PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI...

14
PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN (Rhizophora apiculata) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1 Disusun oleh : SUCI DWI RAHAYU 1201070040 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017

Transcript of PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI...

Page 1: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

i

PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN

(Rhizophora apiculata) DALAM MENGHAMBAT

PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila

SECARA IN-VITRO

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Disusun oleh :

SUCI DWI RAHAYU

1201070040

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

Page 2: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

ii

ii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 3: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

iii

iii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 4: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

iv

iv

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 5: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

v

HALAMAN MOTO

“Didiklah anak-anak kamu, sesungguhnya mereka diciptakan untuk menghadapi

zaman yang berbeda dengan zaman kamu ini”

(H.R. Bukhari)

“Janganlah membanggakan dan menyombongkan diri apa-apa yang kita peroleh,

turut dan ikutilah ilmu padi makin berisi makin tunduk dan makin bersyukur

kepada yang menciptakan kita Allah SWT.”

v

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 6: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

vi

HALAMAN PERSEMBAHAN

Dengan puja dan puji syukur kepada Allah SWT. atas segala rahmat-Nya

penulis mempersembahkan karya ini untuk:

1. Ibu dan bapak tersayang (Ibu Rukoyah dan Bapak Bunasir) atas segala

dukungan moril dan materil serta kasih sayang yang tiada henti kepada

penulis, doa yang tiada henti, dan nasehat yang selalu diberikan kepada

penulis untuk menjadi lebih baik.

2. Seluruh keluarga yang selalu memberikan doa dan dukungan.

vi

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 7: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

vii

PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN (Rhizophora

apiculata) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI

Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO

ABSTRAK

Penelitian yang bertujuan untuk mengetahui bagaimana pengaruh ekstrak

tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) dalam menghambat pertumbuhan

bakteri Aeromonas hydrophila secara in-vitro telah dilaksanakan pada bulan

Februari – September 2016 di Laboratorium Biologi Farmasi dan Laboratorium

Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Pembuatan ekstrak daun

dan batang tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) menggunakan pelarut polar

(metanol) dan non-polar (n-heksan) dilakukan dengan metode maserasi.

Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola

Faktorial dengan 3 faktor yaitu organ tumbuhan mangrove (daun dan batang),

strain bakteri A. hydrophila (GPl-04,GL-01,GL-02,GJ-01, GK-01 dan GB-01) dan

konsentrasi ekstrak mangrove (0%,10%,20% dan 30%). Metode yang digunakan

yaitu metode eksperimen dengan 56 kali perlakuan dan 3 kali ulangan. Parameter

yang diamati yaitu diameter zona hambat. Analisis data menggunakan Analisis

Non-Parametrik pada taraf kepercayaan 95% berdasarkan perhitungan diameter

zona hambat. Hasil analisis menunjukkan ekstrak metanol daun tumbuhan bakau

kacangan (R. apiculata) yang memiliki pengaruh terbaik yaitu konsentrasi 20%

dan konsentrasi 30% terhadap strain bakteri GJ-01 sebesar 2,87 mm dan ekstrak

metanol batang tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) yang memiliki pengaruh

terbaik yaitu konsentrasi 30% terhadap strain bakteri GL-02 yaitu sebesar 2,1 mm.

Ekstrak n-heksan daun tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) yang memiliki

pengaruh terbaik yaitu pada konsentrasi 10% terhadap strain bakteri GL-01

sebesar 2 mm. Ekstrak n-heksan batang tumbuhan bakau kacangan (R.

apiculata)yang memiliki pengaruh terbaik yaitu pada konsentrasi 30% terhadap

strain bakteri GL-01 yaitu sebesar 1,23 mm.

Kata kunci: A. hydrophila, maserasi, Rhizophora apiculata, zona hambat

vii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 8: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

viii

UCAPAN TERIMAKASIH

Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas Rahmat dan

Karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul

PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora apiculata

DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas

hydrophila SECARA IN-VITRO.

Terimakasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Ibu Dini

Siswani Mulia, S.Pi., M.Si dan Bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si yang telah

membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

Selanjutnya penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Drs. Arief

Husin, M.Si dan Bapak Dr. Susanto, M.Si selaku penguji yang telah

menyumbangkan masukan dan pemikiran untuk kesempurnaan penulisan skripsi

ini.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan kepada:

1. Drs. Pudiyono, M.Hum., selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu

Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Drs. Arief Husin, M.Si., selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

3. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan

Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

viii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 9: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

ix

4. Staf laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Laboratorium

Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

5. Kepada Dinas PERHUTANI Banyumas dan Dinas PERHUTANI Cilacap

yang telah ikut serta dalam kelancaran penulis dalam melakukan penelitian.

6. Teman-teman Biologi angkatan 2012 yang saya sayangi, terima kasih atas

dukungan dan semangatnya, sehingga penulis mampu menyelesaikan

penyusunan skripsi dengan penuh semangat.

7. Teman seperjuangan dalam penelitian Ana Miftahul Janah, Yunitasari, Eri,

Berlian, dan Akbar yang sudah bersama-sama dalam segala rasa senang dan

keluh kesah dalam melakukan penelitian.

8. Teman-teman kos Green House Lulu, mba Lina, mba Mey, Gina, Pipit, Nisa,

Tiara, Yuli, Nunung, Laras, mba Opi, Septi, Amalia, Desi, dan mba Unul

yang selalu memberikan dukungan dan semangat kepada penulis untuk

menyelesaikan penulisan skripsi.

Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih banyak

sekali kekurangan dan jauh dari kesempurnaan. Demikian, semoga dengan

terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca dan khususnya bagi

penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi.

Purwokerto, Januari 2017

Penulis

ix

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 10: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

x

DAFTAR ISI

UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................................. viii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ................................................................................................. xiii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xiv

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang .............................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3

1.3 Tujuan ........................................................................................... 3

1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 5

2.1 Tumbuhan Mangrove .................................................................... 5

2.2 Klasifikasi Rhizophora apiculata ................................................ 5

2.2.1 Deskripsi Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora

apiculata) ........................................................................... 6

2.2.2 Kandungan Metabolit Sekunder Tumbuhan Bakau

Kacangan (Rhizophora apiculata) ...................................... 7

2.3 Klasifikasi Bakteri Aeromonas hydrophila ................................... 8

2.3.1 Deskripsi Bakteri Aeromonas hydrophila ............................ 9

2.3.2 Strain Bakteri Aeromonas hydrophila .................................. 9

BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 11

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 11

3.2 Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 11

3.2.1 Alat ....................................................................................... 11

3.2.2 Bahan ................................................................................... 12

3.3 Rancangan Penelitian .................................................................... 12

3.4 Prosedur kerja ................................................................................ 13

3.4.1 Pengumpulan dan Pembuatan Simplisia Daun dan Batang

Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) .......... 13

3.4.2 Pembuatan Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Bakau

Kacangan (Rhizophora apiculata) ....................................... 13

x

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 11: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

xi

3.4.3 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 15

3.4.5 Pembuatan Medium Tumbuh Bakteri Aeromonas

hydrophila ............................................................................ 17

3.4.6 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 18

3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 19

3.5 Parameter yang Diukur .................................................................. 20

3.6 Analisis Data ................................................................................. 21

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 22

4.1 Hasil ............................................................................................... 22

4.1.1 Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ........................................................ 22

4.1.2 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 25

4.1.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 30

4.1.4 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 32

4.1.5 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 33

4.2 Pembahasan .................................................................................. 36

4.2.1 Pembuatan Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Bakau

Kacangan (Rhizophora apiculata) ....................................... 36

4.2.2 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 40

4.2.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 43

4.2.4 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)

Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 43

4.2.5 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 45

BAB V SIMPULAN DAN SARAN.................................................................. 52

5.1 Simpulan ........................................................................................ 52

5.2 Saran ............................................................................................... 52

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 53

LAMPIRAN .......................................................................................................... 57

xi

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 12: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

xii

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Berat Bahan Baku Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 22

Tabel 4.2 Pembuatan Ekstrak Metanol Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ..................................................................... 24

Tabel 4.3 Pembuatan Ekstrak N-heksan Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 24

Tabel 4.4 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Metanol Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 26

Tabel 4.5 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak N-heksan Daun dan Batang R.

apiculata ............................................................................................. 28

Tabel 4.6 Hasil Perhitungan Koloni Sel Bakteri Aeromonas hydrophila strain

GPl-04, GB-01, GK-01, GJ-01, GL-01, dan GL-02 .......................... 32

Tabel 4.7 Daya hambat bakteri oleh ekstrak metanol daun dan batang

tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ......................... 33

Tabel 4.8 Daya hambat bakteri oleh ekstrak n-heksan daun dan batang

tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ......................... 35

xii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 13: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tumbuhan bakau kacangan (Rhizophora apiculata) BI .................. 6

Gambar 4.1 Bahan baku pembuatan ekstrak bakau kacangan (R. apiculata): A.

Bahan basah batang, B. Bahan basah daun, C. Bahan kering

batang, D. Bahan kering daun, E. Serbuk simplisia daun, F.

Serbuk simplisia b atang .................................................................. 23

Gambar 4.2 Hasil ekstrak kental Bakau Kacangan (R. apiculata): A. Ekstrak

kental batang metanol, B. Ekstrak kental daun metanol, C.

Ekstrak kental batang n-heksan, D. Ekstrak kental daun

n-heksan ........................................................................................... 25

Gambar 4.3 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak metanol daun

tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.

Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 27

Gambar 4.4 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak metanol batang

tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.

Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 28

Gambar 4.5 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak n-heksan daun

tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.

Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 29

Gambar 4.6 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak n-heksan batang

tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.

Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 30

Gambar 4.7 Isolat Bakteri A. hydrophila : A. Strain GPl-04, B. Strain GB-01,

C. Strain GK-01, D. Strain GJ-01, E. Strain GL-01, F. Strain GL-

02. ................................................................................................... 31

xiii

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017

Page 14: PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI RAHAYU_BIOLOGI...Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ..... 18 3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun dan Batang

Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ................. 55

Lampiran 2 Hasil Penentuan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila

menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ........................ 57

Lampiran 3 Gambar Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GL-01,

GJ-01, GK-01, GB-01, GL-02, dan GPl-04 ................................ 60

Lampiran 4 Hasil Zona Hambat Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) terhadap Bakteri Aeromonas

hydrophila .................................................................................... 64

Lampiran 5 Hasil Perhitungan Zona Hambat dan Analisis SPSS Non-

Parametrik Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora

apiculata) ..................................................................................... 73

Lampiran 6. Proses Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan

(Rhizophora apiculata) ............................................................... 98

Lampiran 7. Cara Kerja Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol dan N-heksan

Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ................. 101

Lampiran 8. Cara Kerja KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Tumbuhan Bakau

Kacangan (Rhizophora apiculata) ............................................... 105

Lampiran 9. Cara Kerja TPC (Total Plate Count) Bakteri Aeromonas

hydrophila .................................................................................... 106

xiv

Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017