Rekombinasi antara molekul DNA dari organisme
berbeda fenomena umum di alam
Duplikasi fenomena alam di laboratorium manipulasi genetik
Kumpulan teknik atau metode yang digunakan untuk mengkombinasikan gen-gen secara buatan
Proses rekombinasi
Hasil rekombinan
Teknologi DNA Rekombinan
Plasmid
Enzim restriksi (endonuklease restriksi)
Enzim ligase
Bakteri vektor (sel kompeten)
Perangkat Utama
Terdapat pada bakteri
DNA ekstrakromosomal
Berbentuk sirkuler
Umumnya berukuran kecil (lebih kecil dari ukuran kromosom)
Jenis, jumlah, dan ukurannya bervariasi antar sel dan antar jenis bakteri
Plasmid
Sebagai vektor untuk mengklon gen atau mengklon
fragmen DNA mengubah sifat bakteri
Untuk memperbanyak gen (copy gene) yang telah disisipkan dengan bantuan sel bakteri sel vektor/sel kompeten
Fungsi Plasmid (dalam pembentukan DNA rekombinan)
Untuk memotong rantai DNA sticky end atau
blunt end
Contoh: enzim EcoRI diisolasi pertama kali oleh Herbert Boyer pada 1969 dari E. coli
EcoRI memotong pada bagian antara basa G dan A pada sekuen GAATTC
Enzim Endonuklease Restriksi
Setiap enzim endonuklease restriksi mengenali sekuen pemotongan yang khas dan memotong DNA pada situs pemotongan yang khas
Untuk mendeteksi keberadaan DNA sisipan
Bisa dilakukan dengan
- Analisis migrasi
- Analisis restriksi
- PCR (Polymerase Chain Reaction)
Penentuan urutan DNA sisipan (sequencing)
Deteksi
Elektroforesis
Top Related