Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
-
Upload
betty-ika-hidayah -
Category
Documents
-
view
216 -
download
0
Transcript of Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
1/10
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
2/10
STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIUM
I. TUJUAN
Setelah melakukan "raktikum ini dihara"kan mahasis$a da"at :
1% Men&etahui tu'uan dan (ara)(ara sterilisasi%
2% Melakukan sterilisasi den&an men&&unakan autokla*%
3% Men&etahui "en&&unaan dan ma(am medium%
+% Mem,uat medium%
II. TINJAUAN PUSTAKA
Sterilisasi meru"akan suatu "roses untuk mematikan semua or&anism
yan& terda"at "ada suatu alat yan& akan di"aka dalam "raktikum%
-lat)alat dan ,ahan),ahan yan& di&unakan harus dalam keadaan
seteril yan& artinya tidak ada mikroor&anisme yan& ,ersin&&ah di alat terse,ut%
Sterilisasi da"at dilakukan den&an (ara :
1% Sterilisasi se(ara *isik. yaitu den&an "emanasan. sinar /. sinar ultraiolet%
2% Sterilisasi se(ara kimia. yaitu den&an desin*ektan. larutan al(ohol. *ormalin%
3% Sterilisasi se(ara mekanik. yaitu den&an *iltrasi atau "enyarin&an%
-da ti&a (ara utama yan& umum di"akai dalam sterilisasi yaitu
"en&&unaan "anas. "en&&unaan ,ahan kimia. dan "enyarin&an *iltrasi% ika
"anas di&unakan ,ersama)sama den&an ua" air maka dise,ut sterilisasi "anas
lem,a, atau sterilisasi ,asah% #eta"i 'ika tan"a kelem,a,an maka dise,ut
sterilisasi "anas kerin& atau sterilisasi kerin&%
Be,era"a (ara untuk mensterilkan medium:
1%Pemanasan ,asah adalah sterilisasi "anas yan& di&unakan ,ersama)samaden&an ua" air% Pemanasan ,asah ,iasanya dilakukan didalam autokla* atau
sterilisator ua" yan& mudah dian&kat den&an men&&unakan ua" air 'enuh
,ertekanan "ada suhu 121 04 selama 15 menit% 4ara "emanasan ,asah da"at
mem,unuh 'asad renik atau mikroor&anisme terutama karena "anas ,asah
da"at menye,a,kan denaturasi "rotein. termasuk en6im)en6im didalam sel%
2% Di,andin&kan "emanasan ,asah. "emanasan kerin& kuran& e*isien dan
mem,utuhkan suhu yan& le,ih tin&&i serta $aktu lama untuk sterilisasi% Hal
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
3/10
ini dise,a,kan karena tan"a kelem,a,an maka tidak ada "anas laten%
Pemanasan kerin& da"at menye,a,kan dehidrasi sel dan oksidasi kom"onen)
kom"onen di dalam sel% !euntun&an dari "emanasan kerin& adalah tidak
adanya ua" air yan& mem,asahi ,ahan atau alat yan& disterilkan. selain itu
"eralatan yan& di&unakan untuk sterilisasi ua" kerin& le,ih murah
di,andin&kan ua" ,asah% Pemanasan kerin& serin& dilakukan dalam sterilisasi
alat)alat &elas di la,oratorium. dimana men&&unakan oen den&an suhu 170)
180 o4 selama 1.5)2 'am den&an sistem udara statis%
3% Pere,usan adalah "emanasan didalam air mendidih atau ua" air "ada suhu
100 o4 selama ,e,era"a menit% Pada suhu ini sel e&etati* dimatikan. sedan&
s"ora ,elum da"at dihilan&kan% Be,era"a ,akteri tertentu tahan terhada" suhu
"ere,usan ini. misalnya 4lostridium "er*rin&ens dan 4lostridium ,otulinum
teta" hidu" meski"un dire,us selama ,e,era"a 'am%
+% Men&&unkan sinar ultra iolet den&an "an'an& &elom,an& yan& "endek
memiliki daya antimikro,ial yan& san&at kuat%
5% Sterilisi den&an -utokla*
#uan&kan air sulin& se(uku"nya ke dalam tu,uh sterlisator%
#atalah alat)alat dan ,ahan),ahan yan& akan disterilkan di dalam
$adah alumunium ,a&ian dalam sedemikian hin&&a tersedia ruan&an
untuk ,er&eraknya ua" air se(ara ,e,as di antara alat)alat terse,ut
selama sterilisasi%
etakan tutu" sterilisator "ada tu,uh sterilisator den&an (ara
mem"ertemukan tanda)tanda "anah "enun'uk dan memasukkan
ta,un& "en&eluaran &as ke dalam saluran "en&arah "ada dindin&
,a&ian dalam $adah alumunium% -yunkan ,atu),atu "enahan ke atas
ke tem"atnya yan& sesuai "ada tutu" sterisator. dan ken(an&kan
masin&)masin& murya se(ara merata sedemikian sehin&&a tekannya
sera&am dan letak tutu" ,etul),etul di ten&ah%
Bukalah "en&atur kele" "en&aman. dalam keadaan ter,uka "anahan
terse,ut lurus letaknya. "asan&lah "emanasnya%
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
4/10
Bila ua" air mulai keluar den&an deras terden&ar ,unyi mendesis
tutu"lah kele" "en&aman den&an (ara mendoron& "en&aturnya
ke,a$ah sehin&&a "osisinya mendatar%
Bila alat tolak ,ertekanan menun'ukan "ada 15 "si atau 1 atm kuran&i
"emanasnya se"erlunya. (uku" untuk mem"ertahankan tekannya %
Sterilkan medium den&an (ara mem"ertahankan tekanan 1 atm
selama15)20 menit%
Pada "roses akhir. matikan "emanasnya dan tun&&u sam"ai tekanan
kem,ali nol%
Bila alat tolak menun'ukan an&ka nol dan suhu telah turun di ,a$ah
100 o4. ,uka "en&atur kele" "em&aman den&an (ara meluruskannya%
Bila selesai men&&unakan sterilisator. ,uan&lah air yan& tersisa
didalamnya%
6. Den!n Pen!"#!$!n B!$!n K%"%!
a% -lkohol. daya ker'anya adalah men&koa&ulasi "rotein% 4airan alkohol
yan& umum di&unakan ,erkonsentrasi 90)80 karena konsentrasi
yan& le,ih tin&&i atau le,ih rendah kuran& e*ekti*%
,% !hlor. ;as khlor den&an air akan men&hasilkan ion hi"okloride yan&
akan men&koa&ulasikan "rotein sehin&&a mem,ran sel rusak dan
ter'adi inaktiasi en6im%
(%
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
5/10
1% Medium harus men&andun& semua nutrisi yan& mudah di&unakan
oleh mikro,a%
2% Medium harus mem"unyai tekanan osmose. te&an&an muka dan "H
yan& sesuai%
3% Medium tidak men&andun& 6at)6at yan& men&ham,at "ertum,uhan
mikro,a%
+% Medium harus steril%
III. ALAT DAN BAHAN
A. A&!'
Beaker&lass
;elas ukur
-utokla*
!ertas sarin&
Batan& "en&aduk
#anun& reaksi
B. B!$!n
Pem,uatan Medium Nutrien 4air
=kstrak da&in& ,ee* e>tra(t
Pe"ton
Na4l
-?uades
IV. GAMBAR ALAT
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
6/10
V. PROSEDUR
Pe"#(!'!n Me)%(" N('*%en +!%*
#im,an& kstrak da&in& se,anyak 3 &ram
,eaker &lass
&elas ukur
erlenmayer
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
7/10
@
#im,an& "e"ton se,anyak 5 &ram A Na4l
@!edua ,ahan terse,ut dilarutkan dalam 195 ml a?uades sehin&&a men'adi
larutan homo&en
@
Panaskan larutan dalam "enan&as air sam"ai larutan mendidih selama 5 menit
@
Masukkan larutan terse,ut ke dalam ta,un& reaksi olume 5 ml
@
#utu" ta,un& yan& sudah dimasukkan larutan kedalamnya den&an
men&&unakan ka"as kain kasa
@Sterilisasikan den&an autokla* "ada tekanan
VI. HASIL PRAKTIKUM
VII. PEMBAHASAN
Pada "er(o,aan sterilisasi dan "em,uatan medium. ,ertu'uan untuk
da"at men&etahui tu'uan dan (ara)(ara sterilisasi. melakukan sterilisasi
dan&an men&&unakan autokla*. men&etahui "en&&unaan dan ma(am medium.
dan "em,uatan medium%
!a"as den&an kain
kasa
#a,un& reaksi
arutan nutrient (air
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
8/10
Ma(am)ma(am "em,uatan medium yan& di,uat dalam "raktikum ini
yaitu medium nutrient (air. medium nutrient a&ar. medium tau&e (air dan
medium tau&e a&ar% Dari ,er,a&ai ma(am medium kelom"ok kami hanya
mem,uat medium nutrient (air den&an ekstrak da&in&%
-lat)alat yan& di&unakan "ada "raktikum ini adalah autolka*. ta,un&
reaksi. "enan&as air% alu ,ahan),ahan yan& di&unakan adalah ekstrak da&in&
yan& sudah ditim,an& se,anyak 3 &ram. Na4l. 195ml a?uades. dan "e"ton%
=kstra da&in& yan& di&unakan meru"akan aria,le teta" dalam
"em,uatan medium nutrien (air% Pe"ton meru"akan nutrient untuk mikro,a%
Penam,ahan Na4l su"aya untuk men'a&a kesta,ilan "H yaitu netral atau "ada
"H 9% Sedan&kan a?uades se,a&ai "elarut untuk melarutkan semua ,a&an
su"aya homo&eny%
an&kah "ertama yan& dilakukan adalah mensterilkan me'a yan& akan
di"akai atau se,a&ai tem"at untuk melakukan "raktikum su"aya seril%
Menyia"kan semua ,ahan yan& akan di&unakan yaitu "em,uatan medium
nutrient (air dan&an ekstrak da&in&%
Setelah itu ta,un& ditutu" yan& se,elumnya sudah dimasukkan larutan
kedalamnya% #utu" ta,un& terse,ut den&an men&&unakan ka"as dan kain kasa
sam"ai ra"at. teta"i "enutu"an den&an men&&unakan kain ka"as yan&
di,un&kus den&an kain kasa terse,ut tidak ,oleh terlalu ,esar dan "an'an&%
Ini di takutkan a"a,ila terlalu "an'an&. kain terse,ut akan ter,akar "ada saat
disterilisasi didalam autokla*% Setelah ditutu" lalu masukkan kedalam autokla*
den&an suhu sekitar12 o4. tekanan 1 atm. dan selama 20 menit%
VIII. KESIMPULAN
Dari hasil "raktikum da"at diam,il kesim"ulan ,ah$a:
a% #u'uan seterilisasi yaitu untuk mematikan semua mikro,a%
,% Seterilisasi da"at dilakukan den&an men&&unakan autokla*%
(% Medium Nutrient 4air di&unakan se,a&ai media "ertum,uhan mikro,a%
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
9/10
D-
-
8/10/2019 Laporan Resmi Sterilisasi Dan Pembuatan Medium_betty
10/10
Suria$iria. . 2005.Mikrobiologi Dasar. Pa"as Sinar Sinanti. akarta%
Folk Gheeler. 1EE3.Mikrobiologi Dasar ilid ! Edisi kelima. =rlan&&a:
akarta%