i
PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP PROFIL
DISOLUSIDISPERSI PADAT KURKUMIN EKSTRAK TEMULAWAK
(Curcuma xanthorrhiza Roxb.) DALAM HYDROXYPROPYL
METHYLCELLULOSE (HPMC) DENGAN SPRAY DRYING
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Felix Pradana Adi Nugraha
NIM : 098114071
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2013
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Anyone who stops learning is old, whether
at twenty oreighty. Anyone who keeps
learning stays young. The greatest
thing in life is to keep your mind young
Henry Ford
Karya ini kupersembahkan untuk :
Jesus Christ yang slalu menyertaiku
Orang Tua, Adik, Teman-teman ku yang selalu mendukungkudan Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas berkat, kasih
danpertolongan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul“Pengaruh Proporsi Drug Load terhadapProfilDisolusi Dispersi Padat
Kurkumin Ekstrak Temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) dalam
hydroxypropyl methylcellulose (HPMC)dengan Spray Drying”. Skripsiini disusun
guna memenuhi salah satu syarat untuk mendapatkan gelar SarjanaStrata Satu
Program Studi Ilmu Farmasi (S.Farm.).
Selama masa perkuliahan hingga penelitian dan penyusunan
skripsi,penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai pihak baik berupa
bimbingan,doa, dorongan, nasehat maupun sarana dan prasarana. Pada
kesempatan inipenulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-
besarnya kepada:
1. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Prof. Dr. H. Achmad Fudholi, DEA., Apt. selaku Dosen Pembimbing yang
telahmemberikan bimbingan, saran dan nasehat.
3. Enade Perdana Istyastono, Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing
Pendampingatas segala segala arahan, saran dan bimbingannya
4. C.M. Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt., selaku dosen penguji atas segala
arahan, masukan,kritik, dan saran yang telah diberikan kepada penulis.
5. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji atas segala arahan,
masukan,kritik, dan saran yang telah diberikan kepada penulis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
6. Dewi Setyaningsih, M.Sc., Apt., selaku Pembimbing yang
telahmemberikan bimbingan, saran, nasehat, dan menanggung seluruh
biayapenelitian.
7. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt., atas pemberian eksklusif kurkumin
baku dan membimbing kami dalam hal analisis
8. Pak Musrifin, Pak Wagiran, Pak Iswandi, Pak Agung, Pak Yuwono,
MasBimo, Mas Ottok, Pak Parlan, Mas Kunto, Mas Sigit, Pak Pardjiman,
PakHeru, Pak Timbul dan segenap satpam atas bantuan dan kelancaran
yangtelah diberikan dalam pelaksanaan penelitian ini.
9. Pak Bambang, Mas Sigit, dan Mas Jink selaku laboran
LaboratoriumTeknologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
Mada, atasbantuan, kerjasama dan pengetahuan baru yang telah diberikan
selamapenulis melakukan penelitian khususnya dalam pengoperasian
spray dryer.
10. Jati Panantya, Saka Adhiyuda selaku teman seperjuangandalam penelitian
atas bantuan, dukungan, dan persahabatannya selama ini.
11. Semua pihak dan teman-teman yang tidak dapat penulis sebutkan satu
persatu, yang telah membantu terselesaikannya skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna,
olehkarena itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang
bersifatmembangun dari para pembaca demi kesempurnaan skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat
bagiperkembangan ilmu farmasi khusunya dan kemajuan ilmu pengetahuan
padaumumnya.
Penulis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii
HALAMAN PEENGESAHAN ..................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ v
PRAKATA ................................................................................................... vi
DAFTAR ISI ................................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... x
DAFTAR TABEL ........................................................................................ xi
LAMPIRAN ................................................................................................. xii
INTISARI ..................................................................................................... xiii
ABSTRACT ................................................................................................. xiv
BAB I. PENGANTAR .................................................................................. 1
A. Latar Belakang ......................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .................................................................................... 3
C. Keaslian Penelitian ................................................................................... 3
D. Manfaat Penelitian.................................................................................... 4
E. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 4
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ........................................................... 5
A. Kurkumin ................................................................................................. 5
B. Dispersi Padat .......................................................................................... 6
1. Metode Pelelehan ................................................................................ 6
2. Metode Pelarutan ................................................................................. 7
3. Metode Pelarutan-Pelelehan ................................................................. 8
C. HPMC ...................................................................................................... 8
D. Spray Drying ............................................................................................ 9
E. Disolusi .................................................................................................... 11
F. KLT-Densitometri .................................................................................... 11
G. Validasi Metode Analisis .......................................................................... 12
H. Landasan Teori ......................................................................................... 14
I. Hipotesis .................................................................................................. 15
BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................... 16
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................ 16
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ........................................... 16
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
C. Bahan Penelitian...................................................................................... 17
D. Alat Penelitian ......................................................................................... 18
E. Tata Cara Penelitian ................................................................................ 18
1. Pembuatan dispersi padat...................................................................... 18
2. Pembuatan serbuk campuran fisik ......................................................... 19
3. Uji disolusi ........................................................................................... 19
F. Penetapan Kadar Kurkumin dalam cuplikan disolusi ekstrak temulawak dengan
TLC-Densitometri .................................................................................... 20
1. Pembuatan fase gerak ........................................................................... 20
2. Pembuatan larutan baku kurkumin ........................................................ 20
G. Analisis Statistik Penetapan Kadar Kurkumin Terlarut dan Disolusi
Efisiensi ................................................................................................... 23
BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 24
A. Pembuatan Dispersi Padat ........................................................................ 24
B. Pembuatan Campuran Fisik ...................................................................... 24
C. Pembuatan Fase Gerak ............................................................................. 25
D. Pembuatan Larutan Baku .......................................................................... 25
E. Penetapan Panjang Gelombang Maksimum Kurkumin ............................. 26
F. Pengamatan nilai Retardation Factor (Rf) dan Pembuatan Seri Baku
Kurkumin ................................................................................................. 27
G. Validasi Metode Analisis .......................................................................... 28
1. Selektivitas ........................................................................................... 29
2. Linearitas ............................................................................................. 30
3. Akurasi ................................................................................................. 30
4. Presisi ................................................................................................... 31
5. Range ................................................................................................... 32
H. Penentuan Akurasi dan Presisi Baku Kurkumin dalam Sampel ................. 33
I. Uji Disolusi .............................................................................................. 34
J. Hubungan Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Kurkumin .................... 37
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 41
A. Kesimpulan .............................................................................................. 41
B. Saran ........................................................................................................ 41
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 42
LAMPIRAN ................................................................................................. 45
BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 70
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur Kurkumin ....................................................................... 5
Gambar 2. Struktur HPMC............................................................................ 8
Gambar 3. Spray Dryer ................................................................................. 10
Gambar 4. Grafik hubungan antara persentase kurkumin yang terdisolusi dengan
waktu ............................................................................................................ 37
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
DAFTAR TABEL
Tabel I. Elemen-elemen data yang dibutuhkan untuk uji validasi ............. 14
Tabel II. Perbandingan HPMC dan Ekstrak temulawak dalam tiap formula 19
Tabel III. Data replikasi seri baku kurkumin ............................................... 28
Tabel IV. Data % recovery ......................................................................... 31
Tabel V. Data Coefficient of Variation (CV) Kadar kurkumin (μg/ml) ...... 32
Tabel VI. Recovery dan CV baku kurkumin dalam matriks sampel ............ 33
Tabel VII. Hasil perhitungan persentase kurkumin terdisolusi dalam dispersi
padat ................................................................................................... 35
Tabel VIII. Penghitungan DE pada menit ke 120 ........................................... 38
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
LAMPIRAN
Lampiran 1. Penimbangan pembuatan dispersi padat dan campuran ............. 45
Lampiran 2. Validasi metode analisi ............................................................. 46
Lampiran 3. Kromatogram dari seri baku kurkumin ...................................... 54
Lampiran 4. Kromatogram ekstrak temulawak sebelum diadisi ..................... 57
Lampiran 5. Kromatogram ekstrak temulawak setelah diadisi ....................... 57
Lampiran 6. Penghitungan persen tersidolusi ................................................ 59
Lampiran 7. Hasil Uji Statistik ...................................................................... 66
Lampiran 8. Gambar alat ............................................................................... 69
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
INTISARI
Kandungan utama dari temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) adalah
kurkuminoid, yang terdiri dari kurkumin, demetoksikurkumin, dan
bisdemetoksikurkumin. Kurkumin memiliki beberapa efek farmakologi, seperti
antioksidan, antiinflamasi, antimikrobia, dan antikanker. Namun,
kurkuminmempunyai kelarutan yang sangat rendah dalam air. Kelarutan senyawa
diharapkan dapat ditingkatkan dengan pembuatan dispersi padat.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh proporsi drug load
terhadap disolusi dispersi padat dari temulawak. Penelitian ini dilakukan dengan
metode pembuatan campuran fisik dan dispersi padat menggunakan pembawa
HPMCE-15. Pembuatan dispersi padat tersebut menggunakan metodespray
dryingdengan 3 formula yang berbeda: Formula 1 yang terdiri dari ekstrak
temulawak : HPMC E-15 (1 : 1), Formula 2 yang terdiri dari ekstrak temulawak :
HPMC E-15 (1:2) dan formula 3 yang terdiri dari ekstrak temulawak : HPMC E-
15 (1:4). Uji disolusi dilakukan menggunakan alat disolusi dalam medium
buffer phosphat, kemudian diukur kadarnya menggunakan TLC-Densitometri.
Kadar kurkumin dinyatakan sebagai persentase kurkumin yang terdisolusi dan
dilanjutkan dengan perhitungan Disolusi Efisiensi (DE) setiap formula. Nilai-nilai
DE yang diperoleh diuji statistik dengan Kruskal Wallis yang dilanjutkan dengan
analisis post hoc menggunakan uji Wilcoxon.
Hasil dari uji disolusi menunjukkan bahwa ada perbedaan Disolusi
Efisiensi (DE) antar formula, yaitu pada Formula 3 menunjukkan disolusi
efisiensi paling tinggi kemudian diikuti oleh Formula 2, dan yang paling kecil
adalah Formula 1.
Kata kunci : kurkumin, isolat ekstrak temulawak, dispersi padat, Spray Drying,
HPMCE-15, drug load, disolusi, TLC-Densitometri
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
ABSTRACT
The main content of ginger (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) are
curcuminoids, consisting of curcumin, demetoksikurkumin, and
bisdemetoksikurkumin. Curcumin has several pharmacological effects, such as
antioxidant, anti inflammatory, antimicrobial, and anticancer. However, curcumin
has a very low solubility in water. Solubility of the compound is expected to be
improved by solid dispersions.
This study aimed to determine the effect of the proportion of drugloaded
solid dispersion dissolution of ginger. The research was conducted by the method
of creaty physical mixture and solid dispersion using carrier HPMC E-15. The
manufacture of solid dispersions was done by using spray drying method with 3
different formulas: Formula 1 which consisted of ginger extract: HPMC E-15 (1:
1), Formula 2, which consists of a ginger extract: HPMC E-15 (1:2) and 3 formula
consisting of ginger extract: HPMC E-15 (1:4). Dissolution testing was done by
using a phosphate buffer dissolution medium, then levels were measured by using
TLC densitometry. Curcumin levels expressed as a percentage of curcumin were
dissolved, followed by the calculation of Dissolution Efficiency (DE) every
formula. DE values obtained statistically with Kruskal Wallis test followed by
post hoc analysis using Wilcoxon test.
The results of the dissolution test showed that there has a difference
Dissolution Efficiency (DE) between formulas, the dissolution of Formula 3
showed the highest efficiency, followed by Formula 2, and the smallest is
Formula 1.
Keywords: curcumin, turmeric extract isolates, solid dispersion, spray
drying,HPMC E-15, drug load, dissolution, TLC-densitometry
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Temulawak merupakan salah satu tanaman yang banyak digunakan
sebagai obat tradisional di Indonesia. Karena memiliki efek samping yang rendah
dan tergolong murah, saat ini banyak orang menggunakan obat tradisional salah
satunya adalah dengan memanfaatkan temulawak sebagai obat tradisional
(Kristina, dkk., 2006). Pada umumnya bagian tanaman temulawak (Curcuma
xanthorrhiza Roxb.) yang banyak digunakan adalah bagian rimpang. Kurkumin
adalah konstituen utama yang diambil dari temulawak, yang memiliki sejumlah
efek farmakologis seperti antiinflamasi, antibakteri, antikanker. (Sharma et al,
2005).
Kelarutan merupakan sifat fisikokimia senyawa obat yang penting dalam
meramalkan derajat absorpsi obat dalam saluran cerna. Obat-obat yang
mempunyai kelarutan kecil dalam air (poorly soluble drugs) seringkali
menunjukkan ketersediaan hayati rendah dan kecepatan disolusi merupakan tahap
penentu (rate limiting step) pada proses absorpsi obat (Shargel dan Yu,
2005).Beberapa metode dapat digunakan untuk meningkatkan kelarutan obat,
antara lain: melalui pembentukan garam, perubahan struktur internal kristal
(polimorfi) atau penambahan suatu bahan penolong, misalnya bahan
pengompleks, surfaktan dan kosolven (Yalkowsky, 1981).Kurkumin praktis tidak
larut dalam air pada pH asam atau netral.Obat-obat yang kelarutannya sangat kecil
sering banyak menimbulkan masalah pada proses absorpsinya setelah obat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
diberikan, karena obat dapat diabsorpsi oleh tubuh bila sudah dalam
bentuk terdistribusi secara molekular di tempat proses absorpsi berlangsung.
Upaya mengatasinya antara lain dapat dilakukan melalui peningkatan kecepatan
disolusinya (Wang et al,1997).
Dispersi padat adalah dispersi satu atau lebih bahan aktif dalam suatu
pembawa inert atau matriks dalam bentuk padat yang dibuat dengan metode
peleburan, pelarutan atau pelarutan-peleburan. Teknik dispersi padat pertama kali
diperkenalkan oleh Sekiguchi dan Obi tahun 1961 dengan pembawa yang mudah
larut diantaranya: polivinilpirolidon, polietilen glikol, dan urea dengan tujuan
untuk memperkecil ukuran partikel, meningkatkan laju dissolusi dan absorpsi obat
yang tidak larut dalam air (Chiou dan Riegelman, 1971).
Dari persamaanNoyes-Whitney, terlihat bahwa dC/dt (laju disolusiobat)
dapat ditingkatkan melalui peningkatan A (luas permukaan partikel) dan Cs
(kadar obat dalam stagnant layer )(Anselet al., 2005). Cara praktis untuk
meningkatkan kedua parameter tersebut dapat dilakukan praperlakuan terhadap
bahan obat melalui pembentukan dispersi padat. Melalui pembentukan dispersi
padat ini memungkinkan terjadinya pengecilan ukuran partikel, perubahan
struktur internal kristal, terbentuknya campuran eutektik, terjadinya larutan padat
dan terbentuknya ikatan kompleks antara bahan obat dan bahan pembawa.
Masing-masing merupakan pendukung untuk meningkatkan kecepatan disolusi
bahan obat (Chiou dan Riegelman, 1971).
Pembuatan dispersi padat ini dilakukan dengan cara menambahkan bahan
pembawa ke dalam ekstrak temulawak yang sesuai dengan proporsi drug load
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
yang telah ditentukan. Drug load yang semakin meningkat dengan penambahan
pembawa polisakarida akan menyebabkan laju disolusi berjalan lambat. Adanya
fenomena ini menandakan kristalisasi dari obat yang tidak terkontrol terjadi
karena adanya supersaturasi. Pembuatan dispersi padatan amorphous dapat
meningkatkan laju disolusi obat yang kelarutannya rendah (Srinarong et al, 2009).
Bahan pembawa yang digunakan adalah Hydroxypropylmethylcellulose
(HPMC), yang merupakan suatu polimer hidrofil, turunan selulosa yang dapat
meningkatkan hidrofilisitas kristal obat dan mempunyai kemampuan tinggi
membentuk dispersi padat dengan beberapa macam obat yang kelarutannya
rendah dalam air (Sonali et al, 2010).Sifat hidrofilik HPMC inilah yang
dimanfaatkan untukmeningkatkan kelarutan kurkumin yang rendah dalam air.
Dabbagh dan Taghipour (2007) telah melaporkan bahwa bahwa HPMC dapat
digunakan sebagai bahan pembawa untuk meningkatkan karakteristik fisikokimia
ibuprofen.
B. Rumusan Masalah
Dari uraian diatas, dapat ditarik rumusan permasalahan yaitu apakah
adapengaruh proporsi drug loadterhadap profil disolusi dispesi padat kurkumin
dari ekstrak temulawak dalam HPMC E-15 dengan spray drying ?
C. Keaslian Penelitian
Berdasarkan penelusuran literatur yang dilakukan, penelitian mengenai
pengaruh proporsi drug loadterhadap profil disolusi dispesi padat kurkumin dari
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
ekstrak temulawak dalam HPMC dengan spray drying belum pernah dilakukan.
Penelitian tentang dispersi padat dari kurkumin adalah Studi Disolusi dan
Absorbsi dari kurkumin dalam dispersi padat dengan polimer PVP (Dong-Hui et
al, 2006).
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat teoretis
Penelitian ini diharapkan dapat menambah informasi mengenai cara
peningkatan disolusi kurkumin dengan pembuatan dispersi padat ekstrak
temulawak dalam HPMC dengan metode spray drying.
2. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan menghasilkan sebuah bukti ilmiah yang dapat
menunjukkan pengaruh dari dispersi padat dengan pembawa HPMC dapat
meningkatkan disolusi dari kurkumin.
E. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Meningkatkan kemampuan disolusi dari kurkumin ekstrak temulawak
yang memiliki kelarutanrendah dalam air.
2. Tujuan khusus
Mengetahui ada tidaknya pengaruh proporsi drug load terhadap profil
disolusi dispersi padat kurkumin ekstrak temulawak dalam HPMC dengan
metode spray drying.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Kurkumin
Kurkuminoid adalah suatu campuran yang kompleks berwarna kuning
oranye yang diisolasi dari tanaman dan mempunyai efek terapeutik.
Kurkuminoidterdiri dari kurkumin (deferuloil metan), demetoksi kurkumin
(feruloil-phidroksi-sinnamoiletan) dan bis-demetoksi-kurkumin (bis-(p-
hidroksisinnamoil)-metan) (Sharmaet al, 2005).
Gambar 1. Struktur Kurkumin(Kristina, dkk., 2006)
Kurkumin (1,7 bis (4-hidroksi-3-metoksifenil) 1,6-heptadiene-3,5 dion)
pertama kali diisolasi pada tahun 1815, kemudian tahun 1910 kurkumin
didapatkan dalam bentuk kristal dan kristal kurkumin bisa dilarutkan tahun 1913.
Kurkumin bersifat tidak dapat larut dalam air, tetapi larut dalam etanol dan aseton
(Kristina, dkk., 2006). Kurkumin biasanya diekstrak dari bumbu dapur seperti
temulawak dan kunyit yang merupakan polifenol yang memiliki kualitas baik.
Menurut penelitian selama 2 dekade ini, kurkumin banyak memiliki aktivitas
farmakologi, contohnya adalah dapat menjadi antioksidan, anti inflamasi, anti
proliferatif dan memiliki aktivitas anti aging(Majeed et al., 1995). Dengan
berbagai kelebihan tersebut, kurkumin juga memiliki kekurangan yaitu
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
bioavalibilitas yang rendah, hal tersebut dikarenakan rendahnya disolusi
dalam air (< 0,1 µg/ml) (Tonnesen dan Karlsen 1985).
Stabilitas larutan kurkumin sangat dipengaruhi oleh pH. Pada suasana
asam kurkumin relatif stabil, tetapi akan secara cepat terdegradasi pada suasana
basa. Kurkumin mengalami degradasi pada pH 7-10 menjadi asam ferulat dan
feruloilmetana. Feruloilmetana secara cepat membentuk produk kondensasinya
yang ditunjukkan dengan warna larutan yang berwarna kuning sampai kuning
kecoklatan. Hidrolisis feruloilmetana menghasilkan senyawa aseton dan vanilin
yang jumlahnya meningkat terus seiring dengan lamanya waktu inkubasi
(Tonnesen dan Karlsen 1985).
B. Dispersi Padat
Istilah dispersi padat merujuk kepada sekelompok produk padat yang
terdiri dari setidaknya dua komponen yang berbeda. Pada umumnya terdiri dari
matriks yang bersifat hidrofilik dan obat yang bersifat hidrofobik. Matriks dapat
bersifat kristal atau amorf dan obat tersebut dapat terdispersi secara molekular
menjadi partikel amor maupun partikel kristal(Singh et al, 2011)
Metode persiapan dispersi padat :
1. Metode pelelehan
Metode pelelehan yaitu pencampuran secara fisika dari obat larutan
pembawa yang kemudian dipanaskan sampai meleleh. Campuran kedua cairan ini
kemudian memadat dengan cepat setelah dibekukan pada penangas berisi es (ice
bath) dengan pengadukan kuat lalu masa padat yang terbentuk tersebut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
dihancurkan, diserbuk dan diayak. Massa padat tersebut biasanya membutuhkan
penyimpanan satu hari atau lebih dalam desikator pada suhu kamar untuk
pengerasan dan kemudahan diserbuk(Goldberg et al, 1965)
Keuntungan utama metode ini adalah sederhana dan ekonomis. Sebagai
tambahan dapat dicapai supersaturasi zat terlarut atau obat pada sistem dengan
mengkristalkan lelehan langsung secara cepat dari temperatur tinggi Dibawah
kondisi seperti itu, molekul zat terlarut tertahan pada matriks pelarut dengan
proses pemadatan langsung, sehingga didapat dispersi kristalit yang lebih halus
dari sistem campuran eutetis sederhana bila metode ini digunakan.
Kekurangannya adalah banyak zat baik obat atau pembawa, dapat terurai atau
menguap selama proses peleburan pada suhu tinggi (Chiou dan Riegelman, 1971).
2. Metode pelarutan
Dalam metode ini, campuran fisik dari obat dan matriks larut dalam
pelarut biasa, diikuti dengan penguapan pelarut. Keuntungan utama dari metode
pelarut adalah cara dekomposisi termal dari obat-obatan atau operator dapat
dicegah karena suhu relatif rendah yang diperlukan untuk penguapan pelarut
organik.Kekurangannya adalah biaya mahal, kesukaran memisahkan pelarut
secara sempurna, kemungkinan efek merugikan dari pelarut yang jumlahnya dapat
diabaikan terhadap stabilitas obat, pemilihan pelarut umum yang mudah menguap,
dan kesukaran menghasilkan kembali bentuk kristal (Chiou dan Riegelman,
1971).
Salah satu syarat penting untuk pembuatan dispersi padat dengan metode
pelarutan adalah bahwa obat dan pembawa cukup larut dalam pelarut. Suhu yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
digunakan untuk penguapan pelarut biasanya terletak pada kisaran 23-65º C
(Leuner dan Dressman, 2000).
3. Metode pelarutan-pelelehan
Sistem dispersi padat dibuat dengan melarutkan dahulu obat dalam
pelarut yang sesuai dan mencampurnya dengan lelehan polietilen glikol, dapat
dicapai dibawah suhu 70º C, tanpa memisahkan pelarut (Chiou dan Riegelman,
1971).
C. HPMC
Hydroxypropyl Methylcellulose (HPMC) merupakan turunan dari
metilselulosa yang memiliki ciri-ciri serbuk atau butiran putih, tidak memiliki bau
dan rasa. Sangat sukar larut dalam eter, etanol atau aseton. Dapat mudah larut
dalam air panas dan akan segera menggumpal dan membentuk koloid. Mampu
menjaga penguapan air sehingga secara luas banyak digunakan dalam aplikasi
produk kosmetik dan aplikasi lainnya
Gambar 2. Struktur HPMC( Rowe, 2006).
Beberapa alasan menggunakan polimer HPMC yaitu (1) kelarutan
polimer yang khas dalam cairan lambung-usus serta dalam sistem pelarut organik
dan pelarut air, (2) tidak berpengaruh dalam kekerasan tablet dan pemakaian obat,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
(3) fleksibilitas,mengurangi resistensi, tidak memiliki rasa atau bau, (4) stabil
terhadap panas, cahaya, udara, dan dapat disesuaikan dengan tingkat kelembaban,
(5) mempunyai kemampuan untuk mencampurkan zat warna atau zat aditif
lainnya kedalam lapisan tipis tanpa kesukaran (Lachman, dkk., 1994).
D. Spray Drying
Spray drying adalah metode untuk memproduksi bubuk kering dari
cairan atau bubur dengan pengeringan cepat dari gas panas. Ini adalah metode
pengeringan yang paling banyak digunakan untuk bahan yang sensitif terhadap
panas seperti makanan dan farmasi. Distribusi partikel dengan ukuran yang
seragam adalah alasan digunakannya metode spray drying untuk beberapa produk
industri, seperti katalis. Udara adalah media pengeringan panas, namun jika
pelarut yang digunakan mudah terbakar seperti etanol atau produk tersebut sensitif
terhadap oksigen maka digunakan nitrogen(Mujumdar, 2007) .
Spray dryer adalah perangkat yang digunakan dalam spray drying.
Dibutuhkan udara panas yang dapat memisahkan zat terlarut atau suspensi
menjadi serbuk kering dan mengubah pelarut ke dalam bentuk uap. Serbuk kering
ini biasanya dikumpulkan dalam drum atau siklon. Aliran zat cair ini
disemprotkan melalui nozzle ke dalam aliran uap panas dan kemudian pelarutnya
menguap. Sebuah nozzle biasanya digunakan untuk membuat ukuran droplet
sekecil mungkin, memaksimalkan perpindahan panas dan laju penguapan air.
Ukuran droplet berkisar antara 20-180 µm tergantung pada jenis nozzle. Ada dua
jenis nozzle, yang pertama high pressure single fluid nozzle (50 sampai 300 bar)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
dan two-fluid nozzles: satu fluida adalah cairan kering dan yang kedua adalah gas
terkompresi (umumnya pada 1 sampai 7 bar). Spray dryer dapat mengeringkan
produk dengan cepat dibandingkan dengan metode pengeringan lainnya (Niessen,
2002)
Pada umumnya, spray dryers menggunakan beberapa jenis alat
penyemprot atau spraynozzle untuk mendispersikan cairan atau bubur. Yang
paling umum digunakan adalah rotary disk dan single-fluid high pressure swirl
nozzles. Alternatif yang lain yang dapat digunakan adalah two-fluid atau
ultrasonic nozzles. Aplikasi yang paling umum digunakan adalah dalam kisaran
diameter 100 sampai 200 µm. Bubuk kering yang dihasilkan biasanya free-
flowing.
Keterangan :
A : Solusi atau suspensi yang akan dikeringkan
B :
1 : Udara kering
2 : Pemanas udara kering
3 : Penyemprot solusi / suspensi
4 : Ruang pengeringan
5 : Ruang antara siklon dan ruang pengering
6 : Siklon
7 : Gas pengering dikeluarkan
8 : Hasil (serbuk kering)
Gambar 3. Spray Dryer(Niessen, 2002).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
E. Disolusi
Disolusi didefinisikan sebagai proses suatu zat padat masuk ke dalam
pelarut menghasilkan suatu larutan. Secara sederhana, disolusi adalah proses
zatpadat melarut. Secara prinsip, proses ini dikendalikan oleh afinitas antara zat
padat dan pelarut(Syukri,2002).
Sifat-sifat fisikokimia dari obat yang mempengaruhi laju disolusi
meliputikelarutan, bentuk kristal, bentuk hidrat solvasi dan kompleksasi serta
ukuran partikel. Sifat-sifat fisikokimia lain seperti kekentalan serta keterbasahan
berperan terhadap munculnya permasalahan dalam disolusi seperti terbentuknya
flokulasi, flotasi dan aglomerasi (Syukri,2002).
Uji disolusi digunakan untuk menentukan kesesuaian antara persyaratan
disolusi yang tertera dalam masing-masing monografi untuk sediaan tablet dan
kapsul , kecuali pada etiket dinyatakan bahwa tablet harus dikunyah. Persyaratan
disolusi tidak berlaku untuk kapsul gelatin lunak kecuali bila dinyatakan dalam
masing-masing monografi , uji disolusi atau uji waktu hancur tidak setara khusus
dinyatakan untuk sediaan bersalut enterik, maka digunakan cara pengujian untuk
sediaaan lepas lambat , kecuali dinyatakan lain pada masing-masing monografi
(Dirjen POM, 1995).
F. KLT-Densitometri
Kromatografi didefinisikan sebagai prosedur pemisahan zat terlarut oleh
suatu proses migrasi diferensial dinamis oleh sistem yang terdiri dari dua fase atau
lebih, salah satu diantaranya bergerak secara berkesinambungan dalam arah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
tertentu dan di dalamnya zat-zat itu menunjukkan perbedaaan mobilitas
disebabkan perbedaan dalam adsorpsi, partisi, kelarutan, tekanan uap, ukuran
molekul, atau kerapatan muatan ion (Dirjen POM RI, 1995).
Kromatografi lapis tipis adalah suatu cara pemisahan yang berdasarkan
pada pembagian campuran senyawa dalam dua fase, dimana fase gerak bergerak
terhadap fase diam dan fase diam berupa suatu bidang datar. Analisis dengan
kromatografi lapis tipis (KLT) sering digunakan karena prosedurnya sederhana,
pemisahan lebih cepat dan baik serta dapat memisahkan dalam jumlah yang relatif
kecil sampai beberapa mikrogram (Stahl, 1969).
KLT-Densitometri merupakan salah satu metode analisa kuantitatif.
Penetapan kadar suatu senyawa dengan metode ini dilakukan dengan mengukur
kerapatan bercak senyawa yang dipisahkan dengan cara KLT. Pada umumnya
pengukuran kerapatan bercak tersebut dibandingkan dengan kerapatan bercak
senyawa standar yang dielusi bersama-sama (Hardjono, 1985).
Metode densitometri mempunyai cara kerja yang sederhana dan cepat.
Pada metode densitometri diperlukan adsorben dan fase gerak yang murni. Untuk
memperoleh hasil yang baik lazimnya digunakan adsorben siap pakai yang telah
mengalami pra pencucian (Gritter, 1991).
G. Validasi Metode Analisis
Validasi metode menurut United States Pharmacopeiadilakukan untuk
menjamin bahwa metode analisis bersifat akurat, spesifik, reprodusibel, dan tahan
pada kisaran analit yang akan dianalisis. Secara singkat, validasi merupakan aksi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
konfirmasi bahwa metode analisis yang akan digunakan sesuai dengan tujuan
yang diinginkan (Rohman, 2009).
Kategori yang terdapat dalam United States Pharmacopeia:
1. Kategori I
Metode untuk kuantifikasi komponen mayor dalam produk ruahan zat
aktif, termasuk senyawa-senyawa pengawet dalam produk akhir obat,
diklasifikasikan dalam kategori I. Metode uji dan keseragaman kandungan masuk
dalam kategori ini. Analisis zat dengan kadar kecil ini tidak diisyaratkan pada uji
keseragaman kandungan, karenanya penentuan Limit of Detection dan Limit of
Quantification dalam uji ini tidaklahpenting (Rohman, 2009).
2. Kategori II
Metode kategori II ditujukan untuk menentukan pengotor/ pengganggu
(impurities) dalam ruahan obat (bulk), produk-produk degradasi dalam produk
akhir obat atau dalam proses pembersihan (cleanng process). Metode ini lebih
lanjut dibagi menjadi 2 yaitu ke dalam uji kuantitatif dan uji batas(limit test)
(Rohman, 2009).
3. Kategori III
Metode-metode yang digunakan untuk menentukan karakteristik kinerja
produk akhir jatuh pada kategori III. Uji disolusi (tidak termasuk pengukurannya)
dan uji-uji pelepasan obat merupakan contoh metode yang masuk kategori ini
(Rohman, 2009).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
Tabel I. Elemen-elemen data yang dibutuhkan untuk uji validasi
Parameter
Kinerja
Analisis
Pengujian
kategori I
Pengujian kategori
II
Uji
kategori
III
Kuantitatif Uji
Batas
Akurasi Ya Ya * *
Presisi Ya Ya Tidak Ya
Spesifisitas Ya Ya Ya *
LOD Tidak Tidak Ya *
LOQ Tidak Ya Tidak *
Linearitas Ya Ya Tidak *
Kisaran (range) Ya Ya * *
Ruggedness Ya Ya Ya Ya
*Mungkin dibutuhkan, tergantung pada uji spesifiknya
(Rohman, 2009).
H. Landasan Teori
Kurkumin merupakan senyawa yang dapat diekstrak dari temulawak
ataupun kunyit. Senyawa tersebut dikenal memiliki beberapa aktivitas seperti
antioksidan (anti radikal bebas), anti inflamasi (anti radang), anti kolesterol, dan
anti kanker. Karena kurkumin memiliki beberapa kelemahan, seperti kelarutan
dalam air yang rendah sehingga bioavailibilitas (ketersediaan dalam darah) yang
rendah oleh karena itu harus dicari penyelesaian dari masalah tersebut.
Untuk memecahkan masalah tersebut, maka dilakukan Dispersi padat
kurkumin dengan matriks HPMC. Dispersi padat adalah dispersi satu atau lebih
bahan aktif dalam suatu pembawa inert atau matriks dalam bentuk padat yang
dibuat dengan metode peleburan, pelarutan atau pelarutan-peleburan. Teknik
dispersi padat pertama kali diperkenalkan oleh Sekiguchi dan Obi (1961) dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
pembawa yang mudah larut diantaranya: polivinilpirolidon, polietilen glikol, dan
urea dengan tujuan untuk memperkecil ukuran partikel, meningkatkan laju
dissolusi obat yang tidak larut dalam air.
Drug loadyaitu jumlah kurkumin yang terkandung dalam keseluruhan
total kurkumin dan pembawa. Semakin tinggi nilai drug load menunjukkan bahwa
semakin banyak obat yang terkandung dalam dispersi padat sedangkan jumlah
pembawa yang ada semakin sedikit sehingga disolusi obat menjadi lebih rendah.
Uji disolusi menggunakan alat uji disolusi. Metode uji disolusi yang
dilakukan adalah dengan metode klasik. Metode ini mengukur jumlah zat aktif
yang terlarut hanya pada waktu tertentu. Kemudian kadar kurkumin diukur
dengan KLT-Densitometri.
I. Hipotesis
Berdasarkan landasan teori, dapat dihipotesiskan bahwa proporsi drug
load berpengaruh terhadap peningkatan disolusiefisiensi kurkumin ekstrak
temulawak dalam HPMC dengan spray drying,dimana semakin kecil proporsi
drug load diperkirakan semakin besardisolusiefisiensikurkuminekstrak
temulawak.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
16
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental karena adanya
perlakuan terhadap senyawa uji. Rancangan penelitian ini adalah rancangan
penelitian acak pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel
a. Variabel bebas.
Proporsi drug load yang digunakan yaitu 2,4 %, 4 % dan 6 %
b. Variabel tergantung.
Persen kurkumin yang terdisolusi
c. Variabel pengacau.
1) Variabel pengacau terkendali.
Intensitas cahaya selama penyimpanan
2) Variabel pengacau tak terkendali.
Suhu dan kelembaban ruangan
2. Definisi operasional
a. Dispersi padat adalah mendispersikan ekstrak temulawak pada pembawa
HPMC, yang disiapkan dengan cara dilarutkan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
b. Drug load adalah kurkumin yang terkandung dalam keseluruhan total antara
pembawa (HPMC) dan ekstrak temulawak. Drug load yang digunakan
dalam penelitian iniadalah 2,4%, 4% dan 6%.
c. Spray drying adalah metode yang digunakan untuk mengeringkan dengan
cara bahan yang ingin dikeringkan, diubah ke dalam bentuk butiran-butiran
air dengan cara diuapkan menggunakan atomizer. Air dari bahan yang telah
berbentuk tetesan-tetesan tersebut kemudian di kontakan dengan udara
panas. Peristiwa pengontakkan ini menyebabkan air dalam bentuk tetesan-
tetesan tersebut mengering dan berubah menjadi serbuk. Selanjutnya proses
pemisahanantara uap panas dengan serbuk dilakukan dengan cyclone.
d. Disolusi didefinisikan sebagai suatu proses melarutnya dispersi padat
ekstrak temulawak ke dalam suatu medium buffer phosphat.
e. Pengukuran kelarutan dan disolusi kurkumin pada dispersi padat dilakukan
dengan KLT-Densitometri.
f. Disolusi Efisiensi adalah merupakan perbandingan luas di bawah kurva
disolusi dengan luas segi empat seratus persen kurkumin yang terlarut
dalam medium buffer phosphat pada menit 120.
C. Bahan Penelitian
Ekstrak Temulawak(PT Phytochemindo Reksa), baku kurkumin(Dari
Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt.),kapsul cangkang keras gelatin No.00(PT.
Brataco Chemika),kloroform, etanol(Merck-Germany), HPMC(Methocel E15),
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Aquadest, MeOH, Asam Asetat, NaOH, etanol 96%(PT. Brataco Chemika),
Sodium Lauril Sulfat (Merck-Germany), NaH2PO4.2H2O (Merck-Germany).
D. Alat Penelitian
Alat-alat gelas,Dissution tester (Erweka),micropipete
(SocorexPropette)mortir, stamper, neracaanalitis (Sartorius, Metler Toledo), TLC-
Densitometri ( Camag ) , sentrifuge,dry box, magnetic stirer (Labinco BV-
Netherlands), ph indikator universal (Merc),spray dryer(LabPlant).
E. Tata Cara Penelitian
1. Pembuatan dispersi padat
Dispersi padat isolat ekstrak rimpang temulawak - HPMC E-15 dibuat
dengan menimbang serbuk isolat ekstrak rimpang temulawak kemudian dilarutkan
dalam 100 mL etanol 96%. Campuran ini kemudian ditambahkan ke dalam
HPMC E-15 yang terlebih dahulu dilarutkan dengan aquades, kedua campuran
tersebut kemudian diaduk menggunakan magnetic stirer hingga homogen.Sistem
dispersi padat ini dibuat dengan menggunakan metode pelarutan. Larutan ekstrak
temulawak - HPMC E-15 dihilangkan pelarutnya dengan menggunakan spray
dryer dengan kondisi pengoperasian: suhu “inlet”, 120°C; suhu “outlet”, 60 -
70°C; pump speed, 8 ml/menit dan ukuran “nozzle”, 1 mm. Serbuk dispersi padat
isolat ekstrak rimpang temulawak - HPMC E-15yang diperoleh ditimbang
kemudian dimasukkan dalam cangkang kapsul keras ukuran 00. Proses ini
diusahakan dilakukan dalam ruangan dengan RH 50 dan terlindung dari cahaya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
Tabel II. Perbandingan HPMC dan Ekstrak temulawak dalam tiap formula
F1 F2 F3
HPMC 5000 mg 10.000 mg 20.000 mg
Eksrak Temulawak 5000 mg 5000 mg 5000 mg
Perbandingan HPMC :Eksrak Temulawak 1 : 1 2 : 1 4 : 1
Drugload (%) 6 4 2,4
2. Pembuatan campuran fisik
Campuran fisik dibuat dengan mencampurkan serbuk ekstrak ekstrak
temulawak dan HPMC, yang masing-masing telah diayak sebelumnya
denganayakan no. mesh 50. Jumlah serbuk ekstrak temulawak dan HPMC yang
dicampurkan dihitung berdasarkan jumlah dispersi padat yang diperoleh
tiapreplikasinya.
3. Uji disolusi
Uji disolusi dilakukan dengan mendisolusikan dispersi padat dan
campuran fisik ke dalam medium disolusi, yaitu Buffer Phosphat pH 6. Buffer
Phosphat dibuat dengan menimbang 3,12 g NaH2PO4.2H2O kemudian dilarutkan
ke dalam aquades 1000 mL dan ditambahkan NaOH. Dalam larutan tersebut
kemudian ditambahkan SLS 5 g. Kemudian medium disolusi dimasukkan ke alat
uji disolusi sebanyak 500 ml dengan pengaturan kecepatan putar pedal 100 rpm
dan suhu 37° ± 0,5 C. Cuplikan diambil pada menit ke 0, 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90
dan 120.
Setiap pengambilan cuplikan pada menit yang ditentukan, cuplikan
diambil sebanyak 5 ml dan setelah itu ditambahkan 5 ml medium disolusi ke
dalam alat uji disolusi. Cuplikan yang telah diambil kemudian disaring dan di
ekstraksi dengan etil asetat dan dianalisis kadarnya dengan KLT-Densitometri.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
F. Penetapan kadar kurkumin dalam Cuplikan disolusi Ekstrak Temulawak
dengan TLC-Densitometri
1. Pembuatan fase gerak
Fase gerak yang digunakan dalam penelitian menggunakankloroform :
etanol : aquadest (25:0,96:0,04). Fase gerak dibuat dalam labu ukur 50
mLkemudian digojog.
2. Pembuatan larutan baku kurkumin
a. Pembuatan larutan stok kurkumin 2000μg/ml.
Sejumlah lebih kurang50 mg baku kurkumin ditimbang seksama kemudian
dilarutkan dalam etanolhingga volume tepat 25,0 mL.
b. Pembuatan seri larutan baku.
Sebanyak 0,25 mL; 0,5mL; 0,75 mL; 1 mL; 1,25 mL; 1,5, mL; dan 1,75
mL larutan stok kurkumin diambil dandimasukkan ke dalam labu ukur 10
ml kemudian diencerkan dengan etanol hingga tanda, sehingga didapatkan
konsentrasi 50 μg/ml, 100 μg/ml, 150μg/ml, 200μg/ml, 250 μg/ml,
300μg/ml, dan 350μg/ml.
c. Penetapan panjang gelombang maksimum.
Seri larutan baku konsentrasi 50 μg/ml, 200 μg/ml, dan 350μg/ml masing-
masing ditotolkan dengan volume penotolan 1 µL pada plat KLT dengan
fasediam silika gel GF 60 dan setelah kering dikembangkan dalam bejana
kromatografiyang telah dijenuhi dengan fase gerak. Setelah mencapai jarak
rambat 6,5 cm, platdikeluarkan dari bejana dan dikeringkan. Plat hasil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
pengembangan kemudiansecepatnya discan panjang gelombang serapan
maksimumnya dengandensitometer.
d. Pembuatan kurva baku dan pengamatan nilai Retardation Factor (Rf)
kurkumin.
Seri larutan baku konsentrasi 50 μg/ml, 100 μg/ml, 150μg/ml, 200 μg/ml,
250 μg/ml, 300μg/ml, dan 350μg/ml.masing-masing ditotolkan dengan
volume penotolan 1 µL pada plat KLT dengan fase diam silika gel G 60 dan
setelah kering dikembangkan dalam bejana kromatografi yang telah dijenuhi
dengan fase gerak. Setelah mencapai jarak rambat 6,5 cm, plat dikeluarkan
dari bejana dan dikeringkan. Plat hasil pengembangan kemudian secepatnya
diukur AUC dengan densitometer. Replikasi dilakukan sebanyak 3 kali dan
pilih persamaan kurva baku yang paling baik. Selain itu dilihat pula nilai Rf
dari masing-masing seri baku kurkumin.
e. Penentuan recovery dan Coefficient of Variations (CV) baku.
Seri larutan baku konsentrasi 50 μg/ml, 200 μg/ml, dan 350μg/ml
diberiperlakuan seperti pada poin 2.d Replikasi dilakukan sebanyak 5 kali.
Selanjutnyadihitung kadar terukur dengan menggunakan persamaan kurva
baku yang telahdibuat pada poin 2.d. Berdasarkan data ini dapat ditentukan
recovery dan CVnya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
f. Penentuan recovery dan Coefficient of Variations (CV) baku dalam matriks
sampel.
1) Pembuatan larutan sampel (LS)
Sejumlah lebih kurang 50 mgekstrak temulawak ditambah etanol hingga
volume 50 mL. Replikasi dilakukan sebanyak 5 kali.
2) Pembuatan larutan sampel dengan penambahan baku kurkumin (LSK).
Sejumlah 2,25 mL larutan baku kurkumin dengan konsentrasi 90 μg/ml
dimasukkan dalam labu takar 50 mL, kemudian ditambahkan 50 mg
ekstrak temulawak dan ditambahkan medium disolusi hingga tanda,
setelah itu di ekstraksi menggunakan etil asetat kemudian dikeringkan
dengan udara mengalir, setelah itu ditambahkan etanol hingga tanda .
Replikasi dilakukan sebanyak 5 kali.
3) Pengembangan dan pengukuran.
LSdan LSKdiberi perlakuan sepertipada poin 2.d Setelah itu dihitung
kadar baku kurkumin dalam sampel menggunakan persamaan kurva baku
yang telah dibuat pada poin 2.d. Kadar bakukurkumin dalam sampel
adalah selisih kadar LSKdengan kadar LSSelanjutnyadihitung recovery
dan CV nya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
G. Analisis statistik penetapan kadar kurkumin terlarut dan Disolusi
Efisiensi
Data uji disolusi kurkumin dibuat dalam bentuk kurva hubungan antara
jumlah persentase kurkumin terdisolusi terhadap waktu. Kemudian dilakukan
perhitungan disolusi efisiensi selama 120 menit. Kemudian data Disolusi
Efisiensi tersebut dibandingkan dengan uji statistik.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pembuatan Dispersi Padat
Dispersi padat isolat ekstrak temulawak - HPMC E-15 dibuat dengan
mencampurkan ekstrak temulawak dengan HPMC E-15 sesuai dengan proporsi
drug load yang tertera dalam tabel II. Serbuk isolat ekstrak temulawak yang
digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk ektrak rimpang temulawak yang
berasal dari PT Phytochemindo Reksa memiliki kandungan kurkuminoid
sebanyak 15 %, kemudian dianalisis dengan menggunakan KLT-Densitometri
untuk mendapatkan kadar kurkumin dari ekstrak tersebut. Setelah dianalisis di
dapatkan kadarkurkumin dalam ekstrak adalah sebesar12,12 %.Dispersi padat
tersebut dibuat dengan alat spray dryer LabPlant dengan parameter, suhu inlet
120 o C, suhu exhaust 60
oC – 70
oC, pump speed 8 mL/menit, nozzle 1 mm. Cara
kerja dari alat Spray Dryer yaitu dengan adanya uap panas akan mengubah cairan
campuran antara isolat temulawak - HPMC E-15 menjadi serbuk kering. Setelah
dispersi padat dihasilkan, dispersi padat tersebut dibungkus dengan aluminium
foil dan disimpan dalam desikator.
B. Pembuatan Campuran Fisik
Campuran fisik dibuat dengan cara mencampur isolat temulawak dengan
HPMC E-15 secara manual dalam mortir sampai homogen. Perhitungan jumlah
campuran isolat temulawak dengan HPMC E-15 dalam campuran fisik sama
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
dengan perhitungan dispersi padat seperti dalam tabel II yang kemudian
dimasukkan ke dalam kapsul. Campuran fisik diberi perlakuan yang sama seperti
dispersi padat yaitu dibungkus dengan aluminium foil dan disimpan dalam
desikator, kemudian dimasukkan ke dalam kapsul No.00 sebelum diuji disolusi.
Hasil disolusi dari campuran fisik akan dibandingkan dengan dispersi padat.
C. Pembuatan Fase Gerak
Pembuatan fase gerak pada penelitian ini menggunakan fase gerak yang
diperoleh dari penelitian Martono (1996) yaitu kloroform : etanol : aquadest
(25:0,96:0,004). Pemilihan fase gerak sangat penting karena hal ini dapat
mempengaruhi waktu retensi dan komponen-komponen dalam sampel yang akan
dianalisis akan terpisah secara optimal. Sistem kromatografi pada penelitian ini
merupakan kromatografi fase normal, karena fase gerak pada penelitian ini
bersifat non polar, sedangkan fase geraknya, yaitu silika gel bersifat polar.
D. Pembuatan Larutan Baku
Larutan baku kurkumin dibuat dengan melarutkan baku kurkumin
menggunakan pelarut etanol. Penelitian ini menggunakan 7 seri konsentrasi baku
kurkumin, yaitu 50 μg/ml, 100 μg/ml, 150 μg/ml, 200 μg/ml, 250 μg/ml, 300
μg/ml dan 350 μg/ml. Pemilihan seri konsentrasi ini disesuaikan dengan melihat
respon detektor terhadap sinyal (peak) yang dihasilkan, apabila sinyal yang
dihasilkan pada konsentrasi tertentu terlalu kecil, maka sinyal tersebut dapat
terganggu oleh noise yang dihasilkan alat, maka pemilihan konsentrasi harus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
melihat rasio konsentrasi analit terhadap sinyal (respon detektor). Selain itu
pemilihan seri konsentrasi ini juga bertujuan agar respon analit yang terdapat
dalam sampel dapat masuk ke dalam respon seri larutan baku. Dengan demikian
persamaan kurva baku yang diperoleh dapat digunakan untuk penetapan kadar
analit dalam sampel.
E. Penetapan Panjang Gelombang Maksimum Kurkumin
Penetapan panjang gelombang maksimum kurkumin dilakukan agar
didapatkan panjang gelombang dimana kurkumin memberikan respon yang
maksimum, sehingga sensitivitas pengukurannya tinggi, serta memberikan hasil
yang reprodusibel pada pengulangan pengukuran. Oleh karena itu,
denganpengukuran pada panjang gelombang maksimum, diharapkan dapat
meminimalkan kesalahan pada pengukuran. Penetapan panjang gelombang
maksimum dilakukan dengan menggunakan 3 seri konsentrasi, yaitu konsentrasi
50 μg/ml, 200 μg/ml, dan 350 μg/ml. Penggunaan 3 seri konsentrasi ini bertujuan
untuk melihat apakah pada konsentrasi yang dianggap mewakili seluruh
konsentrasi pada seri baku ini dihasilkan spektrum serapanmaksimum yang sama.
Scanning panjang gelombang maksimumkurkumin dilakukan pada panjang
gelombang 400-500 nm, hal tersebut karena panjang gelombang 425 nm diketahui
sebagai panjanggelombang serapan maksimum kurkumin dimana menghasilkan
sensitivitaspengukuran paling baik (Paramasivam et al., 2008). Dari hasil
scanning dengan densitometer, diperoleh panjang gelombang maksimum (λ maks)
ketiga seri konsentrasi pada 425 nm.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
F. Pengamatan Nilai Retardation Factor (Rf) dan Pembuatan Kurva Baku
Kurkumin
Pengamatan nilai Rf merupakan parameter analisis kualitatif yang
nantinya digunakan untuk mengetahui ada tidaknya analit dalam sampel. Dari
hasil pengamatan, diperoleh nilai Rf baku kurkumin adalah 0,61 – 0,63. Nilai Rf
kurkumin dari sistem KLT ini dipengaruhi oleh interaksi kurkumin dengan fase
gerak maupun fase diamnya. Interaksi yang sesuai antara kurkumin dengan fase
diam dan fase gerak akan menghasilkan nilai Rf yang baik, yaitu antara 0,2-0,8.
Selain dari analisis interaksi senyawa terhadap fase diam dan fase geraknya.
Pembuatan kurva baku kurkumin dilakukan 3 replikasi. Hal ini bertujuan
untuk mendapatkan nilai koefisien korelasi yang paling baik. Koefisien korelasi
menunjukkan korelasi hubungan antara konsentrasi dengan respon pengukuran,
baik itu Area Under Curve (AUC). Respon yang menunjukkan nilai korelasi yang
paling baik terhadap konsentrasi akan digunakan dalam pembuatan persamaan
kurva baku.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
Tabel III. Data replikasi seri baku kurkumin
Baku kurkumin
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Seri
Baku
(µg/ml)
AUC
Tinggi
peak
Seri
Baku
(µg/ml)
AUC
Tinggi
peak
Seri
baku
(µg/ml)
AUC
Tinggi
peak
50 2524,3 68,8 49 2434,3 67,5 50 2543,3 68,5
100 6870,3 172,8 98 6162,4 166,6 100 6722 170,5
150 10964,8 275,1 147 9956,3 267,6 150 10710,2 272,8
200 14335,4 372,4 196 13971,2 363,3 200 13495,5 369,9
250 18322,3 443,7 245 17373,3 434,4 250 17487,3 441,3
300 21434,4 484,2 294 20832,5 472,1 300 20351,6 481,4
350 24593,2 528,2 343 24342,2 516 350 24976,6 525,5
A 521,1 A 1058 A 721,3
B 73,35 B 74,69 B 72,38
r 0,9979 r 0,9999 r 0,9979
Seri baku yang digunakan adalah seri baku yang memiliki linearitas yang
baik. Linearitas menyatakan adanya hubungan respon pengukuran yang secara
langsung proporsional terhadap konsentrasi (jumlah) analit. Suatu seri baku
memiliki linearitas yang baik apabila memiliki nilai r > 0,99 (Rohman, 2009).
G. Validasi Metode Analisis
Validasi metode analisis dilakukan untuk membuktikan bahwa metode
analisis yang digunakan memenuhi persyaratan validitas sehingga memberikan
hasil analisis yang dapat dipercaya. Validasi dilakukan dengan 3 seri konsentrasi
sebanyak 5 replikasi. Konsentrasi yang digunakan merupakan konsentrasi rendah,
sedang, dan tinggi dari konsentrasi seri baku, yaitu 50 μg/ml, 200 μg/ml, dan 350
μg/ml. Pemilihan ketiga seri konsentrasi ini adalah untuk mewakili setiap
konsentrasi dari seri baku, yaitu 50 μg/ml sampai 350 μg/ml. Parameter yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
digunakan dalam penentuan validitas metode ini adalah selektivitas, linearitas,
akurasi, presisi, dan range.
1. Selektivitas
Selektivitas menyatakan kemampuan metode penetapan kadar kurkumin
dalam temulawak untuk mengukur respon analit dalam sampel secara akurat
diantara semua komponen yang terdapat dalam matriks sampel. Pengambilan
analit dari matriks sampel, dilakukan dengan mengekstraksi sampel dengan
etanol. Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan ultrasonikator. Gelombang
ultrasonik yang dihasilkan akan memberikan energi atau getaran yang akan
mendorong kurkumin keluar dari serbuk simplisia yang tersuspensi dalam sampel,
kemudian adanya etanol akan dapat menarik dan melarutkan kurkumin. Hal ini
disebabkan karena kurkumin memiliki kelarutan yang baik dalam etanol. Namun
banyak senyawa-senyawa dalam sampel yang juga memiliki kelarutan yang baik
dalam metanol, sehingga dapat ikut terekstraksi bersama kurkumin,seperti
demetoksikurkumin dan bis-demetoksikurkumin, serta minyak atsiri. Oleh karena
itu, selektivitas yang baik dari metode diperlukan untuk mengukur analit secara
akurat tanpa terganggu oleh senyawa-senyawa lain yang terdapat dalam
sampel.Cara menganalisis hasil dari parameter spesifisitas pada metode validasi
penetapan kadar kurkumin dalam temulawak dalam penelitian ini adalah dengan
membandingkan data Rfdari baku dan data Rfdari sampel dalam campuran pada
kondisi yang sama. Nilai Rf merupakan parameter analisis kualitatif suatu
senyawa dalam campuran pada metode KLT, sehingga dapat digunakan sebagai
parameter selektivitas. Parameter lain dari selektivitas adalah resolusi, dimana
suatu metode dikatakan memilikiselektivitas yang baik apabila memiliki nilai
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
resolusi > 1,5 (Swartz and Krull,1997).Dapat dilihat bahwa Rf baku dan analit
dalam sampel menunjukkan nilai yang identik, dimana nilai Rfrata-rata dari baku
adalah 0,62 dan Rf rata-rata dari analit dalam sampel adalah 0,61.Selain itu juga
setelah dihitung resolusinya, menunjjukan bahwa memiliki resolusi > 1,5. Oleh
karena itu metode ini memiliki selektivitas yang baik dalam analisis kurkumin
2. Linearitas
Linearitas suatu metode analitik adalah kemampuannya untuk
memperoleh hasil uji yang proporsional dengan konsentrasi analit pada sampel
yang dinyatakan dengan koefisien korelasi (r), dimana nilai r ini menunjukkan
korelasi hubungan antara konsentrasi dengan respon pengukuran, dalam hal ini
AUC. Suatu metode dikatakan memiliki linearitas yang baik apabila nilai r > 0,99
(Rohman, 2009).
Berdasarkan data yang diperoleh dari hasil pembuatan seri baku pada
tabel III, diperoleh nilai r untuk replikasi I = 0,9979 replikasi II = 0,9999 dan
replikasi III = 0,9979. Semua nilai r memenuhi persyaratan, sehingga dapat
dikatakan metode KLT-densitometri ini memiliki linearitas yang baik dalam
menetapkan kadar kurkumin. Sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat
hubungan linier antara konsentrasi dengan AUC dimana dengan meningkatnya
konsentrasi maka akan meningkat pula respon dalam bentuk AUC yang
dihasilkan.
3. Akurasi
Akurasi menyatakan ukuran kedekatan nilai hasil percobaan dengan nilai
yang sesungguhnya. Akurasi suatu metode dalam penelitian ini dinyatakan dengan
persen recovery / persen perolehan kembali. Persen recovery merupakan persen
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
perolehan kembali kadar terukur terhadap kadar sebenarnya. Suatu metode
dikatakan memiliki akurasi yang baik apabila nilai % recovery antara 98-102%
(Harmita, 2004).
Tabel IV. Data % recoverypada 3 konsentrasi yang berbeda
Kadar
kurkumin
(μg/ml)
% Recovery Rata
Rata Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
50 99,1 101,26 101,2 99,97 99,49 100,21
200 101,25 100,64 99,36 101,78 101,57 100,92
350 98,57 101,38 99,32 99,01 99,03 99,46
Berdasarkan hasil yang diperoleh, nilai recovery yang masuk pada
rentang 98-102% adalah konsentrasi level rendah hingga tinggi. Oleh karena itu,
metode ini dikatakan memiliki akurasi yang baik pada kadar 50 μg/ml dan 350
μg/ml, sehingga dapat digunakan untuk menetapkan kadar kurkumin pada level
tersebut.
4. Presisi
Presisi adalah suatu ukuran kedekatan nilai data satu dengan data lainnya
dalam suatu pengukuran pada kondisi analisis yang sama. Presisi seringkali
diukur sebagai persen Relative Standard Deviation(RSD) atau Coefficient of
Variation(CV) untuk sejumlah sampel yang berbeda bermakna secara statistik.
Kriteria presisi diberikan jika metode memberikan nilai CV 2% atau kurang.
(Harmita ,2004).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Tabel V. Data Coefficient of Variation (CV) Kadar kurkumin pada 3 konsentrasi
yang berbeda
Kadar Std
Deviation Rata-rata CV (%) kurkumin
(μg/ml)
50 0,49 50,104 0,98
200 1,94 201,842 0,96
350 3,86 348,114 1,11
Dari hasil perhitungan data yang diperoleh, nilai CV pada konsentrasi 50
μg/ml, 200 μg/ml, dan 350 μg/ml kurang dari 2 %. Oleh karena itu, metode
penetapan kadar kurkumin ini dikatakan memiliki presisi yang baik, sehingga
penetapan kadar kurkumin pada level konsentrasi tersebut menggunakan metode
ini akan memberikan kedekatan hasil pengukuran.
5. Range
Range merupakan interval antara konsentrasi analit pada level bawah dan
level atas dalam suatu sampel, yang masih memenuhi parameter linearitas,
akurasi, dan presisi. Dapat dilihat bahwa range konsentrasi metode ini adalah 50-
350 μg/ml. Range ini menunjukkan area analisis yang memenuhi parameter
linearitas, akurasi, dan presisi.
H. Penentuan Akurasi dan Presisi Baku Kurkumin dalam Sampel
Penentuan akurasi dan presisi baku kurkumin dalam sampel dilakukan
dengan menambahkan baku kurkumin ke dalam matriks sampel. Hal ini dapat
diketahui dengan melihat apakah terjadi penambahan luas area pada peak yang
dimaksud ketika dilakukan penambahan baku ke dalam sampel.Apabila luas area
pada peak tersebut bertambah ketika baku kurkumin ditambahkan maka dapat
dipastikan bahwa peak tersebut merupakan peak kurkumin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Berdasarkan hasil yang diperoleh, terjadi penambahan luas area pada peak
yang memiliki nilai Rf identik terhadap baku kurkumin. Dengan demikian dapat
disimpulkan bahwa peak tersebut merupakan kurkumin.Setelah dapat dipastikan
bahwa peak dengan nilai Rf yang identik tersebut merupakan kurkumin, maka
dilakukan penentuan akurasi dan presisi baku kurkumin dalam sampel. Hal ini
dilakukan untuk mengetahui apakah metode ini masih dapat mengukur respon
baku kurkumin dalam matriks sampel secara akurat dan seksama. Akurasi dan
presisi baku yang ditambahkan dapat dilihat pada tabel IX.
Tabel VI. Recovery dan CV baku kurkumin dalam matriks sampel
Rep %
Recovery
CV (%)
1 98.72
2.74
2 103.07
3 104.01
4 97.86
5 99.37
Kadar baku yang ditambahkan pada sampel adalah 90 μg/ml, maka nilai
recovery yang dapat diterima yaitu 95-105% dan nilai nilai CV adalah 5%
(Harmita, 2004). Oleh karena itu, dari tabel VI dapat disimpulkan bahwa metode
KLT-Densitometri ini dapat mengukur analit dalam matriks sampel secara akurat
dan reprodusibel.
I. Uji Disolusi
Uji disolusi dilakukan untuk mengetahui profil disolusi kurkumin antara
dispersi padat dengan campuran fisik. Uji disolusi dilakukan menurut rotating
paddle method. Uji disolusi bertujuan untuk melihat jumlah pelepasan obat tiap
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
menit. Dispersi padat maupun campuran fisik dimasukkan ke dalam kapsul
ukuran 00 dan dilakukan uji pada medium disolusi buffer fosfat pH 6. Medium
disolusi tersebut dibuat dengan mencampur 3,12 g NaH2PO4 dengan 5 g SLS
kemudian ditambah dengan NaOH sampai dengan pH 6 dan di tambah aquadest
hingga 1000 mL. Medium disolusi yang digunakan sebanyak 500 mL dituang ke
alat disolusi. Supaya cangkang kapsul tidak bergerak, maka cangkang kapsul
tersebut ditahan di dasar sistem disolusi dengan menggukan saringan alumunium.
Uji disolusi menggunakanrotating paddle method diatur pada suhu 37±0,5oC dan
dengan kecepatan 100 rpm. Pengujian dilakukan selama 120menit dengan
pengambilan cuplikan dilakukan pada menit ke 0, 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90 dan
120untuk setiap sampel.
Pengambilan cuplikan tersebut sebanyak 5 ml, kemudian ditambah lagi
medium 5 ml ke dalam sistem disolusi. Cuplikan yang mengandung kurkumin
yang terdisolusi tersebut disaring, lalu diekstraksi menggunakan etil asetat
beberapa kali hingga fase air menjadi jernih. Hasil ekstraksi kurkumin tersebut
dimasukkan ke dalam flacon dan diuapkan hingga kering. Sebelum ditotol di plat
KLT, dalam flacon dimasukkan pelarut ethanol.Cuplikan kemudian diukur
kadarnya dengan KLT-densitometri dan dihitung persen kurkumin yang
terdisolusi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Tabel VII. Hasil perhitungan persentase kurkumin terdisolusi dalam dispersi padat
dan serbuk campuran fisik ekstrak rimpang temulawak – HPMC E-5
Waktu
(menit)
Rata-rata kurkumin terdisolusi (%) (X±SD)
DP
Formula
1:1
DP
Formula
1:2
DP
Formula
1:4
0 0,00 0,00 0,00
5 0,00 0,00 0,00
10 0,00 0,00 10,13 ± 0,48
15 2,97 ± 0,25 2,16 ± 0,03 10,18 ± 1,32
30 4,54 ± 0,41 5,41 ± 0,13 16,54 ± 0,33
45 7,06 ± 0,71 10,11 ± 0,13 19,83 ± 0,82
60 7,23 ± 0,63 15,89 ± 0,75 20,89 ± 0,4
90 9,30 ± 0,86 20,21 ± 0,55 23,05 ± 0,85
120 14,83 ± 0,88 21,87 ± 0,23 24,91 ± 0,78
Keterangan : DP = Dispersi Padat
Saat pengujian disolusi terhadap serbuk campuran fisik isolat ekstrak
temulawak- HPMC E-15 diketahui bahwa serbuk tersebut tidak terdisolusi, tetapi
membentuk suspensi, hal tersebut ditunjukkan dengan medium disolusi yang tidak
jernih dan membentuk agregat. Berbeda dengan dispersi padat ekstrak temulawak
- HPMC E-15, serbuk dalam cangkang tersbut terdisolusi dengan sempurna yang
digambarkan dengan medium disolusi yang jernih, tetapi sampai menit ke 120,
dispersi padat ekstrak temulawak tidak habis terdisolusi. Hal ini disebabkan
karena HPMC membentuk lapisan seperti gel yang membuat penetrasi air ke
dalam serbuk menjadi sulit, sehingga proses disolusi menjadi lebih lambat. Maka
dapat diketahui bahwa HPMC E-15 kemungkinan dapat digunakan sebagai bahan
pembawa untuk obat-obatan controlled release.
Jika dibandingkan dengan serbuk campuran fisik, dispersi
padatmemberikan profil disolusi yang lebih baik. Hal ini disebabkan karena
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
dengan pembentukan dispersi padat, kurkumin yang molekulnya berbentuk kristal
diubah menjadi bentuk amorphous dengan bantuan spray dryer. Pada saat proses
spray drying, kurkumin yang awalnya berbentuk kristal dengan adanya
penghilangan pelarut (etanol 96%) yangcepat membuat molekul kurkumintidak
sempat menata dirinya sehingga molekulnya tersusun tidak beraturan dan
menjadibentuk amorphous(Goldberg et al, 1965).
Bentuk amorphous memiliki energy state yang besar, untuk
membuatkondisinya stabil maka bentuk amorphous memiliki kecenderungan
untukmenyerap air dengan cepat, baik air dari udara maupun dari medium yang
ada.Maka dari itu ketika dispersi padat kontak dengan air maka obat yang
terdispersidalam matriks akan lebih cepat larut. Jadi kurkumin yang
diformulasikan dalam dispersi padat akan lebih mudah melarut dalam medium
disolusi dibandingkandengan kurkumin yang diformulasikan dalam serbuk
campuran fisik karena dalam serbuk campuran fisikkurkumin masih berada dalam
bentuk kristal(Leuner dan Dressman, 2000).
Pada serbuk campuran fisik, karena tidak diberi perlakuaan apapun
makakurkumin yang ada dalam sistem tersebut molekulnya masih berbentuk
kristalin.Bentuk kristalin memiliki susunan molekul yang teratur dan rapat,
sehinggamembuat molekul air sulit untuk masuk. Maka dari itu disolusi kukumin
padadispersi padat isolat ekstrak rimpang temulawak-HPMC E-15 memiliki profil
yang lebih baik dibandingkan dengan serbuk campuran fisik.Pembentukan
dispersi padat juga menghasilkan ukuran partikel yangkecil, karena saat
pembentukan dispersi padat, serbuk telah terlebih dahuludidispersikan dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
pelarut yang sesuai dan ketika dilakukan proses spray makadispersi tersebut akan
melewati nozzle dengan ukuran yang kecil sehinggadihasilkan partikel yang fines
(halus). Ukuran partikel juga berpengaruh terhadapdisolusi obat. Menurut Aulton
(2002), semakin kecil ukuran partikelmaka luas permukaan spesifiknya akan
semakin besar sehingga luas kontaknyadengan medium akan semakin besar dan
kemungkinan partikel akan terbasahisempurna akan semakin besar dengan
demikian akan mempercepat disolusinya.
J. Hubungan Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Kurkumin
Gambar 5. Grafik hubungan antara persentase kurkumin yang terdisolusi dengan
waktu
Dari ketiga kurva hubungan persentase kurkumin terdisolusi
terhadapwaktu diketahui bahwa dispersi padat dengan drug load 2,4% (Formula
-5,00
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
30,00
-20 0 20 40 60 80 100 120 140
% T
erd
iso
lusi
Waktu (menit)
Hubungan persentase kurkumin terdisolusi vs waktu pada dispersi padat isolat ekstrak
rimpang temulawak – HPMC E-5
Formula 1:1
Formula 1:2
Formula 1:4
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
3), 4% (Formula 2) dan 6% (Formula 1) menghasilkan profil disolusi kurkumin
yang lebih baik dibandingkan denganserbuk campuran fisik, hal tersebut karena
pada campuran fisik tidak terjadi proses disolusi. Dispersi padatdengan drug load
yang semakin kecil yaitu, dengan proporsi drug load 2,4%memberikan disolusi
yang lebih tinggi dibandingkan dengan proporsi drug load 4% dan 6%. Hal ini
dikarenakan semakin kecil proporsi drug load maka jumlahpembawa yang ada
dalam sistem lebih banyak jika dibandingkan denganjumlah pembawa yang
terkandung dalam sistem dispersi padat dengan proporsi drug load yang besar,
sehingga sistem dispersi padat dengan proporsi drug load yang kecilakan
menghasilkan disolusi yang lebih tinggi.
Pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi kurkumin dapat dilihat
dengan membandingkan disolusi efisiensi tiap formula.Disolusi efisiensi
merupakan perbandingan luas di bawah kurva disolusi dengan luas segi empat
seratus persen zat aktif larut dalam medium pada saat tertentu. Penggunaan
disolusi efisiensi dalam penggambaran hasil uji disolusi memiliki keuntungan
salah satunya adalah dengan satu ekspresi, dapat terungkap semua titik yang ada
dalam kurva uji disolusi, sehingga banyak formula dapat dibandingkan (Fudholi,
2013).
Tabel VIII. Penghitungan DE pada menit ke 120
Formula
Perbandingan
Ekstrak :
HPMC
DE120 (%) Rata - rata
DE120 (%) Replikasi
1
Replikasi 2 Replikasi 3
1 1 : 1 7,57 7,59 8,71 7,96 ± 0,65
2 1 : 2 14,42 14,08 13,81 14,13 ± 0,3
3 1 : 4 19,26 18,64 19,76 20,12 ± 0,56
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Untuk pengujian normalitas data digunakan uji Shapiro-Wilk karena
datayang diuji jumlahnya kurang dari 50. Berdasarkan hasil uji Shapiro-Wilk,
nilaisignifikansi (p) untuk Formula 1 adalah 0.0151sedangkan nilai signifikansi
Formula 2 dan 3 masing masing adalah 0.9807 dan 0.6496. MenurutDahlan
(2009), apabila nilai p < 0,05 menunjukkan bahwa kelompok datamempunyai
distribusi tidak normal. Dari hasil uji Shapiro-Wilk maka diketahui bahwa dari
tiga variabel yang diteliti ternyata ada satu variabel yang memilikinilai
signifikansi atau p< 0,05 yang menunjukkan bahwa distribusi data tidaknormal.
Untuk mengetahui variansi dari semua data sama atau tidak, maka dilakukan
Levene test, setelah diuji didapatkan nila p sebesar 0.2898, karena nila p ≥ 0,05,
maka dapat dikatakan bahwa variansi dari data tersebut adalah sama.
Metode Kruskal-Wallis digunakan untuk menganalisis apakah terdapat
perbedaan Disolusi Efisiensi pada menit ke 120 antara masing-masing formula
dengan melihat nilai signifikansi. Bila nilai signifikansi yang diperoleh < 0,05
maka dapat diambil kesimpulan bahwa terdapat perbedaan Disolusi Efisiensi pada
menit ke 120 antara masing-masing formula, sedangkan bila nilai signifikansi
yang diperoleh > 0,05 maka dapat diambil kesimpulan bahwa tidak terdapat
perbedaan Disolusi Efisiensi pada menit ke 120 antara masing-masing formula.
Dari uji Kruskal-Wallis didapatkan nilai p adalah0.02732menunjukkan bahwa
terdapat perbedaan Disolusi Efisiensi pada menit ke 120 antara masing-masing
formula.
Selanjutnya dilakukan uji Wilcoxon Sign Rank Test merupakan uji
statistik yang dilakukan untuk melihat apakah adaperbedaan median dari suatu
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
observasi berpasangan dengan memperhitungkan besarnya selisih-selisihdari dua
observasi yang bersesuaian. Wilcoxon Sign Rank Test merupakan suatu
ujinonparametrik yang biasanya digunakan pada data-data kualitatif (skala
nominal dan ordinal) atau untuk data kuantitatif yangtidak berdistribusi normal.
Dari uji Wilcoxon, C(Formula 3) dibandingkan dengan A(Formula 1),
menghasilkan nilai p ≥ 0,05, yaitu 0,05, maka Ho deterima maka C lebih besar
daripada A, begitu juga dalam uji t.test C dibandingkan dengan B(Formula
2)dengan p = 0,05, Ho deterima maka C lebih besar daripada B, dan dalam uji
t.test B dibandingkan dengan A menghasilkan nila p = 0,05, Ho deterima maka B
lebih besar daripada A, jadi kesimpulan dari uji statistik ini, urutan Disolusi
Efisiensi dari yang besar ke kecil adalah dari C(Formula 3),B(Formula 2) dan
A(Formula 1)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa ada
pengaruh proporsi drugload terhadap profil disolusi dispersi padat kurkumin
ekstrak temulawak dalam HPMC. Dispersi padat dengan drug load 2,4 %
memberikan Efisiensi Disolusi yang lebih tinggi daripada pada drug load 4 % dan
6 %, dan dari uji disolusi diperoleh bahwa disolusi kurkumin meningkat seiring
dengan meningkatnya jumlah HPMC E-15 dalam dispersi padat.
B. Saran
1. Perlu melihat glass transition temperature dari serbuk dispersi padat danserbuk
campuran fisik dengan menggunakan Differential ScanningCalorimetry (DSC).
2. Perlu dilakukan uji bioavailibilitas.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
DAFTAR PUSTAKA
Ansel, H.C., Allen, L.V., and Popovich, N.G., 2005, Ansel’s Pharmaceutical
Dosage Form and Drug Delivery Systems, Eight Edition, Lippincott
Williams & Wilkins a wotters Kluver Company, Philadelphia, pp 159-
150.
Aulton, M.E., 2002, Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design,
Secondedition, Churchill Livingstone, New York, pp. 239.
Chiou, W.L., dan Riegelman, S. ,1971, Pharmaceuticl Applications of Solid of
Solid Dispersion System. J. Pharm. Sci. 60(9): 1281-1302.
Dabbagh, M.A., dan Taghipour, B., 2007, Investigation of Solid Dispersion
Technique in Improvement of Physicochemical Characteristic of
Ibuprofen Powder, Iranian. J. Pharm. Sci., 3(2): 69-76.
Dahlan, M. S., 2009, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Salemba Medika,
Jakarta,hal.157, 164.
Dirjen POM Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). Farmakope
Indonesia. Edisi IV, Jakarta, Hal. 697-698, 1083-1085.
Dong-Hui Xu, Sheng Wang, Jing JIN, Xue-Ting Mei, Shi-Bo Xu, 2006,
Dissolution and absorption researches of curcumin in solid dispersions
with the polymers PVP, Asian Journal of Pharmacodynamics and
Pharmacokinetics, Hong Kong Medical Publisher, Hong Kong, pp
343-349.
Fudholi, A, 2013, Disolusi dan Pelepasan Obat In Vitro, Pustaka Pelajar,
Yogyakarta, hal 144-147.
Goldberg, A.H., Gibaldi, M., dan Kanig, J.L.,1965, Increasing Dissolution Rates
and Gastrointestinal Absorption of Drugs via Solid Solutions and
Eutectic Mixtures III – Experimental Evaluation of Griseofulvin-
Succinic Aid Solid Solution,J. Pharm. Sci. 55(9): 487-492.
Gritter, J.R., Bobbit, J.M., dan Scharting, A.E., 1991, Pengantar
Kromatografi,diterjemahkan oleh Kosasih Pamawinata, Edisi II,
Penerbit ITB, Bandung.
Harmita, 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara
Perhitungannya, Departemen Farmasi FMIPA UI, Depok, pp.5-25.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
Hardjono, 1983, Kromatografi, Laboratorium Analisa Kimia Fisika Pusat, UGM,
Yogyakarta, pp.32-34.
Kristina, N. N., Noveriza, R., Syahid, S. F dan Rizal, M., 2006 ,Peluang
Peningkatan Kadar Kurkumin Pada Tanaman Kunyit dan Temulawak.
Jakarta. Dalam http://balittro.litbang.deptan.go.id, diakses tanggal 4
september 2012.
Lachman, L., Liebermann, H.A., dan. Kanig, J.I, 1994,Teori and Praktek Farmasi
Industri II. Edisi III. Jakarta: UI Press. Hal. 652-653, 657-660.
Leuner, C., Dressman, J., 2000. Improving drug solubility for oral delivery using
solid dispersions,Eur. J. Pharm, P. 50, 47-60.
Majeed M., V. Badmaev, U. Shirakumar, and R. Rajendrar, 1995,Curcuminoids
Antioxidant Phytonutriens Pis Catway, NJ.: Nutri Science Publisher
Inc., Pp 35-38.
Martono, S., 1996, Penentuan kadar kurkumin secara kromatografi lapis
tipisdensitometri, Buletin ISFI Yogyakarta 2 (4), hal. 11-21.
Mujumdar, A S, 2007, Handbook of industrial drying, CRC Press, Boca Raton,
p. 710.
Niessen, W. R, 2002, Combustion and incineration processes, Marcel Dekker,
New York, p. 588.
Paramasivam, M., Aktar, W., Poi, R., Banerjee, H., Bandyopahyay, A.,
2008,Occurrence of curcuminoids in Curcuma longa: A quality
tandardization by HPTLC,
http://www.banglajol.info/index.php/BJP/article/, diakses tanggal 15
Februari 2013.
Rohman, A., 2009, Kromatografi untuk Analisis Obat, Graha Ilmu, Yogyakarta,
pp. 217-233.
Rowe, R.C, Paul J, Sheskey, Owen, S.C, 2006, Hadbook of Pharmaceutical
Excipients-5th ed, Pharmaceutical Press, London, pp 346 – 348.
Shargel, L., dan Yu, A.B.C., 2005,Biofarmasetika and Farmakokinetika Terapan.
Edisi II, Airlangga University Press, Jakarta, Hal. 86-95.
Singh, S. K. , K. K. Srinivasan, K.Gowthamarajan, D. Prakash, and N. B.
Gaikwad,2011, Investigation of preparation parameters of solid
dispersion and lyophilization technique in order to enhance the
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
dissolution of poorly soluble glyburide, J. Pharm. Res., vol. 4, issue 8,
,pp. 2718-2723.
Srinarong, P., Kouwen, S., Visser., M. K., Hinrichs, W. L. J., dan Frinjlink, H.
W., 2009, Effect of drug-carrier Interaction on the Dissolution
Behavior of Solid Dispertion Tablets, Department of Pharmaceutical
Technology and Biopharmacy, University of Groningen, The
Netherlands, pp. 1-9.
Syukri, Y., 2002,BiofarmasetikaEdisi I,Universitas Indonesia Press, Yogyakarta,
Hal. 379-381.
Sharma R.A., Gescher A.J., Steward W.P., 2005,Curcumin: The story so far,Eur J
Cancer 41:1955–1968.
Sonali, D., Tejal, S., Vaishali, T., dan Tejal, G., 2010, Silymarin-Solid
Dispersions: Characterization and Influence of Preparation Methods on
issolution, Acta Pharm, p 60, 427-443.
Stahl, 1985, Drugs Analysis by Chromatography and Microscopy, diterjemahkan
oleh Kosasih Padmawinata, Institut Teknologi Bandung, Bandung.
Swartz and Krull, 1997, Chromatographic Analysis of Pharmaceuticals,
2ndEdition, Marcel Dekker, USA.
Tonnesen, H.H. and Karlsen, J., 1985, Studies on curcumin and curcuminoids. VI.
Kinetics of cur-cumin degradation inaqueoussolution, Z.
Lebensm,Unters. Forsch.,pp. 402-404.
Wang, Y.J., Pan, M.H., Cheng, A.L., Lin, L.I., Ho, Y.S., Hsieh, C.Y., Lin,
J.K., 1997,Stability of curcumin in buffer solutions and
characterization of its degradation products. Pharm. Biomed. Anal.
15, 1867–1876.
Yalkowsky, S. H. 1981. Techniques of Solubilization of Drugs, Marcel Dekker,
New York, pp. 135-143.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
LAMPIRAN
Lampiran 1. Penimbangan pembuatan dispersi padat dan campuran fisik
Dispersi Padat
a. Formula 1 ( 1 : 1 )
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,210 g
Wadah + isi = 5,212 g
Wadah + sisa = 0,210 g
Ekstrak temulawak = 5,002 g
HPMC
Wadah kosong = 0,310 g
Wadah + isi = 5,314 g
Wadah + sisa = 0,311 g
Ekstrak temulawak = 5,003 g
Drug load = 12% 𝑥 5,002
5,003 +5,002 = 6 %
b. Formula II ( 1 : 2 )
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,231 g
Wadah + isi = 5,235 g
Wadah + sisa = 0,231 g
Ekstrak temulawak = 5,004 g
HPMC
Wadah kosong = 0,252 g
Wadah + isi = 10,253 g
Wadah + sisa = 0,252 g
Ekstrak temulawak = 10,001 g
Drug load = 12% 𝑥 5,004
5,004 +10,001 = 4 %
c. Formula III
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,240 g
Wadah + isi = 5,245 g
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Wadah + sisa = 0,242 g
Ekstrak temulawak = 5,003 g
HPMC
Wadah kosong = 0,310 g
Wadah + isi = 20,313 g
Wadah + sisa = 0,311 g
Ekstrak temulawak = 20,002 g
Drug load = 12% 𝑥 5,003
5,003 +20,002 = 2,4 %
Campuran Fisik
d. Formula 1 ( 1 : 1 )
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,321 g
Wadah + isi = 5,323 g
Wadah + sisa = 0,322 g
Ekstrak temulawak = 5,001 g
HPMC
Wadah kosong = 0,421 g
Wadah + isi = 5,301 g
Wadah + sisa = 0,427 g
Ekstrak temulawak = 4,974 g
Drug load = 12% 𝑥 5,001
5,001 +4,974 = 6 %
e. Formula II ( 1 : 2 )
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,543 g
Wadah + isi = 5,569 g
Wadah + sisa = 0,553 g
Ekstrak temulawak = 5,016 g
HPMC
Wadah kosong = 0,435 g
Wadah + isi = 10,454 g
Wadah + sisa = 0,443 g
Ekstrak temulawak = 10,011 g
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Drug load = 12% 𝑥 5,016
5,016 +10,011 = 4 %
f. Formula III
Ekstrak temulawak
Wadah kosong = 0,322 g
Wadah + isi = 5,353 g
Wadah + sisa = 0,342 g
Ekstrak temulawak = 5,011 g
HPMC
Wadah kosong = 0,430 g
Wadah + isi = 20,476 g
Wadah + sisa = 0,443 g
Ekstrak temulawak = 20,033 g
Drug load = 12% 𝑥 5,011
5,011 +20,033 = 2,4 %
Lampiran 2. Validasi metode analisis
Baku Kurkumin
Kurkumin (g)
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Berat kertas 3.966 2.001 4.785
Berat kertas + zat 4.015 2.051 4.835
Berat kertas + sisa 3.966 2.001 4.785
Berat zat 49 50 50
Penimbangan Temu Lawak
Ekstrak Temu Lawak
(g)
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
Berat kertas 3.482 3.564 4.012 3.612 3.654
Berat kertas + zat 3.531 3.614 4.012 3.663 3.704
Berat kertas + sisa 3.482 3.564 4.012 3.612 3.654
Berat zat 49 50 51 51 50
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Validasi Baku
Kurkumin (g)
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
Berat kertas 3.445 3.566 3.412 3.233 3.564
Berat kertas + zat 3.494 3.616 3.462 3.283 3.614
Berat kertas + sisa 3.445 3.566 3.412 3.233 3.564
Berat zat 49 50 50 50 50
Penimbangan cucumin dalam
validasi
Kurkumin (g)
Replikasi
I
Berat kertas 3.966
Berat kertas + zat 4.015
Berat kertas + sisa 3.966
Berat zat 49
Skema pembuatan
Timbang lebih kurang seksama 50,0 mg kurkumin
↓
Larutkan dengan etanol, ad hingga 25,0 ml
↓
Pipet 0,125 ml;0,25; 0,5 ml; 0,75 ml; 1 ml; 1,25 ml;1,5ml;1,75 ml
↓
Encerkan dengan etanol ad hingga 10,0 ml
Perhitungan seri kadar kurkumin
Bobot kurkumin hasil penimbangan = 0,0050 g = 50,0 mg
Kadar stok kurkumin = 50 mg / 25 ml = 2 mg / ml = 2000 μg/ml
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Kadar seri larutan baku kurkumin :
C1.V1 = C2.V2 C1.V1 = C2.V2
2000 μg/mlx0,125 ml = C2 x 10 ml 2000 μg/ml x 0,25 ml = C2 x 10 ml
C2 = 25 μg/ml C2 = 50 μg/ml
C1.V1 = C2.V2 C1.V1 = C2.V2
2000 μg/ml x 0,5 ml = C2 x 10 ml 2000 μg/ml x 0,75 ml = C2 x 10 ml
C2 = 100 μg/ml C2 = 150 μg/ml
C1.V1 = C2.V2 C1.V1 = C2.V2
2000 μg/ml x 0,1 ml = C2 x 10 ml 2000 μg/ml x 0,125 ml = C2 x 10 ml
C2 = 200 μg/ml C2 = 250 μg/ml
C1.V1 = C2.V2 C1.V1 = C2.V2
2000 μg/ml x 1,5 ml = C2 x 10 ml 2000 μg/ml x 1,75 ml = C2 x 10 ml
C2 = 300 μg/ml C2 = 350 μg/ml
Rf dari baku kurkumin dan sampel
Konsentrasi seri
larutan baku
kurkumin (ppm)
Rf
baku
Replikasi
sampel
Rf
sampel
Resolusi
50 0.61 1 0.63 2.2
100 0.62 2 0.62 2.3
150 0.62 3 0.61 2.1
200 0.61 4 0.61 1.9
250 0.62 5 0.62 2.2
300 0.61
350 0.62
Rata-rata 0.615
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Baku kurkumin
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Seri
Tinggi Seri
Tinggi Seri Tinggi
baku AUC peak baku AUC peak baku AUC peak
(µg/ml) (µg/ml) (µg/ml)
50 2524.3 68.8 49 2434.3 67.5 50 2543.3 68.5
100 6870.3 172.8 98 6162.4 166.6 100 6722 170.5
150 10964.8 275.1 147 9956.3 267.6 150 10710.2 272.8
200 14335.4 372.4 196 13971.2 363.3 200 13495.5 369.9
250 18322.3 443.7 245 17373.3 434.4 250 17487.3 441.3
300 21434.4 484.2 294 20832.5 472.1 300 20351.6 481.4
350 24593.2 528.2 343 24342.2 516 350 24976.6 525.5
A 521.1 A 1058 A 721.3
B 73.35 B 74.69 B 72.38
r 0.9979 r 0.9999 r 0.9979
Gambar kurva baku kurkumin (AUC vs konsentrasi)
y = 74.69x - 1058.R = 0.999
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
0 50 100 150 200 250 300 350 400
AU
C
konsentrasi (µg/ml)
AUC vs konsentrasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Nilai AUC dan contoh perhitungan recovery kurkumin
Kadar AUC
kurkumin
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
50 2643 2723,4 2721,5 2675,4 2657,5
200 14067,4 13975,3 13784,8 14145,7 14114
350 24710,2 25443,6 24906,6 24823,5 24829,6
Contoh perhitungan recovery
Bobot kurkumin hasil penimbangan = 0,0050 g = 50,0 mg
Kadar stok kurkumin = 50 mg / 25 ml = 2 mg / ml = 2000 μg/ml
Kadar rendah = C1.V1 = C2.V2
2000 μg/mlx0,25 ml = C2 x 10 ml
C2 = 50 μg/ml
Kadar Tengah=` C1.V1 = C2.V2
2000 μg/ml x 1 ml = C2 x 10 ml
C2 = 200 μg/ml
Kadar Tinggi= C1.V1 = C2.V2
2000 μg/ml x 1,75 ml = C2 x 10 ml
C2 = 350 μg/ml
Perhitungan kadar terukur
y = 74.69x - 1058
Kadar rendah → 2643= 74.69x - 1058
x = 49,55ppm
Kadar sedang →14067,4= 74.69x - 1058
x =202,51ppm
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Kadar tinggi → 24710,2= 74.69x - 1058
x = 345,00ppm
Kadar Recovery
kurkumin
(μg/ml) Replikasi I Replikasi II Replikasi III Replikasi IV Replikasi V
50 49,55 50,63 50,60 49,99 49,75
200 202,51 201,28 198,73 203,56 203,13
350 345,00 354,82 347,63 346,52 346,60
Perhitungan recovery = 𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑡𝑒𝑟𝑢𝑘𝑢𝑟
𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑒𝑡𝑖𝑠 x 100 %
Rendah = 49,55
50 x 100 % = 99,1 %
Sedang = 202 .51
200 x 100 % = 101,25 %
Tinggi = 345.00
350 x 100 % = 98,57 %
Kadar % Recovery
kurkumin
(μg/ml) Replikasi I Replikasi II Replikasi III Replikasi IV Replikasi V
50 99,10 101,26 101,20 99,97 99,49
200 101,25 100,64 99,36 101,78 101,57
350 98,57 101,38 99,32 99,01 99,03
Kadar Std
Deviation Rata-rata CV (%) kurkumin
(μg/ml)
50 0,49 50,104 0,98
200 1,94 201,842 0,96
350 3,86 348,114 1,11
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Nilai AUC sampel Temulawak dan sampel adisi
Replikasi Sampel
TL
Sampel
Adisi
1 6534,2 14634,4
2 6450,9 14563,6
3 6500 14566,1
4 6407,8 14405,6
5 6541,9 14683,9
Contoh perhitungan recoverybaku kurkumin dalam sampel
Perhitungan kadar teoritis
Bobot kurkumin hasil penimbangan = 0,0050 g = 50,0 mg
Kadar stok kurkumin = 49 mg / 25 ml = 1.96 mg / ml = 1960 μg/ml
Kadar rendah = C1.V1 = C2.V2
1960 μg/mlx2,25 ml = C2 x 50 ml
C2 = 88,2 μg/ml
Kadar Temulawak sebelum di adisi
Replikasi AUC
Kadar
(μg/mL)
Kadar kurkumin
dalam TL (%)
Rata rata
1 8321.2 125.58 12.31127878
12.12 ± 0,23
2 8193.6 123.87 12.38666488
3 7982.4 121.04 11.86656481
4 8021.2 121.56 11.91749427
5 8023.5 121.59 12.15892355
Adisi
Replikasi AUC
Kadar
(μg/mL) Kadar Terukur
1 14824.3 212.6429241 87.07
2 14983.4 214.773062 90.91
3 14834.3 212.7768108 91.74
4 14467.6 207.8671844 86.31
5 14569.5 209.2314902 87.64
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
% recovery
Rep Kadar terukur
Kadar
teoritis % Recovery
1 87.07 88.2 98.72
2 90.91 88.2 103.07
3 91.74 88.2 104.01
4 86.31 88.2 97.86
5 87.64 88.2 99.37
x SD CV (%)
88,73 2,428591 2,73697632
Lampiran 3. Kromatogram dari seri baku kurkumin
Peak 50 μg/ml
Peak 100 μg/ml
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
Peak 150 μg/ml
Peak 200 μg/ml
Peak 250 μg/ml
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Peak 300 μg/ml
Peak 350 μg/ml
Lampiran 4. Kromatogram ekstrak temulawak sebelum diadisi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
Lampiran 4. Kromatogram ekstrak temulawak setelah diadisi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Lampiran 5 Penghitungan persen tersidolusi
Formula 1:1
Replikasi 1
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 6937,5 107,05 0,05 1,07 2,81
30 2999,4 54,32 0,15 1,63 4,28
45 3687,2 63,53 0,20 2,54 6,68
60 2179,8 43,35 0,30 2,60 6,84
90 2124,3 42,61 0,40 3,41 8,96
120 2935 53,46 0,50 5,35 14,05
Replikasi 2
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 6878,7 106,26 0,05 1,06 2,83
30 2981,6 54,08 0,15 1,62 4,32
45 3581,9 62,12 0,20 2,48 6,62
60 2165,5 43,16 0,30 2,59 6,90
90 1978,5 40,65 0,40 3,25 8,67
120 3046,2 54,95 0,50 5,49 14,64
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Replikasi 3
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 6962,8 107,39 0,05 1,07 3,25
30 3067,5 55,23 0,15 1,66 5,02
45 3798,9 65,03 0,20 2,60 7,88
60 2213,1 43,80 0,30 2,63 7,96
90 2109 42,40 0,40 3,39 10,28
120 2834,2 52,11 0,50 5,21 15,79
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
0 50 100 150
% K
urk
um
in y
ang
terd
iso
lusi
Waktu (menit)
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Perhitungan ED
Menit AUC Rata
Rep 1 Rep 2 Rep 3 rata
10 - 15 14.07 14.15 16.25 14.82
15 - 30 53.25 53.63 62.03 56.30
30 - 45 82.28 82.13 96.83 87.08
45 - 60 101.49 101.55 117.60 106.88
60 - 90 237.39 233.85 271.35 247.53
90 - 120 346.12 350.55 392.25 362.97
AUC
total 834.59 835.85 956.30 875.58
ED120 7.59 7.60 8.69 7.96
Formula 1:2
Replikasi 1
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 650,4 22,87 0,15 0,69 2,14
30 3163,2 56,52 0,15 1,70 5,28
45 7056,7 108,65 0,15 3,26 10,16
60 12091 176,05 0,15 5,28 16,46
90 15541 222,24 0,15 6,67 20,77
120 16495 235,01 0,15 7,05 21,97
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
Replikasi 2
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 694,7 23,47 0,15 0,70 2,19
30 3365,3 59,22 0,15 1,78 5,54
45 7093,9 109,14 0,15 3,27 10,20
60 11843 172,72 0,15 5,18 16,15
90 14865 213,19 0,15 6,40 19,93
120 16230 231,46 0,15 6,94 21,64
Replikasi 3
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 0 0 0 0,00 0,00
15 694,7 23,47 0,15 0,70 2,14
30 3365,3 59,22 0,15 1,78 5,40
45 7093,9 109,14 0,15 3,27 9,96
60 11265 164,99 0,15 4,95 15,05
90 15193 217,58 0,15 6,53 19,85
120 16873 240,07 0,15 7,20 21,90
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Perhitungan ED
Menit AUC Rata
Rep 1 Rep 2 Rep 3 rata
10 - 15 10.69 10.97 10.70 10.79
15 - 30 55.66 57.99 56.58 56.74
30 - 45 115.85 118.12 115.24 116.40
45 - 60 199.85 197.91 187.79 195.18
60 - 90 559.92 542.62 524.81 542.45
90 - 120 643.97 626.31 628.86 633.05
AUC
total 1585.94 1553.92 1523.98 1554.61
ED120 14.42 14.13 13.85 14.13
0
5
10
15
20
25
0 50 100 150
% T
erd
iso
lusi
waktu (menit)
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Formula 1:4
Replikasi 1
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 3861,9 65,87 0,10 1,32 9,21
15 3284,3 58,14 0,15 1,74 12,20
30 7696 117,20 0,10 2,34 16,39
45 8976,9 134,35 0,10 2,69 18,79
60 6332,6 98,95 0,15 2,97 20,76
90 4876,8 79,46 0,20 3,18 22,23
120 7364,2 112,76 0,15 3,38 23,66
Replikasi 2
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 4142 69,62 0,10 1,39 9,41
15 2519 47,90 0,15 1,44 9,71
30 7730 117,67 0,10 2,35 15,90
45 9015 134,87 0,10 2,70 18,23
60 6353 99,22 0,15 2,98 20,11
90 4852 79,13 0,20 3,17 21,39
120 7725 117,59 0,15 3,53 23,84
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Replikasi 3
Waktu AUC Konsentrasi Pengenceran Konsentrasi
Sebenarnya %Terdisolusi
(menit) (µg/ml) (ml) (µg/ml)
0 0 0 0 0,00 0,00
5 0 0 0 0,00 0,00
10 4349,2 72,40 0,10 1,45 10,13
15 2565,2 48,51 0,15 1,46 10,18
30 7777,5 118,30 0,10 2,37 16,54
45 9534,1 141,81 0,10 2,84 19,83
60 6381,3 99,60 0,15 2,99 20,90
90 5097 82,41 0,20 3,30 23,05
120 7809,2 118,72 0,15 3,56 24,91
0
5
10
15
20
25
30
0 50 100 150
% T
erd
iso
lusi
waktu (menit)
Replikasi 1
Replikasi 2
Replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Rangkuman ED
Menit AUC Rata
Rep 1 Rep 2 Rep 3 rata
5-10 46.06 47.04 50.63 47.91
10 - 15 61.04 48.59 50.94 53.52
15 - 30 214.77 192.37 200.74 202.62
30 - 45 264.67 256.66 273.65 264.99
45 - 60 298.04 288.82 306.92 297.93
60 - 90 649.15 626.45 663.69 646.43
90 - 120 694.41 684.11 725.86 701.46
AUC total 2228.14 2144.02 2272.42 2214.86
ED120 19.38 18.64 19.76 19.26
Lampiran 6. Hasil Uji Statistik
R version 3.0.0 (2013-04-03) -- "Masked Marvel"
Shapiro-Wilk normality test Untuk Formula A
> data_ED_A=read.csv("ED_A.csv", header = F) > data_ED_A V1 V2 1 ED_A 7.59 2 ED_A 7.60 3 ED_A 8.69 > shapiro.test(data_ED_A$V2) Shapiro-Wilk normality test data: data_ED_A$V2 W = 0.7568, p-value = 0.0151
Shapiro-Wilk normality test Untuk Formula B > data_ED_B=read.csv("ED_B.csv", header = F) > data_ED_B V1 V2 1 ED_B 14.42 2 ED_B 14.13 3 ED_B 13.85
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
> shapiro.test(data_ED_B$V2) Shapiro-Wilk normality test data: data_ED_B$V2 W = 0.9999, p-value = 0.9807
Shapiro-Wilk normality test Untuk Formula C > data_ED_C=read.csv("ED_C.csv", header = F) > data_ED_C V1 V2 1 ED_C 19.38 2 ED_C 18.64 3 ED_C 19.76 > shapiro.test(data_ED_C$V2) Shapiro-Wilk normality test data: data_ED_C$V2 W = 0.9667, p-value = 0.6496
Levene test Untuk data semua formula > data_ED_ABC=read.csv("ED_ABC.csv", header = F) > data_ED_ABC V1 V2 1 ED_A 7.59 2 ED_A 7.60 3 ED_A 8.69 4 ED_B 14.42 5 ED_B 14.13 6 ED_B 13.85 7 ED_C 19.38 8 ED_C 18.64 9 ED_C 19.76 > levene.test(data_ED_ABC$V2, as.factor(data_ED_ABC$V1), location = "mean") classical Levene's test based on the absolute deviations from the mean ( none not applied because the location is not set to median ) data: data_ED_ABC$V2 Test Statistic = 1.5334, p-value = 0.2898
Kruskal-Wallis tes untuk data Formula A, B, dan C
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
> kruskal_ED_ABC=kruskal.test(data_ED_ABC$V2 ~ as.factor(data_ED_ABC$V1)) > kruskal_ED_ABC Kruskal-Wallis rank sum test data: data_ED_ABC$V2 by as.factor(data_ED_ABC$V1) Kruskal-Wallis chi-squared = 7.2, df = 2, p-value = 0.02732
Uji Wilcoxon untuk formula C dengan B > wilcox.test(data_ED_C$V2, data_ED_B$V2, "greater") Wilcoxon rank sum test data: data_ED_C$V2 and data_ED_B$V2 W = 9, p-value = 0.05 alternative hypothesis: true location shift is greater than 0
Uji Wilcoxon untuk formula C dengan A > wilcox.test(data_ED_C$V2, data_ED_A$V2, "greater") Wilcoxon rank sum test data: data_ED_C$V2 and data_ED_A$V2 W = 9, p-value = 0.05 alternative hypothesis: true location shift is greater than 0
Uji Wilcoxon untuk formula B dengan A > wilcox.test(data_ED_B$V2, data_ED_A$V2, "greater") Wilcoxon rank sum test data: data_ED_B$V2 and data_ED_A$V2 W = 9, p-value = 0.05 alternative hypothesis: true location shift is greater than 0
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Lampiran 7. Gambar alat
Spray dryer
Alat uji disolusi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi yang berjudul “Pengaruh Proporsi Drug
Load Terhadap Profil Disolusi Dispersi Padat
Kurkumin Ekstrak Temulawak (Curcuma xanthorrhiza
Roxb.) Dalam Hydroxypropyl Methylcellulose
(HPMC) Dengan Spray drying” ini bernama lengkap
Felix Pradana Adi N., dilahirkan di Yogyakarta pada
tanggal 23 Februari 1991. Penulis merupakan Putra
pertama dari pasangan Bapak Eko Martoyo dan Ibu
Cicilia Diana Candra D, dan memiliki adik yang
bernama Prisca Grace Ireana. Penulis telah
menyelesaikan masa studinya di TK Pertiwi Kapencar
(1994-1997), SD Kertek 2(1997-2003), SLTP Bhakti
Mulia, Wonosobo (2003 - 2006), SMA Pangudi Luhur
Yogyakarta (2006-2009) dan melanjutkan kuliah di Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta (angkatan 2009). Selama menjadi mahasiswa,penulis
pernah aktif dalam berbagai kegiatan dan organisasi kemahasiswaan,diantaranya
menjadi anggota BEMU Universitas Sanata Dharma periode 2010 – 2011, panitia
TITRASI 2010 dan 2011, aktif dalam kegiatan UKF seperti Sepakbola, Bola Voli,
Paduan Suara Mahasiswa. Dalam bidang akademis, penulis pernah menjadi
asisten praktikum FTS Semi Solid pada tahun 2012, Validasi Metode Analisis dan
Analisis Farmasi pada tahun 2012. Selain itu penulis juga pernah mengikuti PKM-
M pada tahun 2011 yang lolos sampai tingkat regional Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Top Related