2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

1

ميتوكسي بيريدين -4-دي متيل -5,3- متيل هيدروكسي 2-عزل األوميبرازول في مركباته الدوائيةنواتج تخرب من

***، أنس رجب **، منان سليمان *مروان توما قسم الكيمياء، كلية العلوم، جامعة حلب* فرنسا ،باريس ،جامعة بيير وماري كوري**

الكيمياء، كلية العلوم، جامعة حلب قسم) دكتوراة(طالب دراسات عليا *** الملخص

منميتوكسي بيريدين -4-دي متيل -5,3- متيل هيدروكسي 2-تم عزل على المحضرة على شكل كبسول يحوي في مركباته الدوائيةنواتج تخرب األوميبرازول

25oC/60%(بعد حفظها ثالث سنوات في الشروط النظامية )Pellets(ات حبيب

RH(، عزل نفس ناتج التخرب لدى حفظ المنتج الدوائي ثمانية أشهر في كما تم .)40oC/75% RH(الشروط المسرعة

وتم ،والطبقات الرقيقة تمت عمليات العزل باستخدام كروماتوغرافيا العمودمطيافية األشعة فوق (التعرف على بنية المركب المعزول باستخدام التقانات المختلفة

ومطيافية الطنين المغناطيسي النووي (FT-IR)لحمراء وتحت ا (UV)البنفسجية والتحليل الكروماتوغرافي الكتلوي (13C NMR) 13-وللكربون (1H NMR)للبروتون

(LC/MS) والتحليل العنصري.( :المقدمة. 1

صيغتها ،األوميبرازول مادة كيميائية تصنف ضمن األدوية الهضمية المعديةتتمتع ،لونها أبيض ،345.42g/molلجزيئي ووزنها ا C17H19N3O3Sالمجملة

يتعلق ثباتها في ،156oCعند الدرجة وتتفكك تنصهر ،بخواص قلوية ضعيفة-1[المحلول pHحيث يزداد التفكك بتناقص ،األوساط المائية بدرجة حموضة الوسط

4.[ .تنقية ،عزل ،ثبات طويل األمد ،ثبات مسرع ،تخرب ،أوميبرازول :الكلمات المفتاحية

27/1/2010 ورد البحث للمجلة بتاريخ ـا 5/5/2010 قبل للنشر بتاريخ ـا

.رجبسليمان و توما و

2

األوميبرازول

يعمل األوميبرازول على خفض إفراز الحمض المعدي وذلك بتثبيط خمائر H+,K+,ATPaseبوتاسيوم /سلسلة أنزيمات األدينوزين الثالثي الفوسفاتاز هيدروجين

ة األخيرة في تشكيل الحمض المعدي في المسؤولة عن المرحل) مضخة البروتون(الخاليا الجدارية للمعدة لذلك يوصف األوميبرازول لمعالجة القرحة المعدية والقرحة

].9-5[العفجية على كبسول يحويفي الصناعات الدوائية على شكل األوميبرازول يتم انتاج

ك لحمايته من وذل محمية بطبقة تلبيس معوية بوليميرية خارجية )Pellets(ات حبيب .]6,7[التخرب تحت تأثير الوسط الحامضي للمعدة

إذ أنه يتأثر بشكل ،يعد األوميبرازول من المركبات الدوائية الحساسة والحركيةإنتاجه في من وبالرغم ،...) ،رطوبة ،حرارة(كبير بالعوامل المناخية المحيطة به

يتخرب هفإن ضمن كبسولة ملبسة )Pellets(ات دوائية على شكل حبيبالصناعات المع الزمن تحت تأثير الظروف المحيطة لتتشكل نواتج جديدة مجهولة البنية والتأثير

التخرب وتحديد هوياتها لذلك كان من المجدي أن نفكر في عزل أهم نواتج ،الحيوي .ة والتعرف إلى خواصها الكيميائيةالجزيئي

مادة حديثة ( علق باألوميبرازولومن خالل العودة إلى األرشيف العلمي المتخالل فترة الحفظ لم نعثر على أي دراسة أو بحث يتعلق بنواتج تخربه )االستخدام

وذلك قبل تناوله ...) من حرارة ورطوبة (تحت تأثير العوامل المناخية المحيطة رازول تحت تأثير األشعة ثبات األوميببالمقابل اهتم الباحثون بدراسة ،كجرعة دوائية

اهتم الباحثون بدراسة الضوئية أو ضمن األوساط المائية القلوية والحامضية، كماطرائق تحليلية جديدة لمعايرته في مركباته الدوائية والتعرف على أهم خواصه الفيزيائية

: ومن أبرز تلك الدراسات ،وتأثيراته الحيوية والفيزيولوجية

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

3

خالل متابعة تغيرات تركيزه في ثبات األوميبرازول في الجسم الحي مندراسة - ةجديدكروماتوغرافية وذلك باستخدام طرائقالبالزما البشرية مع الزمن

HILIC–MS/MS، 24(فتبين أن األوميبرازول ثابت طوال فترة بقائه في البالزما .]10[ دون أن يتخرب أو يفقد خواصه العالجية) ساعة

وتأثير إضافة بعض األمالح على pHدراسات حول تأثير درجة حموضة المحلول -فتبين أن ثباته في األوساط المائية يتعلق ،ثبات المستحضرات الدوائية لألوميبرازول

.]11,12[المحلول pHحيث يزداد التفكك بتناقص ،بدرجة حموضة الوسطدراسات صيدالنية تكنولوجية تتعلق بتغيير مواصفات المستحضر النهائي -

على شكل مضغوطات ملبسة بطبقة مصنوعة من بتصنيعه لألوميبرازول وذلك تم دراسة الثبات المسرع للشكل الصيدالني الجديد . حبيبات سيللوزية ميكرو كريستالية

تم اختبار طبقة التلبيس . فتبين أنه ثابت طوال فترة بقائه تحت الشروط المسرعةالتلبيس وال نسبة بدراسة ثبات المنتج الدوائي في الوسط الحمضي فلم تتأثر طبقة

].13[األوميبرازول في المضغوطة من جديدة Derivativeطيفية اشتقاقية طرائق استخدام دراسات تحليلية تعتمد على -

].14,13[ في مستحضراته الدوائية لألوميبرازولأجل التحديد الكمي :أهمية البحث. 2

:فيتأتي أهمية هذا البحث بـــرازول فـــي مستحضـــراته الدوائيـــة تحـــت شـــروط الحفـــظ دراســـة اســـتقرار وثبـــات األومي -

).40oC,75%RH(وتحت شروط الحفظ المسرعة )25oC,60%RH(النظامية بنيتــه فــي مركباتــه الدوائيــة والتعــرف علــى األوميبــرازول عــزل أحــد أهــم نــواتج تخــرب -

ليتثنـــى للمختصـــين فـــي مجـــال الســـمية ،الجزيئيـــة باســـتخدام التقانـــات الطيفيـــة المختلفـــة .معرفة مدى تأثير هذا المركب المعزول على صحة اإلنسان

.رجبسليمان و توما و

4

:ةالمستخدم المواداألجهزة و . 3 :األجهزة المستخدمة 1.3.

Jascoمـن إنتـاج شـركة االمتصـاص الضـوئي المرئـي وفـوق البنفسـجي طيف جهاز - .من صنع اليابانV-530 نموذج

Jascoشــركة مــن إنتــاج FT/IRاالمتصــاص الضــوئي دون األحمــر جهــاز طيـــف - .صنع اليابانمن FT/IR – 450 Plusنموذج

بتـــردد 13C NMRو 1H NMRجهـــاز طيـــف الطنـــين المغناطيســـي النـــووي -400MHz شركة إنتاج منBruker السويسرية األلمانية.

من LC/MSطيف الكتلة السائلة عالية األداء ملحق بجهاز جهاز الكروماتوغرافية - .اليابان من صنع LC/MS-2010 EVوذجنم Shimadzuشركة إنتاج

Agilentشـــركة إنتـــاج مـــن HPLCالســـائلة عاليـــة األداء جهـــاز الكروماتوغرافيـــة - .من صنع الواليات المتحدة األمريكية DADمزود بكاشف Series 1100 نموذج

مـن CH 1500نمـوذج Angelantoni Industrieحاضـنة ثبـات مـن إنتـاج شـركة - .صنع إيطاليا

مــــزود بحمـــــام مــــائي VV1نمــــوذج Normschliffبخــــر دوار مــــن إنتــــاج شركـــــة م - .من صنع ألمانيا 071-4.912 نموذج

نمــــــوذج Sartoriusمــــــن إنتــــــاج شــــــركة 0.05mgحســــــاس بدقــــــة ميــــــزان الكترونــــــي -ED224S من صنع ألمانيا.

،Bibby Sterilin LTDسـخانة كهربائيـة ذات محـرك مغناطيسـي مـن إنتـاج شـركة - .من صنع إنكلترا HC502ج نموذ

مـــن صـــنع 744pH Meterنمـــوذج Metrohmمـــن إنتـــاج شـــركة pHمقيـــاس - .سويسرا

مــن صــنع Ecocell 55نمــوذج MMM Groupفــرن تجفيــف مــن إنتــاج شــركة - .ألمانيا

.اإلسترالية Pty. Ltd. Sonicleanجهاز إلتراسونيك من إنتاج شركة -

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

5

:المواد المستخدمة 2.3.إيزوبروبــــانول ،%99.8دي كلــــورو ميتــــان :اإليرلنديــــة Lab-Scanشــــركة مــــن إنتــــاج -

.اإليرلندية Lab-Scanمن إنتاج شركة %99.9أسيتونتريل ،99.8% ،)NH3 28-30%(هيدروكســــيد األمونيــــوم :األلمانيــــة Merckمــــن إنتــــاج شــــركة -

60 ســــــيليكاجلو ) GF254 -60( ســــــيليكاجل مفلــــــور ،%85هيدروكســــــيد البوتاســــــيوم (0.063-0.200mm).

وفوسـفات % 99.5فوسفات أحادية البوتاسـيوم :اإلسبانية Panreacمن إنتاج شركة - .%99ثنائية البوتاسيوم

أوميبـرازول عيـاري :الهنديـة SL Drugs & Pharmaceuticalsمـن إنتـاج شـركة -%99.9. :القسم العملي 4.

:دراسة ثبات األوميبرازول في مركباته الدوائية 1.4. :الثبات المسرع 1.1.4.

تم وضع عينات من األوميبرازول على شكل منتج دوائي نهائي ضمن ) 40oC ± 2oC / 75% RH ± 5% RH(حاضنة الثبات تحت شروط حفظ مسرعة

لمدة ثمانية أشهر تم خاللها التحليل الكيميائي الدوري للعينات كل شهر باستخدام المنتج الدوائي المدروسعلما أن ،HPLCاء الكروماتوغرافية السائلة عالية األدتقنية

وهو من إنتاج شركة آسيا للصناعات الدوائية Omepral 40mg اسمه التجاري مغلفة معويا )Pellets( حبيبات عبارة عن كبسول يحوي علىوهو )سورية -حلب (

والمستحضر مغلف ضمن علبة بالستيكية محكمة ،8.5% نسبة األوميبرازول فيها .تحمي الكبسول من التماس مع الوسط الخارجي األغالق :الثبات طويل األمد 2.1.4.

تم وضع عينات من األوميبرازول على شكل منتج دوائي نهائي تحت شروط لمدة ثالث سنوات تم ) 25oC ± 2oC / 60% RH ± 5% RH(حفظ نظامية

ة خاللها التحليل الكيميائي الدوري للعينات كل ستة أشهر باستخدام تقان

.رجبسليمان و توما و

6

.HPLCالكروماتوغرافية السائلة عالية األداء طريقة التحديد الكمي لألوميبرازول في مركباته الدوائية باستخدام تقانة 2.4.

:HPLCالكروماتوغرافية السائلة عالية األداء وبرهنتها والتأكد من صالحيتها قبل جديدة يلية لطوير طريقة تحتقمنا ب

.برازول في مركباته الدوائيةكمي لألوميلتحديد الاعتمادها واستخدامها ل تقانة الكروماتوغرافية السائلة عالية األداء تعتمد هذه الطريقة الجديدة على

:استخدام الشروط التجريبية التاليةب وذلك 1.5: التدفق ،(L7 ↔ C8, 4.6mm × 75mm, 5 μm Packing): العمودالطور ،نانومتر 300 :للكاشف طول الموجة ،ميكروليتر 20: حجم الحقنة ،دقيقة/مل

.pH=7.00عند ) 500 :450(محلول واقي وأسيتونتريل بنسبة : المتحرك :على مرحلتين Mobile phaseتم تحضير الطور المتحرك

: Bufferتحضير المحلول الواقي : المرحلة االولىمن فوسفات 0.262gو KH2PO4من فوسفات أحادية البوتاسيوم 1.495gتم وزن

وحلت بالماء المقطر وذلك ضمن دورق حجمي سعة K2HPO4ئية البوتاسيوم ثنا500ml، ثم أكمل الحجم بالماء المقطر حتى اإلشارة.

:Mobile phaseتحضير الطور المتحرك : المرحلة الثانيةمن المحلول الواقي المحضر في 500mlتم تحضير الطور المتحرك بمزج

سيتونتريل وذلك باستخدام خالط مغناطيسي حتى من األ 450mlالمرحلة السابقة مع باستخدام محلول عياري من pH=7ثم ضبطت حموضة المحلول عند ،تمام التجانس

.(1N)هيدروكسيد البوتاسيوم ثالثمع لألوميبرازولتم تحضير ثالث عينات من المستحضر الدوائي

دام الطور حيث استخ ،0.025mg/ml العياري بتركيزاألوميبرازول عينات من ثم حقنت هذه العينات ضمن عمود الكروماتوغرافية السائلة ،المتحرك كمحلول للتمديد

مساحات من خالل نسبوحسبت النسبة المئوية للمادة الفعالة HPLCعالية األداء .لعياريإلى تلك العائدة للمركب اقمم الكروماتوغرامات الناتجة للعينة

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

7

باستخدام ألوميبرازول في مركباته الدوائيةعزل أحد أهم نواتج تخرب ا 3.4. :والطبقات الرقيقة العمود ةكروماتوغرافي

نــواتج تخــرب األوميبــرازول فــي مستحضــراته الدوائيــة وذلــك أحــد أهــم تــم عــزل :التالية الخطواتوفق باستخدام كروماتوغرافيا العمود والطبقات الرقيقة

:حرك على مرحلتينتم تحضير الطور المت: تحضير الطور المتحرك - :)Aالمحلول ( محلول دي كلورو ميتان مشبع باألمونياتحضير : المرحلة األولى

100mlمع ) %25(من هيدروكسيد األمونيوم 30mlبمزج Aتم تحضير المحلول ) Aالمحلول ( السفلية ثم تم فصل الطبقة العضوية ،دي كلورو ميتان في قمع فصل

.واهمال الطبقة المائية العلوية :تحضير الطور المتحرك: المرحلة الثانية

ودي بروبانوليزو مع اإل Aتم تحضير الطور المتحرك بمزج المحلول .على الترتيب) 20:40:40(كلوروميتان وفق النسب الحجمية

-0.063) بمعلـق مـن السـيليكاجل دتـم تعبئـة العمـو : تحضير العمود الكرومـاتوغرافي -

0.200mm) 60 جيــدا مــن أجــل طــرد ت محتويــات هــذا العمــود، ورصــالميتــانول فــيومـــرر الطـــور ،ثـــم وضـــعت طبقـــة علويـــة مـــن الرمـــل النقـــي فـــوق الســـيليكاجل ،الغـــازات

.المتحرك في العمود من أجل طرد الميتانولتم طحن المنتج الدوائي بعد تعريضه لشروط الثبات : تحضير العينة المدروسة -

ثم حل المسحوق في الميتانول مع ،)40oC,75% RH(المسرع لمدة ثمانية أشهر .ورشح الناتج وحفظت الرشاحة لمرحلة الفصل والتنقية الالحقة ،التحريك الشديد

ثــم )4.0ml( ت الطبقــة الرمليــة مــن العمــود بالرشــاحة الســابقةلــم ح : الفصــل والتنقيــة -مـــرر الطـــور المتحـــرك مـــن األعلـــى لترحيـــل مكونـــات المـــزيج المـــدروس ضـــمن العمـــود

.روماتوغرافي وفصلها باالعتماد على التفاوت في قطبية المكوناتالككل قطفة (تم أخذ قطفات متتالية من السائل بعد خروجها من العمود

20ml(، السيليكاجل المفلورورقمت ثم فحصت باستخدام شرائح رقيقة من (60-F254) ف وبعد االنتهاء من الترحيل وتجفي ،باستخدام الطور المتحرك السابق

.رجبسليمان و توما و

8

الشريحة في الهواء تم فحص البقع باستخدام األشعة فوق البنفسجية عند طول . nm 254الموجة

باسـتخدام كروماتوغرافيـة الطبقـات في مرحلـة الحقـة ة المركب المعزول تم تنقيـــــة ـــــي TLCالرقيق ـــــف مكـــــان توضـــــع بقعـــــة المركـــــب المعـــــزول ونقعهـــــا ف ـــــك بتجري وذل

ـــــتخلص مـــــن الســـــيليكاجلاألســـــيتونتريل وترشـــــيح المـــــزيج النـــــاتج ل ـــــك يطـــــرد . ل بعـــــد ذل .باستخدام المبخر الدوار 40oCاألسيتونتريل تحت ضغط مخفف عند درجة حرارة

تم التأكد من نقاوة المركب المعزول وذلك بحقنه ضمن عمود الكروماتوغرافية -ثم مسح ،(2.4.)وذلك باستخدام الشروط المذكورة بالفقرة HPLCالسائلة عالية األداء

-200(ضمن المجال فوق البنفسجي DADلكروماتوغرام الناتج باستخدام كاشف ا

400nm (للتأكد من جودة الفصل وخلو المادة المعزولة من الشوائب األخرى. :تحديد بنية المركب المعزول 4.4.

تمت دراسة المركب المعزول بهدف الكشف عن هويته وتحديد بنيته (UV)مطيافية األشعة فوق البنفسجية (مختلفة الكيميائية باستخدام التقانات ال

ومطيافية الطنين المغناطيسي النووي (FT-IR)ومطيافية األشعة تحت الحمراء -13ومطيافية الطنين المغناطيسي النووي للكربون(1H NMR) للبروتون

(13C NMR) والتحليل الكروماتوغرافي الكتلوي(LC/MS) والتحليل العنصري.( :والمناقشةالنتائج . 5

:دراسة ثبات األوميبرازول في مركباته الدوائية 1.5. :دراسة الثبات المسرع لألوميبرازول في مركباته الدوائية 1.1.5.

تحـت مع الـزمن في مستحضراته الدوائية النسبة المئوية لألوميبرازولتناقص تتـأثره وميبرازول غير ثابـت مـع الـزمن نتيجـةوهذا يدل على أن األ ،شروط حفظ مسرعة .1الجدول ،بالعوامل المحيطة

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

9

تحت شروط حفظ مع الزمن مستحضراته الدوائية نسبة المئوية لألوميبرازول فيالانخفاض ): 1(الجدول )40oC,75%RH( مسرعة

) %األوميبرازول(نسبة المادة الفعالة )شهر(نالزم0 100.00 199.86 298.64 396.36 494.77 594.34 693.12 792.38 891.51

أنه عند إنتاج ،2و 1الشكلين ،كما يتبين من األشكال الكروماتوغرافية )حادة ومتناظرة(كان هناك قمة وحيدة لألوميبرازول ) بداية الحفظ( المستحضر الدوائي

المسرعةروط الحفظ تحت شوبعد مرور ثمانية أشهر على حفظ المستحضر الدوائي .سبع قمم إضافية جديدة تعبر عن نواتج تخرب لألوميبرازول نالحظ وجود

باستخدام ) بداية الحفظ(األوميبرازول عند إنتاجه لمستحضر الكروماتوغرام الناتج : )1(الشكل

HPLC الكروماتوغرفية السائلة عالية األداء

.رجبسليمان و توما و

10

تحت شروط الثبات المسرع أشهر 8ألوميبرازول بعد مرور المستحضر الكروماتوغرام الناتج : )2(الشكل

HPLCباستخدام الكروماتوغرفية السائلة عالية األداء ومــــن خــــالل دراســــة تطــــورات التخــــرب خــــالل الثمانيــــة أشــــهر تحــــت الشــــروط

ممـا يـدل علـى المسرعة تبين أن شـدة القمـم الدالـة علـى نـواتج التخـرب تـزداد مـع الـزمن .ثابت في مركباته الدوائية غيراألوميبرازول أن

:دراسة الثبات طويل األمد لألوميبرازول في مركباته الدوائية 2.1.5.مـــع فـــي مستحضـــراته الدوائيـــة النســـبة المئويـــة لألوميبـــرازول ببطـــىء تتنـــاقص

علـى أن األوميبـرازول غيـر ثابـت مـع ؤكـدالزمن تحت شروط الثبات طويل األمد ممـا ي ).2(الجدول ،مل المحيطةتأثره بالعوا الزمن نتيجة

مع الزمن تحت شروط حفظ في مستحضراته الدوائيةانخفاض النسبة المئوية لألوميبرازول ): 2(الجدول ).25oC,60%RH(الثبات طويل األمد

) %األوميبرازول(نسبة المادة الفعالة )شهر(الزمن

0 100.00 6 99.59

12 98.89 18 97.65 24 95.85 30 95.07 36 94.22

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

11

،كان هناك قمة وحيدة لألوميبرازول) بداية الحفظ(فعند إنتاج المستحضر الثبات وبعد مرور ستة وثالثون شهرا على حفظ المستحضر الدوائي تحت شروط

،سبع قمم إضافية جديدة تعبر عن نواتج تخرب األوميبرازول يالحظ وجوداألمد طويل .)4(و ) 3(الشكلين

باستخدام ) بداية الحفظ(األوميبرازول عند إنتاجه لمستحضر الكروماتوغرام الناتج : )3(الشكل

. HPLC الكروماتوغرفية السائلة عالية األداء

شهرا تحت شروط الثبات طويل األمد 36األوميبرازول بعد مرور لمستحضر الكروماتوغرام الناتج : )4(الشكل

HPLCاألداء باستخدام الكروماتوغرفية السائلة عالية

.رجبسليمان و توما و

12

مقارنة بين نتائج دراسات الثبات المسرع مع الثبات طويل األمد لألوميبرازول 3.1.5. :في مستحضراته الدوائية

تحت تخرب األوميبرازول لدى مقارنة نتائج الدراسة الكروماتوغرافية لنواتج في الشروط المسرعة نجد أن نواتج التخرب هانتائجمع شروط الثبات طويل األمد

ومتطابقة نوعيا من خالل التطابق الواضح بين أزمنة ) 4و 2 األشكال(مختلفة كميا . 3الجدول ،احتباس القمم السبع

مقارنة بين أزمنة احتباس نواتج تخرب األوميبرازول في مستحضراته الدوائية بعد مرور ثمانية ): 3(الجدول .تحت شروط الثبات طويل األمد ستة وثالثون شهرا أشهر تحت شروط الثبات المسرع أو

)دقيقة( زمن االحتباس نواتج التخرب الثبات المسرع

)دقيقة( زمن االحتباس الثبات طويل األمد

1 0.533 0.541 2 0.832 0.833 3 0.943 0.940 4 1.314 1.310 5 1.451 1.450 6 1.624 1.613 7 1.876 1.878

باستخدام برازول في مركباته الدوائيةعزل أحد أهم نواتج تخرب األومي 2.5. :والطبقات الرقيقة العمود ةكروماتوغرافي

تم عزل أحد أهم نواتج تخرب األوميبرازول في مركباته الدوائية باستخدام مما قادنا إلى تنقيته في مرحلة الحقة ،كروماتوغرافية العمود ولكنه لم يكن نقيا تماما

المحضرة لهذا الغرض وذلك بتجريف TLCت الرقيقة باستخدام كروماتوغرافية الطبقا .مكان بقعة المركب المعزول

تم التحقق من نقاوة المركب المعزول بحقنه ضمن عمود الكروماتوغرافية وقد ،(2.4.)وذلك عند نفس الشروط المذكورة بالفقرة HPLCالسائلة عالية األداء ).5الشكل (دقيقة 0.946 الزمن فظهرت قمة وحيدة عند

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

13

.للمركب المعزول HPLCكروماتوغرام الكروماتوغرافية السائلة عالية األداء ): 5(الشكل

ضمن المجال DADتم إجراء مسح الكروماتوغرام الناتج باستخدام تقنية عند طول بلغت ذروتها فلم تظهر إال قمة وحيدة ) 400nm-200(فوق البنفسجي

ودة الفصل وخلو المادة المعزولة من على ج داللة λmax=268nmالموجة األعظمي .الشوائب األخرى

:تحديد بنية المركب المعزول 3.5. ،)6(الشــكل ،أظهــر طيــف االمتصــاص الضــوئي فــي المجــال فــوق البنفســجي

. λmax=259nm عند الطول الموجي المعزول القمة المميزة للمركب

طيف األشعة فوق البنفسجية للمركب المعزول): 6(الشكل

،)7(الشــــــكل ،عــــــزولللمركــــــب الم (FT/IR) طيــــــف األشــــــعة تحــــــت الحمــــــراءهــــــر أظ :التاليةعصابات االمتصاص

.رجبسليمان و توما و

14

3215cm-1عند العدد الموجي O-Hعصابة امتصاص مميزة المتطاط الرابطة -عنــــد العــــدد المــــوجي األليفاتيــــة C-Hعصــــابة امتصــــاص مميــــزة المتطــــاط الرابطــــة -

2943cm-1 ةد الموجيـــاعـــدالعطريـــة عنـــد األ C=Cمتطـــاط الرابطـــة عصـــابة امتصـــاص مميـــزة ال -

1570cm-1 1475وcm-1 عنـــد العـــدد CH2–فـــي األليفاتيـــة C-Hعصـــابة امتصـــاص مميـــزة النحنـــاء الرابطـــة -

1395cm-1الموجي عنـــد العـــدد CH3–األليفاتيـــة فـــي C-Hعصـــابة امتصـــاص مميـــزة النحنـــاء الرابطـــة -

1361cm-1الموجي 1260cm-1عند العدد الموجي C-Oيزة المتطاط الرابطة عصابة امتصاص مم -ـــاء خـــارج المســـتوي - العطريـــة بـــين األعـــداد C-Hعـــن الرابطـــة تعبـــر عصـــابات انحن

. 900cm-1و 700cm-1الموجية

20

70

30

40

50

60

4000 400100020003000

%T

Wavenumber[cm-1] طيف األشعة تحت الحمراء للمركب المعزول): 7(الشكل

ب للمركـــ (1H NMR)أظهــر طيـــف الطنـــين المغناطيســـي النـــووي للبروتـــون :التالية الطنينيةالقمم ،)8(الشكل ، CDCl3 الكلوروفورمالمعزول ضمن

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

15

تعــــــود إلــــــى ppm(2.09-1.88)االنزيــــــاح الكيميــــــائي تقــــــع ضــــــمن مجــــــال متعــــــددة - .(e,c)المتيلية الزمر اتبروتون

تعــــــود إلــــــى ppm(3.62-3.40)تقــــــع ضــــــمن مجــــــال االنزيــــــاح الكيميــــــائي متعــــــددة -، وقــــد انزاحــــت نحــــو الحقــــل المــــنخفض الرتباطهــــا بــــذرة (d)المتيليــــة ةالزمــــر اتبروتونــــ

.األكسجين يتعود إلى بروتـون ppm(4.48-4.31)االنزياح الكيميائي تقع ضمن مجال متعددة -

نحو الحقل المـنخفض الرتباطهـا بـذرة األكسـجين والحلقـة ، وقد انزاحت(a) ذرة الكربون .البيريدينية

الزمـــــــرة تعـــــــود إلـــــــى بروتـــــــون 5.07ppmي عنـــــــد االنزيـــــــاح الكيميـــــــائ قمـــــــة طنينيـــــــة - .(b) الهيدروكسيلية

بروتـونتعـود إلـى ) 7.94ppm-7.82(االنزيـاح الكيميـائي تقع ضمن مجال متعددة - .(6) الحلقة العطرية

للمركب المعزول ضمن الكلوروفورم (1H NMR)طيف الطنين المغناطيسي النووي للبروتون ): 8(الشكل

CDCl3.

2

3

45

6N

OCH3

CH3

CH2OH

H3C

1 a b

C

d

e

.رجبسليمان و توما و

16

نسبة البروتونات العطرية إلى البروتونات األليفاتية فـي النـاتج المعـزول وقد أكد حسابــــــى ] 6.14+2.89+2.11+0.99)/1.07(= [ 0.0879 ــــــك العائــــــدة إل تطابقهــــــا مــــــع تل

).0.0833 = 1/12(المركب المفترض نظريا (13C NMR) -13أكــدت نتــائج طيــف الطنــين المغناطيســي النــووي للكربــون

النتائج السابقة مـن خـالل ،)9(الشكل ، CDCl3كلوروفورم الللمركب المعزول ضمن :التاليةالطنينية ظهور القمم

4 العطريــة كربــونذرة التعــود إلــى 163.74ppm االنزيــاح الكيميــائي عنــد قمــة تقــع -إلــــى الســــحب اإللكترونــــي باتجــــاه ذرة الحقــــل المــــنخفض ويعــــود ســــبب االنزيــــاح نحــــو

لموقـــــع بـــــارا بالنســـــبة لـــــذرة اآلزوت فـــــي الحلقـــــة ، إضـــــافة إلـــــى كونهـــــا فـــــي ااألكســـــجين .البيريدينية

2 العطريــة تعــود إلــى ذرة الكربــون 156.56ppm االنزيــاح الكيميــائي عنــدقمــة تقــع - إلى السحب اإللكترونـي باتجـاه ذرة اآلزوتويعود سبب االنزياح نحو الحقل المنخفض

.من جهة والرتباطها مع ذرة كربون غولي من جهة أخرى 6 العطريــة تعــود إلــى ذرة الكربــون 147.39ppm االنزيــاح الكيميــائي عنــدمــة تقــع ق -

إلــــى الســــحب اإللكترونــــي باتجــــاه ذرة ويعــــود ســــبب االنزيــــاح نحــــو الحقــــل المــــنخفض .اآلزوت

5 العطرية تعود إلى ذرة الكربون 124.83ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع - 3 العطرية تعود إلى ذرة الكربون 122.57ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع -وقد a األليفاتية تعود إلى ذرة الكربون 61.67ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع -

.انزاحت نحو الحقل المنخفض الرتباطها بكل من األكسجين والحلقة البيريدينيةوقد c األليفاتيةتعود إلى ذرة الكربون 59.64ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع -

.انزاحت نحو الحقل المنخفض الرتباطها مع ذرة األكسجين b األليفاتيةتعود إلى ذرة الكربون 12.94ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع - d األليفاتيةتعود إلى ذرة الكربون 09.20ppm االنزياح الكيميائي عندقمة تقع -

ى الكربونــــات األليفاتيــــة فــــي النــــاتج وقــــد أكــــدت نســــبة الكربونــــات العطريــــة إلــــ

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

17

.مطابقتها لتلك المحسوبة نظريا للبنية المفترضة) 5/4(المعزول

للمركب المعزول ضمن الكلوروفورم (13C NMR) -13طيف الطنين المغناطيسي النووي للكربون): 9(الشكل

CDCl3. ) LC/MS(أظهرت الدراسة باستخدام جهاز التحليل الكروماتوغرافي الكتلوي

صحة االفتراض البنيوي للمركب الناتج من خالل ،10الشكل ،للمركب المعزول .الوزن الجزيئي للمركب المعزولوهو ما يطابق ) m/z = 168(ظهور قمة مميزة

.للمركب المعزول) LC/MS(نتيجة الدراسة بجهاز التحليل الكروماتوغرافي الكتلوي ): 10(الشكل

2

3

45

6N

OCH3

CH3

CH2OH

H3C

1 a

b

C

d

.رجبسليمان و توما و

18

مـن خـالل للمركـب المعـزول لصـيغة المتوقعـة اصـري أكدت نتـائج التحليـل العن ).4(الجدول ،موافقتها للنسب المحسوبة نظريا

ومقارنتها مع النسب النظرية للصيغة المقترحةنتائج التحليل العنصري للمركب المعزول ): 4(الجدول %النسبة التجريبية %النسبة النظرية العنصر الصيغة المجملة

C9H13NO2

C64.6564.74 H07.8308.10 N 08.3708.34 O 19.1318.82

نستنتج من خالل الدراسات الطيفية والكروماتوغرافية الكتلوية السابقة أن .ميتوكسي بيريدين -4-دي متيل -5,3- متيل هيدروكسي 2-المركب المعزول هو

N

OCH3

CH3

CH2OH

H3C

المراجعالمراجع1- HOOVER J. e.; PACKER B. B., 2005- "Remington: The Science

and Practice of Pharmacy", 21th Edition, Volume 2, University of The Science in Philadelphia, 2077.

2- UNITED STATES PHARMACOPIA, 2007- 30th Edition, USA. 3- MOFFAT A.; OSSELTON M.; WIDDOP B., 2003- "Clarke's

Analysis of Drugs and Poisons", 3th Edition, Published by Pharmaceutical Press; London, 2136.

4- MERCK INDEX, 2002- 13th Edition, USA, 1313. 5- ROBINSON M.; HORN J., 2003- "Clinical Pharmacology of

Proton Pump Inhibitors: What The Practicing Physician Needs to Know", Drugs, 63, 2739-2754.

6- PHYSICAL DISK REFERENCE (PDR), 2009- 63th Edition, USA, 3536.

7- MARTINDALE: THE COMPLETE DRUG REFERENCE, 2007- 35th Edition, Volume 2, Royal Pharmaceutical Society of Great Britain, 2189.

8- DEKEL R., 2004- "The Role of Proton Pump Inhibitors in Gastro-oesophageal Reflux Disease", Drugs, 64, 277-295.

2010لعام 70لة بحوث جامعة حلب سلسلة العلوم األساسية العدد جم

19

شنارمريم؛ حراقمنال؛ خوالنيناريمان؛ الحمويخالد؛ خرطبيلزهير؛ فضلون - 9المجلس العلمي االستشاري ،SDR 6المرجع الدوائي السوري 2008- ،هالة

CSC 780 ،مشقد ، والمجلس العلمي للصناعات الدوائية. 10- SONG Q.; NAIDONG W., 2006- "Analysis of Omeprazole and

Lansoprazole in Human Plasma Using Hydrophilic Interaction Chromatography with Tandem Mass Spectrometry (HILIC–MS/MS)", Journal of Chromatography B, 830, 135–142.

11- GALLARDO V.; RUIZ M. A.; LO´PEZ-VIOTA J.; SALCEDO J.; DELGADO V., 2003- "Electro kinetic Study of Lansoprazole and Omeprazole Drugs in Aqueous Suspensions", Physicochem, 218, 21-26.

12- EKPE A.; JACOBSEN T., 2000- "Effect of Various Salts on the Stability of Lansoprazole, Pantoprazole, and Omeprazole as Determined by High Performance Liquid Chromatography", Drug Development and Industrial Pharmacy, 25(9), 1065-1072.

13- TÜRKOLU M.; VAROL H.; ÇELIKOK M., 2004- "Tableting and Stability Evaluation of Enteric-coated Omeprazole Pellets", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 57, 279–286.

14- WAHBI A. M.; ABDELRAZAK O., GAZY A.; MAHGOUB H.; MONEEB M., 2002- "Spectrophotometric Determination of Omeprazole, Lansoprazole and Pantoprazole in Pharmaceutical Formulations", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 30, 1133-1142.

15- CASTRO D.; MORENO M. A.; TORRADO S.; LASTRES J. L., 1999- "Comparison of Derivative Spectrophotometric and Liquid Chromatograpic Methods for the Determination of Omeprazole in Aqueous Solutions During Stability Studies", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 21, 291–298.

Res. J. of Aleppo Univ. Basic Science Series No.70 2010

1

Isolation of 2-hydroxy methyl-3,5-dimethyl-4-methoxy pyridine resulting from Omeprazole Degradation in its

Pharmaceutical Products.

M. Touma*, M. Seuleiman **, A. Rajab***

* Dept. of Chemistry. Faculty of Science University of Aleppo **Université Pierre & Marie Curie (Paris - France)

***Postgraduate Student (PhD) Dept. of Chemistry. Faculty of Science, University of Aleppo

Abstract

The degradation component of Omeprazole in its

Pharmaceutical Products (2-hydroxy methyl-3,5-dimethyl-4-methoxy pyridine) has been isolated after three years storage in regular conditions (25oC/60% RH); the same component has been isolated after eight months storage in accelerated conditions (40oC/75% RH).

2-hydroxy methyl-3,5-dimethyl-4-methoxy pyridine has been isolated using column chromatography, TLC, and characterized utilizing UV, FT-IR, 1H NMR, 13C NMR, LC/MS and microanalyze. Keywords: Omeprazole, Isolation, Degradation, Stability, Shelf life, Accelerated.

Received 27/1/2010 Accepted 5/5/2010