Polimorfismos de un solo nucleótido asociados a caracteristicas fenótipicas y Diferencias...
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POLIMORFISMOS DE UN SOLO
NUCLEÓTIDO ASOCIADOS A
CARACTERÍSTICAS FENOTIPICAS Y
DIFERENCIAS ESPERADAS DE LA
PROGENIE DE CRECIMIENTO EN GANADO
DE CARNE
VICENTE ELIEZER VEGA MURILLO SERGIO IVAN ROMAN PONCE
ALBERTO ALVAREZ BARAJAS JOSÉ MANUEL MEDINA CHAPA
MOISÉS MONTAÑO BERMÚDEZ GUILLERMO MARTÍNEZ VELÁZQUEZ
ÁNGEL RÍOS UTRERA
2
INTRODUCCIÓN
Desarrollo de técnicas genómicas
- Estructura
- Localización
- Función
A través de la caracterización del genoma, incluyendo
las variantes alélicas o polimorfismos
Genes
3
Las técnicas moleculares disponibles ofrecen
oportunidades para la mejora genética y para
acelerar el conocimiento de los mecanismos
metabólicos y moleculares que controlan los
procesos biológicos y fisiológicos inherentes a la
producción de carne.
INTRODUCCIÓN
4
OBJETIVO
Identificar asociaciones entre mediciones fenotípicas
de características de crecimiento y sus diferencias
esperadas de la progenie (DEPs) con algunos
marcadores moleculares.
5
Se utilizó la información generada por la Asociación
Mexicana de Criadores de Ganado Simmental-Simbrah.
- 5 ranchos productores de bovinos de registro.
- Nuevo León y Jalisco.
Se seleccionaron 221 animales:
- 179 Simmental y
- 42 Simbrah
MATERIALES Y MÉTODOS
6
Se colectaron muestras de sangre completa de la vena
coccígea por medio de Vacutainer® y tubos EDTA (BD and
Company®), mezclada por inversión.
Para el aislamiento de ADN se requirió del kit Axy Prep Blood
Genomic DNA Miniprep kit (Axygen Biosciences, USA) para
sangre completa.
Las secuencias de interés tuvieron origen en publicaciones
relacionadas con el descubrimiento y detección de 16 locus
SNP de distintos genes y seleccionados por su función
biológica.
MATERIALES Y MÉTODOS
7
Se analizó un microchip de reacción múltiple con
discriminación alélica y generación de fluorescencia (Applied
Biosystems, 2001).
De los registros de la asociación se obtuvo información de:
- 4 características de crecimiento - Peso al nacimiento,
- Peso al Destete,
- Talla Corporal y
- Circunferencia Escrotal
- 5 DEPs - Peso al nacimiento,
- Peso al destete directo,
- Peso al destete materno,
- Peso al destete materno total y
- Peso al año
MATERIALES Y MÉTODOS
8
MATERIALES Y MÉTODOS
Secuencias de Marcadores Moleculares incluidas en el micro arreglo
Gen CHR Ubicación No. Acceso y posición Mutación
SNP Función
GHR (hormona reguladora del crecimiento)
20 Promotor AF126288-149 G/A Crecimiento y calidad de la Leche
20 Intron 4 AY643087-300 G/A Eficiencia Alimenticia
GHRH (Hormona de crecimiento - Hormona liberadora)
13 5`UTR AF242855-4142 A/T Merito de la Canal
NPY (Neuropeptido Y) 4 Intron 2 AY491054-284 G/A Eficiencia alimenticia
4 Intron 2 AY491054-666 G/A Eficiencia alimenticia
4 Intron 2 AY491054-3032 T/C Merito de la Canal
UCP2 (Proteina desacopladora de la grasa parda mitocondria)
15 Intron 2 NW_928956-3730 G/C Crecimiento y Eficiencia Alimenticia
15 Exón 4 XM_614452-812 G/A Crecimiento y Eficiencia Alimenticia
UCP3 (Proteina desacopladora de la grasa parda mitocondrial)
15 Intron 3 AF127030-1099 G/A Eficiencia Alimenticia
DAGT (diacylglycerol O-acyltransferase 1) 14 Exón 8 AW446985- 1802265-6 AA/GC Calidad de la Leche
LEP (Leptina) 4 Exon 2 AF120500-73 C/T Merito de la Canal
TG (Tiroglobulina) 14 Exón 48 EU591737-422 C/T Merito de la Canal
CAPN (Calpaina) 29 Exón 9 AF252504-5709 C/G Merito de la Canal
29 Intron 18 AF248054-6545 C/G Merito de la Canal
CAST (Calpastatina) 7 Intron 5 AY008267-282 C/G Merito de la Canal
7 Exón 2 AY008267-263 C/T Merito de la Canal
• El análisis de asociación se realizo con el Software Plink
1.07.
• El efecto de sustitución alélico se estimó utilizando un
modelo de regresión simple.
• Donde el coeficiente de regresión y su error estándar
representan el efecto de la sustitución de un alelo en
cada SNP.
• El nivel umbral para la significancia fue establecido en
(P< 0.05).
9
MATERIALES Y MÉTODOS
10 CHR= Cromosoma; MAF= Frecuencia menor de un alelo.
Frecuencias alélicas de 16 polimorfismos de un solo nucleótido
(SNP) en la población Simmental Simbrah en México
RESULTADOS
CHR SNP Alelo 1 Alelo 2 MAF
4 LEP T C 0.352
4 NPY-1 G A 0.299
4 NPY-2 A G 0.194
4 NPY-3 T C 0.489
7 CAST-1 G A 0.181
7 CAST-2 C T 0.458
13 GHRH A T 0.376
14 DAGT-1 A G 0.144
14 TG-1 T C 0.394
15 UCP-1 C G 0.219
15 UCP-2 G A 0.218
15 UCP-3 G A 0.170
20 GHR-1 A G 0.326
20 GHR-2 A G 0.402
29 CAPN-1 C G 0.040
29 CAPN-2 C T 0.374
Peso al Nacimiento
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
5.10
5.40
Cromosoma
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
4 13 7 14 15 20 29
UCP-2
UCP-3
GHR-2 CAPN-1
12
Peso al Destete
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
Cromosoma
29 20 15 14 13 7 4
TG-1
GHR-1
UCP-1
Circunferencia Escrotal
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
Cromosoma
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
29 20 15 14 13 7 4
UCP-3
UCP-2
DEP Peso al Destete Materno Total
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
29 20 15 14 13 7 4
Cromosoma
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
UCP-2 CAPN-1
DEP Peso al Año
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
29 20 15 14 13 7 4
Cromosoma
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
NPY-2 TG-1
16
0.00
0.30
0.60
0.90
1.20
1.50
1.80
2.10
2.40
2.70
3.00
3.30
3.60
3.90
4.20
4.50
4.80
5.10
5.40
29 20 15 14 13 7 4
CAST-1 (TC)
Cromosoma
Sign
ific
anci
a =
log 1
0(1
/p)
CAST-1 (DEP PDD) CAST-1 (DEP PDM)
Talla Corporal DEP Peso al Destete Directo y
Materno
CONCLUSIONES
• Los marcadores para el gen que determina las Proteínas
desacopladoras de la grasa parda mitocondrial (UCP 1,2
y 3) tuvieron asociaciones (P > .05) con características
de crecimiento (PN y PD), CE y con la DEPPDMT.
• Los polimorfismos del gen de la Calpastatina estuvieron
asociados (P > .05) para la talla corporal y los
componentes directo y materno del DEP PD
17
CONCLUSIONES
• Los polimorfismos del gen de la hormona del crecimiento
– hormona reguladora tuvieron asociaciones (P < 0.05)
con PN y PD.
• El cromosoma 14 seguido del cromosoma 7 tuvieron más
asociaciones para las características estudiadas (6 y 3
respectivamente).
• Los resultados indican una limitada utilización de los
micro arreglos con un número pequeño de SNPs para
identificar asociaciones entre mediciones fenotípicas y
características de crecimiento y algunas DEPs.
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POLIMORFISMOS DE UN SOLO
NUCLEÓTIDO ASOCIADOS A
CARACTERÍSTICAS
FENOTIPICAS Y DIFERENCIAS
ESPERADAS DE LA PROGENIE
DE CRECIMIENTO EN GANADO
DE CARNE VICENTE ELIEZER VEGA MURILLO
SERGIO IVÁN ROMAN PONCE ALBERTO ALVAREZ BARAJAS
JOSÉ MANUEL MEDINA CHAPA MOISÉS MONTAÑO BERMÚDEZ
GUILLERMO MARTÍNEZ VELÁZQUEZ ÁNGEL RÍOS UTRERA