I. Alat dan Bahan

III.1 Alat :

1. Labu ukur 10 ml, 25 ml, dan 100 ml

2. Pipet volume 5,0 ; 8,0 ; 10,0 ; 15,0 ; dan 25,0 ml

3. Beaker glass

4. Pipet

5. Spektrofotometer UV-Vis 1800 Shimadzu

6. Alat disolusi tipe II (Tipe Dayung) dengan kecepatan 75 rpm dalam waktu

30 menit

7. Pemanas (hot plate)

8. Gelas ukur 1000 ml

9. Syringe

10. Filter

11. Kertas saring

12. Botol penampung sampel

III.2 Bahan :

1. Standar Amoxicillin 100 mg

2. Tablet Amoxicillin 125 mg 6 buah

3. Aquades sebagai media disolusi

II. Cara Kerja

IV.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Standar Amoxicillin

Pengukuran pada = 272.20 nm

Perhitungan penentuan 6 titik konsentrasi dalam kurva kalibrasi =

A11 Amoxicillin=26 a

Konsentrasi standar yang diambil adalah 80 ppm; 100 ppm; 125 ppm ; 150

ppm; 200 ppm; 250 ppm

Skema Pengenceran Standar Amoxicillin

100 mgstandar Amoxicillin

100 ml

100 mg100 ml

=100000 μg100 ml

=1000 ppm

100 ml25 ml100 ml100 ml100 ml

Gambar . Skema Pengenceran Standar Amoxicillin

1. Melarutkan 100 mg standar Amoxicillin dalam 100 ml air dalam labu ukur

100 ml dan didapat konsentrasi 1000 ppm

2. Mengambil 8 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 80 ppm.

3. Mengambil 10 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 100 ppm.

4. Mengambil 15 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 150 ppm.

5. Mengambil 25 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 250 ppm.

6. Mengambil 5 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 200 ppm.

100 ppm 250 ppm 200 ppm 150 ppm

5 ml

125 ppm

80 ppm

5 ml25 ml

10 ml8 ml 15 ml

Alat spektrofotometer UV-Vis 1800 Shimadzu

10 ml

7. Mengambil 5 ml larutan dari konsentrasi 250 ppm dan dimasukkan ke

dalam labu ukur 10 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan

konsentrasi 125 ppm.

8. Mengukur serapan pada masing-masing konsentrasi dengan menggunakan

alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu pada panjang gelombang

272,20 nm.

9. Membuat kurva kalibrasi dari data-data yang telah didapatkan.

Prosedur pengoperasian alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu

1. Alat disambungkan dengan sumber listrik (220 volt). Nyalakan stabilizer.

Nyalakan komputer. Nyalakan alat spektrofotometri UV-Vis 1800

Shimadzu. Tunggu hingga seluruh initialization mode dalam status OK.

2. Setelah muncul tampilan USER NAME dan PASSWORD, tekan ENTER.

3. Pilih mode F4 (PC Control).

4. Klik aplikasi UV Probe pada komputer. Setelah program tampil, klik

CONNECT.

Spektrofotometer akan otomatis terhubung dengan komputer.

5. Buka kotak analisis. Isi kedua kuvet dengan medium. Masukkan ke kotak

analisis dengan posisi buram kuvet menghadap depan-belakang. Lalu

tutup kotak analisis.

6. Klik AUTOZERO pada komputer hingga serapan nol

7. Klik BASELINE pada komputer, lalu pilih rentang panjang gelombang

yang diinginkan (200-400nm). Tunggu hingga scan baseline selesai.

8. Buka kotak analisa. Ganti isi kuvet depan dengan sampel yang akan

diukur. Lalu tutup kotak analisis.

9. Klik AUTOZERO pada komputer hingga serapan nol.

10. Klik START untuk memulai scan.

11. Sesudah scan selesai, pilih PICK PEAK (pada menubar operations) untuk

memperoleh panjang gelombang maksimum sampel.

12. Pilih POINT PEAK untuk mengetahui serapan pada panjang gelombang

maksimum yang diinginkan.

13. Simpan data spektrum yang diperoleh pada spektrum tertentu.

14. Setelah alat selesai digunakan, klik DISCONNECT pada komputer. Lalu

tutup aplikasinya.

15. Tekan tombol RETURN dua kali pada alat spektrofotometer hingga

muncul tampilan USER NAME dan PASSWORD. Lalu matikan alat.

IV.2 Pengambilan dan Pengenceran Sampel Tablet Amoxicillin 125 mg

Apparatus 2 : Tipe Paddle (Dayung)Suhu : 37°±0,5°C ; Kecepatan : 75 rpmWaktu : 30 menit

Masukkan labu disolusi pada masing-masing lubang pada alat disolusi

Masukkan aquades yang telah dipanaskan hingga suhu 37°±0,5°C

Masukkan tablet pada 3 labu disolusi secara bersamaan diikuti dengan 3 labu berikutnya dengan interval waktu 3 menit

Ambil 10 ml sampel dengan syringe setiap 6 menit, kemudian isi kembali labu disolusi dengan aquades suhu 370C dengan volume yang sama

Gambar . Skema penggunaan alat disolusi Paddle, pengambilan dan pengenceran sampel serta pengukuran serapan dengan spektrofotometer UV-Vis

Alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu

Sampel yang telah diambil diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis

Pasang filter pada syringe, masukkan sampel yang telah diambil ke dalam botol penampung