manipulasi kromosom

Post on 20-Jan-2016

177 views 14 download

description

kromosom

Transcript of manipulasi kromosom

Assalamu’alaikum Wr WbSelamat datang

Manipulasi kromosom

• Ginogenesis• Androgenesis• Poliploid

Ginogenesis

• Definisi : proses perkembangan embrio yang berasal dari telur tanpa kontribusi material genetik jantan

• Dapat terjadi secara alami dan buatan

Ginogenesis alami

• Jarang terjadi• Terjadi pada ikan mas koki, jenis vivipar

kecil famili Poecillidae (Poecilia dan Poeciliopsis)

• Ginogenesis spontan/alami, proses terjadinya ?

Ginogenesis buatan

• Pertama kali dilakukan oleh Hertwig tahun 1911, mengamati perkembangan telur kodok dibuahi sperma yang telah diradiasi sinar gamma

Tahap penting ginogenesis

• Menonaktifkan bahan genetik dari gamet jantan

• Meningkatkan jumlah zigot diploid dng pemberian kejutan panas pada fase meiosis II atau mitosis I

Tujuan ginogenesis• Mempercepat proses pemurnian

(homosigositas)• Membuat populasi klon hanya dalam

dua generasi• Membuat populasi tunggal kelamin

betina, misal pada ikan mas• Mempercepat proses seleksi• Mendetermasi genotip jenis kelamin

betina

Inaktifasi kromosom sperma

• Radiasi sinar gamma, • Sinar X• Sinar sinar UV • Bahan kimia : toluidine blue,

ethyleneura, dymetylsulfute

Supaya radiasi merata

• Mengurangi kepadatan sperma• Ketebalan lapisan sperma yang

akan diradiasi dibuat setipis mungkin

• Sudut jatuh cahaya thd lap sperma dibuat relatif sama

Penggunaan Sperma dari spesies yang berbeda

• Syarat : masih kerabat dekat, diameter kepala spermatozoa < lubang mikrofil

• Keuntungan : memudahkan dlm identifikasi keturunan (genetic marker)

Origin:Sumatra & Borneo

ASIA

PUNTIUS TETRAZONA(Bleeker, 1855)

Family: Cyprinidae Order: Cypriniformes

Water Type:Fresh 20-26ºC / pH < 7

Size: 7 cm

 

(Common) © Johnny Jensen (Green) © Johnny Jensen (Yellow / Albino) © Johnny Jensen

 English  Tiger Barb  German Viergürtel Barbe / Sumatra Barbe

 Danish Tiger Barbe / Sumatra Barbe

 French Barbus de Sumatra

 Dutch  Sumatraan  Swedish Tiger Barb / Sumatra Barb

 Spanish  Barbo de Sumatra  Polish  (Brzanka)  Finnish  (Barbi)

http://www.jjphoto.dk/fish_archive/aquarium/puntius_tetrazona.htm

Contoh :Ikan Sumatra dan Ikan Tawes

Kejutan untuk diploidisasi

• Dingin (cold shock)• Panas (heat shock)• Tekanan (banyak digunakan untuk

hewan ampfibi)• Bahan kimia : cytochalasin B

Skema Ginogenesis

Tanpa kejutan

Pb 2

Kejutan tekanan panas/dingin sesaat sebelum mitosis I

Inseminasi dengan sperma yang diin-aktivasi UV

Kejutan tekanan panas/dingin sesaat sebelum meiosis II

Pb 1 Duplikasi genom Oogonia

Ovulasi

n n

2n

2n 2n

Meiosis II Meiosis I

2n 2n 4n Tanpa kejutan

n 2n

n n

Mitosis I

n n n

2n

Pb 2

2n

n

Ginogenesis Meiotik

Haploid

Ginogenesis Mitotik

Sperma Sumatra (K2N)

Sperma Tawes (K2N)

Normal

Pemeliharaan Ikan

• Dipelihara terpisah (jantan, betina)• Kualitas pakan• Induk bagus

Persiapan pemijahan

• Dipuasakan 1 hari• Ketinggian air ±10 cm• sekeliling ditutup plastik• Aerasi kecil• Diberi enceng gondok

Radiasi UV 1,5 menit

Penebaran Telur(27oC)

Inkubasi Telur (27-28 oC)

K2H Percobaan GinogenesisK2N KUV

Kejutan Suhu (40oC):

Tahap I: 18, 19, 20

Mnt a.f

Tahap II: 1, 2 Mnt a.f

Photo 1

Photo 2Inkubasi telur

(27-28°C)

BackPhoto

1

BackPhoto

2

Masa Inkubasi: metilen biru dan diaerasi

FR, SRe, HR

Masa Larva: diberi pakan, disiphon 20-30 %

SR4

SR28

20 cm

20 cm15 cm

11 cm

15 cm

20 cm

Calon induk (4-6 bln):Karakter meristik,Analisis DNA

Keturunan

• SR G2N-meiotik > G2N-mitotik• G2N-meiotik umumnya bergenotip

heterozigot (1N dr pronukleus betina dan 1N dr PB II

• G2N-mitotik (homozigot) • Dimungkinkan adanya penyimpangan

biologis dan fisiologis

Hasil Ginogenesis Ikan Sumatra G2N-mitotik

Hasil GinogenesisG2N-klon