1

LAPORANAKHIRTAHUNAN

KEGIATANPENELITIANTAHUNANGGARAN2017

(Periode2017)

(Dr.RatihPangestuti)

PUSATPENELITIANOSEANOGRAFI

LEMBAGAILMUPENGETAHUANINDONESIA

TAHUN2017

JUDULKEGIATANMikroalgaeKoleksiP2OLIPIuntukNutraseutikalMasaDepan

2

LEMBARPENGESAHAN1. Judul Kegiatan/Penelitian : MIkroalgae Koleksi P2O LIPI Untuk Nutraseutikal MasaDepan2.SubKegiatan:(-)3.PenelitiKepala NamaLengkap:Dr.RatihPangestuti JenisKelamin:Perempuan4.LamaPenelitian:5 Tahundimulai:2017 TahunBerakhir:20215.Tahunke-:16.TotalBiayaKeseluruhan:Rp.1.500.000,00 TahunI(2017):Rp.200.000.000,00 TahunII-V(2018):Rp.1.300.000.000,00

KepalaKelompokPenelitianDr.TutikMurniasih,M.SiNIP.197109271996032002

Jakarta,Desember2017PenelitiKepala/KordinatorDr.RatihPangestutiNIP.198310272014012001Mengetahui,KepalaPusatPenelitianOseanografi-LIPI

Dr.Dirhamsyah,MANIP.196112211981031001

KetuaPMESatker

Dr.A’anJohanWahyudiNIP.198301202006041005

3

PENGANTAR

Puji Syukur kehadirat ALLAH SWT, karena atas perkenanNYA laporan pelaksanaanPengembangan Mikkroalga Koleksi P2O LIPI Untuk Nutraseutikal Masa Depan padaKegiatanTematikP2OLIPItahun2017dapatdiselesaikan.Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memberikan gambaran informasi aktifitasfarmakologismikroalgakleksiP2OLIPIdanmengembangkanproduknutraseutikalnya.Dalampenyusunankaryatulis ilmiahini,penulismendapatbanyak bantuan,masukan,bimbingan, dan dukungan dari berbagai pihak. Untuk itu, melalui kesempatan inipenulis menyampaikan terima kasih yang tulus kepada semua fihak yang turutberkontribusidalamsuksesnyapenelitianini.Tim Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari sempurna dan perlupendalaman lebih lanjut. Oleh karena itu, kami mengharapkan kritik dan saran daripembaca yang bersifat konstruktif demi kesempurnaan penelitian tahun selanjutnya.Penulis berharap semoga hasil penelitian pada laporan ini dapat bermanfaat bagipenelitianmikroalga.

Jakarta,30November2017TimPenelitiTIMPENELITI:1. Dr.RatihPangestuti2. Evi Amelia Siahaan, M.Sc3. Dr.TutikMurniasih4. AbdullahRasyid,S.Si5. ArdiArdiansyah,M.Sc6. Dyah Radini Noerdjito, M.Si7. Serly Sapulete8. Suparmo9. NurdjaminKontak:(Dr.RatihPangestuti,pangestuti.ratih@gmail.com)

4

OUTLINELAPORANAKHIRDAFTARISI HalamanLembarPengesahan 2KataPengantar 3A.Pendahuluan 71. LatarBelakang 72. Permasalahan 83. TujuandanSasaran 84. Hipotesis 8B.ProsedurdanMetodologi 10C.HasilPenelitian 13D.Kesimpulandansaran 36E.Rekapitulasipenggunaandana 36F.Daftarpustaka 37Lampiran 38

5

DAFTARGAMBAR HalamanGambar1 PeneltianMikroalgadiP2OLIPI 7Gambar2 SpesiesmikroaalgakoleksiP2OLIPI 3Gambar3 KurvapetumbuhanmikroalgaChlamydomonassp 14Gambar4 KurvapetumbuhanmikroalgaChlorellasp(Ancol) 14Gambar5 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Ancol) 15Gambar6 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Bitung) 15Gambar7 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Cilegon) 16Gambar8 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Gondol) 16Gambar9 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Kutai) 17Gambar10 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Serayu) 17Gambar11 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochlorisatomus 18Gambar12 KurvapetumbuhanmikroalgaNannochloropsiisoculata 18Gambar13 KurvapetumbuhanmikroalgaNaviculaweissflogii 19Gambar14 KurvapetumbuhanmikroalgaPavlovasp 19Gambar15 KurvapetumbuhanmikroalgaPlatymonassp 20Gambar16 KurvapetumbuhanmikroalgaPorphyridiumsp 20Gambar17 KurvapetumbuhanmikroalgaT.iso(Gondol) 21Gambar18 KurvapetumbuhanmikroalgaTetraselmissuecica(Manado) 21Gambar19 KurvapetumbuhanmikroalgaTetraselmissp(Ancol) 22Gambar20 Rendemenhasilekstraksimikroalga 32

6

DAFTARTABEL HalamanTabel1 Beragamprodukdarimikroalga,sumberdanaplikasipotensialnya 8Tabel2 KomposisiAsamLemakChlamydomonassp 23Tabel3 KomposisiAsamLemakChlorellasp(Ancol) 23Tabel4 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Ancol) 24Tabel5 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Bitung) 24Tabel6 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Cilegon) 25Tabel7 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Gondol) 25Tabel8 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Kutai) 26Tabel9 KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Serayu) 26Tabel10 KomposisiAsamLemakNannochlorisatomus 27Tabel11 KomposisiAsamLemakNannochloropsiisoculata 27Tabel12 KomposisiAsamLemakNaviculaweissflogii 28Tabel13 KomposisiAsamLemakPavlovasp 28Tabel14 KomposisiAsamLemakPlatymonassp 29Tabel15 KomposisiAsamLemakPorphyridiumsp 29Tabel16 KomposisiAsamLemakT.iso(Gondol) 30Tabel17 KomposisiAsamLemakTetraselmissuecica(Manado) 31Tabel18 KomposisiAsamLemakTetraselmissp(Ancol) 31Tabel19 Aktifitasantioksidanekstrakmikroalga 32Tabel20 Aktifitasantibakteriekstrakmikroalga 34Tabel21 KandunganPigmendanPhenolekstrakmikroalga 35

7

A. PENDAHULUAN1. LatarBelakangPotensi mikroalga untuk memproduksi senyawa bioaktif ataupun sebagaipenghasil energi telah diakui secara luas, karena mikroalga mampumemanfaatkan energi sinar matahari dengan lebih efisien dibandingkandengantanamantingkattinggi yangadadidarat [1].Mikroalga(Gambar1)memproduksi beragam metabolit seperti protein, lipid, karbohidrat,karotenoid, vitamin yang dapat dimanfaatkan untuk kesehatan,nutraseutikal,panganfungsional,kosmetikdanuntukproduksienergi[2,3].Penggunaanmikroalgaolehmanusiatelahdimulaisejak2.000tahunsilamdiCina, dimana Nostoc sp dikonsumsi sebagai bahan pangan untuk bertahanselama wabah kelaparan [4]. Bangsa Aztec telah mengkonsumsi Spirulinapadaabad14-16.Produksimikroalgasebagaistokpanganmulaidigalakkansecara masiv pada saat perang dunia kedua, di mana Jepang, Amerika, danJermanwaktuitusedangmenghadapikrisis. Namun,bioteknologimikroalgabaru mulai berkembang pada pertengahan abad ini. Saat ini, ada banyakaplikasikomersialdarimikroalga;antara lainproduk nutraseutikal,panganfungsional,pakanternakdalambudidaya,danjugakosmetik[2,5].

Gambar1.PeneltianMikroalgadiP2OLIPI.Sejak beberapa tahun yang lalu, mikroalga telah diaplikasikan sebagainutrasetikaldan pangan fungsionaldi berbagaibelahandunia.Mikroalgadapatdigunakan sebagai nutraseutikal dan pangan fungsional karena organisme iniberfungsi sebagaipenyediasumberprotein,karbohidrat,dan lemakalamiyangbermanfaat dalam penyediaan energi dalam tubuh. Namun, mikroalga ternyatajuga mampu berfungsi sebagai sumber vitamin, dan bahkan memberikan efekfarmakologis dalam tubuh manusia seperti melundungi hati, anti-bakteri,antioksidan, anti-kanker, anti-inflamasi [6-8]. Tidak hanya aplikasi sebagaipangan fungsional, metabolit mikroalga juga telah digunakan dalam produkkosmetik komersial. Metabolit tersebut adalah campuran polisakarida, yangdipasarkan dengan nama dagang 'Alguronic Acid'. Terdapat juga beberapa

8

produk kosmetik yang menggunakan campuran dari mikroalga sepertipolisakarida dari Porphyridium dan ekstrak Chlorella, Spirulina danAphanizomenon,ekstrakkayaproteindariSpirulinadanekstrakmikroalgayanglain. Pada Tabel 1, ditampilkan beberapa jenis mikroalga potensial dan produkturunanyayangpotensialuntukdikembangkandalamduniaindustri.Tabel1.Beragamprodukdarimikroalga,sumberdanaplikasipotensialnyaProduk Sumber Aplikasidanmanfaatβ-carotene Dunaliellasalina Pigmen(nutraseutikaldanpanganfungsional),pro-vitaminA,antioksidanAstaxanthin Haematococcuspluvialis,

ChlorellazofingiensisPewarna(budidaya),antioksidanCanthaxanthin Chlorellaspp.,mikroalgahijauyanglain Pewarna(budidaya,peternakan,danpangan),antioksidanZeaxanthin Chlorellaellipsoidea;

Dunaliellesalina(mutant)

Antioksidan,pewarnapanganLutein Scenedesmusspp.,

Muriellopsissp.,othergreenalgae

AntioksidanPhytoene,phytofluene Dunaliella Anti-oksidan,kosmetikSqualene Aurantiochytriumsp. KosmetikPolysaccharides Porphyridiumspp.,

Rhodellaspp.,Cyanobacteria

PlastikramahlingkunganMycosporine-likeaminoAcids Cyanobacteria,

Dinophyta Melindungidarisinarmatahariatauanti-UV(Kosmetik)2. PermasalahanBeragam jenis mikroalga telah dikoleksi dan dipelihara di Pusat PenelitianOseanografiLIPI(P2O-LIPI)sejakbeberapadekadeyanglalu.Namun,hinggasaat ini, potensi aktifitas biologis dan farmakologis belum diketahui dandimanfaatkan secara optimal. Selain itu, pengembangan produk potensialdarimikroalgakoleksikulturP2OLIPIjugabelumdilakukan.3. TujuandanSasaranTujuan.UntukmengetahuiaktifitasfarmakologismikroalgakoleksiP2OLIPIdanmengembangkanpotensinutraseutikalmikroalgakoleksiP2OLIPISasaran.Diperolehnyakulturmikroalgaoptimaluntuknutraseutikaldanaktifitasfarmakologisnya.4. HipotesisMikroalgamemilikibeberapakriteriadasaryanguntukdapatdiaplikasikansecara komersial. Pertama, secara genetik mikroalga merupakan kelompokyang sangat beragam karakteristik fisiologis dan biokimianya; sehinggasecaraalamimikroalgamenghasilkanasamlemak,protein,karbohidratdan

9

senyawa bioaktif yang unik. Selain itu, mikroalga dapat secara efektifmenggabungkan unsur C, N, dan H menjadi biomassa dan mensintesaberbagaisenyawabioaktif.Mikroalgamerupakansuatukelompokorganismeyang sangat besar dan belum banyak dieksplorasi sehingga secara umumsangatpotensialuntukdikembangkanuntuknutraseutikal.

10

B. PROSEDURDANMETODOLOGIB.1 BahanMikroalga koleksi kultur P2O LIPI, ethanol, aseton, 96 well plate, 10 ml plasticpipet (disposable),25 mlplasticpipet (disposable),DMEMhigh glucosewithLglutamine, Fetal bovine serum, antibiotic-antimycotic, trypsin-EDTA, centrifugetubecentristarcap15mldan50ml,10×Phosphatebufferedsaline,MTT,aquabidestilatasteril,yellowtips,bluetips,whitetips,1.5mlcleartubes,anaerobicjar (Vol. 2.5 L), Lid ofr anaerobic jar, trizol reagent, DMSO, oligo dT, DPPH, β-carotene, linoleicacid,DEPCwater,M-MLVreversetranscriptase,dNTPmix,go-taq DNA polymerase, primer (housekeeping gene, caspase and pro-survival),agarose, TEAE buffer, bakteri, nutrient broth, brucella agar, agar darah, brainhearthbroth,darah domba,petridish,T-25 flasks,T-75 flasks,96wellplate,6-wellplate,cellculturedish,enzyme.B.2 AlatRotavapor(IKA),tanur,hairdryer,microplatereader(Tecan),centrifuge,vortex,incubator CO2, autoclave, lemari pendingin, incubator bakteri dan sel, ovenvakum,mikropipet,pipetboy,laminarflow,vacusafe.B.3 SterilisasiAlatdanKulturmikroalgaSeluruhperalatandibersihkandengancara dicucidengansabun teepol, setelahitudibilasdenganmenggunkanairtawarhinggabersihdantidakmeninggalkanaromasabunsebelumnya,setelahitudikeringkan.Untukperalatanyangterbuatdarigelassetelahdikeringkan,alat-alattersebutkemudiandimasukkankedalamautoclave disterilisasi dengan autoclave pada temperatur 121°C, selama 15-20menitkemudiandimaskkankedalamovendengansuhu50°Chinggakering.Selanjutnya penyiapan air media. Air laut dan akuades yang telah dituangkandalam toples dan Erlenmeyer 250 ml diukur salinitasnya (28-30) kemudiandisterilisasidenganautoclavpadatemperatur121°C,selama15-20menit.Media kultur mikroalga kemudian disiapkan (F/2). Campuran antara air danmediadiaerasihinggalarutsempurnaini.Bibit/startermikroalgaedituangkansebanyak1%darivolumekultur,sebelummenuangkan bibit, terlebih dahulu hitung kepadatan selnya. Mulut Erlenmeyerditutupdengankertasalumuniumfoilsambildiaerasi.Untuk mendapatkan kepadatan sel yang diinginkan dihitung menggunakanhaemocytometer yang diletakkan pada microskop dengan rumus: N = n x 104Sel/mlKeterangan:N : Jumlahsel fitoplanktonpermln : Jumlahselpadablokhaemacytometer. MIkroalgae dikultur selama 13 hari dan dipanen denganmetodesentrifugasi.

11

B.4. EkstraksimikroalgaSediaan mikroalga yang berupa serbuk ditimbang dan dimaserasi denganmenggunakan menggunakan pelarut etanol (1:10, w/v). Ekstraksi dilakukansebanyak tiga kali. Hasil ekstraksi kemudian disaring dan dipekatkan denganrotaryevaporatorpadasuhu40°C.B.5KarakterisasiMutuEkstrakStandardisasi ekstrak meliputi parameter non spesifik dan parameter spesifik.Parameter non spesifik meliputi: susut pengeringan dan bobot jenis, kadar air,kadar abu, sisa pelarut, cemaran mikroba (meliputi ALT dan AKK). Sedangkanuntuk parameter spesifik meliputi: pemeriksaan makroskopik ekstrak yaitudenganmengamatiwarna,bau,adanyalendir,cendawansertapengotorlainnya,ukuranpartikel dankonsistensi. Ekstrakyangdiperolehdiuji semuaparametertersebutuntukmenjaminmutuekstrakyangdidapat.B.6. AnalisaAsamLemakAnalisa komposisi asam lemak dilakukan dengan menggnakan GCMS. Sampel lemak yangtelah diesterifkasi diinjeksikan ke dalam kolom GC dengan menggunakan metodeautosampler. Pemisahan dilakukan dalam kolom RTx 1-MS Restech, 30 m x 0.25 mm ID,0.25 μm dengan fase diam Poly dimethyl xiloxan, suhu injector 280 °C, suhu kolom70 dinaikkan sampai 300 °C dengan kenaikan 10 °C per menit., laju alir 1.15 mL per menit.Detektor yang digunakan adalah Electron Multifer Detector (EMD) 70 MeV. Hasilanalisa berupa spectrum massa dibandingkan dengan library.B.7 PengujianaktivitaspenangkalradikalbebasPenangkalradikalbebasdi(phenyl)-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium(DPPH)Ekstrakdilarutkandalamethanoldandibuatberbagaiserikonsentrasi. Blankoberupa campuran 75μl ethanol ditambah 75μl ekstrak, sedangkan larutansampel terdiri dari 75μl DPPH ditambah 75μl ekstrak. Blanko maupun sampeldiinkubasiselama30menitdiruanggelap,kemudiandiukurabsorbansinyapadapanjang gelombang 517 nm menggunakan microplate reader (Tecan InfiniteM200Pro-seriesTecan,Austria)Aktivitaspenghambatandihitungmenggunakanrumus:%Penghambatan=

%1000

0

DPPH

DPPHDPPH s

0DPPH =KonsentrasiDPPHawal sDPPH =KonsentrasiDPPHakhiryangtersisaPenangkalradikalbebasβ-karotenasamlinoleatAktivitas penangkal radikal bebas ditentukan dengan menggunakan tes β-karotenasamlinoleat.Sekitar5mgβ-karoten(tipeIsintetis,Sigma-Aldrich),25ml asam linoleat, 200 ml tween 40 dilarutkan dalam kloroform (10 ml).Kloroform dievaporasi menggunakan rotary evaporator (RE-52AA) pada 40 °Cselama 5 menit. Sebanyak 200 μl dari emulsi β-karoten asam linoleatdidistribusikan di masing-masing 96-well plate. Methanol digunakan sebagaiblanko.Selanjutnya,96-wellplatediinkubasipada50°C,danabsorbansidiukur

12

menggunakan microplate reader pada 492 nm. Bacaan dari semua sampeldilakukansegerapadawaktunoldansetiap15menithingga180menit.B.8. UjiAktivitasAntibakteriUji aktivitas antibakteri pada penelitian ini menggunakan metode difusi agar.Untukmengetahuiefektivitasbakteriujidigunakanpembandingantibiotik,yaituampisilin karena termasuk salah satu antibiotik dengan spektrum pemakaianyang luas, lebih murah dan mudah diperoleh. Isolat bakteri uji yang telahdikulturdalammedianutrientbrothselama24 jamdioleskanpadapermukaanmediainokulasi(nutrienagaryangtelahdituangpadaPetridish)menggunakankapas lidi steril. Sebanyak 20 µL ekstrak diteteskan pada paper diskmenggunakan pipet mikro, selanjutnya paper disk yang telah mengandungekstrak diletakkan pada permukaan media inokulasi menggunakan pinset.Bakteridiinkubasi selama24 jampadasuhu30°C.Diameterzonahambatyangterbentukdiukurdenganpenggaris(skalaterkecil1mm).Semuaprosesdiatasdilakukansecaraaseptis.

13

C. HASILPENELITIANDANPEMBAHASANKulturmikroalgaP2OLIPItelahdonulaisejakbulanMaret2017(Gambar2).Hinggaakhirtahun2017,17jenismikroalgatelahdikulturdandianalisanutrisimaupunaktifitasfarmakologisnya.Ketujuhbelasmikroalgatersebutadalah:

Gambar2.SpesiesmikroaalgakoleksiP2OLIPI

14

UntukmendapatkanprofiloptimumpertumbuhanmikroalgakoleksiP2OLIPI,makaketujuhbelasmikroalgatersebutdikulturdandihitungkepadatanselnyaselamatigabelashari.KurvapertumbuhanmikroalgaditampilkanpadaGambar3-19.

Gambar3.KurvapetumbuhanmikroalgaChlamydomonassp

Gambar4.KurvapertumbuhanmikroalgaChlorellasp(Ancol)

15

Gambar5.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Ancol)

Gambar6.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Bitung)

16

Gambar7.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Cilegon)

Gambar8.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Gondol)

17

Gambar9.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Kutai)

Gambar10.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorissp(Serayu)

18

Gambar11.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochlorisatomus

Gambar12.KurvapertumbuhanmikroalgaNannochloropsisoculata

19

Gambar13.KurvapertumbuhanmikroalgaNaviculaweissflogii

Gambar14.KurvapertumbuhanmikroalgaPavlovasp(Gondol)

20

Gambar15.KurvapertumbuhanmikroalgaPlatymonassp

Gambar16.KurvapertumbuhanmikroalgaPorphyridiumsp

21

Gambar17.KurvapertumbuhanmikroalgaT.iso(Gondol)

Gambar18.KurvapertumbuhanmikroalgaTetraselmissuecica

22

Gambar19.KurvapertumbuhanmikroalgaTetraselmissp(Ancol)Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh hasil sintasan yang tertinggi yaitu padamikroalga jenis Nannochloris sp. Nannocloropsis sp merupakan genus gangganghijau bersel satu atau tunggal yang dapat hidup di air tawar, laut, dan tempatbasah. Ganggang ini memiliki bentuk seperti bola dan memiliki kloroplasberbentukmangkuk.Perkembangbiakannyaterjadisecaravegetatifdengancaramembelahdiri.Setiapselnyamampumembelahdiridanmenghasilkanempatselbaruyangtidakmemilkiflagel.Secara umum, kurva pertumbuhan mikrolga terbagi ke dalam lima fase antaralain:faselag,logaritmik,penurunanlajupertumbuhan,stasioner,dankematian.Terdapat beberapa faktor yang dapat mempengaruhi laju pertumbuhanmikroalga antara lain pH, salinitas, suhu, cahaya, nutrient, karbondioksida danaerasi.Selanjutnya,mikroalgadipanendandianalisakandunganasamlemaknya.

23

ProfilasamlemakmikroalgakoleksiP2OLIPIdisajikanpadaTabel2-18.Secaraumum mikroalga tersebut mengandung asam lemak esensial (Linoleic Acid)dalam jumlah yang cukup signifikan. Linoleic acid termasuk ke dalam PolyUnsaturated Fatty Acid (PUFA) atau asam lemak tak jenuh merupakan asamlemakyangmemilikiikatanrangkapduaataulebihyangmemilikititiklelehlebihrendahdibandingMonoUnsaturatedFattyAcid(MUFA).Fungsi PUFA adalah metabolisme lemak, imunitas serta intergritas dan fungsimembran sel dipertahankan. Asam linoleat dan asam alfa linolenat hanya dapatberasal dari makanan contohnya mikroalga karena tubuh tidak mempunyaienzim ∆12 dan ∆15-desaturase. Hal ini menjadikan mikroalga potensial untukdikembangakan sebagai nutraseutikal bagi manusia.Tabel2.KomposisiAsamLemakChlamydomonassp

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.49PalmiticAcid C16:0 31.02StearicAcid C18:0 1.80UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 1.06ElaidicAcid C18:1(n-9) 18.66OleicAcid C18:1(n-9) 2.39EicosenoicAcid C20:1(n-9) 1.98HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 0.71LinoleicAcid C18:2(n-6) 8.51LinolenicAcid C18:3(n-6) 13.52StearidonicAcid(SDA) C18:4(n-3) 1.61EicosapentaenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 5.20DocosahexaenoicAcid(DHA) C20:4(n-9) 1.15Other’s 11.87Tabel3.KomposisiAsamLemakChlorellasp(Ambon)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 12.66StearicAcid C18:0 0.76ArachidicAcid C20:0 4.48UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 5.12OleicAcid C18:1(n-9) 2.207,10-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 9.589,12-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 0.237,10,13-HexadecadienoicAcid C16:3(n-3) 8.11LinoleicAcid C18:2(n-6) 47.18Other’s 9.68

24

Tabel4.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Ancol)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.32PalmiticAcid C16:0 20.09StearicAcid C18:0 1.17UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 2.74ElaidicAcid C18:1(n-9) 22.25VaccenicAcid C18:1(n-7) 3.73LinoleicAcid C18:2(n-6) 17.55LinolenicAcid C18:3(n-6) 15.44HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 6.90Other’s 9.82Tabel5.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Bitung)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.48PalmiticAcid C16:0 19.79StearicAcid C18:0 5.75CeroticAcid C18:0 0.37UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 1.85ElaidicAcid C18:1(n-9) 1.77OleicAcid C18:1(n-9) 1.96EicosenoicAcid C20:1(n-7) 0.217,10-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 2.49HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 5.34LinoleicAcid C18:2(n-6) 20.78LinolenicAcid C18:3(n-6) 11.4Other’s 27.78

25

Tabel6.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Cilegon)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 23.08ValericAcid C5:0 0.23CaprylicAcid C8:0 0.13MargaricAcid C17:0 0.10NonadecyclicAcid C19:0 4.84UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 2.25ElaidicAcid C18:1(n-9) 17.78OleicAcid C18:1(n-9) 0.71VaccenicAcid C18:1(n-7) 1.76EicosenoicAcid C20:1(n-9) 0.22LinoleicAcid C18:3(n-6) 13.88LinolenicAcid C18:2(n-6) 16.46Other’s 13.15Tabel7.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Gondol)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 19.52TridecyclicAcid C13:0 0.77CaprylicAcid C8:0 0.11CeroticAcid C26:0 0.48StearicAcid C18:0 5.88LignocericAcid C24:0 0.21Margaric C17:0 0.11NonadecyclicAcid C19:0 4.59UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 2.45ElaidicAcid C18:1(n-9) 22.48OleicAcid C18:1(n-9) 2.12PaullinicAcid C20:1(n-7) 0.24LinoleicAcid C18:3(n-6) 12.33LinolenicAcid C18:2(n-6) 17.60Other’s 11.19

26

Tabel8.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Kutai)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.75PalmiticAcid C16:0 18.78StearicAcid C18:0 3.58NonadecyclicAcid C19:0 5.18CeroticAcid C26:0 0.58UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 2.07ElaidicAcid C18:1(n-9) 20.18OleicAcid C18:1(n-9) 4.09EicosenoicAcid C20:1(n-7) 0.327,10-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 3.319,12-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 0.12HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 5.93LinoleicAcid C18:2(n-6) 18.01Alpha-LinolenicAcid(ALA) C18:3(n-3) 12.92Other’s 4.21Tabel9.KomposisiAsamLemakNannochlorissp(Serayu)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 21.46MyristicAcid C14:0 0.57ValericAcid C5:0 0.17StearicAcid C18:0 5.59ArachnidicAcid C20:0 4.26UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 1.87IsooleicAcid C18:1(n-8) 20.59OleicAcid C18:1(n-9) 2.83LinoleicAcid C18:3(n-6) 11.46LinolenicAcid C18:2(n-6) 20.27Other’s 10.94

27

Tabel10.KomposisiAsamLemakNannochlorisatomus

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 13.9StearicAcid C18:0 0.44ArachidicAcid C20:0 3.60Valericacid C5:0 0.34UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 4.71OleicAcid C18:1(n-9) 0.66ElaidicAcid C18:1(n-9) 1.737,10,13-HexadecatrienoicAcid C16:3(n-3) 8.689,12-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 11.6LinoleicAcid C18:2(n-6) 18.85LinolenicAcid C18:3(n-6) 27.78Other’s 6.87Tabel11.KomposisiAsamLemakNannochloropsisoculata

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.48ValericAcid C16:0 0.11PalmiticAcid C18:0 19.2StearicAcid C18:0 2.34UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 2.18ElaidicAcid C18:1(n-9) 23.92OleicAcid C18:1(n-9) 6.12EicosenoicAcid C20:1(n-9) 6.127,10-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 0.31HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 3.09LinoleicAcid C18:2(n-6) 17.36Alpha-linolenicacid (ALA) C18:3(n-3) 12.6Other’s 7.09

28

Tabel12.KomposisiAsamLemakNaviculaweisflogii

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.98PalmiticAcid C16:0 30.34PentadecanoicAcid C15:0 0.55LignocericAcid C24:0 1.59UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 33.81ElaidicAcid C18:1(n-9) 0.85OleicAcid C18:1(n-9) 2.41ArachidonicAcid C20:4(n-6) 5.53HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 3.00MeadAcid C20:3(n-9) 0.81EicosapentaenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 15.50DocosahexaenoicAcid(DHA) C20:4(n-9) 0.76Other’s 3.87Tabel13.KomposisiAsamLemakPavlovasp

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 8.10PentadecyclicAcid C15:0 0.28NonadecyclicAcid C19:0 1.16PalmiticAcid C16:0 17.46StearicAcid C18:0 1.94UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 3.59ElaidicAcid C18:1(n-9) 24.18OleicAcid C18:1(n-9) 2.3210Z-HeptadecenoicAcid C17:1(n-7) 0.64LinoleicAcid C18:2(n-6) 7.88LinolenicAcid C18:3(n-6) 7.38DocosahexaenoicAcid(DHA) C22:6(n-3) 7.18EicosapentaenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 0.97Other’s 16.91

29

Tabel14.KomposisiAsamLemakPlatymonassp

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PalmiticAcid C16:0 23.78UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 5.74ElaidicAcid C18:1(n-9) 4.77OleicAcid C18:1(n-9) 29.20PaulliniAcid C20:1(n-7) 2.10LinoleicAcid C18:2(n-6) 4.12LinolenicAcid C18:3(n-6) 9.28StearidonicAcid(SDA) C18:4(n-3) 2.34EicosapentaenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 6.62ArachidonicAcid(AA) C20:4(n-9) 1.58Other’s 10.48Tabel15.KomposisiAsamLemakPorphyridiumsp

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0PalmiticAcid C16:0StearicAcid C18:0ArachidicAcid C20:0UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7)OleicAcid C18:1(n-9)7,10-HexadecadienoicAcid C16:3(n-3)LinoleicAcid C18:2(n-6) 0.79LinolenicAcid C18:3(n-6) 18.23StearidonicAcid(SDA) C18:4(n-3) 0.47EicosapentenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 9.78EicosatrienoicAcid(ETE) C20:3(n-3) 4.12Other’s 0.77

30

Tabel16.KomposisiAsamLemakT.iso(Gondol)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.18PalmiticAcid C16:0 20.22StearicAcid C18:0 22.73NonadecyclicAcid C19:0 0.25BehenicAcid C22:0 0.21LignocericAcid C24:0 0.16UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 3.05ElaidicAcid C18:1(n-9) 18.89EicosenoicAcid C20:1(n-9) 0.47OleicAcid C18:1(n-9) 1.26MyristoleicAcid C14:1(n-3) 0.057,10-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 1.539,12-HexadecadienoicAcid C16:2(n-3) 0.32HexadecatrienoicAcid(HTA) C16:3(n-3) 3.76EicosapentaneoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 0.27LinoleicAcid C18:2(n-6) 12.24Alpha-LinolenicAcid(ALA) C18:3(n-3) 10.25Stearidonicacid (SDA) C18:4(n-3) 3.41Arachidonicacid (AA) C20:4(n-6) 0.18Docosapentaenoicacid(DPA C22:5(n-6) 0.57Docosahexaenoicacid (DHA) C22:6(n-3) 5Gamma-linolenicacid (GLA) C18:3(n-6) 0.23Other’s 13.68

31

Tabel17.KomposisiAsamLemakTetraselmissuecica(Manado)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid PropionicAcid C3:0 0.18PalmiticAcid C16:0 20.22StearicAcid C18:0 22.73CaproicAcid C6:0 0.25CaprylicAcid C8:0 0.21ValericAcid C5:0 0.16ArachidicAcid C20:0 0.25LignocericAcid C24:0 0.24UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 3.02ElaidicAcid C18:1(n-9) 4.19EicosenoicAcid C20:1(n-9) 2.767,10-HexadecadienoicAcid C16:3(n-3) 0.45ArachidonicAcid(AA) C20:4(n-6) 0.66Docosahexaenoic Acid(DHA) C22:6(n-3) 0.26LinoleicAcid C18:3(n-6) 5.93LinolenicAcid C18:2(n-6) 12.48Other’s 14.51Tabel18.KomposisiAsamLemakTetraselmissp(Ancol)

Types Name Formula Area(%)SaturatedFattyAcid MyristicAcid C14:0 0.29PalmiticAcid C16:0 22.14StearicAcid C18:0 0.47HexanoicAcid C6:0 0.31UnsaturatedFattyAcid PalmitoleicAcid C16:1(n-7) 5.86ElaidicAcid C18:1(n-9) 29.387,10-HexadecadienoicAcid C16:3(n-3) 0.77LinoleicAcid C18:2(n-6) 3.72LinolenicAcid C18:3(n-6) 11.67StearidonicAcid(SDA) C18:4(n-3) 2.58EicosenoicAcid C20:1(n-9) 2.26EicosapentaenoicAcid(EPA) C20:5(n-3) 7.81ArachidonicAcid(AA) C20:4(n-9) 3.01DocosahexaenoidAcid(DHA) C22:6(n-3) 0.47Other’s 9.26

32

Gambar20.RendemenhasilekstraksimikroalgaTabel19.AktifitasantioksidanekstrakmikroalgaNo. Spesies IC501 Nannochloris sp. Ancol 6,772 Nannochloris sp. Cilegon 3,773 Nannochloris sp. Kutai 7,724 Nannochloris atomus Gondol 1,925 Navicula weisflogii Ambon 5,886 Nannochloris sp. Bitung 3,207 Nannochloris sp. Gondol 2,608 Nannochloris sp. Serayu 1,459 Porphyridium sp.10 Nannochloropsis oculata Gondol 3,3611 Tetraselmis suecica Manado 3,4212 Pavlova sp. Gondol 3,1813 T. iso Gondol 2,1214 Chlamydomonas sp. 2,0815 Chlorella sp. Ancol 5,4116 Tetraselmis sp. Ancol 2,5717 Platymonas sp. 2,87

33

Setelah diekstraksi dengan ethanol, ekstrak mikroalga kemudian diuji aktifitasantioksidannya. Uji aktivitas antioksidan dilakukan secara kuantitatif. Ujikuantitatif dilakukan dengan menghitung persentase inhibisi seri larutan uji.AktivitasantioksidandiekspresikandengannilaiIC50yangmenunjukkanbahwakonsentrasilarutanujiyangdibutuhkanuntukdapatmenginhibisi50%aktivitasradikal bebas. Pengujian dengan absorbansi peredaman radikal bebas DPPHdilakukan terhadap BHT, ekstrak etanol mikroalga dibuat dengan berbagaikonsentrasi. Absorbansi sampel dihitung aktivitas antioksidan dalam bentuk %inhibisi. BHT sebagai kontrol positif memiliki IC50 sebesar 0.15 mg/mL danekstrak kasar etanol mikroalga jenis Nannochloris sp (Serayu) mempunya IC50terendah(1.45mg/mL)diikutiolehNanochlorisatomusdanChlamydomonas sp.Semakin kecil nilai IC50 menunjukkan semakin besar aktifitas antioksidan suatuekstrak. Hasil uji menunjukan bahwa Nannochloris sp. memiliki aktivitas antioksidanterkuat.Dalam penelitian ini jika dilihat dari nilai uji DPPH, mikroalga yang diuji sangat potensial sebagai sumber antioksidan karena rendahnya nilai IC50

yang diperoleh. Bahan dikatakan sebagai antioksidan sangatkuat apabila memiliki nilai IC50 kurang dari 50 ppm,kuat apabila nilai IC50 antara 50–100 ppm, sedang apabila nilai IC50 antara 10–150 ppm, lemah apabila memiliki nilai IC50 antara 150–200 ppm, danangat lemah apabila memiliki nilai IC50 lebih dari 200 ppm (Molyneux, 2004).Aktifitas antibakteri ekstrak mikroalga ditunjukkan pada Tabel 20. Hampirsemua eksrak mikroalga emenunjukkan aktifitas anti bakteri (Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis) yang potensial.Hasil uji fitokimia dari biomassa mikroalga menunjukkan bahwa mikroalgamengandung senyawa pigmen (klorofil dan karotenoid) dan fenol yangbervariasi (Table 21). Kandungan senyawa fitokimia dipengaruhiberbagai faktor yaitu spesies, varietas, kondisipertumbuhan, variasi musim, metode pengolahan dan penyimpanan. Hasil ujikandungan total fenol menunjukkan bahwa miktoalga mengandung fenolbervariasi antara 0,34 sampai dengan 19.25 mg GAE/g DW. Adanyaperbedaan total fenol pada spesies yang samadimungkinkan karena total fenol dipengaruhi beberapa faktor diantaranyaadalah stress yang dapat memicu kandungan senyawa fenol.Kandungan total fenol pada tanaman dipengaruhi bebrapa faktor antara laingenetik, lingkungan dan teknologi yang diterapkan setelah proses pemanenan.Kandunganfenolikberperanpentingdalamaktifitasantioksidandanantibakterimikroalga. Hal ini sesuai dengan beberapa penelitian yang menyimpulkanbahwa fenolik menjadi senyawa aktif utama di banyakspesies tanaman tingkat tinggi seperti, sayuran, buah dan tanaman medis.Senyawa fenolik dapat berperan sebagai antioksidan karena kemampuannyauntuk mendonasikan atom hydrogen atau electron dalam membentukintermediate radikal bebas yang stabil. Hasil ini sejalan dengan penelitianHajimahmoodi et al. (2009) serta Shetty (2015) yang menyimpulkan bahw fenolmerupakancontributorutama terhadap aktivitas antioksidan mikroalga.

34

Tabel20.AktifitasantibakteriekstrakmikroalgaNo Mikroalga Escherichia

coliPseudomonasaeruginosa

Staphylococcusaureus Bacillus subtilisAve Stdev Ave Stdev Ave Stdev Ave Stdev1 Nannochlorissp.Ancol 9,23 0,56 7,85 0,83 8,81 0,43 9,50 2,142 Nannochlorissp.Cilegon 9,79 0,35 8,00 0,71 8,19 0,90 10,60 1,413 Nannochlorissp.Kutai 8,26 0,84 7,16 0,85 7,60 0,49 7,43 0,314 Nannochlorisatomus 7,99 1,93 7,58 1,07 8,13 1,71 7,73 0,755 NaviculaweisflogiiAmbon 10,98 0,61 9,35 1,05 14,88 0,92 13,10 0,966 Nannochlorissp.Bitung 7,75 1,30 10,58 0,57 8,63 0,49 7,85 0,267 Nannochlorissp.Gondol 10,63 0,93 7,05 0,45 9,98 1,82 9,00 0,238 Nannochlorissp.Serayu 9,98 2,25 10,31 1,81 8,68 0,38 10,00 2,349 Porphyridiumsp. 10,64 0,70 8,88 0,25 9,40 0,37 9,95 0,5710 Nannochloropsisoculata 8,14 0,95 8,01 0,49 8,45 - 4,98 0,8011 Tetraselmissuecica 7,24 1,01 8,35 0,43 7,69 0,68 4,33 0,6412 Pavlovasp.Gondol 9,80 0,83 10,14 1,13 8,91 0,49 9,36 1,2013 T.isoGondol 9,99 0,15 9,09 0,56 9,96 0,46 8,36 0,9214 Chlamydomonassp. 7,30 0,54 7,50 0,46 7,58 1,10 7,20 0,1215 Chlorellasp.Ancol 7,23 0,69 8,31 0,61 9,36 0,59 5,80 0,7416 Tetraselmissp.Ancol 6,99 1,81 7,00 0,98 8,58 0,29 7,15 0,7017 Platymonassp. 7,55 1,79 7,49 0,52 8,83 0,14 6,84 1,0318 Metanol 4,33 0,79 5,08 0,67 7,48 0,81 5,58 0,39

35

Tabel21.KandunganPigmendanPhenolekstrakmikroalgaNo. Spesies Pigmen Phenol(GAE/g)Chlorofil

aChlorofil

b Caroten1 Nannochloris sp. Ancol 0,73 1,64 0,32 3,372 Nannochloris sp. Cilegon 2,20 2,70 1,17 6,013 Nannochloris sp. Kutai 0,60 1,05 0,20 0,494 Nannochloris atomus Gondol 2,66 3,00 2,16 8,405 Navicula weisflogii Ambon 0,89 1,05 0,43 0,346 Nannochloris sp. Bitung 2,18 2,42 1,52 6,057 Nannochloris sp. Gondol 4,07 10,17 2,51 19,258 Nannochloris sp. Serayu 2,95 2,68 2,07 8,329 Porphyridium sp. 0,81 1,68 n.a n.a10 Nannochloropsis oculata Gondol 1,20 2,25 1,21 4,9911 Tetraselmis suecica Manado 2,71 4,81 0,98 8,8312 Pavlova sp. Gondol 0,39 0,94 n.a n.a13 T. iso Gondol 1,05 3,20 0,60 4,0814 Chlamydomonas sp. 2,30 3,10 1,64 8,3015 Chlorella sp. Ancol 0,93 1,37 1,02 3,5916 Tetraselmis sp. Ancol 2,05 3,29 1,25 16,6717 Platymonas sp. 2,25 4,48 0,99 8,72

36

D. KESIMPULANDANSARANSemogapengadaanbahanygindentdapatberlangsunglebihcepatdemikelancaranpenelitian.MikroalgakoleksiP2OLIPImempunyaaktifitasfarmakologisyangbaik.Olehkarenaitudiperlukanpenelitianlanjutanuntukdapatdikembangkansebagainutraseutikal.E. REKAPITULASIPENGGUNAANDANA(PERIODE1FEBRUARI-30NOVEMBER2017)NO JENISBELANJA PAGU

ANGGARANDAYASERAP SISAJUMLAH %01 Honorariumpenunjangpenelitian/perekayasa 6.000.000 6.000.000 100 - -02 Honorariumkegiatanseminar/rakor/sosialisasi/diseminasi/FGD/kegiatansejenis - - - -

03 BelanjaBahan(habispakai) 168.631.000 168.630.350 99.99 - -04 BelanjaBarangNonOperasional 3.400.000 3.400.000 100 - -05 Belanjaperjalananlainnya 22.586.000 22.586.000 100 -06 Kegiatanrapat/pertemuandiluarkantor(dalam/luarkota) - -07 PeralatandanMesin(rancangbangun) - -JUMLAHSELURUHNYA 200.617.000 200.615.870 99.99 - -

37

F. DAFTARPUSTAKA1. Borowitzka, M. A., High-value products from microalgae—theirdevelopmentandcommercialisation.JApplPhycol2013,25,(3),743-756.2. Priyadarshani,I.;Rath,B.,Commercialandindustrialapplicationsofmicroalgae–Areview.Jalgalbiomassutln2012,3,(4),89-100.3. Pangestuti,R.;Kim,S.-K.,Biologicalactivitiesandhealthbenefiteffectsofnaturalpigmentsderivedfrommarinealgae.JournalofFunctionalFoods2011,3,(4),255-266.4. Gao, K., Chinese studies on the edible blue-green alga, Nostocflagelliforme:areview.JApplPhycol1998,10,(1),37-49.5. Wang,H.-M.D.;Chen,C.-c.;Huynh,P.;Chang,J.-S.,Exploringthepotentialofusingalgaeincosmetics.Bioresourcetechnology2015,184,355-362.6. Hoseini, S.; Khosravi-Darani, K.; Mozafari, M., Nutritional and medicalapplications of spirulina microalgae. Mini reviews inmedicinalchemistry2013,13,(8),1231-1237.7. Deng, R.; Chow, T. J., Hypolipidemic, antioxidant, and antiinflammatoryactivitiesofmicroalgaeSpirulina.Cardiovasculartherapeutics2010,28,(4),e33-e45.8. Yuan,J.P.;Peng,J.;Yin,K.;Wang,J.H.,Potentialhealth-promotingeffectsofastaxanthin:Ahigh-valuecarotenoidmostlyfrommicroalgae.Molecularnutrition&foodresearch2011,55,(1),150-165.

38

G. LAMPIRAN DatadananalisisdataEkstrak microalgae potensial yang potensial untuk dikembangkanmenjadiutraseutikalInformasiaktifitasnutrisimicroalgaekoleksiP2OLIPI.InformasiaktifitasfarmakologismicroalgaekoleksiP2OLIPI. RencanakerjatahunberikutnyaOptimasikulturmikroalgaygpotensialdanidentifikasimaterialfungsionalyangterkandungdalammikroalgayangpotensialuntuknutraseutikalOutcome:2KTI Abstrakpublikasiilmiah/makalahdijurnal(jikaada)BukuInternasional1. Ratih Pangestuti, Dedy Kurnianto. (2017). Green seaweeds-derivedpolysaccharides Ulvan: Occurrence, Medicinal Value and PotentialApplications. Seaweed polysaccharides. Academic Press, Elsevier,Chapter11,205-221

39

2. Evi Amelia Siahaan, Ratih Pangestuti, Se-Kwon Kim. (2017). Marinealgae: valuable ingredients for the pharmaceuticals industries. GrandChallengesinMarineBiotechnology.Springer,Accepted.

40

KTIInternasional1. Ratih Pangestuti, Se-Kwon Kim. (2017). Bioactive peptide of marineoriginforthepreventionandtretamentofnon-communicablediseases.MarineDrugs15(67),1-23.DOI::10.3390/md15030067

41

2. Ratih Pangestuti, Zainal Arifin. (2017). Medicinal and Health Benefiteffects of High-Value Sea Cucumber in Asia. Journal of Traditonal andComplementaryMedicine.InPress

42

3. EviAmeliaSiahaan,RatihPangestuti,HendraMunandar,Se-KwonKim.(2017). CosmeceteuticalsPropertiesofSeaCucumbers:ProspectsandTrends.Cosmetics,4(3),1-12

43

ArtikelPopuler1. EviAmeliaSiahaan,RatihPangestuti.(2017).PanganFungsionaldanNutrasetikaldariLaut:ProspekdanTantangannya.DEPIKJurnalIlmuPerairan,PesisirdanPerikanan,6(3),https://doi.org/10.13170/depik.6.3.6874