setiap area dari lingkungan kitapenuh dengan mikroba. Ilmu mikrobiologi memisahkan populasi yang beraneka ragamtersebut menjadi spesies induvidu yangdapat dipelajari (Cappucino, 1983)Isolasi adalah mengambil mikroorganisme yang terdapat di alam danmenumbuhkannya dalam suatu medium buatan. Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal dari campuran bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya dalam media padatselmikrobaakanmembentuksuatukoloniselyangtetappadatempatnya(Sutedjo,1996).Beberapa faktor yang perlu diperhatikan dalam mengisolasi mikroorganisme adalah :1. Sifat dan jenis mikroorganisme2. Habitat mikroorganisme3. Medium pertumbuhan4. Cara menginokulasi dan inkubasi5. Cara mengidentifikasi 6. Cara pemeliharaannya (Dwidjoseputro, 1998).MetodeIsolasiOlehNuniek, 2001isolasimikrobadapatdilakukandenganduacarayaitucarapenggoresan dan cara penaburan.a.IsolasimikrobadengancarapenggoresanTujuan utama daripenggoresan ini adalah untuk menghasilkan koloni-koloni bakteri yangterpisah dengan baik dari suspensi sel yang pekat. Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.Ada beberapa teknik goresan, antara lain :1.GoresanT2.Goresankuadran3.Goresanradian4.Goresansinambung(Nuniek,2001).b.IsolasimikrobadengancarapenaburanCara penaburan (pour plate)merupakancarayangkeduadisampingpenggoresanuntukmemperoleh biakan murni dari biakan campuran mikroba. media agar diinokulasi dalam keadaan tetap cair yaitu pada suhu45C, dan demikian pulakoloni-koloni akan berkembang di seluruh media, tidak hanyapada permukaan. Khusus ntuk isolasi khamir danjamur dikenal beberapa teknik inokulasi yaitu :1.Teknikpengenceran2.TeknikHansen3.TeknikLindner4. Mikromanipulator5.Isolasisporadarisporangium(Winarni,1997).

Tujuan dari pengenceran bertingkat yaitu memperkecil atau mengurangi jumlahmikroba yang tersuspensi dalam cairan. Penentuan besarnya atau banyaknya tingkatpengenceran tergantung kepada perkiraan jumlah mikroba dalam sampel.