Proses Pembuatan Preparat MikroskopisFiksasi- tujuan : mempertahankan struktur fisis dan khemis jaringan.- dilakukan dgn cara koagulasi protein pd jaringan .- jumlah cairan fiksasi : 10 x 20 x vol jaar yg akan difiksasi ( specimen )- cairan yg dpt dipakai Formalin 10 %, alkohol- dpt juga dgn menggunakan suhu yg rendah ( frozen section )

2. Dehidrasi- tujuan : menarik air dari jaringan- dipakai : etil alkohol, aceton

3. Clearing / dealkoholisasi- jaringan yg mengandung alkohol tidak dpt dimasuki lilin cair, karena itu alkohol harus dilarutkan- dipakai : benzena, toluena, xylene

4. Impedding dan blocking- impedding = proses masuknya lilin cair dalam cairan- bila suhu diturunkan ---- jaringan bersifat padat ----- dibuat suatu kubus dari lilin ddgn jaringan ditengahnya ( blocking )- utk impedding dipakai inkubator dgn suhu 54- 58 C

5. Pemotongan dengan mikrotoomMikrotoom = suatu alat potong yg dpt memotong benda padat dgn ketebalan teratur dan sangat tipis- Hasil potongan dimasukkan water bath, lilin dlm jar akan larut ------ jaringan ( mengapung, melayang, tenggelam ), jar diambil dgn kuas / jarum ose ----- dibentangkan di atas obyek glass ---- ditetesi alkohol absolut ( utk dehidrasi )---- dikeringkan dgn menekan sedikit dgn kertas hisap ---- jar siap dicat

Pengecatan dengan HE ( Hematoxillin Eosin )Jar yg terdapat di obyek glass dimasukkan dlm cairan Hematoxillin 3- 5 menitBilas dengan air mengalir 1 menitMasukkan dlm larutan acid alkohol ( 1 cc HCl absolut + 100 cc alkohol 70 % ) sampai warna biru hilangBilas dengan air mengalir 1 menit- Masukkan dlm larutan alkohol amoniak ( 1 cc amoniak 100 % dlm alkohol 80 % ) sampai terlihat lagi warna biru

Bilas dengan air mengalir 1 menitMasukkan dlm larutan eosin 1 % ( - 2 menit )Bilas dengan air mengalir 1 menitMasukkan dlm alkohol 10 -20 menitMasukkan dlm oxypene ( 2-3 x )- Tutup dengan deg glass----- dgn balsam canada / entelan

Proses pembuatan preparat dengan frozen sectionUntuk fiksasi dipakai larutan formalin 10 % atau air garam fisiologis yg dipanaskan sampai hampir mencapai titik didih ( kadang kadang tidak dilakukan fiksassi, jaringan segar langsung dibekukan )Pemotongan dipakai freezing microtoom yaitu mikrotoom yg dilengkapi dgn semprotan gas CO2 cairGas CO2 ini cepat menguap menarik panas dari jar tersebut ----- jar akan bekuSelanjutnya sama dgn cara block parafin

Kegunaan frozen section Pembuatan dgn diagnosa dgn cepat, selama operasi masih berlaangsung, dari diagnosa ini dpt ditentukan macam / luas operasi2. Untuk melakukan pengecatan khusus, misal pengecatan SSP ( sistem saraf pusat )3. Memperlihatkan substansi enzim ( dgn pengecatan biasa ---- enzim akan rusak )

Keuntungan frozen section ----- pengerutan jaringan hampir tidak adaKekurangan :Waktu sangat terbatas2. Sukar diperoleh jaringan yg tipis3. Karena tidak mengalami fase imbedding maka distorsi bentuk jaringan bertambah4. Pengecatan sering kurang baik mutunya

si