Inhibition of serine/threonine-specific protein phosphatases causes premature activation of cdc2MsF...

12
Inhibition of serine/threonine-speci®c protein phosphatases causes premature activation of cdc2MsF kinase at G2/M transition and early mitotic microtubule organisation in alfalfa Ferhan Ayaydin 1 , Emese Vissi 2 , Tama  s Me  sza  ros 1 , Pa  l Miskolczi 1 , Izabella Kova  cs 1 , Attila Fehe Âr 1 , Viktor Dombra  di 2 , Ferenc Erdo È di 2 , Pa  l Gergely 2 and De  nes Dudits 1, * 1 Institute of Plant Biology, Biological Research Center, Hungarian Academy of Sciences, H-6701 Szeged, PO Box 521, Hungary, and 2 University of Debrecen, Faculty of Medicine, Department of Medical Chemistry, Debrecen, Bem te Âr 18/B, H-4026, Hungary Received 21 December 1999; revised 25 April 2000; accepted 3 May 2000. *For correspondence (fax +3662 433188; e-mail [email protected]). Summary Reversible phosphorylation of serine/threonine residues of cell cycle-regulatory proteins is one of the key molecular mechanisms controlling eukaryotic cell division. In plants, the protein kinase partners (i.e. p34 cdc2/CDC28 -related kinases) have been extensively studied, while the role of counter-acting protein phosphatases is less well understood. We used endothall (ET) as a cell-permeable inhibitor of serine/ threonine-speci®c protein phosphatases to alter cytological and biochemical characteristics of cell division in cultured alfalfa cells. A high concentration of ET (10 and 50 mM) inhibited both protein phosphatases 1 and 2 (PP1 and PP2A), while a low concentration (1 mM) of ET-treatment primarily reduced the PP2A activity. High concentrations of the inhibitor increased the frequency of hypercondensed early and late prophase chromosomes that could not enter metaphase. In contrast, a low concentration of ET did not interfere with chromosomal events but caused signi®cant alterations in the organisation of microtubules. Exposure of cells to 1 mM ET resulted in disturbance of preprophase band formation, increase in the number of nuclei with prophase microtubule assembly, premature polarisation of the spindle, and abnormal phragmoplast maturation. Under the same conditions, the ET- treated cells exhibited an early increase in cdc2MsF kinase activity. These results suggest that PP2A contributes to the control of mitotic kinase activities and microtubule organisation. Normal chromosome condensation and mitotic progression are dependent on both PP1 and PP2A activities. The presented data support the functional role of protein phosphatases in the co-ordination of chromosomal and microtubule events in dividing plant cells. Keywords: serine/threonine phosphatases, chromosome condensation, preprophase band, Cdc2-related kinase, endothall, Medicago sativa L. Introduction Reversible protein phosphorylation is a fundamental mechanism in the regulation of a large number of biological functions. Achievement of such control requires co-ordinated action of the interconverting enzymes (protein kinases and protein phosphatases (PPases)). In eukaryotic cells, four major classes of Ser/Thr-speci®c PPases (PP1, PP2A, PP2B and PP2C) have been identi®ed according to the biochemical criteria (Cohen, 1989). Catalytic subunits of PP1 and PP2A are encoded by two related gene families (reviewed by Cohen, 1997). Protein phosphatase 1 (PP1) has broad substrate speci®city in vitro and is sensitive to heat-stable proteins termed inhibitor-1 and ±2. The catalytic subunit of protein phosphatase 2A (PP2A) shares 50% homology with PP1 at the level of The Plant Journal (2000) 23(1), 85±96 ã 2000 Blackwell Science Ltd 85

Transcript of Inhibition of serine/threonine-specific protein phosphatases causes premature activation of cdc2MsF...

���������� �� ����������� ����� ������ ����������� ������� ���������� �� ������ ���� �� ������������� ��� ���� ������� ���������� ����������� ���������

����� �������� !� "��� #���$ �$%�$ ��� &�$ � ������%�� �%����� '���$�� ������ ��$ �� "����� (�����$���

���� !���) ��� &�$ � ������ ��� ($� (����� *���������� �� �� ������ ������ � ���� ��� ������� ���� �� � �� ���� ��������� ������ � ����� �! �" #$��

���� ��� ��$%��&������ '�(������ ) ����� *�������� '�+ ������ *���� � ���������� '�(������ ��� ��,� �-.�� ��/�$��

���� ��

�������� �� ������ � � ������� �� ����� ����� �������� � ��� ��������� �������������� � �! "�##� $���%%� �&��� '����(�'���'���)�*�'&�)�+���,'-�

+������

,����� �������������� �� ����������� ���� �� ��� ���� ��������� ������ � �� �� ��

�� �������� ������� ����������� ��������� ��� �������- �� ����� �� ������ ���� ������ .�--

�/0�����1(1�2 ����� ����3 ��� �� 4������ ����� 5��� �� ��� �� ������ ������ ������

�������� � � 5�� ��������- 6 �� �������� .!#3 � � ��� ������ ��������� �� ����

������� ����� ������ �������� �� ���� ����������� ��� ���������� ������������ �� ���

������� �� ������� ������� ���- � ���� ������������ �� !# .�7 ��� 87��3 �������� ���� ������

�������� � ��� � .&&� ��� &&��3 5��� � ��5 ������������ .� ��3 �� !# ������� ���������

����� �� &&�� ��������- 9��� ������������ �� �� ��������� ������ �� ��:���� ��

���������� ���� ��� ��� ������ �������� ���� ����� ��� ��� ������- �� ������� �

��5 ������������ �� !# ��� ��� ������ 5��� ���������� ��� ��� ���� ��������� ��������� ��

�� ����������� �� ����������- !4���� �� ��� �� ��� !# ����� �� ��������� �� ��������

���� ��������� ����� �� �� ����� �� ����� 5��� ������ ���������� ����� �������

����������� �� �� ����� ��� �������� ����������� ����������- ;��� �� �� ��������� �� !#

����� ��� 4������ �� ���� ����� �� ������ ���� ��������- #� ���� ���� ���� &&��

��������� �� �� ������� �� ������� ���� �������� ��� ���������� �����������- <����� ��������

���������� ��� ������� �������� �� ������ �� ���� &&� ��� &&�� ��������- #� �����

���� ������ �� ���������� ��� �� ������ �������� �� �� �� ���������� �� ���������� ���

���������� ��� �� �������� ����� ���-

'�5���= ����������� �������� �������� ���������� �������� ���� 1��� �����

���� �������� �������� ���� >-

������������

���������� ������� �,���,��������� �� � '��������

��,���� �� �,� ��+'������ � � ���+� �'��� �

�����+���� '�������� ��,������� � �'�, ������� ��.'����

��&��������� ������ � �,� ��������������+ ��)���

�������� *������ ��� ������� �,���,������ �//����--� 0�

�'*������� �����1 �'� �2�� ������� � 3��45,�&�����6�

//���� �//�1 //��1 //�7 ��� //�8- ,��� ���� ������6��

��������+ �� �,� ����,����� �������� �8�,��1 � % -�

8�������� �'�'���� � //� ��� //�� ��� ������� �� �9�

������� +��� ������ ������9�� �� 8�,��1 � :-� /������

�,���,����� � �//�- ,�� ����� �'������� �����6���� �� &���

��� �� ��������� �� ,���&������ �������� ����� ��,������&�

��� ;�� 5,� ��������� �'�'��� � ������� �,���,����� ��

�//��- �,���� ��< ,����+� 9��, //� �� �,� ����� �

0�� �� �� 1��� � �����- �/��-1 %�; #

����� 7���*9��� 3������ =�� %�

���� ���� ��.'����1 �'� �� ��� ��,������ �� ��,������&� �� &�

�>��� ��� ?���+�1 � �-� 5,��� �9� �,���,������

��� �� ������+'��,�� �� �� �������� ����������� ��9����

���&������� ��,������� �'�, �� �*����� ���� �@�-1 ���&

�,������ �� �����,��� �A5- ����B�����, ��� ���B�����,1

� $-� � ,�+, ��+��� � ,����+� ���+�� ����� �

�,� ��� ����1 ��� � ,�+, ��+��� � ����'�������

������������ ���9��� ��+����� �� �����+��� �� �&

��� ��� �����1 ������ �,�� �,��� ��)��� ��� ��������

�� '�������� ���� '������� �����C��1 � :-� 5,�

�������� � '����� �� 3��45,� //���� ��������� �,��

�,��� ��)��� ��� �������� �� �,� ������� � ���'��'���

��� '�������� ������� ���������� 9��, �������

�'������ �� //�� ��������� �'�'��� +���� ���'���� ��

�� ���� �� ������� ������� ��� �����'�'�� +��9�,

�A���� ��� 3���*1 � :� B����,��� �� ��1 � �� 3����,

�� ��1 � #-1 �� ��� ��� '����� �� //�� ��+'������

�'�'��� +���� �D��� �� ��1 � �� B����,��� �� ��1 � #-�

�'������� �� //� ��������� �'�'��� +���� �

� ��� ������ ����&��� � �7���* �� ��1 � �-1

���� � ��� ������ +�(� �@,*'�� �� ��1 � %%�

@,*'�� �� ��1 � % -1 ��+�������� ����� �� ������ ���

������1 � % - ��� '��+��� ��!��� �� ��1 � �- ���'����

�� �����! ������ �,�������� 9��, ��������� �,���&

����1 ������� �������� ��� �,������ ����������

�� '������� '���+ ������ ��+'������1 //���� ��*� ����

�� �,��+��+ �,� ���,���,��������� ����'� � �����6�

�,���,�������� �'�������� ����'���+ ���� �������� �������

*������1 9,��, ,��� ���� ���*�� �� �,� ��������� �

�,������ ������������1 �'������� ����������1 �'���&

�� �������� ����*��9� ��� ������� ������� � ������

������� ������� ������� ��� 7���,1 � % � ������

�� ��1 � % � =�,*�1 � % � ������ �� ��1 � % � E���'��

��� E'���1 � % -� ��� �!����1 ��9���+'������ � ����

*����� �� �,� ����� � ������ �� //�� ,�� ���� �,�9�

�� � ������� � �'*������� �!��'���+ ������ ��� 2��+��1

����! �� ��1 � % � =��1 � �� �� ����6�,1 /����� �� ��1 � ��

�'����+ �����1 A���� ��� 3���*1 � :-� 0� �� *��9� �,��

������� ,����+'�� � ���� *����� ���$����- �!��� �� �

������� � ,�+,�� ������ ���� �����9 '���� �� ��1 � %�

������� �� ��1 � :-� 8���������+ �,� �������� ���6��� �

�,� �� �� � *������ ��������47� ��� ���-1 ��6���

�������� ��� �� ����+����� �,�� �,�9 � ,�+, ��������

� �������47 �� �,� D� �,��� ��� �� �������� ���* ��

������� �� ������ ������ 5,� ������� ���� � �������

*����� �� ������ 9�� '��,�� ��,������ �� �,�

������������ � �,�� *����� �� �������,��� ���� �/�/�7�-1

�����'����� ���+ �� ����� ����,���1 ������ ������� ���

�,��+������ ���C�)�C ��� �� ��1 ����-� � ����� �������

� �,� ��+'������ � ���� ����� *������ ,��� ����

�!��������� ��������1 ���,�'+, �,� ���� � //���� ��

�,� ��+'������ � ����� ��������&������� *������ ,�� ���

���� '��� '�������� ���� 5������� � ����� ����� 9��,

�,���,����� ��,������� ��'��� ������ ������+���� ��&

����������1 ���������+ �,� ���������� � �,���

��)��� �� ����� ����'��� '������� �7��*�� ��� >�����1

� :� F,��+ �� ��1 � �-�

0� �,�� 9��* 9� '��� � ,�������� �A5- �� ��'�� �,�

� ���� � //��� ��,������� �� ������ ��+'������ �� �'��'���

�� �� � ������ A5 �� � ������ ��� �����6� ��,������ � //��

��� //� �=� �� ��1 � �-� 0� �� ������'����� '�� '� �� ������

����� ���� ��'����1 ����� �� �� 9���� ���'��� ��� ��� �� ��*��

'� ���, �� �'�������� �'��'�� ����� ��� �� �� �����

����'�� � ������ ������1 9,����� ��,�� �,���,�����

��,������� �� ��� ������ �� ��������� ��� ����� � �����

����B�����, �� ��1 � $� ����')�9� �� ��1 � %:-� >� ,���

�������� �,� �������������&��������� � ���� � A5 ��

�,������ ������������ ��� �,� � ��� � ��9 ������&

�������� � A5 �� �,� D�4� ������ �� �,� ����� �

�����'�'��� ��� �'����� ����� ���� ������ �� �������� ��

�,��+�� �� �,� *����� ���������� � �� ����� �� �� � ��$����&

������� *�������

,���

3���� �� �� ������� ������+������ ����(��� � �

+����� +��+� � ���

0� ������ �����1 A5 ��,����� ���, //� ��� //�� �A���G ��

�� ��1 � �� =� �� ��1 � �-� 7���� �� �,��� ���� 9� ������

�,� � ���� � �����'� �������������� � A5 �� �� �� � //�

��� //�� ���������� �� &�& 9,�� �'��'��� ����� 9���

�!����� �� ���������+ �������������� � �,�� ��,������� ��

�,�9� �� ��+'�� ���-1 �,� ����� �,���,����� �������� 9��

���'��� �� A5&�������� �� � ����&��������� ������

3��������� � �,� �9� ����� � �,���,����� ���������� '���+

�����6� ��,������� �@� ��� ��,������&�- �� �'����������&

����� ����9�� '� �� ������� �,� ����������� � �,���

��)��� �+����� A5� ��+'�� ���1�- ����������� �,�� A5

��,����� ���, �,���,������1 ���,�'+, //�� �� ���

��������� �� ��,������� ��������������� 5,� �� ������

���9��� �,� �9� �,���,������ �� �������� �� A5 9��

��� �����'���� 9,�� �'�������������� ��)���

9��� �������� ���+'�� ��-� ���,�'+, �������� � �,� �����

9��, � �� A5 ,����� ���'��� �,� �������� � //�1 '���� �,�

��� ���������� //�� 9�� ��,������ �� ��;$�< ��

������� �� �,� ������� ������ 5���� A5 ���'��� �,�

�������� � //�� �� #�< ��� ���� ��,������ //� ��������

�� ��<�

3���� �� ��� ����� � ���� (��� � �������

������ ��� ������ � ��� ������

��� �,� �������� � ������+���� � ���� � �,���,�����

��,������� �'���+ ���� ��������1 �� �� � �'�������� �����

9��� ���'����� 9��, ���� A5 ��� �3@ ��������- �� �$,

��� ������ 9��� �������� �� ��'����+ �,� ����� ��

�� ����� �,���� � ������ ���+'�� �-� 5,� �'��� � �����

%# )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

�� ����� ��� ���� ����,��� 9�� ��+��6������ ��������� ��

�,� �������� � A5� �/0 �������+ � ����� ������� 9��,

A5 �������� �,� ���''������ � ������� ������

6+'��� 9��, ����� ��� ���+,� ��� � �'���� 9��,�'�

�'������ ������ ����,���- ���+'�� �1 �����- ��� ���������1

������������� ����,��� �,������� ����� ����,���-�

�����,��� ��� ����� ������ ���+�� ��'�� ��� ��

�������� �� �,��� ������+���� ������������� 5,� �,��� �� ,-

���'������ � ����� 9��, �� ����� �������������� � A5 ����

���'���� �� ��+��6���� �,������� ������������ �� �

����&��������� ������ 5������ ���,���+���� �����&

������ ��� ��������� �� ��+'�� �� �� �� � ����� �!����� ��

��� A5 ���+'�� ��;,- �!,������ ����� �,������

������������ �� ������� �� �,� ������� ���+'�� ��;�-�

0� ��������1 �������� 9��, �� �� A5 ��'��� $�< �������

������ ���+'�� ��;�1�- ��� �� ���� A5 ������������

����� ���� ��� �����'���� ��� ��.'��� ���+'��

�;�-� @��������������� � ���� ����,��� �,�������

���+'�� �21- ��� ��������� ��'� ������� ���+'�� �*1�-

9��� ���� � ��� �������� �� �,� ������� ������

5,� �������������&��������� � ���� � A5 �'���+ D�

��� � �,���� 9��� '��,�� �������� �� ����,����������

� �� �� � �'�������� �'��'��� �� ,����!�'��� �?H- ��

�#,� ��������+ �� I�9 ��������1 $�;$�< � �,� �����

�������� �� ?H ����* 9��� �� �,� 3&�,��� ���+'�� $-�

>,�� �,� �'��� � 3&�,��� ����� ��������� �#, � ��� �,�

������ � ?H- ��� �� �� �� A5 9��� ����� �� �,�

�'��'��� �� ������� �,� � ���� �,�� ��� ����������� � E�

����,���� ���+'�� $-� ���������+ �,� �'��� � ����� �� �,�

D� �,��� ��� ������ ������� ��������� �,�� A5 ��������

����� �� ����* �,� D� ���+������� ��� � ��+��6����

�'��� � ����� ������� �,� ������ �,���� ?�9����1 �,�

�'��� � ����� �� ������ 9�� ��9�� �� �,� A5&�������

������ �,�� �� �,� ������� ������ �� �,� ���� �,��� ���

������ � ������+�

7���� �� �,� ������+���� ������������1 9� �����'�� �,��

�,� � ���� � ��9 ����- ��� ,�+, ���1 ����- ���������&

����� � A5 �� �� ��+��6������� 5������� � ����� 9��, ���

A5 ����� �� +������� ������� ���������� �� �,������

���'��'��1 9,��� ,�+, �������������� � �,� ��,������

����� ���� 9��, ���, ������� ��� ���'��'��� �,������

��+����������

����� �- �� &�& � ��� � A5 �� �,� ���������� � �� �� � //� ��� //���5���� �,���,����� ���������� 9��� ��������� �� �,� �������� � ���������+ �������������� � A5 ��-� ���������� � //� ��� //�� 9��� ������� �� ��/&�,���,������� �� �,� �������� � �*����� ���� ��� ��,������&�1 ������������ ��- ��� �� �'��������������� '���+ �����6� ���������� �+����� //� ���//�� ��-� A���� ���� ��������� �,� �������� ���������� � �,� ���'��� ���'�� �� ��1�- �,��� ��� ��- �9� ������������

����� �- A ��� � ���� A5 �� ������ ���+������� ��� �,������������������ �� �����,����'��� +��9��+ �� �� � ������8���� 9��� �!����� �� ���� A5 �� �$,� A���� ����,��� ��&���-1 ��������,��� ��&���-1 ����,��� ����-1 ����,��� ����- ��� �����,��� �����-9��� ��������� �� �/0 �������+ � �,� 6!�� ����� � ��� A5&���������8������ �'��'�� 9�� ���'����� 9��, ���< �3@ ��� %��;���� ����� 9�����'����� 0����J ,������������� ����� ����,��� �'���� �����9�- � ��� A5�!���'��� 7�� ���������� ����

���+� � ��� �� ���� ��&���� %:

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

����� /- A ��� � �1 �� ��� ���� �������������� � A5 �� �,������ ���,���+��8���� 9��� ���'����� �� �, 9��, ���< �3@ ��������- �� �1 ��1 ���� A5� ��� �������� ��� ��� � ��� �,� ����� ������� ��� ���'��'��� ���������� � �,������� �� ����,��� ��-1 ����,��� � -1 ����,��� �+- ��� �����,��� �,- �� ������� �� ������������+ �,���� � ������� �'��'�� ��1�1�1�1������������-� ?�+,�� �������������� � A5 ���1 ����- ��� �� ������������ ������������ �21*11�1�-� 5,� ��+�����+ � �,������ ������������ ���������� �� ����� �� ����� �!����� �� �� ��� ���� �������������� ��-1 ����� �,���� � ����� ������ 9��� ���� �������� �� ���� A5 ������������� ��-� 5,���������+� � ������������ 9��� ��'���� ��� ��� ��������� �� ��-� 5,� ��� �� ��- ���������� ���� 0����� �,�9 �,� �'����������� � �/0 ��+�� �������+,� 6��� ����'��� � ��� ��+� �'��������� ��� +�� ����������� /���'��� ��� ��������������� � ��� �,� ����� �������� �� �,� �������� ������ ��K ���������-�

����� 0- @�� ��� ���� A5 ����9 ����� �� ���+���� �,��'+, D� ��� ����, �� ����� �������@�� ��� ���� A5 9��� ����� �� �,� #�, , � ��� �,� ������ � ,����!�'��� ��� �,� ��.'���� � ����� �� �����'� ���� ����� �,���� 9�� ��������� ���,�� I�9 �������� �D�1 31 D�- ��� �� ��'����+ �,� ������ ����! ��L %��;���� �����- � ��� �/0 �������+ � 6!�� ������

%% )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

������� ��� ������(��� ������������� �� ������ �����

�"+��� � �4 ��� ����� ��

0� �������� �� �,������ �������+1 �,� �����'�'�� ��5-

��+��������� � A5&������� ����� 9�� ���� ��������� 0�

�,��� �!�������� � ��9 ����- ������������� � A5 9��

������� �,�� ��� ��� ��+��6������ ����� �,� �,������

��+���������� 3����� 9��� ��������� �� �������� �'��&

��������+ � �5�1 �� �'�������� �'��'��� ����,�������

9��, ?H� A5 ����- 9�� ����� �� �,� �'��'�� %, � ��� �,�

������ � ?H ����* ��� ����� 9��� 6!�� ���,�� �� ���� D�

��� ����� ������ ��$,- �� ���� ������ ��� ,- ���+'��� � ���

#-� 0� ������� �'��'��1 ��< � ����� ��������� /�/�7�

������� �� �,� �$�, ,�'� � ����,����'� +��9�,

���+'�� ��-� 8�����+���� �������� � A5&������� ����� 6!��

� ��� %, � ?H& ��� �'��'���+ ����� �� ������ �,� �5

��+��������� 9,��, �� �,������������ � ����� /�/�7�

������� ���+'�� �1 ��+'�� #��-� 5,� �2����� �

�,� /�/�7�&��*� ���'��'��� �������� �� �,� A5&������� �����

��������� � ������� � ��+����� �5 6���� �������

���+��� �� �������� ������� 0� ������� �'��'��1 ���'����� 9��,

���< �3@1/�/�7� ������� 9�� ����� �� �,�9� ��

��+'�� #��-� 0� ������� �����1 �,� ��'������ ��� ���������&

���� � /�/�7� 9�� ����9�� �� �,� ������� � �

�����'����� ����,��� ��+� ���������� �� �,� ��+�����+

� �,������ ������������ ���+'�� #�-� 0� ��������1 A5

�!���'�� ���'����� �,� ��+��������� � � ����,��� ��+�&

��*� ���'��'�� ���'�� �,� �'����� ������ �� �,� �������

� �,������ ������������ ��� 9,�� ������ �'�����'�

��'�� �� ����+����� ���+'�� #��-� 5,� ��.'���� � �'����

9��, � �����'����� ����,��� ��+� 9�� ���& ��� ,�+,�� �� �,�

A5&������� �'��'�� �,�� �� ������� ������ ���+'�� ��-�

0��������� � ��� �,�� ���� A5&������� ����� ���������

�,�� �� �,� �������� � ��� A51 �,�/�/�7� ������� 9��

������� ��� �,� �5 �������'� 9�� �����'���� ���''&

����� ���'�� �,� �'����� ������ �� �,� ������� �

���������� �,������ ������������� H���� �����

����������1 �,� �'����� ������ ������'���� 9��

����9�� �� �5 �������� � �,� ������'����� )��� �� ����,

*������,���� � �,������� 9��,�'� ������� �������� �

�,� ������� �������'� ���+'�� #�1�-1 9,����� �� A5&�������

����� �5� �,�9�� �����'�� �������� �!������+ �� �,�

�������� ���+'�� #��- �� ��� �'����� ��������� 5,���

������������ �������� �'���+ �,� �������,��� ���+� �

������1 �� ��� �����1 ���'���� �� �,� ��������,��� �

'�����������1 �� �,�9� �� ��+'�� #���-� 0���������+��1 ����

'�������� �������� ��'�� 6����� �� �������+�� �� �� �

����� ������� ����,��� �������� ��+'�� #� �- �,�9� �

'�������� ������� 9��, ��++��+ �,�������� ����,���

��� ����� �����,��� �5 ������� �� A5&������� �����

���+'�� #+�1,�- �������� �� �� ����� �� ������� ��

������� ����� ���+'�� #+1,-� @� �,� ��,�� ,���1 �!����

������������ 9��� �������� �'���+ �,� ��'������ �

�,��+������ �� ���� �����,��� � A5&������� ����� ���+'��

#��-� 5,��� ����� ��'�� ��� �� ���,�� ��9 ���� ����� ��

�������� �����'�'��� �'���+ �!�� �� ������ ���+'�� #2�-��� ���� ������1 �� , � ��� ������� � �,� ?H ����*1 �,�

�'��� � ����� 9��, ������� �,��+������� 9�� ,�+,��

�� A5&������� �'��'�� �,�� �� ������� ����� �!,������+ �����

�,��+������� ���+'��� �� ��� #�-� 0� �,� ������ �����1

�������� �5� ��� �,� ���� ����� ���������� � ��� �,�

��������� � ������ ���+'�� #2-�

3'������+ �,� ���'��� � � ������ � ������+���� ����1

9� �����'�� �,�� � ��9 ������������� � A5 ��� �������&

���� ����� �,� �5 ���'��'�� �� �� �� � ������ 8�&����������

���9��� �5 �������'� ��� �,������ ��+��������� ��

������� �� A5&������� �����1 �����.'����� �5� ���

�����'���� ������ �� �,� ��������,��� � �,� ������

������� ��.'���� �� ���������� � �,��������

��&�&����� ������ 5�� ��� 6���$*�' �� ���$*�)7

�� ��� ���� ��� ��&���� �� � � ����� �"+��� �

����� ��

���+ �'*������� ��+�����1 '��.'��� �� ����� �����1 �,�

D�4� ���� ����� ���+������� �� ���������� �� � ���� �

����&������� +���� ��� *����� �����!�� ���� �,� �����9

�� ��C�)�C ��� �� �� �����-� 0� �� �� �1 �� ����� �,��� ����&

������� *������ ��� ������ �� D�4� ������ 3���� �,� ������'�

������+���� ��'���� ����������� �,� �����6� � ��� � �

��9 ������������� ����- � A5 �� �����'�'�� ��+����&

�����1 9� �������� �,� *����� ���������� �� A5&������� �����

���+'�� :-� 8'��'��� ����� � �� �� � 9��� ��������� ����,���&

���� 9��, ?H� ��������+ �� �,� I�9 �������� ����1 �,�

��.'���� � D� ����� 9�� ��< �� % , ��� �,� ������ ���*

9�� �������� �� �# , � ��� �,� ������� � ?H ����* ���+'��

:�-� 8���� �� % , � ����,����'� +��9�, 9��� ���,�� �������

9��, ��� A5 �� ���< �3@ '��� �� �,� ������� � A5�

3'���.'�����1 �� ��6��� ���������1 ������� �!������ 9���

�������� �� *����� ������ �� �������� �'����������&

����� 8- A ��� � A5 �� �,� ��.'���� � ����� �� �����'� �,���� � �����'�'�� ����� �� ����,������� �� �� � ���� �'���������A5 �� ��- 9�� ����� �� %, � ��� �,� ������ � ,����!�'��� ��� �,������'�'�� �,���� 9��� �������� �� �������� �'��I'��������� � ������ 6!�� �� �,� �$�,, ��� ���� D�4����� ������- ��� ���, , ��� ����������-� 3���,���������� ��������� 9��� �,� ��� �� �� ��+'�� :��-�/�/�7�J �������,��� ����1 /��8�+�J �����'����� ����,��� ��+� �5�1/������J �������,��� �5�1 ����J ����,��� �������1 ���J ����,����5�1 /,��+J �,��+������� � L %��;���� ������

���+� � ��� �� ���� ��&���� %

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

���� 9��, �����6� ������� ���������� ���+��� �� ��1 � :-�

?������ ?� �,���,��������� �� �������47 *������ 9���

��� ��I'����� �� A5 ���+'�� :�-� 8����� *�����

��� ���������� �,���,�������� ������������� H���+ �,��

�'������� � ���'��� *����� �������� 9�� �������� �� �,� A5&

������� ����� ���+'�� :�-� 0� ��������1 ������� *����� 9��

������������ ��������� �� A5 �� ����������� *����� ������

���+'�� :�1�- �,'� ���������+ � ��� �,� � �� ,������ ?�

�,���,���������� 0� A5&������� ����� �,�� *����� 9�� ,�+,��

������ $ , ������� �,�� �� �,� '�������� ������ 5,� �����

����� ?- 5,� � ��� � ��� A5 �� �����'�'��� �'���+ D�4� �����������������'�'��� � �� �� � ����� 9��� �������� �� �������� �'��I'���������� 8������ �5� ��� ����������� �� ��;2-� ��- 0�����,��� �������� �5�� ��-�������,��� ���� �� ���� D� �,���� ��- ���''������ � ����,��� �5� ���'�� ���������+ �,�������� ��- ��� ��- �������� � ������'����� ���� �� ��������,���4�������,��� �5� �� ����, '��� ��������� �,�������� � - ����,��� �������� �+- ����,��� �5�� �,- �,��+������ ������� �� ����������,��� ��� �,������ ��������������� ��- ��'�� �,��+������ ��� �'���'� ������� �� ���� �����,���� �2- ������������ � �������� �5� ��� ��������� � ��� ����*������� �5� �������� �� �,� �������� � � �� A5 ���;2�-� ���- 0�����,��� �������� �5�� ���- ������� �������,��� �5 6���� �� ���� D� �,�������- �����'�� ���''������ � ����,��� �5� ���'�� �'���'� 9��, ������ �'�����'�� ���- �����'���� ��������� ���� ����,���4�������,��� �5� ���'���,�������� ���- �������1 '�������� �������,��� �5�� � �- '�������� ������� 9��, ��++��+ �,�������� �+�- ����,��� �5�� �,�- �,��+��������'������ �� ����� �����,��� ��� �,������ ��������������� ���- ������� �,��+������ ������� 9,��� �'���� �������� �� ���� �����,���� �2�- �������� �������� �5� ��� ���� ����� �� �,� ��� � ������� 5,� ��� �� �2�- ���������� ���� /���'��� � �5 �'����������+ ��� ������������+ �/0 �������+ � �'����� ������� 9��� ��������� ��� ����6������ ������� �� +���� ��� ���1 ������������� /���'��� ��� ��������������� � ��� �,� ����� �������� �� �,��������� ������ �� K ���� �����-�

� )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

��������� �� ������� *����� '������ �+,� �� ������� ��

�����'�� �5 ��+��������� �� ����� ������� 9��, A5�

(������

5,� �2����� � �,� ���� ����� ��+'������ �������� �� '����

�,� ������� � �������� ��� ��+����� �,���,���������

������* ����� ���������� �� � ������� � ������� *������

��� �,���,������� 5,� ��+��6����� � ������4�,�������&

�����6� �,���,��������� �� �,� ��+'������ � ���� �������� ��

9��� ���'����� �� �� ����� �!��������� ������ �'�,

�� ����� ��� '��+��� '����� �B����,��� �� ��1 � ��

3����, �� ��1 � #- �� 9��� �� �,� �������� � 2��+�� ��

������ ����� 9��, �,���,����� ��,������ @� �����!

�� ��1 � �� 5�'�����)� �� ��1 � :� M���,��� �� ��1 � �-�

3'������+ �,� �������� �'������� ���������1 �� �� ��*���

�,�� ���, //� ��� //�� ��� ��������� ���'��� ��,������� �

���� ����� ������� ���,�� �� ���������+ +��9�, ��,������� ��

�� ��,������+ +��9�, ���'������ ���� �����9� �� 7�����1

� � ����9��� �� ��1 � -�

0� �,�� ��'�� 9� ����������� �,�� A51 � ������

,�������� ��� � �������������&��������� ��,������ � //�

��� //�� �?��*����1 � �� =� ��� 8�����1 � �-1 ��'��

��+��6������ ����'�� �,� ��&���������� ���9��� �,���&

��� ������������ ��� ��������&������� �����'�'��

�������+����� �� �� �� � ������ 3������� �� @�1 �,��

��,������ ���'��� ���, //� ��� //�� ����������1 ���,�'+,

��� �����6���� �� ���� �����'���� �A���G �� �� ��1 � ��

���B�����, ��� ���B�����,1 � $-� 3���� A5 ������ �����

����� ������1 �,� �������� �� � ��9 ������������� �

��,������ ��'�� �� ������� 0� �'��'��� �� �� � �����1 �,�

�������� � ��� A5 �� �,� ���' ��'��� ��� ����������

//�� ��,�������1 9,��� //� �������� ������� �����������

'�� ������ 7��, //� ��� //�� 9��� ������������

��,������ �� ,�+,�� �������������� ���;��� ��- � A5� @'�

��)�� �������� ������ �'����� �,� �� �������� �������� �

�� �� � //� ��� //�� �� �����'� �������������� � A5

�� &�&8 E�����,�����1 �,�� ��� ��� �' 6����� �� � �������

'�������� ������������� ���9��� �,� ����� � �9� ����� �

�,���,�������

>� �,��� ��� ������� �'� � ������+���� �������� � �� �� �

����� �!����� �� ��9 ��� ,�+, �������������� � A5� 5,���

��'���� �������� �,�� �,� ��+��������� � �����'�'��� ��

D�4� ����� 9�� � ����� �� ��� A5 �������� 9��,�'�

������� ������������ �� �,������ ������������

���+'�� �-� 0� ��������1 ���'����� � ,�������������

�,������ ������������ ��� ����*��+ � ������ 9���

�������� �� ,�+,�� �������������� � A5� /�����'���1

������� ����� 9��� ������� 9��, ���� @� �F,��+ �� ��1

� �-� 5,�� ���������� ,�+, ���� � ��,������ ��'��� �!����

+���'��� ������������ � �,������� ��� �,� ����*��+

� ���� ����� ���+������� �� D� �!��� 5������� � �� �� �

����� 9��, �� �� ���� A5 ���'���� �� ������ �,������

������������ ������������1 ,�9����1 ������ 9�� �'�&

������ �� ��� ����,��� ���+'��� � ��� �-� 7���� ��

�,��� ������+���� ������������ 9� �����'�� �,�� �'���+ D�

�,��� ������4�,�������&�����6� //���� �!,���� ��+'������

� ���� �� ����'��� ��������� 9,��, ��� ��.'���� ��

����� �,������ ������������ �� ����,���� /�����

'��������+ � �,��� �,���,������ �� ��.'���� �� �����

����+ � �,������ ��+��������� ��� ���+�������

�,��'+, ����,���� 3���� �� �� � ����� �� 9,��, ��� A5

���'��� //�� �������� �� ��;$�< ��� ��� �,�9 �����'�

����� @- /����'�� ���������� � 8������ *����� �����! �� ��� A5 ��D�4� ���������� �� ����,������� �� �� � ���� �'���������B����� ���������� 9��� ������� 9��, ,������ ?� ��������47 ��� �- ��������������� �������- � ��� ������������� � �.'�� ��'��� � �!������� �������� 9��, ����&8������47 ��-1 ����&8���� ��-1 ��� 9��,����&8������ �� ��� �- *����� ����������� ���.'���� � ����� �� �����'����� ����� �,���� 9�� ��������� �� I�9 �������� �D�- ��� ����'����+ �,� ������ ����! � ��� �/0 �������+ � 6!�� ����� ��-�

���+� � ��� �� ���� ��&���� �

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

������������ �� �,������ ������� ��� ��������

������1 9� ,����,����� �,�� �,��� ������ ��� ����

��������� �� //�� ����������� 0� ��������1 ��+��6����

���'����� � ���, //� ��� //�� '������� '��� �,� � ����

� ��1 �� �� A5 ,�� ������ �����.'�����1 �'�, ��

����'���� �,������ ���,���+� ��� ������� ��+����&

����� ��� ��,������� � ������ ���+�������� 0� ?�=� �����

���� ,�+, �������������� � @� ����;���- ��'�� ���'��

�����'�� ������ 9,��, 9�� ������� �� �,� ��,������� �

//�� @� �� � ��9�� ������������� �,�� ����� 9�� �' 6�����

�� ���'�� //�� ��������1 �'� ����� �� ���'�� �����'��

������ �D,��, �� ��1 � #� D,��, �� ��1 � %-� 0� �� �� �

����� ,�+, ����� � A5 ��������� �,� �2����� � //�� ���

//� ����������� 5,��� ��� 9� ,����,����� �,�� �,� �����

���'��'��� ��+��������� � �,������� �� ��������� ��

���, �,���,������� 0�����1 ������� ����� � ��������

�'����� �,� ���� � //� ��� //�� �� ���������+ �,�

�������� �� � ��'������ �������- �������+ �����

��/�- �� ��������� � ������ ���� �����9� �� 7�����1

� ��� ?'����1 � �-�

5,� �������� � ����� ����� 9��, ,�+, �������������� �

@� �� A5 ���'���� �� � ����* � ���� ����� ���+�������� 3����

�� �,� A5&������� �� �� � ����� ���, //� ��� //�� ����������

9��� ���'��� ��� �,� �,������� ��'�� ��� �� ����&

������ ���� �,� ����,��� ����� ���+'�� �-1 9� ,��� ��

�������� ���, ����� � �,���,����� '������� �� ��

��������� ����� �� ������ ���������� 5,�� �'++������ ��

���������� 9��, �,� �,������� � '�+�� //� '�����

����9 �� ��+��������� ���$: �� �8 +�(�- �,�� ���� �,���

���������� �� ���,�� �������� ��'+,��� �'����1 �� ��

������� ����,��� �� �,������ ��+��+����� ������

��� ������1 � % � @,*'�� �� ��1 � % -� //� '������ ��

'��+��� ���'���� �� � �����! ������ �,������� 9��,

��������� �,�������1 ������� �������� ���

�,������ ���������� �� '������ ��!��� �� ��1 � �-�

�� �� � ����� �!����� �� ,�+, �������������� � A5 �,����

������� � �,��� �,������������� �,'� ��,������+ �,�

��+��6����� � //� '������� 5,��� ������������ ���

���������� 9��, �,� ���'��� � ��,������&� ��'���� ��

�����'�'�� ������� �5�'�����)� �� ��1 � :- 9,��,

�'++��� �,�� //� �� ��.'���� �� �����'�'�� �������

�'���+ ������ ����������� 0� ������ D� �����1 //�

��)�� �� ������������ �� �,� �������� ���� �,�

�'���'� ��� ������2������ � ���������� ��'��������+ //�

'������ �������� �,� ������ ����� �� ����,���

���������) �� ��1 � �-�

0� �������� �� //�1 //�� ,�� � �������� ��� ��������� ����

�� ������ ���+������� �B����,��� �� ��1 � �� 3����, �� ��1

� #-� 0� '��+��� '���� ����4�9���- �,� ���� � �,� 7

�'�'��� ��� *�- � //�� ��'��� ������� ����,����

������&N��*�� �� ��1 � �� H�'�� �� ��1 � �-� 5,� '�� �

� ��9 ������������� � A5 �� � �,���,����� ��,������

����9�� '� �� ������� �'��'�� ���������� �� �� �� � �����

�,�� �������� ���'��� �,� //�� '������� 5������� �

����� 9��, ��� A5 ��������� �,� �������� � //�� �� #�;:�<

� �,� ������� ���'�� ���+'�� �-� 5,�� ������� ���������� ��

//�� �������� ��'��� �,������������ �,��+�� �� �����'�'��

��+��������� ���+'�� #-� 3'������+ �,� ���'��� � �,�

�'��I'��������� ��'����1 9� �����'�� �,�� �,� ���'�&

���� �� //�� �������� ���'���� �� �,� ���� � ��&����������

���9��� �,������ ������������ ��� �����'�'��

��+���������� 0� �,� A5&������� �����1 �,� �����'�'���

��+������ �����'���� ���� � ��������� ���'��'�� �� �,�

��+�����+ � �,������ ������������ ����������

�� ������� �������,��� ���� �/�/�7�- �������� 5,�

������������ � �����'�'�� ��+��������� ������ �� ��&

I����� �� �,� ��������� ��.'���� � ����� 9��, �����'�����

����,��� ��+� ��� �������,��� �����+���� ���+'��

�-� 5,� �������,��� ���� �� � �����&�����6� �����'�'��

���'��'�� �,�� ,�� � ������� ���� �� ��6���+ �,� �������� �

��9 ���� 9��� ������� ������'*�1 � -� 5,� ���'�� �� �,�

������ ��������,��� � �,�� ���'��'�� ,�� �����'� ���&

��.'����� �� ����� ���+�� � ���� ��������� ������������ ��

�,��+������ ��+��������� ��� ���� �������'�� �� �,� ���*

� ��9 ���� 9��� ���������� ���+'�� #2�-� ��� �,���

����������� �� �,� A5&������� ����� �����+�� �'����� �

'��� '�������� ���� �� //�� �'���+ ������ �� ����� ������

3�� � �,��� '������� ��� ������ �� �����&�����6�

���'��� �'�, �� �������,��� ���� ������� ���

�,��+������ ��+���������� 0� ��'���� 9��, 2��+�� �++

�!������1 �,� ��,������� � //�� �������� ���'���� �� ���+��

�����'�'��� �5�'�����)� �� ��1 � :-1 9��, �,� �'�,��� �

�,� ��'�� �����'���+ �,�� �,�� �,���,����� �������'��� ��

�,� ���������� � �,� �,���1 ������&����� �����'�'����

5,� ����� �!�������� 9��, @� ,��� ������� ����&

������� �,�� �,� ��,������� � ������4�,�������&�����6�

//���� ��������� ��$���� *����� �����!�� �� ��������

�� ,������ ?� �,���,��������� ����� �����! �� ��1 � ��

M���,��� �� ��1 � �-� '���+ �,� 6��� �����+���� ����

����� �� 2��+�� �++ �!������1 �,� ��,������� � //��

��������� �,� ���� *����� �����! �� ��1 � �-� 0� �������

�����1 @� �������� ������� �,� ������� � �,���,���������1

,�9����1 �,� �������� � ���� *������ 9�� ��� �������+����

�F,��+ �� ��1 � �-� 0� �,� ������� 9��* 9� �'�� �����6�

��������� � �� ����� �� �� � ����&������� *������ �� �,�

�������� � ����� 9��, ��� A5 ���+'�� :-� �����9��+ ?H

����,����������1 D�4� ����� 9��� �!����� �� �,� ��,�������

>� �������� ������'��� �,�� �� �� �� � ����� �� ����� �,���

*����� �����!�� ��� ������ 9��, 9���&��6��� ����+ �

*����� �������� ���*� ��� �� ����� �� &��� �'�������

��� ������� �'���� �� ��1 � %� ��+��� �� ��1 � :�

��C�)�C ��� �� ��1 ����-� 5,� ��� ��'����� ����&�������

*������ ��� �,� ������� ��� 7 �������� 9��, �,������������

/35�0�A ������ ������+ ��� � 5,��� *������ �!,������

�������� ,������ ?� �,���,��������+ �������� �� D�4�

�� �� � ������ 5,� ��,�� �9� D�4� �,���&��������� *������

������� ��� �- ��������� �����&�����6� �������� � �,��

*����� ����� 5,� ������������+ +���� 9��� ��� ����&

� )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

������ ����������� �� D�4� �,���� ��� �,��� �������� ����

�,�9�� ���� ����� �,��� ����������� 5,� ������ *�����

,�� ���������� ,�+, �������� �'���+ �,� 9,��� ����� 9��, �

���* �� ��� D�4� ���������� �,�� �� ��9���� �� �,� ����� �

������� 5,� ������� *����� �� � �����&�����6� ������

*������ 0� ������ ����� �,�� *����� �� ��������� �� �,�

�������,��� ����1 �����'����� ����,��� ��+�1 ������

������� ��� �,��+������ ���� �����9 ��C�)�C ��� �� ��1

����-� 0� ��+,� � �,� �����!��� � D�4� ������� �,��'+,

�,� �������'���� � �,��� �� ����� *������1 �,� �������

������������ �� �����6� ���6������ � ������ *������ ��

A5&������� �� �� � ����� '������� � ��9 �������� �� �,�

��+'������ ������ 0� ����� 9��, ���'��� //�� �������� �,�

������ *����� 9�� ��9���+'�����1 9,��� �,� ������1

������� *����� �,�9�� �� ����� '���+'������� 5,���

�,��+�� �� *����� '������� �� �� ���*�� �� �,� �������

�����'�'�� ��+��������� �,�9��+ �� ����� ���''������

���'�� �,� �'���'� �� �,� ������� � �,������

������������ ��� �����'�� ������� ������������ ���+'��

#��1��-� 5,�� '��������� ���'����� ��� ���'�� �� �,� �����&

����� � � '�������� �����'�'�� ���'��'�� ���+'�� #��-�,�� �+,� �� ��������� �'���+ ����,��� ��� ����,���

���+'�� # �1+�-� �� '��!������ �'���� � �,��� �!����&

���� �� �,� ��������� � ��+��6���� ����������� �� ����&

������� *����� ���������� ��� �����'�'�� ��+��������� ��

����� 9��, ������� ���'����� � //�� '������� @'� 6����+�

�'����� �,� �����'���� �,�� //�� ,�� � �����6� '������

�'���+ D� ��� � ���+������� �,��'+, ����������+ ����

*����� ���������� �� ����� �� ���'�� �,� ������ �����'�'��

��+���������1 ����'���+ �������,��� ���� �������� 5,�

�������'���� � ������4�,�������&�����6� //���� �� �,�

������� � �/� �������� �� �� ������� �� �����

�B'�+�� ��� '��,�1 � �-� 8���� �� � �'��&�����6�

�,���,����� �,�� ���,���,�������� �,� ���� ��,�������

����� �� 5,��$ ��� 5���� �'��,�1 � $� B��+ �� ��1 � $-�

0� ������,��� 2��+�� �!������1 @� �������� ���� ��������

�����'���� ��� ��'��� � ��������'� ����� ���� �������

5,� �����'�� ���������� � ����� ��������� 9��, ���

,�����,���,��������� ������+ �� �,� ������ �� � ����

*����� �B'�+�� ��� '��,�1 � �-� 5,� �'�,��� �'+&

+����� �,�� //�� �,���,����� 9�� ����������� �� �,�

��+'������ � ������ 5,�� ���� ,�� ���� �'������� ��

���������� �!��������� ���� ���� �����9 �� ����9��� �� ��1

� -� 0� ������1 �,� '�������� ���� � �����&���� �,��&

�,������ 9�� ����������� �� '���+ ,�������+�'� ������1

'��+��� - +���� �� ��)��� ���B����� �� ��1 � %�

��C�)�C ��� �� ��1 ����� F,��+ �� ��1 � %-�

5,� ��������� �!�������� 9��, A5 ���'���� �,� ����

�� '��,�� �!�������� �� �� ������� �'� �� ,�+,��+,� �,�

�������� ���� � �������'�� ������� �,���,������ ��� �,���

����������+ �������� �� �,� ������� � �,� ���� �������� �����

� ,�+,�� ������ �� '���+ ��,�� �������,��1 ����'���+

'���� ��������� ��� �,� ����'����� � ����� �� ���������

�����+���� �������

!4�������� �������

������� ��������

?�+,�� ,����+�'� ���� �'�������� �'��'�� � *���� � � ��& ���� ����� �+������� ��- 9,��, 9�� 9��*�� �'��'��'��� � J � 9��, ���, ���' 9�� '��� �� �,��� �!��������� 5,� �'���������'��'�� 9�� ������� �� ����'� ����'� ���+������ �� ������+���� ��� 9�� +��9� �� �3 ���' ��'���,�+� ���3*��+1 � #�- �'��������� 9��, ��� +�;� *������ ��� � + �;�

�1$&���,�����,���!������� ���� ��1$&- ��������+ �� 7�G +�� �� ���� %%-�

������ +��+� � �� �� ��

3� �� ��� �� �; 5,���&���&��� �'��'��� 9��� ������� �� � ,9��, ���< �3@ ��������-1 �� ���1 �1 �1 ��1 �� ��� ����� A5 �=83�������1 >��'��1 ��1 H3�- ��� ��������� �� ���< �3@1������������� �����9��+ ����� 9��,�� 9��, �3 ���' ��������,-1 ������ 9��� ��)�� �� ��.'�� �����+�� ��� *��� �� ;%��8'���� ������� �!��������� /������� 9��� �!������� �� ��� ��+������+ 9��, � +���� ��� �� �,� ������+ �'�� 9��, .'���) ������� ����� � ������� ��� (��� ��� � 5���;?8� �? :��1 � �

A5�1 � � AD5�1 ���< �&������� ��,����1 � � ���)������1��� � /�3�1 $�+ �;� ��'������-� � ��� ������ '+����� ��� ���� �� �� �� �� $�8- �,� �'���������� 9��� ���'��� �� 7' �� ���� � 5���;?8� �? :��1 ��� � A5�1 ���< �&���������,����-�'��������� 9��, �< �94�- ������ ���' ���'��� 5,��,���,����� ����� �!�'�� ��������� ���� �1 �'���������1�� ��

��/&�,���,������� ��� � � �� ����� 5,� ������ 9������ ���� ��������+ �� �,� ��,�� � A���G �� �� �� �� �- �� �,��������� � �� H ��,������&� � �� //��- �� � �� @� � �� //�-�

�����+����+�� ���; 5,���&���&��� �'��'��� 9��� �������9��, ���< �3@ �� �1 �� ��� ���� A5 �� � ,� ���������� � ����&//� �O���� �� ��1 � %- ��� ����&//�� �H������ 7�����,����+�1EM1 H3�- 9��� ����� ���������� ���� �9� ���� � ����+ ��������!������ �� +��� � 6��� ������������� � ���+ ��;� ���������3����� 9��� ���'����� �� � , �� ���1 ��� �,�� ��������&3��,����� ���� ���'���� 9�� ����� ���� ���, �'�� �� � � J :���'� ������ 3����� 9��� '��,�� ���'����� �� � , �� $�8 �� ������� �,�*��� �� �,� ��� � ���'������1 ����� 9��� 9��,�� �,������� 9��, �,� �0/� �' �� ��� � 5���;?8� �? :��1 � � A5�1� � AD5�1 ��� � E�8�1 ���< E/$� ��� ����� /�3�- ��� 9���6����� ���'������� �� �� �� 7' �� � ����'���+ �������� ��,����������� � /�3�1 � � ���)������1 $�+ �;� ��'������- ��������< 7��2��� /,���,����� ����� � �,� ������ 9�� ��� ������ +���� �� �,� ������'� ��������

��������� ��� ��� ���� ����� �� ����� �� ��� �����

� 9$ +� ��

3���,���������� ������� 9��, � J $ ���'���� � � :&���&��� �'����&���� �'��'��� � ��� �� ,1 �� � ,����!�'��� �3�+�1 �@1 H3�-9�� ����� �� �,� ���' ��� 9�� '��,�� ���'����� �� �# ,� 5,���'+ 9�� ������ �� 9��,��+ �,� ����� �,��� ���� 9��, ���,���' �� ��� ���'�������+ �,� �'��'�� �� �,� ���+���� ���'�'���+ � J � ���'��� ����������� ���' �������� �� � �&���&����'��'��� A����,��� �� ��� �� ��- �� �3@ ����<- 9��� ����� � ����,� #�, �� %�, , �� �,� ����,������� �����1 9,��� �,� �2����� � ����� ������ �,� 3&�,���� 3����� 9��� ��������� �� �����'���������� �� ������ ����! ������������1 I�9 ��������1 �������*����� ����� ��� �����'�'�� �'���������������

���+� � ��� �� ���� ��&���� �

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

������� ��� ��� ������(���� �� �������� ���

������ ����"

���� ����� � ����� 9��� 6!�� �� � , �� ���8 �� �537 ��� �

/0/A3 �? #� 1 � � �+3@$1 � � AD5�-1 9��,�� 9��, �,� ����' �� ��� ��+����� �� ���� 9��, � � � ��)�� �!�'�� ��< 94�����'���� @��)'*� �&��1 �< �4� ���������- �� �537� �����9��+9��,��+ 9��, �5371 ����� 9��� �����,�� �� ������ ������ ��� 9����!������� �� �� �� 9��, ���< 5�����&P&���� ��� ����&�'�'����������� �M@=�4�$1 3��� =���1 3'���!1 HB- 9�� ������� ��4������'����- �� ��, �� $�8� ����&��� �058 ���2'+���� ����������������� �3�+�1 �@1 H3�- 9�� '��� �� � , �� ���8 9��, �4������'���� � ��� 9��,��+ �,� ������ ��������� 7� ��� �,� ���� 9��,� �,� ��������� ��������1 �'���� 9��� ������� 9��, ��� �+ ��;�

�/0 �$�1#&��������&��,���������� ?8�- ��� ����� 9��� �'����9��, 8���I'�� �5�� /���� 0��� 8�1 H3�- ��� ������ ����! ��������&����1 ����� 9��� 6!�� 9��, $< ������ �� �,���,���&�' ���������� ��? :��- �� �� �� �� ���8 �,�� �� ��, �� $�8� E'������������ 9�� ������� 9��, ��� �+ ��;� �/0 ��� �'���� �� �� ����%��;���� ����� 9��� ������ �� ������ ��� �����'�'��&�,�����'����

��� � � ��� �� ����� �� �����<���������

������+�

5,� F���� �!������ ��� � I'��������� ��������� ��.'����� 9��,����� �������+ ��� ��������� ���������- 9�� '���� 5,� ���,��� � �,������ �������+ ��������� 9�� ��� �� ��� ��� � �������+ �'������� $ �� % ��� 9��, �� �����+��+ � � 9��� '��� �� ��� ���������������� 9��, /��� E����'�� ���!4���� ��� ��2������ ����������� � 88 ������ /���'��� 9��� ����'��� ����6������ �� �������+��� ��� +���� �,������ � �'����������+ �!�������� ��� �,������� ��������� �� �,������ ���,���+� �!�������� 9����������� �� �'����������� � �/0 ��+�� ���� ���+,� 6��� ����'���� ��� ��+� �'��������� ��� +�� �����������

������ 5�� �� �� �

�� �� � ����� 9��� ,�������� �� ��������� ��������� ��� ��)�� ����.'�� �����+�� ��� ������ �� ;%��8 '���� '��,�� ���������+� ����'���������������1 �������� 9��� �!������� �� +������+ �����9��, .'���) ���� �� �!�������� �' �� ���������+ �� � 5���;?8�1�? :��1 :� � E�8�1 �� � AD5�1 ��� +&������,���� �,���,���1#� � �&+�������,���,���1 � � 551 ���< E������ /&$�1 ��� �

E��O@$1 ��� � E��1 � � /�3�1 ��'������4���������4����������� �+ �;�� ���,-1 � �+ �;� ��������� ��� ��+ �;� �,���������A.'�� ��'��� � �!������� ������� ������ 9��� ���'����� �� $�8 �� � , 9��, �;�� �+ �;� ����&8&������� �� �� � ���������� �����&8�����471 &8����� ��� &8����- ����'��� �� �'� �������������+��� �� ��1 � :-� /�������&3��,����� ���� ���'���� 9�� �,�������� ���� ���, �'�� 9��, � J : ���'����� 3����� 9��� '��,�����'����� �� � , �� $�8 �� � ������ �,�*�� �:;�� �����-� �� �,� ���� ���'������1 ����� 9��� 9��,�� �,��� ���� 9��, �,� �0/� �' �����������+ ��� 5���;?8�1 �? :�$1 � � A5�1 � � AD5�1��� � E�8�1 � � E��1 ���< E������ /&$�1 ����� /�3�1�� �+ �;� ���, ��������� ��� ���+ �;� ��'������� /������ *�������������� '���+ ,������ ?� �� ������������ �� � �'������� 9������ ���� �� ��������� �� ��+��� �� �� �� �-�

�����5������

5,�� 9��* 9�� �'������� �� �,� ?'�+����� E������� �������,�'�� �@5B� 5� :��1 5�#�$� �� /�D� ��� 5�:�:� �� O��-1 �,�

�������� � A�'������ ��B� �B�/ �:%$4� : �� /�D�- ��� 3�+���5�����'����� ��� ��������� �������, D��'� � ?'�+����������� � 3�������1 �������1 ?'�+��� ��� A�O�-� ���� ,�� � ����9�,�� �� 5,� 3������6� ��� 5��,����� �������, 8�'���� � 5'�*��� 5,�� 9��* 9�� ���� �'������� �� 0E8@&8@/A�E08H3���+�� � AH�

,����

�4��� A-�- (�����$�� "- 1��� &-#- ��� ����� (-�- �� �-@�� � �,� ������� �,���,����� � �����)��� �� '��+��� ����������� �� ������� ����1 ?/1 ��;$#�

B���� #-�- ��� 6���� A-!- �� :- 0�,������� � ������� *��������� �,���,������ ����� ���� ���,���+� ��� �����+���)��������� �����'�'���� �� �� ������8 ��/1 $ �;����

B���� <- �� - /������ ���,���,��������� ��� �,� ���������'���������� � �,� ���� �'���� )���8 �����8 01 ��;$��

B���� +- ����5 &-(- +����� �-�- ��� +���� �-A- �� �- ���+'����� �A5�&D=8: +��� '���� �������� �������� � ������� ���� �� � ��� ������ ����&��� � ������� �,���,������� =� ��1 ��1 :$:;:� �

B�) �� >- C��$� D- ��� (���� (- �� %%- 8�"�&��������� �������*����� �� �� �� � �*���� � & �� -� ������� �'��6������ ����'���,���,���������� �� �� ���8 821 ���;�$$�

1��� &-#-6- �� % - 5,� ���'��'�� ��� ��+'������ � ��������,���,������� ����8 ��&8 ������8 821 $��;��%�

1��� &-#-6- �� :- E���� ������� ������4�,��������,���,������J ������� �� �,� ����� � �� �� 0����� ������8���8 ��1 �$�;����

(�����$�� "- �� :- 8��������� �������� � 3��45,� ��������,���,������8 0����� ��+8 ������8 ������8 /1 ��;$%�

(����� A-9- ��� ����� <-,- �� % - 5,� (��9 +��� � ��+�������� ����� ��1 ��.'���� �� ��������� � ����,���1������� � ,����+ � ������ �,���,���������,���,������� ����1 8@1 %:; #�

(����� �- >��� �- 6������ A- B��%��� >- ,������ A-��� B��� (- �� % - 8��� ������� *����� �� �����!�� 9��,���, ������ � ��� 7J �������� �� ����������� ������������ � �/�� ����1 8?1 %� ;%�%�

(����� �- ��� B��� (- �� % - 5,� ������ ���� �������*�����J ��,����� � ��+'������ �'���+ �,� ���� ������ 18 �������8 ��++������1 ��1 ��;�:�

(���� (- ������ D- (�$� �- � �� �� %- 8�����&������������ �����'&��������� *����� ������J �������� � ������������ ����� �� ,����� ��� ������ ��+����� 0� �� �� ����'�&����; *����� � �� '�&��+���� � �����8 ��������1 �1'����1 � ��� 0�)�1 �1 ���-� =�����J /������� /����1 ��� ��;$#�

(����� 6-�- �� $- 5,� �������� �� ����� ������� 0����� �������8 01 ���;��:�

!���) �� �- #�$ �� B- 9����� '- 9����� �- 9������� (-A- �������� &- �� �- A����,��� �,����,������ ��,����� ��������,���,������&� ��� ;�� �� &�&� ��8 18 ������8 �?E1 ��:#;��%$�

!��� (-,- ��� +���� �-A- �� :- �'������� �� �,�� ��� ������ ����&��� � ���� �� ������� �,���,�������������� �'�'��� ������ ����� �� ���� 9��� ����+����1 ����������*������ ��+���)����� ��� ������� 9�������1 �081 ��:;�$��

���4 �-�- 1��� &- ��� '����� !- �� �- 8���1 ?� *����� ����+������� ��+'����� �� � ���� �� �,���,����� �� �,� 2��+������� �������� ���� �����J �������� �� �,� � ���� � �*���������� 3*�! 18 E1 #:�;#%��

���4 �-�- &�� A- 9��� #- ��� '����� !- �� % - � ����&�������� �'��������� �� ��������� 2��+�� �++� �,��

$ )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

�������� ����&��������������� ��+'����� ����������� � ��� ���$:

������ *����� ��������� 3*�! 18 21 ��� ;��# �������% �- B�������� (->- ��� >��� <-A- �� �- /������

�,���,����� ���� � �� ������ ���� ������J �,�������������)����� ��� ���������� �� ������ �!��� 18 ���� ���8 ��?1�$��;�$���

���� +- &�5��% <- ��� +������ (- �� %- 8���&����������� ���'����� � �����'�� ������ �� �*����� ������ ?�=� ������ 3"+8 ���� ���8 �0�1 �; �

���� +- +������ (- ��� &�5��% <- �� #- @*����� ������������� �,� 3&�,��� �,��* ����� ��� ����������� ���+�������� D�&�,��� �� ���'�� �����'�� ������ �� ?�=� ������ 3"+8 �������8 ��@1 �#�;�# �

��� ,- '�� ,-!- C����� 9- ����� (-�- ��� +���� 1-!-�� �- ������� ����,��� �����'���� ����-J � ���'� ��.'���� �����+������� �,��'+, ������ �� '��+��� 8 18 ���� ���8 �701 �%�;� ��

9������ ,-!- �� �- 8���,������1 ����,�� ���'��� ��!�� �,����,����� �,� �������� � ������4�,������� ������� �,���,����������� � ��� ��� )3�� >���8 //71 �%�;�%#�

9���� #- �� �- /������ *������ ��� �,���,������J �,� ��� ������+ � ������� �,���,��������� ��� ��+�����+� ����1 271 ���;��#�

'��� ,-6- A����� &-'- ��� '������ �-6- �� $- ������� ������������� ����1 @E1 �#�;�:��

'������� '- <���� #- <������ '- '����� 9- <�5� 9-��� F������� �- �� #- 5,� ��+'������ �'�'���� � 6���������� ������� �,���,����� �� �//� ��- � ��� �������,�+������1 ���� 9��� ����,���� ��� ����*������� 9���������1 �1 � ;$��

'������� <- C����� 9- ��� F������� �- �� �- �������1��������� ����� � ���� � ��� �� ������� �,���,������ �� �,�������� � �,� 6����� ����� ���� �������� ������ ����1 ?/1$��;$���

'������� <- F����� 9- <�5� 9- F����� #- ��� F������� �-�� �- E�+����� ��+'������ � ������ �� �,� 6����� ������������ �,���,����� ��� ��� 9���� '�&8 @1 ��� ;��:��

'������ �- ��� (����� 6-�- �� �- ��+'������ � �,� ������������ �'���+ �,� ���� ����� �� 2��+�� �!������� ����1 @71 �� ;����

> #-9- �� �- 5,� ���� � ������� �,���,����� ����&�� �� �,�2��+�� ���� �����J ���������� � �,� D�4� ����������� �����8� ���� ���8 ?1 ���;�� �

>� F-�- ��� 1���� A-!- �� �- 8���,������&������+ �������J������6������ �� ������� �,���,����� ��� ���8 ? �� �� �8 ���8%��1 2E1 ��%#:;��%:��

>� F-�- ���'����� 1- ��� 1���� A-!- �� �- /�������,���,����� �� ��� ��� Q�?R����,������4Q�?R�����,����,����,������ ������+ ����� 0�,������ �����6���� � ����,��������� �5/ �����+'��� ������8 �� �� ��8 0?1 �$��;�$$��

>���� �-A- �� % - ������� ������� �� ����,���&�������+ �������� ��� ��������8 18 ���� ���8 E�1 ���;����

���'����� 1- ��� ���'����� ,-6- �� $- 0�,������� � �������*������ ��� �,���,������� 0����� ������8 ���8 �E1 $$$;$$%�

���'����� 1- >��� �-(- ��� ���'����� ,-6- �� $- /�������,���,����� ��,������� �������� ����& '�+�� �� ���� ���������� ������� ���������� ��� ���� �'��'���� �� �� 18 81 ��:;�$:�

������ D- B���$ >- B�) �� >- (����� (- '���� #- ���(���� (- �� �- ������ ���� +���� ��� ���� ����� �,���&�����6�����&������� *����� �����!�� �� ,�����& ���'����� �� �� ������� �� �� 18 01 ���;�#��

������ D- �$%�$ �� #- ������%� &- � �� �� :- 8��� ������,��� �����6���� � �'������ ������&��������� *����� �������� ������,����)�� �� �� � ������ �� �� ����1 E1 ���;����

����%�5� �- ���%���� �-A- ��� 1���� A-!- �� %:- A����,������ ����,������ �����+�J �������� � ���'��'�� �� ,����������������� ��� ������ ��!������ 18 �����8 )� ����8 /81 %��;%� �

���� A��� ,-!- C����� 9- ��� ,- +���� 1-!- B��������� +- 9����� B-�- ��� ����� (-�- �� �-5,� �� *� ��+'������ �'�'��� � '��+��� ��������,���,����� �� �� ��.'���� �� ����,���� ����1 @�1 #��;#���

��'����� ,-+- 9������ <-�- ��� ������ (- �� %- A!�������� � 6����� ����� ����� ������ �,� ��.'���� � ������� ���� ��������� �����+���� �������� �� �� *�8 ���8 /?1 #��;#���

�$%�$ �� #- ������%� &- ������� �- &���� +%������ �- &� �- ������ D- 9����$ �� "-�- B���$ >- ��$ � �- ���(���� (- �����- �'������ ������&��������� *����� �����!����� �,���,������ ������� D�4� ���+������� �� �� �� � �������� �� *�8 ���8 �� ������

����5��� #-�- D������5��% +- ��� 9����� B-�- �� -��+'������ � ������� *����� �������� �� ������� �,���,�������� 0����� ������8 ���8 �01 �%#;� ��

������� F- �� - 5,� �������,��� ���� � �����'�'���J 0�� '������ �� � ����*������ �������'� �� ,�+,�� ������� ���8 ��&8����8 �2@1 �;$ �

������� "- "�� ������� �- ��� ��% (- �� :- ��+'������ � ���� �������� �� ������J �� �� (��+��� ������������ ���8 ��������� ���8 /1 � ;$��

����� +- 9��� A- ��� <�� &- �� % - ��+'������ � ��$����

������� *����� �'���+ ������� ����1 821 �#�;�:��������� #- ��� +���� �- �� #�- � ������� ���' �� �����

+��9�, ��� ��������� 9��, ������� ����'� �'��'��� ������8�� ��8 �81 $:�;$ :�

<������ 1-A- ��� <�� &- �� % - 8������ � �,� ,�+,�� �'*���������� ����� �� ��$���� ,����+'��� ������8 ��+���8 ��� 1 E2E1%�; ��

C����� 9- ������ F- '������� <- <�5� C- #��� #- ���F������� �- �� %%- 8���&��������� ��� �� ����&�'������������'����� � �,� ���� � ��� ������ +�(� ��� +������������� �� ������ �,������ ���������� �'���+ �������3*�! 18 @1 �$#�;�$:��

C����� 9- '������� <- �������� +- #��� #- ��� F������� �-�� % - 5,� 6����� ����� ���$: +��� ��.'���� �� �,���������2�����+ ������� ��� � �9� �'������ ���� � ��������,���,������� ����1 8@1 :;���:�

&����� �- >���$ A-1- B������ 9- 1������ A-1- ��� (��$ �-�� �- @*����� ���� ���� � �'����� �������� ��.'���� �������� 7&���� *����� ������2������ �� ����� ����6�, ����������� � �,���� 18 ���� ���8 ��81 ��:;�$$�

+����� 9-�- �������� 1-�- ��� F- '��� '- ��� 1��� &-#-�� #- �6������ � ������� �,���,����� �� '���'���� �,��'����� ��� ��������� ������ ��� �������� �����,��� � �����'�'��� �� �,� *������,��� �� '��+��� �����'�'�� �������- ������� 18 ���� ���8 �7E1 ����;�����

#������% ,- ����� +-+- "�� �- (�� �- '����� !-��� 9���� �-�- �� :- ������� ����� � //� � ��� //� ��&��*��,���,������ �� ������� � �����'�'�� ������� �'���+������� 3*�! 18 �?1 ���:;��$ �

;���� #- +����� '- #����� +- ��� #������ �- �� �-�'������ � �4��� �������+ � ��+'����� � ������� �,���,������� ����� �� ������� �'��������� �� '��+��� ��+���� ������9���� '�&8 @1 $� ;$$��

"�� !-#- #�$ �� !-1- '���$� �- ������ D- 9����$ �� �-"- B���� &- ����� &- (���� (- ��� (�����$�� "- �� %-/������ �,���,����� � ��������� �'�'��� ��� ��� �� �� �� �J����,����� �,��������)����� ��� �E� ������+� ����8������8 ��+���8 /?71 ��#;��$�

���+� � ��� �� ���� ��&���� �

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #

6�� +- ��� 9����� B-�- �� �- 3�����4�,������� ��������,���,������� ������8 18 /��1 �:;� �

F������� '- F���� 9- &�� A- F������ '- <������� 9- C����� �- 9���� #- +������� #- ��� <������� #- �� �-@*����� ����1 � ������ ��,������ � ���� � ��� ���� �� ��������,���,������1 ��������� ����4?� *����� ��� ����������� ���'���� �����'�� ������&��*� ����� �� 7?B�� ������ 3*�! 18 E1 $���;$��%�

D���� '- (������ >- +� �-A- >����� &-A- >���� (-+- ���A��� &-1->- �� %- 8���*���� ���� �� ���� �������� �,��'+,8���� �,���,������ ����� �(��� �� � ��� ���� ������ ��� ��������� � �� �� 9�4�� ��(�� ����� * 5�� �� *����8N����1 �'+'�� ��;�:�

D���� '- #������� F- ��� A��� &-1->- �� �- ������� ������ ��������� ��'��� �� �,� �,���,�������� �,���,����� ��,�������*����� ����� �� �� ���� ������8 //1 #::;#%%�

# )��� � �� ���� �� ���

� 7���*9��� 3������ =��1 0�� �� �� 1��� �� �����-1 �/ %�; #