagulan
![Page 22: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/22.jpg)
PRAKTIKUM PK
![Page 23: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/23.jpg)
Praktikum I
1. Hemoglobin2. Hematokrit3. Hitung eritrosit4. Indeks eritrosit5. Morfologi eritrosit6. Hitung retikulosit
![Page 24: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/24.jpg)
1. Hemoglobin Metode Kolorimetri Sahli Prinsip:
Hemoglobin diubah mjd hematin asam→ warna yang terbentuk dibandingkan scr visual dgn standard pewarnaan permanen dalam alat tsb
Indikasi: Skrining eritrosit Follow up penderita setelah terapi/transfusi
Bahan & alat: Pipet Sahli - Darah EDTA Tabung hemometer - HCl 0,1 N Standard Hb - Aquabides Pipet tetes pengaduk
![Page 25: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/25.jpg)
hemoglobin Cara kerja:
1. Masukkan HCl 0,1 N ke dalam tabung hemometer (sampai tanda 2)
2. Isap darah dengan pipet Sahli s/d garis tanda 20 µl
3. Hapus sisa darah yang melekat diluar pipet Sahli
4. Catat waktunya, segera alirkan darah dari pipet Sahli ke dalam tabung hemometer, isap HCl pelan2 utk membilas darah pada pipet
5. Campur HCl dan darah 6. Tambahkan aquabides setetes demi setetes,
sambil diaduk dgn batang pengaduk7. Persamaan warna campuran dgn standard
warna harus dicapai dlm 3-5 menit8. Baca kadar Hb (dlm gram/dL darah)
Harga rujukan: Pria : 13,0 – 18,0 g/dL Wanita : 11,5 – 16,5 g/dL
![Page 26: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/26.jpg)
2. Hematokrit Metode mikrohematokrit Prinsip:
Menentukan volume semua eritrosit dlm volume darah tertentu dgn sentrifugasi darah berantikoagulan pada waktu dan kecepatan tertentu
Indikasi: Skrining eritrosit anemia
Bahan dan Alat: Darah EDTA - tabung mikrokapiler Penyumbat - grafik pembacaan Hct Centrifuge mikrohematokrit
![Page 27: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/27.jpg)
hematokrit
Cara kerja:1. Isi tabung mikrokapiler
dgn darah, ¾ penuh2. Sumbat satu sisinya
dgn penyumbat3. Masukkan tabung
mikrokapiler ke dalam centrifuge
4. Pusingkan selama 3-5 menit, 16.000 rpm
5. Baca nilai hematokrit dgn grafik khusus
![Page 28: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/28.jpg)
hematokrit
Harga Rujukan:
• Pria : 47 ± 7 vol %
• Wanita : 42 ± 5 vol %
![Page 29: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/29.jpg)
3. Hitung Eritrosit (Anthal Erythrocyte)
Metode: manual (bilik hitung) Prinsip:
Darah diencerkan dlm larutan isotonis tertentu → larutan merusak sel-sel selain eritrosit → eritrosit dihitung dgn volume tertentu pada bilik hitung
Indikasi: Hb < 10 g/dL Suspek polisitemia Suspek anemia megaloblastik
Bahan dan alat: Darah EDTA Larutan Hayem (Na2SO4, NaCl, HgCl2, Aqua) Haemocytometer (Pipet eritrosit, Bilik hitung (improved
Neubauer) Deck glass mikroskop
![Page 30: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/30.jpg)
Hitung eritrosit Cara kerja:1. Mengisi pipet eritrosit
Isap darah EDTA sampai batas 0,5
Hapus kelebihan darah yang melekat pada ujung pipet
Masukkan ujung pipet ke dlm larutan Hayem, lalu hisap larutan Hayem sampai batas 101
Angkat pipet dari larutan, tutup kedua ujung pipet dgn jari-jari tangan
Kocok pipet scr transversal, 2-3 menit
Letakkan posisi horisontal
![Page 31: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/31.jpg)
Hitung eritrosit
2. Mengisi bilik hitung: Letakkan bilik hitung dgn
deck glass yg sdh terpasang di atasnya
Buang cairan pipet 3-4 tetes, lalu sentuhkan ujung pipet ( sdt 300)ke permukaan bilik hitung, biarkan menyebar
Biarkan bilik hitung selama 1-2 menit, spy eritrosit bisa mengendap
![Page 32: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/32.jpg)
Hitung eritrosit
3. Menghitung jumlah sel: Gunakan perbesaran
lensa objektif 10 x, kemudian pindahkan ke lensa objektif 40 x
Hitung semua eritrosit yang terdapat dalam 5 kotak sedang(diagonal kanan/kiri)
Gunakan batas: kiri atas atau kanan bawah
![Page 33: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/33.jpg)
Hitung eritrosit4. Perhitungan: Pengenceran 200x Luas 1 kotak sedang: 1/5 x 1/5 = 1/25 mm2
Tinggi bilik hitung : 1/10mm Eritrosit dalam 5 x kotak
sedang, V = 1/5 mm2 x 1/10 mm = 1/50 mm3
Faktor utk mendapat jumlah eritrosit per mL/ mm3 darah:
V = 200 x n 1/50 mm3 = 200 x n 1 mm3 = 10.000 n eritrosit
Harga rujukan: Pria : 4,5 – 6,5 juta/mL Wanita : 3,9 – 5,8 juta/mL
![Page 34: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/34.jpg)
4. Indeks eritrosita. MCV: Mean corpuscular volume
(Volume rata-rata eritrosit)MCV (fl)= Hct (%) x 10
AE (106/mm3)
HR: 80 – 90 flb. MCH: Mean Corpuscular Hemoglobin
(banyaknya Hb per eritrosit)MCH (pg) = Hb (g/dL) x 10
AE (106/mm3)
HR: 27 – 31 pg
![Page 35: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/35.jpg)
Indeks eritrosit
c. MCHC: Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (kadar Hb per eritrosit)
MCHC (%)= Hb (g/dL) x 100
Hct (%)
HR: 32 – 36 %
![Page 36: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/36.jpg)
Indeks eritrosit
![Page 37: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/37.jpg)
5. Morfologi eritrosit
Dengan preparat apusan darah: Size, shape, staining/kromasi
Size/ukuran:Normositik : ukuran: 6-8 μmMakrositik : anemia megaloblastik, pasca perdarahan /hemolisisMikrositik : ADB, thalasemia
Bentuk:Normal : diskus bikonkaf, inti (-), ukuran 6-8 μm (kemerahan o.k pigmen Hb) Tengah : area kepucatan,normal 1/3 bag luas eritrosit
![Page 38: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/38.jpg)
Morfologi eritrosit Beberapa kelainan eritrosit:
Anisositosis: variasi abnormal ukuran eritrosit Poikilosistosis: variasi abnormal bentuk eritrosit
Kelainan bentuk eritrosit: Sferosit : bentuk sferis, Ø < normal, area pucat di tengah (-)
sferositosis herediter, AIHA, sepsis Ovalosit : bentul oval, normal < 10%.
Makroovalosit → An.megaloblastik Eliptosit : bentuk elips, eliptositosis herediter, ADB (sel pensil) Sel target : eritrosit dg lingkaran Hb tepi cincin dan
hemoglobinisasi di bag. sentral o.k. luas permukaan membran bertambah > dibandingkan vol. sel
thalasemia, Hbpathi, ADB, post splenektomi, peny. Hati
Tear drops Schistocyte Sel sabit
Normoblas (-) atau (+)
![Page 39: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/39.jpg)
6. Hitung retikulosit Prinsip:Setelah inti dari eritrosit berinti (normoblas
asidofilik) hilang, maka sisa RNA akan tetap ada di dalam eritrosit.
Sel tsb disebut RETIKULOSIT, utk mendeteksi sel tsb, eritrosit hrs di-cat ‘hidup-hidup’
Proses tsb disebut pengecatan SUPRAVITAL
Pronormoblasn. basofilik
n. polikromatofilik
retikulosit
n = normoblas
berisi RNA
eritrositmatang
![Page 40: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/40.jpg)
Hitung retikulosit
a. Sediaan basah: Bahan dan Alat:
Kaca objek, deck glass Larutan BCB 1% Darah EDTA
Cara kerja:1. Kaca objek: diberi 1 tetes larutan BCB2. Tambahkan 1 tetes darah EDTA, campurkan dgn
BCB3. Tutup dgn deck glass, campuran akan
menyebar dgn sendirinya4. Baca di bawah mikroskop, perbesaran lensa
objektif 100 x (dgn emersi), hitung retikulosit dalam 1000 eritrosit
![Page 41: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/41.jpg)
HITUNG RETIKULOSIT (sediaan kering)
Lar. cat retikulosityg sudahdisaring
+ Whole blood
campur
Biarkan pd suhu kamar atau
inkubasi pd 37°C (15 men)
Pd 15 menit terakhir, campur isi tabung tsb
teteskan 3 ttske tabung
Membuat beberapaApusan & keringkan
![Page 42: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/42.jpg)
CARA KERJA HITUNG RETIKULOSIT
1. Pasang apusan I pada mikroskop2. Amati dg lensa obyektif kecil (10x)3. Cari daerah yang tipis4. Amati dg lensa obyektif 100x
(pakai minyak imersi)5. Cari daerah apusan dg jumlah
eritrosit kira-kira 100-200 sel per lapangan pandang. (area ideal : 1 lp ≈ 200 sel eritrosit)
6. Retikulosit diidentifikasi dan dihitung (retikulosit hrs mengandung min. 2 atau lebih partikel biru)
7. Hitunglah retikulosit dalam 1000 eritrosit (utk mempermudah penghitungan, kecilkan lap. pandang dg membuat potongan kertas yg dilubangi & dipasang pd lensa)retikulosit
retikulosit
![Page 43: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/43.jpg)
Penghitungan hasil
Dihitung jumlah retikulosit dlm 1000 eritrosit, misal: didapatkan 20 sel retikulosit per 1000 eritrosit Hasil ditulis 2%
Harga rujukan: Retikulosit: 0,5 – 1,5 %
![Page 44: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/44.jpg)
Praktikum II
1. Hitung lekosit2. Hitung jenis lekosit3. Morfologi lekosit4. LED
![Page 45: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/45.jpg)
1. Hitung Lekosit (Anthal Leucocyte) Metode: Manual (bilik hitung) Prinsip:
Darah diencerkan dalam pipet lekosit, dihitung dlm bilik hitung di bawah mikroskop
Indikasi: Pemeriksaan rutin hematologi
Bahan dan alat: Darah EDTA Larutan Turk (gentian violet, asam asetat glasial, aqua) Pipet lekosit Bilik hitung (improved Neubauer) Deck glass Mikroskop
![Page 46: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/46.jpg)
Hitung Lekosit Cara kerja:1. Mengisi pipet lekosit
Isap darah EDTA sampai batas 0,5
Hapus kelebihan darah yang melekat pada ujung pipet
Masukkan ujung pipet ke dlm larutan Turk, lalu hisap larutan Turk sampai batas 11
Angkat pipet dari larutan, tutup kedua ujung pipet dgn jari-jari tangan
Kocok pipet scr transversal, 15-30 detik
Letakkan posisi horisontal
![Page 47: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/47.jpg)
Hitung lekosit
2. Mengisi bilik hitung: Letakkan bilik hitung dgn
deck glass yg sdh terpasang di atasnya
Buang cairan pipet 3-4 tetes, lalu sentuhkan ujung pipet ( sdt 300) ke permukaan bilik hitung, biarkan menyebar
Biarkan bilik hitung selama 2-3 menit, spy lekosit bisa mengendap
![Page 48: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/48.jpg)
Hitung lekosit
3. Menghitung jumlah sel: Gunakan perbesaran
lensa objektif 10 x Hitung semua lekosit
yang terdapat dalam 4 kotak besar( tepi-tepi)
Gunakan batas: kiri atas atau kanan bawah
![Page 49: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/49.jpg)
Hitung lekosit4. Perhitungan: Pengenceran 20x Luas 1 kotak besar: 1 x 1 = 1 mm2
Tinggi bilik hitung : 1/10mm Lekosit dihitung dalam 4
kotak besar,Vol = 4 x (1 x 1/10) mm
= 0,4 mm3
Faktor utk mendapat jumlah lekosit per mm3 /mL darah:
V = 20 x n 0,4 mm3 = 20 x n 1 mm3 = 50 n lekosit
Harga rujukan: 5000 – 10.000/mL
![Page 50: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/50.jpg)
2. Hitung jenis lekosit
Prinsip: Hapusan darah yang baik berwarna merah dan
seragam dimana eritrosit, lekosit, dan trombosit dapat terlihat jelas
Indikasi: Pemeriksaan rutin
Tahap-tahap:1. Pembuatan slide preparat apusan darah2. Pengecatan3. Pembacaan hitung jenis lekosit
![Page 51: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/51.jpg)
a. Pembuatan apusan darah tepi
![Page 52: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/52.jpg)
Pembuatan slide
Slide apusan darah yang baik:1. Panjang apusan ± 2/3 panjang slide2. Warna kemerahan, coklat jingga3. Terdapat bagian yang tebal, tipis, dan
peralihan tebal tipis4. Apusan > sempit dari slide dengan tepi yang
halus dan berakhir pada ujung yang lurus5. Apusan harus bebas goresan, lubang-lubang,
tonjolan, kerutan, dan kontaminasi lemak6. Ukuran standard apusan darah 2 x 3,5 cm
![Page 53: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/53.jpg)
Ideal
Kurang baik
![Page 54: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/54.jpg)
b. Pengecatan Bahan & alat:
Slide apusan darah - rak pengering Larutan Wright - timer Larutan Giemsa - pipet tetes Stainning jar - methanol 90%
Cara Kerja:1. Slide apusan darah → biarkan mengering2. Fiksasi slide dgn methanol absolut 90%, 1-2
menit3. Genangi dgn Larutan Wright, 2 menit4. Genangi dgn larutan Giemsa, 5 – 12 menit5. Alirkan air scr tidak langsung mengenai slide
( > 30’’)6. Letakkan slide miring dlm rak pengering →
biarkan mengering7. Setelah kering, dibaca di bawah mikroskop
![Page 55: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/55.jpg)
c. Menghitung jenis lekosit1. Preparat GDT siap baca2. Gunakan lensa objektif 10x utk mencari area
hitung.3. Pindahkan ke perbesaran 100x utk menghitung
jenis lekosit (gunakan minyak emersi)
No Jenis sel I II III IV V VI VII VIII IX X
1 Basofil
2 Eosinofil
3 Netrofil batang
4 Netrofil segmen
5 Limfosit
6 Monosit
JUMLAH 10
10
10 10 10
10
10 10 10 10
100
![Page 56: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/56.jpg)
Zona pada slide GDT: Zona I: zona ireguler (± 3%)
Eritrosit tidak teratur, bergerombol sedikit/banyak dan tidak selalu sama pada tiap preparat
Zona II: zona tipis (± 14%) Eritrosit tidak teratur, saling bertumpukan dan berdesakan
Zona III: zona tebal (± 45%) eritrosit bergerombolan rapat/padat, saling bertumpukan
dan berdesakan
Zona IV: zona tipis (± 18%) ~ zona II
Zona V: counting area/zona reguler (± 11%) Sel-sel tersebar secara merata, tidak saling bertumpukan
dan berdesakan, bentuknya masih utuh
Zona VI: zona sangat tipis (± 9%) Di ujung preparat sebelum mjd ekor, eritrosit tersusun
longgar, cenderung membentuk gerombolan sel-sel yang berderet
![Page 57: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/57.jpg)
ideal
ekorkepala
MORFOLOGI DARAH TEPI
![Page 58: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/58.jpg)
Ideal Ekor Kepala
![Page 59: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/59.jpg)
Hitung jenis lekosit Harga Rujukan:
Jenis Prosentase
Absolut
Basofil 0 – 2 % 0 – 0,2 x 109/L
Eosinofil 0 – 4 % 0 – 0,45 x 109/L
Netrofil batang
0 – 6 % 0 – 0,7 x 109/L
Netrofil segmen
40 – 64 % 1,8- 7,0 x 109/L
Limfosit 22 – 44 % 1,0 – 4,8 x 109/L
monosit 0 – 7 % 0 – 0,8 x 109/L
![Page 60: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/60.jpg)
3. Morfologi lekosit KARAKTERISTIK INTI SEL
a. Bentuk:- pelana, ginjal (monosit), bersegmen
(segmen)b. Ukuran relatif:
- inti dibandingkan dgn luas sitoplasma (rasio nukleositoplasmik)c. Pola kromatin:
- pola kepadatan : halus (monosit, sel muda), kasar (limfosit)
d. Ada tidaknya anak inti (nukleoli) - sel muda (sel blas)
![Page 61: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/61.jpg)
Morfologi lekosit
KARAKTERISTIK SITOPLASMAa. Granuler atau non granuler
– Granula besar & merah (eosinofil), granula besar & biru/ungu tua (basofil), granula halus (netrofil)
b. Warna– Sangat biru (limfosit reaktif,
LPB=limfosit plasma biru)c. Luas
– Luas (monosit)– Sempit (limfosit)
![Page 62: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/62.jpg)
MORFOLOGI DARAH TEPI
MORFOLOGI ERITROSIT MORFOLOGI LEKOSIT
MORFOLOGI TROMBOSIT
![Page 63: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/63.jpg)
Manfaat Pemeriksaan Gambaran Darah Tepi (GDT)
Memperkirakan jumlah lekosit dan trombosit
Menentukan atau memperkirakan penyebab penyakit
Mengetahui perjalanan penyakit Pemantauan penyakit atau
pengobatan
![Page 64: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/64.jpg)
Sel muda
Sel matur
Monosit
Makinkecil
![Page 65: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/65.jpg)
Netrofil batang
Ukuran : sedang Sitoplasma :
Warna pucat Ukuran sedang-luas sedang-luas dg granula halus
Inti : seperti btk batang melekuk kromatin kurang kasar &
menggumpal
![Page 66: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/66.jpg)
Netrofil segmen
Ukuran : sedang Sitoplasma :
Warna pucat Ukuran sedang-luas Tdp granula halus Granula toksik Vakuolisasi
Inti : bersegmen 2-5 lobus kromatin kasar &
menggumpal
![Page 67: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/67.jpg)
Eosinofil
Ukuran : sedang Sitoplasma :
Warna pucat Ukuran sedang-luas Tdp granula besar merah, tidak menutupi inti
Inti : biasanya memp 2 lobus kromatin kasar &
menggumpal
![Page 68: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/68.jpg)
Basofil
Ukuran : sedang-kecil
Sitoplasma : Warna pucat Tdp granula besar & kasar,
biru/ungu tua Inti :
tdk bersegmen bilobus (2 lobus) sering tertutupi oleh
granula
![Page 69: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/69.jpg)
Limfosit
Ukuran : kecil Sitoplasma :
sempit, kd tidak tampak tak bergranula Kdg bergranula
(azurofilik) sitoplasma biru Sitoplasma sangat biru
(LPB) Inti :
bulat kromatin kasar &
menggumpal
![Page 70: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/70.jpg)
Gambaran Darah Tepi
Morfologi eritrosit: Kromasi, ukuran, bentuk sel, normoblas
(-)/(+)
Morfologi lekosit: Jumlah lekosit, sel muda
Morfologi trombosit: Jumlah trombosit, penyebaran
![Page 71: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/71.jpg)
4. LED (Laju Endap Darah) Prinsip:
Darah vena dgn antikoagulan tertentu dimasukkan dlm tabung tertentu dan dicatat pengendapan dari eritrosit
Indikasi: Penyakit infeksi
Bahan dan alat: Darah Natrium sitrat 3,8 % Tabung Westergreen Rak tabung LED
![Page 72: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/72.jpg)
LED
Cara kerja:
1. Darah vena 1,6 ml campurkan ke dalam botol yang telah terisi 0,4 ml larutan Natrium sitrat 3,8 %, homogenkan dengan merata
2. Isap campuran tsb dengan pipet Westergreen sampai garis bertanda 0 mm
3. Tutup bagian atas tabung dgn jari, lalu letakkan tabung scr vertikal pada rak westergreen, biarkan selama 60 menit
4. Baca tingginya kolom lapisan plasma dlm mm
5. HR: Pria : 0 – 10 mm/jam
Wanita : 0 – 15 mm/jam
![Page 73: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/73.jpg)
Praktikum III
1. Hitung trombosit2. Morfologi trombosit3. Bleeding time4. Clot retraction
![Page 74: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/74.jpg)
1. Hitung Trombosit (Anthal Thrombocyte)
Metode: manual (bilik hitung) Prinsip:
Darah diencerkan dgn larutan pengencer Rees ecker yg mengandung BCB yang akan mengecat trombosit shg berwarna biru jernih
Indikasi: Faal hemostasis Skrining pre operasi Diagnosis penyakit dan kelainan perdarahan
Bahan dan alat: Darah EDTA Larutan Rees Ecker (Na Sitrat, formaldehide, BCB, aqua)
Pipet eritrosit Bilik hitung (improved Neubauer) Deck glass mikroskop
![Page 75: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/75.jpg)
Hitung trombosit Cara kerja:
1. Mengisi pipet eritrosit Isap larutan RE sampai batas
0,5 Isap darah EDTA sampai
batas 1 Hapus kelebihan darah yang
melekat pada ujung pipet Masukkan ujung pipet ke dlm
larutan RE, lalu hisap larutan RE sampai batas 101
Angkat pipet dari larutan, tutup kedua ujung pipet dgn jari-jari tangan
Kocok pipet scr transversal,
2 – 3 menit Letakkan posisi horisontal
![Page 76: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/76.jpg)
Hitung trombosit
2. Mengisi bilik hitung: Letakkan bilik hitung dgn
deck glass yg sdh terpasang di atasnya
Buang cairan pipet 3-4 tetes, lalu sentuhkan ujung pipet ( sdt 300)ke permukaan bilik hitung, biarkan menyebar
Biarkan bilik hitung selama 2-3 menit, spy trombosit bisa mengendap
![Page 77: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/77.jpg)
Hitung trombosit
3. Menghitung jumlah sel: Gunakan perbesaran
lensa objektif 10 x, kemudian pindahkan ke lensa objektif 40 x
Hitung semua trombosit yang terdapat dalam kotak besar tengah
![Page 78: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/78.jpg)
Hitung trombosit4. Perhitungan: Pengenceran 200x Luas 1 kotak besar: 1 x 1 = 1 mm2
Tinggi bilik hitung : 1/10mm
Trombosit dihitung dalam 1 kotak besar tengah,V = 0,1 mm3
Faktor utk mendapat jumlah trombosit per mm3 /mL darah
V = 200 x n 0,1 mm3 = 200 x n 1 mm3 = 2000 n
trombosit Harga rujukan:
150.000 – 400.000/mL
![Page 79: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/79.jpg)
2. Bleeding Time Prinsip:
Masa perdarahan merupakan waktu perdarahan sejak terjadi luka kecil yg dibuat di permukaan kulit dan dilakukan dalam kondisi standard
Indikasi: Gangguan hemostasis Skrining pre operasi Trombositopenia
Bahan dan alat: Lancet steril Alkohol 70 % Tensimeter Kertas saring Stopwatch
![Page 80: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/80.jpg)
Bleeding time
Cara Kerja (metode Ivy):
1. Bersihkan bagian volar lengan bawah dgn alkohol 70 %, biarkan kering
2. Pasang manset tensimeter pada lengan atas, pompakan sampai tekanan 40 mmHg
3. tegangkan kulit lengan bawah, tusuklah dgn lanset pada dua tempat ± 3 jari di bawah lipat siku (kedalaman 3mm)
4. Jika terlihat darah mulai keluar, jalankan stopwatch
5. Isaplah tetes darah yang keluar itu dgn kertas saring setiap 30 detik
6. Hentikan stopwatch pada waktu darah tidak dapat dihisap lagi
![Page 81: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/81.jpg)
Bleeding time
Perhitungan: x : masa perdarahan x = (t1 + t2) : 2 atau [(n1 + n2): 2 x
30’’] t : waktu n : jumlah bercak darah
Harga Rujukan: 1 – 6 menit
![Page 82: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/82.jpg)
3. Clot retraction
Prinsip: Darah setelah diambil dari vena, dimasukkan dlm suatu
tabung, diinkubasi dlm suhu 370C selama 1 jam. Setelah serum serta darah yang terperas keluar dari bekuan, diukur volumenya dan dinyatakan dlm volum % darah seluruhnya
Indikasi: Gangguan fungsi trombosit Faal hemostasis Trombositopenia
Bahan & Alat: Spuit injeksi Jam Tabung sentrifus bergaris lidi
![Page 83: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/83.jpg)
Clot retraction
Cara kerja:1. Lidi dibengkokkan membentuk kait2. Masukkan ke dlm tabung sentrifus yg telah berisi
darah (± 5 cc) tanpa antikoagulan→ Biarkan 2-3 jam
3. Tarik lidi perlahan-lahan4. Serum yg tertinggal pada botol5. Catat dlm vol %, dan konsistensinya
X = S/V x 100 % X: % serum S: volume serum V: volume darah
Harga Rujukan: % vol serum yg ada dlm tabung 40-60%
![Page 84: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/84.jpg)
4. Morfologi trombosit
![Page 85: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/85.jpg)
![Page 86: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/86.jpg)
![Page 87: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/87.jpg)
Pengaruh penyimpanan terhadap morfologi sel darah
Darah disimpan dlm botol/tabung tidak segera dibuat apusan
Terjadi perubahan degeneratif ok adanya antikoagulan, juga terjadi pada darah defibrinasi
![Page 88: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/88.jpg)
Efek penyimpanan thd morfologi sel darah
Dibiarkan (sebelum pembuatan apusan)
Terjadi perubahan degeneratifdarah
1 jam 3 jam 12-18 jam
1 jam 18-25°C
Tidak berubah
Perubahan dptterlihat rusak
![Page 89: Kuliah Pengantar Praktikum Darah](https://reader033.fdokumen.com/reader033/viewer/2022061505/55cf8f78550346703b9cb412/html5/thumbnails/89.jpg)
Keterlambatan pemeriksaan
Pemeriksaan kuantitas &kualitas trombosit
lambat• Jumlah trombosit turun !• Agregasi trombosit hipoagregasi
Pemeriksaan Koagulasi(PT, APTT, F. VIII, F. IX
lambat• Memanjang • F VIII, F IX turun
Pemeriksaan Hb, hmt, jumlah lekosit
lambat
Relatif konstan