Aktivitas Antioksidan Fraksi Fenolik dari Terminalia Catappa pada

Penyebaran ELA di Mencit Albino Swiss

Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah seminar

Disusun oleh:

Dyah Arum Ariyanti

J2C008014

JURUSAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Abstrak

Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi potensi antioksidan fraksi fenolik dari

Terminalia catappa ELA disebarkan pada tikus Swiss albino. Tingkat dari enzimik antioksidan

seperti katalase, superoksida dismutase dan glutation peroksidase dan non enzimik antioksidan

seperti vitamin A, vitamin E dan pengurangan glutasi meningkat dengan fraksi fenolik dari

Terminalia catappa pada tikus diinduksi ELA. Hasil ini menunjukkan bahwa fraksi fenolik

Terminalia catappa memiliki aktivitas antioksidan.

Keywords: Terminalia catappa, Limfoma Ascite Ehrlich, fraksi fenolik, Antioksidan

BAB I

Pendahuluan

Tanaman obat dan aromatik, hadiah alam yang sedang digunakan untuk melawan berbagai

infeksi dan penyakit di dunia. Produk alami berfungsi sebagai sumber yang sangat baik dari

molekul bioaktif yang digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit manusia yang

berbeda. Obat produk alam termasuk poliketida aromatik, polieter, coumarin, flavonoid,

terpenoid, alkaloid dan aminoglikosida. Kanker adalah penyebab utama kematian di seluruh

dunia dan insiden kanker meningkat pesat dari tahun ke tahun. Studi terbaru telah menunjukkan

bukti kuat bahwa spesies oksigen biologis reaktif (ROS) seperti anion superoksida hidroksil

radikal dan terlibat dalam perkembangan kanker. Sebagai ROS yang terlibat dalam

perkembangan kanker, senyawa dengan aktivitas pengurangan ROS yang tinggi mampu

mencegah kejadian kanker. Antioksidan telah dilaporkan untuk mencegah kerusakan oksidatif

yang disebabkan oleh ROS dan dapat mencegah terjadinya kanker. Flavonoid dan senyawa

fenolik secara luas didistribusikan dalam tanaman yang telah dilaporkan untuk mengerahkan

efek biologis termasuk, antioksidan, kemampuan menangkap radikal bebas, anti-inflamasi, anti

kanker, dan lainnya. Kandungan Fenol dan flavanoid dari ekstrak officinalis Melliiotus dan

fenolat dari Scutellaria baicalensis dilaporkan memiliki kemampuan untuk menangkap radikal

bebas dan sebagai antioksidan. Azizah Othman et al menyelidiki kandungan fenolik ekstrak biji

koka memiliki aktivitas antioksidan. Terminalia catappa adalah (keluarga - combretaceae)

banyak ditanam di daerah tropis di dunia sebagai pohon hias. Fitokimia tanaman ini termasuk

tanin, flavonoid dan triterpenoid. Ekstrak etanol berair dan daun dilaporkan untuk aktivitas

heapatoprotektif. Studi lebih dan lebih farmakologis telah melaporkan bahwa ekstrak daun T.

catappa dan buah-buahan memiliki antikanker, antioksidan, anti-HIV reverse transkriptase, anti-

inflamasi, efek antidiabetes dan aktivitas hepatoprotektif. Baru-baru ini, telah dilaporkan bahwa

Terminalia catappa protein daun memiliki aktivitas antioksidan terhadap ELA ditanamkan tikus

Swiss albino. Oleh karena itu tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan potensi

antioksidan fraksi fenolik dari Terminalia catappa terhadap ELA tikus ditanamkan Swiss albino.

BAB II

Bahan dan Metode

A. Bahan Tanaman

Daun Terminalia catappa segar dikumpulkan di daerah bebas dari pestisida dan

kontaminan lainnya dari daerah sekitarnya Tiruchengode, Namakkal kabupaten,

Tamilnadu. Daun dicuci bersih dikumpulkan dan dikeringkan dengan kertas filter dan

digunakan untuk persiapan fraksi fenolik.

B. Persiapan ekstrak metanol

Daun Terminalia catappa dikumpulkan dan dikeringkan dan dibuat menjadi bentuk

bubuk. 10 gm sampel dikemas dalam alat Soxhlet dan diekstraksi menggunakan metanol

selama 4 jam. Ampas dibuang dan filtratnya dikeringkan dalam desikator. Setelah kering

kemudian disimpan di 4 oC dalam ruangan yang dingin.

C. Hewan uji

Tujuh sampai delapan minggu tikus Swiss albino jantan dengan berat sekitar 25-30 g

dibawa dari peternakan hewan kecil stasiun, Thrissur, Kerala. Hewan-hewan itu

diaklimatisasi selama 15 hari di bawah kondisi laboratorium dan diberi makan dengan

diet standar.

D. Penyebaran Ela pada sel

Ehrlich Limfoma Ascites (ELA) baris sel tumor yang diperoleh dari Pusat Penelitian

Kanker Amala, Thrissur, Kerala. Tikus-tikus itu diaklimatisasi selama dua minggu dan

sel-sel disebarkan oleh transplantasi intraperitoneal dari 1x106 sel dalam 100μl PBS.

Setelah 15 hari, sel-sel diambil dari rongga intraperitoneal dan digunakan untuk studi in

vitro dengan metode eksklusi sitotoksik tripan biru. Studi In vitro sitotoksik dilakukan

untuk mengetahui dosis efektif 50% (ED50) ekstrak fenol Terminalia catappa yang

75μg/100μl ditentukan dengan metode eksklusi biru tripan. Para Fraksi yang

menunjukkan minimal ED50 dipilih untuk studi in vivo.

E. Pengelompokan hewan uji

a) Kelompok 1

Diberi 0,1 ml dimetil sulfat (DMSO) setiap hari, dan intraperitoneal digunakan sebagai

kontrol untuk kelompok percobaan 2 sampai 4.

b) Kelompok 2

Kelompok kontrol positif dengan diberi makan antoksidan silmarin ((0,18 mg / kg

berat badan).

c) Kelompok 3

Diberi 1x106 tumor ELA sel, intraperitoneal dan diperlakukan sebagai kontrol ELA

d) Kelompok 4

Diberi ED50 ekstrak dari T. catappa Fenol (T.catappa 75μg fenol di 100μl DMSO)

intraperitoneal.

e) Kelompok 5

Ekstrak T. catappa dan sel-sel tumor ELA diberikan pada hari yang sama dan ekstrak

fenol dilanjutkan selama 15 hari. Setelah 15 hari, tikus dikorbankan setelah puasa

semalam. Hati itu dibedah, dicuci dengan PBS pada pH 7,2 dan di homogenkan

dengan menggunakan PBS dan digunakan untuk penentuan katalase, superoksida

dismutase, glutation peroxidise dan non enzimik antioksidan seperti vitamin A,

vitamin E , pengurangan glutation dan lipid peroksidas dan hasilnya disajikan sebagai

deviasi standar dari rata-rata 6 hewan.

BAB III

Pembahasan

Tabel I. menunjukkan tingkat enzimik antioksidan katalase, Superoksida dismutase dan

peroksidase Glutathione dalam hati homogenat kontrol dan kelompok eksperimen. Tingkat CAT,

SOD, GPX yang menurun pada tikus diinduksi ELA bila dibandingkan dengan kelompok

kontrol. Tabel II. menunjukkan kadar antioksidan non enzimik seperti vitamin A, vitamin E,

glutathione dan mengurangi lipid peroksidasi di homogenat hati kontrol dan kelompok

eksperimen. Tingkat non enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E dan Glutathione

Mengurangi mengalami penurunan pada tikus diinduksi ketika ELA dibandingkan dengan

kelompok kontrol. Tingkat peroksidasi lipid itu meningkat pada tikus diinduksi ELA bila

dibandingkan dengan kelompok kontrol.

Tabel 1. Kegiatan enzimik Antioksidan dalam kontrol hati

dan eksperimen di mencit albino swiss

Tabel 2. Kegiatan Non enzimik Antioksidan dalam kontrol hati

dan eksperimen di mencit albino swiss

Flavonoid dan senyawa fenolik secara luas didistribusikan di tanaman

yang telah dilaporkan memberikan beberapa efek biologis termasuk, antioksidan, kemampuan

menangkap radikal bebas, antiradang, anti kanker. Senyawa polifenol didefinisikan sebagai zat

yang memiliki cincin aromatik dengan satu atau lebih substituen hidroksil dan dilaporkan untuk

memberikan radikal bebas oksigen dengan menyumbangkan atom hidrogen atau elektron pada

radikal bebas. Demikian juga fraksi fenolik Terminalia catappa yang dapat meningkatkan kadar

antioksidan enzimik katalase, Superoksida dismutase dan Glutathione peroxidise dan non

enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E serta pengurangan Glutathione dalam homogenat hati

tikus yang diinduksi ELA dibandingkan dengan untuk tikus kontrol ELA. Spesies oksigen yang

reaktif(ROS) diikat oleh antioksidan, dan peroksidasi lipid menurun ketika ditambahkan dengan

ekstrak tanaman serta dibandingkan dengan tikus kontrol ELA. Enzimik antioksidan dan

aktivitas antioksidan enzimik juga meningkat ketika diberikan dengan silymarin.

BAB IV

Kesimpulan

Dari hasil penelitian ekstrak fenolik Terminalia catappa dapat meningkatkan kadar

antioksidan enzimik katalase, Superoksida dismutase dan Glutathione peroksidase dan non

enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E serta pengurangan Glutathione dalam homogenat hati

tikus yang diinduksi ELA dibandingkan dengan untuk tikus kontrol ELA. Senyawa fenol ini juga

dapat menurunkan lipid peroksidase hasil penelitian menegaskan bahwa pemberian ekstrak fenol

dari Terminalia catappa memiliki aktivitas antioksidan yang menghambat sel tumor ELA

multiplisitas dan dapat direkomendasikan sebagai agen antitumor.

DAFTAR PUSTAKA

Azizah Othman, Amin Ismail, Nawalyah Abdul Ghani, Ilham Adenan. Food Chemistry, 2007;

100: 1523-1530.

Bayfield RF, Cole ER. Methods of Enzymology, 1980; 67: 189-195.

Dewick PM. Medicinal Natural Products: A Biosynthetic Approach. Chichester, UK; John Wiley

& Sons; 2002. p. 112-129.

Halliwel B, Gutterdige JMC. Free radicals In Biology and Medicine 1989 (2nd ed) Oxford;

Clarendon Press.

Luck H, In: Methods in Enzymatic analysis 2 (Ed. Bergmeyer), Academic Press, New York,

1974, 885.

M,Saroja, R,Santhi, S,Annapoorani, 2011, , Antioxidant Activity of Phenolic of Terminalia

Catappa in Ela Propagated Swiss Albino Mice, Journal of Advanced Scientific

Research 2(3): 70-72

Misra HP, Fridovich. J Biol Chem, 1972, 247: 3170-3171.

Mohale DS, Dewani AP, Chandewar AV, Khadse CD, Tripathi AS, Agarwal SS. J Herbal

Medicine &Toxicology, 2009; 3(1): 7-11.

Moron MS, Depierre JN, Mannerisk VC. Biochimica Biophysica Acta, 1979; 582: 67-68.

Newman DJ, Cragg GM. J Nat Prod, 2007; 70(3): 461-477.

Ohkawa H, Ohisi N, Yagi K. Assay for tissue lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric

acid reaction, 1979; 95: 351-358.

Pourmorad F, Hosseinimehr SJ, Shahabimajd NA. J Biotech, 2006; 5(11): 1142-1145.

Rosenberg HR, Chemistry and Physiology of the Vitamins, Interscience Publishers, New York,

1992; 452-453.

Rotruck JT, Pope AL, Ganther HE, Hafeman DG, Hockstraw G. Science, 1973; 179: 588-590.

Salomi MJ, Panikkar KR. Amala Research Bulletin, 1989, 11: 60-63.

Santhi R, Annapoorani S. Int J. Drug Dev & Res, 2009; 1: 81-88.

Shahidi F, Naczk M. Food Phenolics; Sources, Chemistry, effects and applications. Basal,

Switterland; Technomic Pub. Co.

Shukla Y, Pal S K. International Journal of Human Genetics, 2004; 4(4): 265-276.

Ta- Chen Lin, Kazutaka Nishikawa, Tzu- Hua Wu, Kanji Ishimaru. Chin Pharm J, 2002; 54:

193-198.

USULAN

Tanaman Terminalia catappa yang mengandung fenol dan flavanoid selain digunakan untuk

menguji anti kanker, dapat digunakan untuk uji aktivitas lainnya. Salah satunya adalah dengan

menggunakan senyawa flavanoid sebagai uji aktivitas antioksidan. Metode yang digunakan

dalam uji ini adalah dengan menggunakan DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Setelah

ditambahkan DPPH kemudian dilakukan analisis dengan menggunakan spektometer UV-Vis.

Selain mengandung senyawa flavanoid dan fenol, terdapat senyawa metabolit sekunder lainnya

yaitu alkaloid, terpenoid, steroid, triterpenoid, dan tanin. Sehingga perlu dilakukan penelitian

selanjutnya untuk mengetahui uji aktivitasnya lainnya misalnya sebagai uji sitotoksik,

antidiabetes dan uji lainnya. Hal ini dapat bermanfaat dalam bidang kesehatan karena tanaman

ini dapat bermanfaat untuk mengobati dan mencegah beberapa penyakit.