Tugas Individu

VAKSIN HEPATITIS B

OLEH HERIANSYAH P1506209007

PROGRAM STUDI BIOMEDIK KONSENTRASI MIKROBIOLOGI UNIVERSITAS HASANUDDIN

MAKASSAR 2010 ABSTRAK

Tujuan penulisan makalah ini adalah untuk mengetahui peranan rekayasa genetika dalam bidang kesehatan khususnya dalam menangani penyakit Hepatitis B. Salah satu produk rekayasa genetika adalah Vaksin Hepatitis B yang dihasilkan oleh yeast (Saccharomyces cereviceae) melalui tehnik rekombinan DNA

menggunakan hepatitis B surface antigen (HBsAg). Penggunaan vaksin ini telah meluas di seluruh dunia dan terbukti efektif dalam menekan jumlah infeksi virus Hepatitis B (HVB). Jenis vaksin rekombinan yang paling umum digunakan adalah Recombivax HB dan Energix-B, diberikan secara intramuscular pada bayi yang baru lahir, anak-anak, dan dewasa. Dosis pemberian vaksin sebanyak 3 kali. Pemberian vaksin telah dikembangkan dengan

menyisipkannya ke dalam tanaman, misalnya pada pisang.

BAB I PENDAHULUAN

Teknologi DNA rekombinan atau sering juga disebut rekayasa genetika merupakan teknologi yang memanfaatkan proses

replikasi, transkripsi dan translasi untuk memanipulasi, mengisolasi dan mengekspresikan suatu gen dalam organisme yang berbeda. Biasanya gen dari organisme yang lebih tinggi diekspresikan pada organisme yang lebih rendah. Teknologi ini juga memberikan kesempatan yang tidak terbatas untuk menciptakan kombinasi baru dari gen yang tidak ada pada kondisi normal. Melalui rekayasa genetika, akan dihasilkan kombinasi baru dari materi genetik melalui penyisipan molekul asam nukleat kedalam suatu sistem DNA vektor (plasmid bakteri, virus dan lain-lain) dan kemudian memasukkan vektor ini kedalam suatu inang sehingga akan dihasilkan suatu produk gen dalam jumlah banyak

Protein rekombinan merupakan protein yang diproduksi oleh sel yang DNA-nya telah dimodifikasi dengan rekombinasi genetik. Secara umum sistem produksi yang diadaptasi untuk pembuatan protein rekombinan adalah suatu proses yang berdasarkan pada: 1. penggunaan vektor ekspresi (yang berfungsi sebagai pembawa gen pengkode protein yang diinginkan dan bertanggung jawab untuk replikasi, transkripsi dan translasinya. 2. penggunaan sel inang yang melaksanakan instruksi yang disediakan oleh gen tersebut untuk mensintesis gen yang diinginkan 3. produksi massa protein yang diinginkan dengan menggunakan suatu inducer yang berfungsi untuk menginduksi produksi protein tersebut. 4. pemisahan dan ekstraksi protein dari kulturnya dilanjutkan dengan purifikasinya. Rekayasa genetika telah banyak digunakan dalam berbagai bidang diantaranya dalam bidang pertanian (tanaman transgenik), pangan, pembuatan antibiotic, peternakan (kloning hewan),

pengolahan limbah, pembuatan protein rekombinan, pembuatan enzim (streptokinase,tre rekombinase), pembuatan hormone

(growth hormone) serta pembuatan vaksin (polio, hepatitis B, cacar). Infeksi virus hepatitis B dapat menyebabkan penyakit hati menahun, sirosis dan karsinoma hepatoselular. Di seluruh dunia diperkirakan ada lebih 200 juta orang sebagai carrier virus hepatitis B. Oleh karena itu, imunisasi diperlukan terutama bagi yang mempunyai resiko infeksi tinggi, antara lain berdasarkan pola epidemiologi,faktor sisio ekonomi, budaya dan lingkungan. Selain itu adanya transmisi perinatal virus hepatitis B di beberapa tempat menunjukan pentingnya imunisasi bayi, terutama yang lahir dari ibu karier. Tujuan vaksinasi hepatitis B antara lain untuk mencegah penyakit klinis dan transmisi virus hepatitis B ke individu lain. Faktor yang mempengaruhi imunogenisitas pada waktu imunisasi antara lain faktor host dan faktor imunisasi. Faktor host meliputi umur, lingkungan dan genetik, sedang faktor imunisasi meliputi tempat inokulasi, dosis, vaksin dan program imunisasi. Virus hepatitis B hanya hidup di dalam sel dan plasma manusia (dan simpanse). Virus ini tidak dapat berkembang biak pada media biakan standar yang biasa digunakan membiakkan

virus untuk pembuatan vaksin konvensional. Kesulitan ini sedikit menghambat perkembangan pembuatan vaksin hepatitis B.

BAB II ISI

A. Penyakit Hepatitis

Penyakit Hepatitis B banyak ditemukan diseluruh dunia, terutama di daerah Selatan, Timur Tengah. Asia, Afrika, Pasifik Selatan, Amerika

Diketahui bahwa penyakit ini disebabkan oleh virus Hepatitis setelah ditemukan pada yang lalu di Korea. Penyakit hepatitis merupakan penyakit infeksi yang liver mumi anak kecil 500 tahun

menyerang hati dan disebabkan oleh virus hepatitis B (HVB). Virus ini berasal dari genus Orthohepadnavirus, dan familinya adalah Hepadnaviridae. Mula-mula, virus ini dikenal sebagai serum hepatitis. Bila dibandingkan dengan virus AIDS (HIV), HBV seratus kali lebih ganas dan sepuluh kali lebih banyak menularkan. Di bawah mikroskop elektron, HBV tampak sebagai partikel dua lapis berukuran 42 nm yang disebut partikel Dane.

Lapisan luarnya terdiri atas antigen, yang disingkat HBsAg. Antigen ini membungkus bagian dalam virus yang disebut partikel inti atau core yang berukuran 27 nm. Masa inkubasi HBV kira-kira selama 6 sampai 25 minggu. Virus ini juga tidak dapat tumbuh dalam kultur jaringan, dan memiliki 7 genotip (A G), serta 9 serotype (ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adw2, adw4, adrq+, adrq-)

Gambar 1 : virus Hepatitis B (www.hon.ch/Library/Theme/HepB/virology.html) HBV terdapat dalam semua cairan tubuh dari

penderitanya, baik dalam darah, sperma, cairan vagina dan air ludah. Virus ini mudah menular pada orang-orang yang

hidup bersama dengan orang yang terinfeksi melalui cairan tubuh tadi. Secara umum, seseorang dapat tertular HBV melalui: Hubungan seksual Penggunaan jarum suntik

Penggunaan

alat

yang

terkontaminasi

darah

dari

penderita (pisau cukur, tato, tindik, dsb). 90% berasal dari ibu yang terinfeksi HBV. Transfusi darah yang terinfeksi HBV.

Lewat peralatan dokter gigi dan peralatan dokter bedah, jika sterilisasi peralatannya kurang sempurna.

A. Vaksin Hepatitis 1. Sejarah pembuatan vaksin Hepatitis Pada tahun 1965, Blumberg dan kawan- kawan di Philadelphia menemukan suatu antibodi pada pasien yang ditransfusi yang berasal dari suku Aborigin Australia, sehingga antigen tersebut dikenal dengan nama Antigen Australia. Pada tahun 1977, Blumberg mendapat hadiah nobel untuk penemuannya itu. Sekarang antigen tersebut

dikenal dengan nama hepatitis B surface antigen (HBsAg) (Zain, 2006). Vaksin hepatitis B pertama kali diperkenalkan oleh Krugman dan koleganya pada tahun 1971. Mereka

menggunakan serum yang mengandung virus Hepatitis B. Serum diencerkan dan diinaktivasi panas 90oC selama 1 menit. Vaksinasi dilakukan pada 29 orang anak, hasilnya separuh dari anak terlindung dari infeksi Hepatitis B. Pengembangan vaksin ini selanjutnya menggunakan

antigen lain untuk imunisasi aktif yaitu Hepatitis B surface antigen (HBsAg) . Vaksin HBsAg ini merupakan partikel yang berukuran 22 nm, diinaktivasi panas, diadsobsi alum dan bebas dari asam nukleat. Dimurnikan melalui tahap presipitasi, ultrasentrifusasi, gel filtrasi dan afinitas

kromatografi. Tahun 1973 diketahui bahwa HBV dapat menginfeksi simpanse, tahun 1981 dibuatlah vaksin

hepatitis B yang berasal dari plasma darah penderita, seiring dengan perkembangan teknologi maka pada tahun 1986 dibuatlah vaksin rekombinan dengan menggunakan yeast Saccharomyces cereviceae. Penggunaan vaksin ini secara besar-besaran pada tahun 1991 dan dianjurkan

pada bayi yang baru lahir dan tahun 1996 penggunaan vaksin secara umum untuk dewasa.

2. Vaksinasi terhadap Hepatitis B Vaksin hepatitis B dapat mencegah penyebaran HBV termasuk kanker hati dan sirosis. Vaksin hepatitis B mulai dikomersialkan di Amerika Serikat pada tahun 1982,

diproduksi dengan tehnik DNA rekombinan pada tahun 1986, dan produksi second recombinant-type hepatitis B vaccine pada tahun 1989 (Immunization Action Coalition, 2008). Vaksinasi Hepatitis B rutin dilakukan di Amerika

sejak tahun 1991 dan dilaporkan terjadi penurunan tingkat infeksi HBV sebanyak 75% pada semua kelompok umur (anonym, 2007; Oshea, 2009) Pelaksanaan imunisasi aktif terhadap virus hepatitis B pada manusia, pertama kali dilakukan oleh Krugman dan koleganya tahun 1971 yaitu menggunakan sediaan serum yang diperoleh dari karier virus hepatitis B dan diinaktifasi menggunakan panas. Hasilnya 20 dari 29 anak terlindung dari infeksi virus hepatitis B. Imunitas dijumpai pada anak-anak yang mempunyai antibodi terhadap Hepatitis B Surface Antigen (HBsAg).

Hasil ini memacu perkembangan pembuatan vaksin hepatitis B lebih maju, terutama untuk produksi skala besar dari plasma karier.

3. Pembuatan vaksin Hepatitis B Vaksin HBsAg yang dimumikan dari plasma karier dan

inaktifasiformalin/panas telah diproduksi di beberapa laboratorium. Namun dengan terbatasnya persediaan plasma, perlunya seleksi dan kontrol yang ketat untuk mendapatkan vaksin murni dan bebas sumber infeksi lain, maka pendekatan lain terus dicari. Problem ini akhirnya dapat teratasi dengan pendekatan rekombinan DNA. Salah satu sintesis HBsAg yang telah berhasil dari sel ragi (yeast) rekombinan. Partikel ini memperlihatkan sifat imunogenik pada binatang percobaan; pengujian pada manusia telah berhasil menginduksi anti HBs dan melindungi dari infeksi virus hepatitis B Saat ini setidaknya ada 3 sumber partikel HBsAg yang digunakan untuk vaksinasi hepatitis B. Terutama HBsAgdimumikan dari plasma karier. Metode ini telah berhasil dan efikasinya tidak disangsikan. Dua sumber lain yaitu melalui pendekatan teknologi rekombinan DNA, dengan memasukan gen virus hepatitis B pengkode HBsAg ke dalam sel ragi dan

sel mamalia. Selain itu, HBsAg juga dapat disekresi oleh E coli, namun jumlahnya relatif kecil, demikian juga sifat antigeniknya. a. Virus yang dilemahkan (imunisasi) Untuk menghasilkan vaksin dibutuhkan HBsAg yang berasal dari virus Hepatitis B, virus diperbanyak dalam

medium tertentu sehingga nantinya dihasilkan virus yang tidak menyebabkan penyakit namun mampu merangsang system imun. Strain ini selanjutnya dikultur pada kondisi yang sesuai dan virusnya diinaktifkan melalui pemanasan dan proses kimia. Tahapan berikutnya virus yang telah dilemahkan ini diinjeksikan ke dalam tubuh .

b. Vaksin DNA rekombinan Vaksin hepatitis B yang diproduksi sel ragi rekombinan telah menjalani pengujian keamanan, imunogenisitas dan evaluasi klinis. Hasil menunjukkan bahwa vaksin ini aman, antigenik dan relatif bebas efek samping yang merugikan, bahkan vaksin ini telah dilisensikan dan diproduksi di berbagai negara. Salah satu keuntungan vaksin dari sel ragi dibanding dari plasma yaitu siklus produksinya dapat dikurangi, dan konsistensi dari batch ke batch lebih mudah diperoleh.

HBs Ag dilepaskan dari sel dengan homogeniser atau disruption menggunakan glass bead. Pemurnian melalui

tahap

klarifikasi,

ultrafiltrasi,

kromatografi

dan

ultrasentrifugasi serta diabsorbsi dengan alum hidroksida; sebagai pengawet ditambahkan thiomerosal.

Karakterisisasi partikel dilakukan dengan membandingkan HBs Ag dari plasma antara lain meliputi berat molekul, komposisi asam amino, densitas dalam CsC12 dan

sebagainya. Analisis imunologis menggunakan antibodi monoklonal memperlihatkan vaksin dari plasma dan ragi mengandung epitop yang berperan menginduksi antibodi setelah vaksinasi.

Vaksin

HBs

Ag

rekombinan

juga

diproduksi

menggunakan

sel mamalia yaitu sel Chinese Hamster

Ovary (CHO). Gen HBsAg dimasukkan ke dalam sel CHO dan sel ini dapat mensintesis dan mensekresikan partikel HBs Ag 22 nm. Cell line CHO'dapat mensintesis HBs Ag 15 mcg/106 sel/hari. Bahkan bila cell line ditumbuhkan pada fase stasioner, mereka dapat mensintesis secara terus dapat dilakukan berulang-

menerus dan isolasi HB Ag

ulang dari supemat biakan sel selama 2 3 minggu. HBs Ag yang dimumikan dari supernatan biakan sel CHO terdiri dari patikel 22 nm yang sangat homogen dan dengan HBs Ag dari serum manusia. Pada percobaan imunogenisitas pada guinea pig, identik

temyata 50% binatang mempunyai antibodi HBs sesudah imunisasi HBs Ag 1,5 ug dari sel CHO dan 2 ug HBs Ag dari serum manusia. Pada simpanse, vaksin HBs Ag

rekombinan dari sel

CHO terlihat lebih imunogenik dari ragi. Selain itu dari sel CHO yang

daripada vaksin yang diperoleh

simpanse yang divaksinasi dengan vaksin

mempunyai respon imun seluler dan binatang

divaksinasi dengan HBs Ag rekombinan (subtipe ad) terlindung dari infeksi virus HB subtipe ad dan ay

Pembuatan vaksin Hepatitis B dengan berbagai sumber yaitu: a. VAKSIN DARI PLASMA KARIER Penggunaan vaksin hepatitis B yang diekstraksi dari plasma manusia dimulai sejak keberhasilan

penelitian Krugman dan koleganya tahun 1971. Mereka menggunakan serum yang mengandung virus hepatitis B. Serum ini mereka encerkan 1:10 dan diinaktivasi panas 90o C selama 1 menit. Vaksinasi dilakukan pada 29 anak, hasilnya lebih dari separuh terlindung dari infeksi hepatitis B. Pengembangan vaksin ini

selanjutnya menggunakan antigen lain untuk imunisasi aktif yaitu "Hepatitis B Surface Antigen" (HBsAg). Antigen ini merupakan permukaan virus yang diambil dan dimumikan dari plasma manusia karier. Vaksin HBsAg ini merupakan partikel 22 nm mumi, diinaktifasi panas, diadsorbsi alum dan bebas dari asam nukleat; dimumikan melalui tahap presipitasi, ultrasentrifugasi, gelfiltrasi dan afinitas kromatografi Vaksin imunogenisitas HBsAg baik. mempunyai Setelah keamanan dan

mengalami

berbagai

perbaikan, lebih dari 30 juta dosis telah tersebar di dunia dan memperlihatkan keamanan yang

menggembirakan. Hal ini dicapai karena ketatnya inaktifasi dan purifikasi untuk memusnahkan sumber infeksi serta pengujian kontrol kualitas untuk menjamin kemurnian produk.b. VAKSIN DARI SEL YEAST DAN SEL MAMALIA

Kemajuan di bidang genetika molekuler dan kimia asam nukleat, telhh memungkinkan identifikasi dan analisis gen pengkode substansi aktif, transfer di antara organisme dan memproduksinya di bawah kondisi terkontrol. Gen pengkode produk tertentu dapat diisolasi dan dibiakkan untuk memproduksi zat tersebut, dengan cara memasukkan molekul DNA (alami atau sintetik) ke dalam vektor yang sesuai, kemudian dimasukkan ke dalam host. Teknik rekombinan ini telah membuka jalan untuk mengembangkan produksi vaksin, terutama sumber infeksi yang belum tersedia vaksinnya dan untuk meningkatkan vaksin yang ada. Pendekatan baru terhadap perkembangan vaksin ini sangat berharga

terutama untuk mikroorganisme/virus yang tidak dapat dibialdcan dengan metoda yang ada, seperti virus hepatitis B. Teknologi rekombinan DNA ini telah berhasil digunakan untuk memproduksi HBs Ag dengan berbagai sel antara lain sel prokariot seperti E. coli dan B. subtilis, sel eukariot seperti sel S. cerevisiae, sel CHO dan sebagainya Vaksin hepatitis B yang diproduksi sel ragi

rekombinan telah menjalani pengujian keamanan, imunogenisitas dan evaluasi klinis. Hasilnya

menunjukkan bahwa vaksin ini aman, antigenik dan relatif bebas efek samping yang merugikan, bahkan vaksin ini telah dilisensikan dan diproduksi di berbagai negara. Salah satu keuntungan vaksin dari sel ragi dibanding dari plasma yaitu siklus produksinya dapat dikurangi, dan konsistensi dari batch ke batch lebih mudah diperoleh. Bahkan antigen yang berasal dari sel ragi juga telah dicoba disiapkan dalam bentuk

micellar. Vaksin polipeptida

micelle ini di dalam

laboratorium dilaporkan lebih antigenik.

HBsAg dilepaskan dari sel dengan homogeniser atau disruption menggunakan glass bead. Pemurnian melalui tahap clarification, ultrafiltrasi, kromatografi dan ultrasentrifugasi serta diabsorbsi dengan alum hidroksida; sebagai pengawet ditambahkan

thiomerosal. Karakterisisasi partikel dilakukan dengan membandingkan HBsAg dari plasma antara lain

meliputi berat molekul, kompisiii asam amino, densitas dalam CsC12 dan sebagainya. Analisis menggunakan imunologis

antibodi monokional memperlihatkan

vaksin dari plasma dan ragi mengandung epitope yang berperan menginduksi antibodi setelah vaksinasi. Vaksin HBsAg rekombinan juga diproduksi

menggunakan sel mamalia yaitu sel Chinese Hamster Ovary (CHO). Gen HBsAg dimasukkan ke dalam sel CHO dan sel ini dapat mensintesis dan mensekresikan partikel HBsAg 22 nm. Cell line CHO'dapat mensintesis HBsAg 15 mcg/106 sel/hari. Bahkan bila cell line Imunisasi dengan satu kali inokulasi merupakan salah satu cara vaksinasi yang sangat didambakan terutama untuk vaksinasi masal dengan populasi cukup besar.

Saat ini para peneliti telah berusaha mendapatkan vaksin hidup terhadap hepatitis B menggunakan virus vaccinia. Vaksin hidup ini sangat potensial dan telah digunakan untuk memproduksi vaksin hepatitis B, herpes simpleks, rabies dan lain-lain di dalam

laboratorium. Percobaan menyimpulkan rekombinan pendahuluan bahwa untuk pada kelinci virus telah

penggunaan vaksinasi

vaccinia mungkin.

sangat

Karakteristik biofisik dan biokimia partikel antigenik yang disekresikan oleh virus ini identik dengan HBsAg asli. Kelinci dan binatang laboratorium lain yang diinokulasi dengan virus hibrida ini mampu

memproduksi anti-HBs. Simpanse yang divaksinasi dengan virus vaccinia rekombinan terlindung dari infeksi virus hepatitis B. Beberapa keuntungan virus vaccinia rekombinan untuk memproduksi vaksin antara lain biaya

produksinya relatif lebih rendah, cara vaksinasi relatif lebih mudah, stabilitas baik, mempunyai shelf life panjang, tidak onkogenik dan tidak bersifat laten.

c. VAKSIN POLIPEPTIDA DAN PEPTIDA SINTETIK Partikel HBs Ag 22 nm telah terbukti merupakan imunogen yang baik, namun penelitian lebih lanjut telah memperlihatkan bahwa komponen imunogenik tersebut mungkin merupakan bagian dari HBs Ag komplek. Para ahli akhirnya dapat memperoleh 2 polipeptida dari partikel HBs Ag murni.Kedua polipeptida mengandung determinan

antigenik hepatitis B. Pertama berupa polipeptida dengan BM 25.000 26.000 (P25) dan bentuk glikosilatnya dengan BM 28.000 30.000 (GP 30). Keduanya ternyata

merupakan antigen yang efektif. Dari purifikasi peptida ini akhirnya diperoleh antigen dalam bentuk micellar. Pada pengujian potensi pada mencit, vaksin polipeptida subunit ini ternyata menimbulkan respon antibodi lebih kuat daripada antigen partikel 22 nm utuh. Vaksin ini telah menjalani pengujian keamanan dan efrkasi pada primata non manusia dan sedang dikembangkan untuk uji klinis. Vaksin polipeptida micelle ini juga telah dibuat dari HBs Ag yang dihasilkan oleh sel ragi dan sel mamalia rekombinan. Keberhasilan isolasi polipeptida p25 dan gp30 dari HbsAg murni dan bukti bahwa polipeptida tersebut

mengandung

determinan

antigen

yang

mampu

menginduksi anti HBs, telah mendorong para ahli untuk mensintesis peptida tersebut secara kimia. Di samping itu, dorongan juga diperkuat dengan keberhasilan peptida sintetik menginduksi antibodi penetral bakteri dan virus tanaman.Vaksin peptida sintetik pertama tersebut dibuat untuk tobacco mosaic, virus, sesudah mengidentifikasi determinan antigeniknya dan rangkaian asam aminonya. Rangkaian asam amino tersebut ternyata dapat dibuat sintetik dan mampu menginduksi antibodi dalam binatang percobaan. Beberapa laboratorium akhirnya berhasil membuat

peptida sintetik yang mengandung rangkaian asam amino identik dengan molekul p25 HBs Ag. Respon antibodi terhadap peptida ini muncul 1 2 minggu sesudah imunisasi primer dan semua binatang menginduksi

antibodi sesudah inokulasi kedua. Mencit yang diimunisasi secara intraperitoneal, menginduksi anti HBs setelah 7 14 hari inokulasi. Perkembangan vaksin polipeptida yang disintesis secara kimia memberikan banyak keuntungan antara lain dapat

memproduksi imunogen yang relatif murah, aman dan uniform secara kimia, sehingga dapat menggantikan

vaksin yang ada saat ini, yang relatif kurang murni atau mungkin mengandung determinan antigen mikroba lain 1. Orang-orang yang perlu mendapatkan vaksin a. Bayi yang baru lahir b. Anak-anak yang berusia di bawah 19 tahun yang belum divaksinasi c. Orang yang memiliki pasangan yang terinveksi HVB d. Orang yang sering berganti pasangan e. Pekerja kesehatan f. Penderita HIV dan Liver kronik g. Wisatawan yang akan berkunjung ke daerah endemik 1. Jenis-jenis vaksin Hepatitis B Secara umum Ada dua macam vaksin Hepatitis B, yaitu :1. Vaksin Hepatitis yang terbuat dari darah manusia yang

telah kebal Hepatitis B, disuntikkan kepada orang sehat sekali sebulan sebanyak 3 kali (Immunoglobulin

Hepatitis B)2. Vaksin Hepatitis yang dibuat dari perekayasaan sel ragi

(Recombivax, HB dan Engerix-B),

diberikan kepada

penderita sebulan sekali sebanyak 2 kali, lalu suntikan yang ketiga diberi 5 bulan kemudian. Vaksin Hepatitis B rekombinan (Recombivax HB) Recombivax HB vaccine mengandung antigen yeast

Hepatitis B, amorphous aluminum hidroksiphosfat, protein yang diberi formaldehid, pengawet.

dan thimerosal sebagai

Vaksin Hepatitis B rekombinan ini berasal dari Hepatitis B surface antigen (HBsAg) yang diproduksi dalam sel yeast. Bagian virus yang mengkode HBsAg dimasukkan ke dalam yeast, dan selanjutnya dikultur. Antigen kemudian dipanen dan dipurifikasi dari kultur fermentasi yeast Saccharomyces cereviceae, antigen HBsAg mengandung gen adw subtype. Proses fermentasi meliputi pertumbuhan Saccharomyces cereviceae pada medium kompleks yang mengandung ekstrak Yeast, soy pepton, dextrose, asam amino, dan garam mineral. Protein dilepaskan dari sel yeast melalui pengrusakan sel kemudian dipurifikasi potein

dengan metode fisika dan kimia. Selanjutnya

dimasukkan ke larutan buffer posfat dan formaldehid, dipercepat dengan menggunakan alum (potassium

aluminium sulfat). Vaksin rekombinan ini memperlihatkan kesamaan dengan vaksin yang diperoleh dari plasma darah. Vaksin Hepatitis B rekombinan (Engerix-B) Engerix-B dikembangkan GlaxoSmithKline permukaan dipurifikasi cereviceae. virus dan merupakan dan DNA dibuat rekombinan oleh yang

perusahaan antigen telah

Biological. Hepatitis dikultur B

Mengandung (HBsAg) sel yang

dalam yang

Saccharomyces oleh

HBsAg

diekspresikan

Saccharomyces cereviceae dipurifikasi dengan cara fisikakimia dan aluminium hidroksida Engerix-B vaccine mengandung antigen hepatitis B hidroksida, sejumlah

yang telah dimurnikan, aluminum

yeast protein dan thimerosal yang digunakan dalam proses produksi, serta 2-phenoxyethanol sebagai pengawet. Dosis pemberian vaksin Engerix-B Remaja : 0,5 ml vaksin mengandung 10 mcg HBsAg dan 0,25 mg aluminium hidroksida. Formula pediatrik

mengandung sodium klorida (9 ml /ml) dan buffer posfat

(disodium phosfat dyhidrate 0,9 mg/ml; sodium dihidrogen phosfat dihidrate 0,71 mg/ml) Dewasa : 1 ml vaksin mengandung 20 mcg HBsAg dan 0,25 mg aluminium hidroksida. Formula pediatrik mengandung sodium klorida (9 ml /ml) dan buffer posfat (disodium

phosfat dyhidrate 0,9 mg/ml; sodium dihidrogen phosfat dihidrate 0,71 mg/ml)

Dosis pemberian vaksin pada manusia Recombivax HB Dose (mcg) Infants children 20 1.0 mL (10)

1.0 mL (20)

Umu

Umumnya vaksin hepatitis diberikan pada bayi (sampai usia 12 bulan )melalui injeksi pada otot paha dan lengan atas pada anak-anak (Poland and Jacobson, 2009).

Vaksin Hepatitis B tidak mengandung komponen hidup, aman diberikan kepada bayi yang baru lahir, anak-anak dan orang dewasa. Efek dari pemberian vaksin ini adalah pembengkakan pada daerah injeksi dan demam pada bayi. Pemberian vaksin Hepatitis B pada manusia dapat dikombinasikan misalnya Twinrx dengan (komb. vaksin untuk A) penyakit atau lain

Hepatitis

Pediarix

(diphtheria, pertussis, tetanus dan polio) (Chang, 2000). Perkembangan vaksin hepatitis B Saat ini pemberian vaksin tidak terbatas hanya pada injeksi ke dalam otot tetapi telah berkembang melalui

makanan. Di Amerika Serikat dikembangkan tanaman kentang yang mengandung vaksin Hepatitis B (Isbagyo, 2005). Penelitian pada tahun 1992 menunjukkan bahwa tanaman tembakau dapat mengekspresikan vaksin

hepatitis B. dan juga akan dikembangkan kedelai dan pisang sebagai vektor vaksin.

penggunaan

KESIMPULAN

Tidak dapat dipungkiri, betapa besar minat para ahli untuk mengembangkan vaksin hepatitis B. Hal ini dapat dimengerti, karena hepatitis B merupakan penyakit yang tersebar di berbagai penjuru dunia dan akibat yang dapat diitimbulkannya bagi

penderita penyakit ini seperti sirosis, penyakit hati kronis, kanker dan sebagainya. Pengembangan vaksin ini menjadi lebih menarik dengan kemajuan bidang pendukung yang begitu pesat seperti rekombinan DNA, antibodi monoklonal, sintesis kimia oligopeptida,

pemrograman komputer, kristalografi, sehingga struktur protein mudah digambarkan dan determinan antigen mudah ditentukan. Berangkat dari antigen virus yang diekstrak dari plasma manusia karier, vaksin hepatitis B mulai dikembangkan. Antigen yang lebih spesifrk diidentifikasi dan diisolasi, sehingga diperoleh partikel HBsAg 22 nm yang mempunyai sifat imunogenik dan dapat digunakan untuk vaksinasi. serta Karena terbatasnya yang masih donor dan

rumitnyapurifikasi

keamanan

disangsikan

walaupun tak terbukti, para ahli mulai memanfaatkan teknologi rekombinan DNA untuk membuat vaksin hepatitis B. Vaksin rekombinan pertama yang dipasarkan yaitu antigen HbsAg yang diproduksi oleh sel ragi rekombinan. Vaksin ini sudah terbukti manfaatnya. Untuk mencari vaksin yang imunogenik lebih kuat, maka dicoba sel lain sebagai host dan didapatkan sel mamalia Chinese Hamster Ovary. Sel E. coli juga dapat mengekspresikan HBsAg, tetapi titernya terlalu rendah. Dengan vaksin yang sudah ada, para ahli masih disibukkan mencari kemungkinan lain untuk memproduksi vaksin ini. Dari hasil analisa HBs Ag, didapatkan polipeptida p25 dan bentuk

glikosilatnya gp30 yang mengandung determinan antigen, sehingga dapat digunakan sebagai vaksin. Dengan mengetahui rangkaian

asam amino penyusunnya, maka para ahli dapat membuat peptida secara kimia. Dalam berbagai pengujian ternyata peptida sintetik mampu menginduksi antibodi terhadap antigen hepatitis B. Tentu keberhasilan ini sangat menggembirakan, karena bila vaksin ini dibuat secara kimia, maka homogenitas dan kemumiannya tak perlu diragukan. Vaksin hidup menggunakan virus rekombinan juga telah diuji. Mereka menggunakan virus vaccinia sebagai vektor. Vaksin ini sudah diuji dengan berbagai hewan percobaan dan hasilnya cukup menggembirakan. pembuatan vaksin Apabila pendekatan tentu ini berhasil memberi untuk banyak

komersiil,

akan

keuntungan seperti cara inokulasi yang relatif mudah, stabilita, shelf life dan sebagainya. Selain itu ada lagi pendekatan pembuatan vaksin hepatitis B menggunakan antibodi sebagai imunogen vaksin. Antibodi ini diproduksi dengan mengimunisasi binatang menggunakan antibodi yang mengenai virus HE sebagai antigennya. Vaksin ini dikenal dengan istilah Anti idiotypes. Pada berbagai percobaan, antibodi (imunogen) ini mampu menginduksi respon kekebalan terhadap antigen asli pada mencit dan hamster. Simpanse yang diimunisasi dengan antibodi ini, dapat terlindung dan serangan virus HB.

Gencarnya

para

ahli

mencari

vaksin

alternatif

untuk

menggantikan vaksin yang sudah ada bukan berarti vaksin yang ada ini kurang layak digunakan, tetapi untuk mencari vaksin yang paling baik dipandang dari berbagai segi

DAFTAR ISI

Anonym, 2009. Hepatitis B vaccine (Recombivax HB and Engerix-B ). Saskatchewan Ministry Health.

http://www.health.gov.sk.ca/hepatitis-b-tearsheet

Anonim, 2007. Hepatitis B Vaccine. Departement of Health and Human Service Center For Disease Control and Prevention. Vis-hep-b.pdf.

Chang, Mei-Hwei. 2000. Hepatitis B Vaccination and Control of Hepatitis B-Related Liver Disease. Journal

of Pediatric Gastroenterology and Nutrition Immunization Information Action for public Coalition, and 2008. Vaccine

health

professional.

www.imunize.org

Isbagyo,

Widyaningroem,

Dyah,

2005.

Masa

Depan

Pengembangan Vaksin Baru. Cermin Dunia Kedokteran. Jakarta

Oshea,

Robert,S.,

2009.

Hepatitis

B.

http://www.clevelandclinicmeded.com/medicalpubs/diseas emanagement/hepatology/hepatitis-B/

Poland, A. Gregory and Jacobson, M. Robert, 2009. Prevention of Hepatitis B with the Hepatitis B Vaccine. The new england journal Of medicine. N Engl J Med 2004;351:2832-8. Copyright 2004 Massachusetts Medical Society.

Zain,

Lukman,

H.,

2006.

Hepatits

B

dan

Permasalahannya. http://www.usu.ac.id/id/files/pidato/orasi_ilmiah_dies_natali s_54_2006.pdf