Adjuvant regulation of cytokine profile and antibody isotype of immune responses to Mycoplasma...
Transcript of Adjuvant regulation of cytokine profile and antibody isotype of immune responses to Mycoplasma...
�������� ����� �� �� ����� � ���� ������ ���� ����� �� ���� ������ ��
��������� �������� � � �
� ������ ���� � �� ����� �� � � �������� � ��� � �������� ��� ����!"������� �#
� ���� �� �� � � ���� � � ��� �� ��� ��� ����� ������� ������� �� ��� �� ��
������ �� ������� �������� ���� ����� �� �� ���������� � !!" �� ���������� �� �
$� �� %& '����� ())(* � �� � � �� ��� & '�� ())(* ������ %% '�� ())(
��������
+�� � ������� ��������� ,�� �� ��� � ��� - �, ��� ��� �� �,��� ���� ��� . ���� � �,
���� �� ���� ��������� ���, �� /���0� ������ �������� 1/2�3� /���0� ������� ��������
1/4�3� � ����������,� � 1��53� ,��������� �� ���� ��� � �6������� ��� � �� � 1���� 4723 ���
��������� �6����� ��� � �� � 1���� �783� � �, �� �,�� � 1� 2�3� ����� � 9� � � ��� ���� ��
�,���,�� �� 12� �:;3 �� �, ���� ����� �� � � �� ����� �! ���� ���� ���������
�������� � +, ��� �� ��� ���� � ����� � ����� �� ��������� - ����� �� <�45�����
��� ����������,� ���� ���� ���� =��� �� �� �, �������� � ��� �, ���� ��
�# �������� !��� �� ��� ���� ����� �� ���� -�� ����� (�>6&!����� 4�? -�� �, ���� �����
�� �# �������� !��� �� ��� ��� � �����-� �� 4��� 4�� ��� 4�<� ����� 4�? ������� /2�� /4��
9� � � ��� 2� �:; ����� �� 4�?% ����� - �, �������� �� ���� �� �, 4�?(�� 4�?(� ��� 4�?@
������ -, � ���� 472 �, ��� �, ����� ��-�� �� 4�?(�A4�?@ ������ ��� / ������ ���� �78
����� �� 4�?(� ����� -, � ��5 ��� � 2� ������� �, 4�?@A4�?%A4�?(� ��� ��� /2�
������� 4�!;� 4�!> ��� 4�!%) ������ �� ������ �� � ����� +,( ������ -, � 4/�!� ��� 4�!%(�� �� ��-* ���� 472 �,���� 4/�!�� 4�!%( ��� +�/!� � � � �� � +,% �����* ���� �78 ����� � � 4�!%)� 4�!>� 4�!& ��� 4�!%( ��� ��* ��� ��5 �,���� �, 4�!%)� 4�!& ��� +�/!� ������ ���:� ���� �,�- �,�� ��������� ������ �# �������� !��� �� ��� ���� ������ �� ��� ��� �� B ���
�����!�- ��, �� � � �, ����� �� ����� � � � �� 2�� � ���������� ���, �� ���� 472� �,���
���� �� ��� � �� ���� �,���� �� ���� ��� �� ��� ��� �# �������� ���� ����
� ())( <��� 5� �� B��� ��� �,�� ����
$ �%����& ��������� �������� * ��������* 2���� �* ��� ���� �����* ����
�� ��� � ��� ����� CC 1())(3 @(>6@@C
# 2������ �� ���,�� +��7 �@)!@%!DDC@D>* ��E7 �@!@%!DDC@%D�'(��� ���� ��& ,��� ��F� �����,�� 1�� ��� ����!"������� �3�
)@GC!%%@>A)(AH 6 � ���� ���� � ())( <��� 5� �� B��� ��� �,�� ����
�447 5 ) @ G C ! % % @ > 1 ) ( 3 ) ) % ( C ! %
� ���� ������
+, ���,������������ �������� � �, ���� ���� �� ������ ��� ������� �� -, �,
� ����� ��� - �, ������� �� ���� � �� ��, � � ��� ������������ � � � � ����� �� �����
12���-� %DGD* =������� %DC@3� �# �������� ���� ��� � ��� � � �� �����
����� � ���� �� � ��� ����� � ���� �� �� ���� � �� ������ �� ��� �����
���� ����� ��� 4� �, ����� � � �������� ���� �� ,�� �� ������ �� ��, �
����� �� ��� ��� �# �������� ���� ���� ��� �, ���� -�� � � �� ����� �� �,
, �,! �� �� �� �� �� � ���� 1/��� � ���� %DG%���3� ���� ��� �� - �, ,��!�
����� �! � �,���! ���� ���� ���� �� -�� ���� �� �� ����� �� �� ����
���� ��� /I������ �, ���� ���� �# �������� ��� � ���� �� -�� ��������� - �,
���� ��� ,���E � � � ��� � ��� ���� �� � ����� ����� �� 15� � � ���� %DCD*
���!� J�� �� � ���� %DD>* +��� � ���� %DDD3�
� ��� ���� �� ����� ,�� �� ������ �� ������� ������� �� ������
�, ������ �� -�� ��������� ,�-�� � �- �� �,�� ���, �� ���� � ��� �
���� ��� �� �� ,����� 1?���� ��� 5 �� %DD;3� ���� � ��� �� ��� �������� �� ���
���� ��� ��� �� �� �� ��� � �� �� ����� ���!�� ��� ���� ������ I� � ��
�, ����� �� �� ����� � ���� �� ��-��� ���� ��������� ���,���� 1.�� � ����
%DC&* ��� ��� ��� B���� %DD%3� ���,���, ���� ����� ,�� �� � ��� ��-��
���� �� �� ���� ���������� � ��� � �� �������� ����� �, ��,�� ��� �� ��� ��
�� ��� � ���� ���������� 4� ,�� �� ������� �,�� ��������� E� �, ������� �������
����� � � ����� �K������� ��� ��� �,�� ���� ��� �� ���� �� ��� ������ �� ��
�, � � �� ���� �� 15�, ���� ()))3� ����� ��������� ������� �, ���� ������
�� ������ �� �, ��� �� ������ ��� ���� �� �, E��� �� �� � 2 4 ��� 44� ��!
����� �� ��,� �� ������� ��� ������ �� ����� � ������ �� 1��� �� ��� � ��
%DD@* ����� %DD;* '�,����� %DD;* ����� %DD>* 5�, ���� ()))3�
+�� � ������� �, ������ �� �� �������� �� � � � �� ��I��� ���� ����� -��
������� �� �, ���� �� ��� ��� � ������� ���,���, �� ���� � �������� �� ��
��� ��!��� �� ��� ��� � � ���������� �� �, ���� �� �� � � ���� �, ����� �� �,
����� ��� ��� � ���� ���� � ���� ��� ���� ��� ��� ������ ���� � ,�� ��� !
���� �, ����� �� ��� ��� � � �, ���� � ����� �� ��� ��� � ���� �������� ��
�, ��� � �� �� �� � 4�?(� ��� ,���� 4�?% � �,�������� �� �������� ��� ��� ���
��� ��� ����!������ ������ ������E � �� 18����� � ���� %DCC* �� � ���� %DD)*
B���� ��� .���� %DD(* =� � ���� %DDG3�
4� � ���� -�� ����� �,� �,�� +,% ��� +,( ����� �� �K��� �, ��� ����
������ �� ��� ����� E��� ��� /� ������� 4�!; ������ 4�?% ��� 4�< ����,� �
15 ��� � ���� %DC>* 5���� � ���� %DD(3� -,�� 4/�!� ������ 4�?(� ��� 4�?@����,� � ��� ������� �, ������ �� �� 4�?% ��� 4�< �� ������� J �� �, ���� ��
4�!; 15���� ��� ����� %DCG* / ������ � ���� %DCC3� 4� �� ��� ���� �� - ,��
��������� �,�� �, ��������� ����� �, �����!�- ��, �� ����� � ����� �� �
������ �,����!������ 1+=3 ��� � ������ �,����! ������� 1+43 ��� �� � � �,
������ �� �� ��� � ����� �� 1"������ ��� ��� ����!"������� �� %DD)���*
� ������� � ���� %DDG3�
+, ����� �� �, ���� ����� -�� �� ���� ��� �, ������� �� ����� �� � ����
��������� �� �, ��� ���� ����� ��� ����� � ���� � ��� �� ���� J�� �� ��
@(& )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
B��BA� � � - �, ����� �! ���� ���� �# �������� � 4� ��� � ��� - ������� �,
������ �� �� ��� ��������� �� ���� �, ���� ����� �� �# �������� � :�
����� ���, ������ �, ������ �,�� ��������� � �� �����!�- ��, �� ����� � �
� ��� � ����� � ����� ��� ��� � � ��� �,�� ��� � ��������� ����� � ���
� ���� ���� �� �� ���� �� �, ��������� �� ������ ���� ��,�� �� ��� ���
�# �������� ���� ����
� ��������� �� ����� �
/#3# ������
+,! �� ��!����,!��� ��� B��BA� � � - ��� � �, � ������ +, �� �����
-, �, ,�� �� �� � �� ��������� - ,���� ��� ������� ���� � ��� ��� � ��
� � � �� ����� �� ���� ����� ��� -�� �� � � ����
/#/# ���� �� ��4������ ��� ����,��� �
/���0� ������ �������� 1/2�3 ��� /���0� ������� �������� 1/4�3 -
���,��� ��� = ��� 1=�� �� �4� 85�3� � ����������,� � 1��53 ��� '��� ������
���� )>>7B> -�� � ���� ��� �� �� �, =������ �� 4��������� �� "��� ���� 4��� ���
15����,���� 5-��3� 9� � � 1��� �� �, � 5�����4� ���������3� ���� 472� ���� �78
- ��, ���,��� ��� 5 ��� 15�� ��� �� �:� 85�3� � 2� ��� ��� 1., �,���
5��� ��� �'� 85�3 ��� 2� �:; �� � G�( -�� ���� �� � E �� )�)G � � ��� ��
,����� �,���,�� 1���3 - �, )�)G � ���� �� �,�� � 1���3� /���� �! ���� ����
�# �������� ��& -�� � ���� ��� �� �� ������ "� 5� � 1=������ �� � ��!
� ������ 5�,��� �� �� ��� �� � �� 8� �� �� �� +,������ � � ?�3 ��� -��
���� �� ��� �� ��-, 15� � � ���� %DCD3 - �, �, �����- �� ��� ���� ����
�# �������� ���� - ������ � �� � ,�� ���� �� ���, ��� = ��� ���������
- �, %)L ���� E���� 1= ���3 ��� ()L ,�� ��� ��� ? ��� B$� 1� � ��,����� ��
"����,� ?����3 �� @G �2 ��� � � �!��� �,��� � ��� ���� ���� -�� ��� ���� � � � �� � ��� ���� 2��� - �,� ,����� �� ��� ����� �� �� () ))) �� ��
@) � � ��� -��,� �- � � �,���,�� ����� ��� � 1�B53� /���� � ���� ��� �� -��
����� �� ������ �� �� %)D ���� � �B5 ����� � �� )�>L ������,�� �� %& , ��
@G �2� 4���� ���� ���� - �,� -��,� �- � � �B5� ����, � J� ��� ���� � ��������� � ����
����� � �,���,��!��������� ���� ��� !����!4� ��� �� �� ��, ����� ��� ��������
�� ��� ��� � - ���,��� ��� 42� B ��,� ���� 4��� 12���� ���� 2�3� $�� 4�?
��� !����!4�!; 1%%B%%3 ��� �� 4�? ��� !����!4/�!� 1M�?%�(3 - �� �� ������� �� ����,�� �� � ��� �� ��� �� E�,��� �,��������,� �� =<�<!��� E
��� ����� ���������� �� ��, ,�� ���� � ������� � ���� %DDG3� ���� �,
��E ���!��������� ��� � ��� !��!4�? -�� ���,��� ��� 5 ���� ��� !����!4�!&
��� !4�!%( - ���,��� ��� 5���� 2�J B ���,������� ��� !����!4�!%) ��� 5 ����
-, � ��� !����!4�!> ��� !+�/!� - ���,��� ��� $N= 5����� 1� ������ ��
��� 85�3�
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @(G
/#1# 6���7������
?���� �� �, � � - ���� J� ���� ������� 1 ���3 - �, � ���� ���� ��
����� �! ���� �����# �������� ���� � ����� �! ���� �����# �������� � E� - �,
�������� � � ���� ����� �� )�( �� � ���� ��� 4� �� �� ��� ���� �� �, I� �
I���� �� �� ��������� �� ��E ��� ������ -�� ��� �� 1"������ ��� ��� �!
���!"������� �� %DD)�3 ��� -�� ���� ��� , �� +,��� �, ������ �� �������� �����
� ���� -�� �� �����-�7 /2� )�% ��� /4� )�% ��� 9� � � )�% ��� ��5 )�% ��� � 2�
)�% ��� 2� �:; ; ��� ��� ���� 472 � ���� �78 %�( �� 1� ������� � ���� %DDG3�
/# # '86������ ��� �� � � �������� �� 6(� �� ��� � ���
�# �������� !��� �� 4�!��� �� ���� - ����� �� � ��� ���� �� �� �, <�45�!
���� ���� �� �� ����� ��� �� 1� ������� � ���� %DDG3� B K�� %)) �� ����� � �� %)� %)&�# �������� ���� � � �������6� ������� ���� � D�& - ���� � D&!-�� K��
������� � ��� � ����� ��� ������� ��� �,� �� ; �2� +, �# �������� !����� -���
-��,� - �, �B5 ��� ������� �� @) � � - �, $��4 %&;) ����� � �� %LB5�� 5��������
1%� %)&3 � �� �� ��� � � �� ��� ��� ���� J�� ��� - ���� � �-�!���� � ��� ��� ��� ��� �, ����� - ������� �� @ , �� @G �2� /����- �� -��, �� - �, �B5� �,����� - ������� - �, %)) �� ����� � �,���,��!����� ���� ��� !����!4� �� ( , ��@G �2� 5���I������ �, ����� - -��,� - �, �B5� )�)>L +-� ()� ��� %)) �� ��>!����!;!�,���!@! �������,���,�� 1% ��A��* 5 ���3 � % ���,��!%!������� ���� ���!
�� � �� > ����2�(� )�)%L+ ���M!;)>� )�)%L���@� ��� @& �2��� �� �����- ������ ��,-��� +, ����� - ������� ��� �,� �� @G �2� 5���� - ������ - �, �, ,�� �� ���� � ������ ��� ����� - E���� �� �, ���� �� 4�!��� �� ���� � �����
/#�# 6�������������� ��� �� � � �������� �� ������� (� �� ��� ��� ����� �
���������,��!�E� ��� ����� ���� -, �, - ���� �� �� ����� ��� ��
1� ������� � ���� %DDG3 - ,����� � G)� >) ��� @)L �,����� <�������� ��E ���
-�� �, � �� �� � �� �� �, �� �� � ��,���� ����� � �� )�%L ,����� ��E � ��
() � �� /����- �� ����� �� - �, >L ����� ��� � ��� �� @) � � �� @G �2� �� �� - ������� - �, �, ����� �� ����� � ���� �� ��� ���� �� &) � � �� @G �2 ��� -��,�E��� ��� - �, �B5� ���-���� �� �� - ������� - �, ,���� �, ��E ���!
����� ��� � ��� !��!4�? �� &) � � �� @G �2 ��� -��,� - �, �B5� +, �� � ��� ���� )�> ��A�� )!� �� � � 15 ���� 5�� ��� �� �:� 85�3 � �B5 ����� � �� )�)%L ,�����
��E � - ���� �� @) � �� /����- �� E��� � -��, �� - �, �B5� �� �� -
�������� �� - �, ? ��� ����� ��� +� �,������ ���� ��� ��, ����� - ������
��� ����� - E���� �� ���� �� ����� � ����� �� ���� ��� ������� �� �,
���� �� ����� � ����� �� ���� ����� � �, ���� �� ������ � ��
/#"# ����������� ��������
5��� �� �� ��� ������ � -�� ��� �� �� �, �-� �� � 5�����0� �!��� ��� ���� �� ���
� �� ����� -�� ������ - �, ����� �� 9 � )�)>�
@(C )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
� �������
1#3# 6���� �� �� ���� � �� �# �������� � �� ��� �� ���� �(�� ����� ����,���
� ����� � ��� ��� ���� �� 6(� �� ��� ��� � � �� ���������
=�� � �� �� E� ���� ���� � �������� �� ���� �� 4�!��� �� ��������� G
���� ��� ���� ��� �� �� � � - �, >� %)& �# �������� ���� 1/ �� %3� �-�� - -
��� ��� �� ���� ��� �# �������� !��� �� 4�!��� �� ��������� � ����� � �� 4�
��� � ��� , �, ���� ���# �������� �� �� �� ���, ������ �, ���� �� ���������
��� �� �# �������� !��� �� ��� ��� � 1/ �� %3�
5 �� >� %)& �# �������� ���� � �� ��� ,�� �� �,�-� �� � ����� �� ��
���� �# �������� !��� �� ��� ���� ������ � -�� �� ���� �� ��� �� �, � �
���� �� 4�!��� �� ��� ����� ��� � � - ����� ��� - �, >� %)& �# ��������
���� ��� �, ���� �� 4�!��� �� ���� -�� �� ���� �� �� ��� � � �� ��� ���
���� J�� ��� � ��� ��� ����� 4�?!��� �� ���� ����� ����� G ���� ���
���� �� 1/ �� (�3� 4��!��� �� ���� ���� -�� �� ����� ���� ��� �� �,
�, � ��� ��� �� �� ����� ��� � �, � ��, ��� ��� ���� ��� -, � � -�� 4��!
��� �� ��� ������ �� -�� ������ 4�? ��������!��� �� ���� - ����� �
���� ������ ������� ��� B��BA� � � ���� J� - �, >� %)& �# ��������
����� +, ����� ����� � / �� (� �,�- �,�� ���� J�� �� - �, �# �������� ����
� � �� �� 4�?(� ��� 4�?@ ���� ���� ����� ��� � ��� ��� -�� 4�?% ��� 4�?(�
������ ���
/ �� %� ��� ��!��� � � ��� ���� ������ �� B��BA� � � ���� J� ��� - �, �� ��� ���� �� ����� �!
���� ���� �# �������� � 5�������� - ,����� G ���� ��� ���� �� ��� <�45����� -�� ����� ��
�� ��� �, ���� �� ����� 4�!� 4��!� 4�?!� ��� 4��!��� �� ����� +, ����� � E���� ��
���� 5�<��� �� �, ������� E� ���� - �, �, �� ���� � ��, ����� +, ���� �� 4�!��� ��
��������� � ���� � � -�� � �� � ������ � ���� ��� ����� � � - �, 9 � )�))> � )�)>�
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @(D
1#/# 6(� �� ��� ��� � � ��� �����%�� ����7����� %��� ���� � �� ��4������
+����� �� � � - �, ���� � E� - �, ��, �������� � � �� � ����� ��� ����
����� ������ ���# �������� ���� ���� 1/ �� @3� ����� I���� ��� � � �����
� �,������ �� � �� �� ��������� - ����� 1/ �� @3� /2� E, � �� �, , �,
�������� ��� � �� - �, � � E!���� ���� -, � ���� 472 ��� � 2� �, ��-�� - �, � (�>!����
���� � �, ���� �� ����� 4�!��� �� ����� ��� �, ��������� ����� �� I� �����
��� ���� ����� � �� ��� �� ���� �� �� �� � ����� 4�?� � ����� 4�� ��� � �� -�� 4��
� 4�< ���� ������
+� �� � �� �� �,� ��� �, 4�? ����� ����� �� ������ �# �������� !��� �� 4�?
�����!��� �� ���� - ���� ����� �����- ���# �������� ���� J�� �� - �, �
- �,��� ���������� +, ����� � / �� ; �,�- �,�� ��������� ������ � ���� 4�? �����
������ 4�?%!��� �� ���� - �, ���� ���������� �� ����� �� /2�� 9� �� ���
2� �:;� �-�� �, ����� �� 4�?(�!� 4�?(�! ��� 4�?@!��� �� ���� - ����
� �� ������� ����� 19 � )�)>3� ��� � ���� �� �� ���� 472 ����� �, 4�?(�!��� ����� ����� ��� 4� ��� � ��� �, ���� �� 4�?@!��� �� ���� -�� � �� ������� , �,
/ �� (� + � ���� �� 4�!��� �� ��� ����� �� � �, ���� �� B��BA� � � ���� J� ��� - �, >� %)&����� �! ���� ���� �# �������� � 5�������� ,����� �� ��� � � �� ��� ��� ������� �� - ������ 1�3
�� 4��!� 4�?!� ��� 4��!��� �� ���� ��� 1�3 �� 4�?%! 4�?(�!� 4�?(�!� ��� 4�?@!��� �� ����� +, �����
� E���� �� ���� 5�<��� �� �, ������� E� ���� - �, �, �� ���� � ��, ����� +,
���� �� ��� ���� ����� �� ���� ���� � ����� �! ���� ���� �# �������� ����� � � -
� �� � ������ � ���� ��� ����� � � - �, 9 � )�))> � )�)>�
@@) )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
19 � )�)>3� -, � 4�?(�! ��� 4�?%!��� �� ���� �� �� �� ��- ����� 4� ����� ��� � ���� - �, ��5 ��� � 2�� 4�?%!� 4�?(�! ��� 4�?@!��� �� ���� - � ��������
-, � 4�?(�!��� �� ���� �� �,��� , �, ������ �� � � ���� - �, �# ��������
���� �����
1#1# :������ (� �� ��� ��� ����� � �����%�� ����7����� %��� ���� � �� ��4������
4� �� ��� ���� � - �, � ������ += ��� ��� - ,�� �,�-� �,�� ��������� �������
����� ���� �� ����� � � ����� �� �� ��� � ����� � ����� �� �, ��� ���� 1�����
@)6D) � � ��� ���� J�� ��3 ��� ��� ���� 1����� @ ���� ��� ���� ��� ��3 �� ��
���� ����� 1� ������� � ���� %DDG3� +� ��� � -,�, ����� � ����� � ���� �
��,�� �� �� ��������!� �� ����� ���� �� � ����� ���# �������� � ���������
,����� �� �, ��� ��� ��� ���� �� �, ����� - ������ �� ����� �!��� ��� 4�
������ � � �, ���� �� ����� � ����� �� ���� ����� �� ������������ � ��
-�� �� ��- 1��� �,�� > � %) ))) ����� ���� ��� �,�-�3� ���� ��� �� - �,�# ��������
���� ���� ����� � � ��� ��� ��- ����� �� �� ���� �� �, ����� �� ����� �-��
/ �� @� <���� �� �������� �� �# �������� !��� � � ��� ���� ����� � �� ��� ��� B��BA� � � - ���� J�
��� - �, >� %)& ����� �! ���� ���� �# �������� ���� � � E� - �, � ���� ���������� 5��������
,����� G ���� ��� ������� �� - ������ �� 4��!� 4�?!� 4��!��� �� ����� +, ����� � E���� ��
���� 5�<��� �� �, ������� E� ���� - �, �, �� ���� � ��, ����� 4� �# �������� !��������
����� � � �, ���� �� 4�!��� �� ��������� -�� � �� � ������ � ���� ��� �,�� � �# ��������
����� � � - �, 9 � )�))> � )�)>�
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @@%
-,� �������� -�� ����� � � �� ����� �,��� �� �, ����� � ����� -�� �����
1/ �� >3�
4���� ����� ��� � ���� �� �� /2� ����� � ����� ���� � �, ���� ��
4�!;!��� �� ����� �� -�� �� �������� �� ���� � �, ���� �� 4�!%)! ��� 4�!>!��� ��
���� �� �, ��� ��� ��� ���� �� �, ����� 1/ �� >�3� 4�!%(!� 4�!&! ��� 4/�!�!��� �� ��� ���� - ���� �� �,��� ������ -, � +�/!�!��� �� ��� ������ �� ������ ��� � ��� /����- �� ���� 472 ������� �� ��� ��� ��� 4/�!� ���+�/!�!��� �� ��� �� ����� �� ����� 1/ �� >�3� ����� ���� 472 � �� ������� ����� �, ���� �� 4�!&! ��� 4�!%(!��� �� ���� �� �, ��� ���� �� �, ������
-, � 4�!;!� 4�!>! ��� 4�!%)!��� �� ���� - ���������� ���� �78 E, � �� �
����� �� ����� �� ���� �� 4�!>!� 4�!&!� 4�!%)!��� �� ���� ��� � ��� ��� �����
�� ����� �� ���� �� 4�!%(!��� �� ���� �� ���, ����� �� �, ����� 1/ �� >�3� 4�
��� � ��� ���� �78 ������ �� �� ����� ����� �� +�/!�!��� �� ���� �� �,��� ���� �� �, ������ -, � �� 4�!; � 4/�!� ��� �� -�� ������ / ������ ��5������ ����� � , �, ����� �� 4�!&! ��� 4�!%)!��� �� ����� �����
����� �� 4�!;!� 4�!>!� 4/�!�!� +�/!�! ��� 4�!%(!��� �� ���� �� ���, ����� ���, ����� 1/ �� >3�
/ �� ;� <���� �� �������� �� �# �������� !��� � � ��� ���� 4�? ����� � �� ��� ��� B��BA� � � -
���� J� ��� - �, >� %)& ����� �! ���� ���� �# �������� ���� � � E� - �, � ���� ����������
5�������� ,����� G ���� ��� ������� �� - ������ �� 4�?%!� 4�?(�!� 4�?(�� ��� 4�?@!��� �� �����
+, ����� � E���� �� ���� 5�<��� �� �, ������� E� ���� - �, �, �� ���� � ��,
����� +, ���� �� 4�? ����� ��� �� ��������� � �# �������� !�������� ����� � � -��
� �� � ������ � ���� ��� �,�� � �# �������� ����� � � - �, 9 � )�))> � )�)>�
@@( )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
/ �� >� 2���� �!��� �� ���� ��� ����� �� ��� ��� ���� J�� �� �� B��BA� � � - �, >� %)& ����� �! ���� ���� �# �������� 1�3 ���� � � E� - �, 1�3 /2�� 1�3 ���� 472� 1�3 ���� �78� ��� 13 ��5� 5��������
,����� �� �, ��� 1 3 ��� ��� ���� 1 3 �� �, ����� - ������ �� ����� � ��� �� ��
����������,� ���� +, ����� � E���� �� ���� 5�<��� �� �, ������� E� ���� - �, �,
�� ���� � ��, ����� ��� �� 1�3 �� ��� ����� ����� � ����� �� ��������� ��� �# �������� !
�������� ����� � � �,�� - � �� � ������ � ���� ��� �# �������� ����� � � - �, 9 � )�))> �
)�)>�
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @@@
� ����������
+, ��� ���� �� ��� �� ��, � �� ��I��� ���� ����� �� �# �������� -
����� ��� �� ,��!� ����� �! � �,���! ���� ���� � ������ ���� /I������ �,
���� ���� �# �������� ��� � ���� �� -�� ��������� - �, ���� ��� ,���E � �
� ��� � �� - �, ����� ����� �� 15� � � ���� %DCD* ���!� J�� �� � ���� %DD>* +���
� ���� %DDD3� 4� �, ���� ������ - ������ �, �� � �� �� �� ��� ��������� �� �� �����
�# �������� !��� �� 4� ������ �� ��� � �� ����� ���� �� � ����� �� �� - �,
� ����� � ����� � ������ ��� +, � ��������� ���� �� �� ��� ��� � ��� ����� ��
��� �� �� ��������� � �� ������ � �,�� ��� ��� ��� � ����� ����� �,
�K��� �� � ��� ������ �� ����� �� �� �����!�- ��, �� �� ��� ��� � ����� � �,
����� � � �� . ���� ������� �� ��- ������� ��� ��� �� �� �, �,� � �� �������� ��
����� �� ��� �# �������� ���� �� �� ���� �� �, ������ ���� ��,�� ���
:� ����� �,�-� �,�� ���� J�� �� - �, ����� �! ���� ���� �# �������� ����
� � �� � ��� ��� -�� 4�? ������ -, � 4��� 4�� ��� 4�< �� �� �� ��- �����
4���� ����� ��� � ���� �� ���# �������� � E� - �, � ���� ��������� ����� � �
(�>6&!���� � � �� ����� 4�!��� �� ��� ����� �������� ������ � � ��� ��� �� �,
��� ���� ����� � �� ��� �� ����� � �� 4�? -�� �, ���� ���� ����� �����-� �� 4���
4�� ��� 4�<� /��, ������ � �� 4�? ������ ���� �,�� �����- �� ���� J�� �� - �,
�# �������� ���� �, ����� -�� �, ��� ��-��� �� 4�?(�A4�?@ ������ ��� �!
������� �� �� �, , �, � � � ��� ����,���� ������ �� �, ���������� ������
����� 1"�,�� � ���� %DGG* ��<�,���� %DCD3� � � �� ��� 4�? ����� ����� -��
����� ���� �� �� �, �������� ������� 2���� ��� ��-� ����� ������
�,�-� �,�� /2�� 9� � � ��� 2� �:; ������ ����� 4�?% ��� ���� ������ ��� -, �
���� 472 ������ � ���� �� 4�?(�A4�?@ ������ ����� ��5 ��� � 2� - 4�?@A
4�?(�A4�?% ������ -, � 4�?(� -�� �, ���� ����� ��� ���� �78 ��� � ���� ���
4� �� ������ �� ����� �, ����� ����� - �, ����� � ���� �����- ��
��� ���� J�� �� - �, � ���� ���������� 4�!;!� 4�!>!� 4�!&!� 4/�!�!� 4�!%(! ���+�/!�!��� �� ���� - ��� ��� +,� ����� �� - ����� �� �, ��� � ���, ���-� ��� ��� �� � �, ����� �� �� +,% � +,( ���� ������� :� �����
�������� I��� ��� � ��� I���� ��� � � ����� � ����� � ������ ��� +�����
- �, �# �������� � E� - �, /2� ����� � � ����� 4�!;� 4�!%)� ��� 4�!> ��� ��
������ �� � +,( ������ +, 4�?%!�- ��, �� ��� ����!�- ��, �� � ���� �� �� ��� ��
�� +,(!� �� ����� �� � -�� ����� �,� 1B � ���� %DD;* ������ ��� 4�������
%DD(3� +,��� �� ����� ������� ������ �,�� /2� � �� ��� �������# �������� !
��� �� 4�?% ������ �� � � +,( ��� ��� �� ��� 4�!;� 4�!%) ��� 4�!> ��� ��� +,
��� ��� ��- ��!��� �� �� ��, ����� ��� ���, �� 4/�!�� 4�!%( ��� 4�!&� ���� �� �, ����� ���� �� �, �� �� �, 4�? ������� +, ���� ��� ��� � ���� � ��������
- �, �� �� ��� ����� -, - ��� ������ += ��� +4 ��� ��� 1 ��� ����!
"������� � ��� ����� %DC;* "������ ��� ��� ����!"������� �� %DD)���*
� ������� � ���� %DDG3� �� -�� �� - �, �, ����� �� ��,� 1"��� � ���� %DCD3� 4�
�������� ��, ���,� ��� �,�� /2� � �� �������� 1 ���3 � � �� �� 4�?(�
������ �� ��� � ����� +,% ������ � ��� �� �,�� � � ����� - �, � ���� �
�����!��� ,����� � � �� 1=+ 3 ����� �,� ��� � ����� ��� ���� �� - �, /2�
1?�� ��� ���� %DCD* "��J � ���� %DD%3� 4� ��� � ��� �������� ����� � ��� � ���� �
@@; )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
���� �� +,%!������ ���� ������ � ������� �� ���� �� �� /2� ����
1���� � � � ���� %DDC3� +,��� � ����� � �, ����� �� �� �, ��� ��A��������
���� �� �� -�� �� �, ��� �� ��� � ���� �� � �� �, ��� �� ���� ������
���� 472 �������� ����� � �� � ��� ���� +,% ����� � ������ -, � ���� ��-
���� �� +,(!� �� ����� �� - ������ +, � ��� �� ������ -, �, ���� ��� ��
4/�!� ��� 4�!%( ������ ��� ����� ����� �, ��� �� �� �# �������� !��� ��
4�?(�A4�?@� 4���� 4/�!� ��� 4�!%( � ���-� �� ����� �, 4�?(� ��� 4�?@ �- ��, ������� 15���� � ���� %DD(* ?���� � ���� %DD>* B��,���� � ���� %DDC3� +�/!� ���4�!& ����� �� �� ���� 472 ������� ��� � ���� �, ���� � ���� �� �� �� 4�?(�! ���
4�?@!�- �,� B ���� �� ������ ����� +, ���� ���� � ������ �� �� � �� ��� �,
-,�, ���� 472 E, � �� � � �� ���� �� 4�!& ��� +�/!� ����� �� � �� �� �� ����� � 4/�!�� -, �, ���, ������ 4�!& ��� +�/!� ������ ���:� ���� ���� �� ��� ��� ��� ��� ����� � ���, �� 4�!; ��� 4/�!� � �,
����� �,��� �� �, �# �������� !��� �� 4�?(� ����� ����� �� ���� �78� ��!
�,���� ��, ���� ����� ���� �,�� +?/!� � ��� ���� � �, 4�?(�!�- ��, ������� 1��4��� � ���� %DD@* ������ � ���� %DDG3� +,��� � � ���� �� �,�� +?/!���� �� � �������� �� - �, �, ����� ����� �� �� 4�!%)� 4�!> ��� 4�!&� ������
, �� ����� � �, ����� � ���� ��� �� �,�� ������ �,�# �������� !��� �� 4�?(�
������ �� ��� �, ��� � ���� �� �� ���� �78�
/ ������ �, ����� ����� �� �� 4�!%)� 4�!& ��� +�/!� ��� ��5 ������ ������� �,���,� ����� �� � ��� ���� � �, �# �������� !��� �� 4�?@ ������ ��� -, � �,
���� �� ��� ��� ��- ����� �� 4�!;!� 4/�!�! ��� 4�!%(!��� �� ���� E��� �� �, ����� 4�?%A4�?(� ������ ���
�# �������� ��� ��� ����� �, �� ���� ��� � ��� � � �� ��� �,��� ����� �
������ �� � ���� �������� ���� J�� ��� ����� ��� � ���� � �, ���� ������
���,���� ������ � �� �, ���� ����� ��� ��� ��, ���,����� ���, �� 8��� ���
������� � �� ��� ���� ;��� ������ ����� ��� ��� ����,��� ��� ��, ��������� ,��
���� �,�� ���� �� ��� � � ��� �� �� �,� ���,���� �� �, ,��� � �� ��� �����
�� 2=;� ���A� 2=C� + ����,����� 1"�� � ��� ���� %DDD3� 4� � �� � ����� ���,2=;� ��� 2=C� + ���� � �� �� � ����� �� 8# ������� � � ���� �� ��� 2=C�
+ ���� ���� �, ���� �� � ����� � ���� �� 1���� � ���� %DD;3� 4� �, ��� �� �#
��, ��������� 2=;� ��� 2=C� + ���� -�� ��!���� ��� � �, ���� ��� ��� �,
���� �� 1/���� � ���� %DD(* 5�,� �� � ���� %DDD3� 4� ��� � ��� 4�/!� ��� 4�!%( � �-� �������������� �,�� ����� ���!�� ��� ������ ��� ��� �� � ��� �� �
������� �� ��������� ���,��� ���� ��� /� ������� + ���! ��� �" ���!� ��
4/�!� ��� 4�!%( - ����� ������ � ������ ��� ����# ��, �������� ��� ����� ���
1B����� ��� ��� %DDC* ='��� � ���� %DDC3� :� ����� �,�-� �,�� ���� 472� � �������
�� �, ��, ���������� ������ � +,% �,����� ���� �� �� �� 4/�!�A4�!%( ��� 4�?(�A4�?@� ����� ���� 472 � � �� �, ��� ��� �� ���� ����� - �, �# ��������
����� �� ��� �� �,�� ���� 472 ����� ��� �, ������ ����� �� �# �������� ���� ���
+,� ��� ��� ����� �,�� ����� �� �� ���� 472 � ���� � ������� �� ��� � ��
����� �� � ����� �� � ����� � ���� �� �� �# �������� ���� ���
+, � � ��� � �� �� ������� �� �, ��� ���� ���� �� ��� ����# �������� �
:� ����� ��������� �,�� ��������� ����� � ��� �� ��������� �� ���� ���� ��
���� �� � ���� ���� �� ���� ������� +, ��� � ���� �� �� ����� �! ���� ����
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @@>
�# �������� � E� - �, �, ����� �� �������� ����� � �, ����� �� �� � ��� �
����� � � � � �,�� ����� �,� � ����� ��� ���� ������ �� �� � ��� �� ����� ������
�-�� ���, ������ � �� �, ���� ���� �� �, ���� ��� ��� � �� �, ���� ��
�� �, � ��� ���� � �� � ����
�������� �������
+, � -�� -�� ������� �� ����� ��� �, ��� � ?��� 5��� �� �� $���,
��� +�,������ ��� �, ��� � �,������ ��� ������� <��<�� +, ���,�� � ������
�� ���� "� 5� � ��� ��!-��� �� ����� �� �, ����� �! ���� ���� �# �������� �
����������
��� ���� ��2�� B���� ��<�� %DD%� 4�������� ��� ���������7 �� ��� ���� � ��� � �!������ ���� 4�������
(C� (GD6(C;�
�� � '�� 5����� ��� ��,�� �� ?������ =���� %DD)� B��� � � ��� ��� ����� � ��� � �� �� 4�?% ��� 4�?(
��� ������� ��� ��� � �� <� ������� ����� �7� ��� �� '� 4����� = �� %&(� %&@6%G%�
��� ��� /���� � �� ��=�� %DD@� ���������7 ���� ������� �� � ��� ����� �� ��� ���� �������� 4�������
+���� %;� (C%6(C;�
���� � �� ��� "������� �� ��� ��� ����� ��� 5��,��� ��� %DDC� ��� ! ���������� ��� ������������ ��
���� � �� ��� ���� �� 4�, � ��� ����� �� ��- ��� ��� �������� ����� � ����
�J� � �������,��� ;C� G&;6GG%�
B������ $�� ��� ����� %DDC� ?�� � ������ � � �� �� �������� � ��� ��, ���,���� � ,������ 2�� :� ��
4������� %)� ;C@6;CG�
B � /�� 5��!=����� 2�� B ���� '���� 5� ��!$��� '���� B���,��� '�� %DD;� ���� ����� � %)
����� �� � ����� ����������� � =� 1�4�=�3 B ���� �� ��� 4�?% ��� 4�?@� '� <E�� ��� %GD�G>G6G&(�
B��,����� $���� ����������� B���� ��J�� =�.�� %DDC� 4�!%( �,���� ��� ���� ������ �� +! �������
��������,� � ���� �� � �, ����� �� + ��� �" ����� '� 4������� %&%� >>(>6>>@@�
B����� =�$�� .���� '���� %DD(� ���� ��� ���� ����� ����� ��� ���� 4������� >%� %6>;�
2���-� ?�5�� %DGD� 2��� �!:� � �����������7 +, ����������� 44� ����� � ���� �- ���� ��� %)@6%@(�
=������� ��'�� %DC@� $���� �� ��������� �������� ��� ���� � � ���� � ��� '� ��� ��� ������ %C@�
>;C6>>;�
='���� $�� ����� /�� ����� 4�!��� <�� ��� =�?�� B�� +�=�� ��� B�� � ����� ��'�� "���� ��'��
=�� ���� '���� ��� = ���� '�+�� "���� /���� 2�������� '���� :���,���� +� �� %DDC� 5� �������� ��
��� 5�������� ���� ��� � ����� �!%( ����!�� � �� ��� ���� 5� �� (C)� %;@>6%;@C�
=�� ����� ?�J ���� $�/�� $��� $�� ��� � . ���� '�?�?�� %DDG� 2� � ��� � �� � ���� �� 4�? /� ����� ���
/��$!� ��� ������,�� �� 4������� +���� %C� %(G6%@>�/ ������� /�=�� "������ 4���� �������� +�$�� 2������� $���� %DCC� 4/�!� ������ �, ����� �� 4� ����
�� �� � � �� ,����� ���� ������� '� 4������� %;)� %)((6%)(G�
/����� ��'�� ?����� �� ����� + ����� "�'�� "���� B�� B����� B�$�� %DD(� ���� , ��������� � � �� �����E
����� 4!�� ��� + ���� � I� � �� � ����� �� ����,��� ��� ��, �������� ���� ��� ���� �����
����� 5� � 85� CD� %()%@6%()%G�
/��� � ��� <�, ��� '�$�� <���� :�� � ���� /�� %DG%�� 2����� ��� ������� � �� �,� ��� ���� ���� � �� � �
��� ��� ���� �� � ������ �� �,�� '� 2���� ���,��� C%� %&>6%G(�
/��� � ��� <�, ��� '�$�� <���� :�� � ���� /�� %DG%�� 2����� ��� ������� � �� �,� ��� ����� '�
2���� ���,��� C%� @D@6;))�
?����� +�� B�����J� ��� =��������� �� ��� �� 5�,� ��� <�� "���� ��� "����,� <�� �������� � /�'�� ?�����
��"�� $��� <�� %DD>� 4����� �!%( ��������� ��!������ �, ����,� � �� ��� ��!��� � � ��������!
� E �� 4�?(�� 4�?(� ��� 4�?@ ��� ���� ��������� � � ��� <�� '� 4������� (>� C(@6C(D�
@@& )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-
?��� '���� ���� �� �� %DCD� = ���� + ,�� ��� ������ � � �� � � � �� � � �� �-� � ���� ��������
�, ���7 �, �� �� �������� ����� � % � ��� ��� � ������� 2��� 4������� %(%� %@;6%;>�
?����� $�"�� 5 �� ?�$�� %DD;� 2���� ��� �� �������� ��� � � � �� ���� � �� �,���,��� ���� �� �,���,��
��� ���� ���� � �� ������ ��E� �� B ���� ���� ((� >@6&@�
����� '�.�� %DD;� +!��� ���������� 4��� '� 4������,������� %&� G)@6G%)�
��� ����!"������� �� ��� ����� <�� %DC;� ��������� ������ �, ����������� � �������� � �� ��� ��
�� ���� ������ � � ��� 5����� '� 4������� %D� (%D6((>�
'�,����� ��?�� %DD;� ������� ��������� ��� ��������������7 �- ������,� �� ���� J�� ��� 2� ��
� ��� ��� $�� G� (GG6(CD�
"�,��� 4�� ?��� �� 5�� $�J �� 5�� %DGG� 2���,���� ������ ��� �J���� � ��� � � � � ����� ��
���������� ������ '� ?�� � ��� ��� %)%� %G@6%G&�
"������ � <�<�� ��� ����!"������� �� ��� %DD)�� $����� �� �� ����� ����������� � ������ �� ��
�������� � � ��� 5���� '� 4������� @(� G;>6G>;�
"������ � <�<�� ��� ����!"������� �� ��� %DD)�� $����� �� �� ����� ����������� � ������ �� ��
�������� � � ��� 2� �� ���� 4������� @@� (D6@D�
"��J� =�� �,� 5�� ?����� :�� ���,� � B�<�� 2�,�� 5�� %DD%� �������� ����� �� � ��,�� � ��������
����� �� ��� �� ������ /���0� �������� ��� ���� � �� ,���E � �� ����� J �� ��� �����
��� ����! ����� ��� �����!��� ,����� � � �� ������ �� 5�� � /��� � �� � � �� /<�5
� ��� ��� 4������� G&� @)>6@()�
"���� '�5�� ��,�� B�.�� ��� �� ����� ��� ���� ��2�� %DCD� 4������ �� ��������� �� �, I���� ��� ��� � ���
����� ��� � ��� ��� � � �� �� �� � ��� ��� �� '� 4������� ��,��� %(%� %>G6%&&�
"�� �� "���� ���� <�?�� %DDD� + ��� ������ �� ���� � ���� ��� 2�� :� �� 4������� %%� ;))6;)>�
����� 2� �� /���,� 4�<�/�� ����� � '�� "�������� 5� �<�� %DD;� 5��� � - �, � 2!�� � �� �����!��� � �
��� ����� �� ���, � 24! ��� � 2 44!������ + ��� ������ �� 8��� ��� ������� � � ���� ���
'� 4������� %>@� @%%&6@%((�
���!� J�� ��� ��� ?� ��!������� /�� 2���!������ ��'�� ����� ��� %DD>� 4��������,���E � �� ��� �
������ ��� ������� � - �, �� ���� ���� ���� �� ��� $�� %@G� (&&6(&D�
������� �� $ ������� ��� ����� <�� %DDG� 4�?(� ���� �� ����� ��� ,����� � ��, � � ����� �� ��� �
���� J� - �, ������� �� ��-�, �����!��� � ����� �� 4�?(� ��� ���� ������ �� � ���� B
����,������ 5����� '� 4������� ;>� >)6>;�
��<�,���� $���� %DCD� +, ������ �� ����� � � � ������ � �� ��� �,�� ��� ���� � �� �����
������ ��� ����� �� � ����� ����� ������%��� 2 �� $�� � ��� ��� %G� %6@(�
��4���� +���� "� ����� =�$�� ����� ��� $��,���� ��� =���,� '�$�� ����� '�'�� 5����� 2���� %DD@�
+������ �� ��-�, ����� ��� % ���� � �� �� ������ ����������� � ?(� ��� �� �� � ����������,�!
�!��� ���� �� � B ����� '� <E�� ��� %GG� %)@%6%)@G�
������� '���� 4������� ��2�� %DD(� 4����� � > 14�!>3 ��� �� � � ���� �,�� � I� � � ��� � �� �� 4�!; ��
����� �- ��, �� �� ����������� � 14�3 ?% ��� 4�<� '� <E�� ��� %G>� DG@6DC%�
5� �� "�� O������ ��� ������ �� �� ��� ������������� :�� %DCD� <E� ����� ������ ��� ������� � ���� ��
B���� ��� � ��� ��� 5��� ;)� G%6G;�
5�,� ��� 8�<�� 2��� ��� ���� "�������� 5� �<�� %DDD� 2�������� �� ��-� ��������� ���� � ��� �,
���� ������ ���� 4������� G%� (&G6@GG�
5�, ���� ��<�'�2�� ()))� 4�������� ��� ������� �� ���� � �������� ��� � ��� 2�� :� �� 4������� %(� ;>&6
;&@�
5 ���� ��� B�����!� ��I� ��� 5�� 5� ����� <�� %DC>� ��� �� � ��,� ��� �,���� J�� �� �� 4�?%! ���� ��
������ <�� '� 4������� %>� >D@6>DC�
5����� 2���� ����� .�<�� %DCG� 4�����!� ��� B!��� �� ������� �����!4 � ������� ����� 4� ����������� ��� 5� �� (@&� D;;6D;G�
5����� 2���� ��4���� +���� ������ $�� ����,�� ����+�� / ������� /�=�� ��� ��� ����� '�'�� %DD(�
4����� �� �� 4�?@ ��� �� �� ����� �7 � ���� �� + ���! ������� ����� �- ��, �� � ����� ��+ ���! ������� ��� ( ��� ���� '� <E�� ��� %G>� %@&G6%@G%�
+���� 5�� �������� =�� $����� 5�� $���, � �� � ����� 4� � � ?�� ��� � � ����� �� � ?�� %DDD� <E� �����
���� ��� �� ��� ��� ��������� �������� �� �� � ���� ���� ���� ���� ��� ���� � %G� (G&;6(G&C�
8������ '�2�� 5� �� ���� <�� /����� �� �� %DCC� 5����� ��� ����� �� �� ,���� ��� �� � ����� ��
4�?� ����� $�� 4������� &� (>%6(C%�
)# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211- @@G
� �������� ��� � ������ ��� ���� � �� ��� ��� ����!"������� �� ��� %DDG� $����� �� �� ����� � ��
E��� �� �� ��������� � � ��� 2� �� <E�� 4������� %)D� >&D6>GC�
����� /�$�� %DD>� +, �� �� ��������� � ��� �� ���� ��� 4��� '� 4������,������� (� C>6D)�
.��� �5�� ����� /�$�� 2,� �� ����� %DC&� 2��� ������ �� �������� ��� ���������� ���� $�� 4�������
;� @&D6@CC�
@@C )# �������� � ��# * + � ������ �����,����� -- ./!!/0 1/�211-