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Efecto de dietas proteicas a base de harina delombríz roja (Eisenia spp.) en el comportamiento del

hámster dorado (Mesocricetus auratus L.).II. Morfometría de órganos e intestino

Effect of protein diets based on red worm (Eisenia spp.)meal in the behavior of golden hamster (Mesocricetusauratus L.). II. Morphometry of organs and intestine

D.E. García1, L.J. Cova2, J.V. Scorza D.2, M.E. González3, P. Pizzani4,M. G. Medina1, F. Perea1 y D. González1

1Departamento de Ciencias Agrarias, Núcleo Universitario "RafaelRangel" (NURR), Universidad de Los Andes (ULA), estado Trujillo,Venezuela.2Instituto Experimental "José Witremundo Torrealba", ULA, estadoTrujillo, Venezuela.3Departamento de Biología y Química, Núcleo Universitario NURR,ULA, estado Trujillo, Venezuela.4Área Agronomía, Universidad Nacional Experimental "RómuloGallegos", estado Guárico, Venezuela.

Resumen

Se evaluó el peso y volumen del corazón (C), riñones (R), hígado (H) e intes-tino (I), y la longitud del intestino (LI) en Hamsters Dorados (Mesocrisetus auratusL.) alimentados con dietas elaboradas con 21% (D1; PB=13,5%), 24% (D2;PB=15,4%), 27% (D3; PB=17,6%) y 30% (D4; PB=19,6%) de harina de LombrizRoja (HL; Eisenia spp.) o con dos alimentos convencionales, Conejarina® (D0:PB=11,4%) y Ratarina® (D5: PB=21,1%). La investigación se efectuó en el Vivariodel Núcleo Universitario Rafael Rangel (NURR) de la Universidad de los Andes.Se empleó un diseño totalmente aleatorizado, en el cual las dietas evaluadasconstituyeron los tratamientos. Los datos se procesaron mediante el paquete es-tadístico SPSS versión 10.0 para Windows. No se observaron diferencias entredietas en el peso del C (280-350 mg). Los animales alimentados con D2, D3 y D5exhibieron mayor peso de ambos R (445-458 mg). El peso mayor del I se observóen los animales que consumieron D3 (12,4 g); mientras que los de D4, excluidos delensayo 12 días antes de finalizado debido a signos de intoxicación, tuvieron unpeso de I comparable (13,2 g), al momento del sacrificio. No se observaron dife-

Recibido el 27-1-2010 Aceptado el 14-5-2012Autor de correspondencia e-mail: dagamar8@hotmail.com

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rencias estadísticas entre tratamientos en el volumen del C (0,35-0,40 cm3) y R(0,26-0,45 cm3). El volumen del H, I y la longitud de I de los alimentados con D2(H: 2,17 cm3; I: 17,33 cm3; LI: 49,27 cm) y D3 (H: 2,30 cm3; I: 18,67 cm3; LI: 50,33cm) fueron superiores al resto de los grupos (H: 1,50 cm3; I: 10,17 cm3; LI: 33,15cm). La HL constituye un suplemento proteico de buena calidad para el hámsterdorado cuando es incluida en la dieta en una proporción del 21%. La inclusión deporcentajes superiores de HL, como los de las dietas D2, D3 y D4, pueden producirresultados contraproducentes debido probablemente al elevado contenido de aminasbiogénicas.Palabras clave: Harina de lombriz, composición nutricional, Eisenia spp.,hámster dorado, órganos.

Abstract

It was evaluated the weight and volume of the heart (C), kidneys (R), liver(H) and intestine (I), and intestine length (LI), in 72 Golden Hamster (Mesocrisetusauratus L.) consuming diets (D) made with red worm (Eisenia spp.; HL) meal anddescribed as: D1: PB=13.5% (HL: 21%); D2: PB=15.4% (HL: 24%); D3: PB=17.6%(HL: 27%); D4: PB=19.6% (HL: 30%) and two commercial feeds (D0: Conejarina®;PB=11.1% and D5: Ratarina®; PB=21.1%). The study was conducted at the vivariumof the Núcleo Universitario «Rafael Rangel, Universidad de los Andes, Trujillo,Venezuela. The data were analyzed by means of the statistical program SPSSv10.0 as a completely randomized design, in which the diets were considered thetreatments. No differences in C weight (280-350 mg) were observed among diets.Animals fed with D2, D3 y D5 exhibit greater R weight (445-458 mg). The greaterweight of the I was observed in the animals consuming D3 (12.4 g); while thoseconsuming D4 had a similar weight (13,2 g) at day 9 of the experiment, time atwhich were removed from the study due to intoxication symptoms. No differencesin C (0.35-0.40 cm3) and R (0.26-0.45 cm3) volume were observed among diets. Thevolume of H and I in the hamsters fed with D2 (H:2.17 cm3; I:17.33 cm3; LI:49.27cm) and D3 (H:2.30 cm3; I:18,67 cm3; LI:50,33 cm) were greater than in the otherexperimental groups (H:1.50 cm3; I:10.17 cm3; LI:33.15 cm). Animals consumingD2, D3 and D4 affected drastically the morphometry of H and I, whereas they weresimilar between hamster fed with D1 and Ratarina®. The HL represent a proteinsupplement of excellent nutritional quality for the Golden Hamster when is includedin the diet in a proportion of 21%. Inclusion of greater percentages of HL, as wasdone in D2, D3 and D4, might produce harmful effects due to high concentrations ofbiogenic amines in such diets.Key words: earthworm meal, nutritional composition, Eisenia spp., goldenhamster, organs

García et al.

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Introducción

En Venezuela, como en otros paí-ses Latinoamericanos, la disponibili-dad de recursos alimenticios para con-sumo animal constituye una de laslimitantes fundamentales para el de-sarrollo de sistemas de producción, sinla dependencia de los insumos compra-dos en el exterior. Debido a ello, se handesarrollado numerosas investigacio-nes para caracterizar y evaluar alimen-tos no convencionales que ayuden amitigar la falta de fuentes proteicaspara la alimentación animal (Savón etal., 2008).

Si bien es conocido que en la ac-tualidad existen fuentes alimenticiasno convencionales con las cuales sehan obtenido resultados satisfactoriosen los rumiantes criados en condicio-nes tropicales, en el caso de los no ru-miantes el espectro de posibilidades esmás limitado, ya que los elevados re-querimientos de estos animales y al-gunos aspectos relacionados con el sis-tema de producción, hacen que aún nose logre prescindir del uso de ingredien-tes tales como oleaginosas y sussubproductos; así como de la harinade pescado por su rica composiciónenergética y de aminoácidos (García etal., 2009). Debido a su alto contenidoproteico, en los últimos años se ha in-vestigado la factibilidad del uso de laharina de lombriz (HL) (Eisenia spp.)como suplemento en la alimentaciónanimal y humana (Morón-Fuenmayoret al., 2008; Cova et al., 2009). La ha-rina de lombriz ha sido tipificada comosuplemento proteico de elevado valornutritivo. No obstante, su uso poten-cial ha sido sugerido para pequeñosanimales debido a que para obtener

Introduction

In Venezuela, as in any otherLatin America country, theavailability of feed resources for ani-mal consumption constitutes one of themain limitations for the developmentof animal production systems, withoutthe dependence of material bought outof the country. For this reason,numerous researches have beencarried out for characterizing andevaluating non conventional food thathelp mitigating the lack of proteinsources for the animal alimentation(Savón et al., 2008).

It is well known that currentlythere are non conventional sourceswith satisfactory results in ruminantsraised in tropical conditions, but inthe case of non-ruminant thespectrum of possibilities is morelimited, since the elevatedrequirements of these animals andsome aspects related to the productionsystem make still demandable the useof oil-base products and sub-products,such as fish flour, for its richenergetic composition and aminoacids (García et al., 2009). Due to thehigh protein content, in the last yearshas been studied the feasibility on theuse of worm meal (HL) (Eisenia spp.)as supplement in animal and humanalimentation (Morón-Fuenmayor etal., 2008; Cova et al . 2009).Wormmeal has been typified asprotein supplement with elevatenutritive value. Nevertheless, itspotential use has been suggested forsmall animals, because, in order toobtain elevated quantities of this foodis needed a continuous commercialproduction in median or big scale.

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elevadas cantidades de este alimento,se necesita una producción comercialcontinua de mediana o gran escala.

Aún cuando son reconocidasmundialmente las ventajas de la hari-na de lombriz como suplemento ali-menticio de excelente calidad, se handesarrollado pocos estudios de compor-tamiento animal en los cuales se ha-yan evaluado los niveles de inclusiónen las dietas y sus efectos en la pro-ductividad, fisiología digestiva, meta-bolismo y morfometría de órganos(Cova et al., 2006; Cova et al., 2009;Cova et al., 2011; García et al., 2012a;García et al., 2012b).

Debido a su bajo costo y fácilmanejo, los animales de laboratoriopueden ser utilizados para realizar es-tudios de diversa índole (De Jesús yQuintero, 2008). El hámster Dorado(Mesocricetus auratus L.) ha mostra-do ventajas para evaluar preliminar-mente las potencialidades de alimen-tos experimentales pues respondenrápidamente a cambios nutricionalesen la dieta (Llewellyn et al., 1985; Carret al., 1996) y exhiben un metabolis-mo similar a muchos de los animalesno rumiantes de interés comercial (DeVries, 1996).

Con el propósito de evaluar lautilidad de la harina lombriz en la ali-mentación del hámster Dorado, se es-tableció como objetivo de esta investi-gación estudiar el efecto de diferentesdietas a base de harina deshidratadade Eisenia spp., y de otras fuentes dealimentos convencionales, sobre el pesoy volumen de algunos órganos talescomo el corazón, riñones, hígado e in-testino y la longitud del intestino enM. auratus.

Though are worldwide known theadvantages of worm’s flour as highquality food supplement, fewresearches have been carried out ofanimal behavior where have beenevaluated the inclusion levels in thediets and their effects in theproductivity, digestive physiology,metabolism and morphometry oforgans (Cova et al., 2006; Cova et al.,2009; Cova et al., 2011; García et al.,2012a; García et al., 2012b).

Due to its low cost and easyhandle, laboratory animals can be usedfor carrying out such researches (DeJesús and Quintero, 2008). GoldenHamster (Mesocricetus auratus L.)has showed advantages to evaluatepreliminary the experimental foodpotentialities because respond easily tonutritional changes in the diet(Llewellyn et al., 1985; Carr et al.,1996) and exhibit a similarmetabolisms to many of the nonruminant animals with commercialinterest (De Vries, 1996).

With the aim of evaluating theuse of worm flour in the alimentationof Golden Hamster, was established asmain objective to study the effect ofdifferent diets base on dehydrated flourof Eisenia spp., and other sources ofconventional food on the weight andvolume of some organs such as heart,kidneys, liver and intestine and theintestine longitude in M. auratus.

Materials and methods

Location of the essayThe research was carried out at

the Vivarium of the UniversityCampus "Rafael Rangel" (NURR) at

García et al.

564

Materiales y métodos

Localización del ensayoEl estudio se desarrolló en el

Vivario del Núcleo Universitario «Ra-fael Rangel» (NURR) de la Universi-dad de los Andes (ULA), en el SectorCarmona de la ciudad de Trujillo, es-tado Trujillo, Venezuela; localizado auna altitud de 800 msnm, y con unatemperatura media anual y humedadrelativa de 25,2ºC y 69% respectiva-mente.

Condiciones de experimen-tación

Se utilizaron 72 hámsters hem-bras con un peso promedio de 81,45 ±8,54 g provenientes del Bioterio de laFacultad de Ciencias de la ULA, esta-do Mérida, Venezuela; los cuales fue-ron divididos en 12 grupos de seis ani-males y distribuidos de forma aleatoriaen jaulas de acero inoxidable (45,5 cmde largo; 40,0 cm de ancho y 22 cm dealtura), con bandejas metálicasintercambiables en la parte inferior.Durante todas las etapas del ensayolos animales fueron sometidos a ciclosde luz-oscuridad de 12 h, suministrode agua a voluntad y oferta diariaconstante de alimento (NRC, 1995).

Para la adaptación a las condi-ciones de experimentación los anima-les fueron confinados una semana an-tes en las condiciones anteriormentedescritas. En dicho periodo se les su-ministró diariamente a cada animalel equivalente a 20 g de una dietapeletizada (11,4% de Proteína bruta,PB; 1,2% de Grasas; 44,0% de Fibradetergente neutro, FDN; 64,4% deExtracto libre de nitrógeno; 8,6% deCeniza) y agua ad libitum. Luego definalizado el periodo pre-experimental,

Universidad de los Andes (ULA), inCarmona, Trujillo city, Trujillo state,Venezuela. This location is at analtitude of 800 masl and has an annualmean temperature and relativehumidity of 25.2°C and 69%respectively.

Experiment conditions72 female hamsters were used

with average weight of 81.45±8.54g from the Vivarium of the ScienceSchool of the ULA. Mérida state,Venezuela, which were divided into 12groups of six animals and distributedrandomly in stainless steel cages (45.5cm of length; 40.0 cm of width and 22cm of height), with interchangeablemetallic trays in the inferior side.During all phases of the study, theanimals were submitted to light-darkcycles of 12 h, ad libitum water supplyand daily constant provision of food(NRC. 1995).

For the adaptation to theexperimentation conditions, theanimals were confined from a previousweek in the above describedconditions. In that period, each animalwas daily provided with the equivalentto 20 g of a pelleted diet (11.4% of rawprotein, PB; 1.2% of fats; 44.0% of neu-tral detergent fiber, FDN; 64.4% ofextract free of nitrogen; 8.6% of ash)and ad libitum water. After finishedthe pre-experimental period, for 21days and at 7:00, the animals were fedwith the corresponding diet on eachcage, removing the residual food andthe excrements of the previous day.

Ingredients, formula of dietsand treatments

To formulate the food rations foreach treatment, the followingingredients were used: star grass

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durante 21 días a las 7:00 am se lesofertó a cada grupo la dieta respectivaen el comedero de cada jaula, retiran-do antes el alimento remanente y lasexcretas del día anterior.

Ingredientes, formulación dedietas y tratamientos

Para formular las raciones decada tratamiento, se usaron los si-guientes ingredientes: pasto estrella(Cynodon nlemfluensis), gelatina tra-tada (Pandock, Distribuidora Valera,Trujillo, Venezuela), cal comercial ymelaza. Los ingredientes, la formula-ción y composición química de cadadieta incluida en el estudio se mues-tran en el cuadro 1.

Restructuración del alimen-to y obtención de los pellet

Considerando que la Ratarina® yla Conejarina® comercial presentan

Cuadro 1. Composición porcentual y química de los ingredientesutilizados en las dietas del estudio.

Table 1. Percentage and chemical composition of the ingredients usedin the diets of the research.

Variable D0 D1 D2 D3 D4 D5

Conejariana 100 - - - - -Harina de lombriz - 21 24 27 30 -Pasto estrella - 24,90 25,00 23,00 22,62 -Gelatina - 38,5 34,48 26,68 20,58 -Carbonato de calcio - 0,10 0,12 0,02 - -Fosfato monocálcico - 0,50 0,40 0,40 0,40 -Maíz - 10,00 11,00 17,90 22,00 -Melaza - 5,00 5,00 5,00 5,00 -Ratarina - - - - - 100Proteína bruta (g/kg) 114,2 135,0 154,0 176,0 196,0 210,9Energía metabólica (Cal/kgMS) 1254 1359 1465 1746 1944 2003Fibra detergente neutra (g/kg) 440,6 450,8 437,2 412,4 400,2 420,3Calcio (g/kg) 2,6 3,0 3,0 3,0 3,1 3,1Fosforo (g/kg) 1,8 2,0 1,9 2,0 2,1 2,0

(Cynodon nlemfluensis), treatedgelatin (Pandock, Valera distributor,Trujillo, Venezuela), commercial limeand molasses. The ingredients, formu-la and chemical composition of eachdiet included in this study are shownin table 1.

Restructuring of the foodand obtaining of pellet

Considering that commercialRatarina® and Conejarina® havedifferent sizes of pellet, both feed wererestructure with the aim of makingthem similar and avoiding theinfluence on the size and consistencyof pellets. For this, was used a crown-type mill (14/249, Royal Triumph) andlater, a 8-knife pelleting with anelectronic velocity variator and 3 HPmotor. Pellets were dried for 48 hoursin a stove with forced ventilation (YRH

García et al.

566

diferentes tamaños de pellets, ambosalimentos fueron reestructurados conel fin de hacerlos similares y así evi-tar la influencia del tamaño y consis-tencia de los pellets. Para ello se utili-zó un molino tipo corona (14/249, mar-ca Royal Triumph) y posteriormenteuna peletizadora de 8 cuchillas de cor-te con variador electrónico de veloci-dad y motor de 3HP. Los pellet fueronsecados durante 48 horas en una estu-fa con ventilación forzada (YRH 02-3,marca Kaltein) y después de enfriarsese almacenaron a temperatura am-biente. Las características físicas delos pellet elaborados para las dietas delestudio se muestran en el cuadro 2.

Manejo y mediciones en losanimales

El manejo, cuidado y manteni-miento de los hamsters se realizó si-guiendo las normas vigentes para elcuidado de animales de laboratorio(Home Office, 1989). Al final el experi-mento, que se extendió por 21 días,todos los animales fueron anestesiadosen ayuno con éter etílico (BDH), y pos-teriormente sacrificados mediante pun-ción cardiaca. Luego del desangradoexhaustivo se extrajo mediante un pro-cedimiento quirúrgico de rutina lossiguientes órganos abdominales: híga-do, riñones, corazón e intestino delga-do (duodeno, yeyuno e ileon) y grueso(ciego, colon y recto). Cada órgano fuelavado con agua destilada de formaindividual, secado con papel adsorbentey pesado en una balanza analítica(Advance Lab-Venezuela, modelo MY).Para evitar sobreestimaciones por lapresencia de contenido intestinal, an-tes de realizar el pesaje y luego de frac-cionar el intestino en cuatro segmen-tos de aproximadamente 12 cm, esta

02-3, Kaltein brand) and later were letcold and stored at environmentaltemperature. The physicalcharacteristics of the elaborated pelletsfor the diets are shown in table 2.

Handling and measurementin the animals

Handle, care and maintenance ofhamster were done following thenorms for laboratory animals’ care(Home Office, 1989). At the end of theexperiment, which extended for 21days, all animals were anesthetizedwith ethylic ether (BDH) after 24 h offasting and later slaughtered bycardiac puncture. After the exhaustivebleeding, the following abdominalorgans were removed by a routinechirugical procedure: liver, kidneys,heart and small intestine (duodenum,jejunum and ileum), large intestine(cecum, colon and rectum). Each indi-vidual organ was washed with distilledwater individually, dried withabsorbent paper and weight on ananalytical balance (Advance Lab-Vene-zuela, MY model). To avoid over-estimations by the presence of intesti-nal content, before weighting and afterfractioning the intestine into foursegments of 12 cm eachapproximately, this part of thegastrointestinal tract was washedexhaustively with distilled water untilthe total evacuation of the content.

The volume of each organ wasestimated after the individualweighting using the difference in thevolume before and after totallysubmerging each organ in gradedcylinders of variable capacity (15, 25and 50 mL). Prior fractioning of parts,the longitude of the intestine wasmeasured extending the intestinal

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García et al.

568

parte del tracto gastrointestinal fuelavada exhaustivamente con agua des-tilada hasta la evacuación total de sucontenido.

El volumen de cada órgano seestimó después del pesaje individualmediante la diferencia en el volumenantes y después de sumergir totalmen-te cada órgano en cilindros graduadosde capacidad variable (15, 25 y 50 mL).Previo fraccionamiento en partes, lalongitud del intestino se midió estiran-do totalmente el tracto intestinal so-bre una regla graduada de 60 cm.

Diseño experimental y aná-lisis estadístico

Se empleó un diseño totalmentealeatorizado, en el cual las dietas eva-luadas constituyeron los tratamientos(D0, D1, D2, D3, D4 y D5). Cada jaulafue considerada como una unidad ex-perimental mientras que cada animalse consideró una unidad de observa-ción. La información fue procesadamediante el paquete estadístico SPSSversión 10.0 para Windows® (Visauta,1998). Para comparar los tratamien-tos en función de las variables medi-das se empleó la prueba de compara-ción de SNK (Student-Newman-Keuls)para un 5% de probabilidad.

Resultados y discusión

Al culminar el experimento loshámster tuvieron un pesos final quevarió en función de cada dieta (D0:99,0±4,5; D1: 113±6,7; D2: 95±4,4; D3:77±2,8; D5: 122±4,3 g) (García et al.,2012a). Los animales alimentados conla dieta 4 (D4) se excluyeron del ensa-yo a los 9 días de su inicio, debido aque exhibieron signos de intoxicación;razón por la cual presentaron un peso

tract on a graded ruler of 60 cm.Experimental design and

statistical analysisA completely randomized design

was employed, in which the evaluateddiets constituted the treatments (D0,D1, D2, D3, D4 and D5). Each cage wasconsidered as an experimental unitwhile each animal was considered asan observation unit. The informationwas processed using the statistical pac-kage SPSS 10.0 for Windows®

(Visauta, 1998). To compare thetreatments according to the variablesmeasured, was employed the SNKcomparition test with a 5% ofprobability was used.

Results and discussion

At the end of the experimenthamsters had a final weight that variedin function of each diet (D0: 99.0±4.5;D1: 113±6.7; D2: 95±4.4; D3: 77±2.8; D5:122±4.3 g) (García et al., 2012a).Animals fed with diet 4 (D4) wereexcluded from the essay at day 9, sincethey presented detoxification signs,reason for which presented a conside-rable inferior weight than the rest ofthe experimental groups (64±0.8 g).

Significant differences wereobserved in the weight of both kidneysin hamsters fed D2, D3 and D5compared to D0 and D1 (P<0.05), whilethe heart’s weight did not vary amongtreatments (P>0.05). In figure 1 isshown the heart and kidneys weightat the end of the essay according tothe diet.

Animals of group D4, which wereslaughtered on day nine of theexperiment, had a heart’s weight of100.32±3.5 mg; while the right and left

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considerablemente inferior al resto delos grupos experimentales (64±0,8 g).

Se observaron diferencias signifi-cativas en el peso de ambos riñones enlos hámsters alimentados con D2, D3 yD5, comparados con D0 y D1 (P<0,05).Mientras que el peso del corazón novarió entre tratamientos (P>0,05). Enla figura 1 se muestra el peso del cora-zón y de los riñones al finalizar el ensa-yo de acuerdo a la dieta.

Los animales del grupo D4, quefueron sacrificados el día 9 del experi-mento, tuvieron un peso del corazónde 100,32±3,5 mg; mientras que losriñones derecho e izquierdo pesaron315,24±22,2 y 309,29±17,6 mg respec-tivamente. Los pesos de los riñones eneste grupo fueron comparables con losque tuvieron los animales alimentados

Figura 1. Peso final del corazón y riñones de hámster alimentados condietas a base de harina de Eisenia spp. y fuentesconvencionales. Medias con diferentes letras (a,b) indicandiferencias significativas (P<0,05).

Figure 1. Final weight of the heart and kidneys of hamsters fed withdiets based on Eisenia spp. flour and conventional sources.Means with different letters (a, b) indicate significantdifferences (P<0.05).

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Peso

(mg)

Corazón Riñón derecho Riñón izquierdo

kidneys weighted 315.24±22.2 and309.29±17.6 mg respectively. Thekidney weights in D4 animals werecompared to those from the other ex-perimental diets. Kidneys of animalssubmitted to D4 were inflamed, with aporous texture and dark-yellow color.This looked different than the kidneysfrom the other treatments, which hada pale-yellow color, typical of thehealthy organs of this specie.

Weight percentages (rank) forright and left kidneys respect to thealive weight of animals were thefollowing: D0: 3.33-3.54; D1: 3.36-3.38;D2: 4.74-4.84; D3: 5.78-5.84 and D5:3.69-3.75%; while for D4 was of 4.83-4.93%, 12 days before the experimentfinishes. As seen on figure 2, therewere significant differences in the

García et al.

570

con las demás dietas experimentales.Los riñones de los animales sometidosa D4 se encontraban inflamados, teníanuna textura porosa y un color amari-llo oscuro diferente a la tonalidad ob-servada en los riñones examinados deotros tratamientos, los cuales presen-taron coloración amarillo pálido, típi-ca de este órgano en la especie.

Los porcentajes (rango) del pesopara los riñones derecho e izquierdorespecto al peso vivo de los animalesfueron los siguientes: D0: 3,33-3,54; D1:3,36-3,38; D2: 4,74-4,84; D3: 5,78-5,84y D5: 3,69-3,75%; mientras que paraD4 fue de 4,83-4,93%, 12 días antes definalizado el experimento.

Como se aprecia en la figura 2,se encontraron diferencias significati-vas en el peso del hígado y del intesti-no delgado + intestino grueso entre los

bbaa

b

b

c

ba

c

0

5

10

15

D0 D1 D2 D3 D5

Dieta

Peso

(g)

Hígado Intestino grueso + intestino delgado

Figura 2. Peso final del hígado e intestino de hámsters alimentadoscon dietas a base de harina de Eisenia spp. y fuentesconvencionales. Medias con diferentes letras (a,b,c) indicandiferencias significativas (P<0,05).

Figure 2. Final weight of the liver and intestine of hamsters fed withdiets based on Eisenia spp. Flour and conventional sources.Means with different letters (a, b, c) indicate significantdifferences (P<0.05).

weight of the liver and small intestine+ large intestine between the animalsfed with different diets.

Animals treated with D1 and D5had a weightier liver (P<0.05) thanthose correspondent to D0, D2 and D3which livers had a statistical similarweight. Hamsters fed with D4 had aliver with 7.18±1.2 g whenslaughtered, weight which wasconsidered superior to the one observedin the rest of the animals at the end ofthe experiment (average: 3.34±0.4 g).In animals fed with D4, this organ wasinflamed, rigid and had an abnormaldark coloring, compare to the classiccolor (dark yellow) exhibited in theliver of animals with the rest of thetreatments. Even when livers ofhamsters submitted to D1 and D5 hada bigger size, coloring was similar to

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animales alimentados con las diferen-tes dietas. Los animales tratados conD1 y D5 tuvieron un hígado más pesa-do (P<0,05) que los correspondientes aD0, D2 y D3, cuyos hígados tuvieron unpeso estadísticamente similar. Loshámsters alimentados con D4 presen-taron 7,18±1,2 g como peso del hígadoal momento del sacrificio, peso que fueconsiderablemente superior al obser-vado en el resto de los animales al fi-nal del experimento (promedio:3,34±0,4 g). En los animales alimen-tados con D4, este órgano estaba infla-mado, endurecido y exhibía una colo-ración anormalmente oscura, compa-rado con el color clásico (amarillo opa-co) que exhibió el hígado en los anima-les de los demás tratamientos. Aúncuando los hígados de los hámsterssometidos a D1 y D5 fueron de mayortamaño, la coloración fue similar a losobtenidos de los animales alimentadoscon D0, D2 y D3. La relación porcen-tual entre el hígado y el peso corporalfue similar entre tratamientos (D0:3,23±0,1; D1: 4,51±0,2; D2: 3,89±0,1;D3: 4,87±0,3; D5: 4,42±0,1%), con laexcepción de la dieta D4, cuyo valor fueconsiderablemente superior al resto delos grupos experimentales.

Los hámsters alimentados con D3exhibieron un peso mayor del intesti-no vacío (P<0,05), mientras que los queconsumieron D1 y D5 tuvieron el pesomenor; los animales alimentados conD0 y D2 exhibieron valores intermedios.Los hámsters del tratamiento D4, quefueron retirados antes de finalizado elensayo como se indicó anteriormente,exhibieron un peso del intestino de13,25±1,1 g, valor similar al peso pro-medio de D2 y D3 (11,1 g) al término delensayo. Este órgano se encontraba in-

those obtained in animals fed with D0,D2 and D3. The percentage relationbetween the liver and the corporalweight was similar betweentreatments (D0: 3.23±0.1; D1: 4.51±0.2;D2: 3.89±0.1; D3: 4.87±0.3; D5:4.42±0.1%), excepting the diet D4,which value was considerable superiorto the rest of the experimental groups.

Hamsters fed with D3 exhibiteda higher weight of the empty intestine(P<0.05), while those that consumedD1 and D5 had the lowest weight;animals fed with D0 and D2 exhibitedintermediate values. Hamsters oftreatment D4 which were retired beforeending the essay, as previouslyindicated, exhibited an intestine weightof 13.25± 1.1 g, similar value of theaverage weight of D2 and D3 (11.1 g) atthe end of the essay. This organ wasinflamed, necrose and abnormallyturgid to the tack, product to theirritation. Regarding the percentage ofthe intestine according to the aliveweight, was observed an increment ofvalues at the time that increased theinclusion of HL in the diet (D1:4.42±0.2; D2: 10.31±0.2; D3: 16.10±0.1;D4: 20.63±0.3%), while in D5 the valueswere inferior (5.16±0.1%) and in D0intermediate (10.00±0.3%). Nonesignificant differences were observedin the volume of the heart and in bothkidneys of animals fed with experi-mental diets (figure 3).

Hamsters submitted to D2, D3 andD5 had a higher volume of the liver,while those fed with D1 presented anintermediate value and significantlylower to D0. Slaughtered animals 12days before ending the researchexhibited a volume of the heart, leftand right kidney and liver of 0.25±0.03;

García et al.

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flamado, necrosado y anormalmenteturgente al tacto, producto de la irri-tación. En cuanto al porcentaje del in-testino según el peso vivo, se observóun aumento de los valores conformese incrementó la inclusión de HL enla dieta (D1: 4,42±0,2; D2: 10,31±0,2;D3: 16,10±0,1; D4: 20,63±0,3%), mien-tras que en D5 los valores fueron infe-riores (5,16±0,1%) y en D0 intermedios(10,00±0,3%). No se observaron dife-rencias significativas en el volumen delcorazón y de ambos riñones en los ani-males alimentados con las dietas ex-perimentales (figura 3).

Los hámsters sometidos a D2, D3y D5 tuvieron un mayor volumen delhígado, mientras que los alimentadoscon D1 presentaron un valor interme-

Figura 3. Volumen final de órganos de hámsters alimentados con dietasa base de harina de Eisenia spp. y fuentes convencionales.Medias con diferentes letras (a,b,c) indican diferenciassignificativas a (P<0,05).

Figure 3. Final volume of organs of hamsters fed with diets based onEisenia spp. flour and conventional sources. Means withdifferent letters (a, b, c) indicate significant differences(P<0.05).

cb

a aab

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

D0 D1 D2 D3 D5

Dieta

Volu

men

(cen

tímet

ros

cúbi

cos)

Riñón derecho Riñón izquierdo Corazón Hígado

0.23±0.02; 0.25±0.03 and 2.17±0.2 cm3,respectively. Likewise, the liver’svolume was superior and the kidneys’volume was similar to the rest of theanimals that had finished the test(right kidney: 0.30±0.02; right kidney:0.31±0.02 and liver: 1.79±0.3 cm3).

In relation to the volume andlongitude of the intestine, wereobserved significant differences in fa-vor of animals that consumed D2 andD3 (figure 4). The consumption of thediet D0 determined the lowest intesti-nal longitude, while the animals fedwith D0, D1 and D5 showed a statisticalsimilar variable.

Animals slaughtered 9 days afterinitiated the research (D4) presented avolume and intestinal longitude of

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dio y significativamente menor a D0.Los animales sacrificados 12 días an-tes de terminarse el ensayo exhibieronun volumen de corazón, riñón izquier-do y derecho e hígado de 0,25±0,03;0,23±0,02; 0,25±0,03 y 2,17±0,2 cm3,respectivamente. Asimismo, el volu-men de hígado fue superior y el de losriñones similar al del resto de los ani-males que finalizaron la prueba (riñónderecho: 0,30±0,02; riñón derecho:0,31±0,02 e hígado: 1,79±0,3 cm3).

En relación al volumen y longi-tud del intestino se observaron diferen-cias significativas a favor de los ani-males que consumieron D2 y D3 (figu-ra 4). El consumo de la dieta D0 deter-minó la menor longitud intestinal;mientras que en los animales alimen-

Figura 4. Volumen y longitud final del intestino de hámstersalimentados con dietas a base de harina de Eisenia spp. yfuentes convencionales. Medias con diferentes letras (a,b,c)indican diferencias significativas (P<0,05).

Figure 4. Volume and final longitude of the intestine of hamsters fedwith diets based on Eisenia spp. flour and conventionalsources. Means with different letters (a, b, c) indicatesignificant differences (P<0.05).

bb

a a

b

a ab

bc

0

4

8

12

16

20

24

D0 D1 D2 D3 D5

Dieta

Volu

men

(cen

tímet

ros

cúbi

cos)

0

10

20

30

40

50

60

Long

itud

(cm

)

Volumen Longitud

14.5±0.2cm3 and 49.0±0.3 cmrespectively. These values were supe-rior to the average observed for D0, D1and D5 (volume: 13.3±0.4cm3 andlength: 39.81±0.2cm) at the end of theessay.

The fact that the heart’s weightdid not vary among treatments isexplained because this organ is notdirectly influenced by the nutrition ofanimals, by being part of other organicsystem. In relation to these, thesubstantial increments of the heartwere only obtained by significantincrements of the corporal condition inanimals with higher metabolic weight(De Vries, 1996), considering that thehamster is small, the changes relatedto positive corporal responses are

García et al.

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tados con D0, D1 y D5 esta variable fueestadísticamente similar.

Los animales sacrificados a los 9días de iniciarse el estudio (D4) presen-taron un volumen y una longitud intes-tinal de 14,5±0,2 cm3 y 49,0±0,3 cm res-pectivamente. Estos valores fueron su-periores al promedio observado para D0,D1 y D5 (volumen: 13,3±0,4 cm3 y largo:39,81±0,2 cm) al final del ensayo.

El hecho de que el peso del co-razón no haya variado entre trata-mientos se explica porque este órga-no no esta influenciado directamen-te por la nutrición de los animales,por formar parte de otro sistema or-gánico. En relación a esto, los au-mentos sustanciales del corazón sólose obtienen por incrementos signifi-cativos de la condición corporal enanimales de mayor peso metabólico(De Vries, 1996); considerando que elhámster es pequeño, los cambios aso-ciados a respuestas corporales posi-tivas son discretos, comparado conotras especies de mayor tamaño, enlas cuales las variaciones de la con-dición corporal influyensignificativamente en el porcentajerelativo de algunos órganos importan-tes. Sin embargo, el peso mayor delos riñones en hamsters alimentadoscon las dietas en las que se incorporóla HL, con la excepción de D1, indicala posibilidad de un mayor esfuerzofisiológico del órgano para excretarlos metabolitos liberados durante ladegradación de las proteínas dietéti-cas, de acuerdo a la proporción de HLen la ración. Alteraciones morfo ycitoestructurales similares se haninformado en otros animales que fue-ron alimentados con dietas que con-tenían aminas biogénicas (Buxbaumg

discrete, compared to other species ofhigher size, where the variations of thecorporal condition significantlyinfluence in the relative percentage ofsome important organs. However, thehighest weight of kidneys in hamstersfed with diets where was used HL,excepting D1, indicates the possibilityof a higher physiological effort of theorgan to excrete the liberatedmetabolites during the degradation ofdietetic proteins, according to theproportion of HL in the ration. Simi-lar morpho-cyto structural alterationshave been reported in other animalsthat were fed with diets with biogenicamines (Buxbaumg et al., 1973;Hellström and Koslow, 1975; Fusi etal., 2004; Smith et al., 2009).

Animals fed with D5, diet that didnot have HL, presented a similar re-nal weight than animals submitted toD2 and D3. This is explained by the factthat the hamsters that ate Ratarina®presented a corporal condition that wassignificantly superior to the rest of thegroups, while the lower weight ofkidneys in animals fed with D0 mightbe associated to the discrete nutritionalvalue of Conejarina®, consequently, toa lower corporal development of theanimal. On this matter, it is wellknown that the quality on thealimentation drastically influences inthe corporal condition, and theincrement in the weight of theseorgans occurs at the same time to thecorporal development of the animal(Robinson and Wilber, 1961; 2005García et al., 2005; Cova et al., 2006).

The kidney is the organ in chargeof purifying the blood, eliminating themetabolic wastes and the excess ofwater. The wastes in the blood are

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et al., 1973; Hellström y Koslow,1975; Fusi et al., 2004; Smith et al.,2009).

Los animales alimentados con D5,dieta que no contenía HL, exhibieronun peso renal similar al de los anima-les sometidos a D2 y D3. Esto se expli-ca por el hecho de que los hámstersque consumieron Ratarina® presenta-ron una condición corporalsignificativamente superior al resto delos grupos; mientras que el peso me-nor de los riñones en los animales ali-mentados con D0 quizás se encuentreasociado al discreto valor nutricionalde la Conejarina®, y consecuentemen-te a un menor desarrollo corporal delanimal. Al respecto, es conocido que lacalidad de la alimentación influyedrásticamente en la condición corpo-ral, y el aumento de peso de estos ór-ganos ocurre de forma paralela al de-sarrollo corporal del animal (Robinsony Wilber, 1961; 2005 García et al.,2005; Cova et al., 2006).

El riñón es el órgano encargadode purificar la sangre mediante la eli-minación de desechos metabólicos y delexceso de agua. Los desechos en la san-gre se forman por la descomposiciónnormal de los tejidos activos y de losalimentos consumidos; por tal razóncuando las dietas son más complejas yabundantes en componentes, este ór-gano realiza un mayor esfuerzo fisio-lógico. En este proceso se produce uncomplicado intercambio de sustanciasquímicas a medida que los desechos yel agua salen de la sangre y entran alsistema urinario. Al principio, lostúbulos reciben una mezcla de molé-culas de desecho y sustancias de de-gradación intermedia que el organis-mo todavía puede usar. Los riñones

formed by the normal decompositionof the active tissues and the foodconsumed; for such reason, when thediets are more complex and abundantin components; this organ performs ahigher physiological effort. In thisprocess, is produced a complicatedinterchange of chemical substances atthe time that wastes and the water goout from the blood and enter into theurinary system. At the beginning,tubules receive a mix of wastemolecules and intermediatedegradation substances that theorganisms can still use. Kidneysmeasure the recycling feasibility ofthese compounds, and in function tothe compatibility degree of thepotentially usable substrates and themetabolic routes of recirculation, canoccur renal deficiency and incrementof the organ’s weight for retention ofliquids and undesirable metabolites,aspects that was corroborated by theappearance and post mortemconsistency of this organ in animalsfed with diets that had HL, speciallywith D4 where the effect was moreevident.

At the end of the essay, theproportion of the kidney’s weight to thecorporal weight in almost alltreatments (D0, D1, D2 and D5) agreedto the published by Hasdai and Liener(1983) for the specie (3.40%). However,the values obtained with D3 (5.78-5.84%) at the end of the experimentand with D4 (4.83-4.93%) at themoment of the anticipated slaughter,were considerable higher than the onesobtained for the mentioned authors.

On the other hand, the highestweight of the liver in hamsterssubmitted to D1 and D5 might be

García et al.

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miden la factibilidad de reciclaje deestos compuestos, y en función del gra-do de compatibilidad de los sustratospotencialmente aprovechables y lasrutas metabólicas de recirculación,puede ocurrir deficiencia renal y au-mento de peso del órgano por la reten-ción de líquidos y metabolitos indesea-bles; aspecto que se corroboró por laapariencia y consistencia post mortemde este órgano en los animales alimen-tados con las dietas que contenían HL,sobretodo con D4 donde el efecto fue másevidente.

Al final del ensayo, la proporcióndel peso del riñón respecto al peso corpo-ral, en casi todos los tratamientos quellegaron a término (D0, D1, D2 y D5), co-incidió con lo informado por Hasdai yLiener (1983) para la especie (3,40%).Sin embargo, los valores obtenidos conD3 (5,78-5,84%) al final del experimen-to, y con D4 (4,83-4,93%) al momento delsacrificio anticipado de los animales,fueron considerablemente más altos quelos obtenidos por dichos autores.

Por otra parte, el peso mayor delhígado en los hamsters sometidos a D1y D5 podría atribuirse a que estos ani-males ganaron más peso, y como con-secuencia este órgano se encontrabamás desarrollado; aspecto corroboradocon la proporción del peso del hígadocon respecto al peso corporal, que de-mostró que el porcentaje del hígadopara este tratamiento se encontrabadentro del rango normal (<5,0%) y acor-de a la condición corporal estándar delM. auratus (Carr et al., 1996). Por otraparte, el peso elevado del hígado y suapariencia macroscópica en los anima-les alimentados con D4 indica una in-flamación severa y colapso tisular,quizás asociado con problemas hepáti-

attributed to the consequence thatthese animals gained more weight,therefore, this organ was moredeveloped; aspect corroborated by theproportion of the liver’s weight inrelation to the corporal weight, whatshowed that the liver’s percentage forthis treatment was on the normal rank(<5.0%) and according to the standardcorporal condition of M. auratus (Carret al., 1996). On the other side, theelevate weigh of the liver and itsmacroscopic appearance in animals fedwith D4 shows a severe inflammationand tisular collapse, maybe related tohepatic problems due to the nature ofthe diet which had the highestproportion of HL (30%). These findingsagree to the fact that these animalshad serum concentrations high inurea, uric acid and enzymes (Garcíaet al., 2012b), and consumed higherquantities of water at the time thatreduced their weight at a reason of 1.5gf/day (García et al., 2012a) during thefirst 9 days of the experiment, momentwhere were removed from the essay.Likewise, hamsters fed with diets thathad 24 or 27% of HL had some alteredhematological values. For example, theleucocytes, platelets, neutrophils andglycemia were inferior and thelymphocytes superior in animals fedwith D2 and D3, with a marked stressindex (determined using the coefficientamong the neutrophils andlymphocytes) in these animals ratherthan in those fed with a 21% diet ofHL (D1) or Ratarina (D5) (Cova et al.,2011).

Among other functions, the liverregulates the blood levels of most of thechemical compound and excretes thebile, which helps eliminating the

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cos debido a la naturaleza de la dietaque contuvo la mayor proporción de HL(30%). Estos hallazgos concuerdan conel hecho de que estos animales tuvie-ron concentraciones séricas altas deurea, ácido úrico y transaminasas(García et al., 2012b), y consumieronmayor cantidad de agua a la vez quedisminuyeron su peso a razón de 1.5gr/día (García et al., 2012a) durantelos primeros 9 días del experimento,momento en que fueron removidos delensayo. Asimismo, los hámsters ali-mentados con dietas que contenían 24o 27% de HL tuvieron algunos valoreshematológicos alterados. Por ejemplo,los leucocitos, plaquetas, neutrófilos yglicemia fueron inferiores y loslinfocitos superiores en los animalesalimentados con D2 y D3, resultandoun índice de estrés (determinado me-diante el cociente entre los neutrófilosy los linfocitos) más acentuado en es-tos animales que en los que consumie-ron una dieta con 21% de HL (D1) oRatarina (D5) (Cova et al., 2011).

Entre otras funciones, el hígadoregula los niveles sanguíneos de lamayoría de los compuestos químicos yexcreta la bilis, que ayuda a eliminarlos productos de desecho y las substan-cias tóxicas biotransformadas. Toda lasangre proveniente del estómago y losintestinos pasa a través del hígado, elcual procesa y descompone losnutrientes en formas más fáciles deusar por el resto de los tejidos del cuer-po, regulando de esta manera la pro-ducción de metabolitos nitrogenados(como los aminoácidos, proteínas, amo-níaco y urea), el colesterol, el excesode glucosa, los factores de inmunidaddel plasma sanguíneo y las sustanciastóxicas ingeridas en la dieta. Cuando

wastes products and bio-transformedtoxic substances. All the blood comingfrom the stomach and intestines goesthrough the liver, which processes anddecomposes the nutrients in an easierways to be used for the rests of thebody’s tissues, thus, regulating theproduction of nitrogen metabolites(such as amino acids, proteins,ammonia and urea), cholesterol, excessof glucose, immune factors of the bloodplasma and toxic substancesconsumed in the diet. When the liverreleases toxic substances, the sub-products are excreted to the bile or theblood. The bile sub-products enter tothe organisms and are finallyeliminated through the stools, while,the blood sub-products are filtered bythe kidneys and excreted by the urine(Dietschy et al., 1993). For suchreasons, the hepatic inflammationevidenced by the weight, the externalaspect and the proportion of this organin relation to the alive weight, mightbe attributed to the elevatedconcentration of toxics compoundsderived from the metabolisms ofproteins to toxic substances presentedin higher quantity in D4 and/or to thehigher production of enzymesnecessary to degrade an elevatedquantity of nitrogen substrates (DeVries, 1996; García et al., 2012b).

On this matter, the differentappearance in both the kidneys and theliver in animals fed with D3 and D4, aswell as the higher percentage of theweight in both organs in function ofthe alive weight; indicate the presenceof a chronic toxic situation probablycaused by biogenic levels (Rees andWatson, 2000; Fusi et al., 2004). Thispathological condition would explain

García et al.

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el hígado degrada sustancias nocivas,los subproductos se excretan hacia labilis o la sangre. Los subproductosbiliares entran en el intestino y final-mente se eliminan en forma de heces,mientras que los subproductos sanguí-neos son filtrados por los riñones y seexcretan en la orina (Dietschy et al.,1993). Por tales motivos, la inflama-ción hepática evidenciada por el peso,el aspecto externo y la proporción deeste órgano con respecto al peso vivo,quizás pueda atribuirse a la elevadaconcentración de compuestos nocivosderivados del metabolismo de las pro-teínas, a sustancias tóxicas presentesen mayor cuantía en D4, y/o a la ma-yor producción de enzimas necesariaspara degradar una cantidad elevada desustratos nitrogenados (De Vries, 1996;García et al., 2012b).

Al respecto, la apariencia dife-rente tanto de los riñones e hígado enlos animales alimentados con D3 y D4,así como el mayor porcentaje del pesode ambos órganos en función del pesovivo, son indicativos indiscutibles dela presencia de un cuadro tóxico agu-do causado probablemente por animasbiogénicas (Rees y Watson, 2000; Fusiet al., 2004). Esta condición patológicaexplicaría la reducción dramática delconsumo de materia seca y del creci-miento de los animales del grupo D4durante los primeros 9 días del ensayo(García et al., 2012a).

Estos compuestos producidos porla degradación inducida o espontáneade altos contenidos de proteínas en elalimento se reconocen comometabolitos extremadamente perjudi-ciales por su efecto antinutricional po-tencial para la alimentación animal yhumana (Cova et al., 2006). En ani-

the dramatic reduction of theconsumption of dry matter and thegrowth of animals belonging to groupD4 during the first 9 days of the essay(García et al., 2012a).

These compounds produced bythe induced or spontaneousdegradation of high protein contentsin the food are known as extremelyharmful metabolites by their potentialanti-nutritional effect for the animaland human consumption (Cova et al.,2006). In laboratory animals fed withdiets that had biogenic compounds havebeen observed variable clinicalsymptoms in function to the metabolicprofile, histopathological changes inorgans related to the circulation andexcretion, as well as other diseases(Buxbaumg et al., 1973; Hellström andKoslow, 1975).

These metabolites produce low-blood-pressure and high-blood-pressure,as most important symptoms (in thecase of tyramine). On the other side,cadaverine and putrescine potentiatethe toxic effects of histamine; also,putrecine can produce carcinogenicnitrosamines. It has been establishedthat these four can cause intoxicationif eaten in elevated quantities; from 50to 200 mg.kg-1 of alive weight it produ-ces toxic effects, while in concentrationssuperior to 1 g.kg-1 of PV may resultmortal (Izquierdo et al., 2006). Theimpossibility of quantifying thesemetabolites in the current researchprovokes that the abnormalities cau-ses observed in kidneys, liver andintestines of animals fed with highcontents of HL are discussed consideringdifferent points of view.

It is well known that during theobtaining process of HL occur

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males de laboratorio alimentados condietas que contenían aminasbiogénicas se han observado síntomasclínicos variables en función del perfilmetabólico, cambios histopatológicosen órganos relacionados con la circu-lación y la excreción, así como enfer-medades coadyuvantes (Buxbaumg etal., 1973; Hellström y Koslow, 1975).

Estos metabolitos provocanhipotensión e hipertensión como sín-tomas más importantes (en el caso dela tiramina). Por su parte, lacadaverina y la putrescina potencianlos efectos tóxicos de la histamina, yademás, la putrescina puede producirnitrosaminas carcinogénicas. Se haestablecido que estas cuatro aminaspueden causar intoxicación si se ingie-ren en cantidades elevadas; entre 50 y200 mg.kg-1 de peso vivo produce efec-tos tóxicos, mientras que a concentra-ciones superiores a 1 g.kg-1 de PV pue-den resultar mortales (Izquierdo et al.,2006). La imposibilidad de cuantificarestos metabolitos en la presente inves-tigación hace que las causas de lasanomalías observadas en los riñones,hígado e intestino de los animales ali-mentados con altos contenidos de HLsean discutidas considerando diferen-tes puntos de vista.

Es conocido que durante el pro-ceso de obtención de la HL ocurrenprocesos de degradación que puedenafectar el valor nutricional de estafuente alimenticia (Cova et al., 2009).Eso quizás se deba a la elevada cargabacteriana que tiene la HL cuando noes sometida a un tratamiento previo;o debido a reacciones ocurridas a par-tir de compuestos presentes en el ané-lido desde el momento de su sacrificio.Además, se han obtenido resultados

degradation processes that mightaffect the nutritional value of this foodsource (Cova et al., 2009). This mightbe due to the high bacteria numberthat HL has when is submitted to aprevious treatment, or maybe toreactions occurred after compoundspresent in the annelid from theirsacrifice. Also, there are favorableresults in other non ruminant specieswhere was used HL as partialsubstitutes of diets (Díaz et al., 2009),which could be related to theparticularities of the digestive specieof each species, the detoxificationmechanisms and the obtaining andstoring way of HL. This aspectconstitutes an element to be consideredin future researches, where should beevaluated the profile of biogenicsubstances in HL and their directinfluence in animals.

The few volume fluctuations ofthe heart and kidneys are justified bythe reduced size of these organs andtheir low proportion to the corporalweight of these animals. Nevertheless,maybe the highest volume of the liverin hamsters fed with D5 is related tothe best corporal condition that theseanimals presented, that gained moreweight than the rest of the treatments.

In relation to the intestine, it iswell known that the size (weight andvolume) of this organ in rodents mightvary in function to the chemical andphysical composition of the diets(Nowak et al., 1990). Occasionally, thebad quality of food, in terms of essentialnutriments, is related to intestinalhypotrophy conditioned by aninefficient absorption of nutrimentsand low multiplication of intestinalcells; aspect statistically proved by the

García et al.

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favorables en otras especies no rumian-tes en las que se utilizó la HL comosustituto parcial de las dietas (Díaz etal., 2009), lo cual pudiera relacionarsecon las particularidades del sistemadigestivo de cada especie, los mecanis-mos de detoxificación y la forma deobtención y almacenamiento de la HL.Este aspecto constituye un elemento aconsiderar en investigaciones futurasen la cual se debe evaluar el perfil delas aminas biogénicas en la HL y suinfluencia directa en los animales.

Las pocas fluctuaciones del volu-men del corazón y los riñones se justi-fican por el tamaño reducido de estosórganos y su baja proporción con elpeso corporal de los animales. No obs-tante, quizás el volumen mayor delhígado de los hamsters alimentadoscon D5 esté relacionado con la mejorcondición corporal que presentaronestos animales, que ganaron más pesoque en el resto de los tratamientos.

Con relación al intestino, es cono-cido que la talla (peso y volumen) de esteórgano en los roedores puede variar enfunción de la composición química y fí-sica de las dietas (Nowak et al., 1990).En ocasiones, la mala calidad de los ali-mentos, en términos de nutrimentosesenciales, se asocia con hipotrofias in-testinales condicionadas por unaineficiente absorción de nutrimentos ybaja multiplicación de células intestina-les; aspecto quizás relacionado con lamenor longitud del intestino en los ani-males alimentados con D0. Asimismo,se ha demostrado en roedores que algu-nas dietas con un elevado contenido defibra provocan mayor viscosidad del con-tenido gastrointestinal, que trae comoconsecuencia una proliferación acelera-da de tejido intestinal con cambios en el

lowed longitude of the intestine inanimals fed with D0. Likewise, it hasbeen proved in rodents that some dietswith an elevate fiber content causehigher viscosity of the gastro-intesti-nal content, consequently, causing anaccelerate proliferation of the intesti-nal tissue with growth changes ofspecific parts (Carr et al., 1996).

In non-rodent animals fed withconventional diets, the effects of somecomponents of the food portion wererelated to the increment of thegastrointestinal tract and/or some specificsections of it (Savón et al., 2008).However, in function of the componentsof the diets and the type of the animal,the response can vary depending on theinclusion’s level of the major componentand its pro-nutritional and pro-toxiccharacteristics (De Vries; 1996), also,influence the physical properties of theportions such as the retention capacityof water, the size of the particles and thebulk-stool viscosity (Savón et al., 2008).

The weight variation andintestine volume have been related totwo important factors, first, whereoccurs the highest transformation ofthe major compound of the diet, andsecondly, which fermentation productsare produced.

Even when there were not foundfindings on the HL incidences in themorphometry of the intestine, thefindings of this research indicate anegative effect on these rodents, whenHL is supplied in elevated proportions,making it evident by the its toxic effectby the volume increment of the liverand volume and longitude of theintestine, as well as by its macroscopicmorphological appearance.

In the case of the diets that had a

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crecimiento de partes específicas del mis-mo (Carr et al., 1996).

En animales no rumiantes ali-mentados con dietas convencionales elefecto de algunos componentes de laración alimenticia se asociaron con elaumento del tracto gastrointestinal y/o de algunas secciones específicas delmismo (Savón et al., 2008). Sin em-bargo, en función de los componentesde las dietas y del tipo de animal deprueba, la respuesta puede ser muyvariable dependiendo del nivel de in-clusión del componente mayoritario yde sus características pronutricionalesy protóxicas (De Vries, 1996); tambiéninfluyen las propiedades físicas de laración tales como la capacidad de re-tención de agua, el tamaño de las par-tículas y la viscosidad del bolo fecal(Savón et al., 2008).

La variación del peso y el volu-men del intestino se ha asociado a dosfactores importantes; en primer lugaren qué parte del mismo ocurre la ma-yor transformación del componentemayoritario de la dieta, y en segundotérmino que productos de la fermenta-ción se producen.

Aun cuando no se encontraronantecedentes sobre la influencia de laHL en la morfometría del intestino, loshallazgos de esta investigación indicanun efecto negativo en estos roedores,cuando la HL se suministra en pro-porciones elevadas, haciéndose eviden-te su efecto nocivo por el aumento delvolumen del hígado y del volumen y lalongitud del intestino, así como tam-bién por su apariencia morfológicamacroscópica.

En el caso de las dietas que contu-vieron una proporción creciente de HL,se observó una relación lineal entre el

growing proportion of HL, was observeda lineal relation between the inclusionpercentage of it and the volume andlongitude increment of thegastrointestinal track, as well as theintestine percentage in function of thealive weight. This indicates aparticularly sensitive effect of HL inthese organs, if are considered theasseverations done by De Vries (1996)and Rees and Watson (2000), whoinformed that even 10% of the intesti-nal weight, in relation to the aliveweight, and a longitude from 10 to 12cm of the intestine, represent the valuesaccepted as normal for these animals.

Conclusion

From the experimental diets thatincluded HL, D1 produced the bestresults in corporal terms, which weresimilar to the obtained with Ratarina®.The 21% inclusion of HL in the diet assupplementary protein source wasadequate for these animals and did notcause abnormal variations in theweight of the studied organs, as wellas in the volume and appearance of theheart, kidneys, liver and intestine.

The increment of the absolute andrelative weight of the intestine, the liverand intestine volumeas well as theintestine longitude showed an apparentrelation to the proportion of HL includedon the diets. Nevertheless, theincrement of the liver’s weight wasrelated to the increment of the corporalcondition; while, the increment inkidneys was associated by both the cor-poral condition and the inclusion of HL.

It is suggested to carry outhistopathological researches in theaffected organs and characterizing the

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porcentaje de inclusión de la misma y elincremento del volumen y longitud deltracto gastrointestinal, así como del por-centaje del intestino, en función del pesovivo. Esto indica un efecto particular-mente sensible de la HL en estos órga-nos, si se consideran las aseveracionesrealizadas por De Vries (1996) y Rees yWatson (2000) quienes informaron quehasta 10% de peso intestinal, en rela-ción al peso vivo, y una longitud entre10 y 12 cm del intestino, representanlos valores aceptados como normalespara estos animales.

Conclusiones

De las dietas experimentales queincluyeron HL, D1 produjo los mejoresresultados en términos corporales, quefueron similares a los obtenidos con laRatarina®. La inclusión de 21% de HLen la dieta como fuente proteica suple-mentaria fue adecuada para estos ani-males, y no causó variaciones anóma-las en el peso de los órganos estudia-dos, así como en el volumen y la apa-riencia del corazón, los riñones, el hí-gado y el intestino.

El aumento de peso absoluto yrelativo del intestino, del volumen delhígado e intestino y de la longitud in-testinal mostró una relación aparentecon la proporción de HL incluida enlas dietas. No obstante, el aumento depeso del hígado se relacionó más con elincremento de la condición corporal;mientras que el de los riñones se aso-cio tanto con la condición corporal comocon la inclusión de HL.

Se sugiere realizar estudios dehistopatología en los órganos afectadosy caracterizar el perfil de aminasbiogénicas para identificar el agente

profile of biogenic substances toidentifying the causal agents of themorphometric changes observed.

Acknowledgement

The authors want to expresstheir acknowledge to the Scientific,Humanistic, Technological andArtistic Development Board of Univer-sidad de los Andes (CDCHTA-ULA) bythe financing provided for carrying outthis research (CDCHT-NURR-C-355-04-03-A). Also, they thank the experi-mental and Agriculture ProductionStation "Rafael Rangel" by the supportreceived for obtaining the worm flourused on this research. Also, they thankthe Laboratory of the NationalDepartment of AgriculturalResearches (CENIAP-Maracay) bytheir collaboration in some of theanalytical determinations. TheVivarium of the University Campus"Rafael Rangel" of Trujillo, Venezue-la, specially to Mr. Javier Moncayo, byhis collaboration in the maintenanceof the animals during the experimen-tal period.

End of english version

causal de los cambios morfométricosobservados.

Agradecimientos

Los autores desean expresar suagradecimiento al Consejo de Desarro-llo Científico, Humanístico, Tecnológicoy de las Artes de la Universidad de losAndes (CDCHTA-ULA) por el

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financiamiento otorgado para la reali-zación de esta investigación (CDCHT-NURR-C-355-04-03-A). A la EstaciónExperimental y de Producción Agríco-la «Rafael Rangel» por el apoyo recibi-do para la obtención de la harina delombriz utilizada en el ensayo. Al la-boratorio del Centro Nacional de In-vestigaciones Agropecuarias (CENIAP-Maracay) por su colaboración en algu-nas de las determinaciones analíticas.Al Vivario del Núcleo Universitario«Rafael Rangel» del estado Trujillo,Venezuela, en la persona del Sr. Ja-vier Moncayo, por su colaboración enel mantenimiento de los animales du-rante el periodo experimental.

Literatura citadaBuxbaumg D.M., G. Yarbroughm. and E.

Carter. 1973. Biogenic amines andnarcotic effects. I. Modification ofmorphine-induced analgesia andmotor activity after alteration ofcerebral amine levels. J. Pharmacol.Exp. Ther. 185: 317-327.

Carr T.P., D.D. Gallaher, C.H. Yang and C.A.Hassel. 1996. Increased intestinalcontents viscosity reduces cholesterolabsorption efficiency in hamsters fedhydroxypropyl methylcellulose1’2’3.J. Nutr. 126: 1463-1469.

Cova L.J. y D.E. García. 2006. Evaluación deparámetros nutricionales utilizandoharina de lombriz (Eisenia spp.) enla alimentación de hamster(Mesocricetus auratus L.). JornadaTécnica, Estación Experimental y deProducción Agrícola «Rafael Rangel»(EEPARR)-Instituto Nacional deInvestigaciones Agrícolas (INIA),Trujillo, Venezuela 12 p.

Cova L.J., D.E. García, J.V. Scorza D., M.G.Medina, T. Clavero, F. Perea y D.González. 2009. Efecto de laestrategia de conservación en lacalidad nutritiva de la harina de lalombríz roja (Eisenia spp.) a medianoplazo. Rev. Fac. Agron. (LUZ) 26(1):107-128.

Cova L.J., D.E. García, S. Briceño, J.V. ScorzaD., F. Montilla, M.G. Medina, P.Moratinos, F. Perea y D. González.2011. Parámetros hematológicos ybioquímicos en el hámster dorado(Mesocricetus auratus L.) alimentadocon base en harina de lombriz roja(Eisenia spp.) y fuentesconvencionales. Avances enInvestigación Agropecuaria 15(1): 9-29.

De Jesús R. y Z. Quintero. 2008.Comparación del crecimiento,parámetros reproductivos y dehematología y glicemia en hámsters(Mesocricetus auratus) alojados adiferentes niveles de intensidad deluz. Zootecnia Trop. 26(1): 19-26.

De Vries, J. 1996. Food safety and toxicity.De Vries. J. (Ed.). London, UK. 338pp.

Díaz D., E. Juárez, M. Maffei, O. Morón, L.González y J. Morales. 2009.Alimentación de codornices deengorde (Coturnix coturnixjaponica) a base de harina de lombrizen dos niveles proteicos. AgriculturaAndina 17:3-18.

Dietschy J.M., S.D. Turley and D.K. Spady.1993. Role of liver in the maintenanceof cholesterol and low densitylipoprotein homeostasis in differentanimal species, including humans.Lipid Res. 34: 1637-1659.

Fusi E., L. Rossi, R. Rebucci, F. Cheli, A. DiGiancamillo, C. Domeneghini, L.Pinotti, V. Dell’Orto and A. Baldi.2004. Administration of biogenicamines to Saanen kids: effects ongrowth performance, meat qualityand gut histology. . Small Rum. Res.53(1): 1-7.

García D.E., M.G. Medina, M. Soca y I.L.Montejo. 2005. Toxicidad de lasleguminosas forrajeras en laalimentación de animalesmonogástricos. Pastos y Forrajes 28:279-289.

García D.E., L.J. Cova, A.R. Castro, M.G.Medina y J.R. Palma. 2009. Efecto delsustrato alimenticio en lacomposición química y el valornutritivo de la harina de la lombrizroja (Eisenia spp.). Revista CientíficaFCV-LUZ XIX(1): 55-62.

García et al.

584

García D.E., L.J. Cova, J.V. Scorza, M.E.González, P. Pizzani, M.G. Medina,F. Perea y D. González. 2012a. Efectode dietas proteicas a base de harinade lombriz roja (Eisenia spp.) en elcomportamiento del hámster dorado(Mesocricetus uratus L.). I. Dinámicade peso y digestibilidad. Rev FacAgron LUZ 29: 248-272.

García D.E., L.J. Cova, S. Briseño, J.V.Scorza, J.V., Montilla F, M.G. Medina,F. Perea y D. González. 2012b.Metabolitos nitrogenados en elhámster dorado alimentado a base deharina de lombriz (Eisenia spp.).Arch. Zootec. 61(234): 163-174.

Hellström S. and S.H. Koslow. 1975. Biogenicamines in carotid body of adult andinfant rats-a gas chromatographic-mass spectrometric assay. ActaPhysiol. Scand. 93(4): 540-547.

Home Office. 1989. Code of practice for thehousing and care of animals used inscientific procedure. 2nd ed. HM&O.Londres. 200 pp.

Izquierdo P., M. Allara, A. García, G. Torres,E. Rojas y M.Y. Piñero. 2006. Aminasbiógenas y bacterias en salchichóntipo milano: Efecto del tiempo dealmacenamiento. Rev. Cient. FCV-LUZ XVI(2): 186-194.

Llewellyn G.C., E.A. Floyd, G.D. Hoke,L.B. Weekley and T.D. Kimbrough.1985. Influence of dietary aflatoxin,zinc, and copper on bone size, organweight, and body weight in hamstersand rats. Bull. Environ. Contam.Toxicol. 35(1): 149-156.

Morón-Fuenmayor O.E., D. Diaz, S.Pietrosemoli, R. Barrera, N. Gallardo,J. Peña y M. Leal. 2008. Efecto de lainclusión de harina de lombriz sobreel rendimiento en canal, en cortes ycalidad físico-química de la carne decodorniz (Coturnix coturnixjaponica). Rev. Fac. Agron. (LUZ) 25:674-685.

Nowak T.V., B. Harrington, J.P. Weisbruchand J.H. Kalbfleisch. 1990. Structuraland functional characteristics ofmuscle from diabetic rodent smallintestine. Am. J. Physiol.Gastrointest. Liver Physiol. 258: 690-698.

NRC. 1995. Nutrients Requirements ofLaboratory Animal. Hamster. Fourthrevised edition. National AcademyPress. 138 p.

Rees, N. and D. Watson. 2000. Internationalstandards for food safety. AspenPublishers, Inc. Aspen, Colorado.USA. 256 pp.

Robinson P.F. and C.G. Wilber. 1961. Organ:Body-weight relationships in thehamster. Anat. Rec. 141(1): 31-33.

Savón L., L.M. Mora, L.E. Dihigo, V.Rodriguez, Y. Rodriguez, I. Scull; Y.Hernández y T.E. Ruíz. 2008. EfectoDe la harina de follaje de Tithoniadiversifolia en la morfometría deltracto gastrointestinal de cerdos encrecimiento-ceba. Zootecnia Trop.26(3): 387-390.

Smith M.A., J.L. Greene-Naples, M.A. Lyle,J.C. Iordanou and JN. Felder. 2009.The effects of repeated opioidadministration on locomotor activity:I. Opposing actions of mu and kappareceptors. J. Pharmacol. Exp. Ther.330(2): 468-475.

Visauta B. 1998. Análisis Estadístico con SPSSpara Windows. En Visauta B (Ed)Estadística Multivariante. Mc-Graw-Hill-Interamericana. Madrid, España.200 pp.