PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI...
Transcript of PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN ...repository.ump.ac.id/1993/1/COVER_SUCI DWI...
i
PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN
(Rhizophora apiculata) DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila
SECARA IN-VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian syarat
Mencapai Derajat Sarjana S-1
Disusun oleh :
SUCI DWI RAHAYU
1201070040
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2017
ii
ii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
iii
iii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
iv
iv
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
v
HALAMAN MOTO
“Didiklah anak-anak kamu, sesungguhnya mereka diciptakan untuk menghadapi
zaman yang berbeda dengan zaman kamu ini”
(H.R. Bukhari)
“Janganlah membanggakan dan menyombongkan diri apa-apa yang kita peroleh,
turut dan ikutilah ilmu padi makin berisi makin tunduk dan makin bersyukur
kepada yang menciptakan kita Allah SWT.”
v
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
vi
HALAMAN PERSEMBAHAN
Dengan puja dan puji syukur kepada Allah SWT. atas segala rahmat-Nya
penulis mempersembahkan karya ini untuk:
1. Ibu dan bapak tersayang (Ibu Rukoyah dan Bapak Bunasir) atas segala
dukungan moril dan materil serta kasih sayang yang tiada henti kepada
penulis, doa yang tiada henti, dan nasehat yang selalu diberikan kepada
penulis untuk menjadi lebih baik.
2. Seluruh keluarga yang selalu memberikan doa dan dukungan.
vi
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
vii
PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN BAKAU KACANGAN (Rhizophora
apiculata) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO
ABSTRAK
Penelitian yang bertujuan untuk mengetahui bagaimana pengaruh ekstrak
tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Aeromonas hydrophila secara in-vitro telah dilaksanakan pada bulan
Februari – September 2016 di Laboratorium Biologi Farmasi dan Laboratorium
Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Pembuatan ekstrak daun
dan batang tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) menggunakan pelarut polar
(metanol) dan non-polar (n-heksan) dilakukan dengan metode maserasi.
Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola
Faktorial dengan 3 faktor yaitu organ tumbuhan mangrove (daun dan batang),
strain bakteri A. hydrophila (GPl-04,GL-01,GL-02,GJ-01, GK-01 dan GB-01) dan
konsentrasi ekstrak mangrove (0%,10%,20% dan 30%). Metode yang digunakan
yaitu metode eksperimen dengan 56 kali perlakuan dan 3 kali ulangan. Parameter
yang diamati yaitu diameter zona hambat. Analisis data menggunakan Analisis
Non-Parametrik pada taraf kepercayaan 95% berdasarkan perhitungan diameter
zona hambat. Hasil analisis menunjukkan ekstrak metanol daun tumbuhan bakau
kacangan (R. apiculata) yang memiliki pengaruh terbaik yaitu konsentrasi 20%
dan konsentrasi 30% terhadap strain bakteri GJ-01 sebesar 2,87 mm dan ekstrak
metanol batang tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) yang memiliki pengaruh
terbaik yaitu konsentrasi 30% terhadap strain bakteri GL-02 yaitu sebesar 2,1 mm.
Ekstrak n-heksan daun tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata) yang memiliki
pengaruh terbaik yaitu pada konsentrasi 10% terhadap strain bakteri GL-01
sebesar 2 mm. Ekstrak n-heksan batang tumbuhan bakau kacangan (R.
apiculata)yang memiliki pengaruh terbaik yaitu pada konsentrasi 30% terhadap
strain bakteri GL-01 yaitu sebesar 1,23 mm.
Kata kunci: A. hydrophila, maserasi, Rhizophora apiculata, zona hambat
vii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
viii
UCAPAN TERIMAKASIH
Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas Rahmat dan
Karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
PENGARUH EKSTRAK TUMBUHAN MANGROVE Rhizophora apiculata
DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas
hydrophila SECARA IN-VITRO.
Terimakasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Ibu Dini
Siswani Mulia, S.Pi., M.Si dan Bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si yang telah
membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Selanjutnya penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Drs. Arief
Husin, M.Si dan Bapak Dr. Susanto, M.Si selaku penguji yang telah
menyumbangkan masukan dan pemikiran untuk kesempurnaan penulisan skripsi
ini.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan kepada:
1. Drs. Pudiyono, M.Hum., selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu
Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si., selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi
Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah
Purwokerto.
3. Seluruh dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
viii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
ix
4. Staf laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Laboratorium
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
5. Kepada Dinas PERHUTANI Banyumas dan Dinas PERHUTANI Cilacap
yang telah ikut serta dalam kelancaran penulis dalam melakukan penelitian.
6. Teman-teman Biologi angkatan 2012 yang saya sayangi, terima kasih atas
dukungan dan semangatnya, sehingga penulis mampu menyelesaikan
penyusunan skripsi dengan penuh semangat.
7. Teman seperjuangan dalam penelitian Ana Miftahul Janah, Yunitasari, Eri,
Berlian, dan Akbar yang sudah bersama-sama dalam segala rasa senang dan
keluh kesah dalam melakukan penelitian.
8. Teman-teman kos Green House Lulu, mba Lina, mba Mey, Gina, Pipit, Nisa,
Tiara, Yuli, Nunung, Laras, mba Opi, Septi, Amalia, Desi, dan mba Unul
yang selalu memberikan dukungan dan semangat kepada penulis untuk
menyelesaikan penulisan skripsi.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih banyak
sekali kekurangan dan jauh dari kesempurnaan. Demikian, semoga dengan
terselesaikannya skripsi ini berguna bagi para pembaca dan khususnya bagi
penulis serta Program Studi Pendidikan Biologi.
Purwokerto, Januari 2017
Penulis
ix
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
x
DAFTAR ISI
UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................................. viii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ................................................................................................. xiii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xiv
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3
1.3 Tujuan ........................................................................................... 3
1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 5
2.1 Tumbuhan Mangrove .................................................................... 5
2.2 Klasifikasi Rhizophora apiculata ................................................ 5
2.2.1 Deskripsi Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora
apiculata) ........................................................................... 6
2.2.2 Kandungan Metabolit Sekunder Tumbuhan Bakau
Kacangan (Rhizophora apiculata) ...................................... 7
2.3 Klasifikasi Bakteri Aeromonas hydrophila ................................... 8
2.3.1 Deskripsi Bakteri Aeromonas hydrophila ............................ 9
2.3.2 Strain Bakteri Aeromonas hydrophila .................................. 9
BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 11
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 11
3.2 Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 11
3.2.1 Alat ....................................................................................... 11
3.2.2 Bahan ................................................................................... 12
3.3 Rancangan Penelitian .................................................................... 12
3.4 Prosedur kerja ................................................................................ 13
3.4.1 Pengumpulan dan Pembuatan Simplisia Daun dan Batang
Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) .......... 13
3.4.2 Pembuatan Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Bakau
Kacangan (Rhizophora apiculata) ....................................... 13
x
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
xi
3.4.3 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 15
3.4.5 Pembuatan Medium Tumbuh Bakteri Aeromonas
hydrophila ............................................................................ 17
3.4.6 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)
Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 18
3.4.7 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 19
3.5 Parameter yang Diukur .................................................................. 20
3.6 Analisis Data ................................................................................. 21
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 22
4.1 Hasil ............................................................................................... 22
4.1.1 Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ........................................................ 22
4.1.2 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 25
4.1.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 30
4.1.4 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)
Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 32
4.1.5 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 33
4.2 Pembahasan .................................................................................. 36
4.2.1 Pembuatan Ekstrak Daun dan Batang Tumbuhan Bakau
Kacangan (Rhizophora apiculata) ....................................... 36
4.2.2 Uji Fitokimia Menggunakan Uji Warna pada Plat KLT ...... 40
4.2.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 43
4.2.4 Penentuan Jumlah Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila)
Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ................. 43
4.2.5 Uji Daya Hambat Bakteri Aeromonas hydrophila ............... 45
BAB V SIMPULAN DAN SARAN.................................................................. 52
5.1 Simpulan ........................................................................................ 52
5.2 Saran ............................................................................................... 52
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 53
LAMPIRAN .......................................................................................................... 57
xi
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Berat Bahan Baku Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 22
Tabel 4.2 Pembuatan Ekstrak Metanol Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ..................................................................... 24
Tabel 4.3 Pembuatan Ekstrak N-heksan Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 24
Tabel 4.4 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Metanol Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ...................................................................... 26
Tabel 4.5 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak N-heksan Daun dan Batang R.
apiculata ............................................................................................. 28
Tabel 4.6 Hasil Perhitungan Koloni Sel Bakteri Aeromonas hydrophila strain
GPl-04, GB-01, GK-01, GJ-01, GL-01, dan GL-02 .......................... 32
Tabel 4.7 Daya hambat bakteri oleh ekstrak metanol daun dan batang
tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ......................... 33
Tabel 4.8 Daya hambat bakteri oleh ekstrak n-heksan daun dan batang
tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ......................... 35
xii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Tumbuhan bakau kacangan (Rhizophora apiculata) BI .................. 6
Gambar 4.1 Bahan baku pembuatan ekstrak bakau kacangan (R. apiculata): A.
Bahan basah batang, B. Bahan basah daun, C. Bahan kering
batang, D. Bahan kering daun, E. Serbuk simplisia daun, F.
Serbuk simplisia b atang .................................................................. 23
Gambar 4.2 Hasil ekstrak kental Bakau Kacangan (R. apiculata): A. Ekstrak
kental batang metanol, B. Ekstrak kental daun metanol, C.
Ekstrak kental batang n-heksan, D. Ekstrak kental daun
n-heksan ........................................................................................... 25
Gambar 4.3 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak metanol daun
tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.
Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 27
Gambar 4.4 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak metanol batang
tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.
Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 28
Gambar 4.5 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak n-heksan daun
tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.
Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 29
Gambar 4.6 Uji fitokimia menggunakan plat KLT ekstrak n-heksan batang
tumbuhan bakau kacangan (R. apiculata): A. Flavonoid, B.
Alkaloid, C. Tanin, D. Terpenoid .................................................... 30
Gambar 4.7 Isolat Bakteri A. hydrophila : A. Strain GPl-04, B. Strain GB-01,
C. Strain GK-01, D. Strain GJ-01, E. Strain GL-01, F. Strain GL-
02. ................................................................................................... 31
xiii
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak Daun dan Batang
Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ................. 55
Lampiran 2 Hasil Penentuan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila
menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ........................ 57
Lampiran 3 Gambar Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila Strain GL-01,
GJ-01, GK-01, GB-01, GL-02, dan GPl-04 ................................ 60
Lampiran 4 Hasil Zona Hambat Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) terhadap Bakteri Aeromonas
hydrophila .................................................................................... 64
Lampiran 5 Hasil Perhitungan Zona Hambat dan Analisis SPSS Non-
Parametrik Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora
apiculata) ..................................................................................... 73
Lampiran 6. Proses Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Bakau Kacangan
(Rhizophora apiculata) ............................................................... 98
Lampiran 7. Cara Kerja Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol dan N-heksan
Tumbuhan Bakau Kacangan (Rhizophora apiculata) ................. 101
Lampiran 8. Cara Kerja KLT (Kromatografi Lapis Tipis) Tumbuhan Bakau
Kacangan (Rhizophora apiculata) ............................................... 105
Lampiran 9. Cara Kerja TPC (Total Plate Count) Bakteri Aeromonas
hydrophila .................................................................................... 106
xiv
Pengaruh Ekstrak Tumbuhan…, Suci Dwi Rahayu, FKIP UMP, 2017