Respon imun humoral di Chromoblastomycosis selama dan

setelah Terapi

P. Esterre,

1, 2 * M. Jahevitra,

1 dan A. Andriantsimahavandy

1

Parasitologi Unit, Institut Pasteur de Madagaskar, Antananarivo 101, Madagaskar, 1 dan

Internasional Jaringan Lembaga Pasteur, Institut Pasteur, F-75724 Paris cédex 15, Perancis 2

* Korespondensi penulis. Present address: Imunologi Unit, Institut de Recherches Médicales

L. Malardé, PO Box 30, 98713-Papeete Tahiti, Polinesia Perancis. Telepon: 689 41 64 64.

Fax: 689 43 15 90. E-mail: esterre@malarde.pf .

Diterima November 1, 1999; Revisi diminta 24 Jan 2000; Diterima 13 Mar 2000.

Artikel ini telah dikutip oleh artikel lain di PMC.

ABSTRAK

Sebuah studi longitudinal dilakukan di Madagaskar, fokus yang paling penting dari

chromoblastomycosis (P. Esterre, A. Andriantsimahavandy, E. Ramarcel, dan JL Pecarrere,

Am J. daerah tropis.. Med. Hyg. 55:45-47, 1996) , untuk menyelidiki kekebalan alami untuk

penyakit ini. sampel darah Sequential diperoleh sebelum, selama, dan pada akhir percobaan

terapeutik sukses dengan terbinafine, obat anti jamur baru. Menggunakan immunosorbent

assay enzim-linked dan metode imunoblot, analisis rinci konsentrasi antigen antibodi dan

pemetaan dilakukan untuk 136 sampel serum dan tentatif berhubungan dengan data

epidemiologis dan pathobiological. Dua antigen sitoplasma yang berbeda, sesuai dengan dua

spesies jamur yang terlibat (Fonsecaea pedrosoi dan Cladophialophora carrionii), digunakan

untuk menganalisis distribusi berbagai kelas imunoglobulin. Hal ini dilakukan sehubungan

dengan asal isolat, klinis dan pathobiological. Meskipun variasi individu yang kuat yang

melihat, beberapa antigen utama (salah satu dari 18,5 kDa khusus untuk pedrosoi F. dan dua

sebesar 23,5 dan 33 kDa, masing-masing, khusus untuk C. carrionii) berhubungan dengan

prevalensi antibodi tinggi dan konsentrasi. Seperti beberapa komponen antigen juga

terdeteksi oleh imunoglobulin M (IgM) dan antibodi IgA, peran bahwa antibodi spesifik bisa

bermain dalam respon imun dibahas.

Jamur berpigmen milik keluarga Dematiaceae dianggap sebagai kelompok yang muncul

jamur patogen, setidaknya di negara-negara kebarat-baratan ( 22 ). Ini masalah kesehatan

semakin meningkat juga terkait dengan epidemi AIDS ( 8 ), dan kasus chromoblastomycosis

disebarluaskan berkembang pada pasien AIDS baru-baru ini diterbitkan ( 9 ).

Chromoblastomycosis adalah mikosis kronis kosmopolitan menginfeksi manusia setelah

inokulasi oleh trauma. Dengan tidak adanya intervensi medis yang segera, khas seperti lesi-

kembang kol verrucous berkembang, kadang-kadang selama lebih dari 30 tahun, dan

menunjukkan reaksi granulomatosa terorganisir sangat terkait dengan fibrosis luas dalam

dermis dan jaringan subkutan ( 11 , 12 ). Penyakit ini memiliki morbiditas tinggi, dengan

Madagaskar digambarkan sebagai fokus yang paling penting di dunia ( 12 ). obat-obatan yang

tersedia adalah sangat tidak efektif, kecuali untuk obat terbinafine baru yang baru saja diuji

dalam percobaan terapi multicentric (didukung oleh Novartis Perancis dan Institut Pasteur de

Madagaskar) di dua wilayah endemisitas di Madagaskar ( 13 , 15 ).

Pada kesempatan itu, kami dipantau kohort 40 pasien selama 1 tahun terapi dan memeriksa

kekhususan mereka respon humoral kekebalan tubuh dengan immunosorbent assay enzim-

linked (ELISA) dan imunoblotting (bercak Barat). Teknik ini sangat berguna bagi studi

respon host serologis selama chromoblastomycosis, tetapi tidak ada antigen dengan nilai

diagnostik potensi yang pernah dipilih. Dalam studi longitudinal ini kita memeriksa

kekhususan dari respon kekebalan manusia humoral dengan dua spesies jamur utama. Untuk

tujuan ini, immunoblots dari Fonsecaea pedrosoi dan carrionii Cladophialophora strain

dianalisis dengan sampel serum dari chromoblastomycosis-dan lain-pasien terinfeksi atau

parasitologi penyakit infeksi jamur yang telah terbukti di laboratorium dengan, antara lain,

ELISA seropositif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tingkat antibodi menurun selama

kemoterapi spesifik dengan komponen-kDa 18,5 dibatasi F. pedrosoi terinfeksi sera dan-dan

33-kDa komponen 23,5 dibatasi C. carrionii terinfeksi sera. Anehnya, hasil ini menunjukkan,

untuk pertama kalinya, imunoglobulin M (IgM) dan antibodi IgA dalam respon imun

humoral terhadap penyakit ini.

BAHAN DAN METODE

Daerah penelitian dan pasien.

Sejumlah 40 pasien (34 pria dan 8 perempuan; usia rata-rata ± standar deviasi [SD], 48,8 ±

15,3 tahun) menyajikan lesi kronis (rata-rata waktu evolusi lesi, 10 tahun dan 3 bulan) dari

dua daerah endemisitas chromoblastomycosis ( 12 ) yang dipelajari selama terapi percobaan

multicenter ( 13 ). Tiga puluh lima pasien terinfeksi F. pedrosoi dan diikuti selama 1 tahun

terapi khusus di rumah sakit dari Andapa terletak di hujan itu, bagian utara Madagaskar.

Lima pasien yang terinfeksi dengan C. carrionii dan terdaftar dalam studi desain yang sama

diselenggarakan di rumah sakit Manambaro, terletak di wilayah selatan semidesertic

Madagaskar. Untuk setiap pasien, kedua immunoassays dilakukan pada serum sebelum (t 0),

selama (di 4 [t 4] dan 8 [t 8] bulan), dan pada akhir (t 12) dari kemoterapi dengan terbinafine.

Korelasi potensi hasil imunologi (tingkat Igs spesifik dan IgG, IgM, dan profil imunoblot

IgA) dengan data clinicopathological berbeda yang dikumpulkan selama percobaan

terapeutik ( 15 ) telah dipelajari dengan kelompok pertama dari 136 sampel serum.

Selain itu, serum sampel dari 24 kontrol sehat (20 pria dan 4 wanita, rata-rata usia ± SD, 41,7

± 13,8 tahun; P = 0,4 untuk kontrol versus pasien) dan 13 pasien yang terinfeksi dengan

penyakit endemis ke daerah tersebut (satu untuk masing-masing penyakit berikut: kandidiasis

disebabkan oleh Candida albicans, Aspergillus fumigatus terkait aspergillosis, Trichophyton

rubrum infeksi, mycetoma jamur, malaria, schistosomiasis mansoni dan heamatobium,

Wuchereria terkait limfatik filariasis-bancrofti, distomatosis, ascaridiasis, sistiserkosis,

Trichuris infeksi, hydatidosis, dan taeniasis) dimasukkan dalam analisis. Semua sampel

serum telah disimpan beku (-80 ° C) dan diamati di bawah kondisi laboratorium seragam

untuk menghindari variasi internal.

Jamur budaya dan antigen.

Dua referensi strain, salah satu dari F. pedrosoi (PHT-A8) dan satu C. carrionii (PHT-M8),

diperoleh dari biopsi kulit dari dua pasien yang terdaftar dalam percobaan terapeutik. Mereka

dibudidayakan dalam 500 ml media cair Sabouraud's, mekanis gelisah (300 rpm selama 10

sampai 15 hari) dalam sistem kultur sel roller-type (Bellco New Technology, Ltd, Vineland,

NJ). kurva pertumbuhan Khas dari dua jamur diperoleh, dan antigen disusun dari fase log ( 1

, 19 ). Kami memperoleh dua antigen somatik setelah ekstraksi formalin 0,5%, disintegrasi

dengan Homogenizer Polytron (Kinematica, Ltd, Kriens, Swiss), dan sonikasi (20 kHz)

dengan alat Vibracell (Sonics & Materials Inc, Danbury, Conn). Ekstrak antigen akhirnya

lyophilized (di-ml Botol 3) dan isi protein ditentukan oleh teknik Bradford (Bio-Rad,

Richmond, Va) sebelum dan sesudah langkah terakhir ( 4 ).

Teknik ELISA.

Teknik ELISA dilakukan sebagaimana telah dijelaskan sebelumnya ( 1 , 26 ), dengan hanya

sedikit modifikasi untuk mendapatkan kondisi yang optimal dengan antigen jamur: piring

yang dilapisi dengan antigen (konsentrasi, 1,0 mg / ml) dan diinkubasi selama 1 jam;

pengenceran serum adalah 1 / 200; konjugat itu peroksidase-label anti-manusia Ig (Sanofi

Diagnostik-Pasteur, Marnes-la-wanita yang genit, Perancis) pada 1 / 8, 000 pengenceran, dan

pengukuran densitas optik pada 492 nm dilakukan dengan spektrofotometer UV (Multiskan

Plus; Labsystems, Helsinki, Finlandia) didorong oleh sebuah komputer (Prolinea 486;

Compaq Ltd, Houston, Tex). Setiap uji direferensikan oleh termasuk sampel referensi positif

yang diperoleh dari lima dikumpulkan sampel serum positif, dan hasilnya disajikan dalam

immunoenzymatic unit didefinisikan secara sewenang-wenang (IEU), sebagaimana telah

dijelaskan sebelumnya ( 14 , 26 ). Sera digolongkan sebagai positif ketika hasil uji lebih besar

dari 25 IEU, menurut parameter normal yang ditetapkan oleh menyelidiki sampel serum dari

24 orang sehat dari Antananarivo, di mana, karena lingkungan perkotaan,

chromoblastomycosis tidak ada. Reprodusibilitas data dipantau oleh termasuk pada masing-

masing satu piring ELISA positif dan satu sampel serum negatif.

Immunoblotting.

Teknik imunoblotting ( 26 ) diadaptasi untuk mempelajari respon humoral di

chromoblastomycosis ( 14 ). Kondisi optimal untuk antigen jamur adalah sebagai berikut:

dodesil natrium sulfat-gel polyacrylamide elektroforesis dengan gel akrilamida 10 hingga

15% dilakukan selama 4 jam pada tingkat konstan 35 mA dalam sistem buffer diskontinyu.

protein transfer aktif terjadi dengan 36-pengobatan V semalam pada suhu 4 ° C, dengan

aparat Power Transphor (Hoefer Ilmiah Instrumen, San Francisco, California). Inkubasi

kertas nitroselulose dilakukan dengan sera (cairan, 1 / 100) sebelum penambahan alkali

fosfatase berlabel anti-manusia IgG (Protoblot sistem AP II; Promega, Ltd, Madison, Wis),

IgM (Biosys, Compiègne, Perancis), atau IgA (Sigma, St Louis, Mo), diinkubasi selama 60

menit pada 1 / 6, 000, 1 / 1, 600 dan 1 / 2, 500 pengenceran, masing-masing. Kedua

elektroforesis antigen-bernoda dan lembaran nitroselulosa imunoblot difoto sambil basah

untuk catatan laboratorium referensi. Secara paralel, ambang profil imunoblot telah

densitometrically ditentukan menggunakan scanner video (Scanjet IICX / T; Hewlett

Packard, Boise, Idaho) dan perangkat lunak khusus (Deskcan 2.0; Hewlett Packard)

berdasarkan komputer EL Bravo (AST Research Inc, Irvine , California). Elektronik

perekaman data memungkinkan kita untuk mengatur buta interpretasi hasil imunoblot oleh

tiga penyidik. Setelah definisi yang tepat dari band diagnosis, frekuensi pengakuan band dan

pola dihitung. Sampel yang menunjukkan satu atau lebih dari diagnosis band dianggap

positif. Komponen antigenik diakui oleh lebih dari 50% dari sera ini diidentifikasi sebagai

band imunodominan.

Analisis statistik.

Perbandingan antara dan kontrol ELISA data pasien dilakukan dengan Student's t test dan uji

F Snedecor's tersebut. Perbandingan nilai yang diperoleh dengan sampel yang sama pada

waktu yang berbeda dilakukan dengan uji t perbedaan dan uji Wilcoxon nonparametrik untuk

seri cocok. Semua nilai P kurang dari 0,05 dinilai menunjukkan signifikansi statistik.

HASIL

Kami memperoleh dua ekstrak antigen, salah satu dari F. pedrosoi (PHT-A8 antigen, hasil,

21-66 mg / ml) dan satu lainnya C. carrionii (PHT-M8 antigen, hasil, 19-35 mg / ml).

kekhususan ini pertama kali diuji pada 19 sampel serum sejarah dipelajari oleh ELISA,

dengan reproduktibilitas baik (86%) dalam kelompok ini sampel terbatas ( 1 ). Hasil yang

disajikan di sini adalah hasil yang diperoleh dengan koleksi lebih dari 136 sampel serum,

dikumpulkan setiap 4 bulan dari 42 pasien yang dipantau selama 1 tahun setelah menerima

kemoterapi antijamur spesifik ( 13 , 15 ), dan dibandingkan dengan hasil yang diperoleh

dengan sampel serum dari 24 sehat Malagasi orang.

Teknik ELISA ini pertama kali dikembangkan untuk tujuan diagnosa. Menggunakan atau

histopatologi pemeriksaan mikologi sebagai tes acuan untuk diagnosis, kami menghitung

sensitivitas 86,9%, spesifisitas 92,5%, dan efisiensi global 89,1% ( 14 ), hasil yang lebih baik

daripada yang diperoleh baru-baru ini dengan difusi ganda ( 25 ) dan

counterimmunoelectrophoresis ( 29 ). Sangat menarik untuk dicatat bahwa hasil terbaik

diperoleh dengan F. pedrosoi antigen dalam semua percobaan kombinasi (Gambar (Gambar

1). 1 ).

Gambar. 1 Reaktivitas sera dari pasien dengan F. pedrosoi terkait chromoblastomycosis

(n = 35) diuji dengan homolog (A8 antigen) dan heterolog (M8 antigen)

kondisi (A dan B, masing-masing) dan dari C. carrionii terinfeksi pasien (n =

5) diuji dengan (more ...)

Konsentrasi Igs spesifik dalam serum diukur sebelum perlakuan (konsentrasi pada t 0 ± SD,

72,9 ± 46,8 IEU), setelah 4 bulan (konsentrasi pada t 4 ± SD, 66,1 ± 44,4 IEU) dan 8 bulan

(konsentrasi pada saat t 8 ± SD , 59.4 ± 43,5 IEU), dan pada akhir (konsentrasi pada t 12 ± SD,

59.3.1 ± 40,7 IEU) dari percobaan (Gambar (Gbr.2) 2. ). Tingkat Ig menurun secara bertahap

selama 8 bulan pertama dari terapi dan kemudian tetap stabil sampai penyelesaian tindak

lanjut. Sangat menarik untuk mengkonfirmasi bahwa diagnosis masih dapat dilakukan

dengan ELISA pada akhir terapi: bahkan pada t 12, tingkat Igs spesifik mudah dibedakan (t =

6,22, P <0,0001) dari yang ditemukan dalam kontrol normal. Para pasien dengan bentuk yang

paling parah penyakit, dengan beberapa (setidaknya tiga) lesi, disajikan titer lebih tinggi Igs

tertentu dibandingkan dengan pasien dengan lesi lokal (99,6 ± 56,3 55,7 ± IEU versus 32,2

IEU; P = 0,015). Perlu dicatat bahwa sembilan pasien dengan serologi negatif dengan ELISA

umumnya disajikan bentuk lokal (67% hanya memiliki satu lesi), kadang-kadang rumit oleh

karsinoma sel skuamosa (22%), yang cenderung muncul baru-baru ini, meskipun perbedaan

waktu secara statistik tidak signifikan (durasi rata-rata ± lesi SD, 7,8 ± 5,8 tahun,

dibandingkan 10,2 ± 7,6 tahun di seluruh sampel; P = 0,4). Tidak ada korelasi dapat

ditemukan antara tingkat Ig dan parasitisme skor jaringan atau (sirkulasi fibrosis penanda

tingkat 23 ).

Gambar. 2 Perbandingan reaktivitas antibodi global dengan F. A8 pedrosoi antigen,

dalam sera dari 35 F. Pasien terinfeksi pedrosoi dimonitor selama 1 tahun

terapi tertentu. Garis tebal menunjukkan nilai median IEU sebelum

pengobatan (t 0) dan setelah 4 (t 4), 8 (t 8), dan (more ...)

Dengan Barat imunoblotting, tidak ada band terungkap dengan sera nonimmune tetapi

beberapa-lintas reaktivitas jelas diidentifikasi dengan mycoses lain atau parasitoses,

mengarah ke cut definisi yang jelas tentang band diagnosis (Gambar (Gbr.3) 3. ). Pola

antibodi IgG menunjukkan bahwa F. Pasien terinfeksi pedrosoi mengakui jangkauan yang

lebih luas dari molekul antigen dari C. carrionii terinfeksi kelompok, yang sejajar dengan

nilai-nilai hasil ELISA masing-masing. Pada tanggal 14 F. pedrosoi-spesifik (dari 18 - to 58-

kDa) antigen, hanya ada satu band imunodominan sebesar 18,5 kDa (Gambar (Gbr.3, 3 , jalur

1 sampai 5) 23,5. Pada tanggal 10 C. carrionii-spesifik (dari - untuk 94-kDa) antigen

diidentifikasi, dua (sesuai dengan-dan 33-kDa band 23,5) adalah imunodominan (Gambar

(Gbr.3, 3 , jalur 6 sampai 8). Selain itu, tiga antigen (sesuai dengan 26 -, 36 -, dan 40-kDa

band) yang umum untuk dua spesies Gbr. paralel. percobaan menegaskan bahwa sebagian

besar IgG respon sebenarnya IgG1 (A. Andriantsimahavandy tidak dipublikasikan, hasil ()

tersebut. rinci IgM dan IgA (Gbr.3, 3 , jalur 9-14) pemetaan mengungkapkan bahwa sejumlah

determinan antigen dari jamur yang aktif untuk kedua IgG dan IgM (64 - dan 68-kDa

antigen), tetapi tidak ada antigen IgM spesifik, yaitu , tidak diakui oleh antibodi IgG atau IgA

Empat determinan antigen minor adalah, tidak teratur, diakui oleh antibodi IgG dan IgA. (36

-, 44 -, 50 -, dan 53-kDa antigen), sementara tiga band (dari 47 -, 57 -, dan 84-kDa antigen)

yang jelas IgA spesifik Sangat menarik untuk dicatat bahwa beberapa komponen

immunoreactive, termasuk ban 18,5-dan 40-kDa utama, ditemukan di sera ELISA-negatif

dari pasien chromoblastomycosis..

Gambar. 3 Imunoblot F. pedrosoi dan C. carrionii polipeptida dengan

chromoblastomycosis sera yang terinfeksi. Jalur 1 sampai 5, respon IgG untuk

F. pedrosoi terinfeksi sera; jalur 6 sampai 8, respon IgG ke C. carrionii

terinfeksi sera, jalur 9 sampai 11, IgM respon terhadap F. pedrosoi (more ...)

Analisis sampel serum yang diambil dari tujuh pasien selama 1 tahun terapi khusus, dalam

suatu pengadilan yang dirancang untuk menjadi program waktu percobaan benar,

menunjukkan penurunan dalam jumlah rata-rata makromolekul aktif dari tujuh band yang

diidentifikasi pada t 0-2,5 pada t 12 .

DISKUSI

Demonstrasi sirkulasi antibodi dalam chromoblastomycosis pertama kali dibuat

menggunakan imunodifusi ganda ( 5 , 25 , 28 , 29 ) atau tidak langsung immunofluorescence

( 6 , 17 ) teknik, dengan hasil yang tidak konsisten. Baru-baru ini, profil antigen F. pedrosoi

ditandai oleh immunoprecipitation dan iodinasi protein permukaan ( 19 ). Laboratorium kami

mengembangkan ELISA, efisiensi yang untuk tujuan diagnostik dengan hati-hati dievaluasi

pada pasien referensi ( 1 , 14 ). Ketersediaan ELISA dan Western imunoblotting ( 26 )

bersama-sama dengan karakterisasi sebagian antigen jamur ( 1 , 19 ) membimbing kami

untuk melaksanakan, untuk pertama kalinya berkaitan dengan penyakit ini, sebuah studi

longitudinal pada 40 pasien, dimonitor selama 1 tahun terapi anti jamur ( 13 , 15 ).

Adapun sebagian besar patogen jamur, peran kekebalan alami dalam perlindungan tidak

pasti, dan ini terutama berlaku untuk respon antibodi ( 7 ). Selain itu, sebagian penduduk di

daerah endemisitas yang telah terkena jamur akan mengembangkan respon humoral spesifik

tetapi bukan penyakit ( 2 , 14 ). Waktu yang diperlukan untuk serologi untuk menjadi negatif

adalah variabel dalam pengalaman kami, dan beberapa pasien mungkin memiliki hasil positif

persisten lebih dari 1 tahun setelah akhir pengobatan antijamur. Karena tidak ada informasi

yang jelas pada evolusi status imunitas humoral pasien chromoblastomycosis menerima

terapi, kami dipantau 40 pasien rujukan selama percobaan terapi 1 tahun dengan terbinafine.

Dalam contoh kita dan dengan teknik ELISA kuantitatif, hal itu selalu mungkin untuk

membuat diagnosis infeksi setelah 12 bulan terapi berhasil. Menariknya, pasien dengan

bentuk yang paling parah penyakit, yaitu, beberapa lesi kronis, disajikan titer lebih tinggi Igs

tertentu.

Western blotting dengan dua lisat jamur tampaknya menjadi alat yang ampuh, karena

memungkinkan pengukuran yang tepat dari pola antibodi. Sera dari orang-orang terkena

antigen jamur chromoblastomycosis terkait menanggapi beberapa band di immunoblots,

dengan variasi intersubject luas dalam pola dan jumlah band diamati. Seperti yang telah

dilakukan untuk penyakit parasit lain (untuk gambaran global, lihat referensi 20 dan 21 ),

kami telah mendokumentasikan respon humoral spesifik heterogen terhadap antigen spesies.

Beberapa determinan antigenik (-disebut immunodominants begitu) yang sangat reaktif

dalam hal frekuensi antibodi tinggi: 18,5, 36, dan 40 kDa untuk F. pedrosoi dan 23,5, 26, 33,

dan 40 kDa untuk C. carrionii. Beberapa antigen kecil diakui oleh baik IgG dan IgM atau

IgA. Anehnya, tiga determinan antigenik, dari 47 -, 57 -, dan massa molekul 84-kDa, hanya

diakui oleh IgA spesifik. Baik dengan ELISA dan teknik imunoblot, C. Pasien terinfeksi

carrionii tampaknya responden lebih buruk daripada F. pedrosoi pasien terinfeksi.

Parameter imunologi sini disajikan (IgGs tertentu, sebagian besar dari mereka berurusan

dengan isotipe IgG1, tingkat IgA dan IgM, dan evolusi mereka selama kemoterapi)

tampaknya berkorelasi dengan heterogenitas klinis dijelaskan untuk paracoccidioidomycosis,

penyakit dua-kutub dengan-Th2 seperti Peraturan respon humoral ( 2 , 3 ). The Ig rinci

pemetaan isotipe mengungkapkan tingkat tinggi kompleksitas untuk set antigen merangsang,

termasuk tingginya tingkat antibodi IgM yang mungkin telah menjadi konsekuensi dari

rangsangan antigen konstan karena latar belakang jamur rendah degradasi terus menerus ( 11

). Penjelasan lain untuk mengikat IgM adalah bahwa banyak protein jamur sebenarnya

glikoprotein, gugus glikosidik membangkitkan respons IgM. Dengan tidak adanya

keterlibatan mukosa dalam patologi ini, IgA mungkin hanya mewakili penanda potensial

status kekebalan tubuh pasien dengan chromoblastomycosis. Bahkan jika mekanisme

kekebalan yang terlibat dalam pengendalian jamur tampaknya selular asal, di autoantibodies

setidaknya dapat dikaitkan dengan kronisitas dan luasnya lesi dalam patologi ( 16 ). Di

daerah endemisitas, bagian dari penduduk yang telah terkena jamur tidak akan

mengembangkan penyakit tapi akan memiliki tingkat signifikan beredar antibodi spesifik ( 14

). Saat ini, banyak faktor yang relevan dengan mekanisme kerentanan atau perlawanan pada

manusia masih belum diketahui. Langkah selanjutnya adalah berkorelasi informasi kami pada

imunitas humoral dan immunopathology di chromoblastomycosis dengan in vivo dari

interaksi ligan CD40-CD40 ( 18 , 27 ).

Singkatnya, teknik ELISA dan imunoblot memungkinkan analisis 136 sampel serum yang

diambil dari pasien baik belajar dengan lesi chromoblastomycosis. Sejumlah besar

determinan antigen dengan berbagai BM diamati dalam pendekatan humoral. Polimorfisme

diamati sesuai dengan dikenal luas repertoar-sumur F. pedrosoi dan C. carrionii fenotipe

yang disebabkan oleh transformasi dimorfik dari saprophytic ke fase parasit dan pertumbuhan

jamur yang terkait ( 19 ). Meskipun kekebalan alami untuk infeksi jamur pada umumnya, dan

untuk chromoblastomycosis khususnya, tidak dipahami dengan baik, diketahui tidak

memiliki efek perlindungan, sebagai penyakit memiliki pola yang sangat kronis dan

melemahkan evolusi. Data kami pastikan bahwa tingkat tinggi antibodi spesifik diidentifikasi

dalam serum pasien dan bahwa tingkat IgG berkorelasi positif, seperti halnya tingkat antibodi

antineutrophilic ( 16 ), dengan kronisitas dan luasnya lesi.

UCAPAN TERIMA KASIH

Kami berterima kasih kepada Andapa (Mahatana Ratsioharana) dan Manambaro

(Emmanuelson Randrianiaina) rumah sakit tim untuk bantuan teknis selama pengumpulan

serum dan pemeriksaan klinis.

DAFTAR PUSTAKA

1;. Andriantsimahavandy A, Michel P, Rasolofonirina H, Roux J. Apport de l'au

immunologie diagnostik de la chromoblastomycose à. Madagaskar. J Med 1993 Mycol 3 :30-

36.

2 tahun 1999. Baida H, Biselli PJ, Juvenale M, Del Negro GMB, Mendes-Giannini MJS,

Durate JS, Bernard G. Diferensial antibodi isotipe ekspresi untuk brasiliensis

Paracoccidioides utama antigen pada ikan muda dan bentuk dewasa;

paracoccidioidomycosis. 1 Mikroba Infect.: 273-278. [ PubMed ]

3.. Benard G, Hong MH, Del Negro GMB, Batista L, Shinakai-Yasuda MA, Duarte AJ

Antigen spesifik S. imunosupresi di; paracoccidioidomycosis. Am J Med Hyg 1996 daerah

tropis :7-12. 54 [ PubMed ]

4;. Bradford M M. cepat dan sensitif Sebuah metode untuk kuantisasi mikrogram jumlah

protein memanfaatkan prinsip protein-dye. Mengikat. 1976 Anal Biochem :248-254. 72 [

PubMed ]

. 5 Buckley H, Murray I. mempercepat antibodi dalam chromoblastomycosis;. 1966

Sabouraudia. :78-80. 5 [ PubMed ]

6. Coulanges P, Mayoux A, Brygoo ER, M. Rakoto Pemanfaatan de l'immunofluorescence

indirecte dans la chromoblastomycose humaine et à expérimentale Phialophora pedrosoi et

Cladosporium carrionii. préliminaire. Etude Arch Inst Pasteur Madagaskar;. 1970 39 :65-76.

. 7 Dixon DM, Cox R, Cutler J, Deepe G. peneliti menggunakan imunologi molekuler dan

teknologi untuk memerangi patogen jamur 1996. ASM; News. 62 :81-84.

8.. Dromer F, Dupont B. peningkatan Masalah infeksi jamur pada immunocompromised host

tahun 1996. J; Mycol Med 6 :1-6.

Duggan. JM, Wolf MD, Kauffmann C A. Phialophora verrucosa infeksi pada AIDS. Pasien

9 Mycoses;. 1995 :215-218. 38 [ PubMed ]

10.. Espinel-Ingroff A, Shadomy S, Dixon D, Goldson P. Exoantigen uji Cladosporium untuk

bantianum, Fonsecaea pedrosoi, Phialophora dan 1986 verrucosa. J; Clin Microbiol :305-

310. 23 [ PMC artikel gratis ] [ PubMed ]

11;. Esterre P, Peyrol S, Sainte-Marie D, Pradinaud R, Grimaud R. granulomatous reaksi dan

perbaikan jaringan di kulit dengan lesi. Chromoblastomycosis. 1993 Virchows Arch 422

:285-291.

. 12 Esterre P, Andriantsimahavandy A, Ramarcel E, Pecarrere J L. Empat puluh tahun

chromoblastomycosis di Madagaskar: review.. Am J Med 47 Hyg daerah tropis. 1996; 55 :45

[- PubMed ]

13:. Esterre P, Inzan CK, Ramarcel E, Andriantsimahavandy A, Ratsioharana M, Pecarrere

JL, Roig P. Pengobatan chromoblastomycosis dengan sebuah terbinafine terbuka pilot Br.

Studi pendahuluan J Dermatol. Hasil 1996; 134 :33-36 [. PubMed ]

14.. Esterre P, Jahevitra M, Ramarcel E, Andriantsimahavandy A. Evaluasi teknik ELISA

untuk diagnosis dan seroepidemiology tahun 1997. Chromoblastomycosis J; Mycol Med 7

:137-141.

15 chromoblastomycosis. Esterre, P., CK Inzan, M. Ratsioharana, A.

Andriantsimahavandy, C. Raharisolo, E. Randrianiaina, dan P.: Roig A. Multicenter

trial dari terbinafine pada pasien dengan efek pada kriteria klinis dan biologis. J. Dermatol.

Perlakukan:. 9 529-534.

C Galperin, Shoenfield Y, Bilburd B, Esterre P, Meroni L, Del Papa N, Halpern GM,

Andriantsimahavandy A, Gershwin M E. Anti-antibodi pada pasien sitoplasma neutrophilic

dengan chromoblastomycosis. CLIN 16 Rheumatol Exp.. 1996; 14: 479 -483. [ PubMed ]

17 MA. Gordon, Doory A. Penerapan prosedur antibodi fluorescent untuk mempelajari

dematiaceous jamur patogen, II. Serologis hubungan dari genus Fonsecaea 1965. J;

Bacteriol. 89 :551-556 [. PMC gratis artikel ] [ PubMed ]

. 18 Grewald IS, Flavell R A. peran sentral ligan CD40 dalam regulasi CD4 + T sel

tanggapan;. Immunol 1996 Today. :410-414. 17 [ PubMed ]

19.. Ibrahim-Granet O, De Bièvre C, Jendoubi M. immunochemical karakterisasi antigen

pertumbuhan dan hambatan Fonsecaea dari pedrosoi spesies tertentu dengan 1988 IgG. J;

Med Microbiol :217-222. 26 [ PubMed ]

. 20 Langley JG, Kariuki HC, Hammersley AP, Ouma JH, Butterworth AE, Dunne D W.

Manusia tanggapan subclass IgG dan subclass pembatasan untuk antigen telur Schistosoma

mansoni;. 1994 Immunology. :651-658. 83 [ PMC gratis artikel ] [ PubMed ]

21 tahun 1993. Maizels RM, Bundy DAP, Selkirk ME, Smith DF, Anderson R M. imunologi

modulasi dan penghindaran cacing oleh parasit manusia dalam. Populasi;. Sifat :797-805. 365

[ PubMed ]

22.. Matsumoto T, Matsuda T. Chromoblastomycosis dan 1985 phaeohyphomycosis.; Semin

Dermatol 4 :240-251.

23.. Ricard-Blum S, Hartmann D, Esterre P. Pemantauan matriks ekstraseluler metabolisme

dan cross-linking dalam jaringan, serum dan urin pasien dengan chromoblastomycosis, kulit

kronis tahun 1998 fibrosis. Eur J; Clin Investig 28 :748-754 [. PubMed ]

24.. Rolland-Burger L, Rolland X, Grieve CW, Monjour L. imunoblot analisis respon

kekebalan humoral donovani infantum Leishmania untuk polipeptida mendalam manusia

pada tahun 1991 leishmaniasis. J; Clin Microbiol :1429-1435. 29 [ PMC artikel gratis ] [

PubMed ]

25.. Romero H, Guedez E, Magaldi S. Evaluasi immunoprecipitation teknik pada tahun 1996

chromoblastomycosis. J; Mycol Med 6 :83-87.

26.. Simac C, Michel P, Andriantsimahavandy A, Esterre P, Michault A. Penggunaan ELISA

dan EITB untuk diagnosis dan pemantauan Tahun 1995 neurocysticercosis.; Parasitol Res

:132-136. 81 [ PubMed ]

. 27 Stout RD, Suttles J. banyak peran CD40 di dimediasi inflamasi tanggapan-sel;. Immunol

1996 Today. :487-492. 17 [ PubMed ]

28.. Villalba E, Yegres J F. Deteksi antibodi yang beredar pada pasien dipengaruhi oleh

chromoblastomycosis Cladosporium dengan carrionii ganda menggunakan 1988

imunodifusi;. Mycopathology 102 :17-19.

29. Villalba E. Deteksi antibodi dalam sera penderita dengan chromoblastomycosis oleh

counterimmunoelectrophoresis. Hasil awal;. J Vet Med 1988 Mycol. :73-74. 26 [ PubMed ]