8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

1/10

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

2/10

STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIUM

I. TUJUAN

Setelah melakukan "raktikum ini dihara"kan mahasis$a da"at :

1% Men&etahui tu'uan dan (ara)(ara sterilisasi%

2% Melakukan sterilisasi den&an men&&unakan autokla*%

3% Men&etahui "en&&unaan dan ma(am medium%

+% Mem,uat medium%

II. TINJAUAN PUSTAKA

Sterilisasi meru"akan suatu "roses untuk mematikan semua or&anism

yan& terda"at "ada suatu alat yan& akan di"aka dalam "raktikum%

-lat)alat dan ,ahan),ahan yan& di&unakan harus dalam keadaan

seteril yan& artinya tidak ada mikroor&anisme yan& ,ersin&&ah di alat terse,ut%

Sterilisasi da"at dilakukan den&an (ara :

1% Sterilisasi se(ara *isik. yaitu den&an "emanasan. sinar /. sinar ultraiolet%

2% Sterilisasi se(ara kimia. yaitu den&an desin*ektan. larutan al(ohol. *ormalin%

3% Sterilisasi se(ara mekanik. yaitu den&an *iltrasi atau "enyarin&an%

-da ti&a (ara utama yan& umum di"akai dalam sterilisasi yaitu

"en&&unaan "anas. "en&&unaan ,ahan kimia. dan "enyarin&an *iltrasi% ika

"anas di&unakan ,ersama)sama den&an ua" air maka dise,ut sterilisasi "anas

lem,a, atau sterilisasi ,asah% #eta"i 'ika tan"a kelem,a,an maka dise,ut

sterilisasi "anas kerin& atau sterilisasi kerin&%

Be,era"a (ara untuk mensterilkan medium:

1%Pemanasan ,asah adalah sterilisasi "anas yan& di&unakan ,ersama)samaden&an ua" air% Pemanasan ,asah ,iasanya dilakukan didalam autokla* atau

sterilisator ua" yan& mudah dian&kat den&an men&&unakan ua" air 'enuh

,ertekanan "ada suhu 121 04 selama 15 menit% 4ara "emanasan ,asah da"at

mem,unuh 'asad renik atau mikroor&anisme terutama karena "anas ,asah

da"at menye,a,kan denaturasi "rotein. termasuk en6im)en6im didalam sel%

2% Di,andin&kan "emanasan ,asah. "emanasan kerin& kuran& e*isien dan

mem,utuhkan suhu yan& le,ih tin&&i serta $aktu lama untuk sterilisasi% Hal

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

3/10

ini dise,a,kan karena tan"a kelem,a,an maka tidak ada "anas laten%

Pemanasan kerin& da"at menye,a,kan dehidrasi sel dan oksidasi kom"onen)

kom"onen di dalam sel% !euntun&an dari "emanasan kerin& adalah tidak

adanya ua" air yan& mem,asahi ,ahan atau alat yan& disterilkan. selain itu

"eralatan yan& di&unakan untuk sterilisasi ua" kerin& le,ih murah

di,andin&kan ua" ,asah% Pemanasan kerin& serin& dilakukan dalam sterilisasi

alat)alat &elas di la,oratorium. dimana men&&unakan oen den&an suhu 170)

180 o4 selama 1.5)2 'am den&an sistem udara statis%

3% Pere,usan adalah "emanasan didalam air mendidih atau ua" air "ada suhu

100 o4 selama ,e,era"a menit% Pada suhu ini sel e&etati* dimatikan. sedan&

s"ora ,elum da"at dihilan&kan% Be,era"a ,akteri tertentu tahan terhada" suhu

"ere,usan ini. misalnya 4lostridium "er*rin&ens dan 4lostridium ,otulinum

teta" hidu" meski"un dire,us selama ,e,era"a 'am%

+% Men&&unkan sinar ultra iolet den&an "an'an& &elom,an& yan& "endek

memiliki daya antimikro,ial yan& san&at kuat%

5% Sterilisi den&an -utokla*

#uan&kan air sulin& se(uku"nya ke dalam tu,uh sterlisator%

#atalah alat)alat dan ,ahan),ahan yan& akan disterilkan di dalam

$adah alumunium ,a&ian dalam sedemikian hin&&a tersedia ruan&an

untuk ,er&eraknya ua" air se(ara ,e,as di antara alat)alat terse,ut

selama sterilisasi%

etakan tutu" sterilisator "ada tu,uh sterilisator den&an (ara

mem"ertemukan tanda)tanda "anah "enun'uk dan memasukkan

ta,un& "en&eluaran &as ke dalam saluran "en&arah "ada dindin&

,a&ian dalam $adah alumunium% -yunkan ,atu),atu "enahan ke atas

ke tem"atnya yan& sesuai "ada tutu" sterisator. dan ken(an&kan

masin&)masin& murya se(ara merata sedemikian sehin&&a tekannya

sera&am dan letak tutu" ,etul),etul di ten&ah%

Bukalah "en&atur kele" "en&aman. dalam keadaan ter,uka "anahan

terse,ut lurus letaknya. "asan&lah "emanasnya%

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

4/10

Bila ua" air mulai keluar den&an deras terden&ar ,unyi mendesis

tutu"lah kele" "en&aman den&an (ara mendoron& "en&aturnya

ke,a$ah sehin&&a "osisinya mendatar%

Bila alat tolak ,ertekanan menun'ukan "ada 15 "si atau 1 atm kuran&i

"emanasnya se"erlunya. (uku" untuk mem"ertahankan tekannya %

Sterilkan medium den&an (ara mem"ertahankan tekanan 1 atm

selama15)20 menit%

Pada "roses akhir. matikan "emanasnya dan tun&&u sam"ai tekanan

kem,ali nol%

Bila alat tolak menun'ukan an&ka nol dan suhu telah turun di ,a$ah

100 o4. ,uka "en&atur kele" "em&aman den&an (ara meluruskannya%

Bila selesai men&&unakan sterilisator. ,uan&lah air yan& tersisa

didalamnya%

6. Den!n Pen!"#!$!n B!$!n K%"%!

a% -lkohol. daya ker'anya adalah men&koa&ulasi "rotein% 4airan alkohol

yan& umum di&unakan ,erkonsentrasi 90)80 karena konsentrasi

yan& le,ih tin&&i atau le,ih rendah kuran& e*ekti*%

,% !hlor. ;as khlor den&an air akan men&hasilkan ion hi"okloride yan&

akan men&koa&ulasikan "rotein sehin&&a mem,ran sel rusak dan

ter'adi inaktiasi en6im%

(%

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

5/10

1% Medium harus men&andun& semua nutrisi yan& mudah di&unakan

oleh mikro,a%

2% Medium harus mem"unyai tekanan osmose. te&an&an muka dan "H

yan& sesuai%

3% Medium tidak men&andun& 6at)6at yan& men&ham,at "ertum,uhan

mikro,a%

+% Medium harus steril%

III. ALAT DAN BAHAN

A. A&!'

Beaker&lass

;elas ukur

-utokla*

!ertas sarin&

Batan& "en&aduk

#anun& reaksi

B. B!$!n

Pem,uatan Medium Nutrien 4air

=kstrak da&in& ,ee* e>tra(t

Pe"ton

Na4l

-?uades

IV. GAMBAR ALAT

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

6/10

V. PROSEDUR

Pe"#(!'!n Me)%(" N('*%en +!%*

#im,an& kstrak da&in& se,anyak 3 &ram

,eaker &lass

&elas ukur

erlenmayer

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

7/10

@

#im,an& "e"ton se,anyak 5 &ram A Na4l

@!edua ,ahan terse,ut dilarutkan dalam 195 ml a?uades sehin&&a men'adi

larutan homo&en

@

Panaskan larutan dalam "enan&as air sam"ai larutan mendidih selama 5 menit

@

Masukkan larutan terse,ut ke dalam ta,un& reaksi olume 5 ml

@

#utu" ta,un& yan& sudah dimasukkan larutan kedalamnya den&an

men&&unakan ka"as kain kasa

@Sterilisasikan den&an autokla* "ada tekanan

VI. HASIL PRAKTIKUM

VII. PEMBAHASAN

Pada "er(o,aan sterilisasi dan "em,uatan medium. ,ertu'uan untuk

da"at men&etahui tu'uan dan (ara)(ara sterilisasi. melakukan sterilisasi

dan&an men&&unakan autokla*. men&etahui "en&&unaan dan ma(am medium.

dan "em,uatan medium%

!a"as den&an kain

kasa

#a,un& reaksi

arutan nutrient (air

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

8/10

Ma(am)ma(am "em,uatan medium yan& di,uat dalam "raktikum ini

yaitu medium nutrient (air. medium nutrient a&ar. medium tau&e (air dan

medium tau&e a&ar% Dari ,er,a&ai ma(am medium kelom"ok kami hanya

mem,uat medium nutrient (air den&an ekstrak da&in&%

-lat)alat yan& di&unakan "ada "raktikum ini adalah autolka*. ta,un&

reaksi. "enan&as air% alu ,ahan),ahan yan& di&unakan adalah ekstrak da&in&

yan& sudah ditim,an& se,anyak 3 &ram. Na4l. 195ml a?uades. dan "e"ton%

=kstra da&in& yan& di&unakan meru"akan aria,le teta" dalam

"em,uatan medium nutrien (air% Pe"ton meru"akan nutrient untuk mikro,a%

Penam,ahan Na4l su"aya untuk men'a&a kesta,ilan "H yaitu netral atau "ada

"H 9% Sedan&kan a?uades se,a&ai "elarut untuk melarutkan semua ,a&an

su"aya homo&eny%

an&kah "ertama yan& dilakukan adalah mensterilkan me'a yan& akan

di"akai atau se,a&ai tem"at untuk melakukan "raktikum su"aya seril%

Menyia"kan semua ,ahan yan& akan di&unakan yaitu "em,uatan medium

nutrient (air dan&an ekstrak da&in&%

Setelah itu ta,un& ditutu" yan& se,elumnya sudah dimasukkan larutan

kedalamnya% #utu" ta,un& terse,ut den&an men&&unakan ka"as dan kain kasa

sam"ai ra"at. teta"i "enutu"an den&an men&&unakan kain ka"as yan&

di,un&kus den&an kain kasa terse,ut tidak ,oleh terlalu ,esar dan "an'an&%

Ini di takutkan a"a,ila terlalu "an'an&. kain terse,ut akan ter,akar "ada saat

disterilisasi didalam autokla*% Setelah ditutu" lalu masukkan kedalam autokla*

den&an suhu sekitar12 o4. tekanan 1 atm. dan selama 20 menit%

VIII. KESIMPULAN

Dari hasil "raktikum da"at diam,il kesim"ulan ,ah$a:

a% #u'uan seterilisasi yaitu untuk mematikan semua mikro,a%

,% Seterilisasi da"at dilakukan den&an men&&unakan autokla*%

(% Medium Nutrient 4air di&unakan se,a&ai media "ertum,uhan mikro,a%

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

9/10

D-

8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty

10/10

Suria$iria. . 2005.Mikrobiologi Dasar. Pa"as Sinar Sinanti. akarta%

Folk Gheeler. 1EE3.Mikrobiologi Dasar ilid ! Edisi kelima. =rlan&&a:

akarta%