LAMPIRAN - media.unpad.ac.idmedia.unpad.ac.id/thesis/240210/2015/240210150028_l_7351.pdf · 78...
16
76 LAMPIRAN
Transcript of LAMPIRAN - media.unpad.ac.idmedia.unpad.ac.id/thesis/240210/2015/240210150028_l_7351.pdf · 78...
76
LAMPIRAN
77
Lampiran 1. Perhitungan Jumlah Bakteri Asam Laktat Metode TPC (Total
Plate Count) SNI 01-2897-2008 (BSN, 2008)
1. Sampel dari masing-masing suhu disuspensikan pada NaCl fisiologi
0,85% secara aseptis dan dibuat konsentrasi 10-1
.
2. Masing-masing sampel sebanyak 1 mL disuspensikan pada 9 mL NaCl
fisiologis, kemudian dibuat pengenceran hingga 10-8
secara aseptik.
3. Dari hasil pengenceran diambil 1 mL dan dimasukkan kedalam cawan
petri untuk pengenceran 3 kali terakhir, dilakukan duplo.
4. Kemudian ditambahkan media MRSA lalu diputar-putar membentuk
angka 8 sehingga sampel merata.
5. Diamkan hingga agar membeku.
6. Cawan petri kemudian diinkubasi dengan posisi terbalik kedalam
inkubator pada suhu 37oC selama 48 jam.
7. Pertumbuhan bakteri koloni dicatat (jumlah koloni 25-250 koloni)
8. Selanjutnya dilakukan perthitungan:
CFU/gram = total koloni ×
78
Lampiran 2. Perhitungan Jumlah Bakteri Probiotik Metode TPC (Total Plate
Count) SNI 01-2897-2008 (BSN, 2008)
1. Sampel dari masing-masing suhu disuspensikan pada NaCl fisiologi 0,85%
secara aseptis dan dibuat konsentrasi 10-1
.
2. Masing-masing sampel sebanyak 1 mL disuspensikan pada 9 mL NaCl
fisiologis, kemudian dibuat pengenceran hingga 10-8
secara aseptik.
3. Dari hasil pengenceran diambil 1 mL dan dimasukkan kedalam cawan
petri untuk pengenceran 3 kali terakhir, dilakukan duplo.
4. Kemudian ditambahkan media MRSA + asam asetat glasial 98% sebanyak
0,005% (pH mencapai 3,0), lalu diputar-putar membentuk angka 8
sehingga sampel merata.
5. Diamkan hingga agar membeku.
6. Cawan petri kemudian diinkubasi dengan posisi terbalik kedalam
inkubator pada suhu 37oC selama 48 jam.
7. Pertumbuhan bakteri koloni dicatat (jumlah koloni 25-250 koloni)
8. Dilakukan perhitungan TPC sesuai dengan petunjuk, yakni sebagai berikut:
CFU/gram = total koloni ×
79
Lampiran 3. Pengukuran pH (AOAC, 1984)
Dilakukan kalibrasi pH meter dengan cara:
1. Elektroda dibilas dengan air suling lalu dikeringkan dengan tisu.
2. Celupkan elektroda pada pH 4 dan 7 untuk kalibrasi yang masing-
masingnya telah dibilas air suling pada bagian elektroda saat berganti pH
dan dikeringkan dengan tisu.
Pengukuran pH sampel:
1. Celupkan elektroda pada sampel uji hingga pH meter menunjukkan angka
yang tepat.
2. Catat hasil pembacaan pada pH meter.
80
Lampiran 4. Pengukuran Viskositas (AOAC, 1995)
1. Spindle dipasang pada lengan spindle.
2. Spindle dimasukkan ke dalam sampel yang diuji.
3. Motor dihidupkan sehingga spindle berputar dan jika jarum dial menunjukkan
angka stabil motor dimatikan.
4. Mencatat angka yang ditunjukkan oleh jarum dial, setiap sampel diukur 5 kali
kemudian diambil rata-rata.
5. Nilai rata-rata dikalikan dengan faktor pengali yang sesuai dengan kecepatan
dan nomor spindle.
81
Lampiran 5. Perhitungan Total BAL Pada Kultur Cair, Suspensi, dan
Minuman Sinbiotik
Tabel 1. Perhitungan Total BAL Pada Kultur Cair dan Suspensi
Starter 10-8
10-9
10-10
CFU/mL
Kultur cair 272 204 6
3,9x1010
213 52 10
Suspensi 235 128 14
4,7x1010
292 202 2
Tabel 2. Perhitungan Total BAL Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 15±5°C
Hari Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-8
10-9
10-10
0 261 229 119 107 45 37 4,4x1010
10,64
1 253 218 102 84 31 29 3,8x1010
10,58
2 242 230 99 90 27 23 3,1x1010
10,49
3 238 174 68 84 26 19 2,5x1010
10,40
4 162 155 57 49 27 12 2,0x1010
10,30
5 135 146 32 24 21 15 1,5x1010
10,18
6 95 66 39 22 14 8 9,5x109 9,98
7 75 69 21 17 2 2 7,2x109 9,86
Tabel 3. Perhitungan Total BAL Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 25±5°C
Jam Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-8
10-9
10-10
0 338 224 67 51 48 37 3,5x1010
10,54
2 246 231 90 92 40 38 3,3x1010
10,52
4 229 214 82 77 42 27 3,0x1010
10,48
6 200 196 58 61 25 19 2,4x1010
10,38
8 116 75 30 21 17 8 1,1x1010
10,04
10 98 77 28 19 15 10 9,7x109 9,99
24 87 54 23 12 1 3 7,1x109 9,85
82
Tabel 4. Perhitungan Total BAL Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 35±5°C
Jam Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-8
10-9
10-10
0 360 248 82 70 59 35 4,0x1010
10,60
2 242 239 92 103 62 47 3,5x1010
10,54
4 196 182 68 45 27 18 2,3x1010
10,36
6 112 94 67 71 29 13 1,7x1010
10,23
8 86 81 45 33 19 15 1,1x1010
10,04
10 47 32 29 24 10 6 5,1x109 9,71
24 51 26 16 7 7 2 3,9x109 9,59
Gambar 1. Grafik BAL Suhu 15°C±5ºC Ordo 0
Gambar 2. Grafik BAL Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 0
y = -2E+08x + 4E+10
R² = 0,9896
0
5000000000
10000000000
15000000000
20000000000
25000000000
30000000000
35000000000
40000000000
45000000000
50000000000
0 50 100 150 200
Tota
l B
AL
(C
FU
/mL
)
Waktu (Jam)
Suhu 15°C
Linear (Suhu 15°C)
5x1010
4,5x1010
3,5x1010
3x1010
2,5x1010
2x1010
1,5x1010
1x1010
5x109
0
y = -2x108x + 4x1010
R2 = 0,9896
y = -1E+09x + 3E+10
R² = 0,6857
y = -1E+09x + 3E+10
R² = 0,651
-10000000000
-5000000000
0
5000000000
10000000000
15000000000
20000000000
25000000000
30000000000
35000000000
40000000000
45000000000
0 10 20 30
Tota
L B
AL
(C
FU
/mL
)
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu 25°C)
Linear (Suhu 35°C)
y = -1x109x + 3x1010
R2 = 0,6857
y = -1x109x + 3x1010
R2 = 0,651
4,5x1010
3,5x1010
3x1010
2,5x1010
2x1010
1,5x1010
1x1010
5x109
0
-5x109
-1x1010
83
Gambar 3. Grafik BAL Suhu 15°C±5ºC Ordo 1
Gambar 4. Grafik BAL Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 1
y = -0,0109x + 24,641
R² = 0,9749
22,50
23,00
23,50
24,00
24,50
25,00
0 50 100 150 200
Tota
l B
AL
(L
n C
FU
/mL
)
Waktu (Jam)
Suhu 15°C
Linear (Suhu 15°C)
y = -0,073x + 24,181 R² = 0,7644
y = -0,102x + 24,167 R² = 0,8
21,50
22,00
22,50
23,00
23,50
24,00
24,50
25,00
0 10 20 30
To
tal
BA
L (
Ln
CF
U/m
L)
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu25°C)
84
Lampiran 6. Perhitungan Total Bakteri Probiotik Pada Kultur Cair,
Suspensi, dan Minuman Sinbiotik
Tabel 5. Perhitungan Total Bakteri Probiotik Pada Kultur Cair dan Suspensi
Starter 10-8
10-9
10-10
CFU/mL
Kultur cair 149 21 0
1,7x1010
107 93 1
Suspensi 250 136 5
3,3x1010
224 117 0
Tabel 6. Perhitungan Total Bakteri Probiotik Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 15±5°C
Hari Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-7
10-8
10-9
0 288 298 238 230 127 114 3,2x1010
10,51
1 264 231 226 200 98 75 6,8x109 9,83
2 256 192 144 152 84 79 5,3x109 9,72
3 231 151 122 143 50 94 3,6x109 9,56
4 195 113 99 94 53 30 2,6x109 9,41
5 121 102 90 47 44 29 2,0x109 9,30
6 72 64 38 26 22 16 9,1x108 8,96
7 68 51 32 20 10 2 7,2x108 8,86
Tabel 7. Perhitungan Total Bakteri Probiotik Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 25±5°C
Jam Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-7
10-8
10-9
0 428 320 240 248 100 96 3,1x1010
10,49
2 348 394 242 213 86 74 2,8x1010
10,45
4 368 379 236 196 91 56 2,6x1010
10,41
6 314 293 96 115 29 25 4,6x109 9,66
8 281 217 188 91 32 21 4,0x109 9,60
10 229 145 95 81 23 12 2,5x109 9,40
24 124 96 30 25 7 4 1,3x109 9,11
85
Tabel 8. Perhitungan Total Bakteri Probiotik Pada Minuman Sinbiotik Suhu
Penyimpanan 35±5°C
Jam Pengenceran
(CFU/mL) (log
CFU/mL) 10-7
10-8
10-9
0 480 416 276 231 63 68 3,0x1010
10,48
2 148 131 103 92 55 72 2,7x1010
10,43
4 124 83 69 71 52 22 1,8x109 9,26
6 93 72 62 63 24 13 1,3x109 9,11
8 72 63 49 26 15 17 9,5x108 8,98
10 51 31 48 8 22 10 6,2x108 8,79
24 34 22 15 16 11 6 3,4x108 8,53
86
Lampiran 7. Pengukuran pH Minuman Sinbiotik
Tabel 9. Nilai pH Minuman Sinbiotik Suhu 15ºC±5ºC
Waktu (Jam) 1 2 pH
0 6,6 7,0 6,8
24 6,7 6,7 6,7
48 6,3 6,5 6,4
72 5,4 5,5 5,5
96 4,6 4,5 4,6
120 4,5 4,5 4,5
122 4,4 4,3 4,4
168 4,2 3,9 4,1
Tabel 10. Nilai pH Minuman Sinbiotik Suhu 25ºC±5ºC
Waktu (Jam) 1 2 pH
0 6,6 6,7 6,7
2 6,6 6,4 6,5
4 6,5 6,5 6,5
6 6,2 6,6 6,4
8 5,7 5,8 5,8
10 5,2 5,8 5,5
24 4,2 4,2 4,2
Tabel 11. Nilai pH Minuman Sinbiotik Suhu 35ºC±5ºC
Waktu (Jam) 1 2 pH
0 6,9 6,9 6,9
2 6,8 6,8 6,8
4 6,5 6,6 6,6
6 6,5 6,2 6,4
8 5,3 5,3 5,3
10 4,8 4,6 4,7
24 3,0 2,9 3,0
87
Gambar 5. Grafik pH Suhu 15°C±5ºC Ordo 0
Gambar 6. Grafik pH Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 0
y = -0,0184x + 6,9167
R² = 0,9265
0
1
2
3
4
5
6
7
8
0 50 100 150 200
pH
Waktu (Jam)
Suhu 15°C
Linear (Suhu 15°C)
y = -0,1089x + 6,7828
R² = 0,9659
y = -0,1752x + 7,0226
R² = 0,9391
0
1
2
3
4
5
6
7
8
0 5 10 15 20 25 30
pH
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu 25°C)
Linear (Suhu 35°C)
88
Gambar 7. Grafik pH Suhu 15°C±5ºC Ordo 1
Gambar 8. Grafik pH Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 1
y = -0,0034x + 1,9495
R² = 0,9353
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
0 50 100 150 200
Ln
pH
Waktu (Jam)
Suhu 15°C
Linear (Suhu 15°C)
y = -0,0204x + 1,9286
R² = 0,972
y = -0,0373x + 1,9883
R² = 0,9651
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
0 5 10 15 20 25 30
Ln
pH
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu 25°C)
Linear (Suhu 35°C)
89
Lampiran 8. Pengukuran Viskositas Minuman Sinbiotik
Tabel 12. Viskostas Minuman Sinbiotik Suhu 15ºC±5ºC
Waktu (Jam) Viskositas (mPas)
1 2 Rata-rata
0 28 26 27
24 31 29 30
48 35 35 35
72 42 38 40
96 60 58 59
120 73 77 75
144 75 81 78
168 84 96 90
Tabel 13. Viskositas Minuman Sinbiotik Suhu 25ºC±5ºC
Waktu (Jam) Viskositas (mPas)
1 2 Rata-rata
0 25 23 24
2 26 24 25
4 30 28 29
6 32 34 33
8 35 41 38
10 40 44 42
24 43 47 45
Tabel 14. Viskositas Minuman Sinbiotik Suhu 35ºC±5ºC
Waktu (Jam) Viskositas (mPas)
1 2 Rata-rata
0 26 24 25
2 31 29 30
4 34 30 32
6 39 33 36
8 45 41 43
10 65 59 62
24 120 112 116
90
Gambar 9. Grafik Viskositas Suhu 15°C±5ºC Ordo 0
Gambar 10. Grafik Viskositas Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 0
y = 0,4067x + 20,083
R² = 0,9531
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180
Vis
kosi
tas
(mP
as)
Waktu (Jam)
y = 0,9157x + 26,651
R² = 0,7808
y = 3,9488x + 18,681
R² = 0,9717
0
20
40
60
80
100
120
140
0 5 10 15 20 25 30
Vis
kosi
tas
(mP
as)
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu 25°C)
Linear (Suhu 35°C)
91
Gambar 11. Grafik Viskositas Suhu 15°C±5ºC Ordo 1
Gambar 12. Grafik Viskositas Suhu 25°C±5ºC dan Suhu 35°C±5ºC Ordo 1
y = 0,0079x + 3,2374
R² = 0,9676
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
3,00
3,50
4,00
4,50
5,00
0 50 100 150 200
Vis
kosi
tas
(mP
as)
Waktu (Jam)
Suhu 15°C
Linear (Suhu 15°C)
y = 0,0268x + 3,2851
R² = 0,7375
y = 0,0649x + 3,2578
R² = 0,9633
0,00
1,00
2,00
3,00
4,00
5,00
6,00
0 10 20 30
Vis
kosi
tas
(Ln
mP
as)
Waktu (Jam)
Suhu 25°C
Suhu 35°C
Linear (Suhu 25°C)
Linear (Suhu 35°C)
