Analisis Instrumen I

Analisis Instrumen I

Arie BSArie BSArie BSArie BS

Metode Kalibrasi Alat

Kalibrasi

Adalah suatu proses menghubungkan sinyal analitik yang diukur (respon alat) dengan konsentrasi analit.

Metode Kalibrasi:Metode Kalibrasi:A. Kurva Kalibrasi (Kurva Baku)

B. Metode Adisi Standard

C. Metode Standard Internal




A. KURVA KALIBRASIA. KURVA KALIBRASI

Sejumlah larutan baku dengan dengan variasi konsentrasi disiapkan, kemudian diukur menggunakan instrumen, dan respon instrumen dicatat.Larutan BakuLarutan Baku – – LarutanLarutan analit yg telah diketahui

konsentrasinya. Larutan baku dibuat agar dalam pengukuran menggunakan instrumen tidak melampaui batas linearitas (LOL = Limit of Linearity) dari instrumen.

Kurva KalibrasiKurva Kalibrasi – – Plot konsentrasi baku (Plot konsentrasi baku (XX) versus respon ) versus respon instrumen (instrumen (YY).).

Hubungan antara konsentrasi baku dan respon Hubungan antara konsentrasi baku dan respon instrumen adalah linier.instrumen adalah linier.





Konsentrasi Respon Instrumen (RI) RI terkoreksi (Si – Sbl)

0,00 0.013 0.000

6.01 0.101 0.088

31.80 0.811 0.798

63.50 1.498 1.485

88.90 2.094 2.081

Sampel 0.924 0.875

Kurva Kalibrasi

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

0 20 40 60 80 100Konsentrasi

RI

terk

orek

si

1. Penyiapan Kurva Kalibrasi1. Penyiapan Kurva Kalibrasi





Gunakan metode regresi linier untuk menghitung persamaan fitting y = mx + b

1. Penyiapan Kurva Kalibrasi1. Penyiapan Kurva Kalibrasi


A. KURVA KALIBRASIA. KURVA KALIBRASI1. Penyiapan Kurva Kalibrasi1. Penyiapan Kurva Kalibrasi





Gunakan persamaan fitting y = mx + b untuk menghitung konsentrasi sampel

2. Interpretasi Kurva Kalibrasi2. Interpretasi Kurva Kalibrasi

m = 0.0236m = 0.0236 & & b = -0.00881b = -0.00881y = 0.0236x – 0.00881y = 0.0236x – 0.00881

Sehingga:Sehingga:x = (y – b)/mx = (y – b)/m

x = (y + 0.00881)/0.0236x = (y + 0.00881)/0.0236

dan:dan:x (konsentrasi sampel) = (0.875+0.00881)/0.0236x (konsentrasi sampel) = (0.875+0.00881)/0.0236

= = 37.437.4




B. METODE ADISI STANDARDB. METODE ADISI STANDARD• Digunakan untuk analit dalam matriks yang

kompleks, yg mengakibatkan terjadinya interferensi dalam respon instrumen (RI).

Contoh: darah, sedimen, serum, dll.• Sering disebut juga metode SPIKING.• Metode:

1. Siapkan beberapa aliquot identik, Vx, dari sampel.

2. Tambahkan sejumlah volume tertentu secara bervariasi, Vs, larutan baku yang telah diketahui konsentrasinya, cs, pada tiap aliquot.

3. Encerkan (add-kan) masing2 larutan hingga volume tertentu, Vt

4. Ukurlah dengan instrumen untuk mendapatkan respon instrumen, S

5. Hitung konsentrasi sampel, cx, dengan persamaan berikut:




B. METODE ADISI STANDARDB. METODE ADISI STANDARD

• Persamaan Adisi Standardt

xx

t

ss

V

ckV

V

ckVS

S =S =sinyal atau respon instrumensinyal atau respon instrumen

k =k =konstanta proporsionalitaskonstanta proporsionalitas

VVss = =volume standard yg ditambahkanvolume standard yg ditambahkan

ccss = =konsentrasi standardkonsentrasi standard

VVxx = =volume aliquot sampelvolume aliquot sampel

ccxx = =konsentrasi samplekonsentrasi sample

VVtt = =volume total pengenceranvolume total pengenceran




B. METODE ADISI STANDARDB. METODE ADISI STANDARD• Plot respon instrumen (S) vs volume standard

(Vs)

bmVS s

V s

Res

pon

s In

stru

men

(S

) m = y/ x

b = y-intercept

(V s ) 0




B. METODE ADISI STANDARDB. METODE ADISI STANDARD• Hitung konsentrasi sampel.• Kombinasikan:

bmVS s dandant

xx

t

ss

V

ckV

V

ckVS

x

sx mV

bcc





Contoh: Metode Adisi StandardContoh: Metode Adisi Standard

Arsenik in suatu sampel biologi ditetapkan dengan metode adisi standard. Arsenik in suatu sampel biologi ditetapkan dengan metode adisi standard.

10 mL aliquot sample dipipet ke dalam 5 buah labu takar 100 mL. Variasi 10 mL aliquot sample dipipet ke dalam 5 buah labu takar 100 mL. Variasi volume dari standard 22.1 ppm ditambahkan ke dalam 4 labu takar, volume dari standard 22.1 ppm ditambahkan ke dalam 4 labu takar, masingmasing22 diencerkan hingga batas. Absorbansi masing diencerkan hingga batas. Absorbansi masing22 larutan ditentukan. larutan ditentukan.

Sample (mL) Standard (mL) Absorbance

10.0 0.00 0.156

10.0 5.00 0.195

10.0 10.00 0.239

10.0 15.00 0.276

10.0 20.00 0.320

Hitung konsentrasi sampel!






Adisi Standard Arsenik

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0.45

0 5 10 15 20

Volume Standard (Vs)

Ab

sorb

ance

m = 0.00818b = 0.1554sm = 0.000119sb = 0.001463

x

sx Vm

cbc

.

.

)10)(00818.0(

)1.22)(1554.0(xc

ppm 98.41xc






•• Penggunaan Adisi Standard untuk menghitung konsentrasi sampelPenggunaan Adisi Standard untuk menghitung konsentrasi sampel

1)1) Buat 2 larutan yg mengandung aliquot sampel yg sama, tambahkan Buat 2 larutan yg mengandung aliquot sampel yg sama, tambahkan standar pada salah satu larutan. Encerkan hingga batas (100 mL)standar pada salah satu larutan. Encerkan hingga batas (100 mL)

x

ssx VSS

VcSc

12

1

dimana:dimana: SS11 = respon instrumen sampel = respon instrumen sampel

SS22 = respon instrumen sampel + spike = respon instrumen sampel + spike

2)2) Ukurlah respon instrumennya (absorbansi) pada kedua larutan.Ukurlah respon instrumennya (absorbansi) pada kedua larutan.

3)3) Hitung konsentrasi sampel dengan persamaan berikut:Hitung konsentrasi sampel dengan persamaan berikut:





Contoh: Standard Addition 2 titikContoh: Standard Addition 2 titik

Sebanyak 25.0 mL aliquot larutan quinine diencerkan hingga Sebanyak 25.0 mL aliquot larutan quinine diencerkan hingga 50.0 mL dan diukur absorbansinya, mempunyai absorbansi 50.0 mL dan diukur absorbansinya, mempunyai absorbansi 0.416 pada 348 nm diukur dalam kuvet setebal 1.00 cm. 0.416 pada 348 nm diukur dalam kuvet setebal 1.00 cm. Sebanyak 25 mL aliquot kedua dicampur dengan 10.0 mL Sebanyak 25 mL aliquot kedua dicampur dengan 10.0 mL larutan yg mengandung 23.4 ppm quinine. Setelah diencerkan larutan yg mengandung 23.4 ppm quinine. Setelah diencerkan hingga50.0 mL, larutan ini memiliki absorbansi 0.610 (kuvet hingga50.0 mL, larutan ini memiliki absorbansi 0.610 (kuvet 1.00 cm pada panjang gelombang yg sama). Hitung 1.00 cm pada panjang gelombang yg sama). Hitung konsentrasi (ppm) quinine dalam sampel.konsentrasi (ppm) quinine dalam sampel.

SS11 = 0.416 = 0.416

SS22 = 0.610 = 0.610

VVss = 10 mL = 10 mL

ccss = 23.4 ppm = 23.4 ppm

VVxx = 25.0 mL = 25.0 mLppm 07.20

)0.25)(416.0610.0(

)0.10)(4.23)(416.0(

xc

x

ssx VSS

VcSc

12

1




C. METODE STANDARD INTERNALC. METODE STANDARD INTERNAL• Umumnya digunakan dalam GC dan HPLC• Suatu senyawa reference/pembanding (standard

internal) dengan volume/massa yg konstan ditambahkan ke dalam larutan standar dan sampel.

• Rasio analit terhadap standard internal digunakan sebagai sumbu Y dalam plot kurva kalibrasi dan untuk menetapkan sampel.




C. METODE STANDARD INTERNALC. METODE STANDARD INTERNALHexane Calibration Curve

y = 31641x + 142659

R2 = 0.8171

0.00E+00

5.00E+05

1.00E+06

1.50E+06

2.00E+06

2.50E+06

0 10 20 30 40 50 60

Conc. (ppt hexane)

Pea

k A

rea




C. METODE STANDARD INTERNALC. METODE STANDARD INTERNALHexane/Octane Calibration Curve

y = 0.0359x + 0.0772

R2 = 0.9998

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 10 20 30 40 50 60

Conc. (ppt hexane)

Hea

xne/

Oct

ane

Pea

k A

rea

Analisis Instrumen I

Documents

Transcript of Analisis Instrumen I