Tujuan: Dalam studi ini, kami telah menyelidiki perilaku biokimia asper-gillus sp. (lima jenis) dan Penicillium expansum (satu strain) jamur dibudidayakanpada minyak goreng limbah zaitun. Produksi lipid kaya biomassa adalah utamatarget pekerjaan. Secara paralel, biosintesis ekstraseluler lainnya METABO-Lites (asam organik) dan enzim (lipase) dan spesifisitas substrat asam lemakdari strain dipelajari.Metode dan Hasil: Karbon terbatas budaya dilakukan pada limbah minyak, ditambahkan

dalam medium pertumbuhan sebesar 15 l g) 1, Dan jumlah biomassa yang tinggi adalah diproduksi (sampai 18 g c. l) 1, Konversi hasil c. 1Æ0 g biomassa kering terbentuk per g dikonsumsi lemak atau tinggi). Lipid Seluler adalah akumulasi dalam terkenal jumlah di hampir semua budaya. Aspergillus sp. ATHUM 3482 akumulasi lipid hingga 64Æ0% (b / b) dalam massa jamur kering. Secara paralel, lipase ekstraselular aktivitas dihitung, dan diturunkan menjadi strain dan waktu fermentasi tergantung, dengan kuantitas maksimum 645 U ml ) 1 yang diperoleh asper-gillus niger NRRL 363. Penyimpanan kadar lemak menurun secara signifikan pada stasioner pertumbuhan fase. Beberapa perbedaan dalam komposisi asam lemak dari kedua seluler dan sisa lemak bila dibandingkan dengan lemak substrat awal yang digunakan diamati, dalam berbagai kasus, lemak jenuh lebih seluler dan diperkaya dengan asam arachidic diproduksi. Strain Aspergillus menghasilkan asam oksalat sampai untuk 5Æ0gl) 1.

Kesimpulan: Aspergillus dan Penicillium strain mampu mengubah sampah masak-ing zaitun minyak ke tinggi nilai tambah produk.Signifikansi dan Dampak Studi: Meningkatkan lemak limbah jumlah tersebutsetiap tahun diproduksi. Studi saat ini memberikan cara alternatif biovalou-rization materi ini, dengan menggunakan mereka sebagai substrat, untuk menghasilkan nilai

tambahsenyawa

Lemak substrat (S) digunakan untuk semua percobaan ini digunakan minyak zaitun memasak (limbah yang berasal dari

restoran lokal fasilitas) dengan komposisi asam lemak yangsebagai berikut (% b / b): laurat asam (C12: 0) 1Æ0; miristatacid (C14: 0) 1Æ5; asam palmitat (C16: 0); asam stearat 16Æ1(C18: 0) 2Æ0; asam oleat (D9 C18: 1) 72Æ0; asam linoleat(D9, 12 C18: 2) 7Æ4. Sebelum pemanfaatannya, minyak limbah adalahmengalami filtrasi (Whatman no 4 filter.) untuk menghapuspadat kotoran. Kadar air minyak yang digunakan adalahc. 3Æ0%, b / b. Keasaman bebas dari minyak yang digunakan (dinyatakandi D9 C18: 1 setara) adalah 6Æ0 ± 1Æ0%, b / b, sedangkanjumlah peroksida residu sekitar150 ± 10 mg kg) 1 minyak. Jumlah awal (S0) lemakdalam uji coba yang dilakukan adalah 15 g l) 1

. Ujian, maka, dilakukan pada karbon-media yang terbatas karena Suami-rasio molar esensial C / N yang dikenakan ke media adalahc. 13 mol per mol. Untuk memungkinkan dispersi lemak ke dalamfase air sehingga mempercepat pertumbuhan mikroba,minyak dalam air emulsi diciptakan. Semua senyawamedia kultur (misalnya garam-garam, ekstrak ragi) danlimbah minyak yang ditambahkan dalam konsentrasi yang tepatke dalam labu 2000-ml. Tween 80 (Fluka) pada konsentrasi10% b / b, pada lemak substrat, ditambahkan sebagai pengemulsi (Papanikolaou et al. 2001).

Ultra Turrax homogenizer (T25 dasar; Janke dan Kunkel, Jerman) yang beroperasi selama 15 menit pada berbagai kecepatan c. 6800 min) 1

memungkinkan penciptaan emulsi stabil. Media kemudianditransfer ke 250-ml labu conical (50 ± 1 ml media di masing-masing labu) dan mengalami

panas sterilisasi (T = 115? C, 20 menit). PH media kultursebelum dan sesudah sterilisasi adalah 6Æ0 ± 0Æ1. Proses sterilisasi tidak terlalu

mempengaruhi emulsi stabilitas.

Protokol inokulasi yang dilakukan adalah sebagaiberikut: strain yang diregenerasi dalam tabung miring PDA(diinkubasi pada T = 28? C selama 4 hari sebelum inokulasi).Kemudian, satu tabung dibilas tiga kali dengan disterilkanair (sekitar 30 ml), dan konidia dikumpulkan. percobaandilakukan dalam mode batch pada 250-ml labu conicalmengandung 50 ± 1 ml media pertumbuhan dan diinokulasidengan 1 ml suspensi spora yang disebutkan di atas con-pertama mengandung c. 1-3 · 105spora. Labu diinkubasi dalamorbital pengocok (Lab-Line, USA) pada tingkat agitasi200 ± 5 rev min) 1pada T = 28 ± 1? C.

Lipase aktivitas diukur dengan alat tes titrimetri,menurut protokol eksperimental yang dijelaskan olehKamzolova dkk. (2005). Refined minyak zaitun (keasaman bebas<0Æ5%, b / b) pada 40% (v / v) dan polivinil alkohol (Fluka)sebesar 2% (b / v) adalah komponen dengan bantuan yangemulsi yang merupakan substrat untuk pemeriksaanlipase telah dibuat. Senyawa yang diemulsikan denganbantuan Ultra Turrax homogenizer (Janke danKunkel) untuk memperoleh suatu dispersi yang memuaskan partikel minyakke dalam fase air. Untuk pembuatan emulsi,

operasi menggunakan homogenizer selama 10 menit pada kecepatanberbagai c. 3400 min) 1 dilakukan. Untuk melanjutkanuji, c. Ml 1Æ0 dari media kultur telah dihapusdari labu dan disaring melalui Whatman 0Æ2-lm jarum suntik filter, untuk menghilangkan pelet jamur dan myc-Elia dan dengan demikian untuk menentukan hanya lipase ekstraselularkegiatan. Sampel uji (500 II) ditambahkan padasubstrat emulsi (5Æ0 ml) dan 0Æ05 mol l) 1 dapar fosfat (4Æ5 ml). Seluruh campuran (10Æ0 ml) incu-tertahan selama 1 jam pada shaker dengan kecepatan pengadukan180 ± 5 rev min) 1 pada T = 28 ± 1? C. Selain itu, optimalisasi uji lipase dalam hal pengaruh

pH padaaktivitas lipase dilakukan, sehingga buffer solusi menyajikan berbagai nilai pH awal (awalpH = 5Æ0, 6Æ0, 7Æ0 dan 8Æ0) diciptakan, dan pemeriksaandilakukan di media ini. Dalam semua kasus, titrasidilakukan dengan 0Æ05 mol l) 1NaOH, dan titik akhir titrasi adalah pH = 9Æ0. Mengingat bahwasampel uji itu sendiri berisi beberapa jumlah asam lemak bebas, untuk melakukan

pengukuran kontrol, assaysampel ditambahkan ke campuran substrat emul-sion dan 0Æ05 mol l) 1fosfat buffer, dan titrasi dengan 0Æ05 mol l) 1NaOH dilakukan segera setelahpenambahan sampel uji. Lipase kegiatan untuktitik eksperimental diberikan diberikan sebagai perbedaan antaranilai-nilai sampel uji diinkubasi dan kontrol.Nilai optimum pH untuk melanjutkan dengan uji lipaseditemukan bahwa dari 7Æ0. Lipase aktivitas diungkapkandi U ml,) 1 dengan 1 U didefinisikan sebagai kuantitasenzim yang dibutuhkan untuk pembebasan dari 1 lmol asam lemakper jam.

Karena dapatdiamati, semua jamur yang diuji terbukti kandidat yang cocok untuk lemak yang kaya

produksi biomassa dan lemak limbahserapan, karena di hampir semua dari pencobaan, relatifcepat (misalnya dalam 70-100 jam setelah inokulasi), tinggijumlah lemak yang dikonsumsi oleh strain dan jumlah secara simultan signifikan biomassa

kering disintesis. Dalam hampir semua kasus, biomassa Hasil pada lemak yang dikonsumsi substrat (milik Y / S) adalah c. 1Æ0gg) 1

atau bahkan lebih tinggi, sedangkan di dua dari percobaan dilakukan (budaya denganP. expansum NRRL 973 dan A. niger LFMB 2), milik Y / S nilaidicapai memang sangat baik (> 1Æ30 g g) 1). Selain itu, budidaya pada substrat yang digunakan lemak mengakibatkanfakta bahwa semua dari mikro-organisme diuji berjalan dengansignifikan akumulasi lipid dalam miselia jamur mereka, nilai maksimum dari lipid dalam hal

selular kering (YL / X) dari 0Æ31 untuk 0Æ64 gg) 1diperoleh untuk semua strain, dengan jumlah maksimum dari total akumulasilipid (Lmax) menjadi 7Æ7gl) 1 pada strain Aspergillus sp.ATHUM 3482 (Tabel 1). Sangat menarik untuk menunjukkan bahwadengan pengecualian dari A. niger strain NRRL 364 dan LFMB1 yang menghasilkan beberapa jumlah lipid sel ketikadibudidayakan pada glukosa berbasis bahan dalam kondisi budayamendukung akumulasi lipid penyimpanan (budaya yaitu terendam pada rasio awal yang

tinggi C / N molar dikenakan,dengan demikian, menyajikan kelebihan karbon tinggi - Papanikolaou danAggelis 2002, 2009), strain disaring lainnya tidakmengumpulkan jumlah yang signifikan lipid dalam kondisi yang disebutkan di atas

(Papanikolaou, data pribadi). DiSelain itu, dalam semua percobaan dilakukan, pada akhir pertumbuhanfase, meskipun jumlah substrat lemak non-diabaikantetap yang tidak digunakan ke dalam media kultur (jumlah berkisar antara 20 dan 40% b / b,

dari lemak awalkuantitas), lipid seluler menjadi sasaran degradasi(mobilisasi - omset), dan fakta ini mengakibatkan pengurangan yang nyata dari nilai mereka

(Tabel 1). Rupanya, lipiddegradasi dilakukan karena mikroba straintidak bisa menutupi aktivitas metabolisme mereka dari kolam karbon ekstraseluler, karena

penurunan progresif konsentrasi substrat lemak (sesuai dengan: Aggelis dan Sourdis1997; Papanikolaou dkk. 2001, 2002a; Papanikolaou danAggelis 2003a). Mobilisasi lipid Seluler didampingi (signifikan dalam beberapa kasus)

kenaikan dari nilai total biomassa (X) dan lemak bebas (Xfingl) 1, sebenarnyaXf = X) L), memberikan bukti bahwa akumulasi lipiddigunakan sebagai prekursor untuk biosintesis selular lainnyabahan. Hasil konversi lemak bebas bahan pro-diproduksi per kuantitas yang dikonsumsi lipid akumulasi (YXf / L)adalah c. 1Æ0gg) 1.

Komposisi asam lemak dari lipid seluler dan sisaPara fermentasi Aspergillus spp. dan P. expansum

strain pada minyak zaitun limbah yang diikuti dengan beberapa modifikasi di kedua lemak substrat sisa residu dan akumulasi lipid seluler (Tabel 3 - representasi

sisa lemak dan Tabel 4 - representasi dari lipid selular).Komposisi asam lemak dari kedua fraksi untuk semua strain disajikan kesamaan dengan

komposisi awal lemak substrat. Namun demikian, mengenai lipid sisa,evolusi fermentasi menunjukkan bahwa fraksi ini lebih kaya asam lemak D9 C18: 1 dan

kurang kaya asam lemak C16: 0 dan D9, 12C18: 2, menunjukkan penggabungan selektif dari C16: 0 dan D9, 12C18: 2 oleh semua strain. Acara ini lebih jelas untuk kasus strain A. niger NRRL 363 (Tabel

3). Di sisi lain, meskipun substrat lemak adalah sangat kaya akan asam lemak D9 C18: 1 dan dalam hal apapun

besar jumlah lemak substrat (dan, karenanya, dari lemakasam D9 C18: 1) telah berasimilasi, fakta bahwa sisalemak lebih kaya dalam asam lemak tersebut di atas diperbandingan dengan lemak substrat awal menunjukkan serapan nonpreferential ini asam

lemak dibandingkan dengan asam lemak C16: 0 dan D9, 12C18: 2. Mengenai asam lemak C18: 0, dalam beberapa strain (misalnya A. niger NRRL 364

danP. expansum NRRL 973), evolusi untuk fermentasimenghasilkan fakta bahwa konsentrasi asam lemakdalam fraksi lemak sisa adalah sama bahkan kurang dalamperbandingan dengan yang di substrat lemak awal (Tabel 3). Sebaliknya, dalam kasus lain

(misalnya Aspergillus sp ATHUM 3482, A. niger LFMB 2.), C18: 0 konsentrasijelas meningkat dalam fraksi tidak digunakan sebagai fermentasi berlangsung, menunjukkan

diskriminasi ini mungkin terhadap asam lemak.

Analisis asam lemak dari lemak akumulasi menunjukkansama menarik hasil; pada langkah pertumbuhan awalbudaya (misalnya hingga 40 jam setelah inokulasi), maka lemakasam komposisi lipid selular disajikan luar biasakesamaan dengan komposisi awal lemak substrat.Setelah itu, beberapa (non-diabaikan dalam berbagai kasus) modifiations terjadi, misalnya,

dalam kasus strain A. niger NRRL 363, lipid akumulasi secara progresif menjadi lebih kaya dalam asam lemak D9

C18: 1 dan signi ャ ... antly kurang kaya dalam asam lemak C16: 0 dibandingkan dengan

awallemak substrat. Pengamatan serupa dapat dilakukan untukstrain A. niger NRRL 364 (Tabel 4). Sejauhstrain A. niger LFMB 1, A. niger dan Aspergillus LFMB 2

sp. ATHUM 3482 prihatin, evolusi untuk fermentasi menghasilkan produksi lipid penyimpanan

yang kurang kaya dalam asam lemak C18: 1 dan umumnyalebih jenuh dari pada lemak substrat awal. Menariknyacukup, asam lemak C20: 0 (asam arachidic) ditemukanke dalam cadangan lemak dalam beberapa kasus dalam konsentrasi signifiant (lihat lipid

selular A. niger LFMB 1 dan untuk tingkat yang lebih rendah A. niger LFMB 2 窭 Tabel 4),

menunjukkan intracellu-lar kegiatan elongases asam lemak (reaksi dilakukan dari

jenis C18: 0 ャ C20: 0). Demikian juga, adalah penting untuk

menunjukkan bahwa strain Aspergillus sp. ATHUM 3482 semakin akumulasi lipid yang lebih kaya dalam asam lemak C18: 0 dan kurang kaya dalam asam lemak C16: 0 dari awal

lemak substrat, sedangkan strain A. niger LFMB 2 disintesis lipid selular memang signifikan diperkaya dengan asam lemak C16: 0 dibandingkan dengan lemak substrat

(Tabel 4). Akhirnya, perilaku biokimia benar berbeda diamati untuk strain P. expansum NRRL 973, seperti progresif itu disimpan lipid selular secara nyata lebih tak jenuh (lebih kaya asam lemak D9, 12

C18: 2 dan terutama kurang kaya dalam asam lemak C16: 0) dibandingkan denganawal lemak substrat

DiskusiJamur yang termasuk genus Aspergillus dan spesies-spesies P. expansum adalah labu-

dibudidayakan pada minyak goreng bekas nolive, dan memang pertumbuhan sel mengesankan diperoleh (menghasilkan milik Y / S> 1Æ0gg) 1 dalam banyak kasus). Di sisi lain,

meskipun tak jenuh Media lemak cair digunakan sebagai substrat (bahwa, secara umum, lebih tepat dalam relation into penghapusan mereka dari media kultur dengan bantuan

mikroba sel atau miselia dibandingkan dengan lemak padat-Papanikolaou dan Aggelis 2010), dalam beberapa kasus, non-diabaikan jumlah lipid (yaitu hingga 20%, b / b, dari jumlah substrat awal lemak) tetap tidak digunakan pada akhir dilakukan budaya. Sastra menunjukkan bahwa semakin banyak lemak jenuh substrat (dan, karenanya,

padat), semakin banyak jumlah substrat yang tersisa adalah tinggi pada akhir fermentasi (Bednarski et al 1994;. Papanikolaou dkk 2002a, 2007).

Berbagai mikro-organisme mampu memanfaatkan sabunserta bebas asam lemak sebagai karbon tunggal dan sumber energi,terlepas dari kapasitas lipolitik mereka (Papanikolaou danAggelis 2010). Sebaliknya, untuk melanjutkan triacylglycerolsatau lemak-ester degradasi, yang diberikan mikro-organismeharus wajib melaksanakan lipase-dikatalisis hidrolisis ester(Li dan Zong 2010; Papanikolaou dan Aggelis 2010). dalam

budaya ini, non-diabaikan jumlah lipase ekstraseluler yang disekresikan ke dalam media pertumbuhan, khusus pada fase kultur awal. Ketika fermentasi berkembang dan jumlah lemak substrat ke dalam medium menurun, aktivitas maksimum secara signifikan menurun (sesuai dengan hasil yang dicapai oleh ragi Yarrowia lipolytica - Kamzolova et al 2005; Papanikolaou et al 2007..)

Maksimum aktivitas lipase yang diperoleh dalam penyelidikan saat ini adalah 645 U ml) 1BY jamur A. niger NRRL 363, yang kuantitas lebih rendah dari yang dilaporkan oleh Edwinoliver dkk. (2009) (1600 U ml) 1, oleh lain A. niger strain) atau Jayaprakash dan Ebenezer (2010) (mulai

antara 1800 dan 5400 U ml) 1 untuk A. baru diisolasijaponicus strain). Peningkatan aktivitas lipase karenapenambahan bahan lemak telah dilaporkan untuk Aspergilus sp berbagai. dan Penicillium sp.

strain (Ohnishiet al 1994;. Yadav et al 1998;. Ellaiah et al 2004;. Wolski et al 2009.). Mahadik dkk. (2004) telah melaporkan aktivitas lipase maksimum c. 2400 U ml) 1BY A. niger mutan UV-100 galur dibudidayakan pada media kultur

didasarkan pada minyak zaitun di mana Triton X-100 juga ditambahkanke dalam media, sementara penambahan tambahan glukosa tidak lebih meningkatkan

produksi enzim lipase menggunakan strain mutan, sedangkan penambahan gula meningkat lipaseaktivitas dari strain A. niger liar NCIM 1207 (Mahadiket al. 2004). Demikian pula, pemanfaatan gula bersama-sama denganlemak meningkatkan produksi lipase untuk Amycolatopsismediterranei (Dheeman et al. 2010) dan Burkholderiacepacia (Rathi et al. 2001), sementara tidak hanya kehadiranitu sendiri tetapi juga komposisi asam lemak dari lemakbahan dapat memainkan peran penting pada lipase mikrobialproduksi (Darvishi et al 2009;. Dheeman et al 2010.;Fakas dkk. 2010). Akhirnya, Fakas dkk. (2010) telahmelaporkan kegiatan lipase cukup tinggi (berkisarantara 4100 dan 7300 U ml) 1) oleh Penicillium sp yang baru diisolasi. strain dibudidayakan

pada minyak zaitun digunakan sebagai substrat dalam labu goyang-percobaan.

Berbagai liar strain mikroba prokariotik atau eukariotik telah dilaporkan mampu memproduksi lipase dengan sifat enzymological berbeda dan substrat

kekhususan (Koritala et al 1987;. Dalmau et al, 2000.;Rathi dkk. 2001; Dominguez et al. 2003, 2010; Montesinos dkk. 2003; Mahadik dkk. 2004;

Szcze ˛ SNA-Antczak dkk. 2006; Papanikolaou dkk. 2007; Vargas dkk. 2008;Deive dkk. 2009; Wolski dkk. 2009; Dheeman dkk.2010; Fakas dkk. 2010; Ramani dkk. 2010). maksimumkonsentrasi lipase oleh tersebut di atas liarmikroba strain berkisar antara 50 dan 3000 U ml) 1

(Pereira-Meirelles et al, 1997, 2000;. Dalmau et al, 2000.;Dominguez dkk. 2003; Montesinos dkk. 2003; Kamzolovaet al. 2005; Papanikolaou dkk. 2007; Darvishi dkk. 2009;Deive dkk. 2009; Dheeman dkk. 2010; Ramani dkk.2010), nilai-nilai yang sama dengan investigasi saat ini,sedangkan pemanfaatan substrat lemak murah atau limbah dalamkonversi ini yang baru-baru ini dianggap(Papanikolaou et al 2007;. Darvishi et al 2009;. Dominguezet al. 2010; Ramani dkk. 2010) menyajikan penting dalambaik ekologis dan ekonomis sudut pandang.

Dalam fermentasi lemak dilakukan, bebas asam lemak yang dibebaskan setelah lipase-dikatalisis hidrolisis dari triacylglycerols akan dimasukkan di dalam sel mikroba atau miselia jamur dan baik akan dissimilated untuk pertumbuhan

kebutuhan atau menjadi substrat untuk biotransformations intraseluler (Koritala et al 1987;. Lee et al 1993;. Aggelis et al 1995, 1997;. Aggelis dan Sourdis 1997; Papanikolaou et al 2001, 2002a;. Papanikolaou dan Aggelis 2003a, b). itu

spesifisitas asam lemak mikroba telah dipelajari secara mendalamdalam ragi Y. Ascomycetous lipolytica (Bati et al 1984.;Aggelis dkk. 1997; Papanikolaou dkk. 2001, 2002a; Papanikolaou dan Aggelis 2003b, 2010),

tapi sejenispenelitian, secara umum, lebih terbatas untuk lainnya jamur tinggi atau lebih rendah

berserabut (Koritala et al 1987;. Aggeliset al. 1995). Dalam kasus ragi lipolytica Y., pada lemakasam C12: 0, C14: 0, D9 C18: 1 dan D9, 12C18: 2 disajikan tingkat penggabungan yang sangat tinggi dibandingkan dengan 16:00dan 18:00, terlepas dari konsentrasi awal dari semuaasam lemak ke dalam lemak substrat digunakan (Papanikolaou dkk.2001; Papanikolaou dan Aggelis 2003b, 2010). secara khususdiskriminasi yang signifikan terhadap C18: 0 diamati(Papanikolaou dan Aggelis 2003b, 2010). Similar diskriminasi terhadap C18: 0 juga telah

diamati di lainCandida (Y.) lipolytica atau Apiotrichum ragi curvatumstrain (Lee et al 1993;.. Aggelis et al 1997). Sebaliknya,Temuan penelitian ini menunjukkan diskriminasi yangterhadap C18: 0, Aspergillus strain-strain tampaknya tergantung

sedangkan semua strain hadir afinitas yang lebih tinggi untuk asam lemak D9, 12 C18: 2 dan C16: 0 (Tabel 3).

Sejauh komposisi lipid perolehan prihatin, dalam penelitian ini, hasil samar-samar telah dicapai. Misalnya, dalam beberapa kasus, lipid seluler lebih

tak jenuh dan lebih kaya dalam asam lemak D9 C18: 1 darilemak substrat awal diperoleh. Dalam kasus lain, substratlebih banyak lemak jenuh yang diamati, sedangkan yang layak disebutadalah kehadiran asam lemak C20: 0 di selularlipid. Koritala dkk. (1987) ketika melakukan budaya

A. ャ Bvus NRRL 1957 tentang minyak kacang kedelai mentah telah menunjukkan bahwa

strain yang disebutkan di atas sepenuhnya dihidrolisis lemak bekerja dan akumulasi lipid kurang kaya

asam lemak tak jenuh (Speci ャ ... sekutu D9, 12 C18: 2) dibandingkan

dengan substrat. Akumulasi lipid lebih kaya akan asam lemak jenuh dibandingkan dengan lemak substrat awal (lihat kasus Aspergillus sp. ATHUM 3482 dan A. niger

LFMB 2 窭 Tabel 4) menunjukkan bahwa mikro-organisme

potensial dapat digunakan untuk sintesis yang dibuat khususlipid dengan kesamaan komposisi dengan mentega kakao.Pendekatan seperti ini telah dilakukan denganbantuan ragi Y. nonkonvensional lipolytica dibudidayakanpada biaya rendah lemak industri, tetapi dalam tersebut di ataskasus, masalah untuk menghadapi adalah bahwa ragi ini bisatidak mengakumulasi jumlah yang tinggi dari asam lemak D9 C18: 1,karena ini asam lemak dengan cepat dimasukkan dalamsel-sel mikroba dan sama-sama cepat itu dissimilated untukpertumbuhan kebutuhan (Papanikolaou et al 2001;. Papanikolaoudan Aggelis 2003a, b) sehingga terlepas dari lemak

campuran digunakan sebagai substrat, ragi ャ] sekutu diproduksi

lipid (sedikit atau sangat) lebih jenuh dibandingkandengan mentega kakao (Papanikolaou dan Aggelis 2003b,2010). Sebaliknya, pemanfaatan saat ini digunakan

kapang (Speci ャ ... sekutu strain Aspergillus sp. ATHUM

3482 dan A. niger LFMB 2) tidak bertentangan samamasalah karena telah jelas menunjukkan bahwa dalamsemua SCO contoh dalam jumlah besar dan dalam (relatif)tinggi D9 C18: konsentrasi 1 adalah akumulasi (Tabel 1 dan4), dengan demikian, pemanfaatan simultan D9 murahC18: 1 dan C18: 0 donor (misalnya limbah memasak minyak zaitun bersama-samadengan lemak) dalam campuran yang benar harus menghasilkan sintesis pengganti mentega

kakao intraseluler dengan yang disebutkan di atas jamur lebih tinggi. Di bawah optik serupa, adalah

juga menarik untuk menunjukkan bahwa dalam setidaknya satu kasus di

sastra, goyang-ャ BSK budidaya A. nidulans regangan

Ri-1,473 pada sukrosa media berbasis (karena itu de novo lemakasam jalur biosintesis dipekerjakan) mengakibatkanakumulasi jumlah tinggi lemak di dalam jamur

miselia (sekitar 50%, w 窍 ж), dengan lemak selular yang terdiri

asam lemak jenuh terutama (misalnya C8: 0, C10: 0,C12: 0, C16: 0) dan penyajian, dengan demikian, kesamaan komposisi dengan lipid yang

dihasilkan oleh berbagai tanaman tropis (yaitu Meduca latifolia, kakao) (Azeem et al, 1999)..

Studi saat ini telah menunjukkan bahwa penambahandari bahan lemak ke dalam media kultur dapatmerangsang akumulasi lipid seluler oleh Aspergillus sp. dan Penicillium expansum strain

(Lmax = 7Æ7gl) 1, YL / X = 0Æ64 gg) 1). Pemanfaatan bahan lemak berbagai (misalnya minyak zaitun, kacang kedelai minyak, malam Primerose minyak) sebagai

karbon substrat (atau kosubstrat) di berbagai mikroorganisme lainnya (misalnya Mucor spp, Emericella nidulans., Thamnidium elegans, Langermania gigantea) sama-sama meningkatkan proses akumulasi SCO di dalam miselia ini

mikro-organisme (Aggelis dan Sourdis 1997; Aggelis dkk.1997; C ertik dkk. 1997; Roux-Van der Merwe dkk. 2005;Szcze ˛ SNA-Antczak dkk. 2006). Seperti telah dinyatakan,pemanfaatan lemak sebagai substrat atau kosubstrat terutamaberfungsi sehingga dapat meningkatkan dan memperbaiki bahan lemakdigunakan dengan memodifikasi itu (Aggelis dan Sourdis 1997; C ertiket al. 1997; Roux-Van der Merwe dkk. 2005; Szcze ˛ SNA Antczak dkk. 2006). Di sisi lain,

valourization bioteknologi bahan lemak melalui produksilipid kaya biomassa, yang selanjutnya dapat digunakan sebagai makananatau suplemen pakan, sama bunga (Bati et al 1984.;Aggelis dkk. 1997; Papanikolaou dkk. 2007). Beberapa karakteristik hasil dari Aspergillus

sp. dan Penicillium sp.jamur memproduksi lipid melalui jalur novo de atau'Lebih tinggi' (termasuk ragi) dan 'rendah' jamur memproduksilipid ketika bahan lemak yang ditemukan sebagai substrat tunggal (ataucosubstrates) ke dalam medium, dan perbandingan merekadengan penelitian ini digambarkan dalam Tabel 5. Hasilmelaporkan tentang kapasitas jamur yang lebih tinggi darimarga Aspergillus dan Penicillium untuk menghasilkan lipid darigula atau senyawa sama dimetabolisme agaksamar-samar (Tabel 5). Selain itu, kerja dengan bahan lemak (co) substrat (keterlibatan

terutama atau eksklusif dari jalur biosintesis mantan novo asam lemak anabolik - C ertik et al, 1997;.. Papanikolaou et al 2003),

di sebagian besar studi dilakukan secara signifikan ditingkatkanproses akumulasi lipid

Hal ini diketahui dari penelitian relatif awal bahwa perbedaan yang luar biasa ada antara de novo dan mantan novo

jalur biosintesis asam lemak anabolik, karena dikemudian kasus, akumulasi lipid yang sempurna ditambah denganbiosintesis lipid bebas bahan yang independendari penipisan nitrogen dari medium pertumbuhan(Papanikolaou dan Aggelis 2009, 2010). Memperolehhasil (Gambar 1a) bertepatan sempurna dengan literatur.Namun, dalam kasus akumulasi lipid ex novoproses, lipid konsumsi selular (omset) adalah cukupumum, karena selama periode penyimpanan lipid penyerapan, kondisi masih umumnya baik

untuk pertumbuhan sel (Aggeliset al. 1995; Aggelis dan Sourdis 1997; Papanikolaouet al. 2002a; Papanikolaou dan Aggelis 2003a). Selulerdegradasi lipid tampaknya dilakukan karenapenurunan tingkat penyerapan lemak substrat ekstraseluler padalangkah-langkah fermentasi akhir (Aggelis dan Sourdis 1997;Papanikolaou dkk. 2001), dengan demikian, strategi makan-batch dimana minyak zaitun limbah akan ditambahkan ketika konsentrasi substrat lemak rendah pada

dasarnya dapatberpotensi digunakan untuk menghindari degradasi lipid seluler danmemaksimalkan produksi SCO. Di sisi lain,omset lipid seluler harus dilakukan melaluijalur pintas glioksilat, karena aktivitas enzim memotong glioksilat (lyase asetil-karnitin

transferase dan isocitrate) meningkat jauh dalam sel yang tumbuh disubstrat yang menyebabkan pembentukan C2 unit (yaitu triacylglycerols) (Papanikolaou dkk

2002a, 2004;.. Fakas et al 2007;Kamzolova dkk. 2008). Omset lipid penyimpanan adalahdisertai dengan sintesis baru lipid bebas bahan,menunjukkan bahwa lipid akumulasi menjabat sebagai prekursor untukbiosintesis bahan selular. Hasil konversilipid bebas bahan diproduksi per dikonsumsi lipid penyimpanan (YXf / L) c. 1Æ0gg) 1, Yang hampir setaranilai dibandingkan dengan hasil yang dicapai oleh Mortierellaisabellina (Papanikolaou et al. 2004). Lebih rendah YXf / L nilai-nilai(C. 0Æ7gg) 1) telah dicapai oleh Y. lipolytica (Papanikolaou dan Aggelis 2003a) dan Mucor

circinelloides

(Aggelis dan Sourdis 1997) tumbuh pada bahan hidrofobik berbagai digunakan sebagai substrat, atau dengan Cunningamella

echinulata (Fakas et al. 2008) yang tumbuh di limbah tomathidrolisat dilengkapi dengan glukosa, sedangkan hasil teoritis maksimum konversi

triasilgliserol menjadilemak bebas biomassa lebih tinggi dari hasil yang dicapai dalamstudi saat ini (= 1Æ7gg) 1- Fakas dkk. 2007).

Dalam penyelidikan saat ini, meskipun fakta budaya dilakukan di media karbon terbatas (lihat Bahan dan Metode), pertumbuhan jamur Aspergillus adalah

disertai dengan biosintesis dan akumulasi oksalatasam ke dalam medium. Ini adalah asam organik tunggal diproduksi untuk uji coba dengan

Aspergillus, dan kuantitas yang lebih tinggi dicapai adalah 5Æ0gl) 1oleh jenis Aspergillus sp.ATHUM 3482. Hal ini menarik sebagai hasilnya, karena oksalatasam, serta asam organik lainnya menengah, disintesis sebagai metabolit sekunder setelah

nitrogenhabis dari media (Rymowicz dan Lenart 2003;Musial dkk. 2006). Hal ini juga mencatat bahwa A. niger strainLFMB 1 dan NRRL 364 telah terungkap mampumemproduksi dalam jumlah yang luar biasa asam oksalat (sampai21Æ5gl) 1) dari media yang terdiri dari baku, limbah gliserolhabis selama produksi biodiesel (et Andre al.2010), sedangkan mutan A. niger (strain XP) diproduksioksalat asam dalam konsentrasi berkisar 34-49 gl) 1ketika dibudidayakan dalam uji bioreaktor batch pada media yang mengandung 30 gl) 1postrefining dari asam lemak (et al.2006 Musial). Bahkan jumlah yang lebih tinggi (misalnya

64-66 gl) 1) telah beenachieved oleh strain mutan yang sama selama budaya betspada minyak rapeseed mentah (Rymowicz dan Lenart 2003). Namun, seperti yang

dinyatakan sebelumnya, semua yang disebutkan di atas karyadilakukan dalam nitrogen terbatas media.Kesimpulannya, limbah minyak goreng zaitun adalah memadaisubstrat untuk pertumbuhan jamur milik genusAspergillus dan ke expansum spesies Penicillium.Jumlah yang luar biasa dari lipid kaya biomassa diproduksi, sementara non-diabaikan lipase

ekstraselular jumlahyang terdeteksi. Asam lemak intraselular yang terutamaterdiri dari asam lemak D9C18: 1, karena itu, biomassadihasilkan dapat digunakan sebagai makanan yang sangat baik atau pakan

nutrisi suplemen. Meskipun A. niger strain tidakdianggap sebagai tipikal 'food grade' mikro-organisme, merekatelah secara ekstensif dipelajari sebagai 'mikro-organisme alat'untuk berbagai aplikasi di bidang bioteknologi baik putih dan hijau, sedang, secara umum,

dianggap sebagai produksi yang amanmikro-organisme, karena hanya 3-10% dari straindiperiksa untuk ochratoxin. Produksi telah diuji sebagaipositif, dan ini adalah di bawah kondisi lingkungan yang menguntungkan (Schuster et al.

2002). Tentu saja, saat inipenyelidikan menunjukkan bahwa selain (mikroorganisme digunakan, khas lain jamur 'food

grade' misalnya Aspergillusoryzae, Penicillium roquefortii) dapat digunakan untuk tujuan ini. Studi saat ini, oleh karena

itu, dapat digunakan sebagaicontoh cara alternatif biovalourization dari lemakresidu, dengan menggunakan mereka sebagai substrat oleh spesies jamur, untukmenghasilkan nilai tambah senyawa metabolik.