ANALISIS SENYAWA FENOL

Dosen : Yasmiwar Susilawati, S.Si, M.Si.

POKOK BAHASAN :

1. Fenol dan Asam fenolat2. Fenilpropanoid

3. Flavonoid4. Tanin

ANALISIS SENYAWA FENOL

◦ Merupakan senyawa yang berasal dari tumbuhan dengan ciri memiliki cincin aromatik yang mengandung satu atau lebih gugus hidroksi (-OH)

◦ Analisis senyawa fenol biasanya berkaitan dg hasil degradasi flavonoid atau polifenol dalam suasana basa dimana : degradasiFlavonoid Fenol sederhanaPolifenol Asam fenolat Fenol kompleks Asam fenolat

PENGERTIAN SENYAWA FENOL

Fenol sederhana berupa zat padat tidak berwarna (jika murni), mudah teroksidasi dan warna mjd gelap

Mudah larut dlm air karena seringkali berikatan dengan gula membentuk glikosida. Kelarutan dlm air bertambah jika gugus OH makin banyak. Larut dalam pelarut organik polar

Fenol yang kelarutannya dalam air kecil, mudah larut dalam larutan basa tetapi dalam suasana basa laju oksidasi meningkat

senyawa fenol alami biasanya berada dalam btk terikat ester, eter atau glikosida, jarang yang bebas

Kelarutan senyawa ester atau fenol eter dalam air lebih rendah daripada btk bebas

SIFAT kimia fisika:

Asam fenolat terikat sbg ester tdk larut dalam etanol bersifat non polar

terikat gula sebagai glikosida larut dalam etanol bersifat polar

kelarutan

Ditambahkan larutan FeCl3 1% menimbulkan warna hijau, merah, ungu, biru atau hitam yang kuat

KKt : campuran FeCl3 1% dengan K3FeCN6 1% Flouresensi dengan sinar UV, warna diperkuat atau berubah

bila diuapi amoniak Serapan kuat di daerah spektrum UV dan menunjukkan

efek batokhromik dgn penambahan basa cara yang penting untuk analisis seny. Fenol

Vanilin sulfat (vanilin dlm H2SO4 pekat 2 :1) Vanilin – HCl (1 g vanilin dlm 10 ml HCl pekat) Folin – Ciocalteu

- Fenol dg inti katekol atau hidrokuinon : bercak biru- Fenol lain : bercak biru – kelabu bila diuapi amoniak

Deteksi umum senyawa fenol

Senyawa fenol :

1. FENOL DAN ASAM FENOLAT

OH

OH

OH OH

R

OHOHR

Hidrokuinon R = -H, resorsinol R= H, katekol R = -CH3, orsinol R=OH, pirogalol

R = -OH, floroglusinol

COOH

OH

R

Asam fenolat

COOH

OH

OMeMeO

COOH

OH

R

COOH

OMe

OH

R = H, as. p-OH-benzoat Asam siringatR = OH, as. protokatekuatR = OMe, as. vanilat

R = H, As. salisilat Asam isovanilatR = OH, asam o-protokatekuat

Penyebaran asam fenolat pada tumbuhan

Asam vanillatAsam siringat

Terdapat umum pada angiospermae

Asam salisilatAsam o-

protokatekuat

Penyebaran terbatas, khas pada suku ericaceae

Asam gentisat Tersebar luas

Asam galat Terikat sebagai galotanin

Asam elagat Terikat sebagai elagitanin

Jenis Asam Fenolat Penyebaran

1. Ekstraksi & Fraksinasi2. Kromatografi Lapis Tipis3. Kromatografi Gas Cair4. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

ANALISIS :

Ekstrak total

Tumbuhan segar / simplisia

Ekstrak kental

Ekstrak terhidrolisis (mengandung seny. fenol)

Fraksi Eter

Fraksi eter kental

EKSTRAKSI DAN FRAKSINASI

Maserasi dg pelarut EtOH 70%(3 x 24 jam, setiap 24 jam pelarut diganti)

Disaring, diuapkan (Ratavapor)

Hidrolisis asam (pemanasan 30’) atau Hidrolisis basa (T kamar ; 4 jam)

ECC dgn Eter

Diuapkan

Penyangga Silika gel Pengembang : - HOAc : CHCl3 = 1 : 9

- EtOAc : Toluen = 9 : 1

Deteksi : UV 254 (pemadaman) : bercak gelap pd latar

berflouresensi Vanilin –HCl atau Vanilin- H2SO4

(Turunan resorsinol, turunan floroglusinol bercak merah muda) Pereaksi Gibbs (2,6 diklorokuinon-kloroimida 2% dl CHCl3)

As. vanilat : merah mudaAs. isovanilat : biru Walaupun Rf hampir sama

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

◦ Harus dirubah dulu menjadi turunan eter trimetilsilil atau turunan asetat agar menjadi senyawa yang cukup dapat menguap pada suhu kromatografi

◦ Dapat mendeteksi campuran senyawa fenol sederhana yang rumit dalam jaringan tumbuhan atau asam fenolat dalam jumlah kecil (misal dari kultur jaringan

Kromatografi Gas Cair (KGC)

Fase balik (Reverse Phase) Kolom Bondapak C-18 atau Spherisorb C-

18Dengan pengembang :

H20 : MeOH : HOAc = 12 : 6 :1 H20 : HOAc : BuOH = 342 : 1 : 14

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

Pengertian : Senyawa fenol yang mempunyai cincin aromatik dengan rantai samping 3 atom C (C6-C3)

2. FENILPROPANA

Golongan Hidroksi Sinamat merupakan bangunan dasar lignin, berperan sbg pengatur tumbuh, pertahanan tubuh

Golongan Hidroksi Kumarinterdapat umum pada rumput-rumputan

Golongan Fenilpropena dan Lignanfenilpropena, umum sebagai komponen minyak atsiri

Penggolongan :

Umbeliferon, eskuletin, skopoletin, dafnetin Eugenol, anetol, miristisin, sinamaldehid,apiol Asam ferulat, Asam kafeat, Asam p-kumarat

TUGAS : studi literatur tinjauan senyawa2 diatas (manfaat/khasiat, contoh tumbuhan obat yang mengandung senyawa tersebut, struktur dan analisis fitokimianya)

Golongan lainnya yang umum ditemukan dalam tumbuhan