Functional Role, Structure, and Evolution of the Melanocortin-4 Receptor

10

Transcript of Functional Role, Structure, and Evolution of the Melanocortin-4 Receptor

��

��������������� ����������������������������������������������� ��� �

!"�# ��$�%�$�&��#�"#"��&����'(�$"# ������#)��*�$����# �+��%��,#��

�������������� ������������������� ����������������� �

���������� ���������������������� ���������������� �

������������������ ���������������������� ������������� �������������������������

�������� �� ������������ ������� ��������� ���� ��� ���

�������� !����

��������� �� "����� ��������� �������� #�����$ ����� "��������� �������� ��

%���$ ��� &������ '��$�(�� )����

�������� �� *$������(�� �������� �� "������� #��+,���+� "������

�������� �� ���������� �������� ����� �� *$�������(�� �������� �� �������

������� "���

�������� �� -����� ������( ��� .������� !����$ �������� �� -(�������

�������� ��� ��� �������� !����

�-�.%�/.��.)����$����# ���*/�+�����,#���,�# ,#� � ����0"$# �0�1����� 0)#�)���� # ��2������� #�#�����$��#)#�"#��1$��0�����#)��*/+����,#��� ��� � � ����� �#��� ��� ��$ �(� � ����3 � ��� # �� � �� �# ��4"�����#� #"� � � )���#)#��+�����)��� �1$��0�����#)��*/+�����,#���$�� #����1" #� ��� � � ������� �#��������(�$�,���#�����1� #�&��)��� � # �"+$# ������#)�����,#���$�� �#������3 ��5�#��� # �0$�&�#)���������(�� ����# �� �$��$�� ��� ���1��*/+�����,#���1$��0�&��)��� � #�� ����� ��� �0�� #+#��#��� �# � �� � #�� ��#� ������� /)��� � ��" ��� ��� �� 0�� #" ����#�� ��#� ��� �� ���3�0����� "�,# ����4"�� #"� � �$ �� )���#)##)��*/+�����,#���,$� ����$�� ��$"#� � 6 �0�)����������,��$# �� "�0� � ����$���# ��.)��*/+�����,#���) ����$�� ����� # �0�#)������# ����$�,# ����#)� �� "�0� ��.)��,)�$�0���# ���$# ������#)��*/+�����,#���#���#)���78/% ��#)��)"���0������� ���#��� �����.)��#)���+� ��� ��$� #�"#"������#)�,��#� ��� � #"� ���1���� #�"# �������) 0)+�� � #��6 ��1 �� �0� #��1�#����#)��)�$ � &�" �0�#���) # � ����� �"� �� �0��)��#)����2��$ ��$�����#)�*/+�����,#���������(�$"# ����� �,��#�#� ,� � ���� )�����1��)����+ ��$��,, �0���� ��(��� ��#����1�#�����)"�� ����6�1�� )��.)��*/+�����,#���) �1���������1$���� ��(��� �� #�"#"������,)���$�0����������#)������� $$ ������ &� �,$� �0�#)#�#)�����,#���,�# ,#��� ��( #$,)� �$�0 $��"�# �� ���$�� ��(��#�1�#���(�$"# ���

9'�24%:�����$���#�+ # �"$# �0� )������� �*�;�<� 0�"# +��$#��� ,��#� ���0%8�<���$����# �����,#��<������ �#��<���,���"# ��<��(�$"# ��

��������� ��! ����" #��#!�$���%&'����!(')*( ���"+�*,�#*� ����-� �!'�#!� ��""�+%+��#'.��/�'*0 ��� �� 1�234 �526�78 ��""�+%+ �9���#��� '!�$�:8;�6<�856�86�;=>��+1$�:�8;�6<�26�62�8=�

(�%&'�?@,!�--���

�=�/;5>.;���������*'?��4/4%.5�+��%'/'8.4%

5�.%4:@/.54�

�(�� ,�%+# ! �*'#� A�B/8� ��!�"* �� 9+�� �'&'#+%%0� !% #��� @0� �+#*C� +#�� ! %/%�+&-���6��*�'���1"�������'#�*(��!�#*�+%�#��. -���0�*�,�+#��'��� -#��'#�,-%*'"%���'*��'#�+%, �*��.��0�@�+'#���&' # � '#!%-�'#&�*(��! �*�1 � *(+%+,-� �(0" *(+%+,-� �@�+'#�*�, � +#�� �"'#+%� ! ���6 7� �(�� �'�����#*� #+*-�+%� ,�%+# !0*�/�*',-%+*'#&� ( �, #�A��B�"�"*'����@'#��*(���/8���!�"* ��9'*(�+��'�*'#!*�"(+�,+! % &'!�"� �'%���β/���(+��*(��('&(��*�+��'#'*0�* �*('����!�"* �� ��*(��,�%+# ! �*'#� �9(���+��γ/��"�"*'����(+.��.��0�% 9�+��'#'*0�4��& -*'/��%+*���"� *�'#�A�&��B�'��+�" *�#*��#� &�/# -��+#*+& #'�*�� ��*(���/8���!�"* ��8��('����!�"* ��(+��+#�'," �*+#*�� %��'#�*(���&-%+*' #� �� � �� '#*+D��+#���#��&0�@+%+#!��2E5��#� *('�� .��.'�9 �9��+������� *(�"(0�' % &'!+%�� %�� ��*(���/8���!�"* ��'#�*(��% #&/*��,���&-%+*' #� ��� ��'#*+D�+#��'*��"-*+*'.��� %��'#���"� �-!*' #�����+%� �&'.��'#�'&(*��'#* �*(���*�-!*-�+%�!(+�/+!*��'C+*' #� ��*(���/8���!�"* ��"� *�'#�+#���*-�'��� #�*(���. %-*' #� ��*(���/8��!�"* ��&�#���

%4?'�4!�.;'�*/+��%'/'8.4%�5��?4�7+.'%*�%'7@?�.54��4!!44:�5�.�9'

�!-*��+�,'#'�*�+*' #� ��*(��# #��%�!*'.���/4F�/8���!�"* ��+& #'�*������ α/�� �+#��β/���'��.��0�����!*'.��'#����-!'#&�� ��'#*+D��< 3�� #��%�!*'.���/4F�/8� ��!�"* �� +#*+& #'�*� � �-!(�+����3663 � +#�� ��%�!*'.���/8� +#*+& #'�*� �-!(�+���=68�+#���=78 �+#���&�� �+���+%� �.��0�����!*'.��'#�'#!��+�'#&�� ��'#/*+D��+�*���+!-*��'#G�!*' #��6=E64�����( 9����+�%0�*(+*�@% !D+&�� ��*(���/8���!�"* ���%'�.����*����/'#�-!���+# ��1'+�68��('���*-�0�"� .'����*(���'��*�'#�'!+*' #�*(+*��/8���!�"* ��+#*+& #'�*��,+0�@��(�%"�-%�'#�*(��*��+*,�#*� ��+# ��1'+��� 9�.�� �%'**%�9+��D# 9#�+@ -*�( 9�% #&/*��,�'#G�!*' #�� ������!�"* ��+#*+& #'�*�� ��+& #'�*+���!*�� ��'#*+D� �@ �0�9�'&(* � ���#��&0��1"�#�'*-�������*(���� ����*-�'���( 9!(� #'!�'#�-�' #� ��*(���/8���!�"* ��+#*+& #'�*�� ��*9 �9��D��+���!*���� ��'#*+D��*-�'����( 9���*(+*�@% !D+&�� ��*(���/8���!�"* ��"� �-!���+�� @-�*�'#!��+���'#

!57@%' A� �+'%0�� ��! #�-,"*' #�+�*���8�9��D�� ��*��+*,�#*�9'*(������A�B ��=78A�B �+#���+%'#��A�B�+#��9��D%0�9�'&(*�!(+#&���+�*���8�9��D�� ��*��+*,�#*�9'*(������A�B �=78�A�B �+#���+%'#��A�B�����-%*��+�������+9#��� ,������63�

�B ����?���'2��4%9��/�:'*��4!��/5'�/'�

� ��'#*+D��+#��@ �0�9�'&(*�9'*( -*�*+!(0"(0%+1'��62E65�� ��-�*(���'#.��*'&+*��*(�% #&/*��,�����!*� �9��"��� �,���+��*-�0�9'*(�� -��9��D�� ��!(� #'!� '#*�+!���@� /.�#*�'!-%+��A'�!�.�B�'#�-�' #� ��*(����%�!*'.���/8���!�"* ��+#*+& #'�*��=78�+#��*(�# #��%�!*'.������!�"* ��+& #'�*���+���+#��, #'* ����� ��'#*+D��+#��@ �0�9�'&(*( ,� �*+�'��6<� ,�� ��*(��,+'#����-%*�� ��*('���*-�0�A����+9#�+#���( 9#�'#������6B�( 9� *(+*�+& #'�*� A��/��B/*��+*��� �+*��+*�� %����+#�� % �*� ! #�'���+@%0�, ���9�'&(**(+#��'��! #*� %��+*���-�'#&�*(���'��*�9��D� ��*��+*,�#*��� 9�.�� ��-�'#&�*(����! #�+#��*('���9��D� � *(�0�&+'#���9�'&(* �+#��@0�*(���#�� ��*(��*��+*,�#*�"��' ��*(�'�9�'&(*�&+'#�9+���','%+�� * � *(+*� �� *(��! #*� %� �+*����#*+& #'�*� A�=78B� *��+*,�#*!+-���� (0"��"(+&'+� +#�� ��.�% ",�#*� �� @��'*0� �-�'#&� *(�� �#*'��� "��' ��� �+�&�+!!-,-%+*' #�� ���+*�+#��%+�&��'#!��+����'#�%�"*'#�%�.�%��9���� @���.�����#*����*'#&%0 *(��� ��! #.���' #��+*' ����'#���+��@ �0�9�'&(*�'#!��+�����%+*'.��* �*(��9�'&(*� �'#&��*���� � �9+��!%�+�%0�'#!��+����'#�*(��+#*+& #'�*/*��+*����+*� �9(���+��'*�9+����/!��+���� '#� *(�� +& #'�*/*��+*��� �+*��� �," �*+#*%0 � *(�� ����!*� #� *(�� � ��! #.���' #�+*' �9+��*�+#�'�#* �@�'#&�&��+*��*�� ��@ *(��1"��',�#*+%�&� -"���-�'#&�*(���'��*�9��D+#��*(�#�+**�#-+*���* ���+!(�*(��! #*� %�%�.�%��+*�*(���#�� ��*(���*-�0�����+%� �'#.��/*'&+*���*(������!*�� ��</�+0�!(� #'!�'�!�.��'#�-�' #� ��@ *(�+#*+& #'�*�A�=78B�+#�+& #'�*� A����B� #� 10&�#� ! #�-,"*' #�6<���� @���.��� +� �'&#'�'!+#*� '#!��+��� '# 10&�#�! #�-,"*' #�7��+0�� +�*��� *(�� �*+�*� �� +& #'�*� '#�-�' #���('�� '#!��+����'�/+""�+���� +*� �+0� 8� +#�� %+*��� '#� *(�� �*-�0��� � �'�����#!��9+�� @���.��� '#� 10&�#! #�-,"*' #� +�*��� '#G�!*' #� �� *(�� +#*+& #'�*�� �(�� ',,��'+*�� ����!*� �� *(�� ���!�"* ��+& #'�*� #�@ *(�� ��'#*+D��+#��,�*+@ %'�,�9+��*(-��*�+#�'�#* ��.�#�*( -&(9�'&(*�% ���9+��,+'#*+'#�����(�����*-�'���"� .'���'#�'&(*�'#* �*(������!*��*(+*�!+#@���1"�!*���+�*���*(��+"�-*'!�*��+*,�#*�9'*(��1 &�#� -���/8���!�"* ��+& #'�*��+#�+#*+& #'�*��

%4?'�4!�.;'�*/+��%'/'8.4%�5��%'8%4:@/.54�

�@��'*0 �+# ��1'+ �+#��&�#��+%�@ �0�9�'&(*��%-!*-+*' #��!+-���+�.+�'�*0� ������!*� #� *(�� ��"� �-!*'.�� �0�*�,�� �(�� #�-� @' % &'!� ,�!(+#'�,�� �� *(�� ! ##�!*' #�@�*9��#�@ �0�9�'&(*�+#��*(����"� �-!*'.��+1'� �( 9�.�� �+���# *�9�%%�-#����* ����"*'#�! -%��"%+0�+�D�0�� %��'#�! ##�!*'#&��#��&0�@+%+#!��+#����"� �-!*' #�*(� -&('*�� +!*' #� #� @ *(� %-*�'#'C'#&� ( �, #�� A��B� +#�� "� %+!*'#� A���B� ��%�+���� �(�,�%+# ! �*'#�"�"*'����+#���/8���!�"* ���+����-&&��*���* �"+�*'!'"+*��'#�" ��'@%�� 9#�*��+,�����!*�� �� %�"*'#� #�� �� '#*+D��7= 76��*(����*-�'����( 9�*(+*�α/��,+0�@��'#. %.���'#�������%�+�� �*(+*�α/���'����%�+����+�*���+��-!D%'#&��*',-%-� +#��*(+*� ',,-# #�-*�+%'C+*' #� ��α/���%�+��� * �+�!%�+����!��+��� '#�+��-!D%'#&/'#�-!���������%�+���77�����( 9���*(+*�����!�"* ��+#*+& #'�*����!��+���*(��,+&/#'*-��� �� *(�����+#������ �-�&��� '#� # �,+%%0� ���� �*�� '�/"�',��� .+�'�!* ,'C����,+%���+*��74�� �� .�� �*(��+#*+& #'�*��+%� �@% !D�*(��%�"*'#��*',-%+*' #� ��*(���( �, #+%��-�&���'#��*+�.����+*��78��(�����-%*���-&&��*�*(+*�+��9'*(�� ��'#*+D� �*(�����!*�� ��%�"*'#� #��*�� '�/'#�-!������+#�������-�&���'#���,+%���+*��+���,��'+*�� +*�%�+�*�'#�"+�* �*(� -&(�*(���/8���!�"* ����&���+%� �! ,"%�*�%0�"��.�#*��@ *(���+#�������-�&���'#���,+%���+*��72��#G�!*' #�� ��+#*'/�&������-,�'#��+�*����+*� �9('!(+�����. '�� �����+#�������-�&�� �+%� ���'#�*+*���@ *(��-�&���72��(�������-%*��'#�'/!+*���*(+*��#� &�# -���&���,+0�@��'#. %.���'#����+#�������-�&����-�'#&��*+�.+/*' #�+#���-&&��*�*(+*�*(������!�"* ��(+��+�� %��'#�*(��+%%�&����-�&��!�#*���'#�*(�

���/;5>.;���������*'?��4/4%.5�+��%'/'8.4%

�#� !�'#��(0" *(+%+,-��*(+*��#*�+'#��@ *(����+#�������-�&�����#G�!*' #� ������+#�� γ/��� A�/4� ��!�"* �� +& #'�*B� #� ��� +#�� ���� �-�&��� '#� �*+�.��� �*�� '�/"�',��� .+�'�!* ,'C�����,+%���+*���( 9���*(+*�*(��+& #'�*��'&#'�'!+#*%0���! .����*(�������-�&� �9(���+��γ/���9+��9'*( -*�����!*�7;��('��"� .'�����-�*(����.'��#!�*(+*�'*�'��'#�����*(���/8���!�"* � �+#��# *�*(���/4���!�"* � �*(+*�,��'+*���*(��"��/ .-%+* �0������-�&��'#���,+%���+*����('��%'#D�@�*9��#�*(���/8���!�"* ��+#��*(��#��/����0�*�,�9+���-�*(����-"" �*���@0���!�#*����-%*���( 9'#&�*(+*�',, �*+%/'C���, -����#���#�-� #���"�!'�'!+%%0��1"������-#!*' #+%��/8���!�"* ���*(+*�+��! -"%��� * � �#��� ��%�+���75� ������� 7� �( 9�� +� �!(�,+*'!� ��"����#*+*' #� �� *(�"-*+*'.��� %�� ��*(���/8���!�"* ��'#�'#*�&�+*'#&�*(������+1'��9'*(�*(��(0" *(+%+,'!��&-%+* �0�,�!(+#'�,� ��� ��'#*+D��77

�.%@/.@%�?����?��5��4!�.;'�*/+��%'/'8.4%

'*�/�'��!*���,-*+&�#��'��(+��"%+0���+#�'," �*+#*�� %��'#���*��,'#'#&�*(��"-*+/*'.��'#*��+!*' #� ��+�%'&+#��* �+��'#&%��+,'# �+!'��9'*('#��/"� *�'#E! -"%�����!�"/* ���A����B��-!(�'#*��+!*' # �( 9�.�� �,+0�# *�+%9+0��@��'#� �,+*'.��+@ -*�*(� �'�#*+*' #� ��*(��(�%'1�@-#�%����� �� .�� ����-%*�� ��'#+!*'.+*' #�A+%+#'#���!+##'#&B�*-�'�� �'#�, �*�!+��� �!+## *��'�!�','#+*��@�*9��#��"�!'�'!�%'&+#�/��!�"* ��'#*��+!/*' #�� +#�� !(+#&��� *(+*� !+-��� -#�"�!'�'!� ! #� �,+*' #+%� +%*��+*' #�� *(+*� "��*-�@%'&+#��@'#�'#&���('��'��"+�*'!-%+�%0��.'��#*�9(�#�*(��%'&+#��'��+��%�1'@%��, %�!-%��-!(�+��+�"�"*'��� ��+�"� *�'#���#��9+0� ���*-�0'#&�*(��*(���/�',�#�' #+%��*�-!*-��� �������'��! #�*�-!*' #� ��+�('&(�+��'#'*0�C'#!�@'#�'#&��'*��@�*9��#�*(��(�%'!�� �-�/'#&�*9 ��'�/���'�-����+!'#&��+!(� *(��7<�A���������4B�� ��'#+*' #� ��*(��,�*+%�' #@'#�'#&��'*���'��9�%%�!(+�+!*��'C���'#�#-,�� -��H/�+0��*�-!*-���� ��� %-@%��"� *�'#� +#���'�*+#!����� ,�*(��!(�%+*'#&�+* ,��* �*(��,�*+%�' #�+���D# 9#���#%0�+���9�,-/*+&�#��'���*-�'��� #�*(��(-,+#��/8���!�"* ��+���+.+'%+@%��73 4=����! #�*�-!*���+, %�!-%+�� , ��%� �� *(�� (-,+#��/8� ��!�"* �� @+���� #� *(�� !�0�*+%� �*�-!*-��� ��( � "�'#�46����+%� �'#���*����'�����'�-���'#* ���.��+%�" �'*' #��'#�*(����!�"* ��* &�#��+*��,�*+%�' #�@'#�'#&��'*�������9����+@%��* �!��+*��+�*'�'!'+%�('&(/+��'#'*0�C'#!�'*���@�*9��#��"�!'�'!������&' #����(��,�*+%�' #�'#�-!���'#!��+����'#���! #�/,��/��#&���%�.�%��"���'!*'#&�*(��'#*��+!*' #� ��*(�������&' #�9(�#�*(��+& #'�*�+!*'.+*��*(����!�"* ��A�+&���*�),�� ��� �-#"-@%'�(����+*+B�����+%� �'��#*'�'���+�#+*-�+%�,�*+%

!57@%' �� �-*+*'.��� %�� ��*(���/8���!�"* ��'#�'#*�&�+*'#&�*(��(0" *(+%+,'!���&-%+/*' #� ��� ��'#*+D��9'*(�*(������+1'�������+9#��� ,������74��

�� ����?���'2��4%9��/�:'*��4!��/5'�/'�

' #��'*��'#�*(����!�"* ������-%*��9�����-@��I-�#*%0�-����* �! #�*�-!*�+����'#���, ��% ��*(��(-,+#��/8���!�"* ��"� *�'#����%'+@%��, %�!-%+��, ��%�� ��*(���/8���!�"/* ��,+0�@��-���-%�'#����'&#'#&�+#�����'#'#&�" *�#*�+#����%�!*'.���-@�*+#!���@'#�'#&* �*('����!�"* ��

'[email protected]��4!�.;'�*/+��%'/'8.4%

���0�%'**%��'��D# 9# �( 9�.�� �+@ -*�*(��, %�!-%+��,�!(+#'�,�� ��!�#*�+%���&-%+/*' #� ���#��&0�@+%+#!��'#�# #,+,,+%'+#��"�!'������"'*��*(���+!*�*(+*�*(��&� 9*(��+*� �� +#',+%�� �� ,� ��.��+%� *+1+ � '#!%-�'#&� �'�( �(+�� '," �*+#*�&% @+%� �! % &'!+%� +#��! # ,'!+%�',"+!*��� .�%�&�#���+�'���@0�@ *(�'#�'.'�-+%�+#�F ��@% !D��-"%'!+*' #��(��� �,��� �*�#�%�+.���*(��#�9�&�#��'#�!% ���"� 1','*0�* �*(��"+��#*�&�#� �9(���+�*(��%+**���! #*�'@-*���* ��-"%'!+*' #� ��9( %�� ��"+�*� ��!(� , � ,+%���&' #����+�&�/�!+%�� �-"%'!+*' #� � '#!%-�'#&� " %0"% '�'C+*' #� � +��� @�%'�.��� * � @�� +#� '," �*+#*,�!(+#'�,�'#�*(���. %-*' #� ��.��*�@�+*��&�# ,���47����(+.���*-�'���*(����%+*' # �� *(���/8���!�"* �� * � *(��������9'*('#� *(��(-,+#�&�# ,��@0�"(0% &�#�*'!+#+%0�'�� +%� � ! #�'���'#&� "+�+% & -�� !(� , � ,+%� ��&' #�� +#�� J�'#&��"�'#*K��I-�#!��� � -#�� '#� *('�� �+,'%0� �� &�#���� �(�� ��!�"* ��� *(+*� +��� "(0% &�#�*'!+%%0, �*�!% ��%0���%+*���* �*(������!�"* ���+����( 9#�'#��������8��� � @*+'#��-�*(��'#�'&(*�'#* �*(��,�!(+#'�,� ��&�#���+,'%0��. %-*' #�+#���. %-*' #� ��*(��!�#*�+%���&/-%+*' #� ��� ��'#*+D� �9��+���!-���#*%0�-#���*+D'#&���.��+%��*-�'��� #�����!�"* ��+,'%0���(��*�%� �*�C�@�+�'�(�/����� ���0�'��+#�'," �*+#*��1"��',�#*+%�+#',+%�'#&�# ,'!�+#����.�% ",�#*+%�����+�!(���*�(+��+�! ,"+!*�&�# ,��9'*(�+��','%+��#-,/@��� ��&�#���+��(-,+#� �@-*�'*�'�� #%0� #��*('���'#��'C� �9('%���*'%%��(+�'#&�%+�&��@% !D� ��! #���.����0#*�#0�44������!�#*%0���" �*���*(��!% #'#& �&�# ,��,+""'#& ��-#!/*' #+%��1"����' # �"(+�,+! % &0 �+#��+#+* ,'!��'�*�'@-*' #� ���/8���!�"* ���� ,

!57@%' �� !(�,+*'!���"����#*+*' #� ��( 9�,�*+%�' #�!+#�� �,�+�('&(%0����'#���@ #�@�*9��#� *9 � ('�*'�'#�� ���'�-��� *(+*� !+#� ��*��,'#�� *(�� �'�#*+*' #� �� (�%'!��� 9'*('#� +��!�"* ��

���/;5>.;���������*'?��4/4%.5�+��%'/'8.4%

C�@�+�'�(�ACB48�A���������2B��(� , � ,+%�,+""'#&� �� *(����!�"* ��&�#����( 9��! #���.����0#*�#0�@�*9��#���&' #��! #*+'#'#&�C�/8�+#��(-,+#��/8���!�"* ����(��C�/8���!�"* ���(+����56L� .��+%%�+,'# �+!'��'��#*'*0�9'*(�*(�����"�!*'.��(-/,+#� �*( % &-���+#�� .���3=L�'#�*(�������&' #��*(+*�+���@�%'�.���* �@��, �*�',/" �*+#*� � �� %'&+#�� @'#�'#&�� �(�� C�/8� ��!�"* �� +%� � �( 9��� "(+�,+! % &'!"� "��*'�����,+�D+@%0��','%+��* �*( ��� ��*(�'��(-,+#� �*( % &-� �9'*(��','%+��+��'#/'*'���+#�� *(���+,��" *�#!0� ���� �9'*(�α/���+%� �!+-�'#&�+�� ��/��"�#��#*� '#/!��+���'#�'#*�+!�%%-%+��!����%�.�%����(��C�/8���!�"* ��9+���1"�������'#�*(��@�+'# �0� � .+�'�� �+#��&+�*� '#*��*'#+%�*�+!*���(���*-�'�����"����#*���*(���'��*�!(+�+!*��'C+/*' #� ������!�"* ���'#�+�# #/+,#' *���"�!'���+#��'#�'!+*��*(+*�*(������!�"* ���-@/*0"��� +� ��� .��0� �+�%0� '#� .��*�@�+*�� �. %-*' #�� �," �*+#*� "(+�,+! % &'!� +#��-#!*' #+%�"� "��*'���+��9�%%�+��&�#���*�-!*-���+#���0#*�#'!���%+*' #�('"��(+.��@��#

!57@%' �� �(0% &�#�*'!�*�����( 9'#&�*(����%+*' #� ������!�"* ���* � *(��������'#*(�� (-,+#� &�# ,��� �+�&�� #-,@���� �� (-,+#������9���� +���,@%�� � +#�� *(�� 64�, �*��%+*���+����( 9#�'#�*(���'&-�����(0% &�#�*'!�*�����9����@-'%*�-�'#&�*(���'#47�.���' #�7�6 ��*(������7�� �*9+�� �-�'#&�*(��,+1',-,�"+��', #0�,�*( ��9'*(�*(���+1/�'#'���+#!(+#��� -#���������+�!(�+%& �'*(,��*+@'%'*0� ��*(��# ����9+��+��������-�'#&�*(��@ *�*�+"/"'#&�,�*( ��9'*(�6 ===���"%'!+� �+#��+%%��'*���9����*��+*���+��'#� �,+*'.���������9����"% **��'#�����/.'�9���-,@����+@ .��*(��# ����'#�'!+*��#-,@��� ��@ *�*�+"���"%'!+*���

�� ����?���'2��4%9��/�:'*��4!��/5'�/'�

!57@%' =� �(0% &�#�*'!�*���� ��*(���+,'%0� ������!�"* ���'#��'�����#*��"�!'�����(�*����9'*(�*(���-%%/%�#&*(�+,'# �+!'����I-�#!��� ��*(������!�"* ���9+��!��+*���'#�+��','%+�9+0�+��*(��*����'#��������8 �@-*�9'*(�6==���"%'!+���������9����"% **���'#�����/�1"% ������(�(-,+#�!+##+@'# '��6���!�"* ����I-�#!��9+��-����* �� *�*(��*������(��#-,@����+@ .��*(�# ����'#�'!+*��*(��#-,@��� ��@ *�*�+"���"%'!+*���

�A�/;5>.;���������*'?��4/4%.5�+��%'/'8.4%

('&(%0�! #���.��� .���+�"��' �� ��, ���*(+#�8==�,'%%' #�0�+�� �',"%0'#&�*(+*�*(�����!�"* ���"+�*'!'"+*��'#�.'*+%�"(0�' % &'!+%��-#!*' #��

/4�/?@:5�7�%'*�%9�

�*�'��%'D�%0�*(+*���-&��+���!*'#&�*(���/8���!�"* ��+#��,+#0� *(���(0" *(+%+,'!��!�"* ���9'%%� @�� ��.�% "���9'*('#� *(��#�1*� ��9�0�+���� �*� '�� ! #!�'.+@%�� *(+*����!�"* ��+!*'.���-@�*+#!���+#�� *(����-@�*+#!���+!*'#&� #�!�#*�+%������,+0��'#�*(��+"�-*'!�.+%-��'#�*(��*��+*,�#*� �� @��'*0���(����'� �( 9�.�� �+��+#&�� �� *(����'�/�+���� *(+*�+���&�**'#&�%����+**�#*' # �@-*�� ��9('!(��-!(�+�! ," -#��,+0�@�! ,�-���-%���+*( % &'!�! #�'*' #���-!(�+���+*'#&��'� ����� �'#!%-�'#&�&��'+*�'!�+# ��1'+ +# ��1'+�#��. �+ �@-%','+ �+#��#�-� % &'!�� ��!�+.'#&��'� ����� �� �# *�(+.������!/*'.��"(+�,+! *(��+"'�����+#0�#�-� "�"*'��� ��-!(�+���� ��&�� �#�-� "�"*'���M %�"*'# �+#��*(�'����!�"* ���+�� �* �+�&��+*��� ��%�������1*�#* �'#. %.���'#���"� �-!*'.�"� !������� �(+�,+! % &'!� +&�#*�� +���!*'#&� @��'*0� +#�� @ �0� 9�'&(*� ( ,� �*+�'�,+0�+%� �(+.��+#�'#(���#*�" *�#*'+%�* �+���!*�*(����"� �-!*'.���0�*�,���*�'��" ��'@%�*(+*��-@�*+#!���'#*�#����* �+���!*�@ �0�9�'&(*�,+0��'#��+�� %��'#�!-�'#&���"� �-!*'.��'� �������-!(�! #�'*' #��,+0�'#!%-���,+%�-#!*' #'#&� �����+#��������!��*' #� ��'�����#*�! #�'*' #�� ��'#���*'%'*0�!+-����@0�+# ��1'+ �(0" *(+%+,'!�+,�# ��(�+ �+#� *(���*0"��� ��'�' "+*('!�+,�# ��(�+ �+%%� ��9('!(����'�*�!-���#*�,��'!+%�*��+*,�#*��*�'��+%� �'," �*+#*�* �@��+9+���*(+*���-&��+���!*'#&��'*(���@ �0�9�'&(*� ����"� �-!/*' #�,+0�(+.��+#�'#(���#*�!+"+!'*0� * �!+-���+�.���������!*�� #�*(�� *(����0�*�,���-�*(���-#����*+#�'#&� ��*(��� %�� ��*(��&�#�� �*(�'�� �'&'# ��*�-!*-�� �+#���-#!*' # 9'%%�'#!��+���*(��%'D�%'( �� ��*(����.�% ",�#*� ��#�9��-!!����-%�*��+*,�#*� ��"+*( /% &'!�! #�'*' #��

�/9�42?':7*'�.�

�(���*-�'���9�����-"" �*���@0�*(��9��'�(�����+�!(� -#!'%�A�� �,��'!'#�B 9��'�(� !'�*0�� �����'!+%�����+�!(�A��B �ND���'@��&��*'�*�%�� ���*�-�� !(�-&-�*+����%-#���*'�*�%�� �+#����%+!-����(��+"�-*'!���� ��""�+%+ �9���#�

%'!'%'�/'�

6� ����O ��� �������� �M������� �� ��1�6334��� %�!-%+��!% #'#& ��1"����' # �+#��&�#�% !+%'C+*' #� ��+�� -�*(�,�%+# ! �*'#���!�"* �������' %��(�,���B���62658E62653�

7� �������M ����� ������������� ��������� �� ��1�6338��� !+%'C+*' #� ��*(��,�%+# /! �*'#/8���!�"* �� A�8/�B� '#�#�-� �#� !�'#��+#��+-* # ,'!�! #*� %�!'�!-'*�� '#� *(�@�+'#��� %���#� !�'# %�����673<E64=<�

4� ����� ����� ������������P� ��������������� 633;��(+�+!*��'�+*' #� ��,�%+# /! �*'#�8���!�"* ��@0��+�' %'&+#��@'#�'#&�+#+%0�'����(+�,+! %��� 1'! %������6;6E6;2�

8� ���� ���� ������������� ����������� �� ��1�6333��� %�!-%+��"(+�,+! % &0� ��& -*'�"� *�'#��� ����+#���� �������##����M���!+���!'����=��684E627�

2� ��O�� ��� ������M�� ������������/������ �� ��1�6335���+�&�*����'��-"*' #� �*(��,�%+# ! �*'#/8���!�"* �����-%*��'#� @��'*0�'#�,'!����%%�����646E686�

;� ��� � ����� 6333�� �(�� !�#*�+%�,�%+# ! �*'#� �0�*�,� +#�� �#��&0� ( ,� �*+�'��� ���#���#� !�'# %����*+@��A���766E76;�

�� ����?���'2��4%9��/�:'*��4!��/5'�/'�

5� ����� ������7==6���(��"(0�' % &'!+%�� %�� ��,�%+# ! �*'#���!�"* �����'*+,��� �,�B���632E747�

<� ��� ��� ����������� ������������� �� ��1�6335��� %�� ��,�%+# ! �*'#��&'!�#�-/� #��'#�����'#&�+#��*(��+& -*'� @��'*0��0#�� ,����+*-�����=��6;2E6;<�

3� ��� � �� � ��� ���� � ������������ � � ��1� 7===�� �'�����#*'+%� ����!*�� �� ,�%+# ! �*'#"�"*'���� #�'#&��*'.��@�(+.' -��'#��+*�$��.'��#!��+&+'#�*�*(��'#. %.�,�#*� ���A4B��!�"* ��'#�*(����&-%+*' #� ��� ��'#*+D�����-� �!'����**�������6E8�

6=� ��� ��� �������� ���������� �� ��1�633<���%�!*'.��+#*+& #'�*�� ��*(��,�%+# ! �*'#8� ��!�"* �� A�=68B� '#!��+���� � �� '#*+D�� '#� ����/����'#&� �+*��� �' !(�,�� �' "(0������� ,,-#����=��3=E34�

66� ��� ��� ���������� ����������� �� ��1�633<��'�! .��0� ��+�# .�%��-"��" *�#*�+#���%�!*'.��,�%+# ! �*'#/8���!�"* ��+#*+& #'�*�A�=78B$��.+%-+*' #��� ����+#���� ����1�#� !�'# % &0�A����2==;E2=68�

67� ��� ��� �������� ������������ �� ��1� 633<����/*��,'#+%� ��+&,�#*� ���& -*'/��%+*��� "� *�'#� '#!��+���� ����'#&� +#�� +#*+& #'C��� *(�� ����!*� �� +%"(+/,�%+# !0*��*',-%+*'#&�( �, #��'#�.'. ���#� !�'# % &0�A����887<E8846�

64� ������� ����� ���� ��������� � ������������ � � ��1� 633<���'�����#*'+%� '#�%-�#!�� �� +��%�!*'.��,�%+# ! �*'#��8���!�"* ��+#*+& #'�*� #�,�%+# ! �*'#/'#�-!���@�(+.' �+%����!*��'#��+*����-�������(+�,+! %���B���32E6=6�

68� ������� ����� ������������� ������������� �� ��1�6333���%�!*'.��,�%+# ! �*'#��8��!�"* �� @% !D+&�� ���-!��� ',, @'%'C+*' #� �*����/'#�-!��� +# ��1'+� '#� �+*��� �-��� ���(+�,+! %���B���66E62�

62� ���������� ����� ��������� ����������������� �� ����6333��� #&� *��,� ��1'/&�#'!� ����!*�� �� +� # .�%� ��%�!*'.���8� ��!�"* �� +#*+& #'�*������ ��� �(+�,+! %��A�B�75E48�

6;� ��� ��� ���������� ���� �� �� ��1�6333��� #&/*�,�+�,'#'�*�+*' #� ���8���!�"* �+#*+& #'�*��=68�!+-����(0"��"(+&'+�+#�� @��'*0�'#��+*�����-� ��" �*�A���5=5E566�

65� ������� ����� ������������� ������������ �� ��1�7===��(� #'!�,�%+# ! �*'#�8���!�"/* �� @% !D+&�� !+-���� @��'*0� 9'*( -*� '#�%-�#!'#&� ��1-+%� @�(+.' �� '#� ,+%�� �+*��� ���#� !�'# %��ABB��863E87;�

6<� ����� ��� ����������������� ���������������� �� ��1�7==7��� ��! #.���' #�'�*�+#�'�#*%0� +���!*��� �-�'#&� 8/9��D� !(� #'!� +�,'#'�*�+*' #� �� ,�%+# ! �*'#� +& #'�*+#��+#*+& #'�*�'#��+*�������#� !�'# %��A����265E274�

63� ����� � �� � ����� ����������� � ����� ���������� � � ��1� 7==6�� ��%+# ! �*'#��!�"* ��+& #'�*� *�+#�'�#*%0� '#!��+���� 10&�#�! #�-,"*' #� '#� �+*�����-� ��" �*�A��45=4E45=<�

7=� ����M ����� ������M������� ���������� �� ��1�6335����%+# ! �*'#���!�"* ���'#�%�"*'#����!*����+*-��������483�

76� ��� ��� �����Q�� ��������������P�������������633<���.'��#!��� ��'#. %.�,�#*� �*(��,�%+# ! �*'#�8���!�"* ��'#�*(������!*�� ��%�"*'#� #�� ��'#*+D����-�������(+�,+! %��B���62E63�

77� ����� � ����� P� ������������� 7==7����%+# ! �*'#�� +#�� ��"� �-!*' #�� ��+'#� ������+'#��������.������48=E42=�

74� �������� ��� ����������� ������������� �� ��1�6333���(��,�%+# ! �*'#�8���!�"* �,��'+*��� %�"*'#� �*',-%+*' #� �� %-*�'#'C'#&�( �, #��+#��"� %+!*'#� �-�&��� '#� �*�� '�/"�',��� .+�'�!* ,'C����+*����' !(�,���' "(0�������� ,,-#���=���<;=E<;8�

78� �������� ��� ������� ������������� �� ��1�6333���.'��#!��*(+*�"(0�' % &'!+%�%�.�%� ��!'�!-%+*'#&�%�"*'#��1��*�+��*',-%+* �0�����!*� #�%-*�'#'C'#&�( �, #��+#��"� %+!*'#�-�&���'#��+*����' !(�,���' "(0�������� ,,-#���B���6;7E6;2�

72� ����� ����� �M������O��� ���������� �� ��1�7==6���& -*'/��%+*���"�"*'���"��.�#*��*�� '�/'#�-!���%-*�'#'C'#&�( �, #��+#��"� %+!*'#��-�&���'#���,+%���+*�����-� ��" �*A���;<5E;3=�

7;� �������� ��� ����M����� �M������O��� �� ��1�7==6���-�*(����.'��#!��� ��+��'&#'�'/!+#*�"+�*'!'"+*' #� ��*(��,�%+# ! �*'#�8���!�"* ��'#�*(��"�� .-%+* �0�"� %+!*'#��-�&�'#�*(���+*����+'#�������-%%��=���276E272�

75� ����� ��� � ���� ����O � ����� M�� � � ��1� 7==6�� �1"����' #� �� �-#!*' #+%�,�%+# /! �*'#/8���!�"* ��'#�*(��(0" *(+%+,'!�&*6/6�!�%%� %'#�����-� �#� !�'# % &0�����634E7=6�

���/;5>.;���������*'?��4/4%.5�+��%'/'8.4%

7<� ������ ���� ������������ ����������� �� ��1 6335����*+%/' #� �'*��� +�� �*�-!*-�+%+#���-#!*' #+%�"� @��� ��(�%'1/(�%'1�'#*��+!*' #��'#�5�����!�"* �����##����M���!+��!'���A���687E626�

73� M��� �M��� ���������� ������������ �� ��1�7===��� %�!-%+����*��,'#+#*�� ��%'&+#�@'#�'#&�* �*(��(-,+#�,�%+# ! �*'#/8���!�"* ����' !(�,'�*�0�����683==E68366�

4=� M��� �M� ���� ��� �M�� ��� � � ��1� 7==7��� %�!-%+�� ��*��,'#+#*�� �� (-,+#�,�%+# /! �*'#/8� ��!�"* �� ���" #�'@%�� � �� +#*+& #'�*� ��3663� ��%�!*'.�� +!*'.'*0�� ��� �' %�(�,�������7=47<E7=442�

46� ���O���� ��� ����������� �������� �� ��1�7===���0�*+%��*�-!*-��� ���( � "�'#$�+��"� *�'#/! -"%�����!�"* ���!'�#!�������543E582�

47� ������ � ����� 6334�� �. %-*' #� �� *(�� .��*�@�+*�� &�# ,�� +�� ���%�!*��� '#� "+�+% & -�!(� , � ,+%���&' #��'#�,+#�+#��*(��( -���, -������# ,'!��AB��6E63�

44� ����������� ����� �M����M�� ���������� �� ����633<�����*�@�+*��&�# ,���. %-*' #+#��*(��C�@�+�'�(�&�#��,+"���+*-�����#�*��A���482E483�

48� �������� ��� ������������� ������������� �� ��1� 7==7���#��,�%+# ! �*'#�8�+#�*9 �,�%+# ! �*'#�2���!�"* ����� ,�C�@�+�'�(��( 9���,+�D+@%��! #���.+*' #�'#��*�-!/*-���+#��"(+�,+! % &0�������-� !(�,������;E6<�