Terjemahan Jurnal Phyllanthus Niruri-Mekanisme Efek Antihyperuricemic OfPhyllanthus Niruriand Lignan...

7/21/2019 Terjemahan Jurnal Phyllanthus Niruri-Mekanisme Efek Antihyperuricemic OfPhyllanthus Niruriand Lignan Yang

http://slidepdf.com/reader/full/terjemahan-jurnal-phyllanthus-niruri-mekanisme-efek-antihyperuricemic-ofphyllanthus 1/15

Abstrak

Ethnopharmacological relevansi: Phyllanthus niruriLinn. (Euphorbiaceae) digunakan sebagai obat rakyat

di Selatan Amerika untuk mengobati asam urat berlebih. Studi awal kami menunukkan bahwa ekstrak

metanol dari Phyllanthus niruri dan lignan yang mampu membalikkan asam urat plasma hewan

hyperuricemic.

!uuan penelitian: Penelitian ini dilakukan untuk menyelidiki mekanisme e"ek antihyperuricemic dari

Phyllanthus niruriand konstituen lignan nya.

#ahan dan cara: $ekanisme diselidiki menggunakan ui %antin oksidase dan urikosurik Studi kalium

o%onate& dan tikus asam urat yang disebabkan hyperuricemic.

'asil: Phyllanthus ekstrak nirurimethanol e%hibitedin penghambatan vitro%anthine oksidase dengan

*+o" ,-,-/ 0 1 mL dan moderatein vivo %antin oksidase aktivitas penghambatan. 2amun lignan

menampilkan miskin %antin oksidase inhibitionin vitro dan relati" weakin vivo aktivitas penghambatan

pada 3+ mg 1 kg. 4i sisi lain pengobatan intraperitoneal dengan Phyllanthus niruri ekstrak metanol

menunukkan 35- lipatan peningkatan ekskresi asam urat urin bila dibandingkan dengan hewan kontrol

hyperuricemic. 4emikian uga lignan phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin dipamerkan hingga6.*3 dan 33+ kali lebih tinggi di urin ekskresi urat asam dan cukai masing&masing. o&administrasi

pira7inamid dengan phyllanthin dipamerkan penekanan yang signi"ikan dari aktivitas uricosuric

phyllanthin yang menyerupai pira7inamid dengan ben7bromarone.

8esimpulan: Penelitian ini menunukkan bahwa e"ek antihyperuricemic o"Phyllanthus nirurimethanol

ekstrak mungkin terutama karena tindakan uricosuric dan sebagian melalui penghambatan oksidase

%anthine sedangkan e"ek antihyperuricemic dari lignan disebabkan aksi uricosuric mereka.

3. Perkenalan

'iperurisemia adalah salah satu kelainan biokimia biasa ditemui dalam praktek klinis dan telah

dilaporkan mempengaruhi

sekitar 3+9 dari orang dewasa secara global (4incer et al. 6++6). $odi"ikasi gaya hidup seperti

penurunan berat badan penurunan konsumsi alkohol dan

asupan purin diet dapat membantu untuk menurunkan asam urat darah tetapi banyak

pasien masih akan memerlukan obat&obatan untuk mengontrol hyperuricemia mereka

(right dan Pinto 6++,;. 8ong et al 6++<).

$eskipun searah panang hiperurisemia dan gout hanya ada

seumlah obat yang saat ini digunakan dalam praktek klinis dan mereka

milik dua kelas inhibitor oksidase %anthine misalnya allopurinol dan agen uricosuric misalnya

probenesid dan ben7bromarone.Allopurinol secara luas diresepkan untuk pengobatan hiperurisemia

dan asam urat. 2amun telah sering dikaitkan dengan merugikan

e"ek diwuudkan sebagai ruam hipersensitivitas hepatotoksisitas gangguan pencernaan hepatitis dan

demam. Sekitar 6&3+9 dari

=

Penulis yang sesuai. !el .: >5+ < 5*,,???%65-5; "a%: >5+ < 5*@5?,5.

E&mail address: klchanusm.my (. 8.&L han).



pasien terutama orang tua mengembangkan eritematosa pruritus

ruam dan +<9 dari pasien telah mengembangkan sindrom hipersensitivitas yang selanutnya mencegah

administrasi allopurinol

(8hoo dan Leow 6+++; Adel 6++3; 4incer et al 6++6;. 8ong et

al. 6++6). 4i sisi lain probenesid umumnya tidak e"ekti"

pada pasien dengan gangguan ginal bersamaan sedangkan ben7bromarone e"ekti" pada pasien denganinsu"isiensi ginal tetapi memiliki risiko hepatotoksisitas berat (Pere7&Bui7 et al 3--?;. Adel

6++3; 4incer et al. 6++6). 4engan demikian e"ekti" dan ditoleransi dengan baik urat

asam penurun agen banyak dicari terapi seperti baru

Pilihan.

Produk alami terutama yang berasal dari tumbuhan telah lama digunakan dalam

obat tradisional untuk pengobatan hiperurisemia dan gout.

Sampai sekarang tanaman obat telah menadi sumber untuk seumlah

obat klinis penting seperti mor"in atropin dan digo%in

dan merupakan sumber yang sangat baik dari senyawa timbal dalam pencarian baru

obat. 4alam pencarian yang sedang berlangsung untuk agen antihyperuricemic baru dari

tanaman obat lokal ekstrak metanol dan konstituen lignan

o"Phyllanthus niruriLinn. (Euphorbiaceae) ditemukan untuk menurunkan

asam urat plasma tikus hyperuricemic ($urugaiyah dan han

6++5) .Phyllanthus niruri dikenal di $alaysia sebagai Canak dukongC adalah

ramuan kecil ditemukan di daerah tropis dan subtropis yang paling. ni memiliki

secara tradisional digunakan sebagai obat terhadap demam diare kolik

dan masalah ginal dan sebagai diuretik dan ekspektoran (Perry dan

$et7ger 3-?+). ni uga telah digunakan sebagai obat rakyat untuk mengobati kelebihan

asam urat di Amerika Selatan (Dnader et al. 3--3).

$ekanisme whichPhyllanthus niruriand lignan yang mengerahkan

urat e"ek menurunkan saat ini tidak diketahui. Penelitian ini adalahdilakukan untuk menyelidiki mekanisme antihyperuricemic

E"ek o"Phyllanthus niruriand konstituen lignan yang phyllanthin

hypophyllanthin phyltetralin dan niranthin menggunakan ui %antin oksidase dan studi uricosuric kalium

o%onate& dan urat

asam&diinduksi tikus hyperuricemic.

6. #ahan dan metode

6.3. #ahan kimia dan reagen

Asam urat dan kalium o%onate dibeli dari $erck

(4armstadt erman) dan Aldrich hemical ompany ($ilwaukee

DSA) masing&masing. Probenesid ben7bromarone pira7inamid

%antin oksidase (dari buttermilk) %anthine albumin serum sapi dan #rad"ord reagen yang dibeli dari

Sigma 8imia

(St. Louis $F DSA). Allopurinol baik yang disediakan oleh 'ovid

#erhad (poh $alaysia). Semua reagen yang lain yang digunakan adalah dari kelas analitis.

6.6. Ekstraksi "raksinasi dan isolasi lignan

#ahan baku o"Phyllanthus niruriLinn. (Euphorbiaceae)

yang dibeli dari 2ova Laboratories ($alaysia) Sdn. #hd. Sebuah



spesimen voucher (2o. 3+?<,) telah disimpan di herbarium dari School o" #iological Sciences Dniversiti

Sains $alaysia. !he

kering bubuk daun o"Phyllanthus niruriwere so%hlet&diekstraksi

berulang kali dengan metanol segar selama * hari. Ekstrak dikumpulkan

setelah penguapan pelarut di bawah vakum parsial menghasilkan kehiauan

residu yang kemudian dimuat ke kolom resin (4iaion'P 6+ $itshubishi epang) dan selanutnya dielusi oleh peningkatan persentase bertahap metanol dalam

air. Eluat dari air ,+9

*+9 dan ?+&3++9 metanol dalam air dikumpulkan secara terpisah

sebagai pecahan 3 6 , dan < masing&masing. Graksi < menadi bioakti" adalah

lanut dipartisi dengan n&heksana kloro"orm dan n&butanol untuk

menghasilkan sub&"raksinya. Empat lignan seperti yang ditunukkan inGig. 3;

phyllanthin hypophyllanthin phyltetralin dan niranthin diisolasi dari n&heksana sub&"raksi "raksi <

berikut

protokol dielaskan sebelumnya dan struktur mereka dikon"irmasi

oleh resonansi magnetik nuklir spektrometer massa ultraviolet dan in"ra&merah spektrum ($urugaiyah

dan han 6++5). 8arena rendah

yield niranthin hanya digunakan untuk evaluasi o"in vitro %anthine

oksidase studi inhibisi.

6.,. 'ewan

$aleSprague&4awleyrats tua 36&35 minggu berat awalnya sekitar 3?+&6?+ g disimpan di rumah hewan

Sekolah

lmu Garmasi Dniversiti Sains $alaysia. #inatang

dipertahankan pada 1 siklus gelap 36&h cahaya pada suhu kamar

dari 6*

H

dan dii7inkan akses gratis ke pelet makanan standar (0old oin $alaysia) dan air keran. 'ewan&hewan itu acclimatised untuk setidaknya 3 minggu sebelum

awal percobaan. 'ewan dibagi ke dalam kelompok enam masing&masing dan ditempatkan secara

individual

selama periode percobaan. Penanganan dan penggunaan hewan

adalah sesuai dengan pedoman kelembagaan. Persetuuan

diperoleh dari 8omite Etika 'ewan Dniversiti Sains

$alaysia Penang $alaysia (nomor Be"erensi: DS$ 1 PPSG 1 *+ (-,)

ld.3).

6.<. 8egiatan uricosuric

'ewan model yang digunakan dalam penelitian antihyperuricemic kami sebelumnya

($urugaiyah dan han 6++5) diadopsi. Secara singkat hewan

yang secara kimia diinduksi oleh hiperurisemia intraperitoneal tunggal

pemberian kalium o%onate (6++ mg 1 kg) dan asam urat lisan (3 g 1 kg). $akanan dan air yang ditahan

semalam sebelum belaar.

Ekstrak metanol dan "raksi 1 sub&"raksi o"Phyllanthus niruri

(masing&masing pada *+ mg 1 kg) disiapkan di 6+9 !ween 6+ larutan

atau kandungan kimia yang terisolasi phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin (masing&masing di 3+



mg 1 kg) dan obat&obatan klinis digunakan

(3+ mg 1 kg untuk ben7bromarone *+ mg 1 kg untuk probenesid) disiapkan

dalam campuran 3+9 etanol dalam 6+9 !ween 6+ larutan

yang intraperitoneal diberikan kepada tikus ,+ menit setelah induksi hyperuricemia. Dntuk kontrol

normal dan hiperurisemia yang

hewan diberi kendaraan saa. 'ewan&hewan itu kemudian ditempatkandi kandang metabolisme dan diberi 3++ ml air keran. Drine dikumpulkan dalam tabung lulus dan asupan

air yang diukur selama * am

setelah perawatan diberikan. Sampel darah diambil pada akhir

studi oleh tusukan antung. 'ewan&hewan itu dibius dengan

dietil eter di dalam ruang dan ditempatkan ke punggungnya selama ini

prosedur. Plasma diperoleh setelah sentri"ugasi pada ,+++ I g

selama 3* menit (0allenkamp nggris Baya). Plasma dan urin

Sampel disimpan pada&6+

H

sebelum cair kinera tinggi

kromatogra"i ('PL) analisis. 8onsentrasi asam urat plasma

penentuan yang dielaskan sebelumnya ($urugaiyah dan han

6++5). 8onsentrasi asam urat urin ditentukan oleh 'PL yang

sistem yang terdiri dari aters *3+ pompa 'PL ($il"ord $A DSA) sebuah

aters Spherisorb S* ? kolom (<5 id I 6*+ mm aters DSA) sebuah

0ilson 33* detektor DJ ($iddleton DSA) dan 'itachi 4&6*++

8romatogra"i&integrator (!okyo epang). 8ondisi analitis yang

sebagai berikut: "ase mobile * m$ asetat penyangga dengan p' disesuaikan

untuk <.+ dengan asam asetat aliran&lau 3+ mL 1 menit dan deteksi panang gelombang 6-6 nm dari.

Ekskresi asam urat urin dinyatakan sebagai mg

asam urat diekskresikan per kg dari hewan per * h (mg 1 (kg * h)) sementarai7in asam urat dinyatakan sebagai volume asam urat (L)

dibersihkan per hewan kg per h (L 1 (kg h)). Salah satu lignan diui

phyllanthin selanutnya dinilai untuk aktivitas uricosuric nya pada dosis

* dan 6+ mg 1 kg mengikuti metode yang sama seperti dielaskan di atas.

6.*. Pira7inamid tes penekanan

Percobaan dilakukan dalam empat kelompok hewan

hyperuricemia diinduksi berikut protokol dielaskan dalam #agian

6.<. $akanan dan air yang ditahan semalam sebelum belaar. Sebuah

dosis oral ,++ mg 1 kg pira7inamid di +*9 larutan karboksimetilselulosa diberikan kepada semua

binatang ,+ menit setelah

induksi hyperuricemia. 8elompok yang diperlakukan menerima baik

phyllanthin (3+ mg 1 kg) probenesid (*+ mg 1 kg) atau ben7bromarone

(3+ mg 1 kg) intraperitoneal ,+ menit setelah pemberian pira7inamid. 8elompok kontrol hyperuricemic&

pira7inamid menerima

volume yang sama dari kendaraan. Semua perawatan disiapkan dalam campuran etanol 3+9 di 6+9

!ween 6+ larutan. Futput urin dikumpulkan dalam tabung lulus dan asupan air yang diukur

selama * am setelah perawatan diberikan. 8onsentrasi asam urat urin



ditentukan dengan metode 'PL seperti yang dielaskan dalam Section6.<.

6.5. n vitro assay %antin oksidase

E"ek penghambatan o"Phyllanthus nirurie%tract dan lignan yang

pada aktivitas %antin oksidase ditentukan setelah metode spektro"otometri dimodi"ikasi o"2oro dkk.

(3-?,). Sampel ui dilarutkan dalam dimetil sul"oksida (4$SF) dan kemudian

diencerkan dengan dapar "os"at (p' @?) dengan konsentrasi akhir yang mengandung 3&*9 4$SF. Padakonsentrasi ini 4$SF ditemukan

memiliki tidak ada penghambatan %antin oksidase. Di ini melibatkan penambahan +3 mL larutan ui ke

6- mL *+ m$ bu"er "os"at

solusi (p' @?). +3 mL larutan en7im baru disiapkan mengandung +< unit per mL di *+ m$ dapar "os"at

p' @? adalah

selanutnya ditambahkan dan campuran ui pra&diinkubasi pada ,@

H

"or

3+ menit. Beaksi en7imatik dimulai dengan penambahan

6.+ solusi mL baru disiapkan +3* m$ %anthine substrat di

air dan ui akhir campuran diinkubasi selama ,+ menit. !he

Beaksi dihentikan oleh penambahan 3+ mL asam klorida 3 $. Absorbansi campuran assay diukur pada

6-6 nm. !he niruriwas ekstrak metanol o"Phyllanthus awalnya

diui untuk %antin oksidase aktivitas penghambatan pada 3++/ g 1 mL sedangkan

"raksinya 1 sub&"raksi dan konstituen lignan diui di

<+/ 0 1 mL.

Dntuk *+9 konsentrasi hambat (*+) penentuan

ekstrak metanol dari Phyllanthus niruri "raksinya dan sub"raksi diperiksa di enam konsentrasi di kisaran

,3,&*++/ 0 1 mL. !idak ada *+determination dilakukan untuk lignan terisolasi.

6.@. n vivo assay %antin oksidase

Setelah * am administrasi ekstrak metanol "raksisub&"raksi dan lignan o"Phyllanthus niruri tikus dibius dengan dietil eter dan hati mereka dipotong dan

diproses

untuk mendapatkan "raksi sitosol mengikuti metode yang dielaskan

by4an dkk. (3--<). Secara singkat hati itu per"usi dengan *+ mL

es&dingin +6* mol 1 L sukrosa dalam 3++ mmol penyangga 1 L "os"at

p' @?. Sekitar , g hati itu dipotong dan homogen dalam homogeni7er $SE (nggris) dengan empat ilid

icecold +6* mol 1 L sukrosa dalam 3++ mmol dapar "os"at 1 L p' @?.

'omogenat itu disentri"ugasi dalam Eppendor" centri"uge *<+,

(Engelsdor" erman) pada 3*++ I 0Dntuk 3+ menit pada <

H

. Supernatan yang dihasilkan disaring dan selanutnya disentri"ugasi pada 3<.3++ I g

selama 6+ menit. Supernatan yang dihasilkan lagi disentri"ugasi pada

3<.3++ I 0Dntuk 6+ menit pada <

H

. Supernatan setelah ketiga

sentri"ugasi ("raksi sitosol) digunakan vivoassay Gorin aktivitas %antin oksidase. Graksi sitosol hati +<

mL adalah



pra&diinkubasi di 3< ml *+ mmol 1 L dapar "os"at dan +6 mL

%anthine solusi kemudian ditambahkan. ampuran diinkubasi

selama ,+ menit pada ,@

H

. Beaksi dihentikan dengan penambahan

6.+ mL asam +< $ perklorat. Sampel disentri"ugasi pada3+++ I 0Dntuk 3+ menit. 8onsentrasi asam urat dalam supernatan ditentukan pada 6-6 nm menggunakan

Perkin Elmer Lambda <*

spektro"otometer (Perkin Elmer nstrumen 2orwalk ! DSA).

Aktivitas en7im dinyatakan sebagai nmoles asam urat diproduksi

per menit dengan 3 mg protein (nmol 1 (mg protein min)). 8onsentrasi protein ditentukan mengikuti

metode #rad"ord menggunakan

albumin serum sapi sebagai standar (#rad"ord 3-@5).

6.?. Analisis statistik

'asilnya disaikan sebagai mean K standard error dari

berarti (S.E.$.) dari enam hewan. Signi"ikansi statistik perbedaan dievaluasi dengan analisis varians

(A2FJA) dilanutkan

oleh hoctest !ukeypost.

,. 'asil

,.3. E"ek urikosurik dari ekstrak metanol "raksi

sub&"raksi dan lignan terisolasi dari Phyllanthus niruri

E"ek o"Phyllanthus ekstrak nirurimethanol "raksinya

dan sub&"raksi serta lignan diisolasi pada asupan air

Futput urine ekskresi urin dan pembersihan asam urat dari

tikus hyperuricemic ditunukkan pada !abel 3. Secara umum pengobatan dengan

Phyllanthus ekstrak nirurimethanol "raksinya sub&"raksi

"raksi < (n&heksana kloro"orm andn&butanol) atau lignan disebabkan perubahan signi"ikan dalam asupan air dan output urin tikus hyperuricemic. 'anya tikus hyperuricemic

diobati dengan phyllanthin

pada 3+ mg 1 kg menunukkan peningkatan yang signi"ikan dalam output urine saat

dibandingkan dengan orang&orang dari tikus kontrol hyperuricemic meskipun

asupan air mereka tidak terpengaruh. 2amun perubahan dalam urin

tabel 3

Pengaruh ekstrak metanol "raksi sub&"raksi dan lignan o"Phyllanthus asupan air nirurion urin ekskresi

asam urat dan pembersihan tikus hyperuricemic keluaran diamati dengan phyllanthin hewan diperlakukan

tidak dosedependent.

nduksi hiperurisemia oleh administrasi tunggal kalium o%onate intraperitoneal (6++ mg 1 kg) dan asamurat secara lisan

(3 gm 1 kg) menyebabkan peningkatan signi"ikan dalam ekskresi asam urat

dibandingkan tikus kontrol normal. Sebaliknya hyperuricemic

tikus diperlakukan dengan ekstrak thePhyllanthus nirurimethanol memiliki *.3,

dan 35- kali masing&masing lebih tinggi di ekskresi asam urat urin

dibandingkan hewan kontrol normal dan hiperurisemia. Antara

"raksinya "raksi < dipamerkan *.-? dan 3.-@ kali lebih tinggi



ekskresi asam urat dibandingkan kontrol normal dan hiperurisemia masing&masing. Partisi berikutnya

"raksi < menghasilkan

tiga sub&"raksi dengan komponen kemudian&heksana yang paling

ampuh dan dipamerkan ekskresi signi"ikan ?+5 dan 65* kali lebih tinggi kemih asam urat daripada

normal dan hiperurisemia

kontrol masing&masing. Pengobatan dengan ben7bromarone (3+ mg 1 kg) probenesid (*+ mg 1 kg) dan lignan phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin pada 3+ mg 1 kg

masing&masing uga diproduksi 5.66 *.-*

*.*@ *.+* dan <.*, kali ekskresi urin masing&masing lebih tinggi dari

asam urat dibandingkan tikus normal dan 6.?+ 6.5? 6.*3 6.6@ dan 6.+<

kali masing&masing lebih tinggi bila dibandingkan dengan hyperuricemic

hewan kontrol (!abel 3). Penelitian lebih lanut pada phyllanthin menunukkan

peningkatan yang signi"ikan tergantung dosis dari 6,6 dan ,@@ kali di ekskresi asam urat pada * mg 1 kg

dan 6+ mg 1 kg masing&masing

bila dibandingkan dengan yang kontrol hyperuricemic.

Pengobatan withPhyllanthus ekstrak nirurimethanol diproduksi

peningkatan signi"ikan dalam i7in asam urat bila dibandingkan dengan

yang normal dan hiperurisemia kontrol masing&masing. 2amun

pengobatan dengan "raksi yang < menghasilkan peningkatan yang signi"ikan dalam

pembersihan asam urat dari *.+ dan 3+.+ kali dari kontrol normal dan hiperurisemia masing&masing

sementara kemudian&heksana sub&"raksi

berasal "rom"raction < tikus diperlakukan memiliki @3@ dan 3<,, kali lebih tinggi

pembersihan asam urat dibandingkan hewan kontrol masing&masing. $irip dengan hasil yang diperoleh

untuk ekskresi asam urat administrasi ben7bromarone probenesid dan lignan menyebabkan lebih tinggi

i7in asam urat tetapi peningkatan yang signi"ikan dari 3*5@ dan 33+ kali

dibandingkan dengan kontrol hyperuricemic hanya diamati pada

hewan yang diberi ben7bromarone (3+ mg 1 kg) dan phyllanthin(3+ mg 1 kg) masing&masing. Administrasi phyllanthin lanut uga

menghasilkan peningkatan tergantung dosis clearance asam urat dari -+

dan 6+5@ kali pada * mg 1 kg dan 6+ mg 1 kg masing&masing ika dibandingkan dengan yang kontrol

hyperuricemic.

,.6. Pira7inamid tes penekanan

!abel 6shows e"ek ben7bromarone probenesid dan

phyllanthin pada ekskresi asam urat urin tikus hyperuricemic

dengan co&administrasi pira7inamid. !ikus hyperuricemic diberikan

dosis oral ,++ mg 1 kg pira7inamid menunukkan signi"ikan

penurunan ekskresi asam urat dibandingkan dengan hewan hyperuricemic tanpa pira7inamid (!abel 3).

Pira7inamid

diberikan tikus hyperuricemic diobati dengan probenesid menunukkan

peningkatan yang signi"ikan dari 5-5 kali di urin ekskresi asam urat sedangkan mereka yang diobati

dengan ben7bromarone dan phyllanthin

!abel 6

Pengaruh klinis digunakan obat urikosurik dan phyllanthin pada ekskresi asam urat tikus hyperuricemic

dengan co&administrasi pira7inamid.



!abel ,

4alam vitro%anthine oksidase aktivitas penghambatan dan *+values ekstrak metanol "raksi sub&"raksi

dan lignan o"Phyllanthus niruri

menunukkan peningkatan signi"ikan dari ,*3 dan <65 kali masing&masing di ekskresi asam urat urin.

4engan demikian di pira7inamid diberikan hewan hyperuricemic e"ek urikosurik dari ben7bromarone

atau phyllanthin ditekan saat e"ek urikosurik probenesid tidak terpengaruh.

,.,. n vitro %antin oksidase aktivitas penghambatan

Allopurinol inhibitor dikenal %anthine o%idase diadopsi

sebagai kontrol positi" dalam penelitian dan memiliki *+o" +.+66/ g 1 mL

(+356/ $). Aktivitas penghambatan ekstrak metanol "raksi sub&"raksi dan lignan o"Phyllanthus

niruriagainst %antin oksidase dan *+values masing&masing ditunukkan pada !abel ,.

Aktivitas penghambatan ekstrak metanol awalnya dinilai

pada 3++/ g 1 mL dan *+ yang adalah ,-,-/ g 1 mL. Fleh karena itu %antin oksidase aktivitas

penghambatan o"Phyllanthus niruri"ractions sub"raksi dan lignan awalnya ditentukan pada <+/ 0 1 mL.

!he

'asil menunukkan bahwa setelah "raksinasi %antin oksidase aktivitas penghambatan ekstrak metanol

o"Phyllanthus niruri

terkonsentrasi di "raksinya , dan < dengan *-3<9 dan 5*+39

penghambatan masing&masing. Partisi lanut dari "raksi < menghasilkan

konsentrasi aktivitas penghambatan %antin oksidase dalam nbutanol sub&"raksi dengan penghambatan

5--,9. 2amun mereka

kurang kuat bila dibandingkan dengan allopurinol. Sebaliknya lignan terisolasi tidak menunukkan cukup

%antin oksidase inhibitor

activityin vitro. Lignan tidak dapat diui pada konsentrasi yang lebih tinggi lebih dari <+/ 0 1 mL karena

kelarutan miskin dan

kecenderungan untuk mengendapkan dalam campuran assay bu""er. Selain ituyang *+value dari ekstrak metanol adalah ,-,-/ g 1 mL yang mengindikasikan bahwa penelitian lebih

lanut dari lignan luar <+/ g 1 mL tidak

menguntungkan.

,.<. n vivo %antin oksidase aktivitas penghambatan

Pengaruh metanol ekstrak o"Phyllanthus niruriand nya

"raksi sub&"raksi dan lignan pada tikus %anthine o%idase hati adalah

ditunukkan pada !abel <. 'yperuricemia induksi tidak menyebabkan perubahan berarti dalam aktivitas

oksidase %anthine hati. $etanol

!abel <

Pengaruh ekstrak metanol "raksi sub&"raksi dan lignan terisolasi dan allopurinol pada tikus %anthine

o%idase hati tikus hyperuricemic

ekstrak pada *+ mg 1 kg dosis dipamerkan penghambatan yang signi"ikan @5?<9

aktivitas oksidase %anthine sedangkan antara "raksinya di seenis

dosis yang %antin oksidase aktivitas penghambatan ditemukan terkonsentrasi di "raksi , dan < dengan

penghambatan yang signi"ikan dari ?<3+9

dan ?@<-9 masing&masing. Partisi lanut dari "raksi < menghasilkan

n&heksana kloro"orm andn&butanol sub&"raksi yang menyebabkan



penghambatan *?,+9 <-6,9 dan ?3-?9 dalam kegiatan oksidase %anthine hati masing&masing pada

*+ mg 1 kg. !ak satu pun dari lignan diisolasi

seak saat itu&heksana sub&"raksi menunukkan perubahan yang signi"ikan

dalam hati aktivitas oksidase %anthine pada 3+ mg 1 kg dosis. Sebaliknya

dosis tunggal allopurinol pada 3+ mg 1 kg menyebabkan signi"ikan ?6+59

pengurangan aktivitas oksidase %anthine hati.<. 4iskusi

'iperurisemia yang biasa ditemui dalam praktek klinis tapi

Saat ini agen terapi untuk menurunkan asam urat darah

sangat sedikit dalam umlah (4incer et al. 6++6). Sebuah sumber potensial novel

agen antihyperuricemic dapat berasal dari produk alami. 4alam penelitian kami sebelumnya ekstrak

metanol dari daun

o"Phyllanthus niruri (Euphorbiaceae) menunukkan asam urat menurunkan

8egiatan pada tikus hyperuricemic. Selanutnya antihyperuricemic&dipandu

"raksinasi dan pemurnian lignan ekstrak metanol diberikan; phyllanthin hypophyllanthin phyltetralin dan

niranthin sebagai

konstituen bioakti" yang secara signi"ikan terbalik plasma

kadar asam urat hewan hyperuricemic ke tingkat normal dibandingkan dengan obat klinis digunakan

($urugaiyah dan han 6++5).

Studi ini meneliti mekanisme mereka asam menurunkan e"ek urat.

Ekskresi asam urat telah dipelaari dengan baik di tikus

karena tikus menunukkan reabsorpsi bersih asam urat dalam ginal dan

merespon dengan baik untuk agen dikenal memiliki e"ek pada ekskresi asam urat pada manusia (Sugino

dan Shimada 3--*;. amada et al 3---a).

4alam penelitian ini induksi hiperurisemia menyebabkan peningkatan

dalam ekskresi asam urat dan hasilnya adalah dalam peranian dengan laporan sebelumnya (ohnson et

al 3-5-;. onetanidan waki 3-?,). Pemberian "raksi < dari ekstrak metanol

dan kemudian&heksana sub&"raksi "raksi < meningkatkan ekskresi dan clearance asam urat tikus

hyperuricemic. 4emikian uga

lignan bioakti" phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin

meningkatkan ekskresi asam urat urin. Phyllanthin meningkatkan

urin ekskresi asam urat dan pembersihan dengan cara tergantung dosis dan pada 3+ mg 1 kg dosis

dipamerkan potensi yang sama dengan yang

ben7bromarone (3+ mg 1 kg) dan probenesid (*+ mg 1 kg). Sebaliknya

dosis auh lebih tinggi dari lebih dari 3++ mg 1 kg scopoletin agen uricosuric "romErycibe

obtusi"oliaincrease asam urat urin

tingkat tikus hyperuricemic ke tingkat yang sama seperti probenesid

(3++ mg 1 kg) (4ing et al. 6++*).

Pira7inamid tes penekanan digunakan untuk menelaskan mekanisme kera agen uricosuric. $etabolit

akti" pira7inamid pyra7inoate telah dilaporkan menghambat sekresi

asam urat di segmen kedua dari proksimal convulated tubulues

(Sugino dan Shimada 3--*;. amada et al 3---b). Sementara itu

obat uricosuric seperti probenesid dan ben7bromarone menghambat



pada konsentrasi rendah dapat bertanggung awab atas %anthine oksidase diamati aktivitas penghambatan

dari

Ekstrak Phyllanthus nirurimethanol.

*. 8esimpulan

#erdasarkan temuan dari penelitian ini tampak elas bahwa

peningkatan progresi" dalam ekskresi asam urat urin ditampilkan byPhyllanthus "raksi niruri sub&"raksidan lignan seaar mereka

E"ek antihyperuricemic berbeda dengan orang&orang temuan dari

%antin oksidase studi penghambatan. Fleh karena itu tampaknya sangat mungkin

bahwa e"ek antihyperuricemic Phyllanthus nirurimethanol

Ekstrak mungkin disebabkan terutama untuk aksi uricosuric dan sebagian

melalui penghambatan oksidase %anthine sedangkan antihyperuricemic

e"ek dari lignan ini disebabkan tindakan uricosuric mereka.

Dcapan !erima 8asih

Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada 4epartemen Sains !eknologi

dan novasi $alaysia dan Dniversiti Sains $alaysia untuk memberikan dukungan keuangan dan PASA

beasiswa. !erima kasih uga kami sampaikan

untuk Pro"esor 8. !akeya dari Sekolah Garmasi !okyo Dniversity o" Pharmacy M Li"e Sciences

'achioi !okyo epang dan '.

$orita dari Gakultas lmu Garmasi 'oshi Dniversity

Shinagawa&ku !okyo epang dan Associate Pro"essor Fsamu Shirota

dari Gakultas lmu Garmasi Dniversitas !okushima #unri Sanuki&ity 8agawa epang untuk

menalankan spektrum massa terisolasi

senyawa dan 2$B dari niranthin. !erima kasih khusus kepada $r Peter

Sprenger dari #ruker #FSP2 #angkok !hailand untuk menalankan 2$B

dari phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin.

Abstrak

Phyllanthus niruriLinn. (Euphorbiaceae) atau $eniran digunakan sebagai obat rakyat di Selatan Amerika



untuk mengobati asam urat berlebih. Studi awal menunukkan bahwa ekstrak metanol dari Phyllanthus

niruri dan lignan yang mampu membalikkan asam urat plasma hewan hiperurisemia. $ekanismenya

dengan menggunakan ui %antin oksidase dan urikosurik kalium o%onate& dan tikus asam urat yang

disebabkan hyperurisemia. 'asilnya yaitu Phyllanthus ekstrak niruri dengan menggunakan methanol

e%hibitedin menghambat aktivitas vitro%anthin oksidase dengan *+o" ,-,-/ 0 1 mL dan moderatein

vivo %antin oksidase. 2amun lignan menampilkan kurangnya %antin oksidase inhibitionin vitro danrelati" lemahnya vivo dalam menunukkan aktivitas penghambatan per 3+ mg 1 kg. 4i sisi lain

pengobatan intraperitoneal dengan Phyllanthus niruri dengan menggunakan ekstrak methanol

menunukkan 35- lipatan peningkatan ekskresi asam urat urin bila dibandingkan dengan hewan kontrol

hiperurisemia. 4emikian uga lignan phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin ditunukkan hingga

6.*3 dan 33+ kali lebih tinggi ekskresi asam urat dan cukai di urin masing&masing. o&administrasi

pira7inamid dengan phyllanthin ditunukkan memberi penekanan yang signi"ikan dari aktivitas urikosurik

phyllanthin yang menyerupai pira7inamid dengan ben7bromarone. 8esimpulannya penelitian ini

menunukkan bahwa e"ek antihiperurisemik dari Phyllanthus niruri ekstrak methanol mungkin teradi

terutama karena tindakan urikosurik dan sebagian melalui penghambatan oksidase %anthin sedangkan

e"ek antihiperurisemik dari lignan disebabkan aksi urikosurik mereka.

Latar Belakang

'iperurisemia adalah salah satu kelainan biokimia yang biasa ditemui dalam praktek klinis dan

telah dilaporkan mempengaruhi sekitar 3+9 dari orang dewasa secara global (4incer et al. 6++6).

$odi"ikasi gaya hidup seperti penurunan berat badan penurunan konsumsi alkohol dan diet asupan purin

dapat membantu untuk menurunkan asam urat darah tetapi banyak pasien masih akan memerlukan obat&

obatan untuk mengontrol hiperurisemia mereka (right dan Pinto 6++,;. 8ong et al 6++<). Seumlah

obat yang saat ini digunakan dalam praktek klinis dan mereka milik dua kelas yaitu inhibitor oksidase%anthin misalnya allopurinol dan agen urikosurik misalnya probenesid dan ben7bromarone. Allopurinol

secara luas diresepkan untuk pengobatan hiperurisemia dan asam urat. 2amun telah sering dikaitkan

dengan merugikan e"ek yang diwuudkan sebagai ruam hipersensitivitas hepatotoksisitas gangguan

pencernaan hepatitis dan demam. 8emudian probenesid umumnya tidak e"ekti" pada pasien dengan

gangguan ginal sedangkan ben7bromarone e"ekti" pada pasien dengan insu"isiensi ginal tetapi memiliki

risiko hepatotoksisitas berat. 4engan demikian banyak dicari terapi baru yang e"ekti" untuk penurun agen

asam urat.

Produk alami yang berasal dari tumbuhan telah lama digunakan dalam obat tradisional untuk

pengobatan hiperurisemia dan gout. 4alam penelitian yang sedang berlangsung untuk agen anti

hiperurisemik baru dari tanaman obat lokal ekstrak metanol dan konstituen lignan dari Phyllanthus

niruriLinn. (Euphorbiaceae) ditemukan untuk menurunkan asam urat plasma tikus hyperuricemic

($urugaiyah dan han 6++5) . $eniran dapat ditemukan di daerah tropis dan subtropis dan memiliki

khasiat sebagai obat demam diare kolik dan masalah ginal sebagai diuretik dan ekspektoran uga telah

digunakan sebagai obat rakyat untuk mengobati kelebihan asam urat.Penelitian ini dilakukan untuk

menyelidiki mekanisme e"ek anti hiperurisemik dari meniran dan konstituen lignannya dengan

menggunakan ui %antin oksidase dan studi urikosurik kalium o%onate& dan asam urat yang diinduksikan

ke tikus hiperurisemik.



Bahan dan Metode

a. #ahan dan reagen

& Asam urat dan kalium o%onate

& Probenesid ben7bromarone pira7inamid %antin oksidase (dari buttermilk) %anthine albumin serum

sapi dan reagen #rad"ord

& Phyllanthus niruriLinn. (Euphorbiaceae)

b. $etode

& Ekstraksi "raksinasi dan isolasi lignan

Pertama bubuk kering dari daun Phyllanthus niruri diso%hlet lalu diekstraksi berulang kali dengan

metanol segar selama * hari. Ekstrak yang dikumpulkan setelah penguapan pelarut metanol

menghasilkan residu kehiauan yang kemudian dimuat ke kolom resin dan selanutnya dielusi oleh peningkatan persentase bertahap metanol dalam air. Eluat dari air ,+9 *+9 dan ?+&3++9 metanol dalam

air dikumpulkan secara terpisah sebagai pecahan 3 6 , dan <. Graksi < menadi bioakti" yang dipartisi

dengan n&heksana kloro"orm dan n&butanol untuk menghasilkan sub&"raksinya. Empat lignan seperti

phyllanthin hypophyllanthin phyltetralin dan niranthin diisolasi dari n&heksana sub&"raksi "raksi < dan

kemudian strukturnya dikon"irmasi oleh resonansi magnetik nuklir spektrometer massa ultraviolet dan

spektrum in"ramerah ($urugaiyah dan han 6++5).

& 'ewan

!ikus antan Sprague&4awley umur 36&35 minggu dengan bb awal sekitar 3?+&6?+g dipertahankan pada

siklus gelap cahaya selama 36 am pada suhu kamar dari 6*H dengan pemberian makanan pelet standar

dan air keran yang ditempatkan didalam kandang. 'ewan&hewan itu diisolasi untuk setidaknya 3 minggu

sebelum awal percobaan. 'ewan dibagi ke dalam masing&masing 5 kelompok dan ditempatkan secara

individual selama periode percobaan. Penanganan dan penggunaan hewan adalah sesuai dengan pedoman

kelembagaan. Drine tikus dikumpulkan dalam tabung dengan asupan air yang diukur selama * am

setelah perawatan diberikan. Sampel darah diambil pada akhir studi oleh tusukan antung. 'ewan&hewan

tersebut dibius dengan dietil eter di dalam ruang dan ditempatkan ke punggungnya. Plasma diperoleh

setelah sentri"ugasi pada ,+++ I g selama 3* menit. Plasma dan urin sampel disimpan pada&6+ H

sebelum analisis kromatogra"i cair kinera tinggi ('PL). 8onsentrasi asam urat urin ditentukan oleh

sistem 'PL

& Penguian oksidasi %antin secara n vitro

E"ek penghambatan dari ekstrak Phyllanthus niruri dan lignan yang pada aktivitas %antin oksidase



ditentukan setelah metode spektro"otometri. Sampel ui dilarutkan dalam dimetil sul"oksida (4$SF) dan

kemudian diencerkan dengan dapar "os"at (p' @?) dengan konsentrasi akhir yang mengandung 3&*9

4$SF. Pada konsentrasi ini 4$SF ditemukan memiliki tidak ada penghambatan %antin oksidase.

& Penguian oksidasi %antin n vivo

Setelah * am administrasi ekstrak metanol "raksi sub&"raksi dan lignan dari Phyllanthus niruri tikus

dibius dengan dietil eter dan hati mereka dipotong dan diproses untuk mendapatkan "raksi per"usi sitosol

dengan *+ mL es dingin > +6* mol 1 L sukrosa dalam 3++ mmol 1 L larutan "os"at p' @?. 8emudian

sekitar , g hati tersebut dipotong dan dihomogenkan dalam homogeni7er. 'omogenat itu disentri"ugasi

dalam Eppendor" centri"uge *<+, Dntuk 3+ menit pada <H . Supernatan yang dihasilkan disaring dan

selanutnya disentri"ugasi pada 3<.3++ I g selama 6+ menit. Supernatan yang dihasilkan disentri"ugasi

lagi selama 6+ menit pada <H. Lalu konsentrasi asam urat dalam supernatan ditentukan pada 6-6 nm

spektro"otometer Lambda <*.

& Analisis statistik 'asilnya disaikan sebagai mean Kstandard error (S.E.$.) dari 5 hewan. Signi"ikansi perbedaan statistik

dievaluasi dengan analisis varians (A2FJA) dilanutkan oleh post hoctest !ukey.

Hasil penelitian

Pengobatan dengan ekstrak Phyllanthus niruri dengan methanol "raksinya sub&"raksi "raksi < (n&heksana

kloro"orm dan n&butanol) atau lignan disebabkan perubahan signi"ikan dalam asupan air dan pengeluaran

urin tikus hiperurisemik. 'anya tikus hiperurisemik diobati dengan Phyllanthin pada 3+ mg 1 kg

menunukkan peningkatan yang signi"ikan dalam pengeluaran urin. nduksi hiperurisemia oleh pemberian

tunggal kalium o%onate intraperitoneal (6++ mg 1 kg) dan asam urat per oral (3 gm 1 kg) menyebabkan

peningkatan signi"ikan dalam ekskresi asam urat dibandingkan dengan tikus kontrol normal. Sebaliknya

tikus hiperurisemik diperlakukan dengan ekstrak Phyllanthus niruri methanol memiliki perbedaan

masing&masing lebih tinggi di ekskresi asam urat urin dibandingkan hewan kontrol normal dan

hiperurisemia. Antara "raksinya "raksi < memiliki perbedaan lebih tinggi ekskresi asam urat

dibandingkan kontrol normal dan hiperurisemia. Pengobatan dengan ben7bromarone (3+ mg 1 kg)

probenesid (*+ mg 1 kg) dan lignan phyllanthin hypophyllanthin dan phyltetralin pada 3+ mg 1 kg uga

diproduksi dan ekskresi urin masing&masing lebih tinggi dari asam urat dibandingkan tikus normal bila

dibandingkan dengan hewan kontrol hiperurisemik. $irip dengan hasil yang diperoleh untuk ekskresi

asam urat administrasi ben7bromarone probenesid dan lignan menyebabkan lebih tinggi asam uratdibandingkan dengan kontrol hiperurisemik yang masing&masing hanya diamati pada hewan yang diberi

ben7bromarone (3+ mg 1 kg) dan phyllanthin (3+ mg 1 kg). Administrasi dari phyllanthin uga

menghasilkan peningkatan tergantung dosis clearance asam urat dari masing&masing ui ika

dibandingkan dengan yang kontrol hiperurisemik.



Kesimpulan

#erdasarkan temuan dari penelitian ini tampak elas bahwa peningkatan progresi" dalam ekskresi urin

asam urat yang ditampilkan dari "raksi Phyllanthus niruri sub&"raksi dan lignan adalah seaar. E"ek anti

hiperurisemik berbeda dengan studi penghambatan dari %antin oksidase. Fleh karena itu tampaknya

sangat mungkin bahwa e"ek anti hiperurisemik Ekstrak methanol niruri mungkin terutama disebabkan

untuk aksi urikosurik dan sebagian melalui penghambatan oksidase %anthine. Sedangkan e"ek anti

hiperurisemik dari lignan ini disebabkan oleh tindakan urikosuriknya.

Terjemahan Jurnal Phyllanthus Niruri-Mekanisme Efek Antihyperuricemic OfPhyllanthus Niruriand Lignan...

Documents

Transcript of Terjemahan Jurnal Phyllanthus Niruri-Mekanisme Efek Antihyperuricemic OfPhyllanthus Niruriand Lignan...