1BAB VI

PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN

6.1. Subjek Penelitian

Untuk mengetahui efek pemberian ekstrak mengkudu terhadap daya

hambat Streptococcus mutans secara in vitro maka dilakukan penelitian pada

plate inkubasi di Laboratorium Mikrobiologi Unud Subjek penelitian adalah

Streptococcus mutans ATCC35668 group d (dari identifikasi bakteri), merupakan

salah satu serotipe yang terdapat pada dental plak.

Objek yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak tujuh plate sebagai

sampel, yang terbagi menjadi 4 (empat) kelompok, yaitu kelompok kontrol,

ekstrak mengkudu konsentrasi 50%, 75%, dan 100%, disesuaikan pada MIC

(Minimal Inhibitory Concentration) pada penelitian Dewi (2010) yaitu 69mg pada

bakteri Gram positif.

6.2 Distribusi Data Hasil Penelitian

Diameter zona hambat Streptococcus mutans sebelum dianalisis lebih

lanjut, terlebih dahulu diuji distribusi dan variannya. Diameter zona hambat

diukur dengan menggunakan jangka sorong dalam ukuran milimeter. Pada

penelitian ini memiliki jumlah data yang di atas dan di bawah rata rata adalah

sama, demikian pula simpang bakunya (berdistribusi normal). Variasi data antar

kelompok memiliki varian data yang berbeda (heterogen).

6.3 Pengaruh Ekstrak Mengkudu Terhadap Zona Hambat Streptococcus mutans

Hasil penelitian menunjukkan terjadinya perbedaan yang bermakna antara

kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak mengkudu.

Hal ini menunjukkan terjadinya efek menghambat ekstrak mengkudu terhadap

Streptococcus mutans. Efek menghambat terjadi karena mengkudu mengandung

zat anti bakteri yaitu senyawa antraquinon, flavonoid, alkaloid, acubin dan

alizarin yang dapat melawan bakteri Stahpylokokus aureus, Bacillus subtilis,

Protens morganii, Pseudomonas, Escherichia coli. Zat anti bakteri ini juga dapat

mengontrol bakteri patogen seperti Salmonella typhi, Shigella disentriae

(Suhidayat, 1991). Penelitian yang dilakukan oleh Salomon (1994) melaporkan

bahwa lebih dari 78% pasien yang mempunyai gangguan tenggorokan dan mulut

bisa disembuhkan (Goretti, 2000).

Efek menghambat pertumbuhan bakteri dari ekstrak mengkudu diduga

berkaitan dengan senyawa fenol yang dikandungnya. Senyawa fenol merupakan

senyawa yang tersebar luas sebagai zat warna alam yang menyebabkan warna

pada bunga, kayu, buah. Senyawa fenol yang terdapat pada buah mengkudu

berkisar antara 5,94 36,52g/ 100g material kering (Rohman, et al). Volk dan

Wheeler (1984), Pelczar dan Reid (1988) menyatakan bahwa fenol mampu

melakukan migrasi dari fase cair ke fase lemak yang terdapat pada membran sel

menyebabkan turunnya tegangan permukaan membran sel (Rahayu, 2000).

Selanjutnya mendenaturasi protein dan mengganggu fungsi membran sel sebagai

lapisan yang selektif, sehingga sel menjadi lisis (Jawetz et al., 2008). Oleh karena

itu fenol berperan sebagai senyawa antibakteri. Senyawa fenol yang terdapat

3dalam mengkudu diantaranya adalah antraquinon, acubin dan alizarin. Ketiga

senyawa ini mengandung zat antibiotik (Bangun dan Sarwono, 2002).

Penelitian Dewi (2010) yang meneliti aktivitas antibakteri pada

Staphylococcus saprophyticus dimana bakteri ini merupakan bakteri Gram positif,

sama dengan Streptococcus mutans. Menunjukkan bahwa bakteri ini memiliki

karakteristik yang hampir sama yaitu : tidak memiliki endospora, tidak berkapsul

dan memiliki dinding bakteri yang tersusun atas peptidoglikan dibandingkan

dengan dinding bakteri Gram negatif yang tersusun atas lipopolisakarida. Bagian

rangka peptidoglikan adalah sama untuk seluruh spesies bakteri, keadaan bakteri

seperti ini akan sangat sensitif terhadap bahan antiseptik (Jawetz, 2008 ; Radji,

2009).

Kandungan flavonoid pada mengkudu sangat efektif untuk menghambat

pertumbuhan bakteri Gram positif. Flavonoid merupakan senyawa antibakteri

yang paling banyak terdapat pada buah mengkudu (Djauhariya, 2003). Flavonoid

bersifat polar sehingga lebih mudah menembus lapisan peptidoglikan yang juga

bersifat polar pada bakteri Gram positif daripada lapisan lipid yang nonpolar. Di

samping itu pada dinding sel Gram positif mengandung polisakarida (asam

terikoat) merupakan polimer yang larut dalam air, yang berfungsi sebagai transfor

ion positif untuk keluar masuk. Sifat larut inilah yang menunjukkan bahwa

dinding sel Gram positif bersifat lebih polar. Aktivitas penghambatan ekstrak

mengkudu pada bakteri Gram positif menyebabkan terganggunya fungsi dinding

sel sebagai pemberi bentuk sel dan melindungi sel dari lisis osmotik. Dengan

terganggunya dinding sel akan menyebabkan lisis pada sel (Dewi, 2010).

Asam askorbat yang terdapat di dalam buah mengkudu merupakan sumber

vitamin C dan anti oksidan juga berperan dalam mekanisme pertahanan terhadap

mikroorganisme. (Goretti, 2000 ; Hariana A, 2007 ; Kusuma et al, 2003).

Aktivitas ini dimiliki karena kemampuannya membentuk kompleks dengan

protein yang larut dan protein ekstraseluler serta dapat membentuk kompleks

dengan dinding sel bakteri, sehingga dapat berfungsi sebagai antibakteri

(Kresnawaty, 2009).

Pada penelitian ini ekstrak mengkudu berfungsi sebagai antibakteri untuk

Streptococcus mutans karena menimbulkan efek penghambatan terhadap

pertumbuhan bakteri tersebut. Menurut Jawetz et al (2008) pertumbuhan bakteri

yang terhambat atau kematian bakteri akibat suatu zat antibakteri dapat

disebabkan oleh penghambatan terhadap sintesis dinding sel, penghambatan

terhadap fungsi membran sel, penghambatan terhadap sintesa protein atau

penghambatan terhadap sintesis asam nukleat. Pemakaian buah mengkudu tanpa

memisahkan antara daging dan bijinya akan lebih efektif untuk dimanfaatkan

sebagai senyawa antibakteri. Di samping kemungkinan kandungan senyawa

aktifnya yang lebih tinggi, penggunaan buah utuh juga akan lebih memudahkan

dalam pemrosesannya (Efri, et al, 2004). Ekstrak mengkudu pada penelitian ini

memiliki daya hambat kuat terhadap Streptococcus mutans sesuai dengan hasil

penelitian Dewi (2010) bahwa ekstrak mengkudu memiliki daya hambat kuat

terhadap bakteri Gram positif (Staphylococcus Saprophyticus).

Kontrol terhadap pelarut etanol tidak menunjukkan adanya diameter zona

hambat. Hal ini menunjukkan bahwa pelarut yang digunakan untuk pembuatan

5ekstrak dan pengencerannya tidak berpengaruh sebagai antibakteri terhadap

Streptococcus mutans. Untuk memperoleh zat antibakteri pada mengkudu

Jayaraman et al. (2008) menggunakan pelarut metanol karena senyawa antibakteri

pada mengkudu bersifat polar dan lebih besar dari pelarut heksane. Namun karena

metanol bersifat toksik pelarut metanol diganti dengan etanol (Dewi, 2010).

Pada penelitian ini peningkatan konsentrasi ekstrak mengkudu dari 50% ke

100 % terdapat perbedaan daya hambat yang bermakna, ini menunujukkan bahwa

ekstrak mengkudu 100% mempunyai daya hambat lebih baik dari 50%. Hal ini

sesuai dengan pernyataan Pelczar dan Chan (1988) bahwa semakin tinggi

konsentrasi suatu bahan antibakteri maka aktivitas antibakterinya semakin kuat

pula. Dengan konsentrasi ekstrak yang semakin tinggi maka kandungan senyawa

fenol ataupun zat antibakterinya juga akan semakin banyak (Efri, et al, 2004).

Ekstrak mengkudu memiliki aktivitas bakteriostatik yang semakin meningkat

daya hambatnya seiring dengan meningkatnya konsentrasi. Pada penelitian Dewi

(2010) konsentrasi minimal yang menunjukkan aktivitas daya hambat

pertumbuhan bakteri (MIC : Minimal Inhibitory Concentration) pada bakteri

Gram positif adalah 69mg.

Pada peningkatan konsentrasi dari 50% ke 75% dan dari 75% ke 100% tidak

terjadi perbedaan daya hambat yang bermakna (dengan uji Tamhane), namun jika

dibandingkan dengan hasil uji Duncan antara konsentrasi 50% ke 75% terdapat

perbedaan yang bermakna. Apabila dilihat dari diameter zona hambat terdapat

peningkatan rerata diameter sesuai peningkatan konsentrasi. Pada umumnya

diameter zona hambat cendrung meningkat sebanding dengan meningkatnya

konsentrasi ekstrak, hal ini juga terjadi pada penelitian Jayaraman dkk. (2008),

Elifah (2010), Dewi (2010) terhadap bakteri Gram positif pembusuk daging,

dimana diameter zona hambat tidak selalu sebanding dengan naiknya konsentrasi

ekstrak mengkudu.

Ekstrak etanol buah mengkudu bekerja tidak stabil pada penghambatan, ini

ditunjukkan dengan konsentrasi yang semakin besar tidak memberikan efek

penghambatan yang lebih besar. Kemungkinan disebabkan karena ekstrak yang

digunakan merupakan ekstrak kasar yang kelarutan senyawa antibakterinya belum

maksimal, sehingga aktivitasnya tidak maksimal pula (Dewi, 2010). Pada

penelitian ini pelarut yang digunakan pada pembuatan ekstrak adalah etanol yang

merupakan pelarut universal (Kusmayati et al., 2007), sehingga

senyawa senyawa lainnya yang bersifat polar banyak yang ikut tertarik ke dalam

ekstrak. Hal ini menyebabkan aktivitas senyawa antibakteri yang diharapkan tidak

optimal, karena bekerja secara sinergis dengan aktivitas senyawa senyawa polar

lain yang terkandung dalam ekstrak buah mengkudu.

Secara kuantitatif efek ekstrak mengkudu konsentrasi 50% dengan 100%

terdapat perbedaan yang bermakna tetapi secara kualitatif efek ekstrak mengkudu

pada semua konsentrasi mempunyai daya hambat kuat. Secara kualitatif daya

hambat kuat ekstrak mengkudu berada dikisaran 10 mm 20 mm, merupakan

data ordinal (peringkat) yang mempunyai range yang cukup panjang. Sedangkan

untuk uji analisis data yang digunakan adalah ratio. Ini menunjukkan bahwa

dengan konsentrasi 50% saja ekstrak mengkudu sudah memberikan daya hambat

kuat, sehingga dengan peningkatan konsentrasi efeknya akan bertambah kuat.

7Untuk memperoleh daya hambat antibakteri yang optimal perlu dilakukan

identifikasi senyawa flavonoid yang merupakan zat antibakteri utama pada buah

mengkudu. Dalam suatu penelitian untuk mengidentifikasi senyawa flavonoid

pada daun kayu manis dilakukan dengan cara berikut : Senyawa flavonoid yang

terdapat dalam ekstrak etanol 96% diisolasi dengan menggunakan metode

Charaux Paris. Dilakukan fraksinasi ekstrak etanol 96% menggunakan pelarut

chloroform, etilasetat dan tiga kali dengan n-butanol, kemudian dari fraksi

n-butanol ini dilakukan isolasi flavonoid memakai kromatografi kertas preparatif

dan diidentifikasi dengan spektrofotometer Ultra Violet (UV) dan infrared, enam

senyawa flavonoid berhasil diisolasi (Wijono, 2003).

Agar penelitian ini dapat dimanfaatkan oleh masyarakat, perlu dilakukan uji

klinis, toksisitas dan efek sampingnya. Sesuai dengan pemakaian klorhexidin

sebagi obat kumur dari hasil eksperimen yang diperoleh kemudian dilakukan uji

toksisitas dan efek samping oleh Loe dan Schott (1970) baru dipakai secara luas

kepada masyarakat (Megananda et al., 2009).

Apabila ekstrak mengkudu sudah melalui tahapan uji klinis tersebut, sesuai

dengan penelitian Raiyanti et al. (2004) ekstrak mengkudu baru dapat digunakan

oleh masyarakat sebagai obat kumur untuk menekan koloni bakteri Streptococcus

mutans sehingga terjadi penurunan angka plak skor. Pada penelitian Raiyanti et al.

(2004) kumur kumur mengkudu dilakukan dengan sari buah mengkudu yang

dibuat dengan melarutkan 500 ml perasan buah mengkudu diencerkan dengan air

minum 200ml, dikumur selama dua menit sebanyak 2 3 kali sehari, dapat

menurunkan plak skor dari 0,47 menjadi 0,32.