UJI AKTIVITAS ANTI AGING TETRAHIDROKURKUMIN, …repository.ump.ac.id/4257/1/ANI YUPITAWATI -...

UJI AKTIVITAS ANTI AGING TETRAHIDROKURKUMIN,

EKSTRAK PEGAGAN (Centella asiatica), DAN KOMBINASI

TETRAHIDROKURKUMIN - EKSTRAK PEGAGAN

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

ANI YUPITAWATI

1308010002

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

UJI AKTIVITAS ANTI AGING ...,ANI YUPITAWATI, FARMASI, , UMP 2017

ii


iii


iv


v

MOTTO

Herbal gardening is an amazing of the performing

pharmacist art. Soil, water, air. Read the Alchemy’s

word on organic chemistry. See the miracle of many

secondary metabolites that heal our ill. Keep a faint

dream in the sky. Silent stage. If there are instant

ways….

(Griswold & Yui)


vi

HALAMAN PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan untuk:

Bapak Jatiman Atmowinoto

Ibu Tasmiyah

Emira

An Yupita Garden


vii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-

Nya, dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul Uji Aktivitas Anti Aging

Tetrahydrocurcumin (THC), Ekstrak Pegagan (Centella asiatica), dan Kombinasi

THC Ekstrak Pegagan. Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi

salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1

Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,

dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit untuk

menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis

mengucapkan terimakasih kepada yang terhormat:

(1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

(2) Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt., selaku Dekan Farmasi yang telah memberi

berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan

skripsi;

(3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc.,Apt selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi

yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana

penyusunan skripsi;

(4) Yuni Astuti, M.Si.,Apt .dan Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Sc.,Apt. selaku

dosen pembimbing yang telah menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran

untuk mengarahkan dalam penyusunan skripsi ini;

(5) Dr. Agus Siswanto, M.Si.,Apt. dan Erza Genartika, M.Si.,Apt. yang telah

memberi berbagai pertanyaan untuk menguji kelayakan sebagai sarjana

Farmasi;

(6) Segenap staf laboratorium Biologi Farmasi, laboratorium Teknologi

Farmasi, dan Laboratorium Farmakologi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto yang telah memberi bantuan dan bimbingan dalam

pelaksanaan penelitian skripsi;

(7) Bapak dan ibu serta saudara tercinta yang telah memberi dukungan

material maupun moral


viii

(8) Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu

Akhir kata, semoga Allah SWT memberikan balasan atas segala kebaikan

semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini dapat membawa manfaat

bagi pengembangan ilmu pengetahuan.

Purwokerto, 16 Agustus 2017

Penulis

ANI YUPITAWATI

1308010002


ix

RIWAYAT HIDUP

Nama penulis : Ani Yupitawati

TTL : Banyumas, 26 Oktober 1976

Alamat : Bangsa, RT 02/01 Kebasen, Banyumas

Nama Bapak : Jatiman Atmowinoto

Nama Ibu : Tasmiyah

Riwayat Pendidikan : SDN Bangsa I tahun 1983-1989

SMPN Sampang Cilacap tahun 1990-1992

SMAN I Purwokerto tahun 1993-1995


x

HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN

PUBLIKASI SKRIPSI UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

Sebagai sivitas akademika Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan

demi pengembangan ilmu pengetahuan, saya yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama : Ani Yupitawati

Nim : 1308010002

Program Studi : Farmasi

Perguruan Tinggi : Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Jenis Karya : Skripsi

menyetujui untuk memberikan Hak Bebas Royalti Noneksklusif (Non-exclusive

Royalty-Free Right) kepada Universitas Muhammadiyah Purwokerto atas karya

ilmiah saya yang berjudul:

Uji Aktivitas Anti Aging Tetrahidrokurkumin, Ekstrak Pegagan (Centella

asiatica), dan Kombinasi Tetrahidrokurkumin-Ekstrak Pegagan

Beserta perangkat yang ada (jika diperlukan). Dengan Hak Bebas Royalti

Noneksklusif ini Universitas Muhammadiyah Purwokerto berhak menyimpan,

mengalih media / mengalih formatkan, mengelola dalam bentuk pangkalan data

(database), merawat, dan mempublikasikan skripsi saya dengan tetap

mencantumkan nama saya sebagai penulis / pencipta dan sebagai pemilik Hak

Cipta.

Pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya.

Dibuat di : Purwokerto

Pada tanggal : 29 Agustus 2017

Yang menyatakan

Ani Yupitawati

NIM 1308010002


xi

Uji Aktivitas Anti Aging Tetrahidrokurkumin, Ekstrak Pegagan (Centella

asiatica), dan Kombinasi Tetrahidrokurkumin-Ekstrak Pegagan

Ani Yupitawati, Ika Yuni Astuti, M.Si., Apt., Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt.

ABSTRAK

Sinar ultraviolet matahari merupakan faktor utama penyebab penuaan kulit secara

ekstrinsik atau photoaging melalui pembentukan radikal bebas. Agen anti aging

topikal yang banyak digunakan pada saat ini adalah antioksidan vitamin C (asam

askorbat), namun formula vitamin C tidak stabil dan dapat mengiritasi. Pada

penelitian ini dilakukan uji aktivitas anti aging yang mengkombinasikan

Tetrahidrokurkumin (THC) dan ekstrak Pegagan yang diduga mempunyai

aktivitas anti aging sinergis. Penelitian ini menggunakan rancangan pre-test post-

test control group design. Mencit balb/c jantan, umur 6-8 minggu, BB 20-25 gram

dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok uji. Mencit dicukur bulunya pada

bagian dorsal seluas 2x2 cm2.

Sebelum perlakuan uji, terlebih dahulu dilakukan

pengukuran parameter anti aging pada seluruh kelompok uji dengan Skin Analyzer

EH 900 U. Parameter anti aging meliputi sensitivitas kulit, kadar air, kadar

kolagen, elastisitas, dan besar pori. Proses uji dilakukan selama 4 minggu. Setiap

hari bagian dorsal mencit diolesi krim dengan dosis 2 mg/cm2

2 jam sebelum dan

15 menit sesudah penyinaran UV. Formula krim untuk KN; KP; THC; EP;

THCEP; masing – masing adalah basis krim; basis krim + 3% ethyl ascorbyl

ether; basis krim + 2% THC; basis krim + 10% EP; basis krim + 2% THC + 10%

EP. Penyinaran UV menggunakan lampu UV Repti Glo 13 W Exoterra®

yang

mengandung UVA 630 µW/cm2

dan UVB 105 µW /cm2. Setelah proses

perlakuan selama 4 minggu, seluruh mencit kembali diukur parameter anti

agingnya dengan Skin Analyzer EH 900 U. Hasil data sebelum dan sesudah

perlakuan dianalis secara statistik. Kombinasi THC dan EP dapat meningkatkan

kadar kolagen dan elastisitas dibanding THC dan EP tanpa kombinasi, namun

peningkatan tersebut tidak signifikan. Berdasarkan skor dari seluruh paramater

anti aging, kombinasi THC dan EP tidak memberikan aktivitas anti aging yang

lebih besar dibandingkan THC dan EP tanpa kombinasi.

Kata kunci: photoaging, radikal bebas, antioksidan, Tetrahydrocurcumin, ekstrak

pegagan, skin analyzer


xii

Determination Anti Aging Activity of Tetrahydrocurcumin, Pegagan (Centella

asiatica) Extract, and Combination of Tetrahydrocurcumin - Pegagan Extract

Ani Yupitawati, Ika Yuni Astuti, M.Si., Apt., Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt.

ABSTRACT

Solar ultraviolet radiation is the main factor causing extrinsic skin aging or

photoaging, through the formation of free radicals. The most popular topical anti-

aging agent currently used is the antioxidant vitamin C (ascorbic acid), but the

vitamin C formula is unstable and can be irritating. The aim of this research is to

determinate anti aging activity of Tetrahydrocurcumin (THC) and Pegagan

extract combination which is suspected to have synergistic anti aging activity.

This research uses pre-test post-test control group design. Mice balb/c males, 6-8

weeks age, 20-25 grams body weight were randomly assigned to 5 groups. Mice

shaved his fur on a dorsal area of 2x2 cm2. Prior to the treatment of the test, first

measurement of anti aging parameters in all test groups with Skin Analyzer EH

900 U. Anti aging parameters include skin sensitivity, water content, collagen

levels, elasticity, and large pores. The test process is done for 28 days. Every day

the dorsal portion of the cream is smeared cream with a dose of 2 mg/cm2 2 hours

before and 15 minutes after UV irradiation. Cream formula for KN; KP; THC;

EP; THCEP; each is a cream base; Base cream + 3% ethyl ascorbyl ether; Base

cream + 2% THC; Base cream + 10% EP; Base cream + 2% THC + 10% EP. UV

irradiation uses UV Repti Glo 13 W Exoterra® that containing UVA 630 μW/cm2

and UVB 105 μW/cm2. After 4 weeks treatment process, all the anti aging

parameters of mice is measured again with Skin Analyzer EH 900 U. Results of

data before and after treatment were statistically analyzed. The combination of

THC and EP can increase collagen and elasticity levels compared to THC and EP

without combination, but the increase is not significant. Based on scores of all anti

aging parameters, THC and EP combinations do not provide greater anti-aging

activity than THC and EP without combination.

Keywords: photoaging, free radical, antioxidant, tetrahydrocurcumin, pegagan

extract, skin analyzer


xiii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

HALAMAN PERSETUJUAN ......................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii

HALAMAN PERNYATAAN ......................................................................... iv

MOTTO ........................................................................................................... v

PERSEMBAHAN ............................................................................................ vi

KATA PENGANTAR ..................................................................................... vii

RIWAYAT HIDUP .......................................................................................... ix

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI SKRIPSI ............................ x

ABSTRAK ....................................................................................................... xi

ABSTRACT ..................................................................................................... xii

DAFTAR ISI .................................................................................................... xiii

DAFTAR TABEL ............................................................................................ xvi

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xvii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xix

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................ 1

B. Perumusan Masalah ....................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 2

D. Manfaat Penelitian ........................................................................ 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 4

A. Hasil Penelitian Terdahulu ............................................................. 4

B. Landasan Teori ............................................................................... 6

1. Kulit ........................................................................................ 6

2. Kolagen kulit ............................................................................ 8

3. Elastin ...................................................................................... 9

4. Teori Penuaan (Aging) ............................................................. 10


xiv

5. Anti aging ................................................................................. 12

6. Radikal bebas ........................................................................... 13

7. Antioksidan ............................................................................. 14

8. Sinar Ultraviolet matahari ....................................................... 14

9. Pengaruh sinar UV matahari terhadap penuaan kulit ............ 15

10. Tetrahidrokurkumin (THC) ...................................................... 18

11. Pegagan (Centella asiatica) ..................................................... 20

12. Ethyl Ascorbil Ether ................................................................. 22

13. Remaserasi .............................................................................. 22

14. Krim ........................................................................................ 22

15. Sistem Pemberian Obat Melalui Kulit ..................................... 23

16. Skin Analyzer EH 900 U.......................................................... 24

BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 25

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ..................................................... 25

B. Variabel Penelitian ........................................................................ 29

C. Definisi Variabel Operasional ........................................................ 29

1. Variabel bebas .......................................................................... 29

2. Variabel tergantung .................................................................. 29

3. Variabel terkendali ................................................................... 30

D. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 30

E. Sampel Penelitian ........................................................................... 30

1. Kriteria inklusi ......................................................................... 30

2. Kriteria dropout ........................................................................ 30

3. Besar sampel ............................................................................ 30

F. Bahan dan Alat ............................................................................... 31

1. Bahan uji .................................................................................. 31

2. Alat penelitian ......................................................................... 31

G. Cara Penelitian ............................................................................... 31

1. Determinasi tanaman pegagan ................................................. 31

2. Pengeringan herba pegagan ..................................................... 32

3. Penyerbukan herba pegagan kering ......................................... 32

4. Ekstraksi herba pegagan ........................................................... 32


xv

5. Uji total flavonoid ekstrak pegagan ........................................ 32

6. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .............................. 33

7. Pembuatan sediaan krim ......................................................... 34

8. Uji aktivitas anti aging ............................................................ 35

H. Analisis Data .................................................................................. 37

BAB IV HASIL DAN PEMBANASAN ......................................................... 38

A. Determinasi Tanaman Pegagan ..................................................... 38

B. Penyiapan dan Pengolahan Simplisia Pegagan ............................. 38

C. Ekstraksi herba pegagan ................................................................ 39

D. Uji total flavonoid ekstrak pegagan .............................................. 40

1. Uji kualitatif total flavonoid esktrak pegagan ......................... 40

2. Uji kuantitatif total flavonoid ekstrak pegagan ....................... 41

E. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .................................. 41

F. Pembuatan sediaan krim ................................................................ 42

G. Uji aktivitas anti aging .................................................................. 42

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 59

A. Kesimpulan .................................................................................... 59

B. Saran ............................................................................................... 59

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 60

LAMPIRAN ..................................................................................................... 69


xvi

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Parameter hasil pengukuran dengan Skin Analyzer EH 900 U

(Skin Analyzer EH 900 U, 2017) ................................................. 25

Tabel 3.1 Formula krim ................................................................................ 34

Tabel 4.1 Rerata umur mencit tiap kelompok uji sebelum perlakuan 43

Tabel 4.2 Rerata berat badan mencit tiap kelompok uji sebelum perlakuan 43

Tabel 4.3 Skor jumlah sensitivitas ............................................................... 56

Tabel 4.4 Skor diameter sensitivitas ............................................................. 56

Tabel 4.5 Skor kadar kolagen ....................................................................... 57

Tabel 4.6 Skor elastisitas .............................................................................. 57

Tabel 4.7 Skor besar pori ............................................................................. 57


xvii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Struktur kulit (McLafferty et al., 2012) ................................... 7

Gambar 2.2. Histologi kolagen dermis dengan pewarnaan HE (Emmert

et al., 2013) .............................................................................. 8

Gambar 2.3. Perubahan susunan serat elastin karena photoaging ................ 10

Gambar 2.4. Penetrasi sinar UV matahari ke dalam lapisan kulit

(Dermatology.ca., 2016) .......................................................... 15

Gambar 2.5. Mekanisme penuaan kulit karena radiasi sinar UV

matahari (Jadoon et al., 2015) ............................................... 17

Gambar 2.6. Proses patofisiologi setelah kulit terpapar sinar UV

matahari (Yin, et al., 2015) ..................................................... 18

Gambar 2.7. Hidrolisis kurkumin menjadi tetrahidrokurkumin

(Aggarwal et al., 2015) ............................................................ 18

Gambar 2.9. Tanaman pegagan (Centella asiatica) ..................................... 20

Gambar 2.10. Struktur quersetin pegagan, suatu derivat dari flavonoid

(Roy et al, 2013) ...................................................................... 20

Gambar 2.11. Struktur kimia asiaticoside, madecassoside, asiatic acid,

madecassic acid (Wu et al., 2012) ........................................... 21

Gambar 3.1. Bagan rancangan penelitian pre test post test control

group design ............................................................................ 28

Gambar 4.1. Grafik jumlah sensitivitas sebelum dan sesudah perlakuan ..... 45

Gambar 4.2. Grafik diameter sensitivitas sebelum dan sesudah

perlakuan .................................................................................. 45

Gambar 4.3. Sensitivtas kelompok KN, EP, THC sebelum dan sesudah

perlakuan yang dianalisis dengan Skin Analyzer EH 900 U ..... 46

Gambar 4.5. Kadar air KN, EP, dan THC sebelum dan sesudah

perlakuan ................................................................................. 48

Gambar 4.6. Grafik kadar kolagen sebelum dan sesudah perlakuan ............ 50

Gambar 4.7. Analisis kadar kolagen salah satu sampel THC, THCEP

dengan skin analyzer EH 900 U. ............................................. 50


xviii

Gambar 4.8. Grafik elastisitas sebelum dan sesudah perlakuan ................... 52

Gambar 4.9. Elastisitas dari kelompok uji THC, EP dan THCEP

sesudah perlakuan yang dianalisis dengan skin analyzer

EH 900 U .................................................................................. 52

Gambar 4.10. Grafik besar pori sebelum dan sesudah perlakuan. ................. 54

Gambar 4.11. Besar pori dari kelompok uji KN, KP, THC, THCEP yang

dianalisis dengan skin analyzer EH 900 U. ........................... 55


xix

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman ...................................................... 70

Lampiran 2. Pengolahan simplisia ............................................................... 71

Lampiran 3. Ekstraksi herba pegagan .......................................................... 73

Lampiran 4. Uji kualitatif total flavonoid ekstrak pegagan ......................... 74

Lampiran 5. Uji kuantitatif total flavonoid ekstrak pegagan ...................... 75

Lampiran 6. Uji kualitatif triterpenoid ekstrak pegagan .............................. 78

Lampiran 7. Pembuatan sediaan krim .......................................................... 79

Lampiran 8. Surat persetujuan etik dari Komisi Etik Penelitian .................. 80

Lampiran 9. Data umur dan berat badan mencit tiap kelompok uji

sebelum perlakuan ................................................................... 81

Lampiran 10. Pengelompokan hewan uji ....................................................... 84

Lampiran 11. Pencukuran bulu mencit pada bagian dorsal ........................... 85

Lampiran 12. Alat Skin Analyzer EH 900 U ................................................ 86

Lampiran 13. Penyinaran kulit dorsal mencit dengan lampu UV .................. 86

Lampiran 14. Hasil pengukuran sensitivitas dengan Skin Analyzer EH

900 U ....................................................................................... 87

Lampiran 15. Hasil pengukuran kadar air dengan Skin Analyzer EH 900

U .............................................................................................. 92

Lampiran 16. Hasil pengukuran kadar kolagen dengan Skin Analyzer EH

900 U ....................................................................................... 97

Lampiran 17. Hasil pengukuran elastisitas dengan Skin Analyzer EH 900

U .............................................................................................. 102

Lampiran 18. Hasil pengukuran besar pori dengan Skin Analyzer EH 900

U .............................................................................................. 107

Lampiran 19. Data hasil pengukuran parameter anti aging pada tiap

kelompok uji sebelum dan sesudah perlakuan ........................ 112


xx

Lampiran 20 Rangkuman analisis statistik perbandingan parameter anti

aging pada tiap kelompok uji sebelum dan sesudah

perlakuan ................................................................................. 113

Lampiran 21 Rangkuman analisis statistik perbandingan parameter anti

aging antar kelompok uji sebelum dan sesudah perlakuan ...... 116


xxi

DAFTAR SINGKATAN

AP-1 : Activator Protein-1

MMP : Matrix Metalloproteinase

RER : Rough Reticulum Endoplasmic

ROS : Reactive Oxygen Species

TGF : Transforming Growth Factor

THC : Tetrahydrocurcumin

UV : Ultra Violet


UJI AKTIVITAS ANTI AGING TETRAHIDROKURKUMIN, …repository.ump.ac.id/4257/1/ANI YUPITAWATI -...

Documents

Transcript of UJI AKTIVITAS ANTI AGING TETRAHIDROKURKUMIN, …repository.ump.ac.id/4257/1/ANI YUPITAWATI -...