STERILISASI ALAT DAN PEMBUATAN MEDIA AGAR

PRAKTIKUM BIOINDUSTRI

Fitriyah 125100301111008KELOMPOK 08

Alat dan Bahan Autoklaf Bunsen Hotplate Kompor Rak dan tabung

reaksi Gelas ukur Timbangan digital

Alkohol 95% Tisu Agar bacteriological Lakto fenol Aluminium foil Kertas payung Karet Plastik petromax Kapas

Adapun langkah-langkah untuk sterilisasi alat meliputi:

1.) Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan

2.) Semprot alat dengan Alkohol3.) Bersihkan dengan lap sampai bersih4.) Bungkus dengan kertas Cokelat5.) Masukkan dalam plastik pertomax6.) Ikat dengan Karet7.) Selanjutnya, siapkan Autoklaf dan diisi

dengan air

TAHAPAN STERILISASI ALAT

8.) Masukkan alat yang akan disterilisasi9.) Panaskan dengan menggunakan

kompor 10.) Tunggu hingga suhu mencapai

121,1oC11.) Kemudian tunggu 15 menit dengan

suhu konstan 121,1oC12.) Dinginkan sampai suhu 0oC13.) Dan keluarkan Alat dari Autoklaf

Pada sterilisasi, alat yang akan disterilisasi harus terlebih dahulu disterilkan dengan alkohol(pada cawan petri). Kemudian disiapkan pula kapas, tabung reaksi, kertas coklat, plastik petromax, karet gelang. Setelah semua dibersihkan dengan alkohol, cawan petri dibungkus dengan kertas colklat dengan cara melipatnya pada cawan tersebut. Sedangkan tabung tersebut diberi tutup dengan kapas hingga rapat dan dapat dipastikan udara tidak dapat masuk dalam tabung. Setelah semua diakukan, keduanya dimasukkan kedala plastik petromax yang berfungsi sebagai bahan yang tahan akan uap.

Pada kertas cokelat untuk pembungkusan terdapat dua sisi, yaitu sisi halus dan sisi yang kasar. Pada sisi yang halus diletakkan pada bagian atas pembungkusan. Hal ini bertujuan untuk meminimalisir air dari luar tabung dan untuk menahan uap air masuk dalam tabung reaksi. Sedangkan bagian kasar dibungkuskan dibagian bawah (wadah) dengan tujuan agar dapat menyerap uap maupun air yang terdapat pada bagian dalam tabung atau cawan petri.

TAHAPAN PEMBUATAN MEDIA AGAR

Sebelumnya, perlu diketahui bahwa dalam pembuatan media agar ini digunakan 2 perlakuan yaitu dibuat media agar tegak dan media agar miring. Adapun langkah-langkah pembuatan media agar sebagai berikut:

1.) Timbang Agar Bacteriological sebanyak 0,672 gr2.) Masukkan ke dalam gelas ukur3.) Aduk4.) Panaskan dengan menggunakan hotplate5.) Masukkan dalam tabung reaksi 7 ml6.)Tutup dengan kapas

7.) Bungkus dengan kertas cokelat8.) Masukkan dalam plastik petromax9.)Ikat dengan menggunakan karet10.) Kemudian, masukkan dalam autoklaf11.)Panaskan dengan kompor12.) Tunggu sampai suhu 121,1oC13.) Tunggu 15 menit dengan suhu

konstan 121,1oC14.) Dinginkan hingga suhu 0oC 15.) Keluarkan media agar

STERILISASI MEDIA AGAR Fungsi penambahan aquades digunakan

untuk mengencerkan larutan, penambahan aquades ini mengakibatkan konsentrasi berubah dan volume diperbesar tetapi jumlah mol zat terlarut tetap. Sedangkan pemanasan dengan hotplate seperti biaasa digunakan agar dapat membuat larutan tercampur secara homogen.

Pada pembuatan sterilisasi media agar periksa dulu banyak air dalam autoklaf,

kemudian dimasukkan media yang akan disterilkan yang ditutup dengan sekrup

pengaman pada autoklaf. Lalu nyalakan api pada kompor. Pada saat autoklaf

ditletakkan diatas kompor, katup uap dibiarkan terbuka hingga udara diganti uap. Setelah uadara terganti oleh uap

katup uapnya ditutup.

Kemudian distterilisasi medianya sekitar 15-20 menit, kemudian matikan apinya dan dibiarkan menurun tekanannya hingga nol. Dibuka tutup autoklafnya,lalu diambil tabungnya dengan sarung tangan tahan panas.Kemudian memasukkan kertas sporestrip dalam autoklaf dan dilakukan sterilisasi. Pada proses tersebut, dimasukkan sporestrip dalam dextrose tryptone broth yang diinkubasi pada suhu 55-60oC. Kemudian diamati perubahannya.

Pada pembuatan media agar perlu didiamkan selama 24 jam setelah proses strelisasi agar supaya media dapat berkembang sehingga nantinya media dapat membentuk tekstur seperti agar dan pendiaman ini juga dilakukan karena mikroba atau bakteri dapat berkembang biak dengan cepat dan baik dalam waktu 24 jam.

GAMBAR HASIL STERILISASI ALAT

GAMBAR HASIL MEDIA AGAR