7.建设成果和贡献 - 广东茂名农林科技职业学院

7.建设成果和贡献 7.1 广东省第二批高水平专业群建设

7.2 教师获奖情况

序

号

赛项参赛教师级

别

获奖

情况

主办单位

1 2020 年广东省职业院校技

能大赛教学能力比赛

冯凯玲、黄

冰、廖迎新

省

级

三等

奖

广东省教

育厅

2 2021 年广东省职业院校技

能大赛教学能力比赛

李明俊、王

敏、曹嫚嫚、

刘洋洋

省

级

三等

奖

广东省教

育厅

3 2020 第二届全国职业院校大学

生水产技能大赛

陈昆平、欧志

杰、边芳芳

国

家

级

优秀

组织

奖

中国现代

职业教育

集团

4 2020 第六届中国国际“互

联网+”大学生创新创业大赛

广东省分赛

韩锐、刘婧、

李明俊、李华

峰

省

级

铜奖广东省教

育厅

7.3 学生省级以上技能大赛获奖情况

序

号

赛项参赛学生级

别

指导教

师

获奖

情况

主办单位

1 第十届华南兽医杯

兽医技能大赛

谭钊文、

汤贞湛、

冯南鹏

省

级

植婵

萍、李

明俊

二等

奖

广东省畜牧兽

医学会小动物

医学委员会

2 2020 第二届全国职

业院校大学生水产

技能大赛

李丽纯

国

家

级

边芳

芳、欧

志杰

三等

奖

中国现代职业

教育集团



技能大赛

陈俊任国

家

级

陈昆

平、欧

志杰

三等

奖

中国现代职业

教育集团



技能大赛

曹国宣国

家

级

陈昆

平、欧

志杰

三等

奖

中国现代职业

教育集团



技能大赛

曹国宣、

陈俊任

国

家

级

陈昆

平、欧

志杰

团体

三等

奖

中国现代职业

教育集团

6 2020-2021 年度广

东省职业院校学生

专业技能大赛-新城

疫抗体水平测定

谢龙、梁

锦铭

省

级

植婵

萍、吴

祖雄

二等

奖

广东省教育厅

7.4 教师发表教科研论文情况

（1）教改论文：

[1]李明俊, 王敏, 陈亦霖等. 鸭和鱼骨骼标本制作及在教学中的应用[J].中

国畜禽种业, 2020,16(12):41-42.

[2]植婵萍，吴祖雄，黄万世.基于对分课堂的高职《动物药理与毒理》课程信息

化教学的探索与实践[J].兽医导刊，2021,09:254-255.

（2）科研论文：

[1]李明俊, 王敏, 韩锐. 1 例猫下泌尿道疾病的诊治[J]. 养殖与饲料,

2021,20(2):95-98.

[2]欧志杰. 草缸水族造景设计技巧分析[J]. 南方农业, 2020,14(9):147-148.

[3]吴云鹏, 李孝伟, 付云娜等. 鸡羽毛组成及影响鸡羽毛生长的营养因素[J].

广东饲料, 2020,29(2):45-47.

[4]王敏, 李明俊, 曹嫚嫚. 一例犬肠道异物的诊断和治疗[J]. 中国动物保健,

2021,23(5):130, 132.

[5]李明俊 , 王敏 . 一例犬贫血的诊断和治疗 [J]. 中国动物保健 ,

2021,23(4):128, 132.

[6]徐志婷, 孙显月, 滕金言等. 影响母猪断奶至配种间隔的遗传参数估计[J].

华南农业大学学报, 2020,41(2):18-22.

[7]王敏, 李明俊. 猪弓形虫病的流行病学、临床症状及诊断方法概述[J]. 中

国动物保健, 2021,23(04):23-24.

[8]郑红青，植婵萍,等.猪流行性腹泻病毒通过ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ／ＢＣ

Ｌ２Ｌ２轴调控细胞凋亡[J].畜牧兽医学报，2021，52（8）：2233-2243.

[9]王亮亮，王倩倩，植婵萍，等.mcr－1阳性类噬菌体质粒与 F33∶A－∶B－质

粒共整合形成的融合质粒的生物学特性分析[J].江西农业学报，2021,33（04）：

103-107.

7.5 社会服务

内容参与人时间

2019 年茂名市科学技术局

农村科技特派员

李玉丹、曹嫚嫚、付云娜、彭

钟琴、冯凯玲、孙显月、陈昆

平、植婵萍、欧志杰

2019

2021 年茂名市科学技术局

农村科技特派员

周堪伟、吴祖雄、白红英、刘

洋洋、边芳芳

2021

第九届茂名市畜牧兽医学

会理事

冯凯玲 2019

广东省畜牧兽医学会小动

物医学委员会委员

植婵萍 2019

广东省职业院校教学指导

委员会委员

黄万世 2020

广东宠物行业职业教育战

略联盟常务理事

黄万世 2014-2018

第九届茂名市畜牧兽医学

会副理事长

黄万世 2019

下乡进行农业技术推广工

作

李祖文、黄万世、李明俊、欧

志杰、陈昆平、边芳芳、黄

冰、植婵萍、丁晓、邹毅、曹

嫚嫚、周汉柱及动科系学生

2018-2021

7.6 依托实训基地主编或参编国家规划教材三本

（1）国家示范性职业学校畜牧兽医专业精品系列教材《养禽技术》，ISBN:9787109190818

黄万世（主编）；

（2）中等职业教育农业部规划教材《饲料、兽药与畜禽产品营销》，ISBN 9787109201965，

黄万世（主编）；

（3）高职高专“十四五”规划教材《宠物繁育技术》，ISBN 978-7-5639-7892-2，黄

万世、植婵萍（副主编）。

7.1广东省第二批高职院校高水平专业群建设立项名单

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矩形

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矩形

7.2 教师获奖情况

附件

2021 年广东省职业院校技能大赛教学能力比赛拟获奖名单

一、中等职业教育组

（一）公共基础课程组

序号奖项地市院校名称教学团队成员作品名称

1 一等奖省属广东省民政职业技术学校林超、庄楷玲、蔡梓淇、李斯莹服务用语在交通旅游中的运用(I'm delighted

to serve in transportation and tourism)

2 一等奖广州市广州市交通运输职业学校伍海颖、李伟军、列梓玲、孔梓俊厚德载物，自强不息 ——实事求是树理想，辩

证人生促发展

3 一等奖广州市广州市旅游商务职业学校冯静、王丽莎、张谊姝、黄晓珊Learning Chinese Culture Providing Travel

Service 学习中国文化提供旅游服务

4 一等奖深圳市深圳市第一职业技术学校陈丽、宾文心、雷黎、黄泽均云端赏美术百年正风华

5 一等奖深圳市深圳市博伦职业技术学校蔡巧敏、张立峰、萧筠儒、梁璐琪统计初步

6 一等奖佛山市佛山市南海区盐步职业技术

学校林小玲、梁淑仪、毛小珊幸福都是奋斗出来的

7 一等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校杨旻、杜周雅、何绮雯、陆学青春因奋斗而闪光

8 一等奖佛山市佛山市顺德区陈村职业技术陈雪华、利艳兴、何佩仪、龚成品读促写，悟法塑人——“读写共融”小说专


学校题教学

9 一等奖佛山市佛山市顺德区中等专业学校吴慧鹏、何岷晋、梁慧、李立阅山河沧桑，悟人生理想

10 一等奖东莞市东莞市经济贸易学校侯丽艳、伍尚君、龙琼芳、刘晓平 “魅力家乡”全矩阵数字媒体制作与推广

11 一等奖东莞市东莞理工学校李婉婷、卢碧云、黄家炜How to Be an Online Salesperson 如何成为

金牌销售

12 一等奖东莞市东莞理工学校邹锰、阳莉、张金良、黄建威新冠疫情数据可视化

13 一等奖东莞市东莞市电子科技学校罗翠珠、张燕霞、丁旭露、周京莹English Learning Promotes Culture

Exchanges 英语学习赋能文化传播

14 一等奖中山市中山市中等专业学校韩坤、颜红艳、朱赛明扬文化自信，展啦啦风彩

15 一等奖中山市中山市沙溪理工学校任杰、李桂花、赵波、刘永生厚植文化自信，铸梦幸福中国

16 一等奖中山市中山市现代职业技术学校郑碧莹、官冬婷、龙启兰、张宵《幸福生涯拼图——奋斗职业和谐人际》

17 二等奖省属广东省民政职业技术学校龚浩、陈月娥、陈光路健身操——跳动的青春

18 二等奖广州市广州市交通运输职业学校吴旭东、张慧、张媚、吴洁概率与统计初步

19 二等奖广州市广州市建筑工程职业学校郑智娟、何方、莫洁靓、黄田寻岭南之美．品建筑之韵

20 二等奖广州市广州市建筑工程职业学校师洁、罗新玉、梁健超、方良洪赏中华之音，颂曲乐之韵

21 二等奖广州市广州市财经职业学校陈静思、王金辉、蔡曙旸、郑欣Your Medical, Your Travel, No More Trouble

- 智慧会计，医行无忧

22 二等奖广州市广州市荔湾区外语职业高级

中学刘晓玲、张君娜、陈嘉华、梁嘉洪关爱自然，以美育人


23 二等奖深圳市深圳市第一职业技术学校仇淼、叶雯、郭李英、黄艳鉴人物本色，得生花妙笔——小说人物形象探

究

24 二等奖深圳市深圳市第一职业技术学校张玉婷、黄哲君、刘晓宇、黄文茜概率与统计初步

25 二等奖深圳市深圳市第三职业技术学校刘晓芹、温淑雯、刘莉姣做职业道德的践行者

26 二等奖深圳市深圳市第三职业技术学校杜葭、陈艳、付佳颖、周素琴电商新势力青年正当时 Big Time Young

Generation

27 二等奖深圳市深圳市福田区华强职业技术

学校李宇婷、朱成、姚雅迪、杨硕

Journey to the West 讲中国故事，助“漫游”

出海

28 二等奖深圳市深圳市福田区华强职业技术

学校杨亚、陈少燕、蓝歆变“美”的 PPT

29 二等奖深圳市深圳市博伦职业技术学校陈恒、王艺筱、黎建婷、肖娟诗词润匠心，珠玉咏流传

30 二等奖珠海市珠海市第一中等职业学校陈向玲、邱燕群、徐慧洁产品推介，“疫”路前行

31 二等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校冯恩健、许树杰、梁振城、李诗白太极篮球

32 二等奖佛山市佛山市南海区九江职业技术

学校赵凌玲、马友坤、陈旻旋、李敏青认识自我规划未来

33 二等奖佛山市佛山市顺德区郑敬诒职业技

术学校贾慧咏、梁秀峰、周玲、李慧文夯实职业道德之基争做珠宝能工巧匠

34 二等奖佛山市佛山市顺德区陈村职业技术

学校梁颖琦、李玲艳、江爱云、王先梅 Live Stream Sales in English

35 二等奖佛山市佛山市顺德区陈登职业技术

学校胡碧琼、黄静雯、宋晓花、李秋明

扬中国时尚，游中国河山——Promote Chinese

Fashion & Visit Chinese Attractions

36 二等奖佛山市佛山市顺德区龙江职业技术

学校梁飞飞、颜海兰、杨慧 “美美与共”现代诗歌欣赏


37 二等奖佛山市佛山市顺德区龙江职业技术

学校梁惠琼、陈静玲、萧懿文、薛卉茵家展接待英语学习

38 二等奖佛山市佛山市顺德区均安职业技术

学校周永添、吕德元、赖春连、何志成函数（以形助数、函来数往）

39 二等奖东莞市东莞市经济贸易学校叶翠萍、龚雪、邓晓英、陈昕忻《旅近代百年担复兴使命》

40 二等奖东莞市东莞市商业学校刘书林、赖艳菊、袁亮驹、任国珍乘概率统计之风，破数据谜团之浪

41 二等奖东莞市东莞市信息技术学校张竹青、宋晓红、刘家敏、邱雪红品质关怀，快乐成长

42 二等奖东莞市东莞市信息技术学校戴鑫、刘光燊、赖鸿燕、黎法原圆锥曲线

43 二等奖东莞市东莞市轻工业学校萧沛雯、钟彩红、孙先礼、杨斌 English for Hotel Service

44 二等奖东莞市东莞市机电工程学校李薇、李泓、程瑶、张茹萍中国戏中国美

45 二等奖东莞市东莞市电子商贸学校文娟、黄佳丽、廖婉婷、张洁净立足专业，生涯规划与认识自我

46 二等奖中山市中山市现代职业技术学校谌玲、范琴、史岩山、朱璇珑品悟爱国诗传承爱国情

47 二等奖中山市中山市第一职业技术学校彭伯仲、张桂兰、杜明威、林小洁星光灿烂，“笔”定有我

48 二等奖清远市清远工贸职业技术学校苏晓维、汤家利、高原、汤文烨诗歌阅读与欣赏

49 三等奖广州市广州市市政职业学校赵雪洁、蓝曦、刘小钗、黎曙赏析与描绘人物形象

50 三等奖广州市广州市轻工职业学校朱文君、叶桂桃、李莹、欧阳慧细品漫读·美美与共

51 三等奖广州市广州市建筑工程职业学校谢燕明、魏玲、朱文英、霍蓓筠立体几何

52 三等奖广州市广州市财经职业学校宋依琳、程秋霞、鲍静、刘瑞革命定信仰，电商助我行 ——辛亥革命与新民


主主义革命

53 三等奖广州市广州市商贸职业学校黄望菁、蒋月、黄小慧、刘睿琼 “古为今用”话职场，“文言阅读”有乾坤

54 三等奖广州市广州市幼儿师范学校林玮、林玉娜、张文慧以游博闻，以学寻根 -- 英语基础模块 2 第九、

十单元

55 三等奖广州市广州市增城区东方职业技术

学校罗红娴、叶超、吴国芬、唐颖巧推荐妙讲解 Enjoy Pleasant Journey

56 三等奖广州市广州市荔湾区外语职业高级

中学李蓉、郭静仪、徐毓芝、黎耀坚精明秘书巧采购

57 三等奖广州市广州市电子信息学校崔浩华、张艺、朱荣荣、李镘梁走进集合的数学世界

58 三等奖广州市广州市电子信息学校周苑、周家文、赵萌萌、莫子欣中国机，无人敌！ ——无人机使用说明

59 三等奖广州市广州市旅游商务职业学校孙红、高晓飞、谢莉娟、张迪感悟诗情歌意，践行青春使命

60 三等奖广州市广州市旅游商务职业学校陈启和、王雷、邓志强、邓平伦篮球基本技术

61 三等奖广州市广州市番禺区新造职业技术

学校喻滔滔、邓洁文、霍焕崧

What do you think of fashion? 时尚•国风汉

服导购我能行

62 三等奖广州市广州市花都区职业技术学校王彧、胡旋丽、陈艳敏知行合一促发展，顺应规律树理想

63 三等奖深圳市深圳市龙岗区第二职业技术

学校冯宇琳、以慧文、江涛、张靖婧经典小说品三味，丹青妙笔绘初心

64 三等奖深圳市深圳市第一职业技术学校梁名川、武琳、张玲、林汝茵护我家园，从我做起（We have only one earth!）

65 三等奖深圳市深圳市第三职业技术学校沈佼、杜秀珍、刘薇、张雅丽析时代英雄形象扬爱国主义精神

66 三等奖深圳市深圳市第三职业技术学校王杨兵、卢姗姗、李菊梅商务实践中的函数应用


67 三等奖深圳市深圳市第三职业技术学校蒋健美、么禹斐、齐丹丝路精神历史传承

68 三等奖深圳市深圳市福田区华强职业技术

学校陈静敏、沈琳、杨柳华、曾菁菁 “看”见科学之美，“道”出科技自信

69 三等奖深圳市深圳市博伦职业技术学校徐朝阳、潘虹、李彩萍、汪怡群珠宝商贸与玉文化

70 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校刘瑜、邓桂梅、仲东方、乔舒悦英语同行，职等你来 Master English Well,

Pursue Dream Jobs

71 三等奖珠海市珠海市第一中等职业学校周萍萍、刘慧敏、朱大莺、李红梅函数

72 三等奖珠海市珠海市第一中等职业学校何思莹、王宏飞、陈丽娜、林栋超 PPT 实用指南针

73 三等奖汕头市汕头市潮南区职业技术学校郑楚涛、何安妮、许斯智语颂党恩，文绎芳华——人生理想与价值

74 三等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校张晓航、王媛媛、游仲超、周洁芳《多彩的民族歌舞》

75 三等奖佛山市佛山市南海区九江职业技术

学校张君尧、麦毅强、钟小芳、徐咏雄函数的性质及应用


学校潘超武、陈秉升、陈志雄、陈辉鸿少林连环拳

77 三等奖佛山市佛山市顺德区均安职业技术

学校黄琼燕、罗杰华、朱洁玲、张柳红

Season’s Sale & Online Service 季节促销

与网上销售服务

78 三等奖佛山市佛山市华材职业技术学校江泳娇、赵淑妍、周伟 Welcome to China!

79 三等奖河源市河源理工学校徐晓黎、骆渊、李紫灵《用辩证的观点看问题，树立积极的人生态度》

80 三等奖河源市河源理工学校曾宪基、曾永亮、冯贵香、朱依依《以建筑视角开启立体几何之旅》

81 三等奖东莞市东莞市经济贸易学校邓杨柳、钱锡银、苏惠君、李玠《现当代文本阅读与交流》


82 三等奖东莞市东莞理工学校黄玲、陈茜、陈爱珊、王岩品小说之魅，寻人性之美

83 三等奖东莞市东莞理工学校罗易、芮红菊、舒丰聪、袁彩霞三角函数

84 三等奖东莞市东莞市商业学校陈瑞芬、范莉娟、陈漪、陈显科《参与公共生活共担复兴重任》

85 三等奖东莞市东莞市商业学校赵彩云、张美娟、曾花、胡慧敏语文邂逅电商素养跨界绽放

86 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校陈海怡、吴盛君、赵乐、张迪汇聚民族歌舞·弘扬华美情艺

87 三等奖东莞市东莞市轻工业学校万玉琼、肖进军、陈肖玲、方焕璋《品人物形象悟担当精神》

88 三等奖中山市中山市中等专业学校文怡、卢娟、李嘉怡、杨宇晴We have only one earth! 绿色环保学习创新

从我做起

89 三等奖中山市中山市建斌职业技术学校彭晓萍、黄志茹、黄国强、王乐逆境中不屈的灵魂——古诗词鉴赏学习

90 三等奖中山市中山市现代职业技术学校刘霞、李牧虹、张国涵、刁卓《传承红色基因重温经典旋律》

91 三等奖中山市中山市第一职业技术学校闻明、覃嘉霞、刘小丹、罗月英青春起航匠心逐梦

92 三等奖中山市中山市现代职业技术学校刁龙彬、梁容青、韩建鹏《快乐向前冲》跑的基本技术

93 三等奖湛江市广东省湛江卫生学校冯志芳、李春宁、曾瑜婷、吴珊 Hello, change!

94 三等奖茂名市信宜市职业技术学校周天财、周碧丽、赖燕美、杨冬梅品味数列，点亮生活

95 三等奖清远市清远市职业技术学校罗春祥、蔡满容、何敏金、张海萍学辩证思维，走好人生路

96 三等奖清远市清远市职业技术学校刘凯琳、张红梅、王慧、杜学勇家国情怀诗意传情

97 三等奖清远市清远工贸职业技术学校刘国平、乔艳、谌志辉、李嫦图文编辑


98 三等奖清远市英德市职业技术学校郑素文、陈玲、王桂花、刘舒曼《唐诗宋词的风骨气韵》

（二）专业技能课程一组


99 一等奖省属广东省食品药品职业技术学

校袁照、曾丽智、唐婷婷、邓金莹

双手托举新生，呵护母婴健康—妊娠期、分娩

期及产褥期妇女的护理

100 一等奖省属广东省民政职业技术学校周文思、郭颖诗、吴俊鸿、罗东霞唱时代旋律，扬中国精神——中国声乐作品演

唱

101 一等奖广州市广州市纺织服装职业学校陈宜秀、项慧萍、练映彤、郑开阳字绘插画设计——以”红色基因“融入”吉“字

为例

102 一等奖广州市广州市土地房产管理职业学

校张立、秦美玲、谢智豪、简启廉电梯层门安装与调整

103 一等奖广州市广州市建筑工程职业学校吴海蓉、何韵仪、伍盛勇、刘玮墙面装饰工程清单报价

104 一等奖广州市广州市司法职业学校龚清杰、严宇娟、林翰君、潘燕舞 “互联网+招聘”，开拓人才绿通

105 一等奖广州市广州市黄埔职业技术学校陈民聪、陈文静、赖雨菲、杨林梦新媒体营销之魅力直播

106 一等奖珠海市珠海市理工职业技术学校林巧妍、张亚楠、蒋添四环相“促”守规范，直播助“销”人民车

107 一等奖汕头市汕头市澄海职业技术学校林冰钿、陈洁涵、曾曼雪、谢敏如新媒体营销助力乡村振兴


学校卢咏怡、章媛媛、黄嘉亮、甘雨霁非遗陶瓷短视频直播营销

109 一等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校彭成英、吴凡、区铭鸿、潘宇智慧温室传感网系统设计与实施


110 一等奖佛山市佛山市南海区九江职业技术

学校欧彩霞、翁桂哗、曾艺飞、邓穗平 “魅力中国行”动画短片制作

111 一等奖佛山市佛山市顺德区陈登职业技术

学校范水英、罗志良、皇秋明声光电子电路的安装与调试

112 一等奖佛山市佛山市顺德区勒流职业技术

学校郭俊、张瑜、廖颖欣、曹妙琪个人所得税

113 一等奖佛山市佛山市顺德区龙江职业技术

学校梁金梅、吴韦翔、吴琼、张家英现代中式家具产品设计

114 一等奖东莞市东莞市经济贸易学校李丽萍、赵荣敏、柳晓霞、娄召辉乐享税惠智能报税

115 一等奖东莞市东莞市轻工业学校刘洋、卢牡丹、胡华锋、暨石解析中国八仙桌

116 一等奖东莞市东莞市轻工业学校曾星、林巧玲、钟健强、宋庆道适老化居住空间设计

117 一等奖东莞市东莞市汽车技术学校梁婷婷、王雲雲、李慧、李强向新而行新车推介共筑汽车强国梦

118 一等奖中山市中山市中等专业学校陈春燕、许欢、林珊、黄珍文童诗润童心·童话伴童年——幼儿文学作品教

学活动

119 一等奖中山市中山市沙溪理工学校林敏、彭军、周一平、方万源直播营销实战

120 一等奖中山市中山市现代职业技术学校杨勇、唐帆、郭彩兰“青春心向党.筚路蓝缕 100 年”校园定向越野

赛 VI 设计

121 一等奖中山市中山市第一职业技术学校葛荣光、霍思敏、银丁山、陈倩乡村振兴.励志助农—“荔枝文化节”视觉营销

设计

122 一等奖中山市中山市现代职业技术学校吴娜芬、胡慧晶、何倍廷、黄燕芝匠心造茶衣--花果茶包装设计

123 一等奖中山市中山市现代职业技术学校陈舒乔、谢小娟、李海辉、徐亚《美图配佳果助农显担当——商品营销素材

设计与制作》


124 二等奖省属广东省民政职业技术学校刘燕妮、罗维佳、刘俊怡、詹展鹏为国货发声，我们践行直播规范

125 二等奖省属广东省民政职业技术学校邹凯茵、马思恩、符芳斌 H5广告制作

126 二等奖省属广东省民政职业技术学校陈韵宇、吴丽珊、林扬浪、肖婵智塑产品形象巧推产教融合

127 二等奖广州市广州市纺织服装职业学校陈天勋、李睿、洪安如、何芊蔚地域特色文创产品设计 ——以铜凿剪纸为例

128 二等奖广州市广州市轻工职业学校蔡基锋、谢爱梅、黄德琼、张晓婷三极管放大电路的制作与调试

129 二等奖广州市广州市司法职业学校黄玉敏、叶慧敏、唐三元、邱苹苹家和万事兴——《民法典》婚姻家庭篇

130 二等奖广州市广州市增城区东方职业技术

学校江娴、刘月娇、区艾青、吴智敏薪语心愿，筑梦启航——处理货币性职工薪酬

131 二等奖广州市广州市增城区东方职业技术

学校吴晓燕、许嘉悦、詹娜、李玉芬

《推广云南咖啡，冲煮中国味道》——单品咖

啡的制作与服务

132 二等奖广州市广州市番禺区职业技术学校蒋钻冯、刘晓媚、童冰、蒙绮媚《助农推销有妙招，网实一体拓新道》

133 二等奖广州市广州市旅游商务职业学校陈丽敏、齐冬晴、白碧珍、肖棱棱国饮传承——中国茶品鉴与展示

134 二等奖广州市广州市旅游商务职业学校樊贞、杨波、梁银、李雪英 “宴有百花，艺无止境”——宴会花艺设计

135 二等奖广州市广州市旅游商务职业学校夏薇、潘家佳、许彦琳、郭艳勤葡萄酒侍酒法语

136 二等奖广州市广州市番禺区新造职业技术

学校李妮、蔡雯、林欣、朱君广绣宣传短视频制作

137 二等奖深圳市深圳市博伦职业技术学校朱泽娜、胡现玲、刘秋丹、赵东亮商品详情页的设计与制作

138 二等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校曾珊、赵攀、黄春鼎、徐小娟信息助力，福惠万农——“农家园”网页特效

制作


139 二等奖深圳市深圳市龙岗职业技术学校杨珍、陶梦然、杨丹丹、刘泽佳花香无惧巷子深，即时配送蝶自来

140 二等奖汕头市汕头市鮀滨职业技术学校唐胜、黄桂雪、谢楷炫国风食品类广告设计

141 二等奖汕头市汕头市澄海职业技术学校李树斌、王莉、许樱蓝双创引航，诚信为本——ERP 沙盘模拟经营

142 二等奖佛山市佛山市南海区盐步职业技术

学校刘凤仪、蓝细红、赵惠玲、张遇贤会计凭证

143 二等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校黎亚军、汤伟津、周裕彰、李永杰红旗汽车减速器前盖的加工工艺与编程

144 二等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校王嘉楠、高健、刘艳兰、曹丹茹智慧助力，物达天下


学校关莹莹、吴惠梅、戴冬梅、刘港然脐橙美工综合实训

146 二等奖佛山市佛山市顺德区胡锦超职业技

术学校黄国昌、吕杰、宋忠艺、张璟睿 YL235A 分拣机构安装与调试


术学校吴斌、王丽丽、区颖勤、陈刚

能“工”巧匠，精“艺”求精—塔形截止阀加

工工艺制订

148 二等奖佛山市佛山市顺德区北滘职业技术

学校黄晓菊、黄桂娇、李燕珊、罗凯荣粽意食品公司 VI设计


学校林清香、蔡晓芷、蔡凌云、程志刚工业机器人在纸箱码垛工作站的应用


学校肖雅文、白海燕、马丽蔓、何进林

《以琴入心，奏响经典》——键盘乐器演奏基

础

151 二等奖佛山市佛山市华材职业技术学校左湘、房艺章、葛建利、刘浩波小家电产品智能包装工作站的搭建与调试

152 二等奖佛山市佛山市华材职业技术学校易浩民、陈胜灿、杨文斌、杨颂华时钟调光台灯的制作


153 二等奖惠州市惠州商贸旅游高级职业技术

学校肖婷、吴盛坤、邹宇婷、王茜匠心筑梦——小户型空间设计

154 二等奖东莞市东莞市育才职业技术学校陈苗苗、陈华慧、彭重阳、刘晓云树国舞风范传国韵神采

155 二等奖东莞市东莞市商业学校赵美玲、余锡峰、刘秋红、梁晶晶短视频营销助本土品牌

156 二等奖东莞市东莞市商业学校李珍、周蓉、黄德军、陈中卡神奇的节奏

157 二等奖东莞市东莞市轻工业学校黄力、魏文冲、邱佳银、邓耀华物联网智慧农业实训

158 二等奖东莞市东莞市轻工业学校林君兰、弘艺泽、林颖悦、袁淑灵绿茶冲泡技艺

159 二等奖东莞市东莞市机电工程学校林健辉、林鹏、王静雯、郑恺思智能家居设备安装与控制

160 二等奖东莞市东莞市汽车技术学校陈旭、禤志浩、任俊杰、高鹤汽车“心脏”修复之路

161 二等奖东莞市东莞市电子科技学校林佩蓓、温仲廉、李荣恩、林显健 Python 无人驾驶安全行

162 二等奖东莞市东莞市电子科技学校蒋力、江洪燕、赵朋、钟明宇计算机常见故障诊断与排除

163 二等奖东莞市东莞市电子商贸学校何紫珊、余慧婵、梁正、潘洁婷探索商品拍摄中的参数与构图

164 二等奖中山市中山市中等专业学校陈钧、罗智芸、张文瓈、都本达《妙笔生花，有迹可循——工业机器人绘图操

作与应用》

165 二等奖中山市中山市中等专业学校何文乐、刘开云、曾远征、黎嘉明智慧物联，赋能安全——新能源汽车环境监测

系统搭建

166 二等奖中山市中山市建斌职业技术学校李健柔、梁彦君、张萍、庄标英赋能小微企业，助力乡村振兴——智能 AI 助网

店首页设计

167 二等奖中山市中山市沙溪理工学校王奕、邱雅馨、姚秀芬、徐璐中国节庆类交互型橱窗设计与展示


168 二等奖中山市中山市第一职业技术学校侯敬熙、曾尧、梁结坚、刘佳宁企业网络接入 Internet

169 二等奖中山市中山市火炬科学技术学校陈莉、袁建、黄浩、林海英走进创意短视频——蒙版、抠像与跟踪

170 二等奖中山市中山市现代职业技术学校陈海凤、卢春芽、何翠娇、崔春华《赏建筑园林之美品历史文化之韵》

171 二等奖肇庆市肇庆理工中等职业学校彭静、黄美仪、赵诺怡工于技匠于心——存货

172 二等奖清远市清远市职业技术学校陈志强、刘平、殷孟、王韵蒲党史学习教育展厅设计

173 二等奖清远市清远市清新区职业技术学校王莹滢、朱智敏、沈振谊、陈岸恬 “乐润童心”幼儿音乐活动指导

174 二等奖清远市清远市清新区职业技术学校黄葵、李晓霞、白毅明、许小丽科学引导幼儿情绪情感的发展

175 三等奖省属广东省贸易职业技术学校李琴、赵霞、舒钿、杨晓虹社区项目《垃圾分类 APP 界面设计》

176 三等奖省属广东省石油化工职业技术学

校梁晨、陈素怡、彭长兰、冯泽荣趣探有机悟世界——芳烃醇醛酚说

177 三等奖广州市广州市交通运输职业学校许燕玲、胡广谱、袁康皓、张炳南 3D打印无人机叶片与大象玩具

178 三等奖广州市广州市信息工程职业学校陈煜丹、饶宇婷、刘畅、黄玉霞游戏制作-构建绿色新家乡

179 三等奖广州市广州市轻工职业学校袁晨峰、曹云凤、谢炜龙、梁伟东时钟产品建模与 3D 打印

180 三等奖广州市广州市建筑工程职业学校郭晓明、张海燕、肖又箐混凝土的检测

181 三等奖广州市广州市财经职业学校谢丹影、张莎、张聪、陈沛玲数据服务助力成本核算

182 三等奖广州市广州市财经职业学校杨小梅、刘佳苏、杜昀珍、段宏振兴乡村谱新篇，魅力商务促发展——商务会

议策划与实施

183 三等奖广州市广州市商贸职业学校陈林静、吴春来、郭禧珍、李桂荣智能机器人——智能安防、智能分拣


184 三等奖广州市广州市商贸职业学校伍慧嘉、马冠群、魏碧娟、马嘉昕《直播正当时国货焕新机》

185 三等奖广州市广州市幼儿师范学校沈琼、梁家欣、柏秀娟、余一帆不忘初心担使命，巧练幼师职业语

186 三等奖广州市广州市幼儿师范学校董玲、余玉荣、李丹知于情，思于行——工作过程导向下幼儿园游

戏的组织与指导

187 三等奖广州市广州市番禺区职业技术学校吕思铭、黄壮弟、黄小静、蔡建聪制作投篮游戏机

188 三等奖广州市广州市番禺区职业技术学校阳玉红、蔡晓云、梁嘉敏地方导游服务程序与服务质量

189 三等奖广州市广州市天河职业高级中学颜文静、申定倩、邱荟音乐乐高-节奏音程

190 三等奖广州市广州市黄埔职业技术学校陈秋妹、钟慧静、陈婵、何彩华降本提效，公路先行


学校王雯楹、陈倩红、曹凯灵、罗心清书籍出版策划与设计


学校吴雪梅、蔡小雁、李苑玲、梁通李女士雅居客餐厅方案效果表现

193 三等奖深圳市深圳市第三职业技术学校徐益龙、于洪波、王大明、魏兆协工业 4.0 中的人工智能

194 三等奖深圳市深圳市第三职业技术学校连淑祺、肖亚丽、黄巧慧、冼宝怡网店装修设计


学校乔沐、胡玲丽、窦维鑫、陈秋燕 “直”面挑战，“播”种未来-《直播执行》

196 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校欧阳笑梅、蔚明扬、郑佳丽项目四绘制常用车铣零件图

197 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校黄秀婵、梁章信、吴志娟、林琳借贷记账法的应用

198 三等奖深圳市深圳市奋达职业技术学校毛江挺、田秋艳、易小波、魏继添三相异步电动机的基本控制


199 三等奖珠海市珠海市第一中等职业学校李泽薇、李迪、陈恩程《主厨助力·西餐服务基础知识》

200 三等奖珠海市珠海市第一中等职业学校张小红、聂莉、张敏、范媚娜酒店订房和登记入住服务

201 三等奖汕头市汕头市潮南区职业技术学校洪晓丹、黄琳琳、郑丽丽、陈泽娜析营销策略，创民族品牌

202 三等奖汕头市汕头市潮南区职业技术学校叶妍妍、李婷婷、郑伟珊游戏点亮童年，快乐助航成长

203 三等奖汕头市汕头市鮀滨职业技术学校姚雪琪、胡强、郑绪佳、谢夏纯电商赋能乡村振兴——东北大米巧拍精修

204 三等奖汕头市汕头市潮阳区职业技术学校郑晓群、郭玉静、赵丹晓、谢懿虹风雨兼程一百载，风华正茂创未来--纪念“建

党一百周年”项目教学

205 三等奖汕头市汕头市潮阳区职业技术学校陈丽旋、翁泽鹏、彭炯华、郑钦雄遵守交通法规，关爱生命旅程——Python 模拟

红绿灯控制

206 三等奖汕头市汕头市澄海职业技术学校黄钰杨、陈洁、肖涛助力品牌推广，玩转新媒体营销

207 三等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校梁绮琳、李钻敏、杨韵妍、潘甜喜饼包装设计


学校曾繁昌、陈矿辉、郑建强、陈虎起动系统拆装与检修

209 三等奖佛山市佛山市顺德区胡锦超职业技

术学校冯燕、骆愫颖、钟高泽、张梦依工笔画风汉服详情页图片制作

210 三等奖佛山市佛山市顺德区胡锦超职业技

术学校邓蔚雯、杨颖儿、龚燕、王冰传匠心、润童心，巧手创未来

211 三等奖佛山市佛山市顺德区北滘职业技术

学校黎晓晴、郭志杨、曾智、梁佩瑶执子之手，与子偕老——主题婚礼策划项目

212 三等奖佛山市佛山市顺德区陈登职业技术

学校刘礼菊、彭欢、张金菊、朱琼华处理职工薪酬业务


213 三等奖佛山市佛山市顺德区龙江职业技术

学校卢沛、梁健成、王海林机械传动

214 三等奖佛山市佛山市顺德区中等专业学校贾真、何鉴清、李博炼城轨 AFC 及售票员岗位能力技能实训

215 三等奖佛山市佛山市顺德区中等专业学校熊雨曦、李颖芬、胡艳珊、刘玉珍承海上丝路，做茶艺传人

216 三等奖佛山市佛山市华材职业技术学校宾旭艳、周玲玲、付伊洁、黄俊莨纱制衣，重换非遗光彩——香云纱连衣裙、

配饰的设计与定制

217 三等奖韶关市韶关市振华中等职业学校张莹、梁颖、黄剑斌蕴茶香，展礼盒——茶叶包装设计

218 三等奖东莞市东莞理工学校陈冬冬、习燕菲、张美珍、蔡锐彬基于 Python 的 AI 机器人项目实践

219 三等奖东莞市东莞理工学校郑昕、沈上、陈璐瑶、李伟标 “氯宝宝”免洗消毒液双 11 广告推广

220 三等奖东莞市东莞市商业学校曾越、张涛、李晓燕、王丹云技术学习门店运营，校中企助力创新创业

221 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校张志峰、黄真、王子豪、邵悦华中式椅子手绘设计效果图制作技法

222 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校韩伟、程正、陈宇琴、袁静仪《VI设计》非遗润堂狮坊设计项目

223 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校涂瑜敏、曾焕森、林国勇、王泽塑人物之形，绘时代之魂-人物速写

224 三等奖东莞市东莞市信息技术学校林小婷、林煌、朱燕燕、张宝升匠心打造网店精品

225 三等奖东莞市东莞市轻工业学校周良晨、叶品仁、梁桂平、陈婷婷山川中国海报设计

226 三等奖东莞市东莞市电子科技学校邱谷、阙家伟、钟建珍、洪文良直播带货进课堂

227 三等奖东莞市东莞市电子商贸学校余浪、余希达、郭兵、黄金水典型零部件测绘与 CAD 成图技术

228 三等奖东莞市东莞市电子商贸学校谢明进、刘曼玉、崔月娇、蔡慧晶网店客服售前服务


229 三等奖中山市中山市中等专业学校温金辉、刘志兴、杨华、周斌平面设计∙助力小微企业创新发展“西游系列”

无叶风扇台灯标志与包装设计

230 三等奖中山市中山市中等专业学校邓冠敏、刘蓉、林滋、欧芷昕旅游业的构成

231 三等奖中山市中山市火炬科学技术学校王富夷、杨晓媛、卢璐、方铭忠玩转乐高机械狗结构设计

232 三等奖中山市中山市火炬科学技术学校林晓虹、邱美玲、吴海芳、周俊温情微信运营，献礼建党百年——保温杯营销

大作战

233 三等奖中山市中山市建斌职业技术学校林施施、卢定一、黎俭良、郭潭长循环输送流水线的搭建——探究铰链四杆机构

234 三等奖中山市中山市建斌职业技术学校铁玲、杨文珠、陈艳君、戴晓晴山水人文秀红色华中游

235 三等奖中山市中山市沙溪理工学校胡炎锋、杨婉曼、陈国成、赖海芳“婚庆一瞬，饰穿千年”时尚非遗婚庆缠花设

计与创新

236 三等奖中山市中山市第一职业技术学校史继慈、蔡国财、叶华英、凌国理初心常怀，赤心向党——交互式红船虚拟漫游

系统开发

237 三等奖中山市中山市第一职业技术学校郭曼、孙康源、黄娟、金越构成法则在非物质文化遗产“传统花灯”中的

应用

238 三等奖中山市中山市火炬科学技术学校元志朋、李倩菁、廖江讲红色故事，做“五好”导游

239 三等奖江门市江门市第一职业技术学校梁锦芳、刘艳、张淑芳、章敏《人美于仪事成于礼》 ——公司周年庆典设

宴相关礼仪

240 三等奖江门市鹤山市职业技术学校林永辉、杨娟、罗炫梅、甘桂贤精准入库，畅通物流，助力乡村振兴——入库

作业

241 三等奖江门市江门市工贸职业技术学校李银霞、符笙、谢沛杉赛学一体，对标 1+X—网店“心”装修

242 三等奖阳江市阳春市中等职业技术学校吴烨清、黄玉凤、杨艳萍、陈雪个人所得税纳税实务


243 三等奖茂名市信宜市职业技术学校丘洪丽、罗芸、杨霄、吴林芝幼儿园社会教育活动的设计组织与评价

244 三等奖茂名市信宜市职业技术学校罗怡静、黄楚瑜、林俊谷、陆妙清《幼儿园语言教育活动指导》 ——以文学活动

与早期阅读活动为例

245 三等奖肇庆市肇庆理工中等职业学校罗璟仪、黎春梅、李文、程少珊营销新时代短视频与直播营销

246 三等奖清远市清远市职业技术学校邓丽玉、原靖、张文勇、黎德桂匠心制图

247 三等奖清远市清远市职业技术学校彭美洁、王珊珊、谭彩群、徐美弟析网店，撰文案

248 三等奖清远市清远工贸职业技术学校黎颖欣、江丽群、李海艳幼儿歌曲即兴伴奏

249 三等奖清远市佛冈县职业技术学校邓凤仪、招翠娇、邝智武、范方初电动机的基本控制线路及其安装、调试与维修

250 三等奖清远市佛冈县职业技术学校陈利芳、廖凤英、黄天明会计凭证与会计账簿

251 三等奖清远市英德市职业技术学校刘晓欣、何慧、卫绮珊、梁水姐《学前儿童早期阅读活动》

252 三等奖清远市清远市特殊教育学校李伟如、卢楷锋、武小朋、周建冬人际交往模拟

（三）专业技能课程二组


253 一等奖广州市广州市番禺区职业技术学校虞丽霞、廖艳萍、李佩佩、郑曼如传承茶俗技艺，弘扬传统文化


学校杨茹琪、李秋梅、鲁丹丹旗袍设计与制作


学校陈俊清、梁泽栋、易雁飞、陈渝轩工业机器人激光切割党旗印染模具实训


256 一等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校王杜鑫、曾文芳、何倩雯、黄楚楚电商短视频直播营销技能训练

257 一等奖佛山市佛山市南海区九江职业技术

学校罗凯、黎国玉、陈述颖、蔡克平曲柄连杆机构的拆装与检修

258 一等奖佛山市佛山市顺德区陈村职业技术

学校黄倩倩、罗美文、朱锦饰、李瑞怡仓储与库存管理

259 一等奖佛山市佛山市顺德区勒流职业技术

学校伍志毅、方荣华、张滔、王心国柔性化物料分拣设备设计

260 一等奖佛山市佛山市顺德区均安职业技术

学校陈银爽、喻意梅、王刚、温然然礼服设计与制作

261 一等奖东莞市东莞理工学校杨康、何子永、刘潘峰、陈芳汽车起动系统的检修

262 一等奖东莞市东莞市机电工程学校熊小文、曹建华、尤增、李振豪十二生肖玩具的柔性智能制造实例

263 一等奖东莞市东莞市机电工程学校李回庭、于维斌、曾志芳、周文涛智能门铃盖设计制造综合实训

264 一等奖东莞市东莞市汽车技术学校谌尚、郭剑峰、黎炯、郭欢《技行天下涂装未来》

265 一等奖中山市中山市建斌职业技术学校陈陵锋、毛旺斌、廖嘉欢、王伟烽“焊”卫工匠精神，“接”力智能制造——工

业机器人焊接空压机底座

266 一等奖中山市中山市第一职业技术学校唐雪娟、李俊文、汪海滨、李萍分光光度法测定腊肠中亚硝酸盐的含量

267 一等奖中山市中山市现代职业技术学校孙倩雅、刘广凤、黄益宏、陈锦颖《当甜品遇上中国风——蛋糕裱花创意设计》

268 一等奖中山市中山市现代职业技术学校万咏梅、周晓旋、沈子达、李长福球球是道——高尔夫短杆技术及训练

269 二等奖省属广东省民政职业技术学校徐海建、杨文康、蔡仁整、陈晓曼风驰“电”掣——汽车电源系统检修

270 二等奖广州市广州市纺织服装职业学校贺小红、文观秀、曾四英、陈满红服装数智化——休闲裤模板缝制工艺


271 二等奖广州市广州市交通运输职业学校姚侃、兰杨芳、李镠璘、李荃花聆听沟通勤学练，企业实战见真章—基于中国

邮政真实业务的物流客户投诉处理

272 二等奖广州市广州市信息工程职业学校奚蓉、李鹏敏、王永红、蔡文琼机械手搬运装置组装与调试

273 二等奖广州市广州市建筑工程职业学校陈晓宜、赵李凌、刘钰莹、谢素欢视频监控系统安装与调试

274 二等奖广州市广州市司法职业学校张功煌、罗燕娇、王豪杰、王三山消防灭火，安保有我

275 二等奖广州市广州市电子信息学校许桂骏、杨梦影、李利红、劳伟龙侦探揭秘，影入未来——微电影拍摄技巧的认

知与运用

276 二等奖广州市广州市增城区职业技术学校陈少锋、郭晓花、张瑾物联网初体验

277 二等奖广州市广州市增城区职业技术学校唐小舒、娜布其、陈紫珊、吴房妹幼有所托，共育未来——早期动作、语言发展

活动的设计与实施

278 二等奖深圳市深圳市沙井职业高级中学王宁宁、李姝杰、余婷婷、罗静 AI助力网店装修

279 二等奖珠海市珠海市第一中等职业学校李洁琼、梁桦、陈小艺、张妍澄面皮类品种制作技术

280 二等奖珠海市珠海市理工职业技术学校尹玛琳、龙洁瑜、赵淑华匠心琢艺，成就经典——经典咖啡的制作

281 二等奖珠海市珠海市卫生学校吕秉华、朱小兰、邓舒尹、丘灵芝匠“心”独“运”——人体脉管系统

282 二等奖佛山市佛山市南海区信息技术学校龚文全、郑富豪、关依、蔡二梦工业机器人的搬运和码垛

283 二等奖佛山市佛山市南海区第一职业技术

学校邓永健、吴子健、郭朋飞、周列从动轴的编程与加工


学校冯晓东、何道材、顾兴多旋翼无人机悬停飞行训练


学校关家红、席锡春、刘少颖、吴云芳八大菜系猪肉代表菜



术学校李晓萌、李成交、梁启津、冀殿琛产线升降机电气安装设计调试

287 二等奖佛山市佛山市顺德区陈登职业技术

学校林丽萍、彭小莲、胡文辉、姜绍辉智能停车场管理系统的安装与调试

288 二等奖佛山市佛山市华材职业技术学校谭智男、李淑浩、陆智驹、张家玮新能源汽车空调故障检修

289 二等奖东莞市东莞市信息技术学校招梓妍、刘旭增、李龙平、李丹工业机器人三维激光切割工作站的调试与应用

290 二等奖东莞市东莞市机电工程学校邹萍、李志强、潘剑波、孙慧斌电动玩具脚的改型设计与 3D 打印

291 二等奖东莞市东莞市汽车技术学校商杨伟、卓幼义、张晓娟、李威严谨专精现汽车维修风采

292 二等奖东莞市东莞市汽车技术学校安康、罗辉红、刘文杰、黄有强汽车整容手术

293 二等奖东莞市东莞市汽车技术学校黎文隆、彭锦振、覃昕、伍明浩新能源汽车驱动电机检修

294 二等奖中山市中山市中等专业学校罗美玲、揭英营、姚兰英、黄朝阳《电源电路的原理与制作》

295 二等奖中山市中山市建斌职业技术学校肖学华、邬建彬、林康权、程诗云 “唯美之镜.青春纪念册”主题人像摄影

296 二等奖中山市中山市沙溪理工学校刘腾中、黎佩珊、张家莲、曾雁基于 1+X 课证融通的新能源汽车高压组件检测

与维修

297 二等奖湛江市广东省湛江卫生学校符少莲、杨玉秀、岑嘉莹、林海青中药饮片调剂之中药师炼成记

298 二等奖湛江市湛江中医学校梁晓雁、伍一、朱薇薇与天使比爱心，与死神赛速度—院前基本救护

技术

299 二等奖湛江市湛江中医学校林梦琳、劳斯骅、李幸霖、张小敏因“孕”而生，呵护母婴健康——妊娠合并症

及其护理

300 二等奖茂名市茂名市第二职业技术学校高加芹、蔡秋萍、朱晓珊、郑冬春点“食”成金，面面俱到——形态各异酵面香


301 二等奖清远市清远市职业技术学校阳巧、董南林、余静、向崇标守护成长，3D 打印献礼百年

302 二等奖清远市广东省连州卫生学校梁惠冰、陆玉霞、陈露无“微”不至，细品“菌”心

303 三等奖省属广东省经济贸易职业技术学

校张炜文、熊耐娉、池雨思、杨泳琳深入“拣”“出”——商品拣货出库综合实训

304 三等奖省属广东省食品药品职业技术学

校蒋瑶、黄兰兰、黄婷玉、卢婉怡德技并修，匠心制药--板蓝根片的制备

305 三等奖广州市广州市交通运输职业学校邓超权、曹展涛、冯晶琛、江建 PE燃气管道泄漏探测及抢修

306 三等奖广州市广州市交通运输职业学校陈楚文、林根南、武剑飞、吕晶晶智能灯光 · 安全向未来——汽车智能照明系

统检测与维修

307 三等奖广州市广州市轻工职业学校李壮威、杨沛、冯建财、唐任蓬叶轮和风叶五轴加工

308 三等奖广州市广州市建筑工程职业学校蔡志、毛远芳、庞文娟、刘晓燕 RTK 数字测图

309 三等奖广州市广州市番禺区职业技术学校林奕璇、陈子欣、宋育强懒精灵家族系列动画设计

310 三等奖广州市广州市增城区职业技术学校李淑女、毛建辉、钟淑贤、李琳 PLC 程序设计与项目实施


学校江新燕、陈仁娟、毛晔、王群前厅接待

312 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校张亚鸽、张曼、黄璟、冯乔发为伊制霓裳服装设计在动漫角色造型设计中的

应用

313 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校杨萌萌、徐振、马妙玲、颜其慧《汽车发动机润滑、燃料供给系统认知与拆装》

314 三等奖深圳市深圳市宝安职业技术学校李慧德、梁桂凤、陈红梅、王向阳企业典型业务账务处理

315 三等奖深圳市深圳市龙岗职业技术学校周燕峰、刘双喜、邓雄飞、徐海波电机前盖的加工


316 三等奖汕头市汕头市潮南区职业技术学校卓少玲、黄绣芬、张晓芳拾遗保护，匠心传承——旗袍缝制工艺

317 三等奖汕头市汕头市潮阳建筑职业技术学

校林紫祥、郭海槟、蔡骏、卢崇泽五化筑匠心--框架柱钢筋翻样与加工

318 三等奖汕头市汕头市澄海职业技术学校余钢衍、肖祖亮、谢伦伦智慧物流，智能仓储——现代物流综合作业实

训


学校陈则永、张建长、李伯荣产教融合手柄工件加工

320 三等奖佛山市佛山市顺德区李伟强职业技

术学校谢林、杨玉安、高海燕、郭小勇特色鱼菜品制作

321 三等奖佛山市佛山市顺德区郑敬诒职业技

术学校余娟、夏引回、李俊密、吴文杰婚庆首饰设计与制作

322 三等奖佛山市佛山市顺德区勒流职业技术

学校胡卫涛、陆镇桓、黄晓桐、郭清伟照亮你的美——汽车灯光系统检修

323 三等奖佛山市佛山市顺德区中等专业学校曾丹、冯阳、麦家晖、江利财 “清凉之旅、匠心守护”-汽车空调维修

324 三等奖佛山市佛山市三水区工业中等专业

学校杨冬梅、刘韬、梁帆、杨秋媚型芯板的编程与加工

325 三等奖河源市河源市卫生学校戴贵花、魏洁、邬思婷、赖惠敏正常妊娠与分娩的护理

326 三等奖河源市河源市卫生学校胡明亮、王莉萍、袁文静、谢文娟针灸操作技术

327 三等奖河源市河源理工学校何剑兰、陈梓菲、朱乐、郭丹幼儿照护——早期发展

328 三等奖河源市河源理工学校袁婧、白友谊、伍培林、叶姗幼儿园中班歌表演欣赏与创编

329 三等奖东莞市东莞理工学校罗颖、罗霞荣、文荣钻、张辉匠心独运，巧造斜角规


330 三等奖东莞市东莞市商业学校陈美平、林伟鹏、肖媚娇、彭民鑫无人机装调与飞行

331 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校王朱珠、张丽娜、欧仲立、张德强现代旗袍的造型与立体裁剪

332 三等奖东莞市东莞市纺织服装学校姚林、刘琳、兰炳炎、熊静聚匠心尽精微融思政育新人

333 三等奖东莞市东莞市信息技术学校邹美燕、余舜、李金金、彭小清 PLC 控制实例综合运用

334 三等奖东莞市东莞市机电工程学校郝小静、邓春婷、倪浩涛、林小意工业机器人编程应用与拆装

335 三等奖东莞市东莞市电子商贸学校阮桥根、李日海、姜奉荣、黄永坚新能源永磁同步电机检修

336 三等奖东莞市东莞市南华职业技术学校吕惠敏、段云璐、林必球、吴东短视频拍摄与剪辑

337 三等奖中山市中山市中等专业学校王琳、招妙妍、李秀琴、王婷婷模拟机加工生产过程的智能化生产线编程与调

试

338 三等奖中山市中山市火炬科学技术学校姚明磊、林海阳、袁晓婵、石伟伟 “我和我的家乡”——无人机航拍

339 三等奖中山市中山市火炬科学技术学校杨芳、郭文探、王再浩、周永好表决器的设计与实现

340 三等奖中山市中山市建斌职业技术学校冷潇、刘会朝、李文静、李建文茶颜悦色花茶包装设计与制作

341 三等奖中山市中山市沙溪理工学校王锋、岑东骏、许娴、李旺发曲柄连杆机构的检修

342 三等奖中山市中山市第一职业技术学校石仕娥、黄晓东、罗健、王铁豹“塑”造大国工匠，“控”好人生方向 ——压

印机轴加工

343 三等奖茂名市高州市第一职业技术学校古尚丽、廖畅、熊文辉、陈椿桥网拍实战，拍出畅销商品

344 三等奖茂名市高州市第一职业技术学校罗秀清、郭秀莲、洪景发、余招财百变面团，玩转课堂

345 三等奖茂名市信宜市职业技术学校陆国基、张辉、黄东梅、苏珊珊 PLC 改造电力拖动线路与装调


346 三等奖茂名市信宜市职业技术学校赖冠常、卢学梅、谢丽华、陈秋丽如何让 PPT 课件“亮”起来——幼儿教师课件

制作

347 三等奖肇庆市肇庆理工中等职业学校张傲伟、李锦云、张育珊、王代翠青春心向党--word 图文编辑

348 三等奖肇庆市广东省肇庆市四会中等专业

学校欧盛锋、罗楚灵、张娜兰驾驶练兵显身手——叉车驾驶实训

349 三等奖肇庆市肇庆市工业贸易学校杨妤、赵雨晴、温志灵、曾桂连保教结合，对接 1+X——幼儿园生活活动卫生保

健

350 三等奖清远市清远市职业技术学校廖文婷、罗炳聪、徐文轩、李亦奇四组抢答器与交通灯的 PLC 控制

351 三等奖清远市清远市职业技术学校邱勇胜、潘靖懿、欧素凤、林璇新能源汽车交流充电桩安装与调试

352 三等奖清远市清远工贸职业技术学校蔡名健、郑晓文、骆晓远、周家芳工业机器人码垛操作与编程

353 三等奖清远市清远工贸职业技术学校朱海玲、余武、陈春明、李瑞龙物料输送与分拣的自动化控制

二、高等职业教育组

（一）公共基础课程组

序号奖项院校名称教学团队成员作品名称

354 一等奖广州番禺职业技术学院杨智翼、何华、孙倩倩健康中国梦身材管理行

355 一等奖广州番禺职业技术学院王丽娜、宋良杰、何霞、黄洁琦从 0-1 创新产品开发

356 一等奖广东科学技术职业学院李鹏、彭巧霞、严玥、邵引印强党强军大外交奋力托起中国梦


357 一等奖广东科学技术职业学院蒋茜、秦雯、曾西影、姜媛媛奋斗百年路启航新征程——弘扬中国精神践行社会主

义核心价值观

358 一等奖广东科学技术职业学院苏丹、张映婷、刘志博、孙国兴中国宴 ·宴会服务英语

359 一等奖广东体育职业技术学院于洪霜、朱敏、孟萍、刘婷 “四个全面”战略布局

360 一等奖广东职业技术学院于娟、李敏仪、许明丽 Individual Giving to Team Building

361 一等奖广东建设职业技术学院李香玲、颜然然、闫丽、马梦驰以“史”为鉴，筑梦未来——树立正确人生观，坚定崇高

理想信念

362 一等奖广东机电职业技术学院黄怡伟、祁雪、殷华、方勇华创业决策思维训练

363 一等奖深圳信息职业技术学院朱文明、张倩颖、任静儒深度学习的微分基础

364 一等奖深圳信息职业技术学院许多、郭晓丽、王颖、程芳畅行高新展会代言中国智造

365 一等奖广东省外语艺术职业学院王彬、胡晶君、刘建涛、江琴培根铸魂强国梦圆

366 一等奖广州铁路职业技术学院李媛、叶琳琳、李惠贤、马幸会培育职业心理品质护航城轨安全驾驶

367 一等奖东莞职业技术学院刘丽容、徐小娟、樊红潮、罗美琪学习毛泽东思想传承革命精神勇担时代使命

368 二等奖顺德职业技术学院徐婷婷、陈嘉敏、罗美玲、肖薇薇崇德尚法 e心向党

369 二等奖顺德职业技术学院黄娟、黄俊锋、冯燕、傅芳萍心灵导航自助助人

370 二等奖广东轻工职业技术学院赵庆云、胡冰、王浩、高雅精神引领青春价值筑就梦想

371 二等奖深圳职业技术学院肖正兴、王廷、汤佳梅、李炎 AI助力老有颐养

372 二等奖深圳职业技术学院刘爱容、吴娅妮、杨洋短视频营销中的职场英语


373 二等奖广东农工商职业技术学院邹俊滔、陶裕秀、陆祉亦、高文倩回眸党史育德前行

374 二等奖广东农工商职业技术学院许统德、杨真、杨洁、赵艾菁商业计划书的撰写及可视化

375 二等奖广东农工商职业技术学院唐好、赵秀丽、崔维珊、王珏用中国声音讲中国故事

376 二等奖广东科学技术职业学院李双芹、田志娟、陈倩倩、符愔畅活动庆典文书写作

377 二等奖广东食品药品职业学院张梅花、古玮玮、腰蓝与党同行共“健”中国梦

378 二等奖广东机电职业技术学院李艳丽、杨琳曦、林书舟、伍青珠《中国概况》之中国文化体验篇

379 二等奖清远职业技术学院王雪贞、陈少萍、梁博理、陈珍涛 “五位一体”共筑中国梦

380 二等奖广东工贸职业技术学院晏意华、毛玲、李静、赵勇敢启航新征程，五位一体行

381 二等奖广州工程技术职业学院程云玮、胡雪洁、黄小娟、王凤姿点亮心灯，领航心路

382 二等奖江门职业技术学院王琳琳、黄美桃、伍贤婷舌尖上的美食与文化：Food and Food Culture

383 二等奖珠海城市职业技术学院彭心怡、欧阳效升、李洁春、梁春媚立德红色之旅，筑梦乡村振兴

384 二等奖广州城市职业学院李朝云、胡婷、郝媛媛、金丹悦己纳人共发展，自我调适促和谐——培养高职商务英语

人才心理素养

385 二等奖广州铁路职业技术学院沈珂、周玉、龚婷、何雁玲学习“五位一体” 奋建铁路强国

386 二等奖广州铁路职业技术学院文苇、刘永旭、马睿、李思东乘职场筑梦列车赴劳动强技之旅

387 二等奖广州科技贸易职业学院代道旻、尹富兵、苗苗、惠艳踏板操运动的迁移运用

388 二等奖广州科技贸易职业学院李茜、朱婧、陈冬梅、李奕莹诚待远朋语贯中西


389 二等奖中山职业技术学院丁宇彤、刘缙、卢深勤、廖嘉滨弘扬中国精神践行使命担当

390 二等奖中山职业技术学院陈欢、李思玲、耿海鹰企业行政管理文书写作

391 二等奖广州城建职业学院聂琼、陈映璇、黄瑞娴、胡婷 One World One Dream 同一个家园同一个梦想

392 二等奖广州城建职业学院李芬芳、潘晨、张彩红、王谦谦传情、赋形、达意

393 三等奖顺德职业技术学院胡艳、成娟辉、陈婵英、胡海燕Quality（习“英”晓“语”，助力中国“质”造走向国

际）

394 三等奖顺德职业技术学院郑海曙、杨毅路、郭峰音乐的韵，民族的味

395 三等奖广东轻工职业技术学院王喜英、赵文玲、洪雅、谢卓华 “五位一体”总体布局助推实现“中国梦”

396 三等奖广东交通职业技术学院许娇艳、李柳华、冯蕾锤炼道德品质提升法治素养

397 三等奖深圳职业技术学院张端、赵苏喆、李海龙梦幻脚步牵动乒乓上旋开启国球之旅

398 三等奖深圳职业技术学院吴继雁、张园园、王珊、成英超数据在手，智慧我有—数据采集与分析

399 三等奖广东南华工商职业学院谢荣、曹臣星、宋江浩、黄亚军传承中国文化——初级剑

400 三等奖广州民航职业技术学院刘晶、黄宇飞、李宗涛、梁炼牛顿在疫情中做了什么——定积分及其应用

401 三等奖广州番禺职业技术学院胡琴、刘晓霞、吴雪逸、梁文晓匠心筑梦璀璨报国

402 三等奖佛山职业技术学院黄燕婷、王睿、杜伟儒振奋精气神共圆中国梦

403 三等奖广东食品药品职业学院王卓、江君、罗立军、谭剑音《人人都是自己的创业导师》 ——创新创业须要知行合

一

404 三等奖广东职业技术学院孙德延、梁欢欢、陈汇锋、宋伟创新思维与实践


405 三等奖广东女子职业技术学院刘亚欣、张文淑、周斯昊、罗佳琦量体裁衣——定制你的职业生涯嫁衣

406 三等奖广东机电职业技术学院梁琅、戴雯菲、蓝怡霖、李秀芬巧取心理资本，赢得你的人生

407 三等奖阳江职业技术学院刘帮静、严谨、钟健儿、司徒泳桦环球邮轮，臻情服务

408 三等奖河源职业技术学院刘婧莉、王玉、曾静、阳晓霞玩转数据，学史明理—Excel 和 PowerPoint 应用

409 三等奖广东邮电职业技术学院徐芳丽、黄世吉、文蜀晋新民主主义革命三大法宝

410 三等奖汕头职业技术学院肖柳芙、李丽萍、林烨英、杨海燕星星之火，可以燎原——新民主主义革命与中国共产党的

崛起

411 三等奖深圳信息职业技术学院高丽敏、张一鸣、包美霞、陈忠宁弘扬中国精神勇担时代使命

412 三等奖广东工贸职业技术学院彭枚芳、禹琴、聂雪芬、陈文敏职业英语育匠心，中华文化传全球

413 三等奖中山火炬职业技术学院王林林、孙惠芳、胡玲霞、雷英小工具成大事（师）-Office 高效办公技巧

414 三等奖江门职业技术学院韩利、黎泉妍、苏瑞浓、王辉五位一体奋进新征程

415 三等奖江门职业技术学院杨月莹、张璐斯、林小明、赵文烨燃梦启涯探职业，提质强能促就业

416 三等奖广州南洋理工职业学院齐晓琪、李婧、郭孔生、佟晓彤经典文学审美与应用

417 三等奖肇庆医学高等专科学校叶砾、何晓磊、张兆、梁洁技术引领专业相彰——内科场景英语教学

418 三等奖广州华南商贸职业学院杨冬梅、胡明珠、何慧玲舞动青春与党同庆 ——华尔兹

419 三等奖广东工程职业技术学院张建德、赵芳、李娜、李艳五位一体总布局，全面驱动中国梦

420 三等奖广东工程职业技术学院郭华生、霍仙丽、陈少娟、杨英崇德向善：时代匠人的道德养成


421 三等奖广东科贸职业学院李琳、杨亚、王润萍、祁涛《弘扬中国精神共筑青春梦想》

422 三等奖广州科技贸易职业学院肖影玲、曾慧芳、余青云、肖凤嫦传承红色经典引领青春梦想

423 三等奖东莞职业技术学院刘小梅、董娟娟、樊湘军幼儿园典型日常活动

424 三等奖广东南方职业学院黄婵娟、洪佳磊、李小女、郑倩雯奋进新时代，助力“十四五”，同筑中国梦

425 三等奖广州华商职业学院区楚君、徐金菊、杨梅、林楚贝 Online Business

426 三等奖广东环境保护工程职业学院唐慧盈、吴冬琦、谭叶不忘初心绘就中国梦 Career Planning

427 三等奖广州东华职业学院吴玉环、张闯艳、徐宁、童燕 Unit 2 Friendship-建职场友谊之桥

428 三等奖广东生态工程职业学院曾溅、李晓清、何紫韵、陈楚莹生态为本，文化为魂，旅游富民--Travels

429 三等奖广州卫生职业技术学院李姗、赖珍珍、吕燕宏、王思阳就业宝典助你医路勇往职前

430 三等奖湛江幼儿师范专科学校陈嘉杰、杨越明、张振弟、文迪谱人生华章，担青春使命

(二）专业课程一组


431 一等奖广东轻工职业技术学院李罗娉、罗勇、李峰、顾鼎之旗袍整体服饰设计与制作

432 一等奖广东交通职业技术学院江伟、贺文锦、齐群、骆强轨道车辆转向架检修及维护

433 一等奖广东水利电力职业技术学院刘汾涛、吕海霞、李薇、任楚超基于 BIM 的叠合板·预制剪力墙识图与深化设计

434 一等奖深圳职业技术学院魏彦、连国云、彭艳、管明雷黑客攻防训练营——黑客常用技术与防御措施


435 一等奖广州番禺职业技术学院曾卉、任碧峰、王心如、邹韵区块链金融支付

436 一等奖广州番禺职业技术学院裴小妮、郝雯芳、黄丽丽、李福大数据视角下的智能财务分析

437 一等奖广州番禺职业技术学院段娜、陈慧慧、玄颖双、卢磊健康童鞋的数字化开发

438 一等奖广东农工商职业技术学院刘贞平、李燕、刘婷、熊嘉逸新房销售五步成交

439 一等奖广东农工商职业技术学院张乖利、莫琳、伍岳连、江芸说写做练战，打造金牌理财顾问

440 一等奖广东农工商职业技术学院金晗、任欣颖、罗琼玮、黄继华党史展馆智慧化设计与构建

441 一等奖广东农工商职业技术学院王华、黄冬梅、林愉青、易勇英语为本、数字赋能：打造新外贸工匠

442 一等奖佛山职业技术学院刘嘉熹、邓伟民、段敬毅、冯方友跨境电商商品发布与营销推广

443 一等奖广东科学技术职业学院卢淑萍、刘海、李彬、赖小卿使用 Vue 框架开发智能垃圾分类 APP

444 一等奖广东科学技术职业学院曹婷、熊义淇、陈萌梦、赵亚杰 “图文+短视频+直播”新媒体营销实施

445 一等奖广东科学技术职业学院郭慧、刘颖、徐文瑞、夏梦视觉营销，精准触达

446 一等奖广东科学技术职业学院李贞晶、周苗、文智、石晓莉乒乓球社会体育指导员的培养

447 一等奖广东科学技术职业学院翁方珠、向阳、董丽华、钟建珍后疫情时代会前策划与准备

448 一等奖广东机电职业技术学院谭剑、王彩芳、黎花、刘凯机器视觉智能垃圾分拣

449 一等奖广东机电职业技术学院蔡晓红、房杉、李宏、吴倍贝老年人助浴产品设计

450 一等奖深圳信息职业技术学院薛国伟、黄锐军、吴瑜、程东升航空数据智能爬取与分析


451 一等奖深圳信息职业技术学院张嫄、陈亮、高玉婷、胡樱凡思政铸魂、科技赋能、畅游金融

452 一等奖广东省外语艺术职业学院朴红梅、刘卫宇、姜莹、徐磊创”岭南舞蹈佳作“，育”未来美育之师“

453 一等奖中山火炬职业技术学院官燕燕、付文亭、邱妍、高艳飞传承茶叶文化，助力乡村振兴—“粽茶”包装盒设计与制

作

454 一等奖珠海城市职业技术学院姜源、邱小群、刘玉洁、郎波智慧厨房系统设计

455 一等奖珠海城市职业技术学院卢兰凤、杜敏、吴舒姗、李永玖自然主题研学活动设计

456 一等奖广州铁路职业技术学院刘康妮、何红、杨珂、姬秀春厚德载运，强技利行——地铁车站行车组织

457 一等奖广州铁路职业技术学院李蜜、闫娟、禹婷婷、陈婷婷（云上）展会营销：中国制造 e行记

458 一等奖中山职业技术学院吴华群、王婷婷、杨超、黄菡六大茶类代表茗茶茶艺

459 一等奖东莞职业技术学院樊萱、邓韵雅、肖琴、罗桂玉借他人之力成就自我——数字化融资战略

460 一等奖东莞职业技术学院覃钰斐、蒋海霞、陈惠华助农特产包装设计

461 一等奖广东环境保护工程职业学院何司彦、丘燕芬、王莺璇、王丽娟服务乡村，美化家园——农村公共厕所设计

462 一等奖广东生态工程职业学院白华艳、柯戈、尹冬梅、蔡恒儿 “匠人匠心，传承非遗”短视频与直播营销技巧

463 一等奖湛江幼儿师范专科学校陈春兰、孟盈、陈晓婷、王桂凤乐在其中、以美育人——奥尔夫音乐教育

464 二等奖顺德职业技术学院李泳璋、董青、潘向研、周丽庆大国贸易：订单管理与客服沟通

465 二等奖广东轻工职业技术学院黄敏、朱晓立、张媛媛、刘晓蓉后疫情时代话进口对虾之安全——食品仪器分析技术保

驾护航

466 二等奖广东轻工职业技术学院黄笑、石磊、谢嘉琳、孙雪娇随“肌”应变成就大美——彩妆产品配方设计与制备


467 二等奖广东轻工职业技术学院何展鸿、王晓燕、张禾、李洁数里寻“它”千百度——《市场调查》第 4560 学时

468 二等奖广东轻工职业技术学院罗名君、伏波、易显钦、张韶琲智能陪伴机器人动态表现

469 二等奖广东交通职业技术学院章雨晨、邓志文、李伊泠精准分析，助力企业发展

470 二等奖广东交通职业技术学院王尚、朱文英、兰晓婕、姜天伟车辆展示与产品介绍

471 二等奖广东水利电力职业技术学院赵晨、徐森、雷钢、卢杰河海绵城市集水景观设计

472 二等奖广东水利电力职业技术学院蓝忠华、曹洋、林欢、舒晓娟水情信息采集与处理

473 二等奖广东水利电力职业技术学院周银新、刘伟奇、董婷婷、朱可嘉乘势赋能，直播带货助力国货出海

474 二等奖深圳职业技术学院张凯、李健平、潘浩、李占玉电动汽车源动力——动力电池探秘

475 二等奖深圳职业技术学院夏继媛、宋荣、晏凯、曾启明智能家居，自主搭建

476 二等奖深圳职业技术学院杨征、王一、李珩、刘腾匠心比新——影视广告创作实践

477 二等奖深圳职业技术学院谢娅琦、范轶、唐子云开展中东新媒体运营

478 二等奖广东南华工商职业学院谭金凤、陈丽芳、张彭博、李林玫宾至如归，四季如“家”

479 二等奖广州番禺职业技术学院贺张毅、曹阳艳、黄琛、周晖中国速度，绿色节能—装配式混凝土结构工程计量与计价

480 二等奖广州番禺职业技术学院廖春蓝、陈钰、孙志敬、张立病床呼叫系统

481 二等奖广州番禺职业技术学院刘希、詹增荣、汤双霞、陈海山“数据智能”驱动 “精准教学”，数据挖掘与智能应用

实战

482 二等奖广州番禺职业技术学院李子莹、严美姬、曾衍文、吴莎匠心打造中国产品，数据运筹全球商机


483 二等奖广州番禺职业技术学院刘科江、陈蔼、陈宜国、张雯设计有“方”，创意有“道”——设计创意与方法

484 二等奖广州番禺职业技术学院田丹丹、李海欢、欧阳悦、方子贤译者匠心——讲好中国故事，传播中国声音

485 二等奖广东农工商职业技术学院王汭男、杨冰、谢高妙、卓智勇一花一叶一世界：新时代茶艺师的养成之路

486 二等奖广东农工商职业技术学院李燕茹、王茜、林颖、何小娟非遗醒狮文创产品数字化设计

487 二等奖佛山职业技术学院李晶、何静、甘玲、范洁有礼则安，共赢致远——掌握商务谈判的磋商技巧

488 二等奖广东科学技术职业学院郭卫娜、冯淑玲、段金梅、陈洁容红船起航怀初心逐梦——旅行社产品开发与设计

489 二等奖广东食品药品职业学院严立浩、杨晓雯、张敏怡、张晨洞察消费者心中的“好药” ——药品市场调研与定位

490 二等奖广东食品药品职业学院李雪、段文海、刘立、覃小玲放“心”用药—心血管系统药物

491 二等奖广东食品药品职业学院周国洪、颜仁梁、姚瑶、李宗伟滚滚圆，圆滚滚-中药丸剂的生产技术

492 二等奖广东职业技术学院王昕阳、许燕、张蕾、吴强 “美丽乡村”H5交互融媒体宣传设计

493 二等奖广东建设职业技术学院赖映虹、巫昊峰、何慧兰、丁想荣一手房销售服务

494 二等奖广东女子职业技术学院黄志成、朱雪梅、张莉、陈绣瑶制作网页飘动广告

495 二等奖广东机电职业技术学院耿青玲、王涛、刘潇潇常用机构的分析与设计

496 二等奖广东机电职业技术学院王勇勇、温冠宁、林晓丹、徐娅丹新能源车个性化定制配色设计

497 二等奖广东机电职业技术学院高勇、张少茹、马嘉蓝、江璇内容营销抢占 C位，赋能国货乘风破浪

498 二等奖广东机电职业技术学院黄紫薇、兰桂华、蒋彬、罗淳金融理财进社区，美好生活我助力


499 二等奖河源职业技术学院叶影霞、吕春燕、叶慧娟、刘坤漂洋过海，共建共享——出口合同履行

500 二等奖河源职业技术学院巩云飞、董海燕、潘博欲善其“师”，先利其“技”

501 二等奖深圳信息职业技术学院葛李、谭飞刚、招晓菊、李健艺电动列车司机作业

502 二等奖深圳信息职业技术学院刘俊、郭丽丽、陈文雄、华韵之 5G应急专网部署与优化

503 二等奖深圳信息职业技术学院曹维、张健、张瑞、杨耿基于深度学习的垃圾分类 Web AI 软件应用开发

504 二等奖深圳信息职业技术学院金珞欣、王辉静、陈婉欣、杨微互联网营销战略规划

505 二等奖广东省外语艺术职业学院袁文彬、吴勇健、乔斌、陈路芳舞“一带一路”故事，成“一带一入”课改

506 二等奖广东省外语艺术职业学院钟晨焰、黄美贤、魏小娜、李春会童年有戏，幼有优育

507 二等奖广州工程技术职业学院沈阳、熊亚蒙、陈洁、陈瑛使用盒子模型实现“一带一路”专题网

508 二等奖广州工程技术职业学院骆淑芳、荣桂范、孙志阳、谭素娴创业之道—精打细算、合作共赢

509 二等奖中山火炬职业技术学院胡廉、丁昭巧、衷亚琴、高玉洁跨境荐品数字引领 —美妆产品推介

510 二等奖珠海城市职业技术学院封晔、张静、张思敏、高倩倩企业经营数据预测与归因

511 二等奖广州南洋理工职业学院钟飞凤、李维佳、马倩倩匠心筑建，美育筑梦——公共建筑设计

512 二等奖惠州经济职业技术学院贾雯、严巧慧、余琦、梁辑熙市场论剑，四步为营-打造优质掌“门”人

513 二等奖肇庆医学高等专科学校欧明娥、刘晓颖、孟娜娜、郭雯雯小生命，大健康——新生儿及新生儿疾病

514 二等奖广州城市职业学院李泽文、郑雅婷、孟昉、陈晓柱样式之美—CSS3 前端设计项目


515 二等奖广州城市职业学院张晓琴、卢娓娓、柳彩霞、付美珍党领禁毒，社工助力——《社会工作实务》之介入

516 二等奖广东工程职业技术学院朱珍、黄玲、徐丽新、梁小鸥智汇软件，“云上沟通”促就业

517 二等奖广州铁路职业技术学院龚凌云、诸进才、张菊红、陈泽宇机车转向架零件图识读与绘制

518 二等奖广东科贸职业学院吴萌琼、卓敏、周国丽、谢小曼大国之礼以茶践行

519 二等奖广东科贸职业学院陈若蕾、闫韵云、黄彦婷、贺园融“会”贯通，识时达“务”

520 二等奖广州科技贸易职业学院熊素宜、贾忠秋、尹芬、畅金龙未雨绸缪、行稳致远，做好企业全面预算

521 二等奖广州科技贸易职业学院罗绮琦、彭慧翔、曲红梅、李寅会议筹备

522 二等奖广州城建职业学院汪海藻、何婷、南韩旦、李慧钧建党 100 周年公关活动策划

523 二等奖广州城建职业学院刘静、解心、刘莎、汪德露慧眼识才

524 二等奖东莞职业技术学院梁双艺、段淑娟、杨颖怡、孙强建筑横向构件的构造

525 二等奖东莞职业技术学院李娜、魏华、赵佳、薛美贵印刷品的色彩复制

526 二等奖东莞职业技术学院徐兰、史秀红、脱俗、刘咏梅城市轨道交通突发事件应急处理

527 二等奖东莞职业技术学院罗梦君、王潇、黄佩珊、胡贇后疫情时代幼儿心理健康教育活动的设计与实践

528 二等奖广东南方职业学院赵仁璧、刘月芳、曾莉莎、劳惠燕 “品建筑古韵，扬旅游新风”——中国古建筑及园林文化

529 二等奖广州华商职业学院周冬娥、吴双、王媛、胡亟飞合作共赢，构建智慧供应链

530 二等奖广东环境保护工程职业学院邹小丹、肖好良、吴启文、周平红科技引领智绘世界——无人机摄影测量


531 二等奖广东环境保护工程职业学院蔡云梅、陈熠熠、吴荣方、蔡宗平气相色谱法测定环境空气中苯系物

532 二等奖广东生态工程职业学院陆康英、李樨、徐罗、王喜娜精准划小班匠心营山林

533 二等奖广州卫生职业技术学院唐冰雯、郭俐麟、周伟平、王桂平药检侦探之维生素和抗生素类药物质检的秘密

534 二等奖广州卫生职业技术学院王雅洁、徐建永、杨明照、张凯瘟神照妖镜揪出潜伏疫魔——核酸检测

535 二等奖广州卫生职业技术学院杨荫、岳丽、何华香、孔令平走进运动系统

536 二等奖广东江门幼儿师范高等专科

学校欧美燕、张丽莎、陈嘉琪、凌柏玉科学引领思创探究 ——幼儿园科学活动设计与组织

537 三等奖顺德职业技术学院肖娜、顾宇清、李行、徐清涛国货创新萌宠恒温仓设计

538 三等奖顺德职业技术学院姜佳丽、练翠霞、农彦彦、冯才敏漆彩物语匠心独配 ——建筑乳胶漆的配方设计

539 三等奖顺德职业技术学院牛俊英、蔡泽凡、李俊、杨小东制造升级初探

540 三等奖顺德职业技术学院刘刚桥、师建华、王璐、郑俊亮新零售采购与供应管理

541 三等奖广东轻工职业技术学院万俊杰、冯新、叶秀雅打造碧水生态助力美丽乡村——人工湿地技术治理

乡村生活污水

542 三等奖广东轻工职业技术学院黄媛莎、李慧玮、朱永闯、陈晓腾成人之美，技以载道 “整形式”化妆技巧

543 三等奖广东轻工职业技术学院王厚喜、黄道平、石娜、郑建红区块链在供应链金融的应用

544 三等奖广东轻工职业技术学院张成玉、伍建海、袁银枝、王琳霞《运筹帷幄，决胜千里——海外领队出发篇》

545 三等奖广东轻工职业技术学院徐禹、罗岐熟、张祥磊、刘丹数字“造服”美好生活——旗袍云定制——

546 三等奖广东交通职业技术学院涂建军、贾行浩、查安平、邹心怡技能淬炼建设平安港口——油品码头装卸作业


547 三等奖广东交通职业技术学院黄院芳、龙庆文、武文星变电所主要电气设备及接线

548 三等奖广东水利电力职业技术学院曾乐、钟亮、张天俊 APP 与小程序界面设计

549 三等奖广东水利电力职业技术学院沈化、李玲、由思奇礼迎八方来客，品中西美食文化

550 三等奖深圳职业技术学院高静思、邓爱华、王丝可、赵斌校园供水系统中的能量流动

551 三等奖深圳职业技术学院马德粮、孟凡生、余春晖汽车空调系统检修

552 三等奖深圳职业技术学院张良、朱磊、曾颖、王哲雨设计基础思维转换

553 三等奖深圳职业技术学院金海、张国军、闵光培、刘传兵 “校园党建”主题网站交互设计

554 三等奖深圳职业技术学院蒲蓓蕾、张冰玉、李思瑶、谭昕 “探中思，试中学”——国风动画短片角色制作

555 三等奖深圳职业技术学院王莹、景艳、王瑜、梁颀颀探秘著作权保护之路

556 三等奖广东南华工商职业学院阎文茜、纪姗姗、吴秋琅、张英可图形的处理与展示

557 三等奖广州民航职业技术学院刘文评、刘晨、陈曜陆空信息传递的桥梁—飞机通信系统

558 三等奖广州番禺职业技术学院骆美美、李明、金莉莉品鉴自然瑰宝服务美好生活——钻石鉴定

559 三等奖广州番禺职业技术学院张莉萍、伍岂莹、蔡红女、何晓琳云端展会，直播出海

560 三等奖广州番禺职业技术学院刘晓杰、张春霞、吴源、曾兰君导游综合能力提升

561 三等奖广东松山职业技术学院赖颖、张华伟、孔军廷、梁启红绿色出行-动力电池为你保驾护航

562 三等奖广东农工商职业技术学院王志刚、万磊、周焓、纪倩安得广厦千万间——物业项目承接验收


563 三等奖广东农工商职业技术学院石思文、罗慧如、张春娥、吕雪兴茶富农“抖”来助力——新媒体运营

564 三等奖广东新安职业技术学院陈宁、周卓杭、刘创、吴亚丽以证为据，核算智会未来——“供产销”过程业务核算

565 三等奖佛山职业技术学院臧艳辉、谭建斌、华春梦、余家豪车载驾驶行为监控系统

566 三等奖佛山职业技术学院杨苏力、李闵、李迟芳、黄佩红依法守法，人人有责

567 三等奖广东科学技术职业学院常亚萍、韩天琪、姜晔、杨忠明机器视觉独具慧眼

568 三等奖广东科学技术职业学院倪志敏、邹小平、杨晓红、罗鹏快递网点管理

569 三等奖广东食品药品职业学院林宇乔、吴蕊、林方、周斯斯商务文明礼仪先行

570 三等奖广东食品药品职业学院贺媛媛、郝佳睿、马晓勉码动视界——网页图文动态展示

571 三等奖广东食品药品职业学院李倩雯、郑芳芳、王笑丹诊听肺语心声

572 三等奖广东职业技术学院范敏娜、杨琼莹、刘鑫、任丽惠助力新疆长绒棉国货服装买手

573 三等奖广东职业技术学院刘梓豪、梁娟娟、李泽宇、赖路燕《短视频与直播营销》

574 三等奖广东职业技术学院田甜、徐晓星、吴宝聪、何翔玉 “唐诗之美”APP 动画设计

575 三等奖广东职业技术学院袁晓雪、任婷、李艳辉、陶霞 Attending Trade Fairs 参加展会

576 三等奖广东建设职业技术学院曾跃飞、朱志刚、曾欣、刘文新常见分项工程施工安全管理

577 三等奖广东建设职业技术学院杜平、黄洪标、龚波、邱梓荣党史学习教育管理系统设计

578 三等奖广东建设职业技术学院黄立君、陈金平、曾桦、万敏冷冻鸡翅进出口通关


579 三等奖广东女子职业技术学院荆芳、龚成清、高瑞利、孙恩博山西武乡小米包装视觉设计

580 三等奖广东女子职业技术学院李婷、马天芳、袁赛、陈唯玮青少年小组工作实务

581 三等奖广东女子职业技术学院张怡帆、何晓园、陈晓娴《升阶表达，亮相职场》

582 三等奖广东岭南职业技术学院崔丽娜、谢琴、蔡妙霞、刘柳静点滴匠心药物疗法

583 三等奖广东邮电职业技术学院梁影晖、陈析西、谭嘉辉、麦烨雯红色乡村视觉形象设计及应用

584 三等奖汕头职业技术学院鲁涵、郭钊如、许晓洁服务大众，振兴乡村，共筑中国梦——社会工作方法实践

585 三等奖深圳信息职业技术学院李雪、郭建宁、董晓清、姚萌又见镉米

586 三等奖清远职业技术学院杨敏、皮晓娟、陈新苗揭示食品中蛋白质的奥秘

587 三等奖清远职业技术学院阳义、王兵、钟琦、罗婉媚二手车诚信鉴定与评估

588 三等奖清远职业技术学院谢夏、贺卫卫、黄拥军、廖黔霖消化呼吸器官的辨识与临床护理应用

589 三等奖清远职业技术学院王晓蕾、赵艺、任伟、吴晓芳塑白衣天使形象，建和谐护患关系

590 三等奖广东工贸职业技术学院刘丽、祖为国、谭金石、朱腾运筹帷幄，鹰击长空；经纬天下，指点江山 ——无人机

测绘成图技术

591 三等奖广东工贸职业技术学院周红云、易慧敏、赵娟以人为本，匠心创椅---老人椅的再设计

592 三等奖广东工贸职业技术学院周宇、黎少、张冬兰、张坡给祖国拍张特写，献给建党百年

593 三等奖广东工贸职业技术学院刘佳珺、徐萌、卢岩叩开国际商务谈判“新大门”，国产新能源车进军迪拜

篇

594 三等奖广东司法警官职业学院阳雁、宋健文、徐金成、周亚萍学警雄风鉴证实录


595 三等奖广东省外语艺术职业学院张茵、童姗姗、廖予宁、石硕弹唱红色旋律，奏响文化自信

596 三等奖广东省外语艺术职业学院曹辉、杜晓晖、黄健、刘薇练现代办公技能，塑精益求精匠心

597 三等奖广东文艺职业学院陈俊娟、高嘉敏、邓斌、黄溦琢玉成扇-文化创意产品设计

598 三等奖广东文艺职业学院郭青、李晓玲、魏婷适老化居家空间深化设计

599 三等奖广州工程技术职业学院徐颖、郭鹏、周丹丹、余萍出口业务操作——口罩跨境惠享全球

600 三等奖广州工程技术职业学院何波、王毅、卢莉、陈淦电商赋能双循环，乡村振兴我在行--网店规划与设计

601 三等奖江门职业技术学院郑英杰、张伟雄、曾祥、侯曙光减速器轴系零部件的分析与设计

602 三等奖江门职业技术学院白露、和健、徐斌旅游产品策划

603 三等奖江门职业技术学院冯锦、万历、杨慧自树树人以美育人——教师的美术鉴赏能力

604 三等奖江门职业技术学院张慧、张晓芬、王雅、谭洁莹有德、有理、有专攻

605 三等奖江门职业技术学院林勉、冯晓菲、黄永全、冯焕红开启成功的钥匙

606 三等奖茂名职业技术学院陈桥君、张亚洲、梁燕电商创造财富，设计成就未来

607 三等奖广州涉外经济职业技术学院黄怡然、丘伟萍、林青全陪导游服务

608 三等奖广州南洋理工职业学院潘慧、汪艳、周楠疫飞冲天-国际空运代理

609 三等奖惠州经济职业技术学院邝楚文、李娜、龚电花、刘军轶党史学习网站开发

610 三等奖肇庆医学高等专科学校陈金锋、杨涛、王胜、肖春苟健康中国行-骨与关节


611 三等奖肇庆医学高等专科学校许名颖、陈培海、蒋红群、陈立强共筑免疫屏障——病原生物与免疫学

612 三等奖广州华南商贸职业学院汤秋婷、林雪媛、杨琳、姚丹婷电商新时代，帮扶千万家——短视频运营

613 三等奖广州华立科技职业学院杨金玲、刘金敏、张弦、莫令航知己知彼，知行知礼——涉外商务会议组织管理

614 三等奖广州城市职业学院王凯、李高峰、刘哲明、范意婷企业筹资与投资模型分析

615 三等奖广州城市职业学院姜涛、黄建军、陈宇哲、张容容红色精神时代表现 —设计方法在红色文宣上的运用

616 三等奖广东工程职业技术学院王帅、李梦溪、陈曙征、曾艳家乡产品营销策划

617 三等奖广州铁路职业技术学院陈泽涛、刘文波、雷洁、伍洪俊 ZD6 型转辙机控制电路分析

618 三等奖广州铁路职业技术学院万丽丽、邹莘、戴佳欣、汤海滨数字化时代下，STP 营销战略分析与决策

619 三等奖广东科贸职业学院王晓、罗明清、唐怡欣匠心推介说国货----产品推介

620 三等奖广州科技贸易职业学院莫慧芳、王春艳、彭明仔、肖成军电机电气控制线路的装调

621 三等奖中山职业技术学院徐平凡、杨日容、李海、梅妮 PLC 控制的恒压供水系统

622 三等奖广州城建职业学院尹庆、林怡标、张薿薿、马淑仪匠心独运，共筑梦想之家

623 三等奖广州城建职业学院黄洁贞、张红霞、卢春燕、蒋晓云数字建模精准算量

624 三等奖广州城建职业学院邱丽娜、伍倩莹、王光焰、蔡小宇电商助农巧装修

625 三等奖广州城建职业学院李琪、张云瑞、袁其玲、孙欢欢中国旅游文化元素英语讲解

626 三等奖广东南方职业学院周颖娟、黄聪、陈敏商务接洽环节


627 三等奖广州华商职业学院丘艳燕、刘转英、蔡雪菲、李孟冰三维建筑信息模型的创建

628 三等奖广州华商职业学院何洪健、刘瑾瑾、易丽娟、刘思蕴营养配餐，合理烹饪

629 三等奖广州华夏职业学院胡玲玲、袁哲慧、吴华丽、李智才古韵新生—老人居室空间改造设计

630 三等奖广州华夏职业学院黄义晏、梁景瑜、杨梓妮、王翠个人所得税计算与申报

631 三等奖广东环境保护工程职业学院罗瑜清、武交峰、简志雄、张维威智能+蓝天行动大气污染监控系统设计

632 三等奖广东环境保护工程职业学院余兰、戴险峰、邵博、朱称水小口罩大质量----防疫口罩的标准、检测及纠纷

633 三等奖广东青年职业学院尹智瑾、陶晶慧、卢喜文、王媛媛营销接待，商务精“英”——市场营销及商务关系

634 三等奖广东生态工程职业学院王琳、梁晓婷、胡瑾、徐谙为修德修能，树木树人——森林植物形态识别

635 三等奖广东碧桂园职业学院张校磊、苗振腾、黄国爵、梁健恒机器人运动控制

636 三等奖广东碧桂园职业学院于珊珊、李乐、乔柳杨、谢意浓数字化消费决策与精准营销

637 三等奖广东茂名健康职业学院陈小婉、翟丽君、梁小艺、龙丽帆药物检验项目与实例

638 三等奖广东茂名健康职业学院梁清霞、毛芹超、陈雪平零售连锁药店药品销售管理与服务

639 三等奖广东茂名幼儿师范专科学校李丹恒、王阿丹、罗偲、张永波幼儿园结构游戏设计与指导

640 三等奖惠州工程职业学院吴小婷、胡景凯、张彦红血液循环障碍和水盐代谢障碍的识别与分析

641 三等奖惠州工程职业学院李晋芳、袁艺明、刘琪、李磊智能家居安防

642 三等奖广东江门中医药职业学院于海英、常陆林、张梦诗、吴丹探索生物化学奥秘●感悟生命科学之美


643 三等奖广东江门中医药职业学院李菲、瞿良琴、魏雅君、陆基伟认知症老年人护理

644 三等奖湛江幼儿师范专科学校吴春萌、姜鹏、康丽娟、黄劲打通“电商”最后一公里——1+X 情境下的电子商务仓储

与配送管理

645 三等奖湛江幼儿师范专科学校罗利、林晓燕、梁盛龙、戚林英爱心护苗，立德树人——幼儿园教育课件制作

（三）专业课程二组


646 一等奖顺德职业技术学院郭曼兰、张立荣、高志明、余华明助碳达峰,促碳中和，分布式光伏电站的设计与应用

647 一等奖深圳职业技术学院石静、徐淳、谢少亮、程池浩数字建造--建筑墙体构造设计

648 一等奖深圳职业技术学院任静、裴茜、谭慧珠、周舟乘跨境电商东风，助中国品牌出海

649 一等奖广州番禺职业技术学院张占辉、华俊芳、赵朝夕、秦禹京剧脸谱自动分拣系统安装与调试

650 一等奖广州番禺职业技术学院闫黎、朱欢、唐一苇、孟子渊银胎珐琅饰品设计与制作

651 一等奖广东科学技术职业学院王辉、郑红、胡红坡、伍世平基于比亚迪 EV新能源汽车综合故障排查

652 一等奖广东科学技术职业学院邹晶晶、陈剑、林洪伟、荆舒煬接轨世赛匠心育人-光缆布线系统设计与实施

653 一等奖广东食品药品职业学院李剑、马丽萍、黄佳佳、梁瑞进神奇面团，匠心打造

654 一等奖广东职业技术学院刘优幽、刘婷、戴明菊、冯宝亨万物互联，人境互通——厨房系统智能控制终端创新设计

655 一等奖深圳信息职业技术学院魏志丽、曲璐、殷慧、佟强轮毂定制化生产线仿真与调试


656 一等奖广东工贸职业技术学院陈中明、廖晓虹、方文超、张笑创享未来，业聚电商——电商创业调研实训

657 一等奖广东省外语艺术职业学院程争、何思惠、邓玥唱红色经典歌曲育明日美育之师

658 一等奖珠海城市职业技术学院向美丽、刘艳芝、郭剑英、李妮学前儿童游戏的设计与组织

659 一等奖广州南洋理工职业学院覃卓庚、秦启超、陈友鹏、杜东浩汽车发动机点火系统故障诊断与维修

660 一等奖广州铁路职业技术学院吴静、黎志涛、朱琳、曾险峰四联并举匠心护行——“运.动.防.护”高效客运组织

661 一等奖广州科技贸易职业学院辛维金、林宣洁、王默子、崔士友服装卖场空间规划及陈列方案实施

662 一等奖广东环境保护工程职业学院王小辉、孙红伟、赵淑楠、郑离妮别具匠心识风险，不忘初心保安全——危险化学品储存安

全管理

663 一等奖广东生态工程职业学院荣亮亮、薛菊、吴碧珊、罗中老年社区景观设计

664 一等奖广东茂名健康职业学院熊海燕、黄锦、陆妃妃、李尚贞护心有道-循环系统疾病病人的护理

665 一等奖广州卫生职业技术学院何夏阳、周艳华、唐娅注射法

666 二等奖顺德职业技术学院彭庆红、乡碧云、杨亘、李玲滑仓系统的安装与调试

667 二等奖顺德职业技术学院陈兰、刘畅、冯远日、罗建中《刀光碟影，创意匠心——餐厅桌边服务》

668 二等奖广东交通职业技术学院彭育强、林汉荣、赵晨、宁善平列车司机作业标准

669 二等奖深圳职业技术学院李岩、李粤平、沈翠新、周晓宏基于百度 AI 的人脸识别

670 二等奖深圳职业技术学院何可人、单莉莉、王珊、陈惠娜守护母婴安康——正常分娩及母婴护理

671 二等奖广东南华工商职业学院刘隽华、冯玉玺、彭晓丹云尚栖居——居住空间全屋定制设计


672 二等奖广州番禺职业技术学院代慧、毕天昊、罗洪霞、张剑鲁班锁装配工作站系统集成

673 二等奖广州番禺职业技术学院诸智武、陈贺鸿、谢慕龄、李其骏增值税智能申报与风险管理

674 二等奖广东农工商职业技术学院汤慧敏、许雯、陶正平、魏雪繁花似锦技纷呈，花卉繁殖技术

675 二等奖广东农工商职业技术学院刘海霞、李国华、高凤磊、叶存栋科学防疫战役，保护动物健康

676 二等奖佛山职业技术学院肖宏涛、冯安平、刘璇、杨振国汽车门拉手的 3D 打印实训

677 二等奖广东食品药品职业学院石茗、黄秋妹、崔英、倪明龙教化学之技，思育人之法----定量分析技术

678 二等奖广东建设职业技术学院黄修力、伦炜、王玲、张良火灾自动报警系统安装与调试

679 二等奖广东机电职业技术学院朱敏姬、刘京晶、方佳虹、彭丽嫦跨境电商产品的发布与销售

680 二等奖深圳信息职业技术学院赖周艺、郭婷、张晓莉、汪洋工业机器人 3D打印工作站集成与应用

681 二等奖深圳信息职业技术学院陈培培、夏林中、王乐、曹雪梅 GPON 接入原理及应用

682 二等奖广东省外语艺术职业学院杨赛男、邱燕芳、付尧、曾林专“创”政融，非遗匠“新”

683 二等奖广东省外语艺术职业学院阎伟、张燕、林丛、邹冰锤工匠精神练现代会议服务能力

684 二等奖广州工程技术职业学院题园园、陈明、罗隆、罗琴仓储与分拣单元系统集成

685 二等奖江门职业技术学院黄德晶、赵丽苹、张杰以微见知，以微观价—钻石分级标准

686 二等奖广州南洋理工职业学院周洪梅、何玉、蔡珍珍、黄金金匠心守艺——旗袍立体造型

687 二等奖肇庆医学高等专科学校邹佩良、李盛海、莫健超、刘琳进击的柳叶刀-无菌术和手术基本操作


688 二等奖广州铁路职业技术学院杨静、徐振华、尹邦政、万燕英高铁车地通信故障诊断与排除

689 二等奖广州铁路职业技术学院陈晓宏、邓微、南松地铁列车车门故障处理

690 二等奖广州铁路职业技术学院沈俊娜、范存军、马国治、马志红铁路车站发车作业

691 二等奖广东科贸职业学院赵惠、查琳琳、陈贞、王爽子茗谈商旅、智译营销

692 二等奖中山职业技术学院柳媛、盛晓燕、秦婧、黄醒恒新媒体直播营销与运营

693 二等奖中山职业技术学院尹海丹、郁万荣、多淑杰、潘燕微商业银行存款业务

694 二等奖广州城建职业学院刘冬娜、方岩、陈艳梅、翁银雪新农村墙绘可视化设计

695 二等奖东莞职业技术学院邓婵、丁度坤、范启亮、郭轩项目二机器人搬运工作站的仿真与调试

696 二等奖东莞职业技术学院钟祯、张彦粉、李伟、龚修端月饼盒烫金与模切成型

697 二等奖广东南方职业学院张翠丽、周慧欣、陈淑贞中餐宴会设计与服务

698 二等奖广州华商职业学院林琳、方雪、周期、黄飞凤红棉岁月，英雄故事听我讲

699 二等奖广东环境保护工程职业学院蔡东方、陆俞辰、卢东亮、王逸飞精思国计，细量民生—流量计量器具的安装与检测

700 二等奖惠州卫生职业技术学院郑良芬、王艺艺、高娟关爱母婴、守护健康《小儿营养保健与新生儿的护理》

701 二等奖广东碧桂园职业学院李森萍、刘志忠、胡勇军 “智能建造人机协同” 建筑机器人强化木地板安装

702 二等奖广东江门中医药职业学院彭颖、覃国波、黄思琪提高抢救技能筑牢生命防线

703 三等奖广东轻工职业技术学院谢海东、汪利群、吴峥强、林晓钦精密制造“技+艺”融合-工艺品精雕


704 三等奖广东轻工职业技术学院黄鹏、王芳楷、廖昌明、高又春车床电气控制电路的装调与故障排除

705 三等奖广东轻工职业技术学院栗瑞敏、赵小娟、吴少微、徐丽智慧快检，守护餐桌安全—日常食材快速检验技术

706 三等奖广东交通职业技术学院李国杰、张胜宾、孟国强、蒋翠翠校企融合，书证融通——宝马电气系统检修

707 三等奖广东交通职业技术学院杨英、吴伟平、陈殊、林伟锋水质监测器系统 app 开发

708 三等奖广东水利电力职业技术学院王纯、吴茹、袁琰星、赵婷婷高效智能的会议组织与服务

709 三等奖深圳职业技术学院徐德秀、叶雪、刘学军 “构筑新旧传承，助力乡村建设”——景墙材料与构造

710 三等奖广州民航职业技术学院邱晓慧、孔磊、陆晶文、邢瑞山识结构损伤以匠心护航——飞机蒙皮修理

711 三等奖广东松山职业技术学院王影、曾庆宇、张毅、彭湖红色文化展馆多维空间设计表现

712 三等奖广东农工商职业技术学院刘伟、方弄玉、张文梅、符气叶精准控制，匠心传动，传送带电机的 PLC 控制

713 三等奖广东农工商职业技术学院管卫华、廖中文、李敏、肖熠琳新能源汽车空调系统检修

714 三等奖广东科学技术职业学院林培效、李飞、王贵满、彭霞锋“理、虚、实一体、测、算、绘”融通——工程测量员岗

位实训

715 三等奖广东食品药品职业学院易少凌、罗芬、魏金津、马娟安全护航，匠心制药

716 三等奖广东职业技术学院吴佳林、孙芮、刘佳明、谭耀红魅力无纺，多彩生活

717 三等奖广东建设职业技术学院石永洋、曹棣泉、刘武军洞察零售业的数据价值与可视化展现

718 三等奖广东女子职业技术学院谢秀红、贺聪华、徐万清、黄娟中国传统图案在服饰品的设计应用

719 三等奖广东机电职业技术学院朱旭义、张彩红、冯仙群、郭灿彬桌面清洁器的机器人装配应用设计


720 三等奖广东机电职业技术学院徐梦月、洪易娜、谢志贤、岳程翔 “归巢”适老化家居配饰设计

721 三等奖广东邮电职业技术学院蒋银鸽、余文斗、宁德显初创企业信贷业务

722 三等奖清远职业技术学院李迪华、余嘉飞、刘雪萍、谢绍青玩转音乐——奥尔夫音乐本土化教学

723 三等奖广东工贸职业技术学院安丽、喻怀义、陈蔚珊、魏志安地面点高程测量方法——水准测量

724 三等奖广东工贸职业技术学院张东霞、解梦秋、彭鹏峰、刘小平新能源汽车空调系统维护与检测

725 三等奖广东工贸职业技术学院黄淑雯、崔聿、李王芳、杨嘉伟卖场魔术师--“秀”外“慧”中赋能陈列

726 三等奖广东司法警官职业学院龚亭亭、贾甲麟、闫燕、林岚筑坚固屏障，展别样“警色”

727 三等奖广东司法警官职业学院赵天虹、曾德梅、张庆婕、燕明亮监狱行刑大揭秘——从收监到释放

728 三等奖广州体育职业技术学院董超、王思明、宋占孔、纪昌飞珍爱生命自游自在——水中生存技能

729 三等奖广州体育职业技术学院张卫、陈德志、张志斌、梁志翔网球体能训练设计与实施

730 三等奖中山火炬职业技术学院张娜、郭艳峰、刘敬、淮亚红上善若水，厚德载药——纯化水管理 GMP 应用

731 三等奖江门职业技术学院杨镇首、孙红军、严焰、陈虹安科技抗疫传感先行—温湿度的检测

732 三等奖珠海城市职业技术学院杨裕、关景新、李炳练、马维旻智慧工厂大数据可视化项目设计与开发

733 三等奖广州涉外经济职业技术学院许晓如、刘霞、王芬、杨笛安全为翼，冲上云霄——特情处置

734 三等奖广州南洋理工职业学院许文燕、赖刘生、杜玉香、崔嘉伟工业机器人“智”造加工单元交互联调

735 三等奖惠州经济职业技术学院裘伟超、林世鹄、陈宝丹、朱红新零售背景下配送作业方案设计与实施


736 三等奖肇庆医学高等专科学校朱亚利、张少姬、宋佳、郭固楠因”齿“而美——牙体缺损的全冠修复

737 三等奖广东理工职业学院张宇、张冰洁、朱强、康国坡智能制造产线仿真

738 三等奖广州华南商贸职业学院何开红、顾葳蕤、范莉娟、张娇规则游戏组织与开展

739 三等奖广州华南商贸职业学院汪倩、肖园琼、王怡文、万可萌大国匠心技艺，民俗文化传承—手机端美食 APP 界面设计

740 三等奖广州城市职业学院黎颖、张婧婧、肖燕武、许玲 3D建筑之美--住宅剖立面设计

741 三等奖广州城市职业学院范荟、郝书池、葛斐、杨娟科学评估积极预防快速处置充分善后——培养高职社

区管理与服务人才应急能力

742 三等奖广东工程职业技术学院鲁周静、林晓庆、魏亚遇、丘穗敏装配式墙板制作与安装

743 三等奖广州铁路职业技术学院申富林、郭咏辉、李娟高速铁路轨道精密测量

744 三等奖广东科贸职业学院赵璐、谭心湄、江明磊绿色农产品的文艺范儿——文创农业产品设计

745 三等奖广州科技贸易职业学院陈锦生、王明刚、靳丽丽、陈智凯轨道交通安全守护神之轨道交通信号

746 三等奖广州科技贸易职业学院黄文杰、谌颃、余骞、陈静 “测”神州经纬，“量”祖国山河

747 三等奖中山职业技术学院李万里、陈文源、余敏霞、马刚强鲁班锁的制作

748 三等奖东莞职业技术学院刘志伟、舒雨锋、李笑勉、梅阳寒典型轴类零件的编程与加工

749 三等奖东莞职业技术学院洪恬、蔡莉、杨慧娟、邝雪平幼儿歌曲演唱综合技能培养

750 三等奖广东南方职业学院刘美君、樊赛兰、周喻、袁嘉敏小区域控制测量

751 三等奖广州华商职业学院苏瑾瑾、李名亮、赵淑娟、曾丽绿色钢筋混凝土施工技术


752 三等奖广州华夏职业学院叶廷、徐杨洁、易江华、杜北江红色旅游精品小团地接服务技能

753 三等奖广州华夏职业学院吴岳芳、杨书婷、周晓婧、李艺鹿鸣堂国学馆设计

754 三等奖广东创新科技职业学院逯铮、李艳、侯俊娜、张海波 “疫言为定、花好月圆”中式婚宴设计

755 三等奖广东生态工程职业学院林秀灵、黄晶、麦任娣、吴世军 “花经济”助力乡村振兴球根花卉生产技术

756 三等奖广州卫生职业技术学院符勤怀、陈千、何莉雅、刘成武敞开“心”“肺”，诊辨知疾

757 三等奖惠州工程职业学院林秀莲、陈晓茹、周颖军、杨丽华现代插花

758 三等奖广东江门中医药职业学院黄嘉慧、罗惠文、马立娟、叶美琴针巧灸香促健康

759 三等奖广东茂名农林科技职业学院李明俊、王敏、曹嫚嫚、刘洋洋了不起的宠物医生-从数字到病例

760 三等奖湛江幼儿师范专科学校杨国龙、叶华明、陈煜、许智锋工业机器人的典型应用之码垛搬运

761 三等奖湛江幼儿师范专科学校李钊、陈建榕、占宇琦、庄秋怡健全幼儿人格，康护幼儿体魄——幼儿园健康教育活动设

计与指导

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矩形

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7.3 学生获奖情况

中国畜禽种业中国畜禽种业中国畜禽种业中国畜禽种业2020.12

作者简介：李明俊（1990-），男，河南省开封市人，中级讲师，研究方向：动物解剖学。

鸭和鱼骨骼标本制作及在教学中的应用李明俊王敏陈亦霖韩锐曹嫚嫚（广东茂名农林科技职业学院 525000）

摘要：为了更好地让学生了解动物运动系统的组成和特点，笔者指导学生利用传统方法制作了鸭和鱼的骨骼标本。经选择动物、处死动物、剔除肌肉、脱脂、漂白、组装等操作，标本制作完整。并将该标本用于教学，收到良好教学效果。关键词：鸭；鱼；骨骼标本；制作；教学

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3 中美贸易摩擦中生猪养殖产业发展的对策中美贸易摩擦出现后，生猪养殖产业的发展对策和战略主

要包括以下几个方面，首先可以通过生猪养殖饲料及猪种进口

渠道的多元化进行缓解，进口渠道的多元化是应对中美贸易摩

擦的基本战略措施。在我国农产品市场进口来源中，虽然从美

国进口的总量和品质相对较高，优势比较明显，但美国并不是

中国进口农业产品的唯一来源地，在美国对中国发起贸易战的

时候，许多国家会跟进美国留出的对中国贸易缺口。如俄罗斯

大概每年向国外出口畜禽肉产品总量达到 80t 左右，同时俄罗

斯的植物油可以作为之前美国进口大豆油的替代产品，更有巴

西等国家表明可以为中国提供大量的农产品供应，多方均有很

大的合作空间，在 2019 年第一季度的数据显示，中国从巴西

进口的猪肉产品相比往年提高 140%左右 [5]。

我国生猪养殖产业对中美贸易摩擦出现后还可以通过提高

我国饲料产业及生猪养殖生产水平和效率来缓解，从根本上避

免中美贸易摩擦对我国生猪养殖产业发展带来的负面影响。主

要可以通过改善加强我国饲料行业、生猪养殖的技术应用推广

及高新技术的应用等方面进行；改善生猪养殖饲料配方营养水

平，提高地方饲用资源的利用，降低对进口饲料原料的依赖程

度，提高我国本土饲料原料加工和生产水平。还可以通过出台

完善我国饲料和生猪养殖生产的优惠政策，提高从业者的生产

积极性。

4 结束语中美贸易摩擦对我国各行各业均带来了一定的负面影响，

但其中也存在一定的机遇，在生猪养殖产业中应采取积极的应

对战略，充分发挥我国自身畜牧养殖生产水平，是在中美贸易

摩擦环节下良好发展我国生猪养殖产业的关键途径。

参考文献：

[1] 李新兴, 蔡海龙, 蔡松锋, 谢家琦.RCEP 未来发展前景及潜在影响研

究———基于 GTAP 模型[J].宏观经济研究,2020(7):165-175.

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动保协会 2018 年年会暨动保行业健康发展论坛华丽落幕[J].四川畜

牧兽医,2019,46(2):8-9.

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应———基于 MRIO 模型的分析 [J]. 数量经济技术经济研究 ,2018,35

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评估[J].中国动物检疫,2018,35(4):21-25.

[5] 戴枫,陈百助.全球价值链分工视角下中美贸易对美国就业的影响:基

于 WIOT 的结构性分解[J].国际贸易问题,2016(10):62-73.

近年来，学习动物医专业的学生越来越多，动物骨骼标本

是学生了解动物运动系统组成和特点的重要教学工具，其直

观、形象的特点可增强学生的感知和理解能力，同时可活跃课

堂气氛，使学生主动学习，提高教学效果 [1,2]，为后续学习打下

坚实基础。

骨骼标本可分为整体和散装两种类型 [3]。散装骨骼标本即

为各个部件骨骼，整体骨骼标本是将骨骼按照原来的自然位置

安装为一整体，本文所做骨骼标本为整体骨骼标本。

1 材料1.1 实验器具

直头镊子、直头剪刀、新刀片、牙签、注射器（针筒）、

刷子（牙刷）、不锈钢盆、铁锅、煮水壶、不锈钢漏盆、塑料

篮子镂、塑料量杯（量筒）、笔记本、笔。

1.2 实验药品

无水乙醇、双氧粉（昌乐富强化工科技公司）、洗洁精、

胶水（502）。1.3 实验动物

成年鸭、鲶鱼为学院自养。

2 制作方法2.1 选择动物

选取发育成熟，体形正常，结构完整的鸭和鲶鱼（如图

1）。2.2 处死动物

采用颈静脉放血方法小心处死鸭，注意不能破坏颈部骨

骼；采用离水法处死鲶鱼。

2.3 剔除肌肉2.3.1 去掉毛发及其附属物

将鸭放入烧开的水中烫 30s，将其全身羽毛烫透后捞出，

动态

41

7.4 教研科研成果

中国畜禽种业中国畜禽种业中国畜禽种业中国畜禽种业 2020.12

图 1 选择用于骨骼标本制作的动物鸭（a）和鱼（b）

用手拔掉其全身羽毛；用刀刮去鲶鱼

的鳞片。

2.3.2 去除内脏对鸭，用镊子轻夹腹壁肌肉，用

剪刀剪开腹腔壁，扒出内脏，不要

损坏胸骨和肋骨；鲶鱼的内脏要等到

肌肉剔除后才能清除 [4,5]，以免伤到

鱼骨。

2.3.3 鸭肌肉的剔除将去除内脏的鸭放入锅中煮 1h，

闷 30min，之后将鸭捞出，用刀片剔

除大块肌肉，用刷子去除附着在骨骼

上面的小肌肉 [6]。此步骤可反复进

行，直至将所有肌肉剔除。

2.3.4 鱼肌肉的剔除用锋利的刀小心将鱼身上大块的

肉切除，之后即可看到鱼内脏并小心

将其取出，剩下小块的肉放入烧开

的水中烫 10～15min，用刷子将小块肉刷掉。

2.4 剔除脑将注射器针头经枕骨大孔处伸入颅腔，变换方向搅碎脑

髓，先用注射器抽出搅碎的脑髓，后用注射器吸水后向颅腔里

面射把残余的脑髓冲出来。

2.5 脱脂将剔除肌肉的所有骨骼清洗干净，放在太阳光下暴晒，逼

出其中的脂肪 [7]。用洗洁精洗去脂肪后再暴晒，直至脱去骨骼

中绝大部分脂肪。

2.6 漂白漂白粉和开水按照重量比 1:5 混合、溶解后将骨骼放进去

浸泡 12h 左右。待骨骼变成洁白时取出，清水冲洗干净晒干。

2.7 组装按照动物骨骼解剖结构，用胶水将骨骼一一连接起来。用

不锈钢丝穿入锥孔，将脊椎连接起来。

2.8 固定标本根据动物骨骼主体的长短，宽窄选择合适的木板作为固定

标本的台板。依据动物骨骼重量选取粗细合适的金属丝作为支

柱，依据动物骨骼主体长短和四肢位置确定支柱的数量和位

置。在台板中线或相应位置选取合适的距离钻孔。将金属丝穿

透台板，在台板底部的小槽中固定（如图 2）。3 骨骼标本在教学中的应用

在动物医学专业《动物解剖学》一课中，动物的运动系

统-骨骼这一章节内容重要且抽象，学生学习难度大。在教学

中，如果单纯利用教材和图片很难让学生掌握动物骨骼构成。

而利用动物骨骼标本教学则可以很好地解决这一教学难点 [8]，

骨骼标本可以直观、形象地告诉学生动物全身骨的构成，各骨

骼的形态、名称及数量等，可以让学生迅速掌握该部分的知识

点。并在此基础上帮助学生学习肌肉分布，神经分布，血管分

布等知识，为后续学习《兽医外科学》《兽医临床实践技术》

和《动物生理学》等课程打下坚实的基础。

4 结论动物骨骼标本的制作要经历选择动物、处死动物、剔除肌

肉、脱脂、漂白、组装等复杂且耗时的过程，对学生来讲有难

度。在笔者指导下，学生首先学习了相关动物骨骼系统的知

识，接着给学生讲述了制作骨骼标本的大致过程，然后带领学

生完成骨骼标本制作。在整个过程中，学生的学习热情很高，

动手能力很强，他们也学会了团队协作，提高了其做事要严谨

的意识。

将该标本用于《动物解剖学》课堂教学中可以活跃课堂气

氛，调动学生学习积极性，使学生对这门课产生兴趣，收到了

良好的教学效果。

参考文献:

[1] 潘红平,陈风华,王晓丽,等.动物标本的制作及其在教学中的功能[J].广

西大学学报(自然科学版),2007(S1):357-359.

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[8] 张进良.动物解剖学教学过程中的几点思考[J].考试周刊,2017(43):41,

177.

图 2 组装和固定后的骨骼标本鸭（a）和鱼（b）

动态

42

养殖与饲料 2021年第 02期

1例猫下泌尿道疾病的诊治李明俊王敏韩锐

广东茂名农林科技职业学院，广东茂名 525000

摘要中华田园猫 1只，年龄 1岁，雄性未去势，体重 5.6 kg。2020年 3月 20日，猫主人发现该猫少尿和无尿、伴有精神沉郁、食欲减少等症状。为了对该猫进行诊治，试验采用问诊、临床检查、实验室检查、影像学检查进行诊断和治疗。结果表明：经临床检查患猫膀胱肿大，实验室检查发现患猫脱水、钾升高、酸血症，血尿，蛋白尿。彩超检查提示膀胱内液区可见多个点状回声无声影，余液区清楚，结合主诉高度怀疑猫特发性膀胱炎。治疗以消肿止痛、抗菌消炎为主并对症治疗，住院治疗 3 d，在家治疗 2 d，预后良好，6 d后复查，各项指标均正常，说明诊断准确，用药方案合理。

关键词猫；下泌尿道疾病；诊断；治疗

收稿日期：2020-10-28李明俊，男，1990年生，硕士，中级讲师。

近年来，随着宠物猫越来越多，猫下泌尿道疾病也越来越常见[1]。猫下泌尿道疾病是指会对下泌尿系统造成一系列症状的疾病，具体包括膀胱炎、尿道炎、尿道狭窄或者尿道塞子而引起的阻塞性尿路病等[2]。猫下泌尿道疾病的发生与多种因素有关，除感染因素外，在性别上，临床上公猫的发病率远高于母猫[3]，这是因为公猫尿道狭窄且长导致的，特别是过早绝育的公猫由于其尿道等器官发育不完全会增加尿道阻塞的风险[4]。在体型上，肥胖猫的发病率较高[5]，普遍认为肥胖猫不爱运动，懒得喝水和排尿，导致尿液浓缩，容易引起尿结晶沉积，促使下泌尿道疾病的发生。有研究[6]表明，在多猫家庭中，猫患下泌尿道疾病的机率更高，这与多猫造成的紧张感有关。

1 病例介绍中华田园猫，年龄 1岁，雄性未去势，体重 5.6 kg。

2020年 3月 20号就诊，主诉：最近几天猫蹲猫砂盆时间很长，但仅排出少量尿液，今天（20号）没有排尿，且精神萎靡，不食。

2 诊断2.1 临床检查

患猫体温 39 ℃，呼吸 40次/min，心率 168次/min，有脱水，触诊膀胱肿大。2.2 实验室检查

1）血液常规检查。从表 1可知，红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积和平均红细胞血红蛋白含量均升高，说明猫有脱水；中性粒细胞计数升高，说明可能有感染。

2）血气检查。从表 2可知，碱剩余降低，钾离子浓度升高，说明猫在不能排尿的情况下导致了代谢性酸中毒，进而导致高血钾。

3）尿常规检查。从表 3可知，该猫有蛋白尿，加之猫尿闭且膀胱肿大，因此认为可能是膀胱炎引起的蛋白尿。尿液中红细胞数量明显升高，说明该猫血尿；尿沉渣镜检未发现结晶等异常情况。

4）B型超声检查。从图 1可知，双肾体积正常，包膜清晰，皮质回声均匀，未见明显异常。膀胱充盈，内液区可见多个点状回声无声影，余液区清楚，

疫病防控 95· ·

DOI:10.13300/j.cnki.cn42-1648/s.2021.02.047


表 1 血液常规检查结果

检查项目结果参考值

白细胞计数[WBC]（103/μL） 18.4 5.5~19.5

红细胞计数[RBC]（106/μL） 10.3↑ 5~10

血红蛋白[HGB]（g/dL） 19.1↑ 8~15

红细胞压积[HCT]（%） 53.22↑ 24~45

红细胞平均体积[MCV]（fL） 52 39~55

平均红细胞血红蛋白含量[MCH]（pg） 18.5↑ 12.5~17.5

平均红细胞血红蛋白浓度[MCHC]（g/dL） 35.8 27~36

血小板计数[PLT]（103/μL） 235 300~800

平均血小板体积[MPV]（fL） 15.1 12~17

淋巴细胞计数[WBC-LTM#]（103/μL） 2.45 1.5~7

单核细胞计数[WBC-MONO#]（103/μL） 1.1 0~1.5

中性粒细胞计数[WBC-NEU#]（103/μL） 14.9↑ 2.5~14

嗜酸性粒细胞计数[WBC-EOS#]（103/μL） 0.01 0~1

注：“↑”表示检查结果高于参考值，“↓”表示检查结果低于参考值，下同。


pH值[pH] 7.21 7.21~7.41

二氧化碳分压[pCO2]（mmHg） 41 28~50

氧分压[pO2]（mmHg） 44 35~45

钾[K]（mmol/L） 6.27↑ 3.3~4.5

钠[Na]（mmol/L） 153 149~157

钙[Ca]（mg/dL） 0.94↓ 1.11~1.38

氯[Cl]（mmol/L） 117 117~127

乳酸[LACT]（mmol/L） 2 0~0.25

碳酸氢根离子[HCO3]（mmHg） 16.4 16~23

碱剩余[BE]（mmol/L） -10.9↓ -8.5~-1.5

表 2 血气检查结果

表 3 尿液常规检查


白细胞（个/μL） 0 0

酮体（mmol/L） 0 0

亚硝酸盐 0 0

胆红素（μmol/L） 0 0

尿胆原（μmol/L） 0 0

蛋白质（g/L） 3.0↑ 0

葡萄糖（mmol/L） 0 0

尿比重（mmol/L） 1.025 1.015~1.060

潜血（个/μL） 200↑ 0

pH 7.0 5.5~7.5

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排除了肾结石、膀胱结石和肿瘤的可能性。2.3 诊断结果

综合临床症状和检查，我们能得到的提示有：膀胱肿大、脱水、钾升高、酸血症，彩超提示膀胱内液区可见多个点状回声无声影，余液区清楚。尿常规提示血尿，蛋白尿。

结论：结合主诉和临床症状，优先考虑猫下泌尿道疾病，主要考虑猫特发性膀胱炎。

3 治疗由于患猫尿闭、膀胱充盈、脱水、血尿，因此本

病例建议消肿止痛，抗菌消炎，补充体液，加强护理。治疗方案如下：先对猫进行膀胱穿刺，抽出部分尿液，再对其安置导尿管。静脉注射 0.9%氯化钠溶液 50 mL、头孢唑啉钠注射液 100 mg、三磷酸腺苷注射液（ATP，2 mL∶20 mg）1 mL、辅酶 A 30 IU、止血敏 50 mg、注射用布托啡诺 0.5 mg。咪尿通泡腾饮水片溶于水中让猫饮用。以上药物连用 3 d，根据血常规和尿常规指标酌情增减。

治疗第 1天后，患猫血尿和脱水状况有所好转，但依然不食，在医院比较紧张，会主动攻击人。治疗第 2天后尿液颜色明显变淡，但患猫依然很紧张，不食。治疗第 3天，拆除导尿管，患猫能顺利排尿，轻微血尿。第 4天，主人将患猫接回家喂药护

理，建议饲喂猫泌尿道处方粮。第 5天，患猫回家后很放松，吃喝正常，大小便正常，轻微血尿，建议继续喂药，饲喂猫泌尿道处方粮。

4 讨论本文所述患猫表现为排尿困难、尿闭、不食、喜

卧嗜睡，经一系列的检查最终怀疑该猫所患疾病为下泌尿道疾病中的自发性膀胱炎。该猫在患病前几天搬了新家，在新家一直躲起来（处于紧张状态），且目前认为自发性膀胱炎的病因与猫的生活环境变化及紧张感有关，这些因素会影响神经系统及内分泌系统[7]，说明该猫患病的原因很可能是生活环境改变。在自发性膀胱炎的诊断方面，目前普遍采用的方法有问诊、触诊、血常规检查、尿液检查、X光检查及超声检查[8-9]。本病例中，经与主人沟通，做了问诊、触诊、血常规检查、尿液检查及超声检查，从这些检查中获得重要信息，为疾病诊断提供了帮助。在自发性膀胱炎的治疗方面，对于尿闭的猫应先进行导尿，膀胱充盈的状态下应先用膀胱穿刺的方法导尿，帮助缓解膀胱内压及胀痛感，然后再安置导尿管[10]。止痛剂已被证实有缓解疼痛及排除焦虑情绪的作用[11]，采用抗生素抗菌消炎也是必要的。在猫不食的情况下，可以采用能量合剂与维生素 C配伍进行静脉输液，同时饲喂猫下泌尿道处方粮也

注：A左肾；B右肾；C膀胱；D膀胱。图 1 肾脏和膀胱的 B型超声检查影像

疫病防控 97· ·


对膀胱炎有治疗作用[12]。让猫多喝水是预防本病最好的方法。

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农业大学，2018.

【责任编辑：胡敏】

蜱虫的诊断及防治李雨卓郭文洁 *

沈阳工学院生命工程学院，沈阳 113122

摘要蜱虫是一种常见的体外寄生虫，不仅可以侵害家畜，而且也可以感染人。大量的蜱虫叮咬可造成家畜消瘦、贫血，严重时还可引起家畜麻痹或瘫痪，甚至死亡。同时蜱虫也是多种病毒的传播媒介和储存宿主，如衣原体、支原体、细菌、病毒等，对养殖业造成巨大的经济损失，也危害着人类的健康。因此，蜱虫的防治对养殖业具有重大的意义。

关键词蜱虫；流行病学；诊断；治疗；预防

收稿日期：2020-09-15*通讯作者李雨卓，男，1998年生，本科在读。

1 蜱虫的流行病学蜱虫俗称草爬子、草别子、狗豆子，是一种节肢

动物，寄螨目，蜱总科。蜱总科可分为软蜱科和硬蜱科[1]，硬蜱多分布在自然界，如草原、森林、山地等；软蜱栖息隐蔽的场所，如兽穴、鸟巢及人畜住的缝隙里[2]。硬蜱虫体呈椭圆形，背腹扁平，背面稍隆起，硬蜱虫背侧有盾板，能够传播细菌、病毒、原虫等，而软蜱没有盾板。虫体未吸血时呈芝麻粒至米粒大

小，饱血后虫体可膨胀至蓖麻籽大。家畜多在采食放牧过程中感染，多于 3-6月发病，常寄生于动物体表，是一种暂时性体表寄生虫，依靠吸食宿主血液为生。蜱虫的发育分为 4个时期，包括卵、幼虫、若虫和成虫。寄生在宿主体表面的成虫交配后雄虫会立即死亡，雌虫饱血后会脱离宿主爬至墙角、草根、圈舍等，并在表层缝隙产卵。在适宜的环境条件下，幼虫 2~4周孵出，幼虫形似若虫，但体积较小，经 1~4周蜕皮成为若虫。若虫爬至草尖、墙面、树干

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

疫病防控98· ·

江西农业学报 2021，33( 04) : 103～107Acta Agriculturae Jiangxi

http: / /www．jxnyxb．com

DOI: 10．19386 / j．cnki．jxnyxb．2021．04．18

mcr－1 阳性类噬菌体质粒与 F33 ∶A－ ∶B－质粒共整合形成的融合质粒的生物学特性分析

王亮亮1，王倩倩1，朱莹莹1，庞子峰1，朱玉喜1，植婵萍2，潘玉善1，刘建华1，贺丹丹1*

收稿日期: 2020－08－18基金项目: 国家自然科学基金项目( 31702295) 。作者简介: 王亮亮( 1997─) ，男，河南周口人，硕士，从事兽医药理毒理学研究。* 通信作者: 贺丹丹。

( 1．河南农业大学，河南郑州 450000; 2．广东茂名农林科技职业技术学院，广东茂名 525000)

摘要: 为了分析猪源大肠杆菌中 mcr－1 阳性不可接合类噬菌体质粒 pD72－mcr－1 与 blaCTX－M－55阳性可接合

的 F33 ∶A－ ∶B－质粒 pD72－F33 融合形成的共整合质粒 pD72C 的生物学特性，评估该融合质粒对 mcr－1 传播的

潜在作用，本实验采用生长曲线测定、质粒稳定性实验、竞争性实验和接合实验，测定了融合质粒 pD72C 和亲

本质粒 pD72－F33 对宿主菌的适应性、融合能力和扩散能力。结果表明: 融合质粒 pD72C 在无抗生素的环境中

能稳定传代 9 d，对宿主菌有适应性优势，且比亲本质粒 pD72－F33 具有更好的竞争优势; 该融合质粒表现出较

高的融合频率和接合频率，说明该融合质粒能够扩展菌株的耐药谱并促进粘菌素耐药基因 mcr－1 的传播。

关键词: 共整合质粒; mcr－1; 质粒稳定性; 适应性代价; 融合频率

中图分类号: S852．6 文献标志码: A 文章编号: 1001－8581( 2021) 04－0103－05

Biological Characteristics of Co－integrated Plasmid Derived frommcr－1－positive－phage－like Plasmid and F33 ∶A－ ∶B－Plasmid

WANG Liang－liang1，WANG Qian－qian1，ZHU Ying－ying1，PANG Zi－feng1，ZHU Yu－xi1，ZHI Chan－ping2，PAN Yu－shan1，LIU Jian－hua1，HE Dan－dan1*

( 1． Henan Agricultural University，Zhengzhou 450000，China;

2． Guangdong Maoming Agriculture and Forestry Technical College，Maoming 525000，China)

Abstract: In order to analyze the biological characteristics of the cointegrated plasmid pD72C formed by the fusion of non－conjugative mcr－1－positive－phage－like plasmid pD72－mcr－1 and conjugative blaCTX－M－55 positive IncF33 ∶A－ ∶B－plasmid pD72－F33 and evaluate the potential role of the fusion plasmid in mcr－1 transmission，the growth curve test，plasmid stability test，com-petition experiment，conjugation assay were used to determinate the fitness，fusion and diffusion potentiality of the co－integratedpD72C and the parental plasmid pD72－F33． The results showed that the fusion plasmid remained stable for 9 days of passage inan antibiotic－free environment，presented a adaptive advantage for its host，and showed higher fitness than the parental plasmidpD72－F33． Moreover，the fusion plasmid exhibited the relatively high fusion frequency and conjugation frequency． Fusion plasmidscan expand the drug resistance spectrum of strains and promote the transmission of drug resistance gene mcr－1．

Key words: Co－integrated plasmid; mcr－1; Stability of plasmid; Fitness; Fusion frequency

F33 ∶A－ ∶B－型质粒是多重耐药质粒 IncF 型质

粒中最为流行的亚型之一，它广泛存在于肠杆菌

科细菌，尤其是大肠杆菌中，是介导 fosA3、blaCTX －Ms

和 rmtB 等耐药基因快速传播的主要载体［1－3］。F33 ∶A－ ∶ B－型质粒除了能够借助 IS26 和 IS1294元件捕获和传播抗性基因外，还能够获得 IncN1、IncI1、IncＲ和 IncX1 型质粒的一些片段成为多复

制子质粒［3］。本课题组在研究猪源大肠杆菌中

mcr－1 的水平转移能力时，首次发现在接合过程

中，F33 ∶A－ ∶ B－型质粒 pD72－F33 捕获了大约 96

kb 的 mcr－1 阳性类噬菌体质粒 pD72－mcr－1 形成

融合质粒 pD72C; 序列分析发现，其质粒融合机制

是 pD72－F33 上 1 个拷贝的 IS26 攻击 pD72－mcr－1 上 8 bp 的目标位点( CAGCATTT) ［4］。

质粒介导的粘菌素耐药基因 mcr－1 已经成为

全球关注的重点。自 2015 年 mcr－ 1 被首次报道

后，该基因在世界范围内不同来源的不同菌种中

广泛出现［5－7］。不同的 mcr－1 阳性不相容群质粒

不断被报道，尤其是较流行的 IncI2、IncX4 和

IncHI2 型质粒，它们所具有的较高的稳定性和适

应性优势对 mcr － 1 的快速传播起到重要作

用［8－10］。除了可接合性质粒，Tn6330 ( ISApl1－mcr－ 1 － ISApl1 ) 与 mcr － 1 的快速传播密切相关，

Tn6330 能够通过形成环形中间体形式促使 mcr－1插入到其它细菌的染色体或质粒的 TA 富集

区［11－14］。目前报道的 mcr－1 阳性类噬菌体质粒具

有较高的核酸序列同源性，其中大多数不具有自

身转移性，因此这类质粒对 mcr－1 的快速水平传

播作用具有局限性［4］。本研究中的 mcr－1 阳性类

噬菌体质粒 pD72－mcr－1 具有不可接合性，然而，

可接合性 F33 ∶A－ ∶B－型质粒与之融合后的共整合

质粒具有可接合性，这暗示 F33 ∶A－ ∶B－型质粒能

够作为1个接合辅助质粒提供给不可接合质粒的

接合转移能力，进而促使 mcr－ 1 的快速传播［4］。质粒融合使质粒进化成携带更多耐药基因的质

粒，然而该融合质粒在受体菌中是否能够稳定存

在? 对受体菌是否产生适应性代价? 对该融合质

粒的融合频率和接合频率也不清楚。鉴于此，我

们研究了该融合质粒的生物学特性，评估了携带

mcr－1 多重耐药融合质粒在宿主菌中的适应性、融合和扩散能力，旨在为多重耐药融合质粒介导 mcr－1 传播的研究提供理论依据。

1 材料与方法

1．1 菌株信息

大肠杆菌 D72 菌株分离自猪肛门拭子样品;

接合实验得到携带融合质粒 pD72C ( blaCTX－M－55 阳

性 F33 ∶A－ ∶B－型质粒 pD72－F33 与 mcr－1 阳性类

噬菌体质粒 pD72－mcr－1 的共整合质粒) 的接合子

D72C、携带 pD72－F33 质粒的接合子 D72C－2。标

准菌 E． coli 25922 及工程菌 E． coli DH5α、E． coliC600、E． coli J53 为本实验室保存。采用微量肉汤

稀释法测定原菌、受体菌及接合子的最小抑菌浓

度( minimal inhibitory concentration，MIC) 。1．2 质粒转化实验

用小提质粒试剂盒分别提取两个接合子的质

粒，通过电转化分别将质粒转入受体菌 E． coliDH5a 中，获得携带 pD72C 的转化子 D1 和携带

pD72－F33 的转化子 D2。1．3 生长曲线测定

将接合子 D72C、D72C－2 和 E． coli C600 划线

培养后，分别挑取单菌落到 2 mL 空白 LB 肉汤中，

于 37 ℃下以 200 r /min 的转速过夜培养。分别测

定接合子 D72C、D72C－ 2 的母液的 OD 值，取 OD值最接近的母液进行下一步实验。从母液中吸取

200 μL 接种到含 20 mL 新鲜 LB 肉汤的锥形瓶中，

在 37 ℃下以 200 r /min 震荡培养。每隔 1 h 准确

吸取 200 μL 到 96 孔板中，平行吸取 3 次，以空白

的 LB 肉汤作为空白对照，测定在 600 nm 处的吸

光值 OD600。1．4 质粒稳定性实验

将接合子 D72C 和 D72C－2 分别划线于 LB 琼

脂培养基上，在 37 ℃ 下过夜培养。挑取单菌落，

将其接种至 50 mL 无抗 LB 肉汤中，过夜传代培

养，每株菌 3 个平行。吸取 50 μL 培养液，重复接

种至新的 50 mL 无抗 LB 肉汤中，连续传代 9 d。每隔 1 d 进行 1 次检测，吸取 20 μL 细菌培养液，

用灭菌生理盐水倍比稀释到合适浓度，在无抗 LB琼脂培养基上均匀地滴稀释液，每个稀释梯度滴 3个平行，过夜培养。参照本课题组先前研究报

道［4］中的引物，对在无抗 LB 琼脂平板上生长的所

有菌落进行 PCＲ鉴定。1．5 体外竞争性实验

为了评估融合质粒 pD72C 和亲本质粒 pD72－F33 对宿主适应性的影响，采用转化子 D1、D2 与

E． coli DH5a 进行体外竞争实验。挑取 D1 和 E．coli DH5a，分别接种于 2 mL 无抗 LB 肉汤中，于 37℃、200 r /min 摇床上培养 12 ～ 16 h。取 OD600 值最

相近的初始培养物母液，以 1 ∶ 1的比例均匀混合。分别取 100 μL 混合液接种到 100 mL 空白 LB 肉汤

中( 1 ∶1000) ，同时设 4 个平行，设此时为竞争性实

验 0 h。于 37 ℃、200 r /min 条件下震荡培养 24 h后，取混合液 100 μL 接种到 100 mL 新鲜空白 LB肉汤中( 1 ∶1000) 。此操作每 24 h 重复 1 次，连续

4 d。在培养的 0、24、48、96 h 时，对混合培养物各

取 50 μL 培养液，利用灭菌生理盐水将其倍比稀释

到合适的浓度，然后涂布于无抗 LB 琼脂板，在 37℃ 下培养 14 ～ 18 h。将从 LB 琼脂板上获得的单菌

落全部转接到 2 μg /mL 粘菌素 LB 琼脂板上，于 37℃恒温下培养 14 ～ 18 h。参照文献［4］报道的引

物，进行菌落 PCＲ鉴定。转化子 D2 的体外竞争实

验也进行相同的操作。最后，参照文献［15］的报

道，根据以下公式计算相对适应度ＲF: ＲF =( lgS1d1 －lgS1d0 ) / ( lgS2d1 － lgS2d0 ) ，式中 S1d1 和 S1d0

分别是转化子在 24、48、72、96 和 0 h 时的菌落数;

S2d1和 S2d0分别是 DH5a 在 24、48、72、96 和 0 h 时

401 江西农业学报 33 卷

的菌落数。当ＲF＞1 时，表明转化子相对于宿主菌

有竞争优势; 当ＲF = 1 时，表明质粒对宿主菌不产

生适应性代价; 当ＲF＜1 时，说明质粒对宿主菌造

成了较大的适应性代价，转化子处于竞争劣势。体外竞争性实验重复 3 次，结果取ＲF 的平均值。1．6 质粒的融合频率和接合频率

以原菌 D72 为供体，以利福平抗性 E． coliC600 为受体，通过接合实验观察 pD72－mcr－1 和

pD72－F33 ∶A－ ∶B－融合质粒的形成能力。分别在添

加头孢噻肟( 2 mg /L) 和利福平( 450 mg /L) 的麦康

凯琼脂板上，以及添加黏菌素( 2 mg /L) 和利福平

( 450 mg /L) 的麦康凯琼脂板上筛选接合子。进一

步以携带融合质粒 pD72C 和携带 pD72－F33 质粒

的接合子 D72C 和 D72C－2 为供体，以叠氮钠抗性

E． coli J53 为受体进行接合实验，在含有黏菌素( 2mg /L) 和叠氮钠( 100 mg /L) 、头孢噻肟( 2 mg /L)

和叠氮钠 ( 100 mg /L) 的琼脂板上筛选 J53 接合

子，以评价融合质粒和亲本质粒的水平转移能力。参照文献［4］报道的引物，对所有接合子进行 PCＲ鉴定。融合频率的计算: 融合频率 =携带融合质粒

pD72C 的接合子数量 /携带亲本质粒 pD72－F33 的

接合子数量。接合频率计算: 接合频率 =接合子数

量 / ( C600 数量+接合子数量) 。

2 结果与分析

2．1 接合子及原菌的药敏性

从表 1 可以看出: 原菌 D72 对多种药物耐药;

携带融合质粒的接合子 D72C 对头孢喹肟和粘菌

素的 MIC 值比受体菌分别升高了约 512 倍和 64倍; blaCTX－M－55阳性质粒 pD72－F33 的接合子 D72C－2 对粘菌素敏感，而对头孢喹肟的 MIC 值比受体

菌升高了约 512 倍。这些耐药表型与接合子携带

的耐药基因一致。2．2 细菌的生长曲线

以时间( h) 为横坐标，以不同时间点的平均

OD600值为纵坐标，绘制 D72C、D72C－ 2 和 E． coliC600 的生长曲线。最初 D72C、D72C－2 和 E． coliC600 母液的 OD600 值比较接近，分别为 0． 035、0．033和 0．031。图 1 显示，所有菌株均在 4 h 时达

到对数期，在 10 h 时达到稳定期，且各时间节点的

OD600值相近，3 株菌的生长曲线趋于一致，即接合

子和受体菌的生长能力相似。2．3 质粒的稳定性和竞争性

质粒的稳定性实验结果显示，在不含抗生素

的环境中，融合质粒 pD72C 和亲本质粒 pD72－F33连续传代 9 d 后仍能保持稳定存在，说明该质粒具

有较高的稳定性，其携带的抗性基因可以稳定遗

传。竞争性实验结果( 图 2 ) 显示，在培养过程中，

携带融合质粒 pD72C 的转化子 D1 和携带亲本质

粒 pD72－F33 的转化子 D2 数量都高于受体菌 E．coli DH5a 的数量，相对适应度ＲF 均大于 1，说明

融合质粒 pD72C 和亲本质粒 pD72－F33 对宿主菌

均呈现出适应性优势。融合质粒 pD72C 的相对适

应性高于 pD72－F33 的相对适应性，尤其是在 96 h时，质粒 pD72－F33 的相对适应度性稍微降低，而

融合质粒 pD72C 的突然增大，表现出比 pD72－F33更明显的竞争优势。

表 1 大肠杆菌分离株 D72、接合子

及受体菌的 MIC 值 mg /L

抗菌药 D72 D72C D72C－2 E． coli C600氨苄西林＞128 ＞128 ＞128 2头孢噻肟＞256 64 64 ≤0．125头孢他啶 32 8 8 ≤0．125粘菌素 8 8 ≤0．125 ≤0．125氟苯尼考 128 2 2 2阿米卡星 1 1 1 1卡那霉素＞256 8 8 8新霉素 128 8 8 8恩诺沙星 8 0．008 0．008 0．008环丙沙星 8 0．015 0．015 0．015磷霉素 ≤32 ≤32 ≤32 ≤32

图 1 接合子与受体菌的生长曲线

2．4 质粒的融合频率和接合频率

实验结果表明: 质粒的融合频率较高，为 6．43×10－3 ; 融合质粒 pD72C 和亲本质粒 pD72－F33 的

接合频率分别为 0．82×10－1和 3．19×10－1。

3 讨论

适应性是指耐药菌在没有药物选择压力的情

况下生长、定殖等方面的能力。细菌在药物的选

5014 期王亮亮等: mcr－1 阳性类噬菌体质粒与 F33 ∶A－ ∶B－质粒共整合形成的融合质粒的生物学特性分析

择压力下，可以通过染色体基因突变和质粒上耐

药基因的水平转移等获得耐药性以适应环境的变

化，但是当药物选择压力去除后，耐药菌株中基因

的突变、外源基因的表达以及质粒的导入等会对

宿主菌造成负担，其适应性可能低于敏感菌，在菌

群中逐渐成为劣势菌，这一现象称为适应性代价。一般说来，质粒和染色体抗性基因都会导致细菌

适应性代价的产生［16］。耐药菌的适应性研究主要

包括耐药菌是否能快速适应宿主或环境? 能否在

与敏感菌的生长竞争中成为优势菌群? 质粒的稳

定性是指质粒经复制后分配到子代细菌中的能

力。耐药质粒在宿主菌中稳定的传代可以保证耐

药性的维持，同时有更多的机会传递到其他菌中，

增加耐药基因传播的机会。

图 2 转化子体外竞争的相对适应性

本文通过融合质粒的稳定性、生长竞争性实

验，以及融合频率和接合频率来研究融合质粒的

生物学特征，以评估在接合过程中形成的多重耐

药融合质粒对宿主菌的适应性、融合和扩散能力。

本研究通过测定生长曲线、质粒稳定性、体外竞争

实验来分析 mcr－1 阳性类噬菌体质粒与 blaCTX－M－55

阳性 F33 ∶A－ ∶B－型质粒共整合形成的融合质粒对

宿主的适应性代价。发现接合子 D72C、D72C－2 和

E． coli C600 的生长曲线基本一致，表明该融合质

粒不影响宿主菌的生长能力。融合质粒和亲本质

粒 pD72－F33 在无抗条件下能够稳定传代 9 d，这

表明通过共整合形成的融合质粒比较稳定，有促

进多重耐药菌株形成的可能。体外竞争实验结果

表明融合质粒和亲本质粒不对宿主菌产生适应性

代价。何良英等［17］报道了犬源大肠杆菌 7A8 的

F33 ∶A－ ∶ B－型多重耐药质粒 pHN7A8 在宿主菌

JM109 中具有较高的稳定性和适应性。F33 ∶A－ ∶B－型质粒上存在的一些沉溺系统可以提高质粒的

稳定性和适应性，这可能是 F33 ∶ A－ ∶ B－型质粒在

肠杆菌中流行的主要原因［1］。本研究发现，携带

融合质粒的转化子的相对适应性高于亲本质粒的

相对适应性，尤其是在培养 96 h 时，融合质粒的相

对适应性突然增大，这表明质粒融合后，并没有因

为获得较大序列片段而增加宿主的负担，反而有

利于宿主的生存，其具体的原因有待进一步研究。本研究结果显示，该融合质粒具有较高的融合频

率和接合频率，说明可接合性 F33 ∶ A－ ∶ B－质粒能

够以较高的频率捕获不可接合性 mcr－1阳性类噬

菌体质粒，进而促进 mcr－1 的水平传播，并且在捕

获类噬菌体质粒这个较大的片段后，F33 ∶ A－ ∶ B－

质粒自身的转移性和适应性不受到影响。本研究

中携带 mcr－1 的类噬菌体质粒本身不具有可接合

性，而该质粒通过与可接合的 blaCTX－M－55 阳性 F33 ∶A－ ∶B－型质粒 pD72－F33 融合，不仅使自身具有了

可接合性，而且不对宿主菌产生适应性代价，同时

有着较高的融合频率和接合频率。该融合质粒所

具有的良好的生物学特性可能会促使 mcr－1 的快

速传播及多重耐药质粒的进化，这将导致多重耐

药菌的产生，从而给临床感染治疗带来挑战。以

后应进一步研究影响质粒融合的因素，为采取相

应措施避免多重耐药融合质粒的形成及传播提供

理论依据。

4 结论

mcr－1 阳性类噬菌体质粒和 F33 ∶A－ ∶B－质粒

共整合形成的融合质粒在宿主菌中能够稳定传

代，对宿主菌有较好的适应性优势，拥有较强的扩

散能力。

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( 责任编辑: 黄荣华)

7014 期王亮亮等: mcr－1 阳性类噬菌体质粒与 F33 ∶A－ ∶B－质粒共整合形成的融合质粒的生物学特性分析

第14卷第09期南方农业 2020年3月Vol.14No.09 SouthChinaAgriculture Mar.2020

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现代生活观念让人们的审美情趣逐渐趋于追求雅致的意境，而水族造景已经成为现代家居生活的新亮点。营造水族自然的景观，可以起到修身养性、陶冶情操、净化心灵的神奇作用。不同水草的精巧搭配，根须的盘绕交错，游鱼戏石的千般妙趣，构成水下仙境一般的水族美景。这不仅仅是艺术的营造，更是人们乐活的人生态度 [1]。基于此，从以下 3 个方面分析草缸水族造景的技巧。

1 草缸内生态圈的形成条件鱼和水草都是生命体，而草缸却是一个半封闭的空

间，为了让生命体在这样的环境里和谐地生存和生长，在草缸内营造一套完整的生态系统是至关重要的。这是一个互相依存的良性循环系统，鱼类排泄物和释放的二氧化碳可以为水草提供生长的养分，水草吸收养料后利用光合作用生成氧气，反过来把氧气供给鱼类呼吸。同时，水草因为鱼的养料生长茂盛，还可以有效调节水质，为鱼类创造出更好的生存环境。

2 草缸水族造景设计艺术分析2.1 水族造景构图原则

三分法是目前水族造景中常规运用的一种构图原则。其原理是将图像用三乘三的网格分为 9 个大小相等的区

域，其构图的合理性在于图像主体分布的合理性，即沿着两条横向分割线或者两条竖向分割线（三分法）分布，或在分割线的交叉处进行放置。从图 1 不难看出，沿着三分线分布的前景是由沉木所组成的景物主体，而三分点附近是人们视线的焦点。在进行水族造景的设计构图过程中，还要充分根据具体情况对三分法的 4 个不同的三分点以及 4 条不同的三分线进行灵活应用 [2]。

2.2 水族造景的布局在现代水族造景设计中，构图方式常采用凸起型和

凹陷型两种布局。构图布局互相搭配的变化，会构成不同视觉感受的一幅幅情趣盎然的水族造景作品。如图 2所示，U 型是凹陷型布局的核心，画面硬景观的组成部分为较高的水草或者是搭建的沉木和石头组合等，而画面的中央部分要对低矮的开放空间进行预留，就像是黄金切割点的构成比例对画面的均衡作用一样。主景部分放在黄金分割点上，进行视觉焦点的沟通。凹陷型水族造景的特点就是向后延伸凹陷部分，其透视感异常的强烈，也是水族造景设计中常用的手段，适合狭长大型的草缸水族造景设计 [2]。

凸起型造景设计的布局恰恰与凹陷型布局相反。中间的凸起部分安置沉木或山石构成的主体画面，配景画面则是循序往两边低斜。在视觉上感受到整体画面的两

收稿日期：2020-02-24

作者简介：欧志杰（1992—），男，广东清远人，硕士，助教，研究方

向为水产养殖。E-mail: [email protected]。

草缸水族造景设计技巧分析

欧志杰（广东茂名农林科技职业学院，广东茂名 525000）

摘要草缸营造的水族自然景观，可以起到修身养性、陶冶情操、净化心灵的作用，现已逐渐受到人们的青睐。基于此，以草缸水族造景的过程为例，对草缸内生态圈的形成条件进行探讨，阐述水族造景艺术设计的关键环节，从草缸的配置和造景材料的合理选配与处理、水族造景步骤、草缸的维护等方面进行介绍分析。

关键词草缸；水族造景；设计技巧；维护

中图分类号：S965.8　文献标志码：B　DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.09.072

图 1 水族造景中的三分法

欧志杰：草缸水族造景设计技巧分析

148

边左右对称，但画面凸起顶端上两个角的顶点位置，恰恰就处在黄金分割点的角度上。对画面整体平衡的掌控，是凸起型构图布局的基本要求，所以在造景之初不要太苛求硬景观的搭配，最需要考虑的是水草生长后的高度和位置，后面只能根据情况实施修剪和调整。

图 2 凹陷型布局

3 草缸水族造景设计技巧分析3.1 造景材料的选配与处理技巧3.1.1 硬景材料

用于铺设河流的白砂，必须用清水冲洗 3 ～ 5 遍；用来固定水草的水草泥，必须用清水清洗数遍；用于构造河岸和固定杜鹃根的青龙石，首先用盐酸进行酸洗，然后以刷子反复刷洗；作为树上果实的松皮石，先要用工具磨成小圆形，然后用清水洗干净。3.1.2 水草材料

目前草缸水族造景使用的水草包括红宫廷、虎耳草、矮珍珠、水榕、莫斯、细叶铁皇冠、日本篑藻、青叶草和红波等。把这些水草放在加有水草液肥的盛水容器中暂养 5 d，把不美观的枝叶去掉，把烂叶和黄叶清除，剪掉过长的根，留存 1 ～ 2 cm，然后配置浓度为 1.5 g·L-1

的高锰酸钾溶液，将处理好的水草浸泡 5 min，取出后以清水洗干净 [3]。

3.2 草缸水族造景步骤3.2.1 绘制水族造景的配置图

根据草缸的规格、构图设计的选择与布局以及造景需要的风格意境等因素，绘制草缸水族造景的全景图。3.2.2 泡缸消毒

鱼缸加满水，同时接通过滤水泵循环，加入高锰酸钾或食盐（3% ～ 5%）浸泡 1 ～ 2 d。目的是检查鱼缸的密闭性、消毒并去除鱼缸所夹带的有害物质 [4]。3.2.3 铺沙

清水洗干净鱼缸，将水草泥按照前低后高铺设整平（以 3 ～ 5 cm 厚为宜），呈现前低后高的“地势”，形成一个斜坡，倾斜角度为 20°～ 30°。3.2.4 造景

按照绘制好的设计图案，将造景石按照主石、副石、小碎石的顺序依次摆放。3.2.5 水草种植

3.2.5.1 无水种植法用喷壶喷水，将水草泥湿润透（勿形成积水），然

后将种子倒入手掌中，少量捏于两指之间均匀撒在水草泥上（撒种子时手尽量抬高）。用保鲜膜将鱼缸封起来，保证温度和湿度；并在发芽过程中，每天打开保鲜膜1～2 h，透气并少量喷水。架上水草灯，每天保持 10 h 光照。待种子发芽完成后，可以通过水草夹将其他现成的水草按照前、中、后景进行种植，注意保持水草之间的间距（相邻水草间的叶子不要重叠的间距为好）。3.2.5.2 水缸种植法（适用于冬季）

鱼缸铺上水草泥后，用喷壶喷湿，将种子均匀撒在水草泥上，并用水草夹种植其他水草。使用塑料膜遮挡，向鱼缸缓慢注入曝过气的自来水。注满水后将加热棒调节到 25 ～ 30 ℃，打开过滤装置，每天开灯 5 ～ 8 h，种子 5 ～ 7 d 即可发芽成景。3.2.6 开缸养水

鱼缸注满水后，大概过 2 ～ 3 h 再加入硝化细菌（具体用量请严格按照商品的使用说明）。养水 3 d 左右，可以放入闯缸鱼，用于水质的培养（养水的目的是让水中的有害物质降解转化，给鱼儿提供更为合适的生存环境）。养水 10 d 左右，待水体建立较为稳定的生态系统后，即可放入要养的鱼。3.2.7 鱼儿过水

将鱼袋放进鱼缸中，静置 30 min 左右，让鱼儿逐渐适应鱼缸的水温。接着将鱼袋中的水和鱼一并倒入盆中，用水勺每隔 10 min 缓慢倒入鱼缸中的水，重复该步骤 1 h。3.3 草缸的日常维护

为了促进水草的健康生长，增加草缸的欣赏性，在日常维护过程中要定时打开水草灯并添加二氧化碳气体。同时，每天要对各系统的运转情况进行检查，仔细观察水草和观赏鱼的生存状态，及时捞出水里的杂物。此外，定期对水质进行检测，包括缸内的水温、pH 值、盐度、溶解氧和氨氮浓度等，以防水质恶化导致鱼病的发生 [5]。

4 结语随着人们生活水平的提高以及生活节奏的加快，越

来越多的人把高雅情趣和休闲娱乐作为追求的生活目标，而草缸营造的水族自然景观，可以起到修身养性、陶冶情操、净化心灵的神奇作用，现已逐渐受到人们的青睐。

参考文献：[1] 白明 . 水草栽培与造景 [M]. 北京 : 化学工业出版

社 ,2017.

[2] 毕非易 . 现代室内环境中的自然生态水族造景艺术研

究 [D]. 芜湖 : 安徽工程大学 ,2017.

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艺 ,2015(14):143.

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福州 : 福建师范大学 ,2010.

[5] 韩淑清 , 石万方 , 陈利萍 . 观赏水草的造景技术 [J]. 北

方园艺 ,2005(3):46-47.

（责任编辑：赵中正）

[作者简介]吴云鹏（1987-），男，主要从事畜禽动物营养及饲料科学研究

工作。

近年来，随着我国家禽业的

发展，家禽羽毛性状越来越受到

人们的关注。对于商品鸡而言，

羽毛作为其品种和性别的重要

表型特征之一，其形态、色泽、颜色等是反映鸡生长及健康状态，

决定其商品价值的重要因素（李

莹等，2013）。众所周知，羽毛成

熟推迟会影响鸡的生产性能，当

鸡只羽毛覆盖减少时，饲料的消

耗会增加（Hawkins 等 , 2012;Glatz, 2001）。鸡羽毛的生长发育

受到多种因素的影响，例如栏

舍、温度、鸡只健康状况、饲养管

理等。但是，营养在羽毛的生长

发育中也起着重要作用（VanKrimpen 等, 2005）。因此，本文主

要就营养对鸡羽毛生长的影响

进行综述。1 羽毛的组成

羽毛是着生在皮肤表面，起

源于外胚层表皮细胞的皮肤附

属物，是禽类表皮细胞衍生的角

质化产物。其不仅是禽类的飞行

工具，还具有保暖、防护、调控温

度等功能（谢文燕等，2017）。羽

毛中蛋白质含量为 89%~97%，

其中角蛋白的含量高达 85%~90%。羽毛角蛋白合成中所需的

氨基酸主要为含硫氨基酸———胱氨酸，这表明家禽对这种氨基

酸的饮食需求比较高（Leesonand Walsh, 2004a）。另一个含硫

氨基酸———蛋氨酸，主要通过在

肝脏和毛囊中转化为胱氨酸，从

而参与角蛋白的合成（Champe等, 1984）。研究表明，肉鸡在生

长期羽毛氨基酸组成相对稳定，

营养干预可以导致苏氨酸、缬氨

酸、亮氨酸及蛋氨酸的小幅变

动。与肌肉组织相比，肉鸡羽毛

中含有更多胱氨酸（7.5% vs.1%）、苯丙氨酸（4.7% vs. 3.8%）、缬氨酸（6.2% vs. 4.7%）和苏氨酸

（4.8% vs. 4.1%），但赖氨酸（2.0%vs. 6.9%）、组氨酸（0.7% vs.2.5%）和蛋氨酸（0.7% vs. 2.2%）

（Stilborn 等, 2010）较低。2 影响鸡羽毛生长的营养

因素

2.1 粗蛋白

饲粮中粗蛋白的含量显著

影响羽毛的质量，当饲粮中粗蛋

白含量过低时，雏鸡羽毛质量变

差（Van Emous 等 , 2014）。Ur-daneta- Rincon 和 Leeson（2004）在 21 日龄肉鸡上的研究表明，

当饲粮粗蛋白水平从 17%增加

到 25%时，鸡只羽毛重量从 6.0g增加至 9.3g，同时羽毛中氮沉积

从 0.95g增加至 1.15g。但是当饲

粮粗蛋白水平继续增加至 29%时，鸡只羽毛重量及氮沉积并没

有继续增加。另有研究表明，当

给日龄小于 10- 15 天的雏鸡饲

喂低于 16%粗蛋白水平的饲粮

时，雏鸡羽毛较差，且通过在饲

粮中添加高水平的游离氨基酸

并不能解决这一问题（Lesson and

鸡羽毛组成及影响鸡羽毛生长的营养因素

◆作者：吴云鹏 1,2 李孝伟 2 付云娜 3 耿旭 1 张号杰 1 秦江帆 2

◆单位：1.中粮饲料（佛山）有限公司；2.中粮饲料（茂名）有限公司；3.广东茂名农林科技职业学院

摘要：随着我国家禽养殖业不断发展，消费者对羽毛产量及其品质的要求也在逐步提高。羽毛的形态、色泽、颜色等是反

映鸡生长及健康状态的重要指标，羽毛质量与销售价格密切相关。影响鸡羽毛生长的因素有很多，营养性因素起着很重要的

作用。本文将从饲粮粗蛋白、氨基酸、维生素和矿物质、能量、霉菌毒素等营养因素的角度进行综述。关键词：羽毛；营养性因素；粗蛋白；氨基酸；矿物质和维生素

[中图分类号]S831.5 [文献标识码] A [文章编号]1005-8613（2020）02-0045-03

※健康养殖※

45· ·

Walsh, 2004b）。可能表明，饲粮

中的蛋白质和氨基酸，特别是羽

毛生长发育所需要的氨基酸是

至关重要的（Van Emous, 2015）。2.2 氨基酸

关于赖氨酸对鸡羽毛生长

影响的报道并不多。有报道认

为，赖氨酸缺乏可能会导致有色

羽毛鸡羽毛色素沉积增多（李

蛟，2016）。Urdaneta- Rincon 和

Leeson（2004）的研究认为，饲粮

中赖氨酸水平不低于 0.86%时，

不会影响 0- 21 日龄鸡只的羽毛

质量。饲粮中含硫氨基酸与羽毛

的生长密切相关（Ansari- renani,等，2011）。胱氨酸是角蛋白的主

要组成成分，而蛋氨酸可转化为

胱氨酸（Xu 等，2010）。席鹏彬等

（2011）对 43- 63 日龄黄羽肉鸡

的研究表明，与基础饲粮相比

（蛋氨酸水平 0.25%），在基础饲

粮中添加 0.35%~0.45%蛋氨酸

可显著提高羽毛中干物质含量

及蛋白质沉积。Morn（1981）研究

了不同蛋氨酸和胱氨酸水平对

肉鸡羽毛重量发育的影响，发现

育成期饲粮中蛋氨酸水平的增

加（+0.5g/kg 或 +1.0g/kg）并影响

没有肉鸡羽毛的重量。但是，较

高的胱氨酸水平（在 0.5~1.8g/kg之间）使得母鸡和公鸡的羽毛重

量分别增加了 5%和 3%。此外，

Kalinowski 等（2003）对快羽及慢

羽肉鸡的研究发现，快羽和慢羽

肉鸡所需的最佳蛋氨酸水平没

有差异，基本都为 0.5%，但是，

慢羽肉鸡所需的最佳胱氨酸水

平为 0.39%，而快羽肉鸡所需的

最佳胱氨酸水平为 0.44%。这表

明，胱氨酸比蛋氨酸在肉鸡羽毛

的生长发育中更为重要（van E-mous and van Krimpen, 2019）。

饲粮中色氨酸含量较高时，

鸡只啄羽的现象较少（Savory等，1999）。Van Hierden 等（2004）的研究也证明了这一点，发现饲

喂含色氨酸水平很高（2.1%）的

饲粮的小鸡比饲喂正常色氨酸

水平（0.16%）饲粮的小鸡啄羽现

象明显减少。这可能是因为色氨

酸是 5- 羟色胺合成（serotonin ,5- HT）的前体，而啄羽的鸡通常

5- HT 的转化水平通常比较低

（Van Hierden 等，2004）。此外，有报道称，在基础饲

粮中添加精氨酸或蛋氨酸可显

著改善 2- 6 周龄火鸡羽毛的重

量（Wylie 等，2003）。生长鸡日粮

中缺乏精氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸、苯丙氨酸和

酪氨酸时，都会使鸡只羽毛出现

不正常（van Emous and vanKrimpen, 2019）。

2.3 维生素和矿物质

维生素和矿物质在羽毛的

生长发育过程中也起重要作用

（Lesson and Walsh., 2004b）。维

生素是毛囊发育及羽毛生长过

程中相关酶的辅酶，因此与羽毛

的发育密切相关。饲粮缺乏维生

素 A 会引起肉鸡上皮组织干燥

和皮肤过度角质化，缺乏维生素

D 会导致羽毛蓬松无光泽。缺乏

核黄素、泛酸、叶酸、生物素或烟

酸的饲粮，均可能导致鸡产生羽

毛稀疏、粗糙、易脱落的症状，而

饲粮中适量补充上述维生素，羽

毛光泽会更鲜亮（谢文燕，等

2017）。当然，饲粮中一般都会添

加上述维生素，但受贮存环境及

时间的影响，维生素易失活。此

外，鸡只在疾病及应激的状态

下，维生素的需求会大量增加，

也可能出现上述维生素缺乏而

导致羽毛出现问题的症状。饲粮中钙磷比例不当可导

致鸡只出现啄羽现象，钙磷过量

也会影响羽毛生长（叶敬礼 ,2013）。鸡只缺钠时也会出现羽

毛生长缓慢及啄羽现象的发生

（Yang and Cotsarelis, 2010）。饲粮

缺乏锌、锡、钒、铬和镍等矿物质

元素，均会导致羽毛生长异常，其

中缺锌时，会导致鸡只羽毛卷曲、无光泽、易断（Drew等，2007），而

饲粮中添加硫酸锌或蛋氨酸锌

均可防止鸡只羽毛发育不良（郭

锋等，2010）。饲粮缺硒会使羽毛

生长不佳，但含量超标会导致羽

毛蓬松。铜含量不足会导致羽毛

蓬乱无光泽，但铜含量过高会导

致肉鸡对含硫氨基酸的需求增

加，进而出现饲粮缺乏含硫氨基

酸现象并导致羽毛生长不良（叶

敬礼, 2013）。此外，饲粮缺乏碘

时，鸡只甲状腺肿，会导致雏鸡

不长羽毛或成鸡不能正常换羽

（李蛟，2016）。2.4 能量

鸡具有“为能而食”的特点，

一般能适应比较宽的能量范围。因此，能量对羽毛生长的影响比

较小。但是饲粮能量水平的高低

可以影响鸡的啄羽行为。Vander Lee 等（2001）研究发现，与饲

喂标准日粮（能量水平为

11.55MJ/kg）的母鸡相比，饲喂低

能量水平（能量水平为

11.05MJ/kg）的母鸡羽毛覆盖度

更好，且不影响母鸡的生产性

能。这与 Van Krimpen 等（2005）的研究相一致，表明饲喂低能量

※健康养殖※

46· ·

饲粮时，鸡采食量会更高，采食

时间增加，啄羽时间显著减少。2.5 其他与营养相关的因素

除能量、蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质会影响羽毛的生

长发育外，饲粮中霉菌毒素也可

以影响鸡只羽毛的覆盖度（Les-son and Walsh, 2004b）。维生素或

氨基酸的缺乏可能是引起特定

部位的羽毛生长异常，而霉菌毒

素则会导致整只鸡羽毛的生长

异常, 如由镰刀菌属产生的 T- 2毒素在低至 4- 16ppm 时就会导

致鸡羽毛覆盖问题，且严重程

度与毒素剂量相关（Wyatt 等，

1975）。饲粮中非淀粉多糖（NSP）也

会影响鸡只羽毛覆盖情况。VanKrimpen（2008）研究 NSP 含量

（以燕麦作为非淀粉多糖）对鸡

只饮食行为及啄羽行为的影响，

发现通过增加饲粮中 NSP 含量

来增加鸡只饱腹感，可以有效预

防鸡只啄羽行为。另有研究表明，棉籽粕中抗

营养因子棉酚、菜籽粕中的葡

萄苷酸内酯盐，均可能通过抑

制或破坏甲状腺机能，从而影

响禽类羽毛的生长速度（刘伟，

2016）。3 小结

综上所述，影响鸡羽毛生长

的营养因素包括：蛋白质、氨基

酸、维生素和矿物质、能量及霉

菌毒素等。现有的研究表明，充

足的粗蛋白和氨基酸的供应对

羽毛的生长发育起重要作用。氨基酸、维生素及矿物质的缺

乏会导致羽毛生长迟缓、易断

等羽毛异常情况，而饲粮中霉

菌毒素可导致羽毛整体稀疏。

NSP 会增加饲粮在前肠中保留

时间，通过增加饱腹感从而减

少鸡只啄羽行为。总之，提供营

养均衡的饲粮对于鸡羽毛生长

发育至关重要。参考文献：

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因素对水禽发育的影响 [J]. 中国家禽,2010, 32(19): 46- 48.

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素分析 [J]. 中国动物保健,2016,18(3):11- 12.

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※健康养殖※

47· ·

中国动物保健 2021.05

实践案例

一例犬肠道异物的诊断和治疗

王敏 1，李明俊 2，曹嫚嫚 3

（1.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000；2.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000；

3.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000）

摘要：金毛犬，雄性，年龄 1岁，体重 26kg，疫苗、驱虫正常。一周前主人带出去游玩，回来后发现犬呕吐、持续发热，在其他动物医院诊断治疗 3d而未见好转，遂转至本院。现在患犬无饮食欲、强行灌服后呕吐，吐黑绿色液体，精神沉郁，未排便。经临床检查、实验室检查和影像学检查，触诊发现患犬腹后部可触及一个长度约 10cm的物体，质硬。呕吐物眼观似肠内容物。X线检查发现肠道显著扩张积液，未见高密度物体。超声扫查发现肠管扩张积液，可见强回声反射后方的清洁声影,说明患犬肠道内有异物。治疗采用开腹探查 +肠道切开术取出异物，术后积极输液抗炎、止吐、止泻。治疗 3d后，患犬饮食欲有所恢复，不吐不泄，一周后回访患犬康复。关键词：犬；肠道异物；诊断；治疗

近年来，随着宠物数量增多，宠物疾病也受到越来越多的关注。

肠道异物是指动物误食异物后，异物不被消化且无法下行而停留在

肠道内引起一系列病症的情况[1]。肠道异物引起的肠梗阻的初期症

状是食欲下降甚至不食不饮、不停叫唤、卧地翻滚、呕吐，有时会有少

量粪便；随着病情发展，患病动物表现为呼吸困难、持续性呕吐、眼球

下陷、严重脱水、皮肤弹力下降，腹围增大；随着肠管局部出现血液循

环障碍，病变部位的肠管开始麻痹、坏死，动物表现为自体中毒、精神

沉郁、休克等症状，如不及时救治将会导致死亡[2]。

1 病例介绍金毛犬，雄性，年龄 1 岁，体重 26kg，疫苗、驱虫正常。一周前

主人带出去游玩，回来后发现犬呕吐、持续发热，在其他动物医院

诊断治疗 3d 而未见好转，遂转至本院。现在无饮食欲、强行灌服后

呕吐，吐黑绿色液体，精神沉郁，未排便。

2 诊断2.1 临床检查

体温 41.0℃；听诊无心律不齐和心杂音，肺音粗厉；触诊腹后部

可触及一个长度约 10c m 的物体，质硬，呕吐物眼观似肠内容物。

2.2实验室检查2.2.1血液常规检查具体结果见表 1。

从表 1可知，血常规各项指标均处于正常。

d o i:10.3969/ j.issn .1008-4754.2021.05.088

2.3 影像学检查 2.3.1 X光检查具体结果见图 1。

由图 1可知，患犬肠道显著扩张积液，未见高密度物体。

2.3.2超声检查具体结果见图 2。

图 1患犬 X光检查影像（侧位）

图 2患犬腹部 B型超声检查影像

（下转第 132页）

作者简介：王敏（1991—），讲师，硕士，宠物疾病防治，邮箱：[email protected]。

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130


（上接第 130页）

由图 2 可知，患犬肠管扩张积液，可见强回声反射后方的清洁

声影。

2.4 诊断结果综合临床症状和检查结果，能得到的提示有：患犬腹后部可触

及一个长度约 10c m 的物体，质硬，呕吐物眼观似肠内容物，肠管

扩张积液，超声扫查腹部见强回声反射后方的清洁声影[3]。

结论：该犬患肠道异物性疾病。

3 治疗开腹探查 +肠道切开术[4]：丙泊酚诱导、异氟醚吸入麻醉，脐孔

前 2c m 向后腹正中线切开腹壁，开腹进行探查。探及一个圆柱形

异物，头侧肠管大范围扩张积液，肠管颜色变紫，肠壁尚有活力。异

物位于空肠段，切开肠管取出异物，连续内翻缝合肠壁。先后缝合

腹部肌肉、皮下组织和皮肤。术后清理异物，发现异物为训练棒。

医嘱：术后 24～48h 内禁食禁水[5]，若未呕吐可给予流质食物。同

时进行输液、抗炎、止吐、止泻等[6]。治疗 3d 后，患犬饮食欲有所恢

复，不吐不泄，一周后回访患犬康复。█参考文献：[1]王力光,董君艳.新编犬病临床指南[M].吉林科学技术出版社，2000:333-341.[2]徐亚亚,孙晨明.一例犬肠道异物性梗阻的诊断和治疗[J].吉林畜牧兽医,2019,40(8):78-79.[3]银岭.兽医影像技术在诊断犬肠道内异物性疾病中的对比研究[D].华中农业大学,2007.[4]崔起超,杨霞,赵成龙,等.一例阿拉斯加多位点肠道堵塞的手术疗法[J].吉林畜牧兽医,2020,41(4):57-59.[5]葛春艳.一例犬肠道异物的手术报告[J].特种经济动植物,2020,23(1):7.[6]薛慧亮,徐婕,李冰洁,等.一例犬肠道异物的诊疗报告[J].特种经济动植物,2019,22(12):10-11.

实践案例

无害化处理工作已进入平稳运行阶段。随着项目的投运，有效杜绝

了病死猪流向餐桌带来的食品安全隐患，消除了病死畜禽乱丢乱

弃对环境带来的恶劣影响，为养殖户提供了生物安全新保障，农村

人居环境得到显著改善，人民群众生活更加舒心，达到了环境零污

染、病原零扩散的无害化处理目标，特别是应对重大疫情，取得了

显著的生态、社会效益。但通过近 2 年多的运营，也发现了无害化

处理项目还存在一些问题和困难。

5.1 生猪饲养量有所下降、养殖户配合度有所下降受非洲猪瘟疫情及猪周期的影响，目前养殖积极性大大降低、

养殖难度增加，导致生猪饲养量有所下降；养殖场户担心病死畜禽

收集人员和车辆如果消毒工作不到位、不切底，则容易携带病毒和

细菌，造成猪群感染。所以养殖场为了自身疫病和生物安全，不愿

意上报中心，开始自行深埋或用无害化处理窖处理病死猪。

5.2 运营企业资金压力大，运行困难随着浏阳市动物无害化处理中心的运营，浏阳市已实现病死

畜禽无害化处理全覆盖，有效杜绝了病死猪流向餐桌带来的食品

安全隐患，消除了病死猪乱丢乱弃对环境带来的恶劣影响，为养殖

户提供了生物安全新保障，农村人居环境得到显著改善，人民群众

生活更加舒心，达到了环境零污染、病原零扩散的无害化处理目

标，特别是应对重大疫情，同时取得了显著的生态、社会效益。但由

于浏阳市的无害化处理项目投资大、收益小，2020 年受非洲猪瘟

疫情的影响，病死猪收集、处理数量目前已呈下降趋势，运营企业

面临资金不足，运营困难等局面。

6 几点想法和建议6.1 强化考核和监督执法，做到应收尽收

建议强化监督执法，提供法制保障。公安、农业行政执法等部

门加强对乱扔乱弃、贩卖病死畜禽和加工制售病死畜禽产品等违

法犯罪的打击力度，严厉打击违法行为，建议主管部门加大力量，

督促运营企业严格遵守国家关于病死畜禽无害化处理的有关规

定，严格按照《动物防疫法》和国家关于病死动物相关规定和要求，

落实各项规章制度，对中心厂区、处理车间和收集病死动物及产品

的车辆人员进行全方位消毒灭菌，确保在收集、运输和处理病死动

物的过程中不造成病毒传播、扩散和二次污染。

6.2 加大养殖保险资金投入，切实提高育肥猪保险覆盖率

建议省级财政加大生猪保险的资金投入，做到应保尽保，实施

“无害化处理与保险联动”机制。加快生猪保险与无害化处理联动

运行机制落实，进一步规范能繁母猪、育肥猪保险理赔与无害化处

理工作。农业农村主管部门、保险公司和处理中心三方联动，将病

死猪是否已无害化处理作为保险理赔的前提条件，确保已投保病

死猪生猪必须由处理中心统一收集、集中无害化处理。

6.3 加大政策支持，优化完善无害化补贴规范和标准建议完善病死畜禽无害化处理法律法规，出台除生猪以外的

其它畜禽无害化处理标准，规范除生猪外如鸡、鸭、牛、羊等畜禽及

产品等处理费标准及承担主体，统一无害化处理补助标准。政府出

台适当的公益性补贴机制，如遇病死动物无害化收集和处理量严

重不足或其他非运用公司方面原因，造成运营公司严重亏损的，为

了保障该项工作顺利开展，则可以启动该笔公益性补贴资金。

7 结论综上所述，病死畜禽无害化处理工作事关养殖业安全、公共卫

生安全和生态环境安全，是一项专业性强、技术要求高、变废为宝、

促进资源循环利用、保护公共卫生安全的公益性事业，更是民生工

程，需要统筹兼顾、大力推进，相关部门各司其职、相互协作，采取

科学、环保的无害化处理技术，将病死动物及产品无害化处理，最

终成为循环利用的原料，为土壤添加养分，确保病死畜禽无害化处

理工作高效持续健康发展。█

132


近年来，随着宠物数量增多，宠物疾病也受到越来越多的关注。贫血是指动物循环血液总量减少或单位容积外周血液中血红蛋白量、红细胞数低于同龄、同性别健康动物的正常值[1]。在一些特殊情况下即便红细胞计数和血红蛋白浓度均在参考范围内，若患病动物的红细胞比容（HCT）逐步下降，也可诊断为贫血。临床上引起贫血的原因很多，比如外伤引起动物大量出血导致的出血性贫血；长期营养不良引起的营养不良性贫血[2,3]；红细胞受到微生物感染，比如巴贝斯虫、艾利希体等，物理化学因素刺激引起的溶血性贫血，比如犬猫洋葱、大葱中毒及药物使用不当等[4,5]。犬贫血的主要临床表现包括可视黏膜苍白、口腔黏膜黄染、嗜唾、运动不耐受、异食癖、活动性下降、血尿、血红蛋白尿、粪便潜血等，这些临床症状可能是急性或慢性的，严重程度不定。如不及时救治，贫血会导

致动物休克甚至死亡[6]。

1 病例介绍

德国牧羊犬，3个月，体重 12kg。此前因腹泻口服抗生素治疗 20多天。现食欲废绝，身体消瘦，精神高度沉郁，被毛焦躁逆立，不能站立。

2 诊断

2.1 临床检查

患犬可视黏膜（眼结膜、齿龈、口腔黏膜）均苍白，体温 36.5℃，脉搏 82次 /min。

2.2实验室检查

血液常规检查，见表 1。从表 1可知，红细胞数目、血红蛋白浓度、红细胞比容均低于

实践案例

一例犬贫血的诊断和治疗

李明俊 1，王敏 2

（1.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000；2.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000）

德国牧羊犬，雄性，年龄 3个月，体重 12kg。此前因腹泻口服抗生素治疗 20多天。现食欲废绝，身体消瘦，精神高度沉郁，被毛焦躁

逆立，不能站立，遂来院就诊。经临床检查和实验室检查发现该犬可视黏膜（眼结膜、齿龈、口腔黏膜）均苍白，体温 36.5℃，脉搏 82次

/min，红细胞数目、血红蛋白浓度、红细胞比容均低于参考值，且红细胞比容为 16.2%，小于 18%，说明患犬重度贫血。治疗采用输血疗法

加以强心补液，输血 2h后，患犬体温 38.8℃、脉搏 118次 /min、呼吸 26次 /min，精神明显好转，能站立行走，又经 3d对症治疗后回家，

一周后回访患犬康复。

犬；贫血；诊断；治疗

作者简介：李明俊（1990— ），讲师，硕士，宠物疾病防治，邮

箱：[email protected]。

doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2021.04.086

注：↑表示检查结果高于参考值，↓表示检查结果低于参考值。

检验项目结果单位参考范围检验项目结果单位参考范围白细胞数目 9.85 ×109/L 6.00～17.00 红细胞数目 ↓2.36 ×1012/L 5.1～8.50中性粒细胞百分比 ↓46.8 % 52.0～81.0 血红蛋白浓度 ↓52 g/L 110～190淋巴细胞百分比 ↑35.7 % 12.0～33.0 红细胞比容 ↓16.2 % 36.0～56.0单核细胞百分比 9.6 % 2.0～13.0 平均红细胞体积 68.9 fL 62.0～78.0嗜酸性粒细胞百分比 7.7 % 0.5～10.0 平均红细胞血红蛋白含量 22.1 pg 21.0～28.0嗜碱性粒细胞百分比 0.2 % 0.0～1.3 平均红细胞血红蛋白浓度 321 g/L 300～380中性粒细胞数目 4.61 ×109/L 3.62～11.32 红细胞分布宽度变异系数 13 % 11.5～15.9淋巴细胞数目 3.52 ×109/L 0.83～4.69 红细胞分布宽度标准差 37.8 fL 35.2～45.3单核细胞数目 0.94 ×109/L 0.14～1.97 血小板数目 ↓66 ×109/L 117～460嗜酸性粒细胞数目 0.76 ×109/L 0.04～1.56 平均血小板体积 8.2 fL 7.3～11.2嗜碱性粒细胞数目 0.02 ×109/L 0.00～0.12 血小板分布宽度 ↑17.6 12.0～17.5

血小板比容 ↓0.054 % 0.090～0.500

表1 血液常规检查结果

参考值，且红细胞比容为 16.2%，小于 18%，说明患犬重度贫血[7]。

2.3 诊断结果

综合临床症状和检查，能得到的提示有：患犬可视黏膜苍白，体温极低，脉搏减少，红细胞比容小于 18%。

结论：患犬重度贫血且患有机体衰竭性恶质病。

3 治疗

由于患犬年龄太小且重度贫血体质虚弱，因此本病例采用输血疗法[8]，再加以强心补液，具体治疗方案为：①强尔心 1mL，VC2mL，ATP 2mL，辅酶 A 100U，5%糖盐水 100mL，静脉注射；②取患犬母亲血液 100mL输血。

治疗 2h后，体温 38.8℃、脉搏 118次 /min、呼吸 26次 /min，精神明显好转，能站立行走，又经 3d对症治疗后回家，一周后回访，患犬康复。

4 分析和讨论

128


本病例中的患犬表现为食欲废绝，身体消瘦，精神高度沉郁，被毛焦躁逆立，不能站立，可视黏膜苍白，体温低，脉搏少，而无创伤，无出血，无黄疸，无血尿，因此可初步排除出血性贫血和溶血性贫血的可能。因患犬在贫血前长期服用抗生素，动物肠道菌群失衡，导致食物消化和吸收不良，机体缺乏营养，从而引起营养不良性贫血。临床上有许多药物可能引起犬贫血，比如：对乙酰氨基酚、巴比妥类药物、氯霉素、青霉素和头孢类药物，建议兽医在临床诊断中要详细询问动物用药史，同时使用这些药物时也应谨慎。判断动物是否贫血的准确方法应是评估红细胞比容（HCT），而不能仅根据可视黏膜苍白就视动物为贫血，因为低血压、淤血、瘀斑和深部出血也会导致动物黏膜苍白。HCT也是评价动物贫血程度的重要指标，对犬而言 HCT在 30%～36%之间为轻度贫血，18%～29%为中度贫血，小于 18%为重度贫血。本病例中的患犬 HCT 值为16.2%，属于重度贫血，加之患犬才 3个月大，身体本就虚弱，所以采用输血疗法治疗患犬是极为稳妥的。虽然现在已经有专门针对宠物的商业性血库，但本病例最好采用患犬母亲的血进行输血，以减少输血并发症的出现。血涂片评估可为大多数贫血动物提供重要的临床病理学信息，比如红细胞的大小和形态、白细胞和血小板

的大概数量和形态、是否存下自体凝集、是否存在有核红细胞、是否存在多染性红细胞（再生性贫血的一个指征）以及红细胞中是否存在寄生虫等。这些信息可帮助兽医找到动物贫血的具体原因，比如低染性小红细胞常提示动物缺铁，海因茨小体的出现提示红细胞氧化损伤，球形红细胞是免疫溶血性贫血的特征。█参考文献：[1] Bruyette David S, Bexfield Nick, Chretin Johnny D. et al. ClinicalSmall Animal Internal Medicine [M]. John Wiley & Sons, Inc.:2020-04-30.[2]李淑兰.引起犬贫血、消瘦的几类疾病的鉴别诊断[J].养殖技术顾问,2014(5):167.[3]王福军,王福亮.铁锌添加剂对改善幼犬贫血状况的临床疗效观察[J].黑龙江畜牧兽医,2013(12):106-107.[4]谢鹏.犬洋葱中毒的发病机理及防治[J].中国畜牧兽医文摘,2012,28(5):161.[5]闫丽.犬贫血伴有红细胞大小、形态异常疾病的鉴别与诊断[J].养殖技术顾问,2014(11):227.[6]张桂贤,苗懋东.几例犬常见贫血类型的鉴别诊断和治疗[A].中国畜牧兽医学会犬学分会、公安部南昌警犬基地.第 17次全国犬业科技学术研讨会论文集[C].中国畜牧兽医学会犬学分会、公安部南昌警犬基地:中国畜牧兽医学会,2017:12.[7]（美）Richard W, Nelson等主编.小动物内科学（第五版）[M].夏兆飞等译.北京:中国农业大学出版社,2019.[8]邓天浩. 犬输血疗法病例分析及标准化流程的建立 [D]. 河南农业大学,2019.

典型发病。一般死亡比较少，出现软皮蛋、白壳蛋的比例也不会很高，有些鸡群表现为不合格蛋在鸡舍不同位置循环出现。个别鸡群发生新城疫引起的死亡率比较高，症状比较明显的，多是因季节因素或者棚舍条件太差引起通风不良，舍内空气质量差，灰尘多，继发起大肠杆菌或者支原体混合感染造成，单纯非典型新城疫发生时很少见到死亡率高的情况。

3）关于治疗。发生非典型新城疫病例时，采用疫苗紧急免疫还是比较有效的措施。紧急免疫有一定的风险，要避免紧急免疫带来的风险一定要注意以下几点：①紧急免疫适合在发病初期进行，疾病发生到高峰阶段不能再紧急免疫；②用弱毒苗紧急接种，一定要结合大群精神状态，大群正常的才可以紧急接种；③紧急接种仅适用于单纯疾病单纯感染的病例，对于有混合感染，或者因病程过长引起较严重继发感染而造成死亡比较高的鸡群禁止紧急接种；④紧急接种适用于有一定免疫基础的鸡群，商品蛋鸡因为养殖时间长，灭活苗、弱毒苗免疫次数多，对紧急接种使用弱毒疫苗的耐受力比较强，适合紧急接种。

4）辅助治疗。鸡群发病时，机体抵抗力下降，在制定治疗方案时，除了针对性治疗措施，还可以使用一些药物进行辅助治疗。该病例治疗过程中，除了使用弱毒疫苗紧急免疫，在饲料中添加四味穿心莲散，用以提高机体免疫力，可以提高机体免疫系统对抗病毒的能力，缩短病程。添加维生素可以补充疾病状态下对维生素的额外需求，维生素的补充供应可以快速改善蛋壳质量，提高鸡蛋品质，增加商品性。需要注意的是，在使用药物治疗时，要注意不能使

用产蛋期禁用的药物，避免药物残留，避免出现食品安全问题。5）新城疫是对世界养鸡业影响最大的传染病之一，各国都非

常重视新城疫的防控工作。疫苗免疫为新城疫的防控做出了卓越贡献。而多次免疫，显然增加了养鸡的成本，油乳剂灭活疫苗还需要逐只注射，每次油苗注射都需要大量的人工，对规模化养殖场来说是个巨大的成本。每次疫苗免疫也对鸡群造成一定的应急，很多鸡群在注射油乳剂灭活疫苗后，都出现产蛋下降或者蛋壳质量变差的应激反应。一些条件比较差的鸡群在使用弱毒疫苗后出现呼吸道反应也经常出现。

6）新城疫的扑灭探讨，有些发达国家已经实现了新城疫病的彻底消灭。我国一些学者也提出了在我国彻底消灭新城疫的想法，当前我国蛋鸡养殖业规模化程度还比较低，养殖分散，养殖场数量多，也缺少防疫的规划。在以个体中小养殖户为主体的大环境下，要彻底扑灭新城疫，还有一定困难。针对我国当前的养鸡现状，可以选择一些相对独立的养殖区域，有自然屏障的养殖场，可以试点进行新城疫的扑灭工作。在保证养殖安全的前提下，加强灭活疫苗的免疫，使鸡群有比较高的血清抗体水平，逐步减少弱毒疫苗的使用，从而减少环境中活病毒的载量，经过一定时间后，逐步让弱毒活疫苗退出养殖过程。配合完善的生物安全措施，对动物及环境进行病毒检测与监测，在鸡群和环境中都监测不到病毒后，经过一定时间，再减少灭活疫苗的使用，再经过一定的时间，逐渐不使用灭活疫苗，实现新城疫病在一定区域或者一些地方的彻底扑灭。█

实践案例

132

徐志婷, 孙显月, 滕金言, 等. 影响母猪断奶至配种间隔的遗传参数估计 [J]. 华南农业大学学报, 2020, 41(2): 18-22.XU Zhiting, SUN Xianyue, TENG Jinyan, et al. Estimation of genetic parameters affecting the weaning-to-service interval in sows[J]. Journal of South ChinaAgricultural University, 2020, 41(2): 18-22.

影响母猪断奶至配种间隔的遗传参数估计

徐志婷1†，孙显月1,2†，滕金言1，刁淑琪1，张　豪1，张　哲1，李加琪1

(1 华南农业大学动物科学学院，广东广州 510642； 2 广东茂名农林科技职业学院，广东茂名 525024)

摘要: 【目的】分析影响母猪断奶至配种间隔的因素，并估计母猪断奶至配种间隔的遗传参数，为猪场育种规划提供

理论参考。【方法】本研究材料为 2011—2016年间采集的华南地区 2个场区 (A场和 B场)大白母猪和长白母猪的繁

殖记录。采用 Duncan’s法对影响母猪断奶至配种间隔的因素进行显著性分析，并使用 DMU软件的 AI-REML结

合 EM算法进行遗传参数估计。【结果】分娩胎次和断奶年份对母猪断奶至配种间隔影响均极显著 (P<0.01)；断奶季

节对 A、B 2个场区长白母猪及 B场大白母猪的断奶至配种间隔影响均极显著 (P<0.01)，而对 A场大白母猪的断奶

至配种间隔影响不显著 (P>0.05)；带仔数对A、B 2个场区的母猪断奶至配种间隔影响均不显著 (P>0.05)。A场大白和长

白母猪的断奶至配种间隔遗传力分别为 0.02和 0.04，B场大白和长白母猪断奶至配种间隔的遗传力均为 0.06。

【结论】华南地区母猪断奶至配种间隔为低遗传力性状，受分娩胎次与断奶季节的影响显著。在实际生产中应缩短母

猪初产后断奶至配种间隔，并尽可能使母猪在冷季断奶。

关键词: 母猪；断奶至配种间隔；繁殖性状；遗传参数

中图分类号: S828; S813.3 　　　　文献标志码: A　　　　文章编号: 1001-411X(2020)02-0018-05

Estimation of genetic parameters affecting theweaning-to-service interval in sows

XU Zhiting1†, SUN Xianyue1,2†, TENG Jinyan1, DIAO Shuqi1, ZHANG Hao1, ZHANG Zhe1, LI Jiaqi1

(1 College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;2 Guangdong Maoming Agriculture & Forestry Technical College, Maoming 525024, China)

Abstract: 【Objective】To analyze the factors affecting weaning-to-service interval(WSI) of sows, estimate

genetic parameters of WSI in sows, and provide theoretical references for pig breeding program.【Method】The

research data are the reproductive records of Yorkshire and Landrace in two farms (A and B) of South China

collected from 2011 to 2016. Duncan’ s method was used to analyze the factors affecting WSI of sows. The

genetic parameters were estimated using AI-REML of DMU software combined with EM algorithm.【Result】Parity

and weaning years had highly significant effects on WSI of sows (P<0.01). Weaning season had highly significant

effect on WSI of Landrace sows in both A and B farms and Yorkshire sows in B farm (P<0.01), while it had no

significant effect on WSI of Yorkshire sows in A farm (P>0.05). The number of suckling piglets had no significant

effect on WSI of sows in both farms (P>0.05). The heritabilities of WSI in Yorkshire and Landrace sows in A farm

were 0.02 and 0.04 respectively, and the heritabilities of WSI in both Yorkshire and Landrace sows in B farm were

收稿日期：2019–05–20　　网络首发时间：2020–01–07 11:38:53

网络首发地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1110.S.20200106.0923.018.html

作者简介：徐志婷 (1997—)，女，硕士研究生，E-mail: [email protected]；孙显月 (1986—)，女，硕士，E-mail:[email protected]；†对本文贡献相同；通信作者：李加琪 (1965—)，男，教授，博士，E-mai l :[email protected]

基金项目：国家生猪产业技术体系 (CARS-35)

华南农业大学学报 Journal of South China Agricultural University 2020, 41(2): 18-22 DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.201905036

0.06.【Conclusion】The WSI of sows in South China is a low heritability trait, which is significantly affected by

parity and weaning season. In practical production, the WSI of sows after first delivery should be shortened，and

the sows should be weaned in cold season.

Key words: sow; weaning-to-service interval; reproductive trait; genetic parameter

在猪生产过程中，母猪繁殖性状是重要的经济

性状之一。长期以来，母猪的繁殖能力体现在许多

方面，如年产胎数、年产仔猪数、窝产仔数、产活仔

数、出生质量、断奶质量、泌乳力、受胎率以及母猪

断奶至配种间隔 (Weaning-to-service interval,WSI) 等[1]。其中，最能体现母猪繁殖性能的指标是

年产胎数和年产仔猪数，而胎间距是影响母猪年产

胎数的重要因素[2]，胎间距包含怀孕时长、泌乳期长

度、断奶至配种间隔以及返情空怀时长[3]。母猪断

奶至配种间隔是指母猪断奶当天至断奶后第 1 次

发情并配种的间隔天数[4-6]，简称断配间隔。

大白母猪与长白母猪的繁殖性能与断配间隔

存在基本相似的规律性[7]，与间隔延长的后备母猪

相比，拥有正常断配间隔的后备母猪生长发育及繁

殖性能更好，且寿命更长、淘汰风险更低[8]。因此，

可通过缩短断配间隔来提高母猪年产胎数和年产

仔数。本研究通过统计学方法对影响母猪断配间隔

的因素进行分析，并对母猪断配间隔进行遗传参数

估计，以期为我国种猪的育种生产实践和科学管理

提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验数据

本研究的试验数据来源于华南地区 A、B 2 个

猪场。采集 2011—2016 年大白猪和长白猪 2 个品

种，3 455 头母猪产生的共 9 344 条分娩、配种等生

产记录。母猪繁殖记录包括母猪个体编号、场别、胎

次、情期、分娩时间、断奶时间、带仔数、母猪断配间

隔和下一胎交配时间。本研究以母猪断奶当天配种

为 0 d记录断配间隔。

1.2 统计分析

利用 R3.4.4软件 (http://www.R-project.org/)对原始数据进行质量控制，剔除缺失值、异常数据和

断配间隔大于 50 d的个体。根据极大似然估计法[9]

分场别、品种将胎次、带仔数和断奶季节分组，胎次

分为：1、2、3、4、5、6~9胎，共 6组；带仔数分为：≤7、8~11、12~13、14~16、≥17 头，共 5 组；断奶季节分

为：热季 (5—10 月) 和冷季 (1—4 月、11—12 月)，共 2组。

1.2.1 固定效应　通过方差分析评估胎次、断奶年

份、断奶季节、带仔数对母猪断配间隔的影响，并采

用 Duncan’ s 法对影响显著的因素进行多重比较，

结果以平均值±标准误表示，在动物模型中将具有

显著影响的因素作为固定效应进行进一步分析。本

研究将胎次、断奶年份和断奶季节作为固定效应。

1.2.2 动物模型　使用 DMU6 [ 1 0 ] 软件的 AI-REML 结合 EM 算法对母猪断配间隔进行方差组

分估计及遗传力计算。所采用的动物模型为：

yi jkl = µ+Pi+Y j+Mk +S+al+ ei jkl,

其中，yijkl 代表母猪断配间隔的观测值；μ 代表总体

均值；Pi 代表第 i 个胎次效应；Yj 代表第 j 个断奶年

份效应；Mk 代表第 k 个断奶季节效应；S 代表带仔

数效应，为回归项；al 代表第 l 头母猪的个体加性遗

传效应；eijkl 代表随机残差效应。

2 结果与分析

2.1 母猪断配间隔的描述统计

母猪断配间隔记录描述性统计如表 1 所示，华

南地区 A、B 场区大白和长白母猪的断配间隔主要

集中在 10 d 以内，其中 3~6 d 居多，基本服从正态

表 1 华南 2 个场区大白与长白母猪断奶至配种间隔的描述统计

Table 1 Descriptive statistics of the weaning-to-service interval of Yorkshire and Landrace sows in two farms of South China

场区

Farm

大白 Yorkshire 长白 Landrace观测数

Number断奶至配种间隔1)/d

Weaning-to-service interval观测数


Weaning-to-service intervalA 3 153 7.24±6.95 2 986 6.44±6.27

B 2 210 7.55±8.15 995 7.41±7.64

　1) 此列数据为平均值±标准误

　1) Data in this column are means ± standard errors

第 2 期徐志婷，等：影响母猪断奶至配种间隔的遗传参数估计 19

分布。

2.2 影响母猪断配间隔的因素

由方差分析结果 (表 2) 可知，胎次、年份对母

猪断配间隔的影响均为极显著 (P<0.01)；季节对华

南地区 A、B 场区的长白母猪及 B 场大白母猪的断

配间隔影响为极显著 (P<0.01)，而对华南地区 A场

的大白母猪影响不显著 (P>0.05)；带仔数在本研究

中对母猪断配间隔影响不显著 (P>0.05)。

2.2.1 胎次对母猪断配间隔的影响　不同胎次间

母猪断配间隔的多重比较结果如图 1 所示，第 1 胎

的断配间隔均显著高于其他胎次 (P<0.05)。此外，

华南地区 B 场区母猪第 1 胎的断配间隔与第 2 胎

相差约 9 d。胎次对经产母猪断配间隔的影响比较

稳定，基本维持在 5~7 d。华南地区 A、B 2 个猪场

的长白母猪，以及 A 场大白母猪的经产胎次、断配

间隔差异均不显著 (P>0.05)；B 场的大白母猪断配

间隔、第 2 胎和第 3 胎间差异不显著 (P>0.05)，第3 胎和第 4、5 胎间差异不显著 (P>0.05)，第 6~9 胎

的断配间隔显著低于其他胎次 (P<0.05)。

2.2.2 断奶季节对母猪断配间隔的影响　不同断

奶季节间母猪断配间隔多重比较结果如表 3 所示，

断奶季节对母猪断配间隔的影响一致，热季断奶的

母猪断配间隔均显著高于冷季 (P<0.05)。

表 2 影响母猪断奶至配种间隔的不同因素显著性检验结果1)

Table 2 Significance test results of different factors affecting the weaning-to-service interval of sows

场区

Farm因素　　

Factor　　

大白 Yorkshire 长白 Landrace

DF F DF F

A 胎次 Parity 5 41.53** 5 18.05**

年份 Year 5 5.15** 5 14.19**

季节 Season 1 0.89 1 18.96**

带仔数 Number of suckling piglets 4 0.49 4 0.73B 胎次 Parity 5 110.66** 5 59.08**

年份 Year 2 8.78** 2 4.63**

季节 Season 1 74.28** 1 12.96**

带仔数 Number of suckling piglets 4 1.11 4 1.68　1)“**”表示影响极显著(P<0.01)　1)“**”indicates the effect is highly significant (P<0.01)

15

10 a

a

a a

b b

b

b bb b b

bccd

cd db b b b

b b bb

断奶至配种间隔

/d

Wea

nin

g-t

o-s

ervic

e in

terv

al

A 场大白Yorkshire in A farm

A 场长白Landrace in A farm

B 场大白Yorkshire in B farm

样本Sample

第1胎 1st parity

第2胎 2nd parity

第3胎 3rd parity

第4胎 4th parity

第5胎 5th parity

第6~9胎 6th to 9th parities

B 场长白Landrace in B farm

5

0

相同样本柱子上方的不同小写字母表示差异显著 (P<0.05，Duncan’ s法)

Different lowercase letters on bars of the same type of sample indicate significant difference (P<0.05, Duncan’ s method)

图 1 不同胎次母猪断奶至配种间隔的多重比较

Fig. 1 Multiple comparisons of weaning-to-service intervals in sows among different parities

20 华南农业大学学报 (http://xuebao.scau.edu.cn/zr) 第 41 卷

2.3 母猪断配间隔遗传参数估计

母猪断配间隔的方差组分与遗传参数估计结

果如表 4所示：华南地区 A场大白和长白母猪断配间

隔的遗传力较低，分别为 0.02 和 0.04，华南地区 B场大白和长白母猪断配间隔的遗传力均为 0.06。2个场区的 2个品种母猪断配间隔均为低遗传力性状。

3 讨论与结论

母猪断配间隔主要受到遗传和环境 2 种因素

影响，加性遗传效应是主要的遗传因素，环境因素

包括气候、温度、胎次、场别等[4-5, 11]。本研究对影响

母猪断配间隔的诸多因素进行方差分析，结果表

明，断奶季节、胎次都对断配间隔有显著影响，因

此，在实际生产管理中应当对这些因素加强管理和

改善。

本研究发现胎次作为影响母猪断配间隔的一

个重要因素，初产母猪的断配间隔比经产母猪长。

这与 Tantasuparuk 等 [12](针对泰国长白和大白群

体) 及刘德武等[13](针对长大二元杂群体) 的研究结

果基本一致 [12 -13]。对于经产母猪，本研究中 A、B2个场区的长白及 A场大白经产母猪的断配间隔在

不同胎次之间均无显著差异 (P>0.05)，这可能是随

着母猪胎次的增长，身体和组织器官发育完善后，

断配间隔会稳定在一定的范围[14]。本研究结果显

示，初产母猪与经产母猪断配间隔相差 3~9 d。在哈

白猪的子宫复旧研究中发现，哈白猪产后第 19 天

起，子宫颈的复旧基本完成；到产后第 31 天时，子

宫内膜完成修复[15]。同时，有研究发现荷兰长白经

产母猪体内足量的能量储存有利于卵泡成熟和发

情机制的启动[16]。由此推测，经产母猪断配间隔较

短的原因可能是母猪子宫经过恢复后更加有利于

产后发情。在实际生产中，母猪断奶后可进行短期

优饲来促进其尽早发情。

断奶季节对母猪断配间隔的影响主要与光照

周期变化、外周温度有关[17]，基于断奶季节对母猪

断配间隔的研究结果不尽相同。范春国[18] 对湖北

白猪、杜洛克、大白、长白、通城母猪共 498 头母猪

的研究发现，秋季配种与春季配种相比，前者断配

间隔比后者多 2.61 d；Leite等[19] 对 2个商品系母猪

的研究结果表明，夏天分娩的母猪断配间隔相比秋

天分娩的母猪长 0.99 d。Tantasuparuk 等[20] 的研究

表明断奶季节对泰国地方纯种长白和大白母猪断

配间隔有极显著影响。在本研究结果中，热季的母

猪断配间隔均显著高于冷季 (P<0.05)。可能原因是

表 3 不同断奶季节母猪断奶至配种间隔多重比较

Table 3 Multiple comparisons of weaning-to-service intervals in sows among different weaning seasons

场区

Farm季节

Season

大白 Yorkshire 长白 Landrace观测数


Weaning-to-service interval观测数


Weaning-to-service intervalA 冷季 Cold 1 467 6.89±6.55b 1 329 5.65±4.83b

热季 Hot 1 686 7.54±7.26a 1 657 7.07±7.16aB 冷季 Cold 1 050 5.74±5.23b 466 6.16±5.84b

热季 Hot 1 160 9.20±9.80a 529 8.52±8.79a　1) 此列数据为平均值±标准误；相同猪场同列数据后的不同小写字母表示差异显著(P<0.05, Duncan’ s法)　1) Data in this column are means±standard errors; Different lowercase letters in the same column of the same pig farm indicatesignificant difference (P<0.05, Duncan’ s method)

表 4 母猪断奶至配种间隔的方差组分和遗传参数1)

Table 4 Variance components and genetic parameters of weaning-to-service interval in sows

场区

Farm母猪品种

Sow breed

加性遗传方差

Additive genetic variance(σa

2)

残差方差

Residual variance(σe

2)

遗传力

Heritability(h2)

A 大白 Yorkshire 0.86±0.53 44.29±1.19 0.02±0.01

长白 Landrace 1.43±0.56 35.84±1.01 0.04±0.01B 大白 Yorkshire 3.05±1.10 48.47±1.66 0.06±0.02

长白 Landrace 2.70±1.39 42.07±2.14 0.06±0.03　1)表中数据为平均值±标准误

　1) Data in the table are means± standard errors

第 2 期徐志婷，等：影响母猪断奶至配种间隔的遗传参数估计 21

华南地区热季炎热多雨，母猪采食量下降以致掉

膘，较易延长断配间隔，而在气候适宜时母猪采食

量增多，膘情维持在一定水平，利于产后发情配种。

遗传参数估计受到采用的估计方法、饲养管

理、种群结构的影响[21-22]。本研究采用非求导约束

最大似然法估计了母猪断配间隔的遗传力，2个场

区的 2 个品种母猪断配间隔均在低遗传力范围。

叶健等 [5] 在模型中加入永久环境效应，发现大白

母猪断配间隔遗传力为 0.046。Leite 等 [19] 对美国

某商品场母猪分娩数据利用重复力模型分析，估

算遗传力为 0.04；而利用多性状模型分析前三胎

母猪断配间隔的遗传力分别是 0.07、0.02 和 0.07。Hanenberg 等 [23] 的研究结果表明荷兰长白猪 1~6胎断配间隔遗传力分别为 0.11、0.07、0.07、0.05、0.04 和 0.04[23]。本研究结果基本在上述报道的范

围中，具体差异可能与估计方法以及试验群体大

小有关。

综上所述，母猪断配间隔属于低遗传力性状，

受到分娩胎次、断奶季节的影响。因此，在实际生产

中，应加强饲养管理，或者通过促排技术使母猪同

期发情并排卵来缩短母猪初产后的断配间隔，同时

尽可能使母猪在冷季断奶来缩短断配间隔，以期得

到更多的年产仔数。

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【责任编辑　庄　延】

22 华南农业大学学报 (http://xuebao.scau.edu.cn/zr) 第 41 卷

1 我国部分地区猪弓形虫流行病学

从 1977年猪弓形虫病被报道至今，我国关于猪弓形虫病研究已经过去 40多年。整理我国部分地区猪弓形虫病流行病学调查资料，分析如下：①我国猪弓形虫感染情况较为普遍，全国猪弓形虫平均感染率为 40%左右，大部分省份弓形虫感染率为 20%～45%，弓形虫感染情况最严重的为重庆地区，为 75.94%，感染率最低是西藏地区，为 5.1%[1-7]；②在我国，猪弓形虫感染情况较为严重地区主要分布在沿海亚热带地区，而在相对寒冷且干燥的地区猪弓形虫感染率则低。如西藏地区藏猪弓形虫感染仅为 5.1%；③猪弓形虫感染还与猪场的饲养方式和猪自身免疫情况有关，散户猪场感染率高于规模化养猪场，经产母猪产胎次数越多弓形虫感染率越高，并且可能多次反复感染弓形虫。

2 临床症状

猪弓形虫急性感染主要表现为：稽留热，体温为 40～42℃，精神沉郁甚至食欲废绝，便秘与腹泻交替出现，其耳后和腹下部出现血斑，并伴有腹股沟淋巴结肿大，持续时间大概 7～10d。若感染猪能挺过这段时间，其食欲和体温逐渐恢复正常，弓形虫在其肌肉、脑部等形成包囊，转化为慢性感染，若机体免疫系统受损，则再次出现急性感染症状。一般免疫力正常的猪感染弓形虫无明显症状，呈慢性感染，当猪弓形虫感染呈急性症状时常引起死亡[8]。

3 猪弓形虫病临床诊断技术

3.1 弓形虫病诊断技术概述

猪弓形虫感染诊断技术主要分为 3类：①弓形虫病原检测，如取检测猪的血液、组织液进行涂片，以是否观察到弓形虫虫体作为诊断依据，或者从疑似弓形虫感染的猪取淋巴结等组织进行处理，然后感染小鼠，对感染小鼠进行追踪观察，并取有明显症状的腹水或脑组织进行涂片，以是否观察到弓形虫虫体或脑包囊作为诊断依据；②弓形虫分子生物学诊断，主要以是否扩增到弓形虫特异性片段为诊断依据。如传统 PCR扩增弓形虫 529bp，巢式 PCR检测弓形虫 P30基因，若两者扩增结果均为阳性，则基本可判断为该猪已感染弓形虫；③弓形虫免疫学诊断，主要以是否检测到抗弓形虫抗体或抗原作为

诊断依据，常用方法有 IFA、IHA、MAT、ELISA和GICA。

3.2常用弓形虫感染诊断方法优点与缺点分析

①弓形虫虫体诊断，优点：准确；缺点：诊断时间长、需要饲养实验动物、对诊断环境和诊断人员技术有严格要求；适用对象：实验室研究；②弓形虫分子生物学诊断，优点：特异性高、灵敏度高、诊断方法种类多样；缺点：需要费用高昂的仪器和标准的实验环境、对诊断人员技术有严格要求；适用对象：一般用于实验室研究；③弓形虫免疫学诊断，优点：可批量检测、对诊断环境和诊断人员要求相对较低、操作相对简单；缺点：特异性不及弓形虫虫体诊断，灵敏度不及分子生物学诊断；适用对象：一般用于临床诊断[9]。

3.3 临床常用诊断方法概述

IHA，间接血凝试验的简称，英文全名为：indirect hemagglu-tination test，1957 年 Jacob 和 Lunde 率先用于检测弓形虫感染，1994年曾为国际认定的弓形虫诊断方法两种之一，其优点：价格合理、特异性强且操作方便。实验主要通过红细胞吸附弓形虫特异性抗原，检测血清中有抗弓形虫抗体，若红细胞不稳定，易出现假阳性，且重复性差，临床应用发现敏感性不及 ELISA[10]。

MAT，改良凝集试验的简称，英文全名为：modified aggluti-nation test，是其他国家用于猪弓形虫感染诊断使用较多的诊断方法[11]。与 ELISA、IHA和 LAT一并，四种方法检测同样猪血清，结果显示MAT的敏感性最高[12]。利用MAT检测仔猪弓形虫、蠕虫和病毒感染阳性血清，结果显示：无交叉感染，该方法的特异性较高[13]。但由于成本较高，最终没有被广泛推广。

ELISA，间接酶联免疫吸附试验的简称，英文全名：en-zyme-linked immunosorbent assay，1976年 Voller首次用于弓形虫诊断，是我国近 20年猪弓形虫病诊断使用最多的诊断方法，检测内容为猪抗弓形虫 IgG。优点：诊断时间较短、特异性高、灵敏性高、重复性好、检测内容灵活、可批量检测、操作可程序化，有望实现工业化检测，是理想的临床检测方法。

GICA，为胶体金免疫层析技术的简称，英文全名为：colloidalgold immunochromatography assay。报道显示：已制备的以弓形虫分泌抗原为检测对象的胶体金试纸条，敏感性高，与 IHA符合率为 82.4%[14]。Huang等用胶体金与重组融合蛋白吸附，制备金标试纸条，用于检测猫弓形虫抗体，结果显示该实验的敏感性达100%，特异性达 94.5%[15]。2010年李聪颖制备的可用于山羊弓形虫病检测的试纸条，结果显示：样品检测与 ELISA检测结果符合率

弓形虫病是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种人畜共患寄生虫病，呈全球性分布。我国猪弓形虫感染情况较为普遍，

全国猪弓形虫平均感染率为 40%左右。猪是人类主要的肉食来源，猪感染弓形虫不仅危害猪群的健康和养殖效益，也是人感染弓形虫的

一个重要源头。因此，弓形虫病的防控有十分重要的社会经济价值。

猪弓形虫病；流行病学；临床症状；诊断方法

猪弓形虫病的流行病学、临床症状及诊断方法概述

王敏 1，李明俊 2

（1.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000；2.广东茂名农林科技职业学院广东茂名 525000）

作者简介：王敏（1991— ），讲师，硕士，畜禽疾病防治，邮

箱：[email protected]。

doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2021.04.017

23


也可以选择如磺胺、四环素、新霉素等药物进行治疗。

4 腹泻疫病预防方式

首先，预防腹泻的关键就是做好日常免疫工作，由于仔猪腹泻发病几率较高，因此免疫的重点应当是产前母猪，在免疫疫苗的选择过程中，最好选择与本场血清型相一致的疫苗进行使用，此外，若使用的疫苗防疫效果不佳，则很有可能是养殖场中细菌血清型已经发生变化，因此要及时更换疫苗，确保免疫效果的有效性。

其次，注意喂养中的预防，不同生长阶段的猪对于各类营养物质的需求也不相同，尤其是仔猪和生长猪，不能喂养同一种饲料，因此要根据生长周期的不同使用不同种类的饲料。此外，饲料的储存要做到科学合理，在饲料使用前注意检查饲料品质，防止发霉变质。最后，要注意饲料的搭配，做到营养全面且均衡，饲料中的各类营养物质不仅能够满足猪生长的需要，而且还能够提升其免疫能力，间接促进其生长发育[3]。

最后，注意环境预防，在养殖场中，阴暗潮湿的环境不仅不利

于猪的生长，而且还会滋生各类细菌，此外，缺少阳光的照射，猪群可能会产生某些应激反应，尤其是对于仔猪而言，其免疫能力较低，因此对于环境有着较高的要求，在冬季要及时进行保温御寒，在夏季高温环境下也要注意降温方式，切不可将冷水直接喷洒在猪群中，因此，合理地控制猪圈温度也能够防止腹泻疫病的发生。

5 结语

随着我国养殖业的迅速兴起，生猪养殖已经成为养殖业中的支柱性产业，尤其是近几年人们对于物质的需求越来越高，对于高品质肉类的需求也越来越大，因此，养殖户在进行养殖过程中，要注重做好各类疫病的防治工作，并为猪群的生长提供一个理想的场所，以此降低腹泻的发病几率，从根本上保障生猪养殖健康。█参考文献：[1]于涛.猪腹泻病的综合防治[J].畜牧业环境,2020(6):58.[2]黄茹琪.猪腹泻常见病因及防控措施[J].畜牧兽医科学,2019(17):30.[3]杨光.猪腹泻疾病的预防和治疗研究[J].农民致富之友,2019(8):158.

为 85%[16]。胶体金免疫层析技术操作简单、携带方便、检测过程短，是临床检测中理想检测方法。

4 弓形虫病诊断方法的发展现状

4.1 弓形虫病诊断方法常用诊断抗原

临床上弓形虫病诊断方法主要是以弓形虫全虫蛋白或弓形虫分泌蛋白为诊断抗原，检测动物体内抗弓形虫抗体，或者制备弓形虫分泌抗原重组蛋白的抗体检测动物体内的弓形虫抗原，目前文献报道主要有基于弓形虫 MIC3、SAG1、SAG2、SAG3、GRA6、GRA7、BAG1等基因型检测方法的研究，但普遍都存在特异性和敏感性不够理想的问题[17]。

4.2 目前弓形虫病诊断方法的不足与可能的改进措施

以猪弓形虫病诊断试剂盒为例：①抗体检测对象均为 IgG抗体，而 IgG抗体检测临床价值不突出，检测猪抗 IgM抗体作为诊断依据效果更为理想。猪感染弓形虫，一般在 7d左右出现抗弓形虫 IgM抗体，并逐渐升高至顶峰，在 2个月左右消失，而抗弓形虫IgG抗体则在 1月后出现，一般可以维持 1年以上。一般可根据猪血清中是否含抗弓形虫 IgM抗体结果，判定该猪是否在近期感染弓形虫，而抗弓形虫 IgG抗体存在时间长，检测抗弓形虫 IgG抗体可作为弓形虫病流行病学调查研究依据，但作为药物防治的指导意义不大；②可尝试猪弓形虫抗 IgM抗体和弓形虫抗原联合检测进行判断，IgM是感染初期产生的抗体，一般可作为早期诊断依据，IgG抗体产生时间晚于 IgM的主要抗体[18]，而弓形虫分泌抗原的出现则提示极有可能是急性感染，因此抗原与 IgM抗体检测联合使用具有较好的临床诊断价值。█参考文献：[1]赵俊龙,何国声,姚宝安,等.马丽华.湖北省规模化猪场寄生虫病综合防控措施研究Ⅰ.寄生虫感染情况调查[J].湖北农业科学,1998(4):51-53.[2]王海燕,任庆娥,菅复春,等.河南省部分地区猪弓形虫感染调查及猪源虫

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疾病防治

24

畜牧兽医学报　２０２１，５２（８）：２２３３－２２４３

Ａｃｔａ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａ　ｅｔ　Ｚｏｏｔｅｃｈｎｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ

ｄｏｉ：１０．１１８４３／ｊ．ｉｓｓｎ．０３６６－６９６４．２０２１．０８．０１６开放科学（资源服务）

标识码（ＯＳＩＤ）：

猪流行性腹泻病毒通过ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ／ＢＣＬ２Ｌ２轴调控细胞凋亡

郑红青１，吴旭锦１＊，朱小甫１，尹宝英１，高军花２，李艳芝３，植婵萍４

（１．咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所，咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室，咸阳７１２０００；

２．邢台市农业农村局，邢台０５４００１；３．衡水职业技术学院，衡水０５３０００；４．广东茂名农林科技职业学院，茂名５２５０００）

摘　要：旨在探讨ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ在猪流行腹泻病毒（ＰＥＤＶ）引起的细胞凋亡过程中所起的作用，并探讨其发挥作用

的机制。以ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞为模型，检测ＰＥＤＶ感染过程中细胞的凋亡情况以及６个与凋亡相关ｍｉ－ｃｒｏＲＮＡｓ的表达差异，ＲＴ－ｑＰＣＲ检测ＰＥＤＶ感染过程中与凋亡相关ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ的表达差异，合成ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的

模拟物和抑制剂，转染ＭＡＲＣ－１４５细胞，采用流式细胞术检测ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞的凋亡情况，流式细胞

术检测过表达和敲低ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后细胞的凋亡情况，采用生物信息学方法预测ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的靶基因，荧光素酶

报告基因检测了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ和靶基因的结合情况，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测了过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ对ＢＣＬ－ｗ和ＰＥＤＶ蛋白表达水平的调控，用ｓｉＲＮＡ敲低ＢＣＬ－ｗ蛋白检测细胞凋亡情况。结果显示，ＰＥＤＶ的感染可以诱导ＭＡＲＣ－１４５细胞凋亡（Ｐ＜０．０５），与凋亡相关的ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ，如ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ和ｍｉＲ－１４９－５ｐ的表达上调（Ｐ＜０．０５；Ｐ＜０．００１），ｍｉＲ－１３８－３ｐ的表达下调（Ｐ＜０．０５）。其中，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ在病毒感染后升高了约５倍（Ｐ＜０．０１）。过表达

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后，细胞凋亡率显著升高（Ｐ＜０．０１）；敲低ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后，细胞凋亡率降低（Ｐ＜０．０５）。用生物信息

学方法预测ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ与ＢＣＬ２Ｌ２的３′ＵＴＲ区域有结合位点，荧光素酶报告基因试验显示ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以和

ＢＣＬ２Ｌ２基因靶向结合（Ｐ＜０．０１），过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后细胞内ＢＣＬ－ｗ蛋白的表达明显下调，且病毒的感染可以降

低ＢＣＬ－ｗ的表达水平，敲低ＢＣＬ－ｗ后细胞凋亡率显著升高（Ｐ＜０．０１）。ＰＥＤＶ感染后可以通过上调ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的表达来下调ＢＣＬ２Ｌ２的表达，从而促进细胞的凋亡。

关键词：猪流行性腹泻病毒；微小ＲＮＡ１３３ｃ－３ｐ；ＢＣＬ２样蛋白；凋亡

中图分类号：Ｓ８５２．６５９．６　　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：０３６６－６９６４（２０２１）０８－２２３３－１１

收稿日期：２０２１－０２－０４

基金项目：咸阳职业技术学院科研基金重大项目（２０２０ＫＪＡ０１）；咸阳市科技计划项目（２０１９ｋ０２－６４）；陕西省教育厅专项科学研究计划项目（１８

ＪＫ１２０８）；陕西科技计划一般青年项目（２０２１ＪＱ－９００）；咸阳职业技术学院博士启动基金（２０２１ＢＫ０４）；陕西省科技计划项目（２０２１

ＮＹ－０３７）

作者简介：郑红青（１９８３－），女，河北枣强人，博士，主要从事病毒感染调控机制研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｇａｉｙｕｘｉａｎｇ３＠１２６．ｃｏｍ；Ｔｅｌ：０２９－３３６８０１０９

＊通信作者：吴旭锦，主要从事病毒感染调控机制研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｏｙｕａｎｗｘｊ＠１６３．ｃｏｍ

Ｐｏｒｃｉｎｅ　Ｅｐｉｄｅｍｉｃ　Ｄｉａｒｒｈｅａ　Ｖｉｒｕｓ　Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　Ｃｅｌｌ　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｂｙｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ／ＢＣＬ２Ｌ２Ａｘｉｓ

ＺＨＥＮＧ　Ｈｏｎｇｑｉｎｇ１，ＷＵ　Ｘｕｊｉｎ１＊，ＺＨＵ　Ｘｉａｏｆｕ１，ＹＩＮ　Ｂａｏｙｉｎｇ１，

ＧＡＯ　Ｊｕｎｈｕａ２，ＬＩ　Ｙａｎｚｈｉ　３，ＺＨＩ　Ｃｈａｎｐｉｎｇ４

（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｅｐｉｄｅｍｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ　ｉｎ　Ｘｉａｎｙａｎｇ　Ｃｉｔｙ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，

Ｘｉａｎｙａｎｇ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｘｉａｎｙａｎｇ７１２０００，Ｃｈｉｎａ；２．ＸｉｎｇｔａｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｘｉｎｇｔａｉ　０５４００１，Ｃｈｉｎａ；３．Ｈｅｎｇｓｈｕｉ　Ｃｏｌｌｅｇｅｏｆ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｅｎｇｓｈｕｉ　０５３０００，Ｃｈｉｎａ；４．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍａｏｍｉｎｇ

Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　＆Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｍａｏｍｉｎｇ５２５０００，Ｃｈｉｎａ）

畜　牧　兽　医　学　报５２卷　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｐｕｒｐｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｗａｓ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ（ＰＥＤＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，ＰＥＤＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ａ　ｍｏｄｅｌ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘ－ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｏｆ　６ａｐｏｐｔｏｓｉｓ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　６ａｐｏｐｔｏｓｉｓ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ＲＴ－ｑＰＣＲ　ｄｕｒｉｎｇ　ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ＰＥＤＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｏｎ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅｔａｒｇｅｔ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｗａｓ　ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ｂｙ　ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐａｎｄ　ｔｈｅ　３′ＵＴＲ　ｏｆ　ｔａｒｇｅｔ　ｇｅｎｅ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　ｒｅｐｏｒｔｅｒ　ｇｅｎｅｔ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ａｎｄ　ＰＥＤＶ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　ｗｈｅｎ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｗａｓ　ｏｖｅｒ－ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　ｗｈｅｎ　ｋｎｏｃｋ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ａｎｄ　ｍｉＲ－１４９－５ｐ，ｗｅｒｅ　ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５ｏｒ　Ｐ＜０．００１），ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３８－３ｐ　ｗａｓ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ａｎｄ　ｍｉＲ－１４９－５ｐ　ｗｅｒｅ　ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５ｏｒ　Ｐ＜０．００１），ａｎｄ　ｍｉＲ－１３８－３ｐ　ｗａｓ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｓｅ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓ－ｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｗａｓ　ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ａｌｍｏｓｔ　５ｆｏｌｄｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｓｉｇ－ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅｗａｓ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｋｎｏｃｋ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏｐｒｅｄｉｃｔ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　３′ＵＴＲ　ｏｆ　ＢＣＬ２Ｌ２ｇｅｎｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　ｒｅｐｏｒｔｅｒ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｃｏｕｌｄ　ｂｉｎｄ　ｔｏ　３′ＵＴＲ　ｏｆ　ＢＣＬ２Ｌ２ｇｅｎｅ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ｉｎ　ｃｅｌｌｓ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｏｖｅｒ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ（Ｐ＜０．０１）．ＰＥＤＶ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ．Ｋｎｏｃｋ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗｃｏｕｌｄ　ｉｎｄｕｃｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ｂｙｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ，ｔｈｅｒｅｂｙ　ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ；ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ；ＢＣＬ２Ｌ２；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：ＷＵ　Ｘｕｊｉｎ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｏｙｕａｎｗｘｊ＠１６３．ｃｏｍ

　　猪流行性腹泻病毒（ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓ，ＰＥＤＶ）最早于１９７１年发现于英国［１］，２０１０年

之前的毒株由于有疫苗毒株的保护，以零星发病为

主要特征。习惯上把２０１０年之前的ＰＥＤＶ毒株分

到Ｇ１ａ组［２］。在２０１０年１０月，我国南方几个省发

现了新的变异毒株，这些毒株主要危害７日龄以内

的仔猪，仔猪发病率和死亡率可高达９０％［３］。

ＰＥＤＶ属于冠状病毒科α冠状病毒属，是有膜的单

股正义ＲＮＡ病毒，核酸长约２８ｋｂ，包括５′端帽子

结构和３′的ｐｏｌｙ　Ａ尾。基因组有６个开放阅读框，分别为ＯＲＦ１ａ／１ｂ，分别编码Ｓ、Ｍ、Ｅ、Ｎ和ＯＲＦ３，其中ＯＲＦ１ａ／１ｂ又被切割成１６个非结构蛋白［４］。这些非结构蛋白对于病毒基因的复制至关重要。Ｓ基因可被切割成Ｓ１和Ｓ２亚单位，与病毒的进入和

膜融合有关。由于ＲＮＡ病毒的易突变决定了ＰＥＤ

疫苗研发的难度［５］，目前ＰＥＤＶ突变毒株已经在世

界范围内进化了４个主要的组群，给我国和世界养

猪业造成了重大经济损失［３］。微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡｓ）是非编码

ＲＮＡ，长１８～２５ｂｐ，不编码蛋白质。成熟的ｍｉ－ｃｒｏＲＮＡｓ是单链的，通过与靶蛋白ｍＲＮＡ　３′ＵＴＲ区域的结合，导致靶蛋白ｍＲＮＡ被切割，从而调控

基因的转录水平，甚至影响蛋白翻译的水平，调控蛋

白的表达，进而调控细胞内多种生物学过程［６］。近

年来的研究表明，ｍｉＲＮＡｓ也可以通过直接与病毒

基因组ＲＮＡ结合或者通过改变细胞的转录谱来影

响ＲＮＡ病毒的复制和致病性［７］。在关于ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的研究中发现，它在多种细胞中发挥着调

控细胞凋亡和增殖的作用。体内试验发现，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可抑制心肌细胞的纤维化和心肌肥大［８］。

４３２２

　８期郑红青等：猪流行性腹泻病毒通过ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ／ＢＣＬ２Ｌ２轴调控细胞凋亡

另外，在癌细胞的研究中发现，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可抑制

细胞的增殖和迁移［９－１１］。

ＢＣＬ２蛋白家族整合了触发细胞存活或凋亡的

信号，ＢＣＬ－ｗ蛋白（又称为ＢＣＬ２样蛋白２），属于

ＢＣＬ２家族的成员，由ＢＣＬ２Ｌ２基因编码［１２］。研究

表明，ＢＣＬ－ｗ的ＢＨ１结构域的Ｇｌｙ９４残基可以抑

制ＢＡＫ的活性，ＢＣＬ－ｗ的抗凋亡作用主要通过与

ＢＡＫ、ＢＡＸ相互作用发挥抑制细胞凋亡的作用［１３］。非刺激情况下，ＢＣＬ－ｗ蛋白通常通过其疏水结构域

与线粒体、内质网和核膜的脂质双分子层结合，在静

息细胞中，ＢＣＬ－ｗ的ｃ端结构域在疏水囊内折叠，仅松散地附着在线粒体膜上，当接收到凋亡信号时，

ＢＣＬ－ｗ的ｃ端臂通过促凋亡ＢＨ３－ｏｎｌｙ蛋白的连接

释放，从而促进ＢＣＬ－ｗ与线粒体之间的紧密相互作

用发挥抗凋亡的作用［１４－１５］。关于ＰＥＤＶ感染引起细胞凋亡的机制，有研究

对ＰＥＤＶ感染细胞转录组测序发现，感染前后与凋

亡相关信号通路分子表达水平差异显著［１６］，并且

ＰＥＤＶ也可以通过ｐ５３和线粒体凋亡通路促进细胞

凋亡［１７－１８］。ＰＥＤＶ感染诱导Ｖｅｒｏ细胞凋亡［１９］，那

么ＰＥＤＶ是否也诱导ＭＡＲＣ－１４５细胞的凋亡，这种

凋亡是否由于ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ的表达丰度改变影响凋

亡相关蛋白的表达，而凋亡蛋白表达量的改变抑制

或促进了细胞凋亡呢？对这个问题的研究将对阐明

ＰＥＤＶ致病机制具有重要意义。本研究首先以ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞为

模型，分析了在ＰＥＤＶ感染过程中与细胞凋亡相关

的ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ表达丰度的变化，选取差异表达最明

显的ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ进一步探究ＰＥＤＶ感染诱导细

胞凋亡的可能机制，以期为明确ＰＥＤＶ的胞内复制

机制及抵抗ＰＥＤＶ感染提供新的参考资料。

１　材料与方法

１．１　材料和仪器

ＭＡＲＣ－１４５细胞（非洲绿猴肾上皮细胞）（咸阳

市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室）实验室保存，Ｖｅｒｏ细胞为实验室保存，高糖ＤＭＥＭ细胞培养液购自美国Ｈｙｃｌｏｎｅ公司；减血清培养基

ＯＰＴＩ－ＭＥＭ、胰蛋白酶、转染试剂Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００、ｍｉｃｒｏＲＮＡ模拟物（ｍｉＲ－１３３－３ｐ　ｍｉｍｉｃｓ）、模

拟物对照（ｍｉｍｉｃｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ）、抑制剂（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）和抑

制剂对照（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ）、ＳＣ、ｓｉＢＣＬ－ｗ－１、

ｓｉＢＣＬ－ｗ－２、ｓｉＢＣＬ－ｗ－３、ＣＯ２培养箱、生物安全柜均

购自美国Ｔｈｅｒｍｏ公司；胎牛血清购自德国ＰＡＮ－Ｂｉｏｔｅｃｈ公司；荧光定量试剂盒、ｍｉｃｒｏＲＮＡ第一股

ＲＮＡ合成试剂盒、总ＲＮＡ提取试剂ＲＮＡｉｓｏ均购

自宝生物工程（大连）有限公司；辣根过氧化物酶

（ＨＲＰ）标记的羊抗兔ＩｇＧ（货号：ｂｓ－０２９５Ｇ－ＨＲＰ）和

ＨＲＰ标记羊抗小鼠ＩｇＧ（货号：ｂｓ－４０２９６Ｇ－ＨＲＰ）购自

北京博奥森生物技术有限公司；引物由北京擎科生物

公司合成，引物序列见表１；ＭＴＴ细胞增殖及细胞毒

性检测试剂盒购自碧云天公司；ＰＥＤＶ　Ｎ蛋白单克

隆抗体由上海兽医研究所童光志研究员馈赠；细胞内

参β－ａｃｔｉｎ和ＢＣＬ－ｗ蛋白的抗体购于细胞信号通路技

术公司；ｐｍｉｒＧＬＯ质粒购自普洛麦格公司。ａｎｔｉ－ＢＣＬ－ｗ（２７２４）购自Ｃｅｌｌ　Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＣＳＴ）。

１．２　病毒和细胞培养

本研究使用的ＰＥＤＶ毒株为ＣＨ／ＨＢＴＳ／２０１７（ＧｅｎＢａｎｋ收录号：ＭＨ５８１４８９．１），作者于２０１８年分

离自河北唐山某暴发猪流行性腹泻猪场的病料中。

ＭＡＲＣ－１４５细胞用含有１０％胎牛血清、１％双抗的高

糖ＤＭＥＭ培养基，在３７℃、５％ＣＯ２培养箱中培养。细胞传代时用０．２５％胰蛋白酶进行消化传代。

１．３　猪流行性腹泻病毒感染ＭＡＲＣ－１４５细胞

用Ｖｅｒｏ细胞扩增病毒，待细胞病变８０％时收

毒，ＴＣＩＤ５０测病毒滴度，细胞长到８０％融合度，用

ＰＢＳ缓冲液清洗３遍，配制含５μｇ·ｍＬ－１胰酶的

ＤＭＥＭ感染液，将病毒加到ＭＡＲＣ－１４５细胞上，轻

轻摇匀，孵育１．５ｈ后弃掉毒液，换液在ＣＯ２培养箱

继续培养。

１．４　免疫荧光试验

ＭＡＲＣ－１４５长成单层细胞后，用含２μｇ·ｍＬ－１胰

酶的ＤＭＥＭ培养液感染ＣＨ／ＨＢＴＳ／２０１７毒株，感染复数为０．１ＭＯＩ。１２ｈ后留样用４％多聚甲醛

４℃固定３０ｍｉｎ，再用１％Ｔｒｉｔｏｎ　１００室温通透

１０ｍｉｎ，ＰＢＳ洗３次，每次５ｍｉｎ，５％脱脂奶粉封闭

１ｈ，一抗ＰＥＤＶ　Ｎ蛋白抗体过夜孵育，ＰＢＳ洗３次，每次５ｍｉｎ。ＦＩＴＣ标记的羊抗小鼠ＩｇＧ（货号：ｂｓ－０２９６Ｇ－ＦＩＴＣ）室温孵育１ｈ，Ｈｏｃｈｅｓｔ　３３２５８染核

５ｍｉｎ，封片观察。

１．５　ＴＣＩＤ５０的测定

经过２４ｈ培养生长状态良好的ＭＡＲＣ－１４５细

胞，消化后将浓度稀释到２×１０５个·ｍＬ－１左右，铺

到９６孔板，每孔加１００μＬ细胞混悬液，将培养板放

到细胞培养箱培养２４ｈ长成单层细胞。用１０支

１．５ｍＬ离心管，每管９００μＬ含１０μｇ·ｍＬ－１胰酶

５３２２


的ＤＭＥＭ培养基依次将病毒倍比稀释（从１０－１稀

释到１０－１０），将９６孔板培养的单层细胞用ＰＢＳ洗

３遍后，按照９６孔板上的列数从第１～１０列将病毒

稀释液依次加入，剩余只加培养基作对照。第３天

用Ｒｅｅｄ－Ｍｕｅｎｃｈ方法计算ＴＣＩＤ５０。

１．６　细胞转染

将ＭＡＲＣ－１４５细胞以２×１０５个·孔－１的密度

接种至１２孔板，待细胞长到８０％融合度时进行转

染。按照ＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅＴＭ２０００转染试剂使用说明

书，将ｍｉｍｉｃｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ（ＭＣ）、ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ、ｉｎｈｉｂｉ－ｔｏｒ、ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ（ＩＣ）和ＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅＴＭ２０００分别跟ＯＰＴＩ－ＭＥＭ混合，室温静置５ｍｉｎ后，将合

成的模拟物和抑制剂的混合液及其对照分别跟Ｌｉ－ｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ混合液混合，轻轻混匀，静置１５ｍｉｎ后，轻轻滴到细胞培养液上。

１．７　荧光定量ＰＣＲ（ＲＴ－ｑＰＣＲ）培养细胞处理后用ＰＢＳ冲洗３遍，加ＲＮＡｉｓｏ

到细胞表面，静置５ｍｉｎ，按照厂家说明书提取细胞

的总ＲＮＡ。用５００ｎｇ的细胞总ＲＮＡ用逆转录试

剂盒得到ｃＤＮＡ，按照ｍｉｃｒｏＲＮＡ逆转录试剂盒说

明书所示，合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ的ｃＤＮＡ，使用定量

ＰＣＲ试剂盒和特异性引物（表１）进行荧光定量

ＰＣＲ的反应体系配制，使用荧光定量ＰＣＲ仪在反

应条件：９５℃５ｍｉｎ，９５℃２０ｓ、６２℃３０ｓ，４０个循

环，７２℃３ｍｉｎ条件下进行反应。其中ｍｉｃｒｏＲＮＡ内参使用试剂盒中的Ｕ６

ｓｍａｌｌ　ＲＮＡ引物，ＢＣＬ２Ｌ２内参为ＧＡＰＤＨ，采用

２－ΔΔＣｔ法计算ｍｉＲＮＡ和ＢＣＬ２Ｌ２ｍＲＮＡ表达。

１．８　ＭＴＴ试验

每孔约５×１０３个细胞接种于９６孔板，到８０％融合度时将模拟物对照按照０、２０、５０ｎｍｏｌ·Ｌ－１转

染ＭＡＲＣ－１４５细胞，６ｈ后更换新鲜培养基，２４ｈ后

移除培养基，每孔加２０μＬ　５ｍｇ·ｍＬ－１无菌的

ＭＴＴ染料，３７℃培养４ｈ，每孔加１５０μＬ的ＤＭ－ＳＯ，读取４９０ｎｍ的吸光值。

１．９　流式细胞术

经过不同处理的细胞用胰酶消化下来，用ＰＢＳ洗１遍，用ＦＡＣＳ　ｂｕｆｆｅｒ重悬，单细胞悬液在Ａｎ－ｎｅｘｉｎ　Ｖ中室温孵育３０ｍｉｎ上机检测。

１．１０　荧光素酶报告基因试验

将含有ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ结合位点的ＢＣＬ２Ｌ２　３′ＵＴＲ区域的野生型（ＷＴ）和突变型（ＭｕＴ）连接到

ｐｍｉｒＧＬＯ荧光素酶报告基因质粒，分别命名为

ｐｍｉｒ－ＢＣＬ２Ｌ２－ＷＴ和ｐｍｉｒ－ＢＣＬ２Ｌ２－ＭｕＴ，将ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ模拟物和模拟物对照（ＭＣ）跟上述２个质

粒分别转染进ＭＡＲＣ－１４５细胞，４８ｈ后，按照荧光

素酶报告基因试剂盒使用说明使用多功能酶标仪检

测荧光素酶活性。

表１　引物序列

Ｔａｂｌｅ　１　Ｐｒｉｍｅｒ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ

基因

Ｇｅｎｅ

引物序列（５′→３′）

Ｐｒｉｍｅｒ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ

ｍｍｌ－ｍｉＲ－７Ｆ：ＣＧＧＴＧＧＡＡＧＡＣＴＡＧＴＧＡＴＴＴＴＧＴＴＧＴｍｍｌ－ｍｉＲ－１３８－５ｐＦ：ＡＧＣＴＧＧＴＧＴＴＧＴＧＡＡＴＣＡＧＧＣＣＧｍｍｌ－ｌｅｔ－７ａ－５ｐＦ：ＧＴＧＡＧＧＴＡＧＴＡＧＧＴＴＧＴＡＴＡＧＴＴｍｍｌ－ｍｉＲ－１４９－５ｐＦ：ＴＣＴＧＧＣＴＣＣＧＴＧＴＣＴＴＣＡＣＴＣｍｍｌ－ｍｉＲ－２１０－３ｐＦ：ＣＴＧＴＧＣＧＴＧＴＧＡＣＡＧＣＧＧＣＴＧＡＡｍｍｌ－ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐＦ：ＴＴＴＧＧＴＣＣＣＣＴＴＣＡＡＣＣＡＧＣＴＧｍｍｌ－ｍｉＲ－１５５Ｆ：ＴＴＡＡＴＧＣＴＡＡＴＣＧＴＧＡＴＡＧＧＧＧＴＧｍｍｌ－ｍｉＲ－２５Ｆ：ＣＡＴＴＧＣＡＣＴＴＧＴＣＴＣＧＧＴＣＴＧＡｍｍｌ－ｍｉＲ－１７－３ｐＦ：ＡＣＴＧＣＡＧＴＧＡＡＧＧＣＡＣＴＴＧＴｍｍｌ－ｍｉＲ－１８６－５ｐＦ：ＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＴＣＣＴＴＴＴＧＧＧＣＴ

β－ａｃｔｉｎ　Ｆ：ＡＴＣＧＴＧＣＧＴＧＡＣＡＴＴＡＡＧ

Ｒ：ＡＴＴＧＣＣＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＡＣ

ＢＣＬ２Ｌ２Ｆ：ＡＴＧＡＧＴＴＣＧＡＧＡＣＣＣＧＣＴＴＣ

Ｒ：ＣＴＴＴＧＴＣＴＴＴＧＧＧＧＣＴＧＣＡＣ

ｓｉＢＣＬ－ｗ－１ＣＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＡＧＡＴＧＧＣＴＧＡＴＧＡＡｓｉＢＣＬ－ｗ－２ＧＡＧＡＴＧＧＣＴＧＡＴＧＡＡＧＴＡＡＴＴＴＧＣＡｓｉＢＣＬ－ｗ－３ＧＧＣＴＧＡＴＧＡＡＧＴＡＡＴＴＴＧＣＡＧＴＧＡＡ

６３２２


１．１１　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ将含蛋白酶抑制剂的ＲＩＰＡ加到处理细胞表

面，冰上孵育３０ｍｉｎ，１２　０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，吸取上清提取细胞的总蛋白。提取的总蛋白用蛋

白定量试剂盒定量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳时每孔加相

同的蛋白量，电泳完毕转到ＰＶＤＦ膜，转膜完成后

用５％的脱脂奶粉液封闭，然后用一抗［ＰＥＤＶ　Ｎ蛋白抗体或ａｎｔｉ－ＢＣＬ－ｗ（２７２４）］４℃孵育过夜，再

用ＨＲＰ标记二抗（羊抗小鼠ＩｇＧ或羊抗兔ＩｇＧ）室

温孵育２ｈ，ＴＢＳＴ洗３遍，使用曝光显影液进行

曝光。

１．１２　统计分析

用Ｇｒａｐｈｐａｄ　Ｐｒｉｓｍ　６进行统计分析，图表使用

Ｕｎｐａｉｒｅｄ　ｔ－ｔｅｓｔ、ｏｎｅ－ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ和ｔｗｏ－ｗａｙＡＮＯＶＡ统计方法。用ＳＰＳＳ　２０．０软件对数据进

行统计学分析，数据以“ｘ－ ±ｓ”表示，两组间比较采

用独立样本ｔ检验，多组间比较采用单因素方差分

析；以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２　结　果

２．１　ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞并诱导细胞凋亡

将ＰＥＤＶ毒株ＣＨ／ＨＢＴＳ／２０１８株以０．１和

１ＭＯＩ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞，细胞在０、１２和２４ｈ后细胞病变如图１ａ所示，在感染１２ｈ后细胞也出

现了融合的现象，但融合细胞数量比较少，在感染

２４ｈ后１ＭＯＩ感染的细胞病变出现了片状融合。

１２和２４ｈ病毒的滴度如图１ｂ所示，１ＭＯＩ感染后

２４ｈ病毒滴度在６．５ｌｇＴＣＩＤ５０·ｍＬ－１左右，０．１ＭＯＩ感染２４ｈ后病毒滴度在４．２ｌｇ　ＴＣＩＤ５０·ｍＬ－１

左右。由结果可知，病毒可以在ＭＡＣＲ－１４５细胞高

效增殖。在病毒感染１２ｈ后留样，间接免疫荧光示

踪病毒，检测病毒感染细胞的情况，如图１ｃ所示，病毒以０．５和０．１ＭＯＩ感染可以在ＭＡＲＣ－１４５细胞

内高效复制。分别以０．０、０．１、０．５、１．０ＭＯＩ感染

ＭＡＲＣ－１４５细胞，流式细胞术检测ＰＥＤＶ感染

ＭａｒＣ１４５细胞２４ｈ后细胞的凋亡情况，如图１ｅ所

示，与对照组相比，感染０．１ＭＯＩ病毒１２ｈ后，细

胞凋亡率显著升高（图１ｄ）（Ｐ＜０．０５），随着感染复

数的增大，细胞凋亡率显著增加（Ｐ＜０．０１）。

２．２　ＰＥＤＶ感染引起ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ显著上调

为了进一步探究ＰＥＤＶ感染引起细胞凋亡的

原因，进一步从ＲＮＡ水平揭示ＰＥＤＶ诱导细胞凋

亡的机制，选择了６个文献中报道的影响细胞凋亡

的ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ，分别是ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－１８６－５ｐ、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１４９－５ｐ、ｍｉＲ－１３８－５ｐ。使用

ＲＴ－ｑＰＣＲ方法检测在ＰＥＤＶ感染前后它们的表达

差异。如图２所示，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的表达显著上调

（Ｐ＜０．０１），ｍｉＲ－１４９－５ｐ略有升高（Ｐ＜０．０５），ｍｉＲ－１３８－５ｐ表达下调（Ｐ＜０．０５），ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－１８６－５ｐ和

ｍｉＲ－１５５的表达在ＰＥＤＶ感染前后差异无统计学

意义（Ｐ＞０．０５）。

２．３　过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ促进了细胞凋亡

将合成的ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的模拟物对照（ＭＣ）转

染细胞后，用ＭＴＴ试验检测细胞活性，结果表明０、

２０、３０、５０ｎｍｏｌ·Ｌ－１的转染浓度不影响细胞活性

（图３ａ）。转染ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后６ｈ感染ＰＥＤＶ，继

续感染１８ｈ后收样，流式细胞术检测细胞凋亡，结

果显示，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ过表达并感染ＰＥＤＶ后细胞

凋亡率显著升高（Ｐ＜０．００１）（图３）。

２．４　敲低ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ抑制了病毒感染引起的细

胞凋亡

　　将ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的抑制剂转染ＭＡＲＣ－１４５　１２ｈ换液后感染１ＭＯＩ病毒，继续培养１２ｈ后收取细

胞样品，流式细胞术检测细胞凋亡情况，结果显示，敲低ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后细胞凋亡率明显下降（Ｐ＜０．０１）（图４）。

２．５　ＰＥＤＶ感染后下调了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的靶基因

ＢＣＬ－ｗ的表达

　　为了进一步确认ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ调控的靶基因，使用生物信息学在线预测网站（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔａｒ－ｇｅｔｓｃａｎ．ｏｒｇ／ｖｅｒｔ＿７２／）预测其靶基因，荧光素酶报

告基因用来验证ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ和ＢＣＬ２Ｌ２　３′ＵＴＲ区域的结合。结果发现，ＢＣＬ２Ｌ２基因的３′ＵＴＲ区

域有ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的结合位点（图５ａ），进一步检测

了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的模拟物（ｍｉｍｉｃ）和模拟物对照

（ＭＣ）转染组的荧光素酶活性，结果发现，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以显著降低野生型报告基因质粒的荧光素酶

活性，而对突变型质粒没有影响（Ｐ＜０．０１），这表明

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以与ＢＣＬ２Ｌ２靶基因区域的结合

（图５ｂ）。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测了细胞内转染ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　２４ｈ时ＢＣＬ－ｗ蛋白的表达，结果发现，

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以在细胞内下调ＢＣＬ－ｗ基因的表

达水平，并且ＰＥＤＶ感染也可以下调ＢＣＬ－ｗ的表

达水平（Ｐ＜０．００１）（图５ｃ）。

２．６　敲低ＢＣＬ－ｗ可以促进细胞凋亡

为了检测ＢＣＬ－ｗ是否影响细胞凋亡，合成３条

７３２２


ａ．不同感染复数ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞的病变；ｂ．不同感染复数感染ＭＡＲＣ－１４５细胞后１２和２４ｈ后病毒的滴度；ｃ．ＩＦＡ检测ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞的感染情况；ｄ．不同剂量ＰＥＤＶ导致细胞凋亡百分比柱状图；ｅ．流式细胞仪检测ＰＥＤＶ诱导ＭＡＲＣ－１４５细胞凋亡程度；与Ｍｏｃｋ组比较，＊．Ｐ＜０．０５和＊＊．Ｐ＜０．０１表示显著差异。下同ａ．Ｃｙｔｏｐａｔｈｙ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　０．１ａｎｄ　１ＭＯＩ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ．ｂ．Ｖｉｒｕｓ　ｔｉｔｅｒ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　０．１ａｎｄ　１ＭＯＩ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ；ｃ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｆ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈａｔ　ａｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ　ａｆｔｅｒ　０，０．１，０．５，１ＭＯＩｏｆ　ｔｈｅ　ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ；ｄ．Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　ＰＥＤＶ；ｅ．Ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｍａｒｃ－１４５ｃｅｌｌｓ　ｉｎｄｕｃｅｄｂｙ　ＰＥＤＶ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｍｏｃｋ　ｇｒｏｕｐ，＊．Ｐ＜０．０５，＊＊．Ｐ＜０．０１ａｎｄ＊＊＊．Ｐ＜０．００１ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｔ　０．０５，０．０１ａｎｄ　０．００１ｌｅｖｅｌ，ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ，ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｂｅｌｏｗ图１　流式细胞术检测猪流行性腹泻病毒感染ＭＡＲＣ－１４５细胞的凋亡率Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＭＡＲＣ－１４５ｃｅｌｌｓ　ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ａｆｔｅｒ　ＰＥＤＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ

ｓｉＲＮＡｓ，分别将ｓｉＲＮＡ　ｃｏｎｔｒｏｌ（ＳＣ）、ｓｉＢＣＬ－ｗ－１、

ｓｉＢＣ－Ｌｗ－２、ｓｉＢＣＬ－ｗ－３（序列见表１）转染ＭＡＲＣ－１４５，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测细胞内ＢＣＬ－ｗ的表达水平，由图６ａ可知，ｓｉＢＣＬ２Ｌ２－３敲除效率最高。将ＳＣ和

ｓｉＢＣＬ－ｗ－３转染细胞后流式细胞术检测细胞凋亡情

况，结果显示，敲低ＢＣＬ－ｗ的表达水平促进了细胞

凋亡（图６ｂ）。

３　讨　论

ＰＥＤＶ感染仔猪后能引起仔猪尤其是７日龄以

内的仔猪严重的腹泻，给我国和世界养猪业造成了

严重的经济损失［２０－２１］。由于ＲＮＡ病毒易突变的特

８３２２


图２　与凋亡相关的ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ表达情况Ｆｉｇ．２　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ

性，至今没有有效的疫苗可用，因此急需对病毒感染

细胞的机制进行深入研究。本试验通过检测ＰＥＤＶ感染细胞时凋亡相关

ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ的表达差异，发现了与ＰＥＤＶ感染关系

密切的ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ，为了进一步研究ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ在ＰＥＤＶ感染过程中所起的作用，过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后发现ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ抑制了ＰＥＤＶ的复

制，并且促进了感染细胞的凋亡。为了确定ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ调控的主要靶点，用生物信息学的方法预

测，发现在ＢＣＬ２Ｌ２的３′ＵＴＲ区域有其结合位点，荧光素酶报告基因试验证明ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以

在体外与ＢＣＬ２Ｌ２　３′ＵＴＲ区域结合，在过表达

ａ．转染不同浓度的模拟物对照，ＭＴＴ检测细胞活性的影响；ｂ．凋亡率的柱状图；ｃ．流式细胞术检测过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后细胞的凋亡率ａ．ＭＴＴ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｖｉａｂｉｌｉｔｙ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｍｉｍｉｃ　ｃｏｎｔｒｏｌ；ｂ．Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ　ｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅ；ｃ．Ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ａｆｔｅｒ　ｏｖｅｒ－ｅｘｐｒｅｓｓ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ图３　过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ对细胞凋亡的影响Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｏｖｅｒ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｏｎ　ｃｅｌｌｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后发现细胞内ＢＣＬ－ｗ的表达水平

下调。

凋亡是细胞为了适应外界刺激发生的程序性的

死亡，病毒感染诱导细胞凋亡，而细胞凋亡会抑制病

毒持续感染和扩散，从而防止组织进一步损伤［２２］。

研究表明，许多冠状病毒可以诱导细胞凋亡，如中东

呼吸道综合征冠状病毒（ＭＥＲＳ）和ＳＡＲＳ冠状病毒

感染都可以诱导感染细胞的凋亡［２３－２４］，传染性胃肠

炎病毒可以诱导ＰＫ－１５细胞的凋亡［２５］，而ＰＥＤＶ可以诱导Ｖｅｒｏ细胞凋亡［１８］，本研究结果显示，

ＰＥＤＶ感染可诱导ＭＡＲＣ－１４５细胞的凋亡，并且随

着感染复数的增大凋亡率也相应增加。病毒可以通

过诱导凋亡促进病毒释放，也可以在病毒感染的前

期抑制细胞凋亡促进病毒的复制［２６－２７］，这可能也意

味着凋亡在病毒感染的不同阶段发挥不同的作用。

ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ是一类很短的ＲＮＡ分子，在细胞

９３２２


与ＩＣ组比较，＊＊．Ｐ＜０．０１表示显著差异Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ＩＣ　ｇｒｏｕｐ，＊＊．Ｐ＜０．０１ｉｎｄｉｃａｔｅ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ图４　敲低ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ后细胞的凋亡率Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｃｅｌｌｓ　ａｆｔｅｒ　ｋｎｏｃｋ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ

ａ．生物信息学方法预测在ＢＣＬ２Ｌ２　３′ＵＴＲ的靶向结合位点；ｂ．ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以下调野生型质粒的荧光素酶活性；ｃ．过表达ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ下调细胞内ＢＣＬ－ｗ和ＰＥＤＶ蛋白的表达的水平；与ＭＣ组比较，＊＊．Ｐ＜０．０１和＊＊＊．Ｐ＜０．００１表示显著差异ａ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｔｏ　ｐｒｅｄｉｃｔ　ｔｈｅ　ｔａｒｇｅｔ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅ　ｉｎ　ＢＣＬ２Ｌ２　３′ＵＴＲ；ｂ．ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ　ｐｌａｓｍｉｄｓ；ｃ．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ａｎｄ　ＰＥＤＶ　ｉｎ　ｃｅｌｌｓ；＊＊．Ｐ＜０．０１ａｎｄ＊＊＊．Ｐ＜０．００１ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ图５　ＢＣＬ２Ｌ２是ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的靶基因Ｆｉｇ．５　ＢＣＬ２Ｌ２ｉｓ　ｔｈｅ　ｔａｒｇｅｔ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ

增殖、分化、死亡和发育这些生物过程中发挥重要的

作用，它发挥作用的机制是通过调控基因转录后水

平而影响相应蛋白表达水平［２２］。病毒在感染细胞

的过程中会改变细胞内ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ的表达谱，而这

些ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ会靶向重要的细胞元件，导致细胞生

理过程的改变。Ａ型流感病毒感染Ａ５４９细胞后，

ｍｉＲ－３４ａ的表达显著下降［２８］，而另一篇报道称Ａ型

流感病毒引起ｍｉＲ－２９ｃ的表达上调［２９］，我们先前在

ＭＡＲＣ－１４５细胞的研究中发现ＰＥＤＶ的感染能引

起ｍｉＲ－６７１－５ｐ表达的上调［３０］，本研究发现ＰＥＤＶ的感染能引起细胞ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ表达的上调，该结

果说明病毒感染可能通过改变ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ表达的

丰度来改变细胞的生理状态。从ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ水平

解释ＰＥＤＶ感染细胞时对凋亡的调控，这将为阐明

０４２２


ａ．Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测ｓｉＲＮＡｓ的敲除效率；ｂ．流式细胞术检测检测敲低ＢＣＬ－ｗ后细胞的凋亡情况，＊＊＊．Ｐ＜０．００１表示显著差异ａ．Ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ａｆｔｅｒ　ｋｎｏｗ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ｓｉＲＮＡｓ；ｂ．Ｔｈｅｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ａｆｔｅｒ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｉＢＣＬ－ｗ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ａｎ－ａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ；＊＊．Ｐ＜０．０１ａｎｄ＊＊＊．Ｐ＜０．００１ｉｎｄｉｃａｔｅ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ图６　敲低ＢＣＬ－ｗ诱导细胞凋亡Ｆｉｇ．６　Ｋｎｏｗ－ｄｏｗｎ　ｏｆ　ＢＣＬ－ｗ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ

病毒和细胞互作的分子机制提供依据，从而为抗

ＰＥＤＶ新方法的开发提供理论基础。

病毒感染引起的ｍｉｃｒｏＲＮＡ变化有可能影响

病毒的复制，很可能病毒存在多种促进和抑制自身

复制的机制，这些机制受多种因素的影响处于动态

变化中。一方面，ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ通过下调凋亡抑制蛋

白的表达水平诱导细胞凋亡，如ｍｉＲ－１５／１６通过下

调ＢＣＬ２促进细胞凋亡［３１］，ｍｉＲ－１８６－５ｐ通过下调

ＩＧＦ－１（胰岛素样生长因子）促进细胞凋亡［３２］，ｍｉＲ－１４６ａ通过下调ＢＣＬ２诱导细胞凋亡［３３］，另一方面，

ｍｉＲＮＡｓ通过下调凋亡激活通路的蛋白抑制细胞凋

亡，如ｍｉＲ－Ｃ１２通过抑制细胞凋亡促进疱疹病毒的

复制［３４］，并且，先前研究表明，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以通

过靶向几个凋亡抑制蛋白诱导细胞凋亡，如在狼疮

肾炎中ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ通过靶向ＬＡＳＰ１抑制细胞增

殖，促进细胞凋亡［３５］；在胶质母细胞瘤细胞的研究

中发现，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可以通过抑制ＥＧＦ的表达水

平促进细胞凋亡，从而抑制了细胞增殖［１１］。而在本

研究中，ＰＥＤＶ感染上调了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的水平，而

上调的ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ又促进了细胞凋亡，而且敲低

ＢＣＬ－ｗ后诱导细胞凋亡，但是凋亡率没有过表达

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ所引起的凋亡率高，这可能提示，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ可能靶向多个凋亡抑制蛋白或通过多种途

径影响细胞凋亡。本研究不仅证明了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ诱导凋亡的作用，而且进一步丰富了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的调控凋亡的机制。

ＢＣＬ２Ｌ２作为ＢＣＬ２家族蛋白的分子，是重要

的凋亡抑制剂，ｍｉＲ－３３５ｃ－５ｐ通过下调ＢＣＬ２Ｌ２的

水平促进了卵巢癌细胞的凋亡，从而促进了化疗的

敏感性［３６］，ｍｉＲ－１２６ａ－５ｐ通过下调ＢＣＬ２Ｌ２促进宫

颈癌细胞的凋亡［３７］，ＢＣＬ２Ｌ２是ｍｉｃｒｏＲＮＡ影响细

胞凋亡的过程中一个很重要的靶基因，本研究中，

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ靶向调控ＢＣＬ２Ｌ２。该结果提示，ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ通过靶向ＢＣＬ２Ｌ２调控细胞凋亡机制有可

能是ＰＥＤＶ感染ＭＡＲＣ－１４５细胞引起凋亡很重要

的因素。综上所述，ＰＥＤＶ的感染诱导ＭＡＲＣ－１４５细胞

的凋亡，进一步研究发现，ＰＥＤＶ的感染显著上调了

ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的表达，而ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ通过下调其靶

基因下调了凋亡抑制蛋白ＢＣＬ－ｗ的表达进而诱导

了细胞凋亡，本研究为抵抗ＰＥＤＶ新方法的研究提

供了理论依据。

４　结　论

ＰＥＤＶ的感染上调了ｍｉＲ－１３３ｃ－３ｐ的表达，导

致ＢＣＬ－ｗ表达水平降低，从而促进了细胞凋亡。

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Ｍｉｃｒｏｂ　Ｐａｔｈｏｇ，２０２０，１４７：１０４３７８．

［１７］　ＸＵ　Ｘ　Ｇ，ＸＵ　Ｙ，ＺＨＡＮＧ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ

ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　Ｖｅｒｏ　ｃｅｌｌｓ

ｖｉａ　ａ　ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）／ｐ５３，ｂｕｔ　ｎｏｔ　ｐ３８

ＭＡＰＫ　ａｎｄ　ＳＡＰＫ／ＪＮＫ　ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ

Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１９，２３２：１－１２．［１８］　ＫＩＭ　Ｙ，ＬＥＥ　Ｃ．Ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ

ｉｎｄｕｃｅｓ　ｃａｓｐａｓｅ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ

ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ－ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ［Ｊ］．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２０１４，４６０－４６１：１８０－１９３．

［１９］　ＺＨＡＮＧ　Ｘ　Ｙ，ＺＨＥＮＧ　Ｐ　Ｃ，ＺＨＥＮＧ　Ｑ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．

Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　Ｓ－ｌａｙｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎ－ｍｅｄｉａｔｅｄ

ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ＰＥＤＶ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｖｅｒｏ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１９，２２９：１５９－１６７．

［２０］　ＤＯＲＴＭＡＮＳ　Ｊ　Ｃ　Ｆ　Ｍ，ＬＩ　Ｗ，ＶＡＮ　ＤＥＲ　ＷＯＬＦ　Ｐ

Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ（ＰＥＤＶ）

ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ａ　ｎａｉｖｅ　Ｄｕｔｃｈ　ｐｉｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　２０１４［Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１８，２２１：１３－１８．

［２１］　ＷＡＮＧ　Ｄ，ＦＡＮＧ　Ｌ　Ｒ，ＸＩＡＯ　Ｓ　Ｂ．Ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ

ｄｉａｒｒｈｅａ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｖｉｒｕｓ　Ｒｅｓ，２０１６，２２６：７－１３．［２２］　ＺＨＯＵ　Ｘ　Ｃ，ＪＩＡＮＧ　Ｗ　Ｂ，ＬＩＵ　Ｚ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｖｉｒｕｓ

ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅａｔｈ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．

Ｖｉｒｕｓｅｓ，２０１７，９（１１）：３１６．［２３］　ＹＥＵＮＧ　Ｍ　Ｌ，ＹＡＯ　Ｙ　Ｆ，ＪＩＡ　Ｌ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．ＭＥＲＳ

ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｋｉｄｎｅｙ　ａｎｄ　ｌｕｎｇ　ｂｙｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　Ｓｍａｄ７ａｎｄ　ＦＧＦ２［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，

２０１６，１（３）：１６００４．［２４］　ＫＲＨＬＩＮＧ　Ｖ，ＳＴＥＩＮ　Ｄ　Ａ，ＳＰＩＥＧＥＬ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．

Ｓｅｖｅｒｅ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ

ｔｒｉｇｇｅｒｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｖｉａ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅ　Ｒ　ｂｕｔ　ｉｓ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ

ｔｏ　ｉｔｓ　ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｖｉｒｏｌ，２００９，８３（５）：

２２９８－２３０９．［２５］　ＤＩＮＧ　Ｌ，ＬＩ　Ｊ　Ｗ，ＬＩ　Ｗ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｐ５３－ａｎｄ　ＲＯＳ－

ｍｅｄｉａｔｅｄ　ＡＩＦ　ｐａｔｈｗａｙ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ＴＧＥＶ－ｉｎｄｕｃｅｄ

ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｖｅｔ　Ｍｅｄ　Ｓｃｉ，２０１８，８０（１１）：

１７７５－１７８１．［２６］　ＧＡＬＬＵＺＺＩ　Ｌ，ＢＲＥＮＮＥＲ　Ｃ，ＭＯＲＳＥＬＬＩ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．

Ｖｉｒａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ

Ｐａｔｈｏｇ，２００８，４（５）：ｅ１００００１８．［２７］　ＡＭＰＯＭＡＨ　Ｐ　Ｂ，ＬＩＭ　Ｌ　Ｈ　Ｋ．Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ａ　ｖｉｒｕｓ－

ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｖｉｒｕｓ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ［Ｊ］．

Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，２０２０，２５（１－２）：１－１１．［２８］　ＦＡＮ　Ｎ　Ｎ，ＷＡＮＧ　Ｊ　Ｔ．ｍｉｃｒｏＲＮＡ　３４ａｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ

ｔｏ　ｖｉｒｕｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　ｉｔｓ

ｔａｒｇｅｔ　ｇｅｎｅ　Ｂａｘ　ｉｎ　ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ａ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．

Ｂｉｏｍｅｄ　Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ，２０１６，８３：１４６４－１４７０．［２９］　ＧＵＡＮ　Ｚ　Ｈ，ＳＨＩ　Ｎ，ＳＯＮＧ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ

ｔｈｅ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ－２９ｃｂｙ　ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ｖｉｒｕｓ

２４２２


ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ　ｔｏ　ｖｉｒｕｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ

ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｆａｃｔｏｒｓ　ＢＣＬ２Ｌ２［Ｊ］．

Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ，２０１２，４２５（３）：

６６２－６６７．［３０］　ＺＨＥＮＧ　Ｈ　Ｑ，ＸＵ　Ｌ，ＬＩＵ　Ｙ　Ｚ，ｅｔ　ａｌ．ｍｉｃｒｏＲＮＡ－

２２１－５ｐ　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｐｏｒｃｉｎｅ　ｅｐｉｄｅｍｉｃ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｖｉｒｕｓ

ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ｖｉｒａｌ　ＲＮＡ　ａｎｄ

ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ＮＦ－κＢ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｍｏｌ　Ｓｃｉ，

２０１８，１９（１１）：３３８１．［３１］　ＰＥＫＡＲＳＫＹ　Ｙ，ＢＡＬＡＴＴＩ　Ｖ，ＣＲＯＣＥ　Ｃ．ＢＣＬ２

ａｎｄ　ｍｉＲ－１５／１６：ｆｒｏｍ　ｇｅｎｅ　ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　ｔｏ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．

Ｃｅｌｌ　Ｄｅａｔｈ　Ｄｉｆｆｅｒ，２０１８，２５（１）：２１－２６．［３２］　ＷＡＮＧ　Ｒ，ＢＡＯ　Ｈ　Ｂ，ＺＨＡＮＧ　Ｓ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．ｍｉＲ－１８６－

５ｐ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ＩＧＦ－１ｉｎ　ＳＨ－ＳＹ５ＹＯＧＤ／Ｒ　ｍｏｄｅｌ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｓｃｉ，２０１８，１４（１３）：１７９１－１７９９．

［３３］　ＺＨＡＮＧ　Ｂ，ＹＩ　Ｊ，ＺＨＡＮＧ　Ｃ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．ｍｉＲ－１４６ａ

ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｍｕｒｉｎｅ

ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃ　ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１ｂｙ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　Ｂｃｌ２［Ｊ］．Ｅｕｒ

Ｒｅｖ　Ｍｅｄ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｓｃｉ，２０１７，２１（１７）：３７５４－３７６２．［３４］　ＬＵ　Ｊ　Ｆ，ＳＨＥＮ　Ｚ　Ｙ，ＬＵ　Ｌ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｙｐｒｉｎｉｄ

ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ　２ｍｉＲ－Ｃ１２ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ　ｖｉｒｕｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ

ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｖｉｒｕｓ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇＣａｓｐａｓｅ　８［Ｊ］．Ｆｒｏｎｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１９，１０：２９２３．

［３５］　ＨＵＡＮＧ　Ｚ　Ｍ，ＰＡＮＧ　Ｇ　Ｚ，ＨＵＡＮＧ　Ｙ　Ｇ，ｅｔ　ａｌ．

ｍｉＲ－１３３ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ

ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ＬＡＳＰ１ｉｎ　ｌｕｐｕｓ　ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ　Ｍｏｌ

Ｐａｔｈｏｌ，２０２０，１１４：１０４３８４．［３６］　ＣＡＯ　Ｊ，ＣＡＩ　Ｊ，ＨＵＡＮＧ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ．ｍｉＲ－３３５

ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ　ａｎ　ｉｎｖａｓｉｏｎ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｏｖａｒｉａｎ

ｃａｎｃｅｒ　ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　Ｂｃｌ－ｗ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｌ　Ｒｅｐ，２０１３，３０（２）：７０１－７０６．

［３７］　ＷＡＮＧ　Ｃ　Ｌ，ＺＨＯＵ　Ｂ，ＬＩＵ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．ｍｉＲ－１２６－５ｐｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｃａｎｃｅｒ

ｂｙ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　Ｂｃｌ２ｌ２［Ｊ］．Ｏｎｃｏｌ　Ｒｅｓ，２０１７，２５（４）：４６３－４７０．

（编辑　白永平）

３４２２

7.5 社会服务

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助力乡村振兴--动科系教师下乡提供农业技术服务

一、下乡服务案例 1

左一动科系李祖文老师

二、下乡服务案例 2

动科系黄冰老师到茂名市化州市合江镇大石村进行养鸡农业技术培训。

三、下乡服务案例 3

动科系老师欧志杰下乡提供水产养殖技术服务。

四、下乡服务案例 4

动科系专业团队下乡开展“沉香叶发酵饲料开发”。

五、下乡服务案例 5

动科系学生暑期助力乡村振兴---三下乡技术服务

学生协助教师进行技术指导

学生为养殖户检测水质

学生为养殖户检测水质

学生为养殖户泼药

7.5教学资源

7.建设成果和贡献 - 广东茂名农林科技职业学院

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