Aspartate aminotransferase (EC. 2.6.1.1)

Post on 24-Feb-2016

83 views 0 download

description

Aspartate aminotransferase (EC. 2.6.1.1). Oleh : Dewi Kurnia (20511029) Dina Soes Putri (20511037). Isi Presentasi. Pendahuluan Fungsi Struktur Mekanisme katalisis Isolasi dan pemurnian Aplikasi Modifikasi Genetik. Pendahuluan. Struktur 3D. Struktur tia p s ubunit . Fungsi. - PowerPoint PPT Presentation

Transcript of Aspartate aminotransferase (EC. 2.6.1.1)

Aspartate aminotransferase

(EC. 2.6.1.1)

Oleh:Dewi Kurnia (20511029)

Dina Soes Putri (20511037)

Isi PresentasiPendahuluanFungsi StrukturMekanisme katalisisIsolasi dan pemurnianAplikasiModifikasi Genetik

PendahuluanNo Data Keterangan

1 Nama sistematik L-aspartat:2-oksoglutarat aminotransferase

2 Sinonim 2-oksoglutarat-glutamat aminotransferase; aspartat α-ketoglutarat transaminase; glutamat-aspartat aminotransferase, dll

3 Organisme Arabidopsis thaliana, Bacillus sp., Chamydomonas Reinhardtii, dolphin, E. coli, Homo sapiens, Gallus gallus, Oryza sativa, dll

4 Subsrat L-aspartat dan 2-oksoglutarat5 Produk Oksaloasetat dan L-glutamat6 Kofaktor Piridoksal 5’-fosfat7 Logam Mg2+ (aktivasi)

8 Senyawa aktivator

Akonitat (memberikan efek aktivasi pada bentuk enzim sitoplasmik), etanol (dalam jumlah banyak dapat meningkatkan aktivitas AST pada plasma darah), rosiglitazon, malat

9 Inhibitor

2-metil-DL-aspartat, 2-oksoglutakonat, asam 2-oksoglutakonat dimetil ester, adipat, aminoguanidin, aspartat, Ca2+, kimotripsin, CN-, fumarat, glutamat, glutarat, isositrat, pottasium fosfat, dll

10 Mekanisme bi bi ping-pong

11 Pathway Degradasi: R-sisteat, aspartat I dan II, L-sistein I, fenilalaniin IV, sulfolaktat III, dan glutamat II ; Biosintesis: aspartat dan koenzim M; siklus TCA VI

12 KM (mM)

0,071 (pH 7.6, 25°C); 0,088 (pH 7.4, 30°C); 0,08 (isozyme Asp-DEAE-1, pH 8.0); 0,23 (isozyme AspAT-1, 25°C, pH 8.0); 0,093 (cytosolic isozyme, pH 7.4, 25°C); 0,098 (mitochondrial isozyme, pH 7.4, 25°C); 0,48 (pH 8, co-subsrat: L-Phe, mutan enzim A12T/P13T/N34D/T109S/G261A/S285G/A293D/N297S), dll

13 Turnover number (1/S)

120 (wild-type, pH 8.0, 25°C); 96 (rekombinan C166A mutan, pH 7.5, 25⁰C); 176 (isozyme AAT5, pH 8.0, 25°C); (4 recombinant deletion mutant, pH 7.5, 25°C), dll

14 pH optimum6,3 (mitochondrial enzyme); 6,8 (cytosolic isozyme); 7,5 (isozyme AST II); 8 (oxaloacetate formation, isoenzyme Asp-DEAE-2); dll

Struktur 3D

Struktur tiap subunit

Fungsi AST berperan dalam proses gliseroneogenesis

hati Secara umum, AST mengkatalisis interkonversi

dari aspartat dan α-ketoglutarat menjadi oksaloasetat dan glutamat. Reaksi sederhananya sbb:

Asp + α-ketoglutarat ↔ oksaloasetat + Glu

Mekanisme katalisis

Isolasi dan pemurnian

Presipitasi amonium sulfat

Kromatografi penukar ion

Kromatografi afinitas

Elektroforesis Electrofocusing

Aplikasi industriDigunakan sebagai penanda adanya

kerusakan sel hati akibat paparan pelarut organik karsinogen (CCl4, CHCl3, bahan kimi pada dry clean, dll)

Sebagai alat investigasi pada pre-klinis obat baru dengan pengukuran kadar AST dalam serum

Modifikasi GenetikIn-frame deletion 3 asam amino gen GOT1

pada urutan nukleotida 1165-1167 (AAC) mengakibatkan penghapusan Asn 389.

Urutan nukleotida tersebut diketahui sebagai conserved region cAST pada mamalia

Delesi ini mengakibatkan penurunan aktifitas enzim AST secara signifikan

Daftar Pustakahttp://www.brenda-enzymes.info/php/result_fl

at.php4?ecno=2.6.1.1http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/E

C2/6/1/1.htmlhttp://www.wikipedia/

aspartate_transaminase.htmhttp://omim.org/entry/138180http://www.hepatitis-central.com/hcv/labs/

liverenzymes.htmhttp://www.medfriendly.com/aspartateaminotr

ansferase.htmlwww.rscbi.org/pdb/explore/pudmed.do?

structureId=3II0

Terima Kasih