IDE

GOL

DAU

MET

FAKU

ENTIFIK

LONGA

UN SIRI

TODE K

H

ULTAS MA

KASI DA

AN FENO

IH HIJA

KLT SPE

HARLINA

JU

ATEMATI

UNIV

 

  

AN FING

OL DAR

AU (Pipe

EKTROF

SKRIP

SETIAWA

1208505

URUSAN FA

IKA DAN I

VERSITAS

2016

GERPRI

RI EKST

er betle L

FOTOD

PSI

ATI MANU

5019

ARMASI

ILMU PEN

UDAYANA

6

INT SEN

TRAK E

Linn.) DE

DENSITO

URUNG

NGETAHU

A

NYAWA

ETANOL

ENGAN

OMETR

UAN ALAM

i

A

L

N

RI

M

 

ii  

 

iii  

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus

karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak

Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT

Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis

mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :

1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang

telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,

nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.

2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang

telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,

nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.

3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.

4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua

Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah

membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,

saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.

5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas

MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada

penulis selama penyusunan skripsi ini.

 

iv  

6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak

Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung

penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,

S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,

terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik

moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.

7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,

Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman

bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.

8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian

Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti

yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.

9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,

dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,

Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan

semangat dan membantu saat dalam kesulitan.

10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri

dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,

dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.

11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKN-

PPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa

menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan

pemikiran dan semangat untuk penulis.

 

v  

12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan

skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada

ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.

Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.

Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat

membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis

berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang

membutuhkannya.

Bukit Jimbaran, Juli 2016

Penulis

 

vi  

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................... ii

KATA PENGANTAR .................................................................................. iii

DAFTAR ISI ................................................................................................. vi

DAFTAR GAMBAR .................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ......................................................................................... xi

DAFTARLAMPIRAN .................................................................................. xii

DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN .................................................... xiii

ABSTRAK .................................................................................................... xv

BAB IPENDAHULUAN .............................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ........................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ..................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................... 4

BAB IITINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 5

2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.) ............................................. 5

2.1.1 Klasifikasi ....................................................................... 5

2.1.2 Deskripsi Tanaman ......................................................... 5

2.1.3 Kandungan Kimia ........................................................... 6

2.1.4 Khasiat dan Kegunaan .................................................... 6

2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia ......................................... 7

 

vii  

2.2 Senyawa Fenol ........................................................................... 7

2.3 Metode Ekstraksi ....................................................................... 8

2.3.1 Ekstraksi Secara Umum .................................................. 8

2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih ....................................................... 9

2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi

Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......................................... 10

2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ...... 10

2.4.2 Parameter Kromatogram ................................................. 11

2.5 Kromatografi Fingerprint .......................................................... 14

2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam

Kromatografi Fingerprint ............................................... 15

BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................ 17

3.1 Rancangan Penelitian ................................................................ 17

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ..................................................... 17

3.3 Alat dan Bahan Penelitian ......................................................... 17

3.3.1 Bahan Penelitian ............................................................. 17

3.3.2 Alat Penelitian ................................................................. 18

3.4 Prosedur Penelitian .................................................................... 18

3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih ..................... 18

3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau ................. 19

3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan ......................................... 19

3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper

betle Linn.) ...................................................................... 19

 

viii  

3.4.5 Pemilihan Fase Gerak ..................................................... 20

3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol

dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ............... 21

BAB IV PEMBAHASAN ............................................................................. 23

4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman .................................. 23

4.2 Penetapan Susut Pengeringan .................................................... 23

4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ......................... 24

4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan

Fase Gerak ................................................................................. 25

4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol

dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ......................... 31

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 37

5.1 Kesimpulan ................................................................................ 37

5.2 Saran .......................................................................................... 37

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 38

LAMPIRAN .................................................................................................. 41

 

ix  

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tanaman Sirih(Piper betle L.) ............................................... 6

Gambar 2.2 Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ................................... 13

Gambar 4.1 Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..... 25

Gambar 4.2 Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun

Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat

(93:7 v/v) ............................................................................... 26

Gambar 4.3 Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram

Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau

yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) ....... 27

Gambar 4.4 Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun

Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format

(3:3:0,2 v/v) ........................................................................... 28

Gambar 4.5 Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram

Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau

yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) ..... 29

Gambar 4.6 Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak

Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .............................. 32

Gambar 4.7 Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan

Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang

Gelombang 210 nm ............................................................... 33

 

x  

Gambar 4.8 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa

Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang

Dipindai pada panjang gelombang 210 nm .......................... 34

Gambar 4.9 Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan

Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang

Gelombang 283 nm ............................................................... 35

Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa

Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang

Dipindai pada panjang gelombang 283 nm .......................... 36

 

xi  

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih

Hijau (Piper betle Linn.) ............................................................. 24

Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan

Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak .......................................... 30

 

xii  

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian .......................................................... 41

Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .. 42

 

xiii  

DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN

AUC : Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak

dalam kromatogram

Ekstrak : Hasil dari proses menyari simplisia

Elusi : Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan

mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,

melewati kompleks penjerap-analit

Fase diam : Adsorben yang digunakan dalam kromatografi

Fase gerak (FG) : Pelarut atau eluen dalam kromatografi

Fingerprint : Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram

HPTLC : High Performance Thin Layer Chromatography

Integritas : Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam

tindakan-tindakan, nilai-nilai, metode-metode,

prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

Kontrol kualitas : Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu

produk melalui proses penelitian, pengembangan serta

perancangan produk

Kromatografi : Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola

pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang

berada pada larutan

Kromatogram : Data yang diperoleh dari teknik kromatografi

 

xiv  

Metabolit sekunder : Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber

alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek

fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.

NMR : Nuclear Magnetic Resonance

Resolusi (Rs) : Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang

lain

Rf : Retardation Factor

Spektrofotodensitometri : Detektor dengan prinsip interaksi radiasi

elektromagnetik dengan analit yang merupakan

noda/bercak pada plat

Spektrum : Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang

menjadi identitas suatu senyawa

Standardisasi : Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri

dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari

suatu halyang didokumentasikan

Tailing : Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke

belakang

Tf : Tailing Factor

TLC : Thin Layer Chromatography

WHO : World Health Organization

 

xv  

ABSTRAK

Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.

Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7 v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan Folin-Ciocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283 nm.

Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.

 

xvi  

ABSTRACT Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities

such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a quality determination that provides phytochemistry profile and consistent pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLC-spectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint profile of phenol compound.

Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol 96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLC-spectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena: ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19; 0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound was 283 nm. Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry, ethanol extract.